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Captulo 20

Degradacin de xenobiticos
Pesticidas
Las sustancias xenobiticas (xeno= extrao, bitico= vida) se definen como compuestos orgnicos o
minerales que son introducidos en el ambiente por actividades del hombre a concentraciones que
provocan efectos indeseables.
lgunos de estos compuestos son liberados al ambiente por el hombre con el ob!eto de controlar
plagas, caso de los pesticidas, o agrotxicos, cu"a persistencia " transformaciones refle!an
su eficacia como producto " su peligro potencial para la microflora " la calidad del ambiente. #s
de $.%%% de estos compuestos estn registrados, desde mol&culas simples como el bromuro de
metilo ('()*r) hasta mol&culas mu" comple!as como el aldr+n. 'erca del ,-. son herbicidas,
insecticidas " fungicidas que representan /0, 10 " -. respectivamente. Los restantes ).
corresponden nematicidas, acaricidas, etc.
2tros xenobiticos provienen de la industria manufacturera, efluentes de industrias, aguas residuales,
actividad de minas, de las industrias petrolera, del papel, agr+cola.
#uchos de estos compuestos introducidos continuamente o formados en la biosfera son resistentes a
la biodegradacin3 se conocen como recalcitrantes o refrctiles " pueden clasificarse en 4
categor+as (*alba, $,,))3
$5 compuestos mu" recalcitrantes
15 los que son slo lentamente biodegradables
)5 compuestos que pueden ser utili6ados rpidamente cultivos microbianos, pero que no se sabe si lo
pueden hacer en la naturale6a
45 compuestos aptos para microorganismos en cultivos ax&nicos " en uno o ms habitat microbiano,
pero que son ocasionalmente persistentes.
#uchos polmeros sintticos caen en la categor+a $).
La lignina es un e!emplo de la segunda categor+a "a que es sustrato para algunos hongos aunque no
es desasimilada rpidamente. 'iertos hidrocarburos clorados con carcter insecticida son
e!emplos de la tercera categor+a, "a que muchos son metaboli6ados en medios de cultivo,
pero su minerali6acin a '21, (12 " 'l1 no ha sido demostrado in situ. 7n la 8ltima categor+a se
pueden ubicar algunos hidrocarburos derivados del petrleo constituentes vegetales!
7n t&rminos de cantidad, los xenobiticos orgnicos son los ms numerosos3 $$4 compuestos han
sido designados por la gencia de 9roteccin mbiental de los 7stados :nidos como polucionantes,
en $,;1. Los ms peligrosos son los halogenados, especialmente los aromticos por sus efectos
sobre la biocenosis " su carcter recalcitrante en el ambiente. 'onsecuentemente persisten en el
suelo porque no son susceptibles de transformaciones biolgicas a rangos normales.
7l cuadro $ muestra algunos e!emplos de compuestos orgnicos detectados en suelos " que
representan potencial peligro para el ecosistema suelo5planta5hombre, muchos se reconocen o
sospechan como cancerog&nicos o mutag&nicos. Los halogenados aromticos e!ercen efectos
negativos en la microflora " son reconocidos recalcitrantes. <ueron introducidos por el hombre, de
modo que se consideran verdaderos xenobiticos ((ic=s et al, $,,%).
'omo el suelo es el reservorio 8ltimo de la ma"or+a de ellos, sus efectos sobre poblaciones
microbianas " la accin de &stas sobre estas mol&culas resulta de gran importancia en la
determinacin de sus consecuencias. :na ve6 liberadas al ambiente la distribucin de estas
sustancias depende de3
propiedades quimiodinmicas del producto
propiedades f+sico5qu+micas del suelo
su transferencia en las interfases suelo5agua " suelo5aire " a trav&s de
membranas biolgicas
9rocesos biticos " abiticos pueden transformar a los productos alterando su estado qu+mico "
consecuentemente su toxicidad " reactividad. >dealmente se espera su conversin a3
C"2, #20, minerales
sustancias menos txicas
9ero se pueden formar productos intermediarios que se convierten en polucionantes txicos.
Cuadro $ % &'emplo de importantes xenobiticos orgnicos
(ipo
lifticos (halogenados)
lifticos (no halogenados)
romticos (halogenados)
&'emplos
tricloroetano, tricloro metano, cloruro
de metilo tetracloetano
acilonitrilo, tolueno, benceno,
nitrobenceno,fenol cresol
9entaclorofenol, clorobenceno
hexaclorofenol,diclorobenceno
9olic+clicos (no halogenados) naftaleno, ben6opireno,antraceno,
bifenil, fenantraceno
9olic+clicos (halogenados) bifenilos policlorados (9'*s) lindano,
9esticidas toxafeno, ??@, 1,)5? dieldrin,
heptacloroborano
&fecto sobre la microflora del suelo
7l grado de afectacin de estas sustancias en segmentos de la poblacin depender de3
su composicin qu+mica, dosis, m&todos de aplicacin
parmetros f+sico5qu+micos del ambiente, como p(, temperatura, agua
Ao existen muchos datos cuantitativos sobre las transformaciones de muchos de estos productos
txicos, salvo, qui6, lo referente a los pesticidas, sobre los cuales las investigaciones son ms
abundantes. Los xenobiticos interfieren con procesos importantes como3
fotos+ntesis
metabolismos oxidativos
s+ntesis celulares
algunos, como los clorados alteran la composicin de la membrana celular, alterando su
permeabilidad " la fisiolog+a celular.
Los mtodos empleados para estudiar sus efectos son los clsicos en estudios de ecolog+a
microbiana, pero se destaca en las 8ltimas revisiones sobre el tema ((ic=s et al, $,,%), la necesidad
de estandari6ar procedimientos que refle!en los efectos de estas sustancias sobre grupos " procesos
microbianos de importancia para la continuidad de los ciclos de los elementos en la naturale6a.
Pesticidas
Bu empleo se ha incrementado en los 8ltimos aos " tanto la agricultura moderna, como la
conservacin de frutas " verduras para la exportacin, la lucha contra insectos, etc. liberan en los
ecosistemas naturales grandes cantidades de sustancias de lenta biodegradacin.
Las investigaciones sobre el efecto de muchos de estas sustancias en las comunidades microbianas
naturales " sobre los mecanismos de degradacin se han estimulado por los riesgos reales o
potenciales asociados con el empleo indiscriminado de los xenobiticos.
Los pesticidas son sustancias qu+micas destinadas al control de poblaciones no deseadas (pestes),
de mu" distintos grupos taxonmicos " se caracteri6an por los organismos que atacan3 insecticidas,
nematicidas, herbicidas, fungicidas! 2tros, destinados a la supresin de roedores " moluscos,
han recibido menos atencin.
7n muchos pa+ses no se llevan estad+sticas sobre el uso de estas sustancias " debemos remitirnos a
las cifras sobre sus importaciones. 7l empleo masivo de herbicidas selectivos comen6 hacia la mitad
de la d&cada del 4%, luego del descubrimiento del 1,45?, pero el control qu+mico de male6as est a8n
poco desarrollado, si se lo compara a los logros en el me!oramiento vegetal " con otros aspectos de
las ciencias del suelo.
Be pretende lograr que un agente qu+mico espec+fico act8e selectivamente sobre una determinada
planta. Los m&todos de control de male6as son numerosos e inclu"en3 mecnicos, la competencia por el
cultivo, la rotacinC biolgicos, qu+micos, el fuego, etc&tera.
#uchas de estas sustancias, sobre todo los herbicidas, se aplican directamente en la superficie o
llegan a las capas superficiales del suelo, otros se pulveri6an sobre el folla!e, pero se ponen en
contacto con los microorganismos al caer las ho!as o cuando las plantas mueren. 7stas aplicaciones
pueden alcan6ar 6onas vecinas cuando las mol&culas son voltiles. 7l agua de riego puede
contaminarse, constitu"endo &sta otra v+a de entrada al suelo.
Las interacciones entre los pesticidas " los microorganismos sern anali6adas desde dos puntos de
vista3
sobre los microorganismos estas sustancias pueden afectar habitantes no patgenos de los
ecosistemas naturales, o sus interacciones con el consiguiente efecto sobre procesos ben&ficos
(degradacin de materia orgnica, nitrificacin, fi!acin del A1, solubili6acin de fosfatos)
los microorganismos de estos ambientes metaboli6arn a estas sustancias (la ma"or+a son
2rgnicas) por distintos mecanismos, los que sumados a las otras causas abiolgicas de alteracin,
contribu"en a disminuir sus efectos txicos.
'omo generali)acin, se piensa que3
los compuestos de amplio rango, como los fumigantes, fungicidas, parecen afectar negativamente
todos los procesos biolgicos, al menos temporariamente. 7l mismo efecto se encontr con la
ma"or+a de los metales pesados
herbicidas, insecticidas, son menos per!udiciales para la microflora " en algunos casos, pueden
estimularla
7ntre los procesos3 la nitrificacin es altamente sensible, mientras que la minerali6acin del nitrgeno
es bastante resistente.
La eficacia de un pesticida se determina por la dosis letal, que asegura la muerte de la poblacin
entera " la dosis letal *0 +D, *0-, que elimina al 0%. de los componentes de la poblacin
(?ommergues " #angenot, $,-%). 7n respuesta al efecto causado por los pesticidas, los
microorganismos muestran gran adaptabilidad, evidenciada por el rpido restablecimiento de la
actividad metablica.
Los mecanismos pueden ser3
reempla6o de especies sensibles por otras tolerantes, mu" frecuente en el caso de especies de
rhi6obios
por una rpida recoloni6acin del ambiente luego de los tratamientos biocidas
&valuacin de efectos inhibidores o txicos
Aumerosos estudios se han reali6ado en torno a los efectos laterales de los pesticidas sobre los
microorganismos " sobre sus interacciones. La aplicabilidad de estos resultados obtenidos a nivel de
laboratorio a las condiciones naturales de campo, resulta muchas veces dif+cil porque3
los estudios fueron reali6ados ba!o condiciones mu" diversas,muchas veces no correctamente
explicitadas en los traba!os
en ambientes " tipos de suelos mu" diferentes
falta de informacin sobre la formulacin de productos comerciales " sus aditivos, que pueden
afectar a la poblacin en ma"or grado que el producto mismo.
7l efecto de un pesticida sobre la microflora se eval8a frecuentemente en el laboratorio, ba!o
condiciones controladas. 7n estos casos la determinacin de la dosis que act8a sobre los organismos
resulta dif+cil de precisar, sobre todo con pesticidas voltiles.
'uando las sustancias son fuertemente adsorbidas en los coloides del suelo, se pueden acumular
altas concentraciones en las capas superficiales. La concentracin puede ser ms alta en la 6ona de
la corona, por movili6acin del producto por los tallos. 7n esa 6ona la actividad biolgica es grande "
act8an gran n8mero de patgenos.
'on sustancias mu" adsorbidas, se emplean dosis altas en los modelos experimentales, como refle!o
de la prctica de campo.
(cnicas de estudio.
+/nexo Prctico-
7l estudio de la biodegradacin de sustancias con carcter biocida no es sencillo en aguas, suelos,
alimentos, "a que muchas veces las concentraciones son mu" ba!as, del orden de las partes por
milln (mgD=g). Be deben emplear t&cnicas mu" sensibles3 cromatograf+a en fase gaseosa o l+quida,
espectrofotometr+a con lu6 ultravioleta, para detectar tra6as de pesticidas o de sus intermediarios en
la degradacin.
actividad respiratoria, el desprendimiento de '21 o el consumo de 21 de muestras de suelo o
aguas tratadas con el producto en estudio " alg8n sustrato cu"a transformacin se desea seguir,
glucosa, celulosa, se emplea para evaluar efectos sobre la micropoblacin global
biomasa microbiana, por recuentos o por la t&cnica de fumigacin
recuentos de grupos microbianos que reali6an procesos de inter&s para el ambiente (<*A,
solubili6adores, minerali6antes, etc)
actividad en)imtica. deshidrogenasas, amilasas, fosfatasas, @9asas, etc.
procesos microbianos, como la <*A, minerali6acin, oxido5reduccin, son evaluados a los
efectos de conocer el efecto de estas sustancias
Pesticidas en el suelo
La figura $ ('orrea, $,;%) presenta un esquema de las posibles v+as a seguir por un pesticida cuando
llega al suelo. 9ongamos como e!emplo el caso de la incorporacin de un herbicida. 7ste se puede
perder por lavado, por degradacin en el suelo, o ser absorbido por los cultivos. 7l per+odo en que un
pesticida persiste en el suelo es de gran importancia prctica, "a que refle!a el tiempo en que la plaga
o peste estar sometida a control, afectando tambi&n la polucin del ambiente3 acumulacin en
porciones comestibles de las plantas, en corrientes de agua, transporte a p!aros v+a lombrices,
etc&tera.
0igura $% &s1uema del comportamiento de un pesticida en el suelo
7vaporacin aplicacin fotodescomposicin
tmsfera vegetales
Buelo poros del suelo
#ovimiento capilar
" gravitacional
?ifusin fi!acin3 difusin
rcillas
#ateria orgnica
bsorcin3 formacin de comple!os
9lantas metabolismo con minerales
#icroorganismos " degradacin
qu+mica
Lixiviacin
La persistencia en el suelo, es decir la duracin de la efectividad de un pesticida, depende de
su composicin 1umica
de las condiciones del medio. materia orgnica, arcillas, p(, humedad, tipo de suelo, etc&tera.
7l efecto biolgico de un pesticida (*) depende de su concentracin " la duracin de su accin.
2 3 45 i cdt
?onde c es la concentracin en un momento dado (dt)C E es un factor que depende del suelo
(humedad, coloides, etc.).
La persistencia en ambientes naturales depende de varios factores3 la descomposicin qu+mica "
biolgica, la adsorcin a coloides, el lavado. la volatili6acin, la fotodescomposicin, la remocin por
vegetales que se cosechan. 7l cuadro 1 muestra los procesos que en el suelo afectan a sustancias
xenobiticas
Cuadro 2 % Procesos 1ue afectan a xenobiticos en el suelo
Proceso factores 1ue inciden
(idrlisis 9(
@ransformacin microbiana en6imas degradativas, condiciones
mbientales apropiadas
Folatili6acin presin de vapor
xido5reduccin 7h
Lavado Bolubilidad
dsorcin coeficiente de particin pEa,
Bolubilidad, tipos de adsorbentes
bioconcentracin coeficiente de particin pEa
<i!acinDadsorcin '>'
La estructura de la mol&cula, la posicin " naturale6a de los grupos funcionales afectan tambi&n la
persistencia, como se aprecia en cuadro ).
Descomposicin microbiana
?urante mucho tiempo se pens que los mecanismos de degradacin de los pesticidas por los
microorganismos eran similares a los de los animales. 9ero a medida que las investigaciones fueron
progresando, se apreciaron las diferencias3
en los animales las reacciones conducen sobre todo a convertir estas mol&culas en formas polares "
por lo tanto excretables " los procesos ocurren en rganos especiali6ados, como el h+gado
en los microorganismos, el ob!eto principal es la obtencin de energ+a " mu" pocas mol&culas
(algunos halogenados aromticos usados como insecticidas) no son atacadas por alg8n grupo de
microorganismo, en el suelo. #atsumura, ($,;1) propuso un esquema general sobre la accin de los
microorganismos " de procesos abiolgicos, sobre los pesticidas (cuadro 4)
:na microflora especiali6ada es responsable de la degradacin de los pesticidas mediante dos
mecanismos diferentes3
6! la sustancia favorece el crecimiento " es empleada como fuente de carbono, energ+a
" ocasionalmente de nitrgeno, a6ufre, etc. 7l n8mero de especies activas aumenta " el aislamiento
se puede efectuar en medios de cultivo en donde el pesticida act8a como 8nica fuente de
nutrientes. :na ve6 que el producto es degradado, la poblacin declina
66! cometabolismo. el compuesto no act8a directamente como fuente de nutrientes, sino que debe
emplear otras, como glucosa, por e!emplo, que al disminuir en el medio inducen las en6imas
necesarias para la degradacin. del pesticida.
'uando el nivel de pesticida es ba!o en relacin a otras fuentes de carbono, el metabolismo incidental,
dentro del cual se ubica el cometabolismo, es la forma principal de actividad microbiana.
Las reacciones catablicas ocurren sobre todo cuando las dosis de pesticidas son altas " la estructura
qu+mica permite su biodegradacin " su uso como fuente de carbono.
Cuadro 7 % 6nfluencia de la estructura en la biodegradacin de xenobiticos
(ipo de compuesto
" sustituentes ms degradable menos degradable
(idrocarburos alcanos superiores lcanos inferiores
($1 ')
lcanos lcanos de alto 9#
lifticos de lifticos ramificados
'adenas lineales romticos
romticos mono 9olic+clicos
" bi c+clicos romticos
romticos 52( 5<
sustituidos 5'22( 5'l
5A(1 5*r
52'() 5A21
lifticos 5'l ms / ' 5'l menos / '
'lorados desde el ' terminal
Cuadro 8 % 9etabolismos microbianos sobre pesticidas
6! &n)imtico
/! #etabolismo incidental3 los pesticidas no se usan directamente como
fuente de energ+a.
$. metabolismo por en6imas generalmente disponibles
a. en6imas de amplio espectro (hidrolasas, oxidasas, etc.)
b. en6imas espec+ficas presentes en muchas especies
1. metabolismo inducido por productos anlogos
(cometabolismo)
c. en6imas que emplean sustratos estructuralmente
similares a los de los pesticidas.
2! 'atabolismo3 los pesticidas se emplean como fuente de
energ+a.
d. pesticidas o parte de su mol&cula son rpidamente usados
e. deben inducirse en6imas espec+ficas para su
degradacin
C! ?etoxificacin.
f. metabolismo por microorganismos resistentes
66! :o en)imtico
/! 9articipacin en reacciones fotoqu+micas.
2! 'ontribucin por cambios de p(.
C! 9or la produccin de reactantes orgnicos o inorgnicos.
D! 9or la produccin de cofactores.
Procesos microbianos sobre pesticidas
Detoxificacin, conversin de mol&culas txicas en no txicas
?egradacin, o transformacin de sustancias comple!as en productos simples (puede ser
sinnimo de minerali6acin, con aparicin de '21, (12, A(), etc.
Con'ugacin o formacin de comple!os, por reacciones de adicinC el microorganismo combina el
pesticida con metabolitos celulares (adicin de aminocido, cidos orgnicos, metilos, etc.)C pueden
conducir a ba!ar la toxicidad
activacin. conversin de un producto no txico en mol&culas txicas3 preparaciones
comerciales, como el herbicida 4 (1,45?*) que en el suelo se transforma en metabolito txico para
male6as (1,45?)
cambio en espectro de toxicidad. sustancias espec+ficas para un grupo de organismos, se
metaboli6an " dan productos que inhiben a otros organismos, como la conversin en el suelo del
fungicida pentacloro ben6ol en cido pentacloro ben6oico, que act8a como herbicida
;implificacin. conversin de mol&cula no txica, que puede convertirse en pesticida cuando es
activada en6imaticamente, en producto no txico, fcilmente degradado.
La figura 1 (lexander, $,--) reagrupa estos conceptos en el e!emplo del metabolismo de herbicidas
fenoxialcanos.
0igura 2% Pasos iniciales en el metabolismo de
herbicidas fenoxialcanos
Descomposicin 1umica
#ediante reacciones de oxidacin, reduccin o hidrlisis se pueden degradar pesticidas, mientras que
otros pueden ser activados. s+, el cianato de potasio " el dalapn se hidroli6an lentamente en agua,
resultando entonces inefectivos como herbicidas. 7n suelos en ambiente anaerobio, la degradacin
puede ser qu+mica " microbiolgica.
/dsorcin a coloides
Bon retenidos a la materia orgnica " a la fraccin arcilla, " los xidos e hidrxidos de hierro "
aluminio !uegan importante rol en suelos pobres en materia orgnica. 7n escala descendente de
capacidad de adsorcin tendr+amos3 humus G montmorillonita G illita G caolinita, pero intervienen
tambi&n la temperatura, el p(, la capacidad de intercambio catinico. Los enlaces pueden ser de
naturale6a f+sica (fuer6as de Fan der Haals) o electrostticos, por puentes de hidrgeno, sobre todo
en mol&culas con grupos 5A(, como los fenilcarbamatos " las ureas sustituidas. >ntervienen tambi&n
enlaces en comple!os con iones metlicos, inactivndose muchas mol&culas fi!adas.
s+, suelos con alto nivel de materia orgnica requieren dosis relativamente ma"ores de la ma"or+a de
los herbicidas " suelos arcillosos niveles superiores a los arenosos. 9ara predecir las dosis de
herbicidas que es necesario aplicar en varios tipos de suelos, se han desarrollado modelos
matemticos. 7l nivel de materia orgnica es uno de los parmetros del suelo que ofrece las me!ores
correlaciones entre la adsorcin de herbicidas " propiedades edficas. 7l carbn activado, uno de los
materiales absorbentes ms potentes, se emplea para proteger a las semillas de la accin de los
herbicidas.
,avado
Los herbicidas de pre5emergencia que se aplican generalmente en la superficie del suelo pueden ser
llevados por el agua a capas sub5superficiales donde germinan la ma"or+a de las semillas de
male6as, que son as+ eliminadas por estas sustancias. Las semillas grandes deben sembrarse deba!o
del rea de alta concentracin del herbicida, o bien ser resistentes a ellos. 7l grado de lixiviacin
?epender de las relaciones de adsorcin entre los herbicidas " el suelo, su solubilidad en agua " la
cantidad de agua que atraviesa el suelo. 7n base a estos parmetros se puede calcular la dosis
requerida en una situacin dada.
<olatili)acin
Los &steres del 1,45? son voltiles " sus vapores pueden per!udicar a otros cultivos. 7stas sustancias
se movili6an en los poros del suelo como los gases, " su concentracin se puede medir por
destilacin del agua que se evapora en la superficie del suelo. 'onstitu"e una p&rdida importante, si
se consideran los vol8menes de agua que se pierden.
Los principales factores que afectan la volatilidad son3 el grado de adsorcin al suelo, la temperatura, el
viento, la tensin de vapor ('orrea, $,;%).
0otodescomposicin
#uchos herbicidas absorben en el rango del ultravioleta, pero la radiacin solar con longitudes de
onda menores de 1,0 nm que llega al suelo es despreciable. 7l efecto sobre los biocidas est limitado a
la superficie de suelos " aguasC slo sern atacados (liberacin de electrones, formacin de
puentes) los pesticidas no incorporados o los que ascienden por capilaridad en &pocas secas. 9uede
ocurrir tambi&n cierta Isensibili6acinI3 la energ+a es absorbida por un intermediario " transferida a la
mol&cula herbicida por colisin, la que es as+ daada. Los productos de la foto5descomposicin
pueden ser similares a los obtenidos por degradacin.
=emocin por los cultivos
'iertos cultivos se siembran con el ob!eto de absorber herbicidas persistentes en suelos donde se
aplicaron en altas concentraciones para eliminar toda la vegetacin, para sembrar luego plantas
ornamentales. 7l ma+6 se usa para eliminar sima6ina a atra6ina.
Persistencia en el ambiente
?epende, como hemos visto, del tipo del suelo, de la calidad de las aguas, la temperatura, la
humedad, materia orgnica, coloides minerales, actividad biolgica. Be puede evaluar en ensa"os
controlados o de campo. Be citan datos de que slo un 1- . de la variabilidad encontrada en las
p&rdidas de 9icloram en $$ suelos, en condiciones controladas, pudo relacionarse a las propiedades
de los mismos.
Los datos de temperatura " humedad son ms 8tiles para predecir la desaparicin de un pesticida que el
tipo de suelo. La velocidad de degradacin aumenta con la temperatura " la humedad.
La evaluacin en el campo exige numerosos ensa"os, con aplicaciones en distintas &pocas " durante
varios aos.
'ontando con amplia informacin sobre datos de lluvias, evaporacin, temperatura, residuos de
pesticidas, durante varios aos, se obtienen mediante los modelos de prediccin curvas de
desaparicin simuladas de estas sustancias.
7n general, la concordancia entre valores observados " simulados es buena " su empleo resulta mu"
8til, sobre todo si se consideran las dificultades en la toma de muestras representativas en el campo,
la variabilidad asociada en la determinacin de cantidades pequeas, etc&tera. Boulas ($,;1)
desarroll un interesante modelo matemtico para predecir la degradacin microbiana de pesticidas
en el suelo.
/ccin de los pesticidas sobre la microflora
La bibliograf+a seala innumerables citas relativas a casos de supresin o inhibicin de alg8n
grupo importante de microorganismos por efecto de pesticidas.
&fectos
modificacin del espectro de especies dominantes, pueden ser suprimidos g&neros comunes
" aparecer otros resistentes. 7stos cambios pueden ser de corta duracin, aunque la poblacin
puede ser afectada en algunos casos por largos per+odos.
grados de suceptibilidad3 una especie puede disminuir apreciablemente, una segunda puede
lterarse slo ligeramente " otras pueden resistir el efecto del pesticida. Las hifas de los hongos "
las c&lulas vegetativas de las bacterias son a8n ms afectadas que los conidios o esclerocios de los
hongos o que las endosporas bacterianas.
efecto en interacciones biolgicas algunos fungicidas pueden provocar estimulacin en la
>ncidencia de enfermedades, hecho que se atribu"e a inhibicin de poblaciones que compiten con la
especie per!udicial " a la proliferacin de poblaciones antagnicas.
efectos sobre procesos microbianos. en las transformaciones de compuestos nitrogenados,
se puede generali6ar que, salvo en el caso de fungicidas presentes en el suelo en alta
concentracin, la minerali6acin " la denitrificacin no son mu" afectadas, mientras que la
nitrificacin es uno de los procesos ms sensibles, acumulndose amonio. 7sta sensibilidad
de los nitrificantes auttrofos se usa para evaluar los efectos txicos de diferente dosis de
pesticidas, mediante la evaluacin de los nitratos.
La nodulacin la fi'acin del nitrgeno en leguminosas pueden ser afectadas por
pesticidas, sobre todo por aquellos aplicados a las semillas que adems se inoculan con rhi6obios
espec+ficos. Be propone separar en el tiempo las aplicaciones de inoculante " fungicida o traba!ar con
mutantes de ri6obios resistentes a los pesticidas ms empleados. 7l cuadro 0, publicado por
lexander ($,--), evidencia la importancia de esta l+nea de traba!o.
#arcada inhibicin de la actividad nitrogensica en la ri6osfera de 10 variedades de sorgo se
evidenciaron cuando se emplearon dosis tres veces superiores a las normales de atra6ina (4,0 =gDha)C
efecto que desapareci en otro ensa"o de campo, sin herbicida (<rioni, $,,%).
Cuadro * % =endimiento contenido de nitrgeno en leguminosas inoculadas tratadas con
pesticidas en el invernculo +mg-
Bemillas tratadas semillas no tratadas
>noculante rendimiento A rendimiento A
lfalfa con thiram
Ainguno 1-% 0,, 1,% /,;
rhi6obio sensible 1;% /,/ 44% $1,1
rhi6obio resistente 4,% $),1 0%% $4,/
caupi con ph"gon
Ainguno $$0% 1$,- $$%% 1),1
rhi6obio sensible $;1% )/,4 );1% ,-,%
rhi6obio resistente ),)% $%0 )-,% $%/
7n el mismo cultivo, se comprob en otro ensa"o con aplicaciones de distintas dosis de tres
herbicidas3 atra6ina, linurn " 1,45? amina, que la celulolisis fue inhibida por todos los tratamientos
pesticidas. 7ste efecto fue observado por otros autores " se atribu"e a la falta de sustratos
carbonados (las male6as son suprimidas) " a una inhibicin selectiva de la celulasa.
Aumerosas revisiones ((ic=s et al, $,,%, Jreaves et al., $,;%C #al=olmes " HKhler, $,;)) inclu"en
determinaciones de efectos sobre procesos biolgicos como respiracin, minerali6acin del nitrgeno,
nitrificacin, datos sobre recuentos de ciertos grupos de microorganismos, evaluacin del @9 de
origen microbiano, en6imas espec+ficas (deshidrogenasas, celulasa, amilasa, etc.), fi!acin del
nitrgeno.
Lohnen " ?reM ($,--) propusieron un programa de anlisis a los que deben ser sometidos los
pesticidas antes de que su distribucin sea autori6ada por autoridades competentes, donde se
inclu"en estudios sobre la poblacin normal del suelo, adems de los clsicos controles sobre
sanidad humana " vegetal3
$! /ctividad respiratoria ('21, 21) evaluada en el laboratorio en muestras de suelo3 sin aditivos
(respiracin endgena), con glucosa (proceso activado por el desarrollo microbiano) " con restos
vegetales (degradacin de materia orgnica comple!a por sucesiones microbianas).
2! (ransformaciones del nitrgeno. amonificacin, nitrificacin
7! 0i'acin simbitica del :2, en macetas3 nodulacin3 n8mero, peso, tamao, actividad nodular,
rendimiento vegetal
8! 9icroorganismos particulares antagonismos. micorri6as, patgenos vegetales, antagonistas
*! &stabilidad de agregados me'oramiento de la estructura!
Los estudios inclu"en distintas dosis de los productos, formas de aplicacin3 incorporacin,
pulveri6acin, etc&tera. 7s mu" importante reali6ar experiencias a nivel de campoC "a que resulta casi
imposible correlacionar resultados obtenidos ba!o condiciones controladas con los logrados cuando
estas sustancias llegan al suelo, en condiciones naturales. #al=omes " HKhler ($,;)) sealan estas
diferencias " sugieren que cuando se observan efectos laterales en ensa"os de laboratorio, los
pesticidas deben llevarse a a la naturale6a " reali6ar all+ las observaciones, aunque estos traba!os son
largos " se debe considerar el efecto del ambiente (temperatura, humedad, nutrientes) sobre las
propiedades biolgicas que evaluamos, afectadas adems por los pesticidas.
&n resumen Be puede sealar que raramente la agricultura moderna de!ar de emplear estos
productos para lograr incrementar los rendimientos. Neconocida la toxicidad de la ma"or+a de ellas
para el hombre, animales " microorganismos, es de esperar que se empleen conscientemente por los
t&cnicos " productores " en las dosis recomendadas, evitando contaminar recursos tan importantes
como suelos " aguas, con productos altamente txicos " escasamente biodegradables.
Los agroqu+micos parecen no e!ercer efectos de larga duracin en actividades microbianas del suelo
cuando se aplican a dosis recomendadas. Bin embargo, al emplearlas a dosis superiores, provocan
efectos negativos, de corta duracin, particularmente sobre transformaciones del carbono " del
nitrgeno (*ar=a" et al, $,;/).
Las prcticas de control de plagas inclu"en cada ve6 ms las t&cnicas de Control 2iolgico,
empleando microorganismos antagonistas de fitopatgenos (cap+tulo $;).
>enobiticos inorgnicos
#uchos compuestos inorgnicos se forman como desechos en las industrias modernas, como
anh+dridos de B " A " las sales de metales pesados, que se consideran xenobiticos por la elevada
concentracin liberada en ambientes naturales, sobre todo aguas " suelo " los efectos delet&reos que
e!ercen en la biosfera. pesar de que muchos metales son abundantes en la corte6a de la tierra, las
actividades del hombre, como la combustin de petrleo " derivados, minas " prcticas agr+colas,
frecuentemente incrementan su concentracin a niveles txicos. 7ntre los metales txicos a alta
concentracin se inclu"e el ars&nico, boro, cadmio, cromo, cobre, plomo, mercurio, molibdeno, n+quel,
selenio, 6inc, vanadio. Los microorganismos poseen la capacidad de transformar elementos
minerales, por e!emplo, al usarlos como fuente de energ+a (<e
OO
a <e
OOO
por @hiobacillus), aceptor de
electrones (#n
O4
a #n
O1
por *acillus), oxidacin (s), alquilacin ('()
5
O (g
O1
55 '()(g
5
, por
'lostridium).
2iorremediacin
La biorremediacin constitu"e un con!unto de t&cnicas que permiten aumentar la biomasa microbiana
del suelo, estmulando la biodegradacin de xenobioticos (*ouMer, $,,)). *a!o esta denominacin se
agrupan una variedad de procesos de biotratamiento que var+an en sus mecanismos de accin,
sobretodo los de minerali6acin, transformacin parcial, humificacin " alteracin del potencial redox
(Bhannon " :nterman, $,,)). lgunos de los problemas de polucin ambiental pueden resolverse por
estos mecanismos3 cerca de )%% compuestos polucionantes del suelo se consideran factibles de
biodegradacin microbiana, por lo que la bioremediacin se aplica en ambientes contaminados por3
derramamiento de petrleo bruto e hidrocarburos derivados (benceno, xileno, tolueno, etc.)
solventes diversos (acetona, butanol, etilenglicol, cloruro de metilo)
otros3 pentaclorofenol, @A@, halgenos, pesticidas
9ara lograr una efectiva biodegradacin es necesaria la presencia de microorganismos o de
asociaciones apropiadas " de condiciones ambientales adecuadas para la actividad biolgica. Be
requieren adems, conocimientos de ecolog+a microbiana " de bioingenier+a a los efectos de disear
condiciones favorables para el desarrollo " actividad microbiana para descontaminar ambientes
naturales (Biquiera et al, $,,4).
Los procesos se reali6an3
in situ, el suelo se emplea como un gran reactor, los residuos se incorporan en camadas de
aproximadamente 0% cm, en el suelo o en pilas en el composta!e, donde sufrirn el ataque
microbiano, se agregan los nutrientes necesarios " humedad para estimular a la biomasa
microbiana
en reactores especialmente diseados, que pueden tratar gran volumen de sustancias en
per+odos ms cortos de tiempo.
#uchas veces resulta necesario incrementar la poblacin de microorganismos responsables de las
transformaciones. s+, la inoculacin del ambiente contaminado con organismos seleccionados
aumenta con el tiempo. 7l incremento se puede lograr de varias maneras3
estimulacin de la poblacin existente por alteraciones del ambiente o agregado de nutrientes
aislamiento " seleccin de organismos competentes " posterior inoculacin
uso de microorganismos construidos por ingenier+a gen&tica, denominados (#7J), con
propiedades deseables que pueden albergarse en plsmidos o en el cromosoma microbiano.
7l cuadro / resume las condiciones para favorecer el proceso de depuracin de suelos o aguas
contaminadas.
Cuadro ?% =e1uisitos para lograr xito en la biorremediacin
Los contaminantes deben estar biodisponibles, es decir no adsorbido en un residuo
inaccesible (arcillas, humus)
Los microorganismos degradadores apropiados deben estar presentes en el suelo, agua,
o disponibles para la inoculacin
Los compuestos recalcitrantes3 no son degradados a velocidad ra6onable3 e!emplo de
compuestos naturales recalcitrantes3 humus, artificiales (pesticidas, plsticos)
Los organismos deben degradar el contaminante a velocidad tal que permita llevar su
concentracin a estandares regulares
?eben reunirse condiciones ambientales favorables para el desarrollo microbiano3
@emperatura del suelo, p(, aireacin, humedad
9uede requerirse fertili6acin (A, 9, E, etc.) para estimular procesos degradativos
7l costo del tratamiento debe ser menor que el de las otras tecnolog+as disponibles
La falla en alguna de estas condiciones puede conducir al fracaso de un proceso de
biorremediacin, como ocurre en caso de suelos mu" secos, o de p( inadecuado para la actividad
biolgica.
7l cuadro - resume las estrategias en la bioremediacin.
Cuadro @% &stategias para la biorremediacin
Pasiva o intrnsica. PnaturalQ, de un lugar contaminado por organismos ind+genas.
2ioestimulacin. adicin de nutrientes, A, 9, B, etc. 9ara incrementar a los
#icroorganismos del suelo
2ioventilacin. donde se agregan estimulantes gaseosos al suelo, como %1, '(4,
9asivamente o en forma for6ada, para estimular la actividad microbiana
2ioaumentacin. inoculacin de microorganismos a un sitio contaminado. 7l inoculante
puede tener un microorganismo natural o modificado gen&ticamente (solos o en
'onsorcio), seleccionados por su capacidad degradativa
=ellenos sanitarios. PlandfarmingQ enterrar contaminantes en suelos no contaminados,
con capa impermeable inferior para evitar p&rdidas. Be combina con los anteriores.
Composta'e. microorganismos aerobios, termfilos, en pilas o reactores, humedecidos
luego de atacar materiales rpidamente degradables, atacan a las sustancias xenobiticas
0itorremediacin. empleo de plantas para sacar o transformar contaminantes (plantas
hiperacumuladoras o que estimulan microorganismos ri6osf&ricos degradadores)
La biorremediacin pasiva o intrnseca es la que ocurre naturalmente por accin de los
microorganismos nativos. 7sta es la ms frecuente estrategia de degradacin de contaminantes, a
pesar de que el proceso puede ser mu" lento si las condiciones no son las adecuadas.
La biestimulacin, que incorpora nutrientes, como fuentes de nitrgeno " fsforo, con el ob!eto de
estimular a la microflora nativa, es corrientemente empleada. Los nutrientes pueden incorporarse
con agua de riego, en caso de suelos contaminados, o en preparados solubles en hidrocarburos,
en el caso de derrames de petrleo en el mar.
La bioventilacin, que emplea gases estimulantes, como 21, '(4, en forma pasiva o for6ada en
los suelos a los efectos de incrementar la actividad degradadora de la poblacin nativa, requiere
dispositivos especiales, de tipo industrial, por lo cual los suelos contaminados se transportan "
depositan en estructuras del tipo de los biodigestores, con las instalaciones adecuadas para la
entrada pasiva o for6ada de gases.
La bioaumentacin, es la inoculacin del sitio contaminado con microorganismos seleccionados
para estimular la degradacin. Los inoculantes pueden estar formados por microorganismos
nativos seleccionados para el proceso en cuestin o bien se pueden usar aquellos gen&ticamente
modificados, a los cuales por ingenier+a gen&tica se les incorporaron genes activos en la
biodegradacin. 9uede tratarse de una sola especie o de varias especies (consorcio microbiano).
Los mismos se seleccionan en el laboratorio, inoculando con suelo o aguas, medios de cultivo con
dosis crecientes de la sustancia txica en estudio, por e!emplo, hidrocarburos, como 8nica fuente
de ' " energ+a. Las colonias que se desarrollan en estos medios, se van seleccionando por su
capacidad degradadora sobre el xenobitico. 2tros microorganismos se constru"en por ingenier+a
gen&tica, incorporando genes espec+ficos en sus plsmidos.
=ellenos sanitarios, consisten en la aplicacin e incorporacin de suelos contaminados en la
superficie de suelos no contaminados. Bon en general excavaciones de suelos mu" pobres, con un
fondo de arcillas o alg8n material impermeable, para evitar la contaminacin de las napas
freticas. 7l suelo contaminado es arado " se me6cla bien, pudi&ndose incorporar nutrientes,
inculo microbiano " gases, para acelerar el proceso.
Composta'e, es el uso de procesos microbianos aerobios " termfilos en pilas o reactores, para
degradar el polucionante. Los dispositivos se me6clan peridicamente " se humedecen a los
efectos de lograr la mxima actividad biolgica. Los microorganismos activos se encuentran en el
suelo " son incrementados por el proceso de composta!e.
0itorremediacin, es el empleo de vegetales para absorber, remover o transformar
contaminantes. Bon mu" empleadas en el caso de remocin de metales pesados, que se
acumulan en la madera en el caso de rboles o en la fitomasa en herbcea, que debe tratarse
luego en incineradores.
La accin se da directamente, en plantas hiperacumulantes, o indirectamente, por estimulacin de
microorganismos activos en su ri6osfera.