Mutabilidad y reparaci

Mutabilidad y reparaci

n de DNA
n de DNA
Perpetuacin del material gentico
Variabilidad gentica
Dependen
reducida reducida tasa de mutaciones tasa de mutaciones
Fuentes de mutacin
Inexactitud en la duplicacin de DNA
Dao fsico o qumico del material gentico
Transposicin (transposones)
Apareamiento normal C-G y T-A, (pirimidina-purina)
Inexactitud en la duplicacin de DNA
Tautomerizacin errores en el apareamiento de las bases
Transiciones pirimidina-pirimidina T x C
purina-purina A x G
Transversiones pirimidina-purina T x G o A
purina-pirimidina A x C o T
Sistema de reparaci Sistema de reparaci n de apareamientos incorrectos n de apareamientos incorrectos (1) (1)
lectura de prueba y exonucleasa revisora 35
del replisoma
muy eficiente pero no infalible
Tasa general de mutaciones espontneas nuevas muy alta
Prueba de lectura reduce en 100 veces estos errores
Lesiones del DNA Lesiones del DNA
espont espont neas o inducidas por agentes qu neas o inducidas por agentes qu micos micos
Lesin Hidroltica
Desaminacin
desaminacin bases de citosina uracilo
aparea con A en lugar de G
desaminacin de A hipoxantina
aparea con C en lugar de T
desaminacin de G xantina aparea con C
Depurinacin
hidrlisis en enlace glucosdico pierde la base
Demetilacin de la 5metil citosina
da lugar a timidina
no reconocida como error
punto caliente de mutaciones
Lesiones espont Lesiones espont neas del ADN neas del ADN
Alquilacin, oxidacin, radiacin
Sust. alquilantes qumicos: nitrosaminas
Transferencia de grupos metilo o etilo
a sitios reactivos de las bases y P
o-metilG apareo incorrecto con T
cambio de bases G:C a A:T
ROS: agentes oxidantes
oxoG puede aparear con A
Transversin G:C a T:A
Muy comn en cnceres
Luz UV fusin de Nt.
T-T Dimerizacin de timidina
T-C adducto
incapaces de aparearse
Radiacin gamma y rayos X
producen roturas bicatenarias
Agentes intercalantes mutagnicos
sustituyen a las bases o
se introducen entre ellas
Lesiones del ADN Lesiones del ADN
espont espont neas o inducidas por agentes f neas o inducidas por agentes f sicos sicos
Luz UV Luz UV
Sistemas de reparacin del DNA
Reparaci Reparaci n de apareamientos incorrectos n de apareamientos incorrectos
errores de duplicacin Sistemas especficos
Fotorreactivaci Fotorreactivaci n n
dmeros de pirimidina DNA fotoliasa
Reparaci Reparaci n de escisi n de escisi n de base n de base
base daada DNA glucosidasa
Reparaci Reparaci n por escisi n por escisi n de n de Nt Nt
dmeros de pirimidina Sistemas especficos XP-
aducto abultado en la base XPC, XPA, XPD, ERCCI XPF y XP
Reparaci Reparaci n de roturas n de roturas bicatenarias bicatenarias
roturas, recombinacin Sistema Rec en E. Coli
S S ntesis de DNA de ntesis de DNA de translesi translesi n n
dmeros pirimidina Flia DNA pol Y
Patologas Mutaciones
Xeroderma pigmentoso (XP) Grupos
A-G
Reparacin por escisin de Nt
Dao inducido por luz UV
Variante XP Dao inducido por luz UV
Sntesis translesin por pol
BRCA-2 Reparacin por recombinacin homloga
Ataxia-telangiectasia Protena kinasa activada por ruptura de
cadena doble
Sindrome Cockayne Falla en reparacin dao inducido por luz
UV
Sindrome de Bloom Flia helicasas reqQ
Sindrome de Werner Flia helicasas reqQ
Cncer colorectal hereditario no
polipsico
Apareamiento errneo de bases (hMSH2)
Patologas por errores en los sistemas de reparacin
Fin esta parte
XP (AR) falla en el sistema de reparacin del dao en el DNA producido por
la luz UV. Ampollas, costras, telangiectasias, alteraciones neurolgicas,
retardo sexual, etc
Sindrome de Cockayne- Weber
Epidermolisis ampollosa distrfica; EA hemidesmosmica.
Ataxia-Telangiectasia, AR, gen afectado AT
Afecta el SNC y perifrico
Reparaci Reparaci n por escisi n por escisi n de bases n de bases
Glucosilasa reconoce y elimina la base daada
Fotorreactivaci Fotorreactivaci n n fotoliasa (rompe la unin T-T)
Reparaci Reparaci n por escisi n por escisi n de nucle n de nucle tidos tidos
Sistema de reconocimiento de distorsiones de la hlice
Sistema de reparaci Sistema de reparaci n de roturas n de roturas bicatenarias bicatenarias
Proceso normal slo durante la recombinacin
Proceso de reparacin
ADN polimerasa de translesin
Recombinacin por tirosina o serina recombinasa
ADN ADN polimerasa polimerasa de de translesi translesi n n
sistema SOS que incluye a las SOS que incluye a las Flia Flia. . Pol Pol Y Y
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Sistemas de reparacin por escisin de bases o Nt
tambin funcionan durante la transcripcin
Sistema de reparaci Sistema de reparaci n de apareamientos incorrectos n de apareamientos incorrectos (2) (2)
Aumenta la precisin en dos o tres rdenes de magnitud
Sistema MutS (en E. Coli)
Reconoce los apareamientos incorrectos
por la distorsin que produce en la doble hlice
En eucariontes existen muchas protenas homlogas de
MutS MSH MutL MLH y PMS
con especificidades diferentes
Utilizan las enzimas del replisoma
interactan con el anillo deslizante y controlan durante la
replicacin
Mutaciones en homlogos de MSH2 y de MLH y PMS
predisposicin al cncer de colon no polipsico hereditario
Lesiones del ADN Lesiones del ADN
espont espont neas o inducidas por agentes qu neas o inducidas por agentes qu micos micos
Reversiones directas
Fotorreactivaci Fotorreactivaci n n
Reversiones directas
Eliminaci Eliminaci n de grupos metilo n de grupos metilo
metil metil transferasas transferasas
Reparaci Reparaci n por escisi n por escisi n de bases n de bases
Glucosilasa Glucosilasa reconoce y elimina la base daada
DNA glucosilasas son especficas de lesin y de base
Muy eficientes
Buscan lateralmente los errores (las bases son internas)
Reconocen (o suponen y bien) cuando eliminar T frente a G
en el apareamiento T:G que sucede por desaminacin
espontnea de metil citocina
hidroliza el enlace glucosdico
queda un sitio con monosacrido sin base
endonucleasa corta el DNA en 5 y deja 3OH libre
exonucleasa corta en 3 y deja el 5P libre
DNA pol y DNA ligasa reparan
Reparaci Reparaci n por escisi n por escisi n de nucle n de nucle tidos tidos
reconocimiento de distorsiones de la hlice del DNA
producidas
por dmeros de timidina
por aductos qumicos en la base
Corta segmentos de 12-13 Nt de longitud
En eucariontes sistema utiliza ms de 23 pptidos y
es ms complicado que en E. Coli
Reparaci Reparaci n por escisi n por escisi n de nucle n de nucle tidos tidos
a-UvrA y UvrB reconocen el sitio
de distorsin
b- UvrA abandona el complejo
UvrB desnaturaliza el DNA
c-UvrC forma complejo con UvrB
corta a ambos lados
d-DNA helicasa UvrD
separa el fragmento
DNA pol I y DNA ligasa
reparan y sellan la brecha
Sistemas de reparacin por escisin de bases o Nt
tambin funcionan durante la transcripcin
Sistema de reparaci Sistema de reparaci n de roturas n de roturas bicatenarias bicatenarias
Proceso normal slo durante la recombinacin
requiere del cromosoma hermano para
recuperar la informacin de la secuencia
Recombinacin por tirosina recombinasa
a- R1 y R3 cortan el DNA
Las protenas se unen al DNA por enlace
PTir-3
b-intercambio del primer par de cadenas
c-segundo intercambio de cadenas,
Intervienen R2 y R4
d-intercambio de las cadenas inferiores
Recombinacin por serina recombinasa
Similar al anterior
Mecanismo de recombinacin especfica
Unin Holliday
S S ntesis ntesis translesi translesi n n
Enzima: DNA DNA polimerasa polimerasa de de translesi translesi n n (Familia Pol Y)
Sntesis del DNA
Cuando hay error salta todo el sistema de replicacin y se induce
sistema SOS SOS que incluye a las que incluye a las Flia Flia. . Pol Pol Y Y
DNA pol Flia. Y *Busca y reconoce sitio de replicacin
*repara
DNA pol Y saltea sitios de lesin que no pudo reparar
Sintetiza a travs de la lesin sin leer la ausencia o el error
No incorpora Nt al azar
algunas incorporan Nt especficos, ej dos A frente a dmeros T
Prefiere replicar el DNA con una posible mutacin que
tener un cromosoma duplicado en forma incompleta
Es muy propensa a errores, no tiene lectura de prueba
sistema de ltimo recurso