Universidade Federal de Viosa Campus de Rio Paranaba

Instituto de Cincias Exatas e Tecnolgicas

QAM 136 Qumica Orgnica Experimental I





Prtica nmero 7: Cromatografia

















Introduo

A cromatografia uma tcnica importante usada pelos qumicos para separar
componentes em uma mistura, onde a distribuio de compostos ou ons diferentes gera
duas fases, uma fase mvel e a outra estacionaria. A tcnica funciona na similaridade de
uma extrao com solvente. Na cromatografia, o processo de separao depende das
diferenas de adsoro dos componentes da mistura na fase estacionaria e de quo
solveis so na fase mvel, principalmente da polaridade relativa. (PAVIA, 2009)
Existem vrios tipos de cromatografia, que vai da tcnica de camada fina que simples e
barata, at a cromatografia liquida de alta eficincia, que muito complexa e cara.
(PAVIA, 2009)

Figura 1- Tipos de Cromatografia.
A cromatografia mais usada atualmente a gasosa acoplada com a espectrometria de
massa, tcnica chamada de CGMS. A cromatografia a gas separa os componentes de
uma mistura, enquanto o espectrmetro de massa fornece a informao estrutural sobre
cada um deles. O CGMS tambm fornece dados quantitativos com a utilizao de
padres de concentrao conhecida que so adicionados a amostra. (SOLOMONS,
2012)

Figura 2- Cromatografia gasosa acoplada ao espectrofotmetro de massa.

Objetivos
- Aprendizagem da tcnica de cromatografia em coluna.
- Separao dos pigmentos do espinafre por cromatografia em coluna.
- Monitoramento da cromatografia em coluna por CCD

Materiais e Reagentes
- Algodo - Acetona
- Almofariz e pistilo - Espinafre
- Capilar para CCD - Hexano
- Coluna Cromatogrfica - Slica gel
- Cuba - Tubos de ensaio
- Erlenmeyer 125 mL - Cadinho
- Funil de vidro
- Papel de filtro
- Pipeta Pasteur
- Placa cromatogrfica
- Proveta
- Suporte com garras
Procedimento Experimental
1) Em capela de exausto, adicionou-se 40 mL hexano e 10 mL de acetona em um
erlenmeyer de 125 mL e reservou-se.
2) Pesou-se cerca de 25 g de folhas de espinafre. Rasgou-se as folhas em pequenas
partes e colocou-as em um almofariz, juntamente com 50 mL de uma mistura de
hexano:acetona ( 4:1 v/v). Amassou as folhas at que a soluo adquiriu uma
colorao esverdeada. Com uma pipeta, transferiu-se a soluo para um
erlenmeyer de 125 mL.
3) Ajustou-se a coluna de separao no suporte e adicionou-se a slica gel,
adicionando hexano para fixar a slica na coluna. Deixou-se acima da slica um
espao de alguns centmetros de hexano.
4) Com a pipeta Pasteur adicionou-se o extrato preparado o tpico 1, abriu a
torneira e deixou-se que a amostra penetrasse na slica. Adicionou-se novamente
na coluna o hexano coletado embaixo.
Resultado e Discusses
Na aplicao do extrato na coluna observou-se que houve uma separao de fases, uma
amarela e outra verde. A fase amarela correspondia ao -caroteno que foi eluido antes
por causa da sua interao com a fase mvel que era o hexano que apolar. A fase
verde correspondia as clorofilas a e b. Fez-se o teste com tetracloreto de carbono no
lugar do hexano, mas ele no mostrou-se eficiente na cromatografia em coluna.
Aplicou-se o extrato no papel para cromatografia mas no observou-se uma separao
das clorofilas e do -caroteno.
J a aplicao do extrato na placa de CCD mostrou-se a corrida dos compostos ao ser
revelado na cmara UV.
Concluso
Observou-se que nesse experimento a cromatografia em coluna mostrou-se mais
eficiente que a cromatografia em papel para mostrar a separao dos componentes do
espinafre. Pode-se afirmar que a tcnica que usa a gravidade em seu favor mostrou uma
melhor combinao com o eluente usado do que a tcnica adepta da capilaridade.
O CCD mostrou a interao das clorofilas e -caroteno com a slica e o eluente usado que
no caso foi acetona. As clorofilas com mais interao com o eluente correu mais na placa do
que o -caroteno.

Bibliografia
Pavia D.L.; Lampman, G.M.; Kriz, G.S.; Engel, R.G. Qumica Orgnica Experimental
tcnicas de escala pequena. Editora Bookman, 2 ed, So Paulo, 2009.
Solomons T.W.G.; Craig B. F. : Qumica Orgnica vol 1, 10 ed.- LTC, 2012.