UNIVERSIDAD NACIONAL MAYOR DE SAN MARCOS

Universidad del Per, DECANA DE AMRICA

FACULTAD DE FARMACIA Y BIOQUMICA
ESCUELA ACADMICO PROFESIONAL DE FARMACIA Y BIOQUMICA
Departamento Acadmico de Qumica Bsica y Aplicada

QUMICA ORGNICA I

PRCTICA N 06
CROMATOGRAF A EN CAPA FI NA, EN PAPEL, EN
COLUMNA Y A ESCALA PREPARATI VA
ALUMNOS:
ALLENDE QUISPE, Vctor Manuel

DOCENTES:
DR. Pablo E. Bonilla Rivera

DA DE PRCTICA:
Martes (12:00 pm -2:00 pm)

CICLO:
2014 - II





I. OBJETIVOS
Conocer y realizar tcnicas cromatogrficas para la deteccin y separacin de
compuestos de una mezcla.
Conocer y diferenciar los fundamentos de las diferentes tcnicas cromatogrficas.
II. MARCOTERICO
La cromatografa es una tcnica de fraccionamiento que permite separar, aislar e
identificar los componentes de una mezcla de dos o ms compuestos qumicos. Tambin
puede ser utilizada como criterio de pureza. Tambin puede ser utilizada como criterio de
pureza.
En primer lugar, la cromatografa, constituye un mtodo fsico de separacin en el
cual los componentes a separar se distribuyen entre dos fases: una fase estacionaria, solida
o liquida de gran rea superficial, y una fase mvil, liquida o gaseosa que pasa a travs de
la primera
Un principio fundamental de la cromatografa se basa en las solubilidades o
adsortividades diferentes de la sustancia a separar en relacin a las dos fases entre las
cuales se deben particionar. Por esta razn se distinguen dos fenmenos muy importantes y
que son prcticamente los rectores del proceso de separacin: adsorcin y particin.
La adsorcin es la retencin de una especie qumica en los sitios activos de la
superficie de un slido (adsorbente) que constituye la fase estacionaria, quedando
delimitado el fenmeno a la superficie que separa las fases o superficie interfacial. Esta
retencin superficial puede ser fsica o qumica. La adsorcin ocurre en la superficie de la
partcula de la fase estacionaria y es debida a la atraccin entre el soluto y el adsorbente por
la formacin de uniones dipolo-dipolo, puentes de hidrogeno, etc.
La particin es un fenmeno que tiene lugar entre una fase liquida adsorbida en un
soporte slido y una fase mvil, que puede ser liquida adsorbida en un soporte solido
constituye la fase estacionaria y si la particin se realiza entre dos lquidos, el ms polar es
el que constituye la fase estacionaria.

(Alicia Lamarque, Julio Zygadlo, Diana Labuckas, Liza Lpez, Mariela torres,
Damin Maestri; 2008)



III. PARTE EXPERIMENTAL
MATERIALES Y REACTIVOS:







Cubeta de cromatografa rojo de metilo Sustancia x Azul de metilo




Capilares Porta objeto con Silicagel








Acetato de etilo Pipeta Metanol Mechero
IV. EXPERIMENTACIN:
























El primer paso para la experimentacin, fue preparar la cubeta cromatogrfica,
esto se hizo mezclando entro de la cmara los solventes, los cuales fueron
Acetato de etilo, Metanol, los cuales fueron agregados (0.5 ml de cada uno) a
la cubeta cromatogrfica, mediante la ayuda de una pipeta y un vaso de cristal,
el cual se dej en reposo y sellado para que los gases se acumularan en la cubeta.
Solvente
vaso
Cubeta
Cromatogrfica
Pipeta
Pipeta

























Luego de ello procedimos a calentar los
capilares con la ayuda de un mechero,
para as poder moldear el vidrio del capilar,
el cual fue calentado por el medio y
estirado, dndole la forma en punta que
podemos observar en el capilar, esto nos
ayudara gracias a su fina punta a colocar
de manera correcta las muestras sobre el
silicagel que se encuentra en el porta
objetos; luego de ello, colocamos con la
ayuda de los capilares ya moldeados, los
reactivos o sustancias a Analizar Azul
de metileno, Rojo de metilo, sustancia x
despus de haber colocado correctamente
las sustancias a analizar, pasamos a
colocar nuestra muestra (porta objetos con
silicagel y los reactivos) a la cubeta
cromatogrfica, en la cual el silicagel,
adsorber el solvente y los reactivos se
desplazarn de acuerdo a ciertos patrones
que analizaremos.
Capilares
Mechero Silicagel
Cubeta cromatogrfica












( )




()

()

()

Nueva
posicin del
compuesto A
Nueva
posicin del
compuesto B
Origen
Frente del
disolvente
X
Y
Z
C no
recorri
nada
La Rf es constante para cada Compuesto; siempre que se respete una serie de
variables para como:
a). sistema de disolventes de corrida; b). adsorbente; c). espesor de la capa de
adsorbente; d). cantidad de material sembrado; e). temperatura ambiente.
El valor de Rf puede ser utilizado para identificacin, pero no como criterio nico,
ya que varios compuestos pueden tener la misma Rf, con determinada mezcla de
disolventes.

V. Conclusin:
Se basa en la afinidad entre los componentes de la mezcla entre la fase
estacionaria y la fase mvil, esta mayor o menor afinidad va ligada por la
relacin entre la polaridad entre las molculas que componen la mezcla y la
polaridad de la fase mvil.

El valor de Rf puede ser utilizado para identificacin, pero no como criterio
nico, ya que varios compuestos pueden tener la misma Rf, con determinada
mezcla de disolventes.
V. CUESTIONARIO
1. Clasifique los diferentes tipos de cromatografa que existen.






























2. Explique el fundamento de las tcnicas cromatogrficas estudiadas
El principio fundamental de la cromatografa se basa en las solubilidades o
adsortividades diferentes de la sustancia a separar en relacin a las dos fases
entre las cuales se deben particionar. Por esta razn se distinguen dos
fenmenos muy importantes y que son prcticamente los rectores del proceso
de separacin: adsorcin y particin.

3. Diga la utilidad de la cromatografa en capa fina bidimensional
Se agarra un cuadrado, en la esquina abajo izquierda se aplica la mezcla para
separar en forma de una mancha, que menos dimetro tiene, mejor. Despus se
coloca en un recipiente hermticamente cerrado lleno de vapores de un
solvente y con el solvente liquido en el fondo. Por el efecto de la capilaridad
solvente comienza a subir, arrastrando consigo las fracciones de la muestra
solubles en l. Al terminar el proceso (solvente sube hasta lmite de la placa), la
placa se saca de la cmara y se seca. Cmara vuelve llenarse ya con el otro
solvente y la placa vuelve a colocarse en la cmara, pero ahora en una posicin
de 90 grados con respecto a la primera posicin. Se repite el procedimiento, con
diferencia que ahora se mueven hacia arriba otras fracciones, solubles en el
nuevo solvente. Todo se termina al tratar la placa cromatogrfica con un
revelador especfico (ninhidrina para los aminocidos) que permite visualizar
la posicin de las manchas que corresponden a cada compuesto. Manchas se
escanean y segn su rea e intensidad de color se deduce la cantidad de cada
compuesto.
4. Revisar la bibliografa y explique en que consiste la cromatografa Flash y
HPLC.

















VI. BIBLIOGRAFA
1.- Alicia Lamarque, Julio Zygadlo, Diana Labuckas, Liza Lpez, Mariela torres, Damin
Maestri. Fundamentos teorico-practicos de quimica organica/. Primera edicin. Editorial:
ELIZCOM.2008.
2.- Osorio Giraldo. Manual de tcnicas de laboratorio qumico. Primera edicin.
Colombia. Editorial: Universidad de Antioquia 2009.
3.- Dupont Durst, George Gokel. Qumica orgnica experimental .Edicin Original.
Barcelona, Espaa.Editorial:Reert.2007