Universidad del Quindo

Faculta de Ciencias Bsicas y Tecnologas

Programa de Qumica






Prctica de laboratorio N 1
Aislamiento-Derivatizacin de Cafena








Presentado por:
Ubeiden Cifuentes Samboni




Presentado al Profesor:
M.Sc. Fernando Agudelo A.
Fitoqumica II



Armenia-Quindo
19 agosto del 2014


Introduccin

La cafena es un alcaloide identificado como 1,3,7-trimetilxantina, cuya estructura contiene
un esqueleto de purina (Figura 1). Este alcaloide se encuentra en grandes cantidades en las
semillas de caf y las hojas de t verde. Tambin se puede dividir en otros productos
vegetales, en especial en el cacao, el guaran y la hierba mate. Aunque una pequea
porcin de la poblacin consume cafena en forma de frmacos, por ejemplo, gripe, gran
parte de este alcaloide se ingiere en forma de bebidas. Una taza de caf puede contener en
promedio alrededor de 80 mg de cafena, mientras que una lata de refresco de cola contiene
alrededor de 34-41 mg.

La cafena es uno de los alcaloides ingeridos ms la actividad biolgica planeta. Presenta
diversa accin farmacolgica resultante, entre otros efectos, cambios en el sistema nervioso
central, sistema cardiovascular y la homeostasis del calcio. Los efectos de la cafena sobre
el comportamiento humano han sido estudiados desde hace algunas dcadas. Estos efectos
pueden ser descritos mayor estado de alerta y reduce la fatiga, con mejora concomitante en
la realizacin de actividades que requieren una mayor vigilancia. Por el contrario, el
consumo de cafena puede afectar negativamente el control motor y la calidad del sueo, y
la causa irritabilidad en los individuos con signos de ansiedad.



Algunos metabolitos de las plantas, tales como las contenidas en aceites esenciales son muy
adecuados para el anlisis po GC / MS sin derivatizacin (Jennings y Shibamoto, 1980;
Adams, 2001). Sin embargo, la derivatizacin qumica (Knapp, 1979; Blau y King, 1977;
Blau y Halket, 1993) es por lo general requerida para reducir las polaridades de los grupos
funcionales, facilitar su separacin por GC y pueden influir en su propiedades espectrales
de masas (Halket, 1993).
Reacciones de derivatizacin estn destinadas a transformar un analito para la
detectabilidad en Cromatografa de Gases (GC) u otros mtodos analticos instrumentales.
La derivatizacin en el anlisis de GC se puede definir como una tcnica de procedimiento
que modifica principalmente la funcionalidad de un analito a fin de las separaciones
cromatogrficas. Un analito modificado en este caso ser el producto, que se conoce como
el derivado. El derivado puede tener una estructura similar o estrechamente relacionados,
pero no el mismo que el compuesto original.
La volatilidad de la muestra es un requisito para el anlisis de GC. La derivatizacin har
que los materiales altamente polares para ser suficientemente voltil para que puedan ser
eluidos a temperaturas razonables sin descomposicin trmica (Knapp, 1979) o
reordenamiento molecular (Khnel et al, 2007; Blau y King 1979). La comprensin de la
qumica de los analitos, la derivatizacin de los reactivos utilizados en la preparacin de
muestras, y la funcionalidad detallada de la cromatografa de gases son importantes para
obtener resultados fiables. Para el anlisis de GC, los compuestos que contienen grupos
funcionales con hidrgenos activos, tales como-SH,-OH,-COOH y NH son de principal
preocupacin debido a la tendencia de estos grupos funcionales para formar enlaces de
hidrgeno intermoleculares (Zaikin y Halket, 2003). Estos enlaces de hidrgeno
intermoleculares afectan a la volatilidad inherente de los compuestos que los contienen, su
tendencia a interactuar con materiales de empaquetado de la columna y su estabilidad
trmica (Sobolevsky et al., 2003). Desde GC se utiliza para separar compuestos orgnicos
voltiles, la modificacin del grupo funcional de una molcula por derivatizacin permite el
anlisis de compuestos que de otra manera no pueden ser supervisados fcilmente por GC.
Proceso de derivatizacin aumenta o disminuye la volatilidad del compuesto de inters.
Tambin reduce la adsorcin del analito en el sistema de GC y mejora la respuesta del
detector, las separaciones de pico y el pico de simetra.

Reaccin de derivatizacin de la cafena:



Objetivo
Realizar el aislamiento de la cafena y realizar la derivatizacin de la misma.
Anlisis de resultados

El punto de fusin experimental del salicilato de cafena fue de 132-135 C.
El punto de fusin terico es 137 C

IR de la cafena terica



IR experimental del salicilato de cafena.




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r
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s
m
i t
a
n
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i a
500 1000 1500 2000 2500 3000 3500 4000
Nmero de Ondas (cm-1)


CONCLUSIONES

Se aisl la cafena del t para la posterior derivatizacin.
Se logr realizar la derivatizacin de la cafena, obteniendo como producto derivatizado
la sal de cafena, salicilato de cafena, este producto puede ser analizado por
cromatografa de gases, ya que sus propiedades son diferentes a las de la nicotina
(producto original).
Se comprendi el principio de la derivatizacin, cambiar qumicamente las propiedades
de un compuesto para ser analizado con mayor facilidad por tcnicas como CG, HPLC,
entre otras tcnicas analticas.

CUESTIONARIO

1. En qu consiste la derivatizacin?

Reacciones de derivatizacin estn destinadas a transformar un analito para la
detectabilidad en Cromatografa de Gases (GC) u otros mtodos analticos
instrumentales. La derivatizacin en el anlisis de GC se puede definir como una tcnica
de procedimiento que modifica principalmente la funcionalidad de un analito a fin de las
separaciones cromatogrficas. Un analito modificado en este caso ser el producto, que
se conoce como el derivado. El derivado puede tener una estructura similar o
estrechamente relacionados, pero no el mismo que el compuesto original.
2. Cules son los criterios para la eleccin de un reactivo derivatizante?

La eleccin de la tcnica para el anlisis de la derivatizacin de los compuestos
depender de los reactivos de reaccin y tipos disponibles que pueden producir
derivados que dan resultados deseables en GC. Los derivados deben ser adecuados,
detectable y eficiente para el anlisis de GC. La evaluacin del grupo funcional del
analito, el detector de GC e incluso los subproductos de la reaccin entre otras
consideraciones guiar la eleccin de la tcnica de derivatizacin. Por ejemplo, la
insercin de grupos perfluoroacilo en una molcula mejora su detectabilidad por captura
de electrones. La presencia de un grupo carbonilo adyacente a carbonos halogenados en
un analito mejora la respuesta del detector de captura de electrones (ECD). Para detector
espectroscpico de masas, derivados de acilo tienden a dirigir los patrones de
fragmentacin de los compuestos y, por tanto, proporcionar informacin til sobre la
estructura de las molculas.

Para los analitos de cido, la primera opcin para la derivacin es esterificacin. Los
cidos son compuestos reactivos y tambin ms polares que pueden ser separados
tambin por cromatografa de gases. Los cidos no derivatizados tendern a cola debido
a la adsorcin y la interaccin no especfica con la columna. La esterificacin se utiliza
para derivar cidos carboxlicos y otros grupos funcionales cidos. La reaccin implica
la condensacin del grupo carboxilo de un cido y el grupo hidroxilo de un alcohol, con
la eliminacin de agua. En consecuencia, se reduce la polaridad de la molcula.
Casi todos los grupos funcionales que presentan un problema en la separacin por
cromatografa de gases (hidroxilo, cido carboxlico, amina, tiol, fosfato) se pueden
derivatizar por reactivos de sililacin. Los derivados de las reacciones de sililacin son
generalmente menos polar, ms voltil y ms estable trmicamente. La introduccin de
un grupo (s) sililo tambin puede servir para mejorar las propiedades de espectrometra
de masas de los derivados, ya sea mediante la produccin de patrones de fragmentacin
de diagnstico ms favorables de uso en investigaciones de la estructura, o iones
caractersticos de su uso en anlisis de trazas en otras tcnicas relacionadas.
3. Enuncie y explique las principales teoras de derivatizacin en GC


4. Explique por lo menos tres ejemplos de la utilidad de la derivatizacin.
Adems de analitos particulares, tales como los productos farmacuticos, las
biomolculas, cidos orgnicos, amidas, compuestos poli-hidroxi, amino cidos,
pesticidas y otros persistente compuestos orgnicos, nuevas clases de compuestos de
inters, por ejemplo, sustancias alquiladas fluorados e hidrocarburos aromticos
policclicos siguen surgiendo. Es necesario desarrollar y / o mejorar los mtodos de
anlisis qumico y de ah la necesidad de familiarizarse con los mtodos de
derivatizacin que son aplicables al anlisis de GG. Generalmente derivatizacin tiene
por objeto mejorar en los siguientes aspectos en cromatografa de gases: solubilidad,
eficiencia, detectibilidad.

Referencias bibliogrficas
Bao Ming-Liang, Pantani Francesco, Griffini Osvaldo, Burrini Daniela, Santianni
Daniela, Barbieri Katia (1998). Determination of carbonyl compounds in water by
derivatizationsolid-phase micro extraction and gas chromatographic analysis. Journal
of Chromatography A. 809 (1998) 7587.
Blau, K., King, G. (1997). Handbook of Derivatives for Chromatography; Heyden &
Sons Ltd.; London, 1979.
Kataoka, Hiroyuki (2005). Gas chromatography of amines as various derivatives.
Quantitization of amino acids and amines by chromatography - methods and
protocols. Journal of Chromatography Library. Volume 70, 2005, Pages 364-404.

Szyrwiska, K. Koodziejczak A., Rykowska I., Wasiak W., and Lulek J. (2007).
Derivatization and Gas chromatography low-resolution Mass Spectrometry of
Bisphenol A. Acta Chromatographica, No. 18, 2007.