INTRODUCCION

Se denomina antgeno a toda sustancia que introducida en un individuo

desencadena una respuesta inmune. Todos los microorganismos, virus, bacterias,
parsitos y hongos, generan respuestas inmunes, por lo que en el sentido ms
amplio todos se comportan como antgenos. Para desencadenar una respuesta
inmune el antgeno debe ser reconocido por un receptor linfocitario, en la
superficie de un linfocito B o en la de un linfocito T. Aquella porcin especfica del
antgeno reconocido por el sitio de combinacin de un anticuerpo o por el receptor
T, se denomina epitopo o determinante antignico. Los determinantes antignicos
constituyen porciones muy pequeas del antgeno, de manera que unos pocos
aminocidos estn involucrados en la interaccin con un anticuerpo. Por lo tanto
una protena extraa tiene varios determinantes antignicos y generar una
respuesta inmune policlonal, es decir, con la produccin de anticuerpos contra sus
diversos epitopos. Hay molculas estructuralmente muy sencillas que pueden
unirse a un anticuerpo y que, sin embargo, por s solas no son capaces de inducir
la formacin de los mismos. Estas molculas se denominan haptenos. Para que
un hapteno sea inmungeno es necesario unirlo covalentemente a una
macromolcula apropiada, que cumple las veces de transportador (carrier). En una
protena, un anticuerpo podr unirse a un determinante antignico lineal o continuo,
resultante de unos pocos aminocidos contiguos en la secuencia primaria; de una
manera alternativa, un anticuerpo puede reconocer un epitopo conformacional,
constituido por residuos distantes en la secuencia primaria pero cercanos en la
estructura terciaria (espacial). Los linfocitos B reconocen antgenos (nativos y
libres) mediante su inmunoglobulina de superficie (BCR). Por el contrario, el
receptor TCR (linfocitos T) no es capaz de reconocer antgenos nativos y libres,
sino que siempre los reconoce en superficies celulares. El TCR est
estructuralmente diseado para reconocer pptidos pequeos transportados y
presentados por molculas del MHC (procesamiento antignico), por el cual se
generan pptidos pequeos a partir de una macromolcula compleja. El antgeno
es el principal regulador de la respuesta inmune pues la activa, sta respuesta
elimina el antgeno y cesa una vez desaparecido el antgeno.
OBJETIVOS



MARCO TEORICO
Antgeno es toda sustancia que introducida parenteralmente en el hombre o en los
animales, induce la formacin de anticuerpos o la aparicin de fenmenos de
hipersensibilidad. "In vitro" y en presencia de factores accesorios, pueden
reaccionar con el anticuerpo especfico, dando lugar a fenmenos perceptibles.
Los Antgenos ms comunes en Medicina son: las bacterias, virus, toxinas,
esporas de hongos, hemates, suero, etc.
Se aplican en las inmunizaciones y consisten en inocular un antgeno en dosis
adecuadas y generalmente progresivas con las siguientes finalidades.
1. Inducir en el hombre o en los animales, la formacin de anticuerpos que los
protejan contra determinados procesos infecciosos. Este mtodo conocido
como vacunacin confiere inmunidad adquirida activa.
2. Obtener antisueros, o sea sueros que contengan anticuerpos, los cuales
sern empleados en:
a) Seroterapia, para el tratamiento de diferentes enfermedades, como la
difteria, ttanos, etc., en las cuales se administran anticuerpos pre-
formados confiriendo al paciente una inmunidad adquirida pasiva.
b) La tipificacin de especies bacterianas, lo que ha dado lugar a
verdaderos esquemas de clasificacin, como el de Kauffmann-White
para las Salmonellas, el de Ewing para las Shigellas y el de Kauffmann-
Knipschildt- Vahlne para Escherichia coli.

MATERIAL
Cultivo bacteriano en medio slido y en desarrollo confluente
Cultivo bacteriano en medio lquido (caldo nutritivo)
Pipetas graduadas estriles de 5 cc.
Suero fisiolgico estril, repartido en frascos de 100 cc.
Embudos y gasa, estriles para filtrar
Acido fnico concentrado en tubos de 13x100 ml.
Formol concentrado, en tubos de 13x100 ml.
Pipetas de Pasteur, estriles
Pipetas graduadas de 1 ml.
Tubos vacos estriles de 16x150 ml.
Algodn y Alcohol yodado
Agar nutritivo en placas y tubos


PROCEDIMIENTO
1. Con una pipeta graduada, agregar 2 cc. de suero fisiolgico estril a los
cultivos bacterianos presentados en medio slido






2. Recoger por lavado todo el desarrollo bacteriano, tratando de no arrastrar
agar
3. Separar la suspensin en cantidades iguales en dos tubos de 13x100
4. Para preparar el Antgeno somtico "O", medir la cantidad de suspensin
bacteriana de uno de los tubos y agregar fenol en volumen necesario para
alcanzar una concentracin de 0.5%.







5. Se puede as mismo inactivar las fracciones flagelares, sometiendo el
antgeno a la ebullicin durante dos horas, o tratndolo con alcohol absoluto.
6. Para preparar el Antgeno flagelar "H", inactivar las fracciones somticas en
el otro tubo de suspensin bacteriana, agregando formol puro hasta
alcanzar una concentracin del 0.5%