Laboratorio de Microbiologa I- Materiales de Laboratorio: Reconocimiento, Utilidad y Limpieza

I.- OBJETIVOS
Que el alumno conozca parte del material necesario en un laboratorio de
microbiologa y parasitologa.
Que el alumno aprenda a manejar el material utilizado en un laboratorio de
microbiologa y parasitologa.
II.- MARCO TEORICO
Algunos de los instrumentos ms utilizados en los laboratorios, son elaborados de
vidrio resistente a altas temperaturas, por su alto contenido de dixido de silicio, bajo
lcali, xido brico y vestigios de otros xidos, lo que condiciona su escaso coeficiente
de dilatacin, teniendo una gran aplicacin en la fabricacin de materiales de
laboratorio, uno de los mas conocidos es .el vidrio !"#$. As como los elaborados
de distintos metales pesados como platino,% mercurio, aluminio, cobre que les otorgan
caractersticas como buenos conductores del calor o por que al medio ambiente son
muy manejables sin alterar su composicin.
Instrumentos de vidrio como la probeta, la pipeta o el tubo de ensayo, y otros como el
mechero Bunsen, son de los ms comunes en la mayora de los laboratorios
cientficos.
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MATERIAL DE VIDRIO
&onstituye una de las principales 'erramientas para los fines que se persigue en el
laboratorio. (os requisitos necesarios para que un material sea un )buen material),
son*
+. ,er de buena calidad- es decir que no sean fcil de quebrarse.
.. ,er de color neutro.
/. oseer resistencia a las acciones mecnicas y a las variaciones de
temperatura as como tambi0n a los lcali1libre 2no se raje3.
4. oseer bajo coeficiente de dilatacin 2que no pierda su forma3.
Tubos de Ensayo:
,e emplean como recipientes de medios de cultivo.
1 5ubos de prueba
6eben ser de vidrio neutro, paredes gruesas y equilibradas, de preferencia sin
rebordes para facilitar el taponamiento.
6e +7 x +89 mm
6e +8 x +.8 mm
6e +/ x +99 mm para estudio de fermentacin :trabajos mecnicos
6e +9 x ;8 mm pruebas, estudios serologicos.
1 5ubos de "oux
&on escotadura de 4 cm. de fondo, de .8 x .99 mm para
1 5ubos de centrfuga
6e vidrio, pueden ser cnicos o cilndricos, siempre de paredes gruesas,
6e paredes gruesas, por estar inmersos rotando a alta velocidad.
6e polietileno, se utiliza para centrifugaciones a altas velocidades, de medidas
semejantes a los anteriores.
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Cpsulas o Placas Petri:
&ajas cilndricas, se emplean como recipientes de medios de cultivo para el
cultivo y aislamiento de microorganismos. (as ms usadas son las de +9, +8
.9 mm x +99 mm.
Cultivos bacterianos
Colonias de bacterias Escherichia coli (ms grande, rosa) y roteus vulgaris (ms
pe!ue"a, de color casta"o) !ue crecen #untas en una placa etri. En circunstancias
normales estas bacterias son inofensivas y habitan en el intestino humano
favoreciendo la digesti$n, si bien pueden convertirse en pat$genas y producir
infecciones del tracto urinario. %os cientficos y m&dicos llevan a cabo cultivos
bacterianos y estudian sus caractersticas con el fin de ad!uirir conocimientos
respecto a las enfermedades bacterianas y su prevenci$n.
Placas Breer:
ara el cultivo y aislamiento de microorganismos anaerbicos. ,on id0nticas a
las anteriores, con excepcin de las tapas que adems de ser mas pesadas
estn adaptadas para crear anaerobiosis.
Pipetas:
5ubos cilndricos delgados terminados en punta, graduados al d0cimo o al
cent0simo de m<. ,e emplean en la medicin de peque=as cantidades de
lquidos. ueden ser*
!erol"#icas* son terminales y con capacidad de 9.+ a .8 ml.
Volumtricas, se reconocen por presentar una dilatacin bulbosa central con
unas marcas de aforamiento conocida, en el extremo proximal angosto de la
pipeta, se les llama tambi0n pipetas de bola, las medidas ms conocidas son
de +9, .8, 89 y +99 ml.


Pipetas Pasteur:
&onfeccionados de varillas de vidrio de dimetro de 4 x .9mm de /9 49cm de
longitud. (a calidad de vidrio debe facilitar reblandamientos a la accin directa
de la llama del mec'ero, para conseguir por estiramiento la capilaridad
deseada. ,e emplea para la toma de peque=os inculos de siembra.

.
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Matraces y Erlen$eyers:
"ecipientes de forma cnica y cuello corto, volum0tricos >tiles para la
preparacin y almacenamiento de soluciones, colorantes, reactivos, medios de
cultivos, etc.

Matraces A%orados o &iolas *
"ecipientes de forma esf0rica y base plana. #stn calibr4ados a medidas
exactas mediante un foro en la parte media del cuello del recipiente en el que
se indica la medida. ,e emplean para la preparacin de reactivos de
preferencia solucin buffer.
%os matraces Erlenmeyer son recipientes de vidrio de forma troncoc$nica !ue
se utili'an en el laboratorio para medir o contener l!uidos.
'itasato:
,on frascos muy parecidos a los #rlenmeyers, se caracterizan por sus paredes
gruesas y por una tubuladura lateral en el cuello, la misma que sirve de
tabulacin lateral para 'acer el vaco. ,e utiliza

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Probetas:
"ecipientes graduados de forma cilndrica y capacidad variable, con base para
la esterilidad. ueden estar graduada.

Vasos de Precipitaci"n o Beac(er:
"ecipientes cilndricos y cortos, con una depresin en el margen de la
bocadura. ,u utilidad es amplia. #l vidrio debe ser resistente al calor.

&rascos )iales para *e$oculti)os+ )acunas+ Culti)os de Te,ido:
,on de vidrio neutro, resistentes al calor, transparentes y con tapas de rosca,
&on capacidad para 89ml y +99ml blancos o de color mbar pueden utilizarse
para la reserva de soluciones y medios de cultivo en stoc?, previamente
taponados con algodn esterilizados,
Perlas de Vidrio -eutro:
,e emplean para desfibrilar sangre y para recoger cosec'as microbianas en la
preparacin de antgenos, 6e 4 a 7 mm.
@arilla* de @idrio Aacizo
MATERIAL DE OTRA -AT.RALE/A
@stago de metal con una cubierta de ebonita aislante del calor y en el extremo
proximal una tuerca para insertar el alambre de plstico o necron,
Asa de 'olle
@arillas metlicas o de vidrio que llevan en un extremo alambre de platino-
cuando el alambre es recto se llama Becrn y cuando el alambre forma un
anillo de dimetro variable en su extremidad toma el nombre de asa.
#sptulas de Aetal con mango de madera
#stuc'es cilndricos o &ubculares
Aec'eros de Cunsen
&anastillas o &estos de Aetal
,oportes Dniversales
5rpodes
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E0.IPO! DE LABORATORIO
Potenci"$etro:
Aiden el pE de los medios de cultivo y de las solucione buffer. &onstituido de
un par de electrodos sensible a concentraciones de 'idrogeniones, conectados
a un potencimetro que indique las mediciones, (os potencimetros emplean
un electrodo de vidrio, unido a un electrodo de calomel como estndar.

Centr1%u#as:
,e utiliza en la separacin de slidos suspendidos en lquidos. Eay centrfugas
de tama=o y velocidades variables, la velocidad, se mide en revoluciones por
minuto, (a velocidad a la cual sedimentaran las partculas en un lquido
dependen de varios factores*
5ama=o de la partcula.
#l peso de la partcula.
(a viscosidad del lquido.
(a fuerza gravitacional.

Dltra centrifugacin- para obtener alteraciones elevadas 2mayor o igual a +99
999 g3, pueden ser*
Dltracentrifugacin analtica* para determinacin de caractersticas fsicas de
protenas o de cido nucleicos.
Dltracentrifugacin preparativa* permite la separacin de organelos
2mitocondrias, etc.3, la separacin se debe efectuar en gradiente de densidad.
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Incubadoras y *ornos
(os 'ornos son capaces de mantener tF mas de +99Fc y las incubadoras
menos de +99F c .(os 'ornos no tienen salida de aire, las incubadoras si.
Ba2os de a#ua
5ambi0n llamados CAGH AA"<A tienen salida de aire presentan un termostato
que regula la temperatura del agua presenta un piso para colocar los
materiales que se desea.

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Re%ri#eradoras y con#eladoras
,on incubadoras de temperatura fra menor de cero grados y los frigideres de
dos a siete grados.
&iltraci"n
,irve para separar materiales lquidos de slidos un ejemplo los I<5"H, 6#
A#AC"ABA.

Espectro%ot"$etro
,e puede observar los colores de los alimentos con una intensidad que el
aparto brinda.

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Autocla)e
Iunciona por las presiones que se dar a una mayor temperatura logrando su
esterilizacin como por ejemplo las conservas.

*orno Pasteur
#s como una mufla que tiene tres paredes y la cubierta es de asbesto sirve
para la esterilizacin por el calor seco.
Estu%as de aire caliente
Al igual que el anterior es utilizado en la esterilizacin por el calor seco. 5ienen
solo dos paredes y son de forma c>bica.

Aparato de arnolo (oc3
#s un tipo de esterilizador con calor '>medo de forma cilndrica.
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III.-MATEIAL PARA LA PRCTICA
ipetas de diferentes graduaciones.
Asas Cacteriolgicas de aro y punta.
&aja de etri.
5ubos de ensayo con tapn de rosca y tapn de algodn.
robeta.
Aatraz #rlenmeyer.
@aso de precipitado.
Aec'ero Cunsen.
5orundas de algodn.
IV. EXPERIMENTO
,iga cada uno de los pasos como lo indica su rofesor, 50cnico o instructor.
+. #ncienda el Aec'ero.
.. #sterilice su asa en el mec'ero 'asta que este al rojo vivo y enfre en el rea
de seguridad.
/. Abra su caja de etri dentro del rea de esterilidad 'asta que aprenda a
'acerla correctamente.
4. 5ome una pipeta est0ril, brala y pipetee la cantidad exacta de agua de
acuerdo a la graduacin de la pipeta.
8. 5ome un tubo de ensayo de rosca o liso y bralo dentro del campo de
esterilidad 'asta que aprenda a 'acerla correctamente.
7. 5ome la probeta y vierta un poco de agua 'asta alguna cantidad exacta.
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V.- RESULTADO
Hbviamente, 'ay unos ciertos tipos de experimentaciones que realizamos o
determinamos con mas frecuencia que otras. ,in embargo, el personal del (aboratorio
esta siempre dispuesto a considerar nuevos retos. Bo pretendemos ser capaces de
realizar cualquier tipo de determinacin, pero prometemos considerar, desde nuestra
experiencia, todas las posibles alternativas es por eso lo imprescindible de reconocer
todos los materiales, su utilidad y su debida limpiezapara cumplir con nuestros
propsitos.
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VI.- CONCLUSIONES
#s muy importante 'aber reconocido todos los materiales a utilizar en el
laboratorio y saber su utilidad para la prctica.
5ambi0n era necesario para prevenir cualquier accidente no provocado y no
lamentar consecuencias.
Dna de las conclusiones es 'aber reconocido algunos reactivos que se debe
tener cuidado y cogerlo con los guantes para prevenir alg>n tipo de
contaminacin.
Eaber reconocido los equipos a utilizar como la centrifuga, el potencimetro y
la estufa de aire caliente.
&onocer la calidad de las principales 'erramientas a utilizar como los tubos de
ensayo, las pipetas, las placas petri, los matraces, etc.
,aber desinfectar las placas cuando se encuentren con algunas bacterias u
'ongos o cidos, tambi0n saber desinfectar las manos y los materiales a
utilizar.
VII.- RECOMENDACIONES
5ener el mandil siempre puesto para evitar contaminacin en la ropa
cuando se encuentre en el laboratorio.
&uando se utilice la pipeta utilizar la bombilla para prevenir cualquier
accidente a menos que se utilice agua en ese instante.
5ener los guantes puestos cuando se trabaje en cultivos de 'ongos o
bacterias en las placas o tubos a utilizar.
Antes de empezar cualquier experimento desinfectar la zona donde se
trabajara.
Bo poner cuadernos grandes sobre la zona donde se trabaje ni meter los
lapiceros en la boca para prevenir alg>n tipo de infeccin.
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VIII.- CUESTIONARIO
45 6Para 7ue sir)e una ca,a de Petri8
,on utilizadas en bioqumica para llevar a cabo cultivos de microorganismos.
95 6Cul es la %inalidad de utili:ar $ateriales est;riles en el laboratorio8
#l propsito del proceso de esterilizacin es destruir la contaminacin microbiana de
los productos no est0riles. (a destruccin microbiana mediante agentes fsicos o
qumicos sigue una ley exponencial, que nos permite calcular la probabilidad de
supervivencia de un microorganismo a partir de la dosis suministrada en el
tratamiento. (a probabilidad de supervivencia est en funcin del n>mero y tipos de
microorganismos 2carga biolgica3, de la letalidad del proceso de esterilizacin y en
algunos casos, del medio ambiente en el que se encuentren los microorganismos
durante la esterilizacin.
<5 6De 7ue esta %or$ada el asa bacteriol"#ica8
,on varillas metlicas o de vidrio que llevan de un extremo alambre de platino- cuando
#l alambre es recto se llama aguja y cuando el alambre forma un anillo de dimetro
variable en su extremidad tmale nombre de asa.
=5> 6.tilidad del $ec3ero Bunsen8
6ispositivo que se utiliza muc'o en los laboratorios debido a que proporciona una
llama caliente, constante y sin 'umo. 6ebe su nombre a "obert Cunsen el que lo creo.
(os mec'eros Cunsen constan de un tubo vertical, enroscado en su parte baja a un
pie por donde entra el gas.Aediante un aro metlico mvil se regula la entrada de aire.
(a mezcla se enciende por la parte superior.
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Ciblioteca de consulta #ncarta .994.