MECANISMOS MOLECULARES RESPONSABLES DE LA HIPOACUSIA

La exposicin al ruido o a drogas ototxicas (antibiticos aminoglicsidos, cisplatino, etc) inicia una compleja cascada
de procesos bioqumicos en las clulas ciliadas sensoriales, el cual conduce a una marcada apoptosis.
La apoptosis es un proceso activo de muerte celular programada caracterizada por condensacin de la cromatina,
fragmentacin intracelular asociada a trozos celulares rodeados de membranas, llamados cuerpos apoptticos y
otros fenmenos celulares secuenciales.
Estos procesos proteolticos son llevados a trmino en gran parte por activacin de las caspasas. Un esquema de los
circuitos de muerte celular que participan en la apoptosis se observa en la figura inferior.
En el caso de las neuronas auditivas espirales la muerte celular puede ser debida a una excesiva liberacin de
glutamato (el neurotransmisor de las clulas ciliadas internas), un dao denominado excitotoxicidad (ver pgina
ototoxicidad en este mismo website); sin embargo, tambin ha sido sugerido que la degeneracin de las neuronas
ocurre en forma secundaria a la prdida de las clulas ciliadas internas sensoriales a las cuales estn conectadas.
Cualquiera que sea el mecanismo desencadenante de la muerte neuronal (ausencia de objetivos presinpticos o
excitotoxicidad) estudios recientes han sugerido que un proceso apopttico est involucrado.


En esta figura se observa una representacin esquemtica de los 2 principales circuitos apoptticos que se considera
que estn activos en el interior de las clulas ciliadas daadas en los mamferos. En el lado izquierdo el circuito de la
muerte del receptor celular est gatillado por miembros de la superfamilia de muerte de receptores tal como el
CD95 (Fas). Unin del CD95 ligando (CD95 L) al CD95 induce agrupamiento de los receptores y formacin de un
complejo sealizador inductor de la muerte. Este complejo recluta, va la molcula adaptadora FADD, mltiples
molculas procaspasas-8, resultando en una autocatalisis de esta molcula procaspasa y en la formacin de una
molcula caspasa-8 activada.
En el lado derecho el circuito o va de las mitocondrias est extensamente activado en las clulas como respuesta a
seales extracelulares y dao interno (por ej: dao al DNA). Estas diversas respuestas convergen en las
mitocondrias, a menudo a travs de la activacin de miembros proapoptticos de la familia Bcl-2 (por ej: Bax, Bad y
Bik). Estas formas citoslicas proapoptticas de la familia Bcl-2 representan un pool de protenas inactivas, pero
potencialmente letales. Seales proapoptticas activan y redirigen estas protenas a las mitocondrias , donde ellas
interactan con molculas antiapoptticas tales como Bcl-2 y Bcl-xL en la membrana externa de las mitocondrias,
donde ellas compiten para regular la formacin de poros y la liberacin del citocromo C desde las mitocondrias al
citosol de la clula afectada. El citocromo C se asocia con Apaf-1, procaspasa-9 para formar un complejo
apoptosoma. El apoptosoma activa la procaspasa-9, que a su vez activa una disminucin del flujo de las caspasas
efectoras (por ej: caspasa-3). Las clulas en las cuales las mitocondrias se han destrudo estn en riesgo de muerte
a travs de un mecanismo noapopttico ms lento semejante a la necrosis celular por la prdida del gradiente
electroqumico a travs de la membrana interna (m) , produccin de altos niveles de ROS y una rpida disminucin
en la produccin de ATP.
Los 2 circuitos mencionados convergen al nivel de la activacin de la procaspasa-3. Clivaje de Bid (mediado por
caspasa-8) un miembro proapopttico de la familia Bcl-2, aumenta grandemente su actividad proapopttica y
resulta en su translocacin desde el citosol a la membrana mitocondrial externa donde promueve la formacin de
poros por Bax y la liberacin de citocromo C.
Ms hacia la derecha (C) se observa como dao al DNA y/o stress oxidativo pueden gatillar la activacin de la va de
transduccin de la seal JNK. Esta transduccin de la seal puede inducir la fosforilacin de factores de
transcripcin tales como c-Jun y c-Fos, los cuales son miembros de la primera e inmediata familia de genes. C-Jun y
c-Fos cuando estn activos son heterodmeros, forman AP-1, el cual puede desencadenar rpida actividad
transcripcional y ha estado implicado en la regulacin de muchos e importantes procesos biolgicos incluyendo
progresin del ciclo celular, transformacin celular, diferenciacin celular, proliferacin celular, reparacin del DNA y
apoptosis.
Abreviaciones: AIF (factor inductor de la apoptosis), Apaf-1 (Dominio de la muerte asociado a Fas), AP-1 (Activador
de protena-1), ATP (Adenosin Trifosfato), CD95 (receptor Fas), CFLIP (Protena inhibitoria FLICE celular), FADD
(Protena del dominio de la muerte asociada a Fas), JNK (Protena kinasa N-terminal de C-jun), ROS (Especies oxgeno
reactivas), SAPK (Protena kinasa activada por el stress).
DAO AUDITIVO INDUCIDO POR RUIDO
El trauma acstico induce prdida de clulas ciliadas en el sitio mximamente estimulado por el sonido. Ncleos
fragmentados de las clulas ciliadas se observan en la misma regin usando anlisis morfolgicos y titulacin
especfica para DNA.
En las clulas ciliadas daadas por el ruido se observa caractersticas morfolgicas tpicas de:
a) autolisis (citoplasma vacuolado, pero con membrana lateral intacta)
b) apoptosis (plegamiento del cuerpo celular, aumento de la densidad electrnica del citoplasma, compactacin de
la cromatina con una membrana lateral intacta)
Es interesante constatar que pueden observarse clulas ciliadas individuales que comparten caractersticas de
ambos procesos, tanto autolticas como apoptticas. Ms an signos de necrosis (restos celulares y membrana
citoplasmtica desintegrada) se ven ocasionalmente en el rea de las clulas ciliadas daadas.
La presencia de estos diferentes fenmenos indica que la degeneracin de las cllulas ciliadas daadas por ruido
implica diferentes mecanismos de muerte celular, incluyendo apoptosis tpica, autolisis y, en un grado menor,
necrosis.
En el caso de la muerte de neuronas auditivas, sin embargo, no est claro si la degeneracin de las neuronas se
produce secundariamente a prdida de las clulas ciliadas internas a las cuales estn conectadas, o si la muerte
celular es ocasionada por una excesiva liberacin de glutamato. En el hecho, perfusin intracoclear de antagonistas
del glutamato previene un 50% de la elevacin aguda del umbral protegiendo las terminaciones nerviosas del nervio
coclear, pero no tiene efecto protector sobre las clulas ciliadas mismas.
Tambin se han usado estrategias farmacolgicas para proteger a la cclea contra el traumatismo acstico. Terapia
con corticoides ha tenido un efecto significativo por va intra-peritoneal. Una dosis de 20 mg/kg de
metilprednisolona inyectada i.p. una hora despus del traumatismo acstico resultan en una mejora funcional de 10
dB, aunque dosis mayores agravan las consecuencias del traumatismo.
Pirvola y col. usaron el inhibidor de la kinasa CEP-1347 para bloquear la va de sealizacin de muerte celular MAPK /
JNK (Protena Kinasa Mitogenactivada / Kinasa terminal c-JUN N). Administracin sistmica de CEP-1347, un
inhibidor de la kinasa de lnea mixta, proporcion proteccin parcial contra la prdida auditiva inducida por ruido.
En aos recientes ha aumentado el inters en el desarrollo de agentes farmacolgicos de liberacin local para
proteger la cclea del dao por ruido.Recolectores de residuos como el manitol o la deferoxamina son mucho menos
potentes que los antagonistas de glutamato en prevenir la elevacin aguda del umbral pero pueden reducir la
prdida celular en alrededor de un 40 %. Tambin se han evaluado las neurotrofinas.Neurotrofina-3 y un Factor
Neurotrfico derivado de la lnea de clulas de la gla han demostrado rescatar un 11 % de las clulas ciliadas y
mejorar ligeramente los umbrales auditivos. El inhibidor de la calpaina, leupeptina, reduce la prdida de clulas
ciliadas externas que sigue a la exposicin a un nivel de presin sonora de 105 dB SPL hasta en un 60 %. Riluzole, un
agente neuroprotector de amplio espectro, ha demostrado igualmente prevenir o atenuar la muerte celular
apopttica o necrtica en modelos de ratones con isquemia retinal y de mdula espinal.
A la luz de estos hallazgos, Wang y col. han examinado el potencial efecto protector del riluzole en la prdida
auditiva por ruido en la cclea del conejillo de indias adulto. La perfusin intracoclear de riluzole protege la cclea
del dao por traumatismo acstico lo que han demostrado con tests funcionales y morfomtricos. Los animales
tratados con riluzole muestran menor elevacin del umbral del potencial de accin compuesto y menos prdida de
clulas ciliadas que los animales control un mes despus de la exposicin al traumatismo. El efecto protector del
riluzole fu ya evidente al 2 da y an ms pronunciado al mes del traumatismo acstico. Citococleogramas
preparados un mes despus del ruido traumtico mostraron que el tratamiento con riluzole protega a ms del 80 %
de las clulas ciliadas internas y externas que estaban destinadas a morir.
Hasta ahora, el modo ms eficiente para proteger la cclea contra el ruido es un nuevo pptido inhibidor D-JNKI-1 ,
un pptido permeable celular que bloque la va de sealizacin MAPK / JNK. Cuando se aplica directamente en la
cclea, el pptido D-JNKI-1 tambin protege la cclea de prdida auditiva permanente inducida por traumatismo
sonoro y proporciona una proteccin casi total de las clulas ciliadas auditivas. Resultados similares se obtuvieron
cuando el pptido D-JNKI-1 fu aplicado sobre la ventana redonda por medio de una minibomba osmtica. La
concentracin eficiente en un 50 % (EC50) fu calculada en 2.31 M. para perfusin intracoclear del D-JNKI-1 y en
2.05 M. para la aplicacin en la ventana redonda.
Adems, la proteccin de este pptido es an efectiva hasta por 12 horas cuando se aplica sobre la ventana redonda
despus del trauma sonoro.