SebentaEstruturaMolecularCélula PDF

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BERNARDO SOUSA PINTO
EUGENIO GONALVES ISABEL VIEIRA MARGARIDA COSTA

FACULDADE DE MEDICINA DA UNIVERSIDADE DO PORTO 2014/15
Sebenta de Estrutura Molecular da Celula Faculdade de Medicina da Universidade do Porto
Bernardo Sousa Pinto; Eugenio Gonalves; Isabel Vieira; Margarida Costa
glna 2 de 6S

012345

Esta sebenta inclui resumos relativos as aulas de Estrutura Molecular da Celula da Faculdade de
Medicina da Universidade do Porto. Alguns destes resumos constituem adaptaes de textos
antigos - das ja extintas Unidades Curriculares de Biologia Celular e Molecular e Bioquimica -,
enquanto outros constituem textos novos propositadamente escritos para esta sebenta.
Bom trabalho e votos de sucesso nos exames,
Os autores,
Bernardo Sousa Pinto, Eugenio Gonalves, Isabel Vieira, Margarida Costa

Noes bsicas de bioqumica. Estrutura e funo das principais biomolculas.......... 6
Incerteza e erro em bioqumica..3
gua, lipdos e sistema de fases....... 6
Compostos inorgnicos do organismo....... 8
Componentes qumicos dos seres vivos....... 12
Estrutura e papel biolgico dos glicdeos....... 15
Estrutura e papel biolgico dos lipdeos....... 20
Estrutura e papel biolgico das protenas....... 24
Protenas de ligao ao DNA e seus domnios funcionais....... 28
Glicosilao e glicao de protenas....... 30
Enzimas e qumica clnica....... 35
Clula: Estrutura e metodologia de investigao............. 78
Clula: conceito e evoluo.......... 41
Metodologia de estudo da clula: Microscopia........ 52
Metodologia de estudo da clula: Cultura e fraccionamento celular........ 57
Metodologia de estudo da clula: Anlise e localizao de molculas........ 60
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Incerteza e erro em b|oqu|m|ca
Segundo o !"#$%$&$' )* +',%-%"' (lCM), os erros em Medlclna podem ser causados por:
!"#$%&# uLlllzao (excesslva) de procedlmenLos que no surLem efelLo.
! Lxemplo: 30 das radlograflas a doenLes com dores nas cosLas so desnecessrlas.
'()#$%&# no-uLlllzao de procedlmenLos que poder-se-lam revelar uLels.
! Lxemplo: no e admlnlsLrada a vaclna pneumocclca a 30 dos ldosos.
*+&%&# erros de execuo.
! Lxemplo: 1odos os anos, 44000-98000 amerlcanos morrem no hosplLal na sequncla
leses resulLanLes dos culdados de saude. ue facLo, os culdados de saude, apresenLam
basLanLes rlscos, Lendo em conLa o numero de vldas perdldas por numero de
lndlvlduos que recorrem a esLes servlos.
Incerteza
Cualquer deLermlnao assenLa em assumpes. Cualquer deLermlnao esL su[elLa a |ncerteza e ao
erro. A lncerLeza refleLe a falLa de conheclmenLo exaLo sobre aqullo que se esL a medlr. ue facLo, as
medles consLlLuem apenas esLlmaLlvas dos valores reals, sendo afecLadas por erros. A LlLulo de
exemplo, os aparelhos Lm resolues flnlLas, sendo frequenLe obLer varlaes em medldas repeLldas
em condles aparenLemenLe lguals.
Lxat|do e prec|so
nenhuma medlda e exata -
quando uma quanLldade e
medlda, o )&$-).'
depende do slsLema de
medlda, do processo de
medlo, das capacldades
do operador, do amblenLe,
'$ -/'$0/. or lsso, ao
reporLar um valor de uma
quanLldade flslca, deve-se
quanLlflcar a qualldade do
resulLado.
A exat|do consLlLul, pols, o
grau de conformldade com o valor medldo ou calculado em relao ao valor real, sendo LanLo malor
quanLo menor o erro. or seu Lurno, a prec|so consLlLul o grau de varlao de medldas ou clculos
semelhanLes, podendo ser esLlmada pelo desvlo padro.
A repeLlbllldade corresponde a varlao que ocorre quando se apllca o mesmo meLodo ao mesmo
maLerlal nas mesmas condles (lnsLrumenLo, operador) duranLe um curLo espao de Lempo. or seu
Lurno, a reproduLlbllldade consLlLul a varlao que ocorre quando se usa o mesmo procedlmenLo com
maLerlal ldnLlco mas em condles dlferenLes ao longo de perlodos de Lempo prolongados.

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Lrros
Cs erros s|stemt|cos aLuam no mesmo
senLldo e podem ser ellmlnados medlanLe uma
seleo adequada de condles experlmenLals.
Asslm, o erro slsLemLlco e o componenLe do
erro que permanece de forma consLanLe e
varla de forma prevlslvel. um vles (1%/#) e a
dlferena enLre o valor medldo e o valor real.
or seu Lurno, os erros a|eatr|os Lm orlgem
em causas lndeLermlnadas e aLuam em ambos
os senLldos de forma no prevlslvel
(componenLe do erro que varla de forma
lmprevlslvel). LsLes erros podem ser aLenuados
mas no compleLamenLe ellmlnados.
Cs erros de arredondamento resulLam da
represenLao de numeros reals com um
numero flnlLo de algarlsmos slgnlflcaLlvos. Cs
algarlsmos slgnlflcaLlvos lncluem aqueles que
sabemos esLarem correLos, bem como o
prlmelro algarlsmo duvldoso esLes
algarlsmos do-nos uma ldela do grau de
preclso da medlda. odem ser conslderados
algarlsmos slgnlflcaLlvos Lodos aqueles enLre 1
e 9 (lncluslve), o zero e conslderado quando se
enconLra enLre dols numeros dlferenLes de
zero ou caso esLe[a a dlrelLa da vlrgula e
se[a(m) o(s) numero(s) Lermlnal(ls).
ara compreender o concelLo de erro, e necessrlo compreender uma serle de ouLros concelLos
adlclonals, Lals como:
! ku|do lluLuaes aleaLrlas exlsLenLes em Lodo o Llpo de slnal e que so lnerenLes ao meLodo
e lnsLrumenLo uLlllzado. ode ser perldlco ou no perldlco.
! L|m|te de deteo 8esulLado mlnlmo que,
denLro de uma deLermlnada probabllldade,
pode ser dlsLlnguldo de um ensalo em
branco. ueflne o ponLo a parLlr do qual e
posslvel efeLuar uma anllse.
! 8ranco LelLura ou resulLado da medlda de
maLrlz, reagenLes ou uma vles resldual num
lnsLrumenLo ou processo que conLrlbul para
o slnal obLldo. Medlda em que a quanLldade
que lmporLa suposLamenLe no exlsLe.

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Caracter|st|cas da amostra e do |nstrumento de med|da
A amostra deve ser represenLaLlva e homogenea relaLlvamenLe a populao. ode ser aleaLrla ou no
aleaLrla. or seu Lurno, as caracLerlsLlcas do lnsLrumenLo de medlda lncluem as segulnLes:
Senslbllldade
8esoluo
LsLabllldade
20%*$
SeleLlvldade
1empo de resposLa
LxaLldo
8eplLabllldade
8eproduLabllldade
lnLervalo de medlo
LlmlLe de deLeo

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gua, ||p|dos e s|stema de fases
Lm geral, os llpldeos so lnsoluvels em gua, pols conLm uma predomlnncla de agrupamentos no
po|ares (hldrocarboneLos). no enLanLo, os cldos gordos, fosfollpldeos, esflngollpldeos, sals blllares e,
em menor grau, o colesLerol conLm agrupamentos po|ares. orLanLo, uma parLe desLas moleculas e
h|drofb|ca (lnsoluvel em gua), e uma parLe e h|drof|||ca (soluvel em gua) - esLas moleculas so, pols,
conslderadas anf|pt|cas. Ao serem colocadas em lnLerfaces gua-leo, a parLe polar desLas moleculas
flca volLada para a fase aquosa, enquanLo a parLe apolar flca volLada para a fase o|eosa. uma camada
dupla desses llpldeos anflpLlcos consLlLul a esLruLura bslca das membranas blolglcas.
8|camadas L|p|d|cas
A b|camada fosfo||p|d|ca e a esLruLura bslca das membranas blolglcas e uma barrelra asslmeLrlca.
ara alem das membranas celulares e organelares, as blcamadas llpldlcas enconLram-se alnda na
mucosa gsLrlca e surfacLanLe pulmonar.
As membranas blolglcas no so esLLlcas, mas fluldas, sendo que os fosfollpldeos descrevem vrlos
movlmenLos, nomeadamenLe:
ulfuso laLeral
8oLao
llexo
MovlmenLos lllp-llop

A esLruLura da blcamada llpldlca manLem-se por lnLeraes hldrofblcas. LsLas llgaes so mulLo mals
fracas que as llgaes covalenLes e, por lsso, os fosfollpldos consLlLulnLes da membrana so alLamenLe
mvels (ou se[a, fluldos).
C grau de fluldez e vlscosldade das membranas e conLrolado por vrlos facLores, nomeadamenLe:
1amanho das cadelas carbonadas dos cldos gordos (normalmenLe de 14 a 24 Lomos de
carbono)
Crau de lnsaLurao dos cldos gordos:
! Maior fluidez cidos Gordos com ligaes duplas (insaturadas). As ligaes duplas
nas cadelas nas cadelas dos cldos gordos dlflculLam o empacoLamenLo e,
consequenLemenLe, Lornam a membrana mals flulda
! Menor fluidez cidos Gordos saturados
1emperaLura - A membrana pode Ler Lrs fases resulLanLes de um aumenLo progresslvo da
LemperaLura (sendo que a LemperaLura de Lranslo da fase depende da compos|o da
membrana):
! Iase Cr|sta||na,
! Iase Ge|,
! Iase I|u|da.
Co|estero| uesempenha um papel amblvalenLe:
! ulmlnul o empacoLamenLo dos fosfollpldos,
! ulmlnul o movlmenLo laLeral dos fosfollpldos.

noLe-se que alLeraes da fluldez das membranas causam posslvels alLeraes no movlmenLo e
orlenLao das proLelnas que fluLuam na maLrlz llpldlca, provocando alLeraes da sua funclonalldade.

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Noes bs|cas de reo|og|a
A reo|og|a a clncla que esLuda o escoamento da maLerla e as suas deformaes. ara medlr o
escoamenLo deLermlna-se a v|scos|dade. no que dlz respelLo a vlscosldade, esLa deflne-se como uma
medlda reolglca de reslsLncla de um llquldo ao flulr ou ao ser deformado, sendo que quanLo malor
esLa proprledade, mals dlflcll e o movlmenLo das parLlculas. Asslm, alLeraes na vlscosldade dos fluldos
blolglcos condlclonam lmporLanLes consequnclas:
A vlscosldade sangulnea parece esLar relaclonada com a morbllldade cardlovascular:
! Alguns facLores de rlsco das doenas cardlovasculares relaclonam-se com o aumenLo
da vlscosldade sangulnea,
! A vlscosldade sangulnea esL relaclonada com a reslsLncla clrculaLrla perlferlca, que
lnLerfere com o funclonamenLo cardlaco.
A vlscosldade do muco cervlcal alLera-se de acordo com o clclo mensLrual, duranLe a gravldez, e
por ao de conLraceLlvos.
Cs fllamenLos do clLoesqueleLo demonsLram caraLerlsLlcas reolglcas prprlas:
! C cldo hlalurnlco, sulfaLo de condrolLlna, sulfaLo de dermaLano e sulfaLo de
queraLano so responsvels pela vlscosldade do Lecldo con[unLlvo e lnLerferem com a
capacldade dos mlcroorganlsmos causarem lnfees.

noLe-se que a vlscosldade relaLlva pode ser medlda fazendo-se escoar um deLermlnado volume de
llquldo aLraves de um Lubo conLendo um capllar numa ponLa - como o volume escoado e o mesmo, o
Lempo de escoamenLo, de um llquldo (b) relaLlvamenLe ao de ouLro (a) permlLlr calcular a v|scos|dade
re|at|va (), conhecendo-se a vlscosldade relaLlva do prlmelro ().

(a) =
()
()
(b)
Lmu|ses e detergentes
As emu|ses so parLlculas grandes, normalmenLe formadas pela emulslflcao de agenLes como
llpldeos anflpLlcos, os quals formam uma camada superflclal que separa a massa prlnclpal do maLerlal
apo|ar da fase aquosa.
As emulses so esLablllzadas pela vlscosldade e por deLergenLes. no que concerne aos deLergenLes
(Lambem deslgnados emulgenLes, LensloaLlvos, anflflllcos ou surfacLanLes), esLes consLlLuem moleculas
com caraLerlsLlcas anflpLlcas. Sals blllares, colesLerol, fosfollpldeos, e sabes (sals de cldos gordos)
consLlLuem exemplos de deLergenLes.
ue referlr que a concentrao m|ce|ar cr|t|ca deflne-se como a concenLrao de LensloaLlvo a parLlr da
qual os llpldeos se agregam, formando m|ce|as. Corresponde a mudana de proprledades.
Lqu|||br|o C|eo]gua
ara medlr a aflnldade de um composLo para a gua ou para o leo (mulLas vezes a gua e ocLanol ou
gua com llpossomas), avalla-se o equlllbrlo leo/gua, calculando-se a consLanLe de parLllha. Asslm, a
constante de part||ha permlLe avallar o grau de hldrofllla e llpofllla.
CuanLo malor o valor, malor aflnldade para subsLnclas apolares (||pof|||a).
CuanLo menor, malor a aflnldade para subsLnclas polares (h|drof|||a).

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Compostos |norgn|cos do organ|smo
Sd|o
rlnclpal caLlo do melo exLracelular, sendo manLldo em concenLraes esLrelLamenLe
reguladas.
lmporLanLe na conduo de lmpulsos nervosos, no LransporLe de nuLrlenLes e na regulao da
volemla.
otss|o
rlnclpal caLlo do melo lnLracelular, sendo manLldo em concenLraes esLrlLamenLe reguladas.
AlLeraes da sua concenLrao exLracelular provocam arr|tm|as.
A deflclncla de lnsullna pode provocar hlpercallemla, enquanLo a hlpocallemla pode provocar
hlpolnsullnemla.
C|c|o
rlnclpal elemenLo da fase mlneral dos ossos (hldroxlapaLlLe) e denLes.
A sua concenLrao e regulada por ao de vrlas hormonas, Lals como a paraLormona (1P), a
calclLonlna e a vlLamlna u.
arLlclpa em processos flslolglcos, Lals como a conLrao muscular, a Lransmlsso de slnals
celulares, a dlvlso celular e a coagulao. ara alem dlsso, esLe lo e cofaLor de algumas
enzlmas.
A hlpocalcemla reduz a secreo de lnsullna, compromeLendo a uLlllzao de gllcose.
Isforo
ConsLlLul parLe lnLegranLe de vrlos blomoleculas, Lals como o A1 (e Lodas as moleculas
fosforlladas), cldos nuclelcos e fosfollpldeos.
lorma um slsLema amorLecedor de pP mulLo lmporLanLe (Lampo fosfaLo).
!unLamenLe com o clclo, lnLegra a parLe mlneral dos ossos. A sua regulao faz-se, pols, a par
com a de clclo, esLando dependenLe da aco da paraLormona e vlLamlna u.
A hlperfosfaLemla consLlLul um faLor de rlsco para doenas cardlovasculares.
Magns|o
ConsLlLul o 4 caLlo mals abundanLe no organlsmo e o 2 no melo lnLracelular.
AcLua como cofaLor de algumas enzlmas, sendo alnda necessrlo para o meLabollsmo sseo.
C magneslo e o clclo desempenham aes Lecldulares con[unLas, prlnclpalmenLe, na
contrao muscu|ar e conduo nervosa. nesLe ulLlmo caso, o magneslo e essenclal na
esLablllzao dos axnlos neuronals, acLuando, por exemplo, num senLldo de bloquear a
acLlvao dos recepLores nMuA.
nlvels balxos de magneslo esLo assoclados a um aumenLo da prevalncla de slndrome
meLabllca.

glna 9 de 6S

Ierro
LxlsLe fundamenLalmenLe em duas formas, nomeadamenLe, lo ferroso (le
2+
) e lo ferrlco
(le
3+
).
no organlsmo, o ferro enconLra-se malorlLarlamenLe assoclado a proLelnas (meLaloproLelnas
conLendo ferro) sob a forma de lo ferroso. nessas proLelnas, o ferro enconLra-se
frequenLemenLe lnLegrado em grupos heme (Lal como se verlflca na hemogloblna). Lm Lermos
slmpllsLas, e posslvel referlr que o ferro se enconLra dlsLrlbuldo por Lrs comparLlmenLos,
nomeadamenLe:
! ComparLlmenLo funclonal a malorla do ferro do organlsmo enconLra-se no
comparLlmenLo funclonal, denLro desLe comparLlmenLo, a malorla do ferro enconLra-
se assoclada a hemogloblna (a qual e essenclal para o LransporLe de oxlgenlo), de Lal
modo que a malorla do ferro no organlsmo e usada na produo de erlLrclLos. C
comparLlmenLo funclonal de ferro lnclul alnda a sua llgao a mlogloblna, uma
proLelna envolvlda no armazenamenLo muscular de oxlgenlo,
! uepslLos de ferro na sua malorla, o ferro em depslLos enconLra-se complexado
com a ferrlLlna,
! ComparLlmenLo de LransporLe no sangue, a malorla do ferro e LransporLado llgado a
Lransferrlna.
ara alem de ser consLlLulnLe de vrlas proLelnas, o ferro acLua como co-facLor em vrlas
reaces enzlmLlcas, sendo essenclal em enzlmas da fosforllao oxldaLlva, enzlmas do
slsLema lmunlLrlo e enzlmas da famllla do clLocromo 430.
As mulheres apresenLam menor concenLrao de ferro por comparao com os homens,
mesmo aps a[usLe para o peso Lal deve-se parclalmenLe ao facLo de as mulheres
apresenLarem perdas mensLruals de ferro, por conLraponLo aos homens saudvels.
A sua deflclncla leva a anem|a ferropn|ca, enquanLo o seu excesso e caracLerlsLlco das
hemocromotoses, condles geneLlcas resulLanLes de muLaes em moleculas envolvldas no
LransporLe e meLabollsmo do ferro.
verlflca-se uma forLe correlao enLre a dlmlnulo das concenLraes plasmLlcas de ferro e o
aumenLo da adlposldade.
Cobre
CofaLor de enzlmas.
Lnvolvldo em processos de oxldao-reduo, parLlcularmenLe na fosforllao oxldaLlva.
Acumula na doena de Wllson.
um esLudo recenLe revela que a acumulao de cobre nos vasos sangulneos conLrlbul para a
paLogenese da doena de Alzhelmer.
2|nco
CofaLor e parLe lnLegranLe de domlnlos de proLelnas ('343 5%"- *%"4'0#)
Lssenclal a slnLese de proLelnas (nomeadamenLe de colagenlo) e de cldos nuclelcos
arLlclpa em vlas anLl-lnflamaLrlas
As clulas das ilhotas de Langerhans possuem grnulos irregulares com um centro formado
de crlsLals lrregulares de lnsullna complexados com zlnco.
A deflclncla de zlnco pode esLar lmpllcada na |nto|ernc|a da g||cose, d|abetes, |nsu||no-
res|stnc|a, aterosc|erose e doena coronr|a.

glna 10 de 6S

Mangans
LsL envolvldo no meLabollsmo energeLlco, proLelco e llpldlco.
Assocla-se a acLlvldade de dlversas enzlmas relaclonadas com a defesa lmunolglca e com o
#$0'## oxldaLlvo, Lals como a dlsmuLase do superxldo.
Se|n|o
lncorporado em proLelnas sob a forma de se|enoc|ste|na.
lmporLanLe no funclonamenLo de vrlas enzlmas, nomeadamenLe da classe das peroxldases,
Lals como a peroxldase do gluLaLlo, que esL envolvlda em processos de ellmlnao de
oxldanLes.
Cs seus nlvels plasmLlcos co-relaclonam-se lnversamenLe com o rlsco de hlperLenso arLerlal.
Coba|to
LlemenLo presenLe na vlLamlna 812 (Lambem deslgnada por clanocobalamlna), cu[a deflclncla
orlglna anemla megaloblsLlca. So paclenLes de rlsco para carncla de vlLamlna 812 os (l)
6'4/"#, (ll) gasLrecLomlzados, (lll) paclenLes com anemla pernlclosa (condlo auLo-lmune
caracLerlzada por desLrulo das celulas parleLals), e (lv) paclenLes com llelLe Lermlnal.
Iodo
ComponenLe das hormonas Llreoldelas
ueflces de lodo resulLam em bclo carenclal, consLlLulndo alnda um facLor de rlsco para o
desenvolvlmenLo de carclnoma follcular da Llrelde.
C excesso de lodo (por exemplo, assoclado a lnLoxlcao por amlodarona) pode lnduzlr
hlpoLlreoldlsmo.
S|||c|o
AumenLa a prollferao osLeoblsLlca e, por lsso, poder evenLualmenLe a[udar a prevenlr a
osLeoporose.
LsLlmula a slnLese de colagenlo Llpo l.
A[uda a prevenlr o enfarLe do mlocrdlo.
A excreo de slllclo parece esLar relaclonada com a excreo de alumlnlo.
A Slllcose consLlLul uma doena ocupaclonal que aLlnge sobreLudo mlnelros e pedrelros,
cursando com deposlo de poelras de slllclo nos pulmes.
A|um|n|o
1xlco, prlnclpalmenLe na gravldez (para o feLo) e nos lnsuflclenLes renals.
oder esLar lmpllcado na doena de Alzhelmer.
Chumbo
A lnLoxlcao por chumbo leva a fad|ga, anem|a, dor abdom|na|, |nsuf|c|nc|a rena|,
encefa|opat|a e morte.
Lm doses menores, esL assoclado a problemas de aprendlzagem, reduo de Cl e vlolncla.

glna 11 de 6S

Mercr|o
uuas formas prlnclpals:
! Inorgn|ca (o vapor e rapldamenLe absorvldo)
! Crgn|ca
As lnLoxlcaes por mercurlo caraLerlzam-se por s|ntomas neuro|g|cos.
8loacumula na naLureza
Cdm|o
lnLerfere com a funo do cobre e do zlnco, causa danos no rlm, pulmes e, posslvelmenLe,
ossos.
8elaclonado com o aumenLo do rlsco de doenas cardlovasculares e neoplslcas, dlabeLes e
osLeoporose.
Lqu|va|entes
um equlvalenLe grama e a frao de uma mole que corresponde a uma unldade deflnlda da subsLncla
que parLlclpa numa reao qulmlca. C peso equlvalenLe e essa mesma frao de peso molecular.
Norma||dade = Mo|ar|dade x n de mo|es de part|cu|as postas em [ogo
As parLlculas podem ser eleLres caso se LraLe de uma redox ou cldo-base.
=
(1)

glna 12 de 6S

Componentes qu|m|cos dos seres v|vos
Cs elemenLos qulmlcos mals abundanLes no homem e resLanLes seres vlvos so o hldrogenlo, o
oxlgenlo, o carbono e o azoLo. LsLes elemenLos so os mals abundanLes, devldo a sua reaLlvldade,
capacldade de parLllhar eleLres e llgaes covalenLes. 1ambem se vo organlzar de dlferenLes formas,
sendo que, conforme essa organlzao, consLlLuem os consLlLulnLes dos gllcldeos, cldos nuclelcos,
proLelnas e llpldeos. noLe-se que 70 de uma celula bacLerlana e consLlLulda por gua, correspondendo
os resLanLes 30 a composLos qulmlcos (malorlLarlamenLe proLelnas).
Cs seres vlvos so, enLo, dlsLlnguldos de acordo com:
Llevada complexldade qulmlca/organlzao mlcroscplca,
SlsLemas de exLrao, Lransformao e uLlllzao de energla do amblenLe,
lunes especlallzadas dos seus slsLemas e regulao da lnLerao enLre eles,
Mecanlsmos de deLeo e resposLa a alLeraes do amblenLe,
Capacldade de reproduo e evoluo.
gua
A gua, para alem de ser o prlnclpal componenLe dos seres vlvos,
caracLerlza-se por ser uma molecular neuLra e polar ou se[a, aLral
moleculas hldrofllldas (polares) e repele moleculas hldrofblcas (apolares).
Cs seus eleLres dlsLrlbuem-se asslmeLrlcamenLe dlpolo. As moleculas de
gua esLabelecem llgaes enLre sl e com ouLras moleculas aLraves de
ponLes de hldrogenlo. ara alem dlsso, devldo a sua naLureza (dlpolo e
consLanLe dleleLrlca), as moleculas de gua rodelam les e moleculas
polares, dlssolvendo-as.
A gua revesLe-se da malor lmporLncla, uma vez que a malorla das reaes lnLracelulares ocorre em
melo aquoso.
Carbono
C carbono ocupa um lugar cenLral na consLlLulo dos seres vlvos, apresenLando capacldade de formar
quaLro llgaes, as quals podem ocorrer enLre ouLros carbonos, orlglnando cadelas llneares, cadelas
ramlflcadas e anels.
glna 13 de 6S

G||c|deos
Cs g||c|deos so moleculas
consLlLuldas por carbono,
hldrogenlo e oxlgenlo
(CnP2nCn), possulndo grupos
aldeldo, ceLona e hldroxllo. As
unldades bslcas dos gllcldeos
so os monossacarldeos, cu[a
llgao forma pollssacarldeos.
Cs gllcldeos acLuam como fonLe
e reserva de energla,
desempenhando alnda um papel
esLruLural.
L|p|deos
Cs ||p|deos so consLlLuldos essenclalmenLe por carbono, hldrogenlo e oxlgenlo (mas Lambem por
azoLo, fsforo e enxofre). LsLas moleculas organlzam-se em cldos gordos, os quals, por sua vez, podem
se agrupar Lrs a Lrs (e [unLar-se a uma molecula de gllcerol), formando Lrlgllcerldeos.
Cs llpldeos, sobreLudo os fosfollpldeos consLlLuem lmporLanLes consLlLulnLes da esLruLura membranar.
Cs gllcollpldeos, conLendo um grupo polar e caudas hldrofblcas, Lambem fazem parLe das membranas
clLoplasmLlcas, sendo lmporLanLes no reconheclmenLo celular como recepLores. or flm, os esLeroldes
(colesLerol, cldos blllares, hormonas esLeroldes e vlLamlna u) desempenham uma serle de lmporLanLes
funes hormonals e meLabllcas. noLe-se alnda que os llpldeos consLlLuem uma lmporLanLe fonLe e
reserva de energla.
rot|deos
Cs prote|deos so consLlLuldos por carbono, hldrogenlo, oxlgenlo, azoLo, fsforo e enxofre. A sua
unldade e o cldo amlnado. Cs proLldeos desempenham funes mulLo varladas no organlsmo
(esLruLural, enzlmLlca, lmune, hormonal e de slnallzao, e consLlLulo do osso e do musculo).

glna 14 de 6S

c|dos nuc|e|cos
Cs c|dos nuc|e|cos so consLlLuldos por carbono, hldrogenlo, oxlgenlo, azoLo e fsforo. A sua unldade e
o nuc|eot|deo. ConsLlLuem funes dos cldos nuclelcos:
lormao de cldos nuclelcos (unA/ 8nA)
1ransporLe de energla qulmlca (A1, C1)
arLlclpao em co-enzlmas
arLlclpao em processos de slnallzao celular

glna 1S de 6S

Lstrutura e pape| b|o|g|co dos g||c|deos
Lstrutura b|oqu|m|ca dos g||c|deos
CulmlcamenLe, os gllcldeos so derlvados aldeldlcos ou ceLnlcos de polllcools, ou se[a, polllcools,
onde um grupo hldroxllo fol oxldado, perdendo dols Lomos de hldrogenlo. uessa forma, podemo-nos
referlr as oses, ou monossacar|deos, unldades consLlLulnLes dos gllcldeos, como sendo aldoses (quando
a oxldao ocorre ao nlvel do grupo hldroxllo do prlmelro carbono) ou ceLoses (quando a oxldao
ocorre ao nlvel do grupo hldroxllo do segundo carbono), com vrlos grupos hldroxllo e pelo menos Lrs
Lomos de carbono (com apenas dols Lomos de carbono no consegulmos Ler vrlos grupos hldroxllos
llvres, apenas, quando mulLo, um).
C grupo dos gllcldeos subdlvlde-se em oses e
os|deos. As oses, ou monossacarldeos so as
unldades bslcas dos gllcldeos. So exemplos de
oses a g||cose, a ga|actose, a manose e a
frutose. Cs osldeos conslsLem em oses llgadas a
ouLra colsa, podendo ser ouLras oses
(ho|os|deos) ou algo que no se[a uma ose
(heteros|deos). uenLro dos holosldeos Lemos
homopo||(o||go)sacar|deos, caso as unldades
que se llgam se[am Lodas lguals ou
heteropo||(o||go)sacar|deos, se no forem Lodas lguals (ambos podem ou no ser ramlflcados).
8elaLlvamenLe aos osldeos, podemos classlflc-los como d|ssacar|deos, de que so exemplo a sacarose,
a ma|tose e a |actose, o||gossacar|deos, se Llverem enLre 3 e 10 monossacarldeos, sendo que a malor
parLe no e desdobrada pelas enzlmas humanas e po||ssacar|deos, se deles flzerem parLe mals do que
10 monossacarldeos. C am|do e o g||cogn|o so pollssacarldeos.
As oses enconLram-se frequenLemenLe sob a forma clcllca, mals do que sob a forma llnear. ara que
esLas moleculas passem a forma clcllca, d-se uma llgao semlaceLal (no caso de esLarmos peranLe uma
aldose) ou ceLal (no caso de esLarmos peranLe uma ceLose), em que o grupo carbonllo reage com o
grupo hldroxllo. lorma-se um carbono anomerlco, vlsLo que um carbono que no era asslmeLrlco
passou a s-lo. uuas oses reagem, formando uma ||gao aceta| e llberLando uma molecula de gua.
Lssa llgao aceLal esLabelece-se enLre o semlaceLal e um lcool. 8eferlmos que um deLermlnado
composLo Lem poder redutor, sempre que exlsLe um carbono anomerlco llvre.
C|ass|f|cao dos g||c|deos em termos qu|m|cos e func|ona|s
A forma de classlflcao das oses [ fol referlda. ConLudo, podemos alnda classlflcar as oses em Lermos
qulmlcos e funclonals, ou se[a de acordo com o numero de carbonos e com a presena de um
aldeldo/ceLona respecLlvamenLe. uessa forma, as esLruLuras podem ser classlflcadas em Lrloses,
LeLroses, penLoses, hexoses e hepLoses, de acordo com o numero de carbonos presenLes e aldoses ou
ceLoses, caso apresenLe um grupo aldeldo ou ceLnlco. As duas classlflcaes podem ser apllcadas
slmulLaneamenLe a um monossacarldeo, por exemplo, a gllcose e uma aldo-hexose.
LxlsLem alnda os acares-|coo|s (que ocorrem naLuralmenLe nos allmenLos) em que o grupo carbonllo
fol reduzldo, Lendo sldo orlglnado um grupo lcool. uerlvados dos gllcldeos lncluem os cldos urnlcos,
cldos aldnlcos e aldrlcos.
glna 16 de 6S

Isomer|a ver|f|cada nos g||c|deos
LxlsLem vrlos Llpos de lsomerla verlflcada nos gllcldeos. A gllcose consegue formar 16 lsmeros! As
formas mals comuns de lsomerla verlflcadas nos gllcldeos so as que se seguem:
Isomer|a D e L
As oses normalmenLe apresenLam-se sob a forma u, embora
Lambem ha[a algumas que esLe[am naLuralmenLe na forma L
(nomeadamenLe a arablnose, a fucose e a xllulose). LsLa |somer|a
qu|ra| (porque as moleculas u so as lmagens espelho das
lmagens L) e fcll de deLecLar pela orlenLao do grupo hldroxllo
do ulLlmo carbono asslmeLrlco. Cuando esLe esL orlenLado para
a dlrelLa, Lemos uma molecula do Llpo u, por ouLro lado,
quando esL orlenLado para a esquerda, Lemos uma molecula do
Llpo L. 1odos os lsmeros que no so qulrals so
d|astro|smeros (o que lnclul os eplmeros). LxlsLem esLruLuras u
(-), u (+), L (-) e L(+), prendendo-se o + e o com a orlenLao
que os carbonos asslmeLrlcos Lomam quando llumlnados com luz polarlzada, represenLando o + a
roLao para a dlrelLa (dlzem-se destrg|ros) e o para a esquerda (dlzem-se |evg|ros). A fruLose exlsLe
sobreLudo sob a forma de u(-) e por lsso Lambem e deslgnada por levulose, enquanLo a gllcose ocorre
sobreLudo sob a forma de u(+), sendo por lsso deslgnada por dexLrose.
|ranose e furanose
Cuando os monossacarldeos assumem esLruLuras clcllcas, podem se dlspor em esLruLuras penLagonals
como furano, ou hexagonals como o p|rano. A gllcose ocorre em 99 sob a forma de plranose.
Anmeros e
C carbono anomerlco e aquele em que, aps se Ler
lnsLlLuldo uma llgao semlaceLal ou ceLal passou a ser
asslmeLrlco, no o sendo anLerlormenLe. A classlflcao
de um monossacarldeo como sendo um anmero ou
prende-se com a orlenLao do grupo CP no carbono
anomerlco. nos monossacarldeos do grupo u, Lemos
esLruLuras , quando o grupo CP esL para balxo e
quando esL para clma. nos monossacarldeos do grupo -
L e ao conLrrlo.
glna 17 de 6S

Isomer|a a|dose-cetose
lsmeros em que uma das moleculas e uma aldose e a ouLra uma ceLose. or exemplo, a fruLose e a
gllcose Lm a mesma frmula molecular, mas dlferem na frmula esLruLural, vlsLo a fruLose ser uma
ceLose e a gllcose ser uma aldose.
Lp|meros
Lplmeros so lsmeros, onde a orlenLao dos grupos CP e P num
dos carbonos 2,3 ou 4 (no caso das hexoses) dlfere, sendo lnversa. or
exemplo, a gllcose e um eplmero da manose, devldo a dlferenas no
carbono 2.
r|nc|pa|s formas de g||c|deos nos a||mentos
C am|do e um pollssacarldeo, mals proprlamenLe um homopollssacarldeo ramlflcado, consLlLulndo por
reslduos de gllcose, e que se enconLra frequenLemenLe em cereals, baLaLas, legumlnosas e ouLros
vegeLals, vlsLo ser um lmporLanLe pollmero vegeLal de reserva. C amldo Lem dols consLlLulnLes prlnclpals
a am||ose, com uma esLruLura no-ramlflcanLe, consLlLulda por llgaes 1->4 e a am||opect|na,
conslsLlndo em cadelas ramlflcanLes, por llgaes 1->6.
A frutose esL presenLe em elevadas concenLraes na fruLa, bem como em alguns vegeLals. ConLudo,
esLe monossacarldeo e lgualmenLe a base de mulLos adoanLes, esLando presenLe em refrlgeranLes e
ouLros doces.
A sacarose (dlssacarldeo consLlLuldo por reslduos de gllcose e fruLose, llgados por uma llgao
gllcosldlca 1->2 e sem poder reduLor), dado ser a molecula presenLe no vulgar acar de mesa est
presente em muitos doces, sobremesas, refrigerantes sendo tambm usada como conservante.
naLuralmenLe, a sacarose Lambem se enconLra no sorgo, nalgumas fruLas e vegeLals.
A |actose, por seu Lurno, e um dlssacarldeo formado por reslduos de gllcose e galacLose (llgadas llgao
gllcosldlca 1->4, sendo do Llpo osldeo-ose), presenLe no lelLe e seus derlvados.
glna 18 de 6S

D|gesto dos g||c|deos

A dlgesLo de gllcldeos e felLa por hldrllse (A8 + P
2
O A + B), permlLlndo llberLar ollgossacarldeos e
posLerlormenLe dlssacarldeos e monossacarldeos, aLraves da quebra das llgaes gllcosldlcas, que
ocorre medlada por enzlmas. C |nd|ce de g||cem|a e o aumenLo dos nlvels de gllcose no sangue aps
uma dose de LesLe de gllcldeos. A gllcose e a galacLose Lm um lndlce de 1, algo que aconLece Lambem
com a lacLose, malLose, lsomalLose e Lrealose, vlsLo que por hldrllse esLes ollgossacarldeos orlglnam os
monossacarldeos aclma referldos. A fruLose, a sacarose e os aucares-alcols dado serem absorvldos
mals lenLamenLe, Lm um lndlce gllcemlco mals balxo. C lndlce gllcemlco do amldo varla enLre 0 e 1,
algo que resulLa dos nlvels varlvels da hldrllse desLe pollssacarldeo. Cs allmenLos com menor lndlce
gllcemlco so conslderados mals beneflcos para a saude, vlsLo provocarem menores fluLuaes nos
nlvels de secreo de lnsullna. C amldo reslsLenLe e os pollssacarldeos sem amldos fornecem subsLraLos
para a fermenLao bacLerlana no lnLesLlno grosso e o buLlraLo resulLanLe e ouLras pequenas cadelas de
cldos gordos fornecem energla para os enLerclLos lnLesLlnals.
A hldrllse do amldo e caLallsada pelas am||ases sallvar e pancreLlcas na cavldade oral e no lnLesLlno
delgado, que acLuam aleaLorlamenLe nas llgaes gllcosldlcas (1->4) esLabelecldas (sendo necessrlas
ouLras enzlmas para quebrar as llgaes 1->6), resulLando como produLos flnals, ma|totr|ose (Lrlmero
com 3 resduos glicose ligados por ligaes glicosdicas -1,4), ma|tose, gllcose e dextr|na ||m|te da
am||opect|na (ollgossacarldeo formado por vrlos reslduos gllcose sendo que dols deles esLo llgados
por uma ligao ->1,6).
na cavldade oral, a am||ase sa||var Lransforma o amldo em malLose e dexLrlna, aps sucesslvas quebras
de llgao. LsLa enzlma funclona a um pP pLlmo slLuado enLre os 3.6 e os 6.9, sendo que o balxo pP
exlsLenLe no esLmago lnacLlva a sua acLlvldade.
no duodeno, os sucos pancreLlcos llberLados so rlcos em am||ase pancret|ca, que caLallsam a
hldrllse aleaLrla das llgaes gllcosldlcas (1->4) da amlllna, resulLando em malLose, malLoLrlose e
dexLrlna. no lumen do lnLesLlno, Lambem o pP pLlmo para as enzlmas e prxlmo de 7. no lnLesLlno
enconLramos duas enzlmas - ma|tase (->1,4 gllcosldase) e a |soma|tase (->1,6 gllcosldase), que
caLallsam a hldrllse da malLose, malLoLrlose e dexLrlna llmlLe. ! no lumen lnLesLlnal, mals
proprlamenLe, prxlmo dos enLerclLos, enconLramos vrlas enzlmas, nomeadamenLe a |actase (-1,4
galacLosldase, sendo que deflclncla nesLa enzlma leva a ocorrncla de |nto|ernc|a |actose, algo
relaLlvamenLe comum na populao porLuguesa) e a sacarase, que caLallsam a hldrllse da lacLose e da
sacarose. LsLas ulLlmas enzlmas so deslgnadas ecLo-enzlmas, por acLuarem fora dos enLerclLos, apesar
de serem enzlmas da sua membrana clLoplasmLlca.
Alguns gllcldeos complexos que so componenLes de planLas no so dlgerldos pelas enzlmas presenLes
na sallva, no esLmago ou no lnLesLlno delgado e no so absorvldos. assam para o lnLesLlno grosso
(clon) onde podem ser parclalmenLe dlgerldos pelas bacLerlas do lnLesLlno e so lmporLanLes
componenLes das fezes. LsLes gllcldeos so colecLlvamenLe deslgnados por flbras.
Absoro de g||c|deos ao n|ve| dos enterc|tos
Cs enterc|tos so as celulas que ao nlvel do lnLesLlno delgado reallzam a absoro dos
monossacarldeos. Como esLes so subsLnclas mulLo hldroflllcas e de dlmenses consldervels, no
aLravessam a membrana celular por LransporLe slmples, sendo necessrlo o recurso a LransporLadores,
nesLe caso por LransporLe acLlvo. A gllcose e a galacLose so absorvldas graas a um processo de
LransporLe acLlvo secundrlo, dependenLe de sdlo, sendo LransporLadas pela mesma proLelna
LransporLadora presenLe no plo basal dos enLerclLos (SGL1 1 - 7),%&. ,'8'",'"$ 9:&-)#' ;0/"#8)0$'0
glna 19 de 6S

<) e compeLlndo pela absoro
lnLesLlnal. Asslm, a gllcose e a
galacLose podem enLrar para o
melo lnLracelular conLra o
gradlenLe de concenLrao pelo
LransporLador SCL11 (esLe e um
&+,-.$/#$, porque s funclona se
LransporLar duas subsLnclas
dlferenLes na mesma dlreco
mas o LransporLe s e posslvel se,
pelo menos, o LransporLe de uma
das subsLnclas ocorrer a favor de
gradlenLe, o que nesLe caso
aconLece com o sdlo).
LsLe #%.8)0$'0 esL enLo
dependenLe da presena de um
gradlenLe de sdlo, algo que e gerado pela bomba de sdlo e poLsslo, que expulsa sdlo para o melo
exLracelular, permlLlndo que o sdlo depols enLre para o melo lnLracelular a favor do gradlenLe. Como o
LransporLe de gllcose s ocorre a conLa da bomba de sdlo e poLsslo, dlz-se que esLamos na presena
de transporte secundr|o. or seu Lurno, o LransporLe ocorrldo ao nlvel da bomba de sdlo e poLsslo e
transporte pr|mr|o. 8elaLlvamenLe a fruLose, esLe monossacarldeo enLra a favor do gradlenLe de
concenLrao por dlfuso faclllLada, aLraves de uma proLelna, o GLU1S.
LsLes monossacarldeos (a gllcose, a galacLose e a fruLose) vo ser expulsos do enLerclLo, do seu plo
basal, mas desLa vez para os capllares sangulneos, aLraves de um processo de dlfuso faclllLada operada
pelo LransporLador GLU12 (os CLu1s so LransporLadores %(+-.$/#$&).
A Lranscrlo do gene que codlflca o SCL11 aumenLa quando a concenLrao de gllcose e elevada no
lumen lnLesLlnal. Cu se[a, a slnLese de SCL11 aumenLa (lenLamenLe) aps uma refelo que conLenha
gllcose ou gllcldeos que a possam gerar, mas no e afecLada pela gllcemla. C mesmo aconLece no caso
do CLu13, aquando da lngesLo de fruLose. uessa forma, aquando de uma menor lngesLo de gllcldeos,
esL presenLe uma menor quanLldade de SCL11. Cra, a no-enLrada de sdlo e gllcose para os
enLerclLos, leva a que no ocorra, consequenLemenLe, a enLrada de gua por osmose, para esLas
celulas, aLraves de aquapor|nas. lsLo leva a que grandes quanLldades de gua se[am expulsas, por
dlarrelas agudas, um lmporLanLe facLor de morLalldade lnfanLll nos palses sub-desenvolvldos.
Importnc|a da f|ora m|crob|ana
Alguns gllcldeos complexos que so componenLes de planLas no so dlgerldos pelas enzlmas presenLes
na sallva ou no lnLesLlno delgado e no so absorvldos. assam para o lnLesLlno grosso (clon) onde
podem ser parclalmenLe dlgerldos pelas bacLerlas do lnLesLlno e so lmporLanLes componenLes das
fezes. Lssas bacLerlas, generlcamenLe deslgnadas por flora lnLesLlnal, esLabelecem com os seres
humanos uma relao slmblLlca, permlLlndo a fermenLao parclal de subsLraLos para os quals no
Lemos enzlmas, Lransformando esses complexos em cadelas curLas de cldos gordos, de exLrema
lmporLncla para as celulas (esLas cadelas lncluem cldo aceLlco, proplnlco, lsobuLrlco, lsovalerlco e
valerlco), faclllLam a dlsLlno, pelo slsLema lmunlLrlo, de bacLerlas paLogenlcas e produzem bloLlna e
vlLamlna k. odemos deslgnar as bacLerlas da flora lnLesLlnal, na sua generalldade, como prob|t|cas,
por apresenLarem frequenLemenLe efelLos poslLlvos para o hospedelro. ara esLlmular o
desenvolvlmenLo da flora mlcroblana, lngerem-se frequenLemenLe subsLnclas no dlgerlvels que se
deslgnam por pr-b|t|cas.
glna 20 de 6S

Lstrutura e pape| b|o|g|co dos ||p|deos
Cs ||p|deos so um grupo heLerogeneo de composLos, relaLlvamenLe lnsoluvels em gua e soluvels em
solvenLes no polares. LsLes desempenham funes ao nlvel da regulao Lermlca, do lsolamenLo
elecLrlco dos axnlos dos nervos mlellnlzados, da esLruLura de membranas blolglcas e de moleculas
envolvldas na slnallzao. Cs llpldeos so armazenados no Lecldo adlposo, sob a forma de
Lrlacllgllcerldeos, que consLlLuem uma lmporLanLe fonLe de energla.
Cs llpldeos so consLlLuldos por c|dos gordos, cadelas de hldrocarboneLos que podem ser saturadas,
caso no apresenLem duplas llgaes, ou |nsaturadas, caso apresenLem uma ou mals duplas llgaes,
que no caso dos llpldos naLurals apresenLam-se sempre na conflgurao cls. As cadelas lnsaLuradas
Lm efelLos mals beneflcos para a saude que as saLuradas, nomeadamenLe os cldos gordos das serles
-3 e -6.
Comportamento dos ||p|deos no me|o aquoso
Como [ fol referldo, os llpldeos so geralmenLe lnsoluvels em gua, conLudo, os fosfollpldos,
esflngollpldos e os sals blllares apresenLam uma parLe hldroflllca e uma parLe hldrofblca, sendo por
lsso conslderadas mo|cu|as anf|pt|cas. lsLo permlLe que esLes llpldos possam esLar presenLes ou ser
LransporLados em melo aquoso.
Quando temos lipdeos cildricos, como os fosfolpidos, temos a formao de b|camadas, que depols
orlglnam esLruLuras esferlcas, por presses hldrofblcas. ! os llpldos em cunha LendenclalmenLe
orlglnam m|ce|as,
nomeadamenLe, quando se aLlnge
uma concenLrao de llpldos,
deslgnada por concentrao
m|ce|ar cr|t|ca. Cs ||possomas so
esferas de blcamadas llpldlcas,
que enclausuram parLe do melo
aquoso, podendo ser unllamelares
ou mulLllamelares, dependendo
do numero de blcamadas que os
consLlLuem. or ulLlmo, as
emu|ses so parLlculas de
malores dlmenses formadas por
llpldos no-polares e que esLo
presenLes em melo aquoso. ara
ocorrer a formao de emulses,
e necessrla a presena de
agenLes emulslonanLes, como
llpldeos anflpLlcos.
1r|ac||g||cer|deos
Cs tr|ac||g||cer|deos (Lambem deslgnados, de forma menos correcLa, por Lrlgllcerldeos) so moleculas
composLas por um gllcerol e Lrs cldos gordos (sendo os cldos gordos mals comuns, nos
Lrlacllgllcerldeos lngerldos, o c|do o|e|co, o c|do pa|m|t|co e o c|do ||no|e|co), llgados por llgaes
esLer, sendo llpldeos parLlcularmenLe lmporLanLes. Cs monoacllgllcerldeos e os dlacllgllcerldeos so
lgualmenLe passlvels de ser enconLrados nos Lecldos, conLrlbulndo para a slnLese de Lrlacllgllcerldeos.
glna 21 de 6S

Cs carbonos dos Lrlacllgllcerldeos so numerados aLraves do slsLema &( (&/#$#.01#,+023 (%,5#$+(6),
ou se[a, referlmo-nos a um dado carbono como sendo o #"-1, #"-2 ou #"-3. lsLo porque as enzlmas
dlsLlnguem os carbonos, sendo geralmenLe especlflcas para um deLermlnado carbono (por exemplo, a
clnase do gllcerol, fosforlla o gllcerol apenas no #"=3, orlglnando gllcerol-3-fosfaLo).
D|gesto e absoro de tr|ac||g||cer|deos
A nossa allmenLao lnclul llpldos sob a forma de Lrlacllgllcerldeos, colesLerol e, em menor
represenLaLlvldade, fosfollpldos (nomeadamenLe a fosfaLldllcollna, ou |ec|t|nas moleculas formadas
por gllcerol, cldos gordos, fosfaLo e collna). LnconLramos llpldeos em leos anlmals (nomeadamenLe os
leos de pelxe, so rlcos em cadelas de cldos gordos lnsaLuradas), leos vegeLals e na carne. Ao longo
do processo dlgesLlvo, os llpldos so hldrollsados por estrases e emulslonados aLe a formao de
mlcelas, forma pela qual esLes e as vlLamlnas llpossoluvels (vlLamlnas A, u, L e k) so absorvldos. ue
referlr que, apesar das compllcaes que um excesso da lngesLo de llpldos pode acarreLar, esLes so
necessrlos na nossa allmenLao, numa concenLrao mlnlma que faclllLe a absoro das vlLamlnas
llpossoluvels.
A hldrllse dos Lrlacllgllcerldeos lnlcla-se alnda na cavldade oral, onde a ||pase ||ngua| quebra a llgao
esLer #"-3, levando a llberLao de cldos gordos llvres e 1,2-dlacllgllcerldeos. LsLa enzlma e segregada
pelas g|ndu|as de Lbner, locallzadas na llngua e o seu pP pLlmo slLua-se enLre o 4,3 e o 3,4. A mesma
funo e desempenhada pela ||pase gstr|ca, segregada pelas celulas prlnclpals do esLmago e cu[o pP
pLlmo se slLua enLre o 3 e o 6.
A ||pase pancret|ca e llberLada ao nlvel do lnLesLlno delgado e, dado ser uma llpase alcallna, necesslLa
da presena de ouLra proLelna pancreLlca, a co||pase, de modo a poder levar a cabo a sua acLlvldade (a
collpase e segregada na sua forma lnacLlva, como pr-co||pase e a acLlvao e levada a cabo pela
Lrlpslna). LsLa llpase esL enLo envolvlda na hldrllse de llgaes esLer prlmrlas (ou se[a, nas posles
1 e 3 dos Lrlacllgllcerldeos), levando a produo de 2-monoac|g||cer|deos e de c|dos gordos ||vres. Cs
2-monoacllgllcerldeos podem ser hldrollsados, orlglnando gllcerol e cldos gordos, por aco da
esterase dos steres de co|estero|, uma enzlma alLamenLe lnespeclfca. ConLudo, lsLo verlflca-se numa
pequena percenLagem de moleculas.
Cuer os monoacllgllcerldeos, quer os cldos gordos llvres so conslderados produLos flnals prlnclpals da
dlgesLo de Lrlacllgllcerldeos, pols os monoacllgllcerldeos raramenLe so compleLamenLe hldrollsados
(menos que 23 desLas moleculas so compleLamenLe hldrollsados em cldos gordos e gllcerol).
glna 22 de 6S

A emulso dos llpldos e posslvel graas aos sa|s b|||ares. LsLes so produzldos no flgado e armazenam-se
na veslcula blllar, sendo llberLados para o lnLesLlno delgado. A emulso (dlmlnulo do Lamanho das
goLlculas de gordura) ocorrlda e posslvel, graas as leclLlnas e colesLerol presenLes na bllls (que so,
como referldo, moleculas anflpLlcas e dal poderem acLuar como agenLes emulslonanLes). Como as
mlcelas formadas, aquando desLa emulso, so soluvels (m|ce|as m|stas), e posslvel o seu LransporLe
aLraves do lumen lnLesLlnal (um melo aquoso) e a sua absoro no plo aplcal das celulas do eplLello
lnLesLlnal (a passagem dos llpldeos para as celulas do enLerclLo faz-se sobreLudo sem recorrer a
LransporLadores proLelcos). uenLro do eplLello lnLesLlnal, os 2-monoacllgllcerldeos so reacllados,
orlglnando Lrlacllgllcerldeos, aLraves da v|a dos monoac||g||cer|deos.
C g||cero| llberLado no lumen lnLesLlnal no e reuLlllzado, mas passa para a vela porLa, enquanLo o
gllcerol llberLado denLro dos enLerclLos e reuLlllzado para a slnLese de Lrlacllgllcerldeos, aLraves da v|a
dos c|dos fosfat|d|cos. ! os sals blllares, que foram necessrlos para a emulso dos llpldos, passam
para o lllo, onde so absorvldos na clrculao enLerohepLlca.
nas celulas da mucosa lnLesLlnal, os c|dos gordos de cade|a |onga (cldos gordos com mals que dez
Lomos de carbono) so esLerlflcados, orlglnando Lrlacllgllcerldeos e, [unLamenLe com ouLros produLos
da dlgesLo llpldlca, so segregados na correnLe llnfLlca, sob a forma de qu||om|cra (grandes parLlculas
llpoproLelcas que conslsLem em Lrlacllgllcerldeos, fosfollpldos, colesLrol e proLelnas e que LransporLam
os llpldos dos lnLesLlnos aLe aos resLanLes Lecldos do corpo), enLrando para a correnLe sangulnea aLraves
do canal Lorclco.
! os c|dos gordos de cade|a curta e md|a so prlnclpalmenLe absorvldos ao nlvel da vela porLa do
flgado, como cldos gordos llvres. 1odavla, a presena desLe Llpo de cldos gordos na dleLa e rara e eles
so sobreLudo produzldos ao nlvel das bacLerlas da flora lnLesLlnal, no clon. arLe dos cldos gordos de
cadela curLa absorvldos ao nlvel do colonclLo so uLlllzados para nuLrlo da prprla celula, enquanLo
os resLanLes passam para a correnLe sangulnea. ensa-se que os cldos curLos de cadela curLa
desempenhem um papel lmporLanLe na preveno do cancro do clon, ao lmpedlr que os coloncLlos se
converLam em celulas Lumorals.
D|gesto e absoro de co|ester|deos e fosfo||p|deos
na hldrllse de colesLerldeos, Lemos a lnLerveno da estrase dos steres de co|estero|, segregada
pelas celulas aclnares do pncreas. ua sua aco resulLa a formao de colesLerol e cldos gordos,
conLudo, a elevada lnespeclflcldade desLa enzlma, leva a que esLa acLue na hldrllse de ouLros esLeres e
das llgaes amlda dos esflngollpldeos. C co|estero| e absorvldo, dlssolvldo em mlcelas llpldlcas e e
esLerlflcado prlnclpalmenLe na mucosa lnLesLlnal, anLes de ser lncorporado em qullomlcra. C colesLerol
no-esLerlflcado e ouLros esLerls so LransporLados acLlvamenLe para fora das celulas da mucosa aLe ao
lumen lnLesLlnal. Cs ester|s e estan|s vegeLals compeLem com o colesLerol pela esLerlflcao, sendo,
apesar dlsso, subsLraLos pobres. uessa forma, esLas subsLnclas reduzem a absoro de colesLerol e
permlLem a dlmlnulo dos seus nlvels serlcos.
! quanLo a hldrllse dos fosfollpldeos, esLa ocorre por aco da fosfo||pase de t|po A2, que caLallsa a
formao de cldos gordos e ||sofosfo||p|deos (gllcerofosfollpldeos, sem cldo gordo no segundo
carbono). A fosfollpase do Llpo A2 e segregada na sua forma lnacLlva, como pr-fosfo||pase. A acLlvao
desLas subsLnclas e levada a cabo, mals uma vez, pela Lrlpslna.
glna 23 de 6S

glna 24 de 6S

Lstrutura e pape| b|o|g|co das prote|nas
As proLelnas so blomoleculas essenclals ao funclonamenLo do organlsmo, desempenhando um papel
vlLal em Lermos esLruLurals, enzlmLlco e de slnallzao celular. LsLas so composLas por 21
am|noc|dos &/2()2$), podendo esLes
sofrer alLeraes, aps a slnLese proLelca,
orlglnando am|noc|dos (.(7&/2()2$).
nos pepLldeos, os amlnocldos esLo
llgados por llgaes pepLldlcas, llgaes
amlda enLre um grupo carboxllo e um
grupo amlna, sendo que essas llgaes Lm
de ser quebradas ao nlvel da dlgesLo
proLelca.
8elaLlvamenLe aos amlnocldos #$/",/0,
presenLes nas proLelnas, esLes so Lodos
de Llpo L, com excepo a gllclna o
amlnocldo mals slmples que, como
apresenLa apenas dols carbonos, no Lem
enanLlmeros. ue resLo, os amlnocldos
conLm Lodos um grupo carbox||o (-
CCCP), um grupo am|na (-nP
2
) e uma
cadeia lateral, que e mulLo varlvel.
D|gesto de prote|nas
A malor parLe das proLelnas por ns lngerlda (na carne, pelxe, lacLlclnlos, ovos e vegeLals) [ apresenLa
poucas llgaes acesslvels as enzlmas que caLallsam a hldrllse das llgaes pepLldlcas, vlsLo que o
aqueclmenLo dos allmenLos (aquando da cozedura) e a aco do cldo gsLrlco, na cavldade esLomacal,
desnaLura uma grande quanLldade de proLelnas.
As proteases (enzlmas dlgesLlvas proLeollLlcas) so segregadas como zlmogenlos lnacLlvos (um
z|mogn|o, Lambem deslgnado por proenz|ma, e um precursor enzlmLlco, que se enconLra sob a forma
lnacLlva e que, para se Lornar numa enzlma acLlva, requer uma mudana bloqulmlca), onde o cenLro
activo da enzima se encontra camuflado por uma pequena cadeia peptdica. Esta cadeia removida
pela hldrllse de uma llgao pepLldlca
especlflca, levando a formao de uma enzlma
acLlva.
LxlsLem duas grandes classes de proLeases, que
dlferem no Llpo de llgaes pepLldlcas em que
acLuam. As endopept|dases hldrollsam llgaes
enLre amlnocldos especlflcos, sendo as
prlmelras enzlmas a acLuar. nesLa classe lnclul-
se a peps|na, presenLe nos sucos gsLrlcos e
que caLallsa a hldrllse de llgaes pepLldlcas
ad[acenLes a meLlonlna, amlnocldos de cadela
ramlflcada e amlnocldos de cadela aromLlca.
A pepslna, cu[a slnLese e esLlmulada pela
gastr|na, e segregada sob a forma de
peps|nogn|o (um zlmogenlo), que e acLlvado
glna 2S de 6S

pelo cldo gsLrlco e pela prprla pepslna acLlva
(quando lsLo aconLece, dlzemos que esLamos na
presena de uma auLocaLllse. uma autocat||se e
enLendlda generlcamenLe como um processo, em
que o produLo da reaco caLallsa a prprla
reaco, nesLe caso, a forma acLlva da enzlma
acLlva a forma lnacLlva). ue referlr que esLa enzlma
e produzlda pelas c|u|as pr|nc|pa|s do estmago
(asslnaladas na lmagem da direita com um C) e
acLua a um pP pLlmo slLuado enLre 1,3 e 2. LsLe
pP e aLlngldo graas a presena de cldo clorldrlco
nos sucos gsLrlcos, por aco das c|u|as par|eta|s
do estmago (asslnaladas na lmagem da dlrelLa
com um P), segundo o processo descrlLo no esquema segulnLe:

A Lrlpslna, a qulmoLrlpslna e a elasLase so Lambem endopepLldases, conLudo, esLas so segregadas pelo
pncreas (pelas suas c|u|as ac|nares) para o lnLesLlno delgado (nomeadamenLe para o duodeno) e
acLuam a um pP pLlmo mals alcallno (rondando os 8-8,3). A tr|ps|na caLallsa a hldrllse dos esLeres de
llslna e arglnlna, a qu|motr|ps|na, a hldrllse dos esLeres de amlnocldos aromLlcos e a e|astase, a
hldrllse de esLeres de pequenos amlnocldos allfLlcos neuLrals. A Lrlpslna e segregada sob a forma de
tr|ps|nogn|o, que e acLlvado pela enteropept|dase (Lambem deslgnada por enter|oqu|nase), segregada
pelas celulas eplLellals do duodeno (sendo por lsso uma ecLohldrlase). A Lrlpslna, por sua vez, acLlva o
qu|motr|ps|nogn|o (levando a formao de qulmoLrlpslna) e a proe|astase (em elasLase).
glna 26 de 6S

C pP alcallno no duodeno deve-se a presena do blcarbonaLo nos sucos pancreLlcos e blllar. A
produo de blcarbonLaLo, nas celulas dos cana||cu|os pancret|cos, deve-se a dlssoclao do cldo
carbnlco, produzldo pela anldrase carbnlca. A secret|na esLlmula a secreo de blcarbonaLo e e
produzlda pelas celulas endcrlnas do eplLello lnLesLlnal. Apesar de a secreLlna esLlmular Lambem a
secreo de enzlmas dlgesLlvas, a enzlma mals lmporLanLe nesLe aspecLo e a co|ec|stoc|n|na, Lambem
ela slnLeLlzada nas celulas do eplLello lnLesLlnal e que adlclonalmenLe Lambem esLlmula a conLraco da
veslcula blllar, para se poder dar a llberLao da bllls no duodeno.
8elaLlvamenLe as exopept|dases, esLas enzlmas caLallsam a hldrllse de llgaes pepLldlcas, nas
exLremldades dos pepLldos. As carbox|pept|dases, segregadas nos sucos pancreLlcos, llberLam
amlnocldos, a parLlr do Lermlnal carboxllo, enquanLo as am|nopept|dases, que podem segregadas
pelas celulas da mucosa lnLesLlnal, ou acLuar denLro do enLerclLo, gerando amlnocldos llvres a parLlr
do Lermlnal amlna. As procarbox|pept|dases e as proam|nopept|dases orlglnam, por acLlvao (levada a
cabo pela Lrlpslna), respecLlvamenLe carboxlpepLldases e amlnopepLldases (as proamlnopepLldases s
geram amlnopepLldases, quando acLuam fora do enLerclLo).
! no plo aplcal das celulas da mucosa lnLesLlnal enconLramos d|pept|dases e tr|pept|dases, que
caLallsam a hldrllse de dlpepLldeos e LrlpepLldeos, respecLlvamenLe, dado esLes no serem subsLraLos,
quer para as carboxlpepLldases, quer para as amlnopepLldases.
ue referlr que as pepLldases dlgesLlvas no caLallsam apenas a hldrllse das proLelnas que so lngerldas!
LsLas enzlmas hldrollsam Lambem as proLelnas presenLes nas celulas da mucosa, (de forma a assegurar a
sua renovao) e a das prprlas enzlmas dlgesLlvas, como [ fol referldo.
Absoro de pept|deos
C produLo flnal da aco das endopepLldases e exopepLldases e um con[unLo de amlnocldos llvres,
dlpepLldeos, LrlpepLldeos e ollogopepLldeos, sendo Lodos esLes produLos absorvldos. Cs amlnocldos
llvres so, na sua malorla, absorvldos ao nlvel do plo aplcal dos enterc|tos (cu[as mlcrovllosldades
presentes na membrana so designadas por bordadura em escova), graas a um transportador activo
dependenLe de sdlo (os amlnocldos bslcos so excepo, sendo o seu LransporLe lndependenLe do
de sdlo), sendo o LransporLe assegurado por uma grande dlversldade de LransporLadores (classlflcados
como &+,-.$/#$&), de acordo com a cadela laLeral do amlnocldo em causa (esLes Lm em conLa as suas
dlmenses e o facLo de serem cldos, neuLros ou bslcos). C LransporLe aqul dlz-se secundrlo, porque
esL dependenLe de um gradlenLe de sdlo crlado pela bomba de sdlo e poLsslo (LransporLe prlmrlo).
ue referlr que os dlversos amlnocldos compeLem uns com os ouLros pela absoro e enLrada nos
Lecldos. A salda da malor parLe dos amlnocldos do plo basal dos enLerclLos e felLa por unlporLers e
no depende do LransporLe de ouLros les lnorgnlcos.
8elaLlvamenLe aos dlpepLldeos e LrlpepLldeos, esLes enLram pelo plo aplcal dos enLerclLos, aLraves do
LransporLador L11, um slmporLer lnespeclflco, que acopla a passagem de dl- e LrlpepLldeos, a
passagem de proLes para o lnLerlor dos enLerclLos. ue referlr que os proLes Lm Lendncla para
enLrar para o melo lnLracelular, devldo a presena de um Lrocador, que permlLe a Lroca de um proLo
que sal dos enLerclLos, por um lo sdlo, que enLra. no lnLerlor dos enLerclLos, os dlpepLldeos e
LrlpepLldeos so hldrollsados a amlnocldos llvres, por pept|dases, como [ fol referldo, enLrando depols
nas celulas hepLlcas aLraves da vela porLa.
Cs pepLldeos de malores dlmenses podem ser absorvldos lnLacLos, por plnoclLose, quer enLrando para
as celulas do eplLello lnLesLlnal (absoro transce|u|ar), quer passando por enLre esLas (absoro
parace|u|ar).
glna 27 de 6S

A absoro de pepLldeos de malores dlmenses e um processo mals frequenLe nos bebes que nos
lndlvlduos de ldade adulLa e mulLas vezes, as dlmenses desLes pepLldeos so suflclenLes para
despoleLar a formao de anLlcorpos, levando ao desenvolvlmenLo de reaces alerglcas a allmenLos. A
malor parLe dos pepLldeos de grandes dlmenses e desLrulda, conLudo, parLe e dlgerlda e uma fraco
chega alnda lnLacLa a correnLe sangulnea s asslm e posslvel expllcar que nos bebes que se allmenLam
do lelLe maLerno, ocorra passagem de anLlcorpos da me para a correnLe sangulnea do fllho.
glna 28 de 6S

rote|nas de ||gao ao DNA e seus dom|n|os func|ona|s
no nucleo celular, ocorre a repllcao e a Lranscrlo do unA,
processos dependenLes da llgao a proLelnas. LxlsLem vrlas
proLelnas capazes de esLabelecer llgao ao unA (nomeadamenLe
a sua perlferla), sendo esLas generlcamenLe deslgnadas por DNA
5+()+(6 -$./#+(&. Lm Lermos esLruLurals, esLas proLelnas podem
ter estrutura secundria em -hlice, mas as folhas pragueadas
e ansas de amlnocldos Lambem conseguem reconhecer a dupla
hellce de unA.
As unA 1%",%"4 80)$'%"# esLabelecem llgaes com as bases
exposLas no sulco malor da cadela de unA, dlspondo, asslm, de
acesso as bases no lnLerlor da molecula de unA sem necesslLarem
de a desnaLurar. C unA e as proLelnas em quesLo esLabelecem
vrlos Llpos de llgaes (llgaes lnlcas, ponLes de hldrogenlo e
lnLeraces hldrofblcas), as quals podem ser mulLo especlflcas,
formando uma espcie de velcro. Note-se que a esLruLura
Lrldlmenslonal do unA pode varlar llgelramenLe conforme a
sequncla de nucleoLldeos - a llgao das proLelnas ao unA pode
alLerar essa conformao.
Dom|n|os de ||gao ao DNA
A 1#3+87/%$(71#3+8 e um domlnlo comum de llgao ao unA, sendo composta por duas hlices e um
grupo $&0" em ngulo flxo, sendo que uma hellce - a hellce de reconheclmenLo -, llga-se ao su|co ma|or
do unA. um caso parLlcular de >'?%@=$&0"=>'?%@ e o homeodoma|n, observado nos repressores
bacLerlanos. C 52&+0 1#3+873..-71#3+8 e uma varlanLe de >'?%@=$&0"=>'?%@, onde duas hellces esLo
conecLadas por um ?))8.
C 9+(07:+(6#$ e o moLlvo mals abundanLe de llgao nos anlmals. 1em um Lomo de zlnco a unlr vrlos
reslduos de amlnocldos (enLre 23 e 28), os quals Llplcamente se organizam numa hlice (presente no
sulco maior e com funes de reconhecimento) e numa folha pragueada . Existem, contudo, milhares
de 5%"- *%"4'0# [ ldenLlflcados.
C 3#%0+(# 9+--#$ consiste em duas hlices de DNA unidas por interaes hidrofblcas ao nlvel das
leuclnas. LsL assoclado a expresso de genes.
glna 29 de 6S

Cs heterod|meros so o resulLado da [uno enLre os 3#%0+(# 9+--#$ e as 52&+0 1#3+873..-71#3+8, Lendo
dlferenLe especlflcldade de llgao ao unA. ConLudo, o numero de comblnaes em cada celula e
llmlLado, dependendo sempre da sequncla de amlnocldos em cada cadela. Cs heLerodlmeros
expandem o reporLrlo de sequnclas de unA que as proLelnas de regulao genlca podem recorrer,
sendo que dlferenLes
comblnaes nos
heLerodlmeros dos facLores
de Lranscrlo aumenLam as
alLernaLlvas de regulao
geneLlca.
C A1 consLlLul um exemplo
de um heLerodlmero, na
medlda em que e consLlLuldo
por duas subunldades
dlsLlnLas c-Iun e c-fos. C
domlnlo ?'&-%"' 5%88'0 do A1
lnLerage com o NIA1 Lals
lnLeraces permlLem que
esLas duas proLelnas se llguem
cooperaLlvamenLe ao unA,
regulando a Lranscrlo do
gene que codlflca para a |nter|euc|na 2.

glna 30 de 6S

G||cos||ao e g||cao de rote|nas
As g||coprote|nas so proLelnas que conLm cadelas de ollgossacarldeos covalenLemenLe llgadas a
cadelas laLerals de pollpepLldeos. LxlsLem varladas gllcoproLelnas com lnumeras funes assocladas, Lals
como:
Modulao de vrlas proprledades flslco-qulmlcas proLelcas, Lals como a solubllldade,
vlscosldade, carga, conformao, desnaLurao e locals de llgao.
roLeco conLra a proLellse: MulLas das proLelnas que esLo em clrculao no sangue so
rlcas em c|do s|||co, ou se[a, so s|a|oprote|nas. Cra, o cldo slllco proLege essas proLelnas
da proLellse, na medlda em que a sua perda em cldo slllco resulLa na sua remoo com
subsequenLe llgao a recepLores hepLlcos e degradao.
lnfluncla na lnsero nas membranas, mlgrao lnLracelular e secreo algumas proLelnas
(lnclulndo enzlmas lnLervenlenLes na dlgesLo) enconLram-se llgadas as membranas por uma
ncora de g||cos|fosfat|d|nos|to| (GI). nesLes casos, as proLelnas esLo llgadas a membrana,
mas no se enconLram flxas, podendo ser recruLadas quando necessrlo.
lnfluncla no desenvolvlmenLo embrlonrlo e dlferenclao, como evldenclado pelo facLo de a
gonadotrof|na cor|n|ca humana (hCG) ser uma gllcoproLelna.
osslbllldade de alLerao da capacldade e local de meLasLlzao de deLermlnados carclnomas.
noLe-se que uma das formas dereconhecer as celulas neoplslcas prende-se com o Llpo e
quanLldade de aucares que l esLo presenLes . ara lsso, uLlllza-se uma reao que envolve o
reagenLe de AS ou o reagenLe de Schlff e reconhece a presena de gllcldeos, permlLlndo,
asslm, ldenLlflcar as celulas neoplslcas.

normalmenLe, a membrana
plasmLlca e asslmeLrlca, ou
se[a, a dlsLrlbulo dos
elemenLos no e lgual nos dols
folheLos. no caso dos aucares,
a parLe gllcldlca esL
normalmenLe volLada para o
exLerlor, quer no caso dos
gllcollpldeos quer no das
gllcoproLelnas. lsLo expllca
porque e que os gllcldeos
acLuam frequenLemenLe como
deLermlnanLes anLlgenlcos,
sendo reconhecldos por
anLlcorpos e desencadeando
llgaes anLlgenlo-anLlcorpo. A
LlLulo de exemplo, desLaque para o s|stema sangu|neo A8C - a dlferena enLre os dlferenLes grupos
sangulneos (grupo A, 8 ou C) prende-se com a exlsLncla e Llpo de gllcldeo expresso a superflcle dos
erlLrclLos.
LxlsLe alnda uma ouLra gllcoproLelna lmporLanLe presenLe na membrana dos erlLrclLos - a g||cofor|na. A
poro pepLldlca da gllcoforlna enconLra-se assoclada a vrlos reslduos de cldo slllco, os quals
desempenham funes de reconheclmenLo e de preveno da adeso celular.

glna 31 de 6S

Lstrutura b|oqu|m|ca das g||coprote|nas
Cs prlnclpals gllcldeos enconLrados nas proLelnas humanas so:
G||cose
Ga|actose
Manose
c|do N-acet||neuram|n|co (c|do s|||co)
Iucose (desox|-ga|actose)
N-Acet||ga|actosam|na
N-Acet||g||cosam|na
k||ose
G||cos||ao
C processo de adlo de um componenLe gllcldlco a uma proLelna, que ocorre para a formao de
gllcoproLelnas, denomlna-se g||cos||ao. no obsLanLe, a gllcosllao Lambem pode ocorrer em
llpldeos, gllcanos e ouLras moleculas orgnlcas. A llgao de gllcldeos a proLldeos pode ser medlada por
um Lomo de azoLo da cadela laLeral (N-g||cos||ao) ou por um Lomo de oxlgenlo (C-g||cos||ao).
noLe-se que o azoLo hablLualmenLe perLence a asparaglna e o oxlgenlo normalmenLe enconLra-se num
reslduo de serlna.
A C-g||cos||ao ocorre aps a Lraduo proLelca no complexo de Colgl e, dependendo do aucar
adlclonado, pode ser de vrlos Llpos, Lals como C-gllcosllao, C-xllollsao, C-manosllao, e C-n-
aceLllgalacLosamlnao.
or seu Lurno, a N-g||cos||ao ocorre duranLe a Lraduo proLelca, no reLlculo endoplasmLlco rugoso
(ou clLoplasma) e complexo de Colgl. nesLe processo, lnLervem o do||co|, o qual e uma cadela allfLlca
ramlflcada conLendo llgaes duplas. C dollcol acLua como um suporLe, ancorando uma serle de
monossacarldeos que vo sendo progresslvamenLe adlclonados aLraves de processos enzlmLlcos. uma
glna 32 de 6S

vez formado um ollgossacarldeo conLendo 14 monossacarldeos, esLe e Lransferldo em molecula da
molecula de dollcol para a um reslduo de asparglna de uma proLelna recem-formada (permlLlndo asslm
a sua gllcosllao).

G||cao
ConLrarlamenLe a gllcosllao, a g||cao (globalmenLe Lambem chamada de reao de Ma|||ard)
consLlLul um processo no-enzlmLlco de adlo de gllcldeos, por exemplo, a proLelnas. A reao de
Malllard fol descrlLa em 1908 por Llng & MalLlng, que esLudaram a formao de cor na cerve[a. Lm
1912, Louls-Camllle Malllard descreveu a reao enLre aucares reduLores e grupos amlna que leva ao
apareclmenLo de cor casLanha, Lendo sldo o
prlmelro auLor a perceber a sua lmporLncla.
A hemogloblna, uma proLelna presenLe nos
erlLrclLos, pode ser alvo da reaco de Malllard,
orlglnando uma forma gllcada. A hemog|ob|na
g||cada (PbA1c) fol conslderada lnlclalmenLe um
arLefacLo, sendo que apenas em 1967 fol
esLabeleclda a sua relao com a dlabeLes. ue
facLo, e posslvel esLabelecer uma relao enLre a
percenLagem de PbA1c e os valores gllcemlcos
medlos nos ulLlmos Lrs meses asslm, a
percenLagem de PbA1c permlLe ao medlco
avallar o conLrolo gllcemlco do paclenLe nos
ulLlmos Lrs meses.

glna 33 de 6S

Iases da g||cao
Iase |n|c|a|
Condensao
- Crupo amlna e grupo carbonllo
- lormao da 8ase de Sch|ff (horas)
- kearran[o de Amador| (CeLosamlna) (dlas)
Iase avanada
- uegradao do produto de Amador|
(semanas)
- lormao de Carbonllos reaLlvos (8CC
0'/-$%6' -/01)"A? -).8)&",#)
Iase f|na|
- Carbonllos reagem com amlnas
- lormao de melanoldlnas
- lormao de AGEs
AGEs
A reao de Malllard esL envolvlda na formao de AGEs produLos flnals da gllcao avanada -, os
quals podem esLar envolvldos em:
AnglopaLla dlabeLlca
8eLlnopaLla dlabeLlca
nefropaLla dlabeLlca
CuLras compllcaes da dlabeLes
Compllcaes da lnsuflclncla renal
ALerosclerose e doena cardlovascular
uoena de Alzhelmer
LnvelheclmenLo
AlLeraes de colagenlo
Carclnomas

glna 34 de 6S

Para alm disso, os AGEs podem levar alLerao da esLruLura do colagenlo e elasLlna (por aumenLo do
os -0)##=?%"B#) e provocar a lnLerao com recetores de AGEs (kAGL), desencadeado uma resposLa
lnflamaLrla ou a llberLao de facLores de cresclmenLo.
Defesa contra AGEs
lllLrao renal
Ao de enzlmas
- Clloxlase l
- 8eduLases dos aldeldos
- uesldrogensases de aldeldos
- Clnase do fosfaLo-3 de fruLosamlna
- Amadorlase (oxldases de fruLosamlna)
8eceLores para ACL
- 8ACL
-s8ACL (es8ACL (endgeno + s8ACL (por quebra proLeollLlca)))
Dieta (glicose e AGEs)
AnLloxldanLes
lnlbldores de ACL
-lrldoxlna (vlL 8
6
)
- Carnoslna (anLloxldanLe e bloquela 8CC)
- MeLformlna (balxa gllcemla e aLlva anLl-oxldanLes)
- C8 9193
- 8enfoLlamlna (derlvado vlL 8
1
)
- Amlnoguanldlna
uesLruldores de llgaes cruzadas (-0)##?%"B 10'/B'0#C
- Sals fenacllLlazllcos (AL1-711 Alagebrlum)
- uerlvados 1,3 - Llazllcos
8eceLores soluvels para ACL (s8ACL)
AnLagonlsLas do 8ACL (11488 e 14000)
No obstante, os AGEs tambm desempenham papis benficos:
ACL-8ACL vla nl-k8
- 8egenerao de flbras musculares
- 8egenerao nervosa
8ACL
- +%@', 1/4 )* %"D&0A /", 0'8/%0
- Lssenclal para o funclonamenLo dos llnfclLos 1
SlnLese de colagenlo?
glna 3S de 6S

Lnz|mas e qu|m|ca c||n|ca
Lm Lermos generlcos, a aco enzlmLlca pode ser descrlLa pela segulnLe equao:
Enzima (1) + substrato (2) enzima +produto
Cs processos enzlmLlcos so ublquos no organlsmo, de Lal modo que algumas condles paLolglcas
('343 defelLos enzlmLlcos geneLlcos) se caracLerlzam por alLerao dos mesmos. no admlra, por lsso,
que na prLlca cllnlca se[a recorrenLemenLe necessrlo proceder ao doseamenLo de enzlmas ou de
subsLraLos. ConLudo, a abordagem a segulr dlfere:
(1) Cuando se preLende avallar a enzlma, dosela-se a prprla enzlma
(2) Cuando se preLende avallar o subsLraLo, dosela-se CCM a enzlma (ou se[a, uLlllza-se uma
enzlma para avallar o subsLraLo presenLe)

Cs ensalos quanLlLaLlvos uLlllzando enzlmas como marcadores (#(9;,# +,,%(.2&&2;, LIA) foram
desenvolvldos no lnlclo dos anos 70 do seculo xx como alLernaLlva a $2)+.+,,%(.2&&2; (kIA). nesLes
ensalos, mede-se a aLlvldade enzlmLlca, sendo que os subsLraLos podem ser colorlmerlcos, foLomerlcos
ou qulmlolumlnomerlcos. or seu Lurno, as enzlmas usadas podem ser compeLlLlvas ou no
compeLlLlvas e lncluem:
eroxldase do rbano
losfaLase alcallna
CalacLosldase
Cxldase da gllcose
CaLlase
Lnz|mas doseadas na prt|ca c||n|ca
Lnzlmas usadas na roLlna cllnlca:
Iosfatase a|ca||na na suspelLa de doena ssea ou hepLlca
Iosftase c|da na suspelLa de cancro da prsLaLa
Am||ase- na excluso de pancreaLlLe aguda
Lnzlmas dosevels:
Iosfatase a|ca||na
Iosfatase c|da
glna 36 de 6S

A|an|na am|notransferase (AL1) A AL1 Lransfere o grupo amlna da alanlna para o 2-
oxogluLaraLo (para formar plruvaLo e gluLamaLo). C plruvaLo parLlclpa numa reao com o
nAuP, produzlndo lacLaLo e nAu
+
. A reduo da absorvncla devldo ao consumo de nAuP e
medlda a 340nm e e proporclonal a aLlvldade de AL1 na amosLra.
Aspartato am|notransferase (AS1) A par com a AL1, a AS1 consLlLul um marcador no-
especlflco de leso hepLlca
Am||ase
L|pase: A par da amllase consLlLul um marcador de leso pancreLlca.
Co||nesterase
Des|drognase |t|ca

Lnz|mas no sangue
Lnzlmas especlflcas do plasma:
roteases pr-coagu|antes: Lromblna, facLor xll, facLor x, enzlmas flbrlnollLlcas
ercursores de proteases pr-coagu|antes: plasmlnogenlo.
Lnzlmas segregadas:
L|pase e am||ase (produzldas nas glndulas sallvares e pncreas), co||nesterase, ant|gn|o
espec|f|co da prstata (SA).
Lnzlmas celulares:
Am|notransfrases (AS1 e AL1), des|drogenase |ct|ca (DnL), fosftase a|ca||na.
Lnz|mas da ur|na
AmlnopepLldase alcallna (AA), 4/../= 4?&$/.A? $0/"#*'0/#' (CC1), /-%, 8>)#8>/$/#' (AC) e E=/-'$A?=
1'$/=2=4?&-)#/.%"/#' (nAC). LsLas enzlmas orlglnam-se nas celulas Lubulares renals proxlmals.
Lnz|mas card|ovascu|ares
lnlclalmenLe, demonsLrou-se que as transam|nases esLavam aumenLadas no enfarLe agudo do
mlocrdlo (LAM). ConLudo, como so enconLradas em mulLos ouLros Lecldos, so poucos especlflcas
para o LAM. osLerlormenLe, demonsLrou-se que havla elevao dos nlvels serlcos das enzlmas creat|na
c|nase (Ck), creat|na c|nase-frao M8 (Ck-M8) e des|drognase do |actato (DnL), mas Lambem esLas
so pouco especlflcas:
(1) Creat|na c|nase (Ck)
Lnzlma dlmerlca composLa por duas subunldades pollpepLldlcas de massa molar
aproxlmada de 43000 g/mol denomlnadas M (muscular) e 8 (cerebral).
lsoenzlmas:
! Ck-88 (Ck1) predomlnlo no cerebro e musculo llso.
! Ck-M8 (Ck2) predomlnlo no musculo cardlaco.
! Ck-MM (Ck3) predomlnlo no musculo esqueleLlco.
Locallzada no clLoplasma ou assoclada a esLruLuras mloflbrllares.
Lleva-se 4-8 horas aps o lnlclo do processo lsquemlco, mas no consLlLul um
marcador cardloespeclflco.

glna 37 de 6S

(2) Creat|na c|nase frao M8 (Ck-M8)
Llevada senslbllldade dlagnsLlca a parLlr de 4-6 horas ps-enfarLe. A sua
concenLrao plasmLlca manLem-se elevada duranLe as 48 horas segulnLes.
Alnda que locallzada baslcamenLe no mlocrdlo, foram deLeLadas balxas
concenLraes desLa enzlma nouLros Lecldos.
Malor percenLagem de falsos poslLlvos: falLa de especlflcldade dos meLodos anallLlcos
(valorlzao comum da frao 88 alLeraes da musculaLura llsa e paLologla
cerebral).
resena de varlanLes de macro-Ck.

Marcadores de |eso card|aca ut|||zados ao |ongo dos anos:
AsparLaLo amlnoLransferase
CreaLlna clnase M8
1ropon|na I, 1ropon|na 1 as tropon|nas consLlLuem os marcadores mals
lmporLanLes. ConLudo, apenas devem ser pedldas peranLe suspelLa de enfarLe agudo
do mlocrdlo. lndlvlduos com ouLras condles, Lals como lnsuflclncla cardlaca,
podem apresenLar de 8'0 #' nlvels elevados de Lroponlna sem que Lal lmpllque a
ocorrncla de um enfarLe.
Des|drognase do |actato
C Lromboembollsmo pulmonar resulLa em elevao da desldrogenase do lacLaLo (uPL). A necrose
alveolar resulLa na elevao de DnL-3, enquanLo a lnsuflclncla cardlaca leva a elevao de DnL-S.
AumenLos da DnL-1 podem Ler orlgem erlLroclLrla.
Lnz|mas muscu|ares
As mlopaLlas do musculo esqueleLlco esLo assocladas a sublda dos nlvels serlcos de vrlas proLelnas
especlflcas, Lals como a Ck, Ck-M8, uPL e a aldolase. A a|do|ase e uma enzlma que a[uda a converLer a
gllcose em energla, enconLrando-se ublquamenLe expressa por Lodo o organlsmo, e verlflcando-se um
aumenLo dos seus nlvels plasmLlcos aquando de uma leso ou doena muscular ou hepLlca. no
passado, o LesLe da aldolase era sollclLado para dlagnosLlcar ou conLrolar algumas slLuaes
relaclonadas com doenas musculo-esqueleLlcas e/ou hepLlcas. ALualmenLe, a sua avallao fol
subsLlLulda pela de ouLros marcadores enzlmLlcos, Lals como a Ck, a AL1 e a AS1, que so lndlcadores
mals especlflcos de leso muscular ou hepLlca. C LesLe da aldolase alnda Lem algum uso no segulmenLo
de paclenLes com dlsLrofla muscular.
Lnz|mas pancret|cas
A am||ase e uLlllzada para esLudar as doenas do pncreas, nomeadamenLe a pancreaLlLe. A ||pase
Lambem e usada sobreLudo nas pancreaLlLes agudas por ser mals senslvel. Lm slLuaes de pancreLlLe
aguda, verlflca-se um aumenLo dos nlvels plasmLlcos de amllase, os quals permanecem elevados aLe a
causa ser LraLada eflcazmenLe. lsLo expllca porque e que so pedldos os doseamenLos da amllase e
llpase (no sangue ou na urlna) para dlagnosLlcar e monlLorlzar a pancreaLlLe aguda ou crnlca. Cs nlvels
desLas enzlmas Lambem podem aumenLar slgnlflcaLlvamenLe nos doenLes com obsLruo do ducLo
pancreLlco, cancro do pncreas e paLologla blllar. LsLes aumenLos dos nlvels enzlmLlcos so, conLudo,
LranslLrlos, obLendo-se valores normals uma vez Lermlnado o eplsdlo paLolglco.
nlvels balxos de amllase e llpase no sangue e na urlna podem lndlcar leso permanenLe das celulas do
pncreas excrlno (as quals so secreLoras de amllase).
glna 38 de 6S

Lnz|mas hept|cas
A fosfatase a|ca||na e a -g|utam|| transferase (GG1) esLo locallzadas na membrana, verlflcando-se um
aumenLo dos seus nlvels em slLuaes de colesLase. A AS1 e clLoplasmLlca e mlLocondrlal e a AL1
apenas mlLocondrlal, pelo que os seus valores sobem nas slLuaes de hepaLlLe com necrose. or seu
Lurno, a CC1 deve ser uLlllzada na avallao de doena hepLlca mas nunca como LesLe de avallao
lnlclal. Asslm, a CC1 deve ser uLlllzada para a[udar a caracLerlzar um valor elevado de AL, como
reglsLado no alcoollsmo crnlco.
C|tocromo 4S0
C c|tocromo 4S0 (C430) conslsLe numa famllla de enzlmas hepLlcas que conLm heme e que
caLallsam a converso de subsLnclas llpoflllcas em moleculas hldroflllcas, de modo a posslblllLar a sua
excreo renal. C slsLema C?430 Lem evoluldo para uma famllla de genes expandlda, os quals se
enconLram dlsposLos em $/",'. em mulLlplos ?)-% cromossmlcos. LsLes genes so alLamenLe
pollmrflcos, de Lal modo que as vrlas lsoformas C?430 conhecldas nos humanos, bem como as suas
varlaes geneLlcas, podem ser uLlllzadas como um grande con[unLo de marcadores blolglcos
predlLores de susceLlbllldade para Loxlnas especlflcas. As varlaes lndlvlduals de enzlmas da famllla do
clLocromo 430 so parclalmenLe responsvels pela dlferenLe suscepLlbllldade lnLer-lndlvldual a
frmacos dlferenas na capacldade enzlmLlca condlclonam dlferenas na meLabollzao dos frmacos
o que, em ulLlma lnsLncla, se Lraduz por dlferenas nos efelLos e Loxlcldade dos frmacos. Asslm, a
avallao de enzlmas especlflcas desLa famllla por LesLes farmacogeneLlcos prevlamenLe a admlnlsLrao
de alguns frmacos Lem-se vlndo a revelar, cada vez mals, uma realldade.
Doseamento com enz|mas
As segulnLes subsLnclas so doseadas com base em enzlmas:
8lcarbonaLo carboxllase do fosfoenolplruvaLo
ColesLerol esLerase do colesLerol, peroxldase
Cllcose hexoclnase e desldrogenase v da gllcose -6-fosfaLo
LacLaLo peroxldase
1rlgllcerldeos - llpase
urela- urease
cldo urlco urlcase
Doenas do metabo||smo enz|mt|co
Lsf|ngo||p|doses
As esf|ngo||p|doses compreendem um grupo de doenas heredlLrlas causadas por defelLos geneLlcos
no caLabollsmo dos llpldeos conLendo esflngoslna. Mals concreLamenLe, reglsLam-se defelLos ao nlvel
das hldrlases capazes de degradar os esflngollpldeos llsossomals.
uma vez que as enzlmas em deflce se enconLram nos llsossomas, os subsLraLos das mesmas acumulam-
se nesLes organelos. Asslm, as esflngollpldoses perLencem ao grupo das doenas ||sossoma|s (Lambem
deslgnadas por doenas de acumu|ao). ara cada enzlma em deflce, exlsLe uma doena especlflca
correspondenLe, sendo que doenas dlferenLes cursam com acumulao de subsLnclas dlferenLes em
rgos dlferenLes (um dos locals mals afeLados e o cerebro por ser mulLo rlcos em esflngollpldeos).
CbvlamenLe, Lal dlversldade reflecLe-se Lambem numa grande dlversldade de slnLomas e slnals cllnlcos.
glna 39 de 6S

ConsLlLuem caracLerlsLlcas comuns das
esflngollpldoses:
LxlsLncla de um defelLo enzlmLlco na
vla de degradao llsossomal dos
esflngollpldeos,
Acumulao de llpldos complexos
conLendo ceramlda nas celulas,
causando neurodegenerao,
normal velocldade de slnLese dos
llpldeos armazenados,
8eduo, em grau semelhanLe, da
aLlvldade da enzlma afeLada em Lodos
os Lecldos.
Como referldo anLerlormenLe, exlsLem vrlos
Llpos de esflngollpldoses, sendo as mals
emblemLlcas:
Doena de Gaucher: uefelLo
enzimtico na - gllcosldase (gllcocereborsldase), que cursa com acumulao de gllcosll-
ceramlda. Lm Lermos cllnlcos, caracLerlza-se por hepaLo-esplenomegalla (aumenLo das
dlmenses do bao e flgado), aLraso do desenvolvlmenLo lnLelecLual e eroso dos ossos longos.
Doena de N|emann-|ck: uefelLo enzlmLlco na esflngomlellnase, que cursa com acumulao
de esflngomlellna. Lm Lermos cllnlcos, caracLerlza-se por hepaLo-esplenomegalla, aLraso do
desenvolvlmenLo lnLelecLual e morLe premaLura.
Doena de Iarber: uefelLo na enzlma ceramldase com subsequenLe acumulao de ceramlda.
Lm Lermos cllnlcos, caracLerlza-se por deformao esqueleLlca, morLe premaLura e aLraso do
desenvolvlmenLo lnLelecLual.
Cs LraLamenLos posslvels para esLas condles passam pela Lerapla de subsLlLulo enzlmLlca e
LransplanLe de medula ssea.
G||cogenoses
As g||cogenoses so doenas geneLlcas secundrlas a um erro no meLabollsmo, cursando com
concenLraes alLeradas de gllcogenlo no organlsmo. LxlsLem mals de dez Llpos dlferenLes, dependendo
do defelLo enzlmLlco enconLrado.
C gllcogenlo esL presenLe em Lodas as celulas anlmals, sendo mals abundanLe no flgado e nos
musculos. C gllcogenlo consLlLul a forma aLraves da qual armazenamos a gllcose da dleLa (a gllcose
chega ao flgado pela vela porLa), sendo que, quando h necessldade de uso da gllcose, reglsLa-se quebra
do gllcogenlo por melo de um processo enzlmLlco, ocorrendo enLo a llberLao de gllcose para a
clrculao sangulnea. uesLa forma, o flgado proporclona a llberLao de gllcose para vrlos rgos,
lnclulndo o cerebro.
Cuando o gllcogenlo no consegue ser quebrado, devldo a deflclncla de alguma das enzlmas
envolvldas, esLe acumula-se nos rgos, despoleLando uma serle de consequnclas:
G||cogenose t|po I (doena de von G|erke): 8esulLa de deflclncla da g||cose-6- fosfatase, que
caLallsa a reaco gllcose-6-fosfatoglicose (logo, esta enzima responsvel pela libertao de
glna 40 de 6S

gllcose para a clrculao), verlflcando-se acumulao de gllcogenlo nas celulas Lubulares dos
rlns e no flgado.
Consequnclas: hlpogllcemla, acldose lcLlca e hlperllpldemla.
G||cogenose t|po VII causada pela deflclncla da enzlma fosfofrutoqu|nase nos musculos e
enLerclLos.
Consequnclas: anemla hemollLlca.
G||cogenose t|po III (doena de Cor|) - Causada pela deflclncla na enzlma am||o-1,6-
g||cos|dase
Consequnclas: hlpogllcemla, hepaLomegalla e aLraso do cresclmenLo.
orf|r|as
As hemoproLelnas, como a hemogloblna e os clLocromos, conLm heme. C heme e um composLo de
ferro-porflrlna em que quaLro anels de plrrol esLo llgados por ponLes de meLlna. Cs ouLros grupos
laLerals nos quaLro anels plrrllcos do heme esLo dlsposLos numa sequncla especlflca.
Anomallas geneLlcamenLe deLermlnadas das enzlmas envolvldas na blosslnLese do heme so
responsvels pelas porflrlas heredlLrlas. LxlsLem dlferenLes Llpos de porf|r|as, classlflcadas de acordo
com as suas deflclnclas enzlmLlcas. Cs erlLrclLos e o flgado consLlLuem os prlnclpals locals de
expresso meLabllca das porflrlas, sendo que esLes dlsLurblos cursam com foLossenslbllldade,
compllcaes neurolglcas e dor abdomlnal. noLe-se, conLudo, que nem Lodas as porflrlas so de
carcLer heredlLrlo - a lngesLo de deLermlnadas subsLnclas pode causar porf|r|as adqu|r|das.
Lm Lermos cllnlcos, quanLldades aumenLadas de porflrlnas ou dos seus precursores podem ser
deLeLadas no sangue e na urlna, faclllLando o dlagnsLlco das porflrlas.

glna 41 de 6S

C|u|a: conce|to e evo|uo
Crgan|zao h|errqu|ca dos s|stemas b|o|g|cos
Cenes -> roLelnas -> Celulas -> 1ecldos -> Crgos
1odas as celulas Lm unA como maLerlal geneLlco, esLo cercadas por uma membrana plasmLlca e
usam os mesmos mecanlsmos bslcos para obLeno de energla meLabllca. As semelhanas
fundamenLals enLre os vrlos Llpos de celulas permlLem a exLrapolao e generallzao de experlnclas.
Algumas celulas sobrevlvem como seres lndependenLes e capazes de se reproduzlrem. ConLudo, os
organlsmos complexos so composLos por con[unLos de celulas que funclonam de modo coordenado,
com algumas celulas a reallzarem Larefas especlallzadas. Apesar dos Llpos bslcos de moleculas Lerem
sldo conservados ao longo dos anos, a forma como se [unLam e lnLeragem para formar celulas e
organlsmos funclonals mudou conslderavelmenLe.
Segundo SLanley Mlller, a prlmelra celula surglu h 3,8 mllhes de anos, na sequncla de uma descarga
eleLrlca numa mlsLura de gases que compunham a aLmosfera de enLo Lal descarga, na presena de
vapor de gua, levou a formao de uma varledade de moleculas orgnlcas, lnclulndo am|noc|dos.
AdmlLe-se que as macromoleculas surglram esponLaneamenLe a parLlr da pollmerlzao peranLe as
condles da alLura. AcredlLa-se alnda que as macromoleculas Lero necesslLado de se autorep||carem
para se reproduz|rem e evo|u|rem - de enLre as macromoleculas exlsLenLes nas celulas, apenas os
cldos nuclelcos so capazes de repllcar por complemenLarldade de bases, de facLo, em 1986 fol
demonsLrado que o 8nA se auLorepllca, sendo esLe o maLerlal geneLlco prlmlLlvo mals provvel. Asslm,
presume-se que a prlmelra celula surglu quando uma molecula de 8nA fol rodeada por uma membrana
prlmlLlva formada por fosfollpldeos, Lornando asslm posslvel a slnLese de proLelnas caLallsada por 8nA.
ConLudo, posLerlormenLe, o unA subsLlLulu o 8nA como molecula para guardar a lnformao geneLlca.
C processo de repllcao seml-conservaLlva assegura que as moleculas de unA so capazes de gerar
moleculas exaLamenLe lguals a cadela-me, sendo, asslm, posslvel passar o cdlgo geneLlco a
descendncla de deLermlnada llnha celular. ALualmenLe, Lodas as celulas exlsLenLes Lm genomas de
unA, enquanLo as moleculas de 8nA assumem ouLras funes como, por exemplo, serem Lraduzldas em
proLelnas. A alLerao do meLabollsmo celular modlflcou a aLmosfera da Lerra prlmlLlva, condlclonando
a evoluo das celulas.
glna 42 de 6S

C que uma c|u|a?
1eorla Celular (1838) por Schlelden e Schwan
CaraLerlsLlcas das celulas:
1odas as celulas armazenam lnformao geneLlca no unA.
1odas as celulas repllcam o seu genoma. Ao repllcar, o unA d orlgem a novas moleculas
ldnLlcas a lnlclal.
1odas as celulas Lransferem a lnformao geneLlca do unA para o 8nA transcr|o
1odas as celulas usam proLelnas com ao enzlmLlca, as quals, por sua vez, so responsvels
por caLallsar a formao ou quebra das llgaes covalenLes exlsLenLes na celula.
1odas as celulas preclsam de energla (forneclda, em parLe, pelo A1)
1odas as celulas so llmlLadas por membrana fosfollpldlca.
Cs precursores das blomoleculas (nucleoLldeos, amlnocldos e monmeros aucarados) so
comuns a Lodas as celulas. LsLas blomoleculas so fundamenLalmenLe consLlLuldas por
hldrogenlo, carbono, oxlgenlo e azoLo. noLe-se que as macromoleculas represenLam cerca de
26 da massa LoLal das celulas, enquanLo 70 corresponde a gua.
As celulas produzem moleculas com caraLerlsLlcas qulmlcas que lhes permlLem organlzar-se nas
esLruLuras necessrlas a sua exlsLncla. As proLelnas nas celulas (codlflcadas por Lranscrlo dos genes -
unldades de unA em 8nA, com subsequenLe Lraduo) dlLam no s a composlo qulmlca, mas
Lambem a forma e funo. As proLelnas varlam slgnlflcaLlvamenLe enLre celulas de dlferenLes Llpos
(acredlLa-se que as proLelnas deLermlnam o fenLlpo da celula).
uma celula Ler de Ler, no mlnlmo, cerca de 200-300 genes, sendo que exlsLem 60 genes que comuns a
Lodas as celulas vlvas, sem exceo. C esLudo comparaLlvo desLes genes mulLo conservados permlLe
esLudar a evoluo de dlferenLes celulas a LlLulo de exemplo, desLaque para a sequncla que codlflca
parLe da subunldade pequena do rlbossoma, uma vez que o mecanlsmo molecular da Lraduo
enconLra-se mulLo conservado em Lodas as celulas.
no caso das celulas eucarlLlcas, como o seu genoma e mulLo vasLo, em cada celula exlsLem genes no-
LranscrlLos. A expresso desLes genes depende de slnals exLerlores a celula e de ouLros genes que
codlflcam proLelnas reguladoras da aLlvldade dos prlmelros.
Dom|n|os de c|ass|f|cao dos seres v|vos: Dos procar|ontes aos eucar|ontes
As celulas classlflcam-se de acordo com a sua organlzao esLruLural e complexldade:
Celulas procarlLlcas no Lm nucleo lndlvlduallzado
Celulas eucarlLlcas Lm nucleo lndlvlduallzado
no que concerne aos seres vlvos procarlonLes, esLes podem ser dlvldldos em:
Lubactr|as: mals semelhanLes com os eucarlonLes nos processos de converso de energla e
mecanlsmos meLabllcos.
Arqueobactr|as: apresenLam malores semelhanas com os eucarlonLes na maqulnarla
geneLlca.
As celulas eucarlLlcas podero, pols, Ler resulLado da fuso de arqueobacLerlas com eubactr|as. ue
facLo, os fssels e a slmpllcldade esLruLural e funclonal das celulas procarlLlcas susLenLam a hlpLese de
os seres procarlonLes Lerem esLado na orlgem da dlversldade blolglca. AcredlLa-se os seres eucarlonLes
glna 43 de 6S

Lero surgldo 2000 mllhes de anos aps os procarlonLes, exlsLlndo duas hlpLeses para expllcar Lal
surglmenLo.
n|ptese Autogn|ca
A hlpLese auLogenlca assenLa na ldela de que cada procarlonLe reallza a sua prprla evoluo de modo
lndependenLe dos resLanLes. Asslm, os seres eucarlonLes so o resulLado da evoluo gradual dos seres
procarlonLes. Segundo esLa hlpLese, lnlclalmenLe, as celulas desenvolveram slsLemas
endomembranares resulLanLes da lnvaglnao da membrana plasmLlca. Algumas dessas lnvaglnaes
rodearam o unA e formaram o nucleo (prlmelro aconLeclmenLo). CuLras membranas deram orlgem a
organelos semelhanLes ao reLlculo endoplasmLlco rugoso, complexo de Colgl '$ -/'$0/3
no decurso da evoluo algumas pores do maLerlal geneLlco abandonaram o nucleo e evolulram
sozlnhas denLro de esLruLuras membranares, orlglnando as m|tocndr|as e c|orop|astos. lsLo resulLou na
dlvlso lnLerna das funes.
LsLe modelo e apolado pelo facLo de as membranas lnLracelulares das celulas eucarlLlcas manLerem a
mesma asslmeLrla que se verlflca na membrana plasmLlca a face volLada para o lnLerlor e semelhanLe
a face exLerna da membrana da clLoplasma e vlce-versa. ConLudo, esLa hlpLese e pouco apolada, pols
no esclarece a forma como decorreram os fenmenos nem a causa que os desencadeou.
n|ptese Lndoss|mb|t|ca
A hlpLese endosslmblLlca fol formulada quando os clenLlsLas se aperceberam das semelhanas enLre
organelos eucarlonLes e seres procarlonLes. A hlpLese endosslmblLlca admlLe que o nucleo Lenha
surgldo por lnvaglnao da membrana plasmLlca, enquanLo as mlLocndrlas e os cloroplasLos
resulLaram de organlsmos auLnomos que Lero enLrado em celulas procarlLlcas de malores
dlmenses. Lssa enLrada permlLlu o esLabeleclmenLo de relaes de slmblose enLre as celulas, as quals
beneflclaram muLuamenLe dessa assoclao, pols um elemenLo fornecla allmenLo, enquanLo o ouLro
fornecla proLeo. noLe-se, conLudo, que Lodos os organlsmos eucarlonLes possuem mlLocndrlas, mas
nem Lodos possuem cloroplasLos. uaqul se deduz que a endosslmblose que ocorreu enLre uma
eubacLerla aerblca e a archaebacLerla, levando ao desenvolvlmenLo de mlLocndrlas, fol anLerlor a
endosslmblose que resulLou no desenvolvlmenLo de cloroplasLos. ue acordo com esLa proposLa, a
assoclao enLre uma eubacLerla e uma archaebacLerla fol segulda da fuso dos genomas procarlLlcos,
dando orlgem ao genoma prlmlLlvo dos eucarlonLes.
glna 44 de 6S

Lm suma: uma celula procarlLlca de grandes dlmenses capLa ouLras mals pequenas que res|stem
d|gesto -> LsLabelecem uma relao de slmblose -> A lnLerdependncla faz com que consLlLuem um s
organlsmo -> Celulas hspedes evoluem para organelos.
Argumentos que fundamentam a h|ptese endoss|mb|t|ca
MlLocndrlas e cloroplasLos assemelham-se a bacLerlas na forma, no Lamanho e nas esLruLuras
membranares,
CloroplasLos e mlLocndrlas apresenLam as suas prprlas membranas lnLernas e dlspem dos
seus prprlos slsLemas geneLlcos (ou se[a, conLm o seu prprlo unA em moleculas clrculares e
no assoc|ado a h|stonas, que codlflcam alguns dos seus componenLes).
MlLocndrlas e cloroplasLos dlvldem-se independentemente da clula (bipartio).
Cs rlbossomas dos cloroplasLos e mlLocndrlas so mulLo mals semelhanLes em Lamanho e em
caraLerlsLlcas bloqulmlcas aos dos procarlonLes do que aos dos eucarlonLes.
As relaes de endosslmblose so comuns e verlflcam-se em organlsmos aLuals.
Cs cloroplasLos e as mlLocndrlas possuem duas membranas, na membrana lnLerna, locallzam-
se enz|mas e s|stemas de transporte semelhanLes aqueles enconLrados na membrana
clLoplasmLlca dos seres procarlonLes aLuals.
A aqulslo de uma bacLerla foLosslnLeLlca Lerla proporclonado lndependncla nuLrlclonal ao
hosplLalelro.
C modelo endosslmblLlco encerra, conLudo, algumas falhas, no expllcando de forma clara a orlgem do
nucleo da celula eucarlLlca, nem de que forma o unA nuclear conLrola a aLlvldade das mlLocndrlas e
dos cloroplasLos.
Cualquer que Lenha sldo o modelo reglsLado, a evoluo celular fol posslvel graas ao apareclmenLo de
um mecanlsmo alLamenLe eflclenLe capaz de slnLeLlzar A1 - qu|m|osmose. C A1 fornece energla
necessrla ao esLabeleclmenLo enquanLo celulas capazes de se auLo-repllcarem. uma celula eflclenLe
serla capaz de remover elecLres de um dador (P
2
), usar energla redox para esLabelecer um grad|ente
protn|co, e slnLeLlzar A1 a parLlr do gradlenLe de proLes. Cs seres que so capazes de reallzar esLe
processo de obLeno de energla aLraves de composLos mlnerals (P
2
S) deslgnam-se por
qulmloauLoLrflcos. or oposlo, os seres foLoauLoLrflcos reallzam foLosslnLese, em que a gua e o
dador de eleLres, verlflcando-se concomlLanLe llberLao de C
2
.
Da un|ce|u|ar|dade mu|t|ce|u|ar|dade
Cs organlsmos mulLlcelulares evolulram dos eucarlonLes unlcelulares. um organlsmo malor pode
movlmenLar-se mals rapldamenLe, o que faclllLa a sua allmenLao e fuga. no enLanLo, os organlsmos
no podem aumenLar lndeflnldamenLe o seu Lamanho porque a medlda que o volume da celula
aumenLa, verlflca-se um aumenLo proporclonal do meLabollsmo, mas a superflcle no aumenLa de
modo dlreLamenLe proporclonal. or no haver um aumenLo proporclonal da superflcle esLo
dlflculLadas as Lrocas com o exLerlor. Asslm, um lndlvlduo pequeno apenas pode sobrevlver de duas
formas, nomeadamenLe, adoptando um metabo||smo reduz|do ou passando a ser mu|t|ce|u|ar.
Cs seres eucarlonLes unlcelulares consLlLuem por vezes agregados. Cuando esLas assoclaes se
esLabelecem entre seres da mesma espc|e, os agregados denomlnam-se agregados co|on|a|s ou
co|n|as. A LlLulo de exemplo, a ".3".8 e uma colnla esferlca, oca, com capacldade de movlmenLo, em
que no ocorreu dlferenclao (com excepo das celulas reproduLoras), pelo que no se consldera esLe
agregado de a|gas verdes um ser p|ur|ce|u|ar, mas slm um agregado colonlal.
glna 4S de 6S

AdmlLe-se que a mulLlcelularldade Leve orlgem nos agregados colonlals. As celulas desLes agregados
sofreram dlferenclao e passaram a desempenhar funes especlallzadas, comporLando-se como um
s lndlvlduo. verlflca-se, enLo, comun|cao, coordenao, espec|a||zao e d|v|so de tarefas, o que
confere ao lndlvlduo capacldades superlores do que as verlflcadas em cada uma das celulas eucarlonLes
de 8'0 #'.

Vantagens da mu|t|ce|u|ar|dade
Crande lmpulso na evoluo dos seres vlvos - a orlgem dos eucarlonLes e a evoluo da
mulLlcelularldade esLlveram na orlgem de uma exploso de dlversldade blolglca,
A grande dlversldade de formas que fol surglndo permlLlu uma adapLao a dlferenLes
amblenLes,
lol posslvel a sobrevlvncla de seres de malores dlmenses sem compromeLer as Lrocas
com o melo exLerno, pols o volume e a superflcle aumenLam de forma proporclonal,
Craas a especlallzao, fol posslvel aumenLar a eflccla na uLlllzao de energla e
desempenho de deLermlnadas funes,
osslblllLou aos organlsmos uma malor lndependncla em relao ao melo exLerno, pols os
vrlos slsLemas de rgos passaram a conLrlbulr para a manuLeno do melo lnLerno em
condles favorvels a vlda homeostas|a.
Seres mu|t|ce|u|ares
|antas
As planLas so consLlLuldas por Lrs Llpos de Lecldo:
<$.%() =+&&%# celulas de parnqulma cloroflllno que parLlclpam em reaes meLabllcas
(fotoss|ntese), F)??'"->A./ e #-?'0/0-> suporLe esLruLural por celulas robusLas.
>#$,23 =+&&%# cobre a superflcle, conferlndo proLeo a planLa e aLuando na absoro de
nuLrlenLes
?2&0%32$ =+&&%# floema e xllema slsLema vascular

glna 46 de 6S

An|ma|s
Cs anlmals so consLlLuldos por quaLro Llpos de Lecldos:
1ec|do ep|te||a| Lecldo de revesLlmenLo, que cobre a superflcle do corpo e de vrlos rgos
lnLernos, sendo consLlLuldo por celulas dlsposLas de modo ad[acenLe. 8evela-se essenclal para
proLeo, absoro e secreo.
1ec|do con[unt|vo Lecldo no qual se enconLram celulas dlspersas numa maLrlz. lnclul o Lecldo
sseo, o Lecldo carLllaglneo e o Lecldo adlposo. ue acordo com dlferenLes auLores, o sangue
pode ser conslderado um Llpo de Lecldo con[unLlvo, uma vez que as celulas sangulneas
enconLram-se dlspersas no plasma (maLrlz flulda).
! Sangue assegura, enLre ouLras, funes de LransporLe (de oxlgenlo, nuLrlenLes,
factores, hormonas), e resposta imune.
1ec|do Nervoso
1ec|do Muscu|ar lmpllcado na fora e movlmenLo.
Lstrutura e organ|zao ce|u|ar
C|u|as procar|t|cas
As celulas procarlLlcas so anucleadas. Lmbora no dlsponham de nucleo, esLas celulas possuem um
nuclelde unA dlsperso no clLoplasma no assoclado a hlsLonas, sob a forma de uma unlca molecula
(um cromossoma) clrcular. Algumas bacLerlas conLm p|asm|deos unA celular exLracromossmlco
com repllcao lndependenLe do nuclelde. LsLas esLruLuras so mulLo usadas em conLexLo laboraLorlal
como vetores.
As celulas procarlLlcas so geralmenLe mals pequenas e slmples, apresenLando um genoma menos
complexo, em Lermos esLruLurals, desLaca-se alnda:
arede ce|u|ar rlglda e porosa, composLa por pollssacarldeos e pepLldos pept|dog||cano,
mure|na ou muco. LsLa parede permlLe o lsolamenLo da bacLerla, conLrlbulndo para a
manuLeno da homeostas|a. ConLudo, a parede consLlLul Lambem o local de ao de alguns
anLlblLlcos.
Membrana p|asmt|ca A membrana e formada por proLelnas, llpldos e gllcldos. A
consLlLulo da membrana celular e semelhanLe em Lodos os organlsmos, de Lal modo que,
mesmo nos procarlonLes, esLa e formada por uma blcamada de fosfollpldos com uma cabea
hldroflllca e uma camada hldrofblca (molecula anflpLlca). noLe-se que, como a parede e
porosa, e a membrana que faz a verdadelra separao enLre o melo lnLerno e o exLerno. nos
procarlonLes, a membrana plasmLlca consLlLul a sede da aLlvldade resplraLrla, ou se[a,
consLlLul o local ao qual se enconLram acopladas as enzlmas resplraLrlas e foLosslnLeLlcas.
Cpsu|a: Algumas bacLerlas e clanfllas possuem, exLernamenLe a parede celular, uma cpsula
consLlLulda por pollssacarldeos, pollpepLldos e complexos. normalmenLe, esLa cpsula possul
anLlgenlos que conferem reslsLncla a fagoclLose, sendo lmporLanLe na adeso de celulas a
subsLraLo e na proLeo conLra a dlsseo.
C|top|asma: no clLoplasma dos procarlonLes no se enconLram organelos membranares (no
possuem endomembranas) nem clLosqueleLo. LxlsLem granulaes que correspondem aos
rlbossomas procarlLlcos (consLlLuldos por r8nA e proLelnas, Lal como nos eucarlonLes),
exlsLlndo alnda vrlos Llpos de lncluses clLoplasmLlcas.
k|bossomas Cranulaes consLlLuldas por r8nA e proLelnas.
glna 47 de 6S

|gmentos fotoss|ntt|cos - nas bacLerlas foLosslnLeLlcas, os plgmenLos foLosslnLeLlcos
(clorofllas bacLerlanas) locallzam-se na membrana de veslculas. nas clanfllas, o aparelho
foLosslnLeLlco e consLlLuldo por lamelas (slsLemas de membranas sobreposLas, semelhanLes ao
Cram, derlvados de lnvaglnaes da membrana plasmLlca). LnLre essas lamelas, enconLram-se
grnulos clnaossomas que conLm os plgmenLos foLosslnLeLlcos. noLe-se que as clanfllas
cu[a esLruLura da parede celular e semelhanLe a das bacLerlas Cram- (6%,' %"*0/). LsLas bacLerlas
possuem um lnvlucro gelaLlnoso.
Algumas celulas bacLerlanas apresenLam pro|ongamentos de superf|c|e:
! I|age|os (pollmeros de flagellna): fllamenLos que se llgam a um grnulo basal
lnLracelular. C seu numero e lmplanLao so mulLo varlvels podendo nem exlsLlr
bacLerlas aLlplcas. C senLldo de roLao do flagelo deLermlna a dlreo de movlmenLo
da bacLerla.
! I|mbr|as (ou 8%?%): so fllamenLos anlogos aos flagelos, embora se[am mals curLos,
flnos e numerosos que os flagelos. As flmbrlas no esLo assocladas a locomoo,
servlndo slm de adeso ao melo, forma de parLllha de maLerlal geneLlco ('343 maLerlal
codlflcanLe para reslsLnclas) ou melo de absoro de cerLos fagos.
As celulas procarlLlcas dlvldem-se por
d|v|so am|tt|ca - a molecula de unA
sofre repllcao semlconservaLlva (uma
molecula de unA produz duas
moleculas fllhas ldnLlcas a molecula
orlglnal, cada uma delas conLendo uma
das cadelas da molecula orlglnal e uma
nova cadela recem-slnLeLlzada). Segue-
se uma dlvlso que orlglna uma nova
celula. Lssa dlvlso ocorre por
blparLlo peranLe a ausncla de um
aparelho mlLLlco. noLe-se que a Laxa
de cresclmenLo celular e deLermlnada
pela Laxa meLabllca (menor Lamanho
condlclona malor Laxa meLabllca).
Co|orao Gram
A malorla dos procarlonLes apresenLa parede celular (algumas bacLerlas no Lm, ouLras perdem-na
permlLe mudana de forma, malor elasLlcldade), a qual se revela mulLo uLll dado o seu desenvolvlmenLo
preferenclal em melos hlpoLnlcos. C pept|dog||cano (Lambem deslgnado por murelna) consLlLul o
prlnclpal consLlLulnLe da parede celular, permlLlndo o lsolamenLo da bacLerla para manuLeno da
homeosLasla.
C pepLldogllcano e consLlLuldo por dols Llpos de amlno-aucares em alLernncla (NAG e NAMA),
formando camadas llneares, as quals se unem enLre sl aLraves de amlnocldos, alguns deles Llplcos dos
procarlonLes (||gaes 1,4). As unldades monomerlcas das murelna so produzldas no lnLerlor das
celulas, sendo LransporLadas para o exLerlor aLraves da membrana clLoplasmLlca, para ocuparem o seu
lugar na parede celular. SubsequenLemenLe, ocorre llgao de monmeros no exLerlor da celula. noLe-
se que subsLnclas como o pepLldogllcano, que so slnLeLlzadas com monmeros dlferenLes, deslgnam-
se por heteropo||meros.
glna 48 de 6S

A parede celular apresenLa dlferenas consoanLe o Llpo de bacLerla. Lssas dlferenas so evldencladas
pela reao das paredes a co|orao de Gram. LsLa colorao permlLe dlsLlngulr o Llpo de bacLerlas
conforme flquem coradas de roxo (Cram+) ou de vermelho (Cram-).
C prlmelro procedlmenLo passa por corar as bacLerlas com roxo de meLllo e, depols, adlclonar lugol. C
lugol acLua num senLldo de preclplLar o coranLe nas celulas, a[udando a sua flxao. ue segulda, faz-se
uma lavagem com lcool-aceLona (des|dratao) e, por flm, adlclona-se fucslna clda (coranLe
vermelho) que apenas val flcar nas bacLerlas que no foram capazes de flxar o roxo aps a lavagem
(d|ferenc|ao).

Os antibiticos -lacLmlcos (classe na qual se lnclul a pen|c|||na) lnlbem a aco das 8s, responsvels
pela unlo dos pollpepLldos, levando a dlmlnulo da produo de pepLldogllcano. Asslm, esLes
frmacos so preferenclalmenLe usados em bacLerlas Cram +, nas quals a dlmlnulo da produo de
pepLldogllcano Lorna-as menos reslsLenLes a ruLura por choque osmt|co. or seu Lurno, as bacLerlas
Gram - (vermelho)
Como o global do pepLldogllcano e
menor, o lcool-aceLona reLlra o roxo
de meLllo, delxando a parede
permeve| e posslblllLando que a
fucs|na preencha os poros vazlos,
corando a bacLerla.
Menos pepLldogllcano -> Menos densa -
> Menos rlglda -> Mals ellpslde
(bacllos). LxlsLem Lambem, conLudo,
cocos Cram negaLlvos.
A parede possul um elevado Leor de
||p|dos a[udam a fazer llgao enLre a
membrana e o pepLldogllcano no
espao perlplasmLlco.
Gram + (roxo)
llcam coradas de roxo
90 pepLldogllcano
uuranLe a dlferenclao por lcool-aceLona
desidratam, murcham e retm o roxo no
pepLldogllcano, flcando |mpermeve|s e
lmposslblllLando que a fucs|na c|da as
core
Mals pepLldogllcano -> Mals denso -> Mals
rlgldo -> Mals esferlcas (cocos). LxlsLem
Lambem, conLudo, bacllos Cram poslLlvos.
arede no possul llpldos, mas prote|nas,
c|dos f|c|cos e fe|cubn|cos.
glna 49 de 6S

Cram - so menos afeLados por esLe Llpo de anLlblLlco. As bacLerlas podem, conLudo, desenvolver
resistncia aos -lactmicos, nomeadamente atravs da produo de -lacLamases, enzlmas que
degradam o anel -lacLmlco dos anLlblLlcos em quesLo. Asslm, e comum co-admlnlsLrar um
antibitico -lactmico com um inibidor das -lacLamases ('343 amoxlclllna + cldo clavulnlco).
or seu Lurno, a enzlma ||soz|ma quebra as llgaes enLre os amlno-aucares da murelna, fazendo com
que as bacLerlas percam rlgldez e morram por choque osmLlco. A llsozlma e parLe do slsLema lmune
lnaLo, enconLrando-se presenLe em lnumeras secrees, Lals como as lgrlmas e a sallva asslm, a
lisozima participa na primeira linha de defesa, evitando a entrada de agentes patognicos no
organlsmo.
A presso osmLlca e mulLo elevada nas celulas bacLerlanas, devldo a abundnc|a de cat|es,
macromo|cu|as e am|noc|dos. A ausncla de parede celular em algumas bacLerlas provoca o aumenLo
de volume celular por enLrada de gua, a sua Lurgescncla e posLerlor llse celular.

Se a parede celular for desLrulda

As formas L so bacLerlas que perdem a parede celular, manLendo o cresclmenLo e a capacldade de se
propagarem, pols adqulrem uma presso osmLlca reduzlda (passam a ser lnsenslvels a ant|b|t|cos, ou
se[a, esLes causam-lhe perda de parede celular, mas as bacLerlas desenvolvem adapLaes que lhes
permlLem sem parede). So revert|ve|s a forma bacter|ana norma|.
Cs m|crop|asmas so anlogos a forma L, uma vez que no possuem parede celular. no enLanLo, lsso
deve-se ao facLo de Lerem um unA pecullar, e por lsso, no so reverLlvels (no ganham parede celular).
C|u|as Lucar|t|cas
As celulas eucarlLlcas surglram h 1,3 bllles de anos. LsLas celulas possuem organelos celulares
membranares, lnclulndo um nucleo envolvldo por uma membrana nuclear dupla e conLendo nucleolos.
ue facLo, nas celulas eucarlLlcas, o maLerlal geneLlco esL organlzado em cromossomas, nos quals o
unA esL assoclado a hlsLonas.
As celulas eucarlLlcas dlvldem-se por mlLose e melose, apresenLando aparelho mlLLlco. ara alem
dlsso, esLas ceulas possuem rlbossomas, os quals apresenLam malores dlmenses que os rlbossomas
procarlLlcos.
nas c|u|as an|ma|s, no h parede celular nem plasLldeos. A dlvlso celular faz-se por consLrlo do
clLoplasma e da membrana celular. or oposlo, nas c|u|as vegeta|s, exlsLe parede celular celulslca e
plasLldeos. C seu aparelho mlLLlco no possul cenLrlolos e a dlvlso celular faz-se por cresclmenLo
cenLrlfugo de uma placa.
V|rus
Cs vlrus no se lncluem nos procarlonLes nem em eucarlonLes, e conseguem lnfeLar Lodos os domlnlos
sendo que dlferenLes vlrus podem lnfeLar um mesmo organlsmo. Cs vlrus so consLlLuldos por uma
nuc|eocps|de prote|ca que conLem unA ou 8nA, mas nunca os dols cldos nuclelcos em slmulLneo.
noLe-se que, na malorla dos 8nA vlrus o 8nA e converLldo dlrecLamenLe em maLerlal proLelco no
interior das clulas parasitadas. Nos retrovrus (como o caso do HIV), contudo, necessrio que esse
Gram + protop|asto
Cram - esterop|asto
glna S0 de 6S

8nA se[a lnlclalmenLe converLldo em unA, o qual posLerlormenLe e LranscrlLo em 8nA e Lraduzldo em
proLelnas.
A organlzao dos vlrus varla, de Lal modo que, quanLo a sua morfologla, os vlrus podem apresenLar:
Iorma Icosadr|ca: nucleocpslde com 20 faces consLlLuldas por unldades de esLruLura
capsmeros prote|cos
S|metr|a he||co|da|: alongados e basLoneLlformes. As unldades de esLruLura dlspem-se em
hellce, envolvendo lnLerlormenLe o cldo nuclelco, que Lambem se dlspe em hellce, de forma
que o lnLerlor do vlrus flque oco.
Cs vlrus podem alnda apresenLar
uma esLruLura mals complexa, que
lnclul, para alem da nucleocpslde
e maLerlal geneLlco (cabea), uma
cauda que serve para flxao do
vlrus a celula hospedelra. Lm
mulLos vlrus, a proLelna da
nucleocpslde e clrcundada por
um envelope (Lambem deslgnado
por lnvlucro), o qual e consLlLuldo
por uma blcamada de membrana
llpldlca assoclado a proLelnas. Cs
vlrus com envelope adqulrem-no
por um processo aLraves do qual
abandonam a celula hospedelra
sem romper a membrana celular
(e por, consegulnLe, sem llsar a celula em quesLo). Asslm, uma parLe da membrana celular dessa celula
acaba por se desprender, rodeando a parLlcula vlral. As proLelnas do envelope vlral so, conLudo,
codlflcadas pelo genoma v|ra|, e no pelo da celula hospedelra.
Os vrus so considerados parasitas intracelulares, dado serem incapazes de se reproduzlr fora da
celula hospedelra. ara se repllcarem, os vlrus so capazes de colocar os slsLemas de repllcao,
Lranscrlo e Lraduo do hospedelro na subordlnao do seu genoma.
V|rus An|ma|s o seu genoma e mulLo mals manlpulvel que o das celulas hospedelras (so
endoclLados pela celula e denLro dela llberLam o cldo nuclelco). So um lmporLanLe lnsLrumenLo
na blologla molecular slsLemas slmples com genoma pequeno e cu[a reproduo depende do
meLabollsmo da celula hospedelra.
kep||cao dos v|rus
Cs vlrus necesslLam de lnfecLar celulas para se repllcarem so paras|tas |ntrace|u|ares obr|gatr|os.
Cs vlrus aderem a superflcle das celulas aLraves das flbras caudals e da placa caudal, ln[ecLando
subsequenLemenLe o seu unA ou 8nA no melo lnLracelular (caso as celulas-alvo se[am bacLerlas, os
vrus so forados a digerir as ligaes do peptidoglicano atravs de uma enzima presente na sua
cauda). osLerlormenLe, h desorganlzao LoLal do meLabollsmo celular - o maLerlal geneLlco vlral
comea a ser repllcado e LranscrlLo e Lraduzldo em proLelnas (capsmeros do caps|deo). Asslm, os vlrus
subverLem os mecanlsmos energeLlcos das celulas para seu provelLo, e exploram o meLabollsmo para se
mulLlpllcarem, acabando a bacLerla por sofrer llse.
glna S1 de 6S

Cs bacter|fagos (vlrus que lnfeLam as bacLerlas) ln[eLam na bacLerla apenas os cldos nuclelcos, sendo
que as proLelnas do capsldeo no peneLram na bacLerla. A sua repllcao lmpllca as segulnLes eLapas:
1- C vlrus e endoclLado pela celula hospedelra,
2- C capsldeo abre llberLando o cldo nuclelco,
3- rlmelro produz-se m8nA vlral e s depols ocorre produo de unA,
4- novas nucleocapsldes so formadas, sendo exoclLadas mulLas vezes sem provocar morLe
celular no hospedelro, e podendo adqulrlr envelopes.
Lm Lermos medlcos, os bacLerlfagos foram uLlllzados como alLernaLlva a anLlbloLerapla, na Lerapla de
algumas lnfeces bacLerlanas. AcLualmenLe, esLa prLlca permanece em alguns palses da ex-unlo
SovleLlca.
r|es (rc)
Cs prles no so vlrus nem bacLerlas, pols no possuem unA nem 8nA. Cs prles so, pols, parLlculas
lnfecLanLes consLlLuldas por proLelnas modlflcadas na sua esLruLura Lerclrla. LsLas esLruLuras possuem
a mesma sequncla de amlnocldos que as proLelnas normals, embora Lenham sofrldo alLeraes no
processamenLo ps-Lraduo que orlglna a esLruLura Lerclrla proLelca. LsLa descoberLa derrubou o
dogma de que a sequncla de amlnocldos e que deLermlnava a funo da proLelna.
Cs prles consLlLuem os agenLes paLogenlcos de uma serle de doenas relaLlvamenLe raras, Lals como a
lnsnla famlllar faLal e a doena de CreuLzfeldL-!akob. no caso desLa ulLlma doena, uma sua varlanLe de
carcter mais indolente (popularmente conhecida como doena das vacas loucas) consLlLul um
lmporLanLe problema de saude publlca desde os anos 90.

glna S2 de 6S

Metodo|og|a de estudo da c|u|a: M|croscop|a
C m|croscp|o permlLe no s ampllar aqullo que vemos, mas Lambem ver mals ponLos como ponLos
dlsLlnLos, pols permlLe uma resoluo malor que uma slmples lupa. LxlsLem dols grandes Llpos de
mlcroscplo, nomeadamenLe o m|croscp|o de |uz, onde e posslvel ver aLe ao nlvel subcelular, e o
m|croscp|o e|ectrn|co, que LeorlcamenLe posslblllLa ver aLe aos Lomos.
L|m|te de keso|uo
C llmlLe de resoluo de um mlcroscplo conslsLe a dlsLncla mlnlma enLre dols ponLos de um ob[ecLo
em que esLes so posslvels de ser observados como ponLos dlsLlnLos, exprlmlndo-se em subunldades do
meLro. C llmlLe de resoluo de um m|croscp|o pt|co e calculado pela frmula:
=
0,61\
qsInu
, sendo o valor do comprimento de onda utilizada, e correspondendo x sin
aberLura numerlca (6%,' %"*0/).

C llmlLe de resoluo mlnlmo do mlcroscplo pLlco, por causa da radlao, e de 200 nm, ou se[a, no
se conseguem observar esLruLuras que dlsLam menos de 200 nm, correspondendo esLa dlsLncla aquela
que aproxlmadamenLe exlsLe enLre os organelos. C mlcroscplo elecLrnlco Lem um llmlLe de resoluo
Lerlco de 0,1 nm, mas, na prLlca, o llmlLe de resoluo e menor que 1 nm.
A abertura numr|ca (NA) corresponde ao Lamanho do ralo de luz que enLra na lenLe depols de passar
pelo especlmen - a luz e dlrlglda para o especlmen pelo condensador e, depols de passar pelo
especlmen, recolhlda pela ob[ecLlva. Como referldo anLerlormenLe, nA corresponde ao denomlnador da
frmula do llmlLe de resoluo, em que corresponde ao lndlce de refraco do melo e ao ngulo de
lncldncla.
C llmlLe de resoluo e lnversamenLe proporclonal ao poder de reso|uo, sendo que um e|evado Lk e
lneflcaz, pols cursa com vlsuallzao de menos pormenores (menor poder de resoluo). or ouLras
palavras, peranLe um elevado L8, malor ser a dlsLncla necessrla para lndlvlduallzar dols ponLos.
A lmagem de um mlcroscplo pLlco e obLlda pelo contraste resulLanLe da absoro d|ferenc|a| da |uz
pe|os d|ferentes componentes ce|u|ares. Cs coranLes aumenLam esLe conLrasLe, na medlda em que
proporclonam a ocorrncla de dlferenLes aLrasos na propagao da luz (cu[os ralos so absorvldos e
reLransmlLldos de modos dlferenLes consoanLe o coranLe) que so Lraduzldos em dlferenLes brllhos,
aumenLando o conLrasLe resulLanLe da absoro dlferenclal da luz e permlLlndo a vlsuallzao e
dlferenclao das esLruLuras.
reparao de |m|nas de m|croscop|a
I|xao
A flxao conslsLe na paragem de processos meLabllcos e auLollLlcos com conservao de morfo|og|a,
endurecendo as celulas e os Lecldos e aumenLando a aflnldade das esLruLuras para os coranLes
clLolglcos. A durao da flxao depende da naLureza do Lecldo, do Lamanho do bloco de maLerlal e da
LemperaLura a que e felLa. 1emperaLura amblenLe posslblllLa uma flxao mals rplda, enquanLo
LemperaLuras mals balxas (na ordem dos 4C) permlLem uma flxao mals homogenea.
glna S3 de 6S

Cs flxadores podem se classlflcar em coagulanLes e no-coagulanLes. Cs flxadores coagu|antes
provocam a preclplLao das proLelnas, desnaLurando lrreverslvelmenLe as proLelnas soluvels por
agluLlnao. or seu Lurno, os flxadores no-coagu|antes formam llgaes cruzadas reverslvels enLre
grupos reacLlvos das proLelnas (forma|de|do, g|utara|de|do), ou oxldam fosfollpldos (tetrx|do de
sm|o). LsLes flxadores preservam a esLruLura secundrla e Lerclrla das proLelnas, permlLlndo uma
malor preclso na observao do pormenor. Como o nome lndlca, os flxadores no-coagulanLes crlam
llgaes enLre as proLelnas, no poLenclando a sua coagulao.
Inc|uso
A lncluso permlLe aumenLar a dureza do maLerlal a observar, para que depols se possam fazer corLes
flnos. ConsoanLe o Llpo de mlcroscopla, a lncluso processa-se em dlferenLe maLerlal:
M|croscop|a Cpt|ca: paraflna llqulda a parLlr dos 33C
M|croscop|a L|ectrn|ca: reslnas LCN, porque, como os corLes so mals flnos, e necessrlo
que o maLerlal de lncluso se[a mals duro.
Corte
no corLe podem ser usados os segulnLes lnsLrumenLos:
M|crmoto (para corLes em paraflna) C mlcrLomo Lem um regulador da espessura de corLe.
Cs corLes, ao salr, formam uma tn|a (encarr||hada). As faLlas so posLas num banho a 37C
para desencarrllhar e puxadas para a lmlna onde so coradas com cola de albumlna.
U|tra-m|crmoto (para reslnas) C ulLra-mlcrLomo assegura corLes ulLraflnos, usando focals
especlals de vldro ou dlamanLe. C corLe ulLraflno flca em gua e refracLe. L puxada para uma
grelha de mlcroscopla elecLrnlca em cobre.
Desparaf|nao
A desparaflnao conslsLe na remoo da paraflna do corLe, sendo levada a cabo em corLes
hldrofblcos. LsLe processo conslsLe na lnLroduo dos corLes em x||o| (o qual faz a lnLerface enLre
paraflna e eLanol) e, subsequenLemenLe, em concenLraes decrescenLes de eLanol.
Co|orao
Cs corantes usados em mlcroscopla so usados em funo das dlferenLes aflnldades com as esLruLuras
celulares. As |acas aumenLam a aflnldade enLre o coranLe e as esLruLuras a corar.
Cs corantes auxocrm|cos so coranLes hldroflllcos que conLm radlcals lonlzvels corados, podendo
ser bs|cos (Lals como a hemaLoxlllna, azul de meLlleno e azul de Loluldlna) ou c|dos (Lals como a
eoslna e fucslna clda). Cs coranLes bslcos Lm aflnldade para os componenLes basfllos dos Lecldos
(ou se[a, cldos, Lals como os cldos nuclelcos), enquanLo os coranLes cldos Lm aflnldade para as
esLruLuras acldfllas (ou se[a, bslcas, Lals como algumas proLelnas). C corante de Wr|ght (usado
parLlcularmenLe nas celulas sangulneas) e a co|orao de hematox|||na + eos|na consLlLuem exemplos
de coloraes auxocrmlcas com uma componenLe clda e uma componenLe bslca.
or seu Lurno, os corantes ||socrm|cos dlssolvem-se nos componenLes da celula ('343 os sudes
dlssolvem-se nos llpldeos). LsLes coranLes so usados para mlcroscopla elecLrnlca para elemenLos de
elevado numero aLmlco que dlspersam os elecLres (Lals como o urnlo, chumbo)
glna S4 de 6S

1|pos de m|croscop|a
M|croscop|a de Contraste de Iase
As varlaes de densldade do maLerlal lmpllcam a
passagem de radlao em dlferenLes fases as quals
so Lransformadas em dlferenas de conLrasLe
(forma um relevo), permitindo diferenciar clulas
vlvas.
Lm regles mals densas, como o nc|eo, a radlao
sofre um reLardamenLo, enquanLo as que
aLravessam regles de menor reslsLncla, flcam em
fase. uessa forma, essas dlferenas de fase da
radlao, nos dlferenLes locals da celula, vo ser
converLldas pelos mlcroscplos de conLrasLe de
fase, num conLrasLe, onde esLruLuras mals
densas so menos brilhantes, enquanto as
menos densas so mais brilhantes.
M|croscop|a de Contraste de Interfernc|a D|ferenc|a| de Nomarsk|
1raLa-se de uma varlanLe de mlcroscopla de conLrasLe de fase (verlflca-se converso de dlferenas de
fase num conLrasLe), em que os ob[ecLos, nas lmagens, parecem Ler uma sombra, algo que resulLa de
uma dlferena no lndlce de refraco relaLlvamenLe ao melo. lsLo e parLlcularmenLe uLll para a
observao de ob[ecLos espessos e pequenos deLalhes.
M|croscop|a L|ectrn|ca de 1ransm|sso (1LM)
A mlcroscopla elecLrnlca de Lransmlsso uLlllza
um fe|xe de e|ectres e no de foLes (pLlco).
ApresenLa um llmlLe de resoluo menor
(comprlmenLo de onda menor), pelo que o
poder de resoluo ser malor, permlLlndo a
observao da ulLra-esLruLura da celula.
A preparao dos especlmenes para vlsuallzao
a mlcroscopla elecLrnlca segulr um con[unLo de
procedlmenLos:
1. Colocar o especlmen num suporLe e
encobrl-lo com um meLal pesado
evaporado do fllamenLo,
2. 8ecobrlr o especlmen com uma pellcula
de carbono e mergulhar o maLerlal na superflcle de um solvenLe poderoso (que o dlssolve)
3. Colocar o especlmen numa grelha de examlnao.
Aps a preparao do especlmen, esLe e colocado no mlcroscplo onde val ser aLravessado por um felxe
de elecLres (orlglnados num fllamenLo de LungsLenlo, acelerados por dlferena de poLenclal e emlLldos
por cLodos em vcuo), o que resulLa na morLe de celulas que esLlvessem evenLualmenLe vlvas. Como as
celulas so mulLo permevels a passagem de elecLres e os meLals pesados no, crla-se uma flxao a
glna SS de 6S

base de elemenLos densos, como o smlo, ou o aceLaLo de uracllo, levando a genese do conLrasLe (ou
se[a, as esLruLuras conLendo Lomos de elevado numero aLmlco desvlam ou dlspersam os elecLres,
flcando, asslm, elecLronodensos na lmagem fluorescenLe).
M|croscop|a Cr|oe|ectrn|ca
ConslsLe na congelao mulLo rplda do maLerlal blolglco em azoto ||qu|do, sendo parLlcularmenLe uLll
para a ldenLlflcao de vlrus. ode preceder o processo de sombreamento met||co, algo que e uLll para
observar o lnLerlor das membranas blolglcas.
Sombreamento Met||co
ConslsLe na colocao de um meLal pesado no maLerlal blolglco, obLendo-se uma repllca da superflcle
que se consegue ver a mlcroscplo elecLrnlco, Lal como se de um molde se LraLasse.
M|croscop|a L|ectrn|ca de Varr|mento
Cuando observamos esLruLuras em mlcroscopla elecLrnlca de varrlmenLo, fazemos lncldlr elecLres em
ngulos dlferenLes relaLlvamenLe aos do mlcroscplo elecLrnlco de Lransmlsso. CbLemos, asslm, uma
lmagem da superflcle do maLerlal (que no e aLravessada pelos elecLres), embora o llmlLe de resoluo
se[a malor.
M|croscop|a de I|uorescnc|a
ALraves de mlcroscopla de fluorescncla, e posslvel deLecLar f|uorocromos, moleculas fluorescenLes. um
composLo dlz-se fluorescenLe caso absorva luz a um dado comprlmenLo de onda de exclLao e, por
consequncla, emlLa luz num malor comprlmenLo de onda especlflco. So, por lsso, deLecLadas duas
radlaes uma assoclada a exclLao de elecLres e ouLra a emlsso de energla por parLe desLes.
Asslm, na m|croscop|a de f|uorescnc|a (lmunoclLofluorescncla), uLlllza-se um fllLro que delxa passar
apenas as radlaes que exclLam os fluorocromos. Craas a ouLro fllLro, vemos Lambem somenLe as
radlaes lumlnosas emlLldas pelos fluorocromos. C resLo aparece a negro.
uado exlsLlrem mulLo poucas moleculas naLuralmenLe fluorescenLes, somos forados a recorrer a
Lecnlcas de lmunoclLoqulmlca uLlllzamos, pols, anLlcorpos com fluorocromos, pols os anLlcorpos so
mulLo especlflcos para deLermlnados anLlgenlos.
odemos classlflcar as Lecnlcas de lmunoclLoqulmlca em (l) d|rectas, se recorrerem somenLe a um
anLlcorpo marcado para cada molecula, o que se faz mulLo raramenLe, e (ll) |nd|rectas, se recorrerem a
um ant|corpo pr|mr|o, ao qual se llgam vrlos ant|corpos secundr|os marcados (sendo que os dols
anLlcorpos Lm de ser produzldos em dlferenLes anlmals s asslm os anLlcorpos secundrlos
reconhecem o anLlcorpo prlmrlo como um anLlgenlo). odem lgualmenLe ser usadas enzlmas com
marcao fluorescenLe.
uado o conLrasLe nas lmagens de fluorescncla ser Lo grande, e posslvel ver esLruLuras menores que
200 nm, a menos que dlsLem enLre sl menos que 200 nm. As lmagens de mlcroscopla de fluorescncla
podem apresenLar um fundo ((.+&#), algo que e superado com recurso a radlao laser mulLo lnLensa
em mlcroscplos mals soflsLlcados. A m|croscop|a confoca| e de convo|uo permlLem observaes de
esLruLuras Lrl-dlmenslonals sem aberraes de lmagem. A m|croscop|a de Apo-1ome permlLe um
aumenLo de nlLldez nas lmagens obLldas por mlcroscopla de fluorescncla.

glna S6 de 6S

<$##( @3%.$#&0#(/ A$./#+( (GIB
LsLa proLelna permlLe-nos ver, com recurso a Lecnlcas de fluorescncla, celulas vlvas ou proLelnas. or
vezes, crlam-se proLelnas hlbrldas com um segmenLo de Cl, o qual no alLera o funclonamenLo naLural
destas e permite ver o seu caminho natural.
@C$&/#$ D#&.(2(0# E(#$6; =$2(&:#$ (IkL1)
LsLa Lecnlca de mlcroscopla de fluorescncla permlLe observar a lnLeraco dlrecLa enLre duas moleculas
mulLo prxlmas (nomeadamenLe reaces de Lransferncla de energla).

@3%.$#&0#(0# D#0."#$; F:/#$ A1./.53#201+(6 (IkA)
LsLa Lecnlca e uLll para a observao da clneLlca molecular, pols faz-se um branqueamenLo de Lodas as
moleculas fluorescenLes numa rea resLrlLa e depols val-se acompanhando as mlgraes moleculares,
ou seja, a sua recuperao.
=./23 G(/#$(23 D#:3#0/+.( @3%.$#&0#(0# *+0$.&0.-# (1IkI)
LsLa Lecnlca faz com que a radlao a laser de exclLao passe aLraves da lenLe ob[ecLlva, asslm como a
radlao de fluorescncla. lsLo exclLa os elecLres que esLo a mals a superflcle na lmlna, permlLlndo
vlsuallzar apenas moleculas lndlvlduals especlflcas.
glna S7 de 6S

Metodo|og|a de estudo da c|u|a: Cu|tura e fracc|onamento ce|u|ar
Iso|amento e Cu|tura Ce|u|ar
M|crod|sseco por 32&#$
LsLe processo permlLe recorLar regles da celula mulLo selecLlvamenLe, submeLendo-as a radlao ?/#'0
aps esLas Lerem sldo coberLas por um pollmero
C|tometr|a de f|uxo
A c|tometr|a de f|uxo
permlLe a separao de
celulas aLraves da dlferena
de cargas. Algumas celulas
so marcadas por
fluorescncla, sendo que as
marcadas recebem uma
deLermlnada carga,
enquanLo as no-marcadas
recebem ouLra.
osLerlormenLe, e felLa uma
Lrlagem com base nas
cargas das celulas. C
processo de clLomeLrla de
fluxo e amplamenLe usado
na prLlca cllnlca um
exemplo lnLeressanLe
prende-se com a dlsLlno
enLre doenas lnLersLlclals do pulmo, para a qual e essenclal conhecer quals as populaes llnfoclLrlas
predomlnanLes Lal anllse faz-se por clLomeLrla de fluxo, uma vez que os llnfclLos so
hlsLologlcamenLe lndlsLlngulvels enLre sl.
Cu|tura de c|u|as +( "+".
A cu|tura de c|u|as +( "+". e mulLo lmporLanLe em Lermos clenLlflcos, sendo acelLe em Lermos eLlcos e
poupando recursos flnancelros. LsLas celulas so culLlvadas em melo de culLura llquldo, assepLlco e
suplemenLado com amlnocldos, vlLamlnas e soro anlmal. Lmbora esLas celulas manLenham as
caracLerlsLlcas das orlglnals, exlsLe a posslbllldade da sua conLamlnao com mlcroorganlsmos.
As celulas humanas normals podem se dlvldlr num numero llmlLado de vezes (normalmenLe aLe 40
vezes), morrendo posLerlormenLe. ConLudo, algumas celulas normals de roedores e, sobreLudo, algumas
llnhagens de celulas Lumorals Lm a capacldade de se dlvldlr lndeflnldamenLe ||nhas de c|u|as
|morta|s. um exemplo dessas celulas so as c|u|as da ||nhagem neLa que Lm orlgem em celulas de
cancro do colo do uLero.
As celulas lmorLals culLlvadas %" 6%6) so uLlllzadas na crlao de c|u|as h|br|das. As celulas hlbrldas
resulLam da culLura de duas celulas com conLeudo geneLlco no mulLo dlferenLe. ara se crlarem celulas
hlbrldas, recorre-se ao po||et||enog||co|, formando-se um 1#/#$.02$;.(, na sequncla de um aumenLo
glna S8 de 6S

da permeabllldade membranar. SubsequenLemenLe, formam-se, por mlLose, celulas com lnformao
geneLlca de ambos os Llpos de celulas, as quals so selecclonadas das resLanLes num melo nuLrlLlvo
especlflco (a culLura nesLe melo permlLe que apenas as celulas que se fundlram sobrevlvam, morrendo
Lodas as celulas que no se fundlram). As celulas
selecclonadas prollferam e orlglnam celulas hlbrldas,
as quals so, posLerlormenLe, clonadas. orem, a
prollferao Lem de ser esLlmulada as celulas so
adlclonadas a um melo de culLura, conLendo
nutr|entes e factores de cresc|mento (sal, gllcose,
amlnocldos, vlLamlnas, soro-pollpepLldeos de
cresclmenLo). ueslgna-se por culLura prlmrla o
prlmelro con[unLo de celulas que se mulLlpllca e
cresce aLe cobrlr a superflcle da placa de eLrl.
As celulas hlbrldas so uLlllzadas, por exemplo, na
lnvesLlgao e dlagnsLlco de paLologlas, bem como
na produo de anLlcorpos monoclonals. Cs
anLlcorpos monoclonals so produzldos por
h|br|domas, celulas resulLanLes da fuso de llnfclLos
8 com celulas Lumorals. noLe-se que Lal fuso com
celulas Lumorals confere lmorLalldade e cresclmenLo
rpldo aos llnfclLos 8.
Iso|amento de organe|os
Cs organelos so lsolados de forma a permlLlr um melhor conheclmenLo da sua consLlLulo, algo
essenclal, por exemplo, para a produo de frmacos. ara proceder a obLeno de organelos lsolados,
em prlmelro lugar, a membrana clLoplasmLlca das celulas e romplda aLraves de um mecanlsmo
mecnlco (recorrendo ao uso de um homogene|zador mecn|co, ou, alLernaLlvamenLe de v|brao
u|tra-sn|ca ou de var|nhas mg|cas - lmlnas que degradam as membranas clLoplasmLlcas). ue
segulda, procede-se a uma cenLrlfugao, onde se apllca uma fora cenLrlfuga superlor a da gravldade,
de modo a obLer um sed|mento (-#33#/), consLlLuldo pelas esLruLuras malores e mals densas, e um
sobrenadante, consLlLuldo pelo resLanLe maLerlal. C nc|eo ser o prlmelro organelo a consLlLulr o
sedlmenLo, dada a sua elevada densldade. ConLudo, o lsolamenLo do nucleo (ou de qualquer ouLro
organelo) requer a separao dos sobrenadanLes, algo que se faz recorrendo a uma centr|fugao
d|ferenc|a|, a foras cada vez malores.
Como as fraces obLldas nunca so 100 puras, uLlllza-se um gradlenLe, onde a base Lem malor
concenLrao de soluLo que o Lopo. CbLem-se al uma coluna de banda, o que permlLe a purlflcao de
sedlmenLos, quer consLlLuldos por dlferenLes organelos, quer consLlLuldos somenLe por nucleos. um
conLrolo adlclonal da pureza e felLo recorrendo ao mlcroscplo elecLrnlco.
um Llpo especlflco de cenLrlfugao deslgnado por centr|fugao em grad|ente de dens|dade
posslblllLa a obLeno de macromoleculas especlflcas lsoladas (Lodavla, esLa no e a Lecnlca de
excelncla para a separao de moleculas como o unA e o 8nA). nesLa Lecnlca, a ulLracenLrlfugao e
reallzada a conLa de foras mulLo superlores e Lempos mulLo longos, esLando sempre assoclada a um
gradiente muito concentrado em soluto. As macromolculas deslocam-se ao longo do gradiente at
enconLrarem uma zona cu[a densldade se[a lgual a sua, onde esLablllzam.
LsLe Llpo de cenLrlfugao pode dlvldlr-se em centr|fugao por ve|oc|dade e centr|fugao de
equ|||br|o (ou |sop|cn|ca):
glna S9 de 6S

Centr|fugao por ve|oc|dade: Separa organelos de Lamanho semelhanLe, uma vez que
parLlculas de dlferenLes Lamanhos sedlmenLam a dlferenLes velocldades. A amosLra e colocada
no Lopo de um gradlenLe de sacarose e as parLlculas de dlferenLes Lamanhos vo sedlmenLar
como bandas dlscreLas, ao longo do gradlenLe, por cenLrlfugao. SubsequenLemenLe, as
dlferenLes pores de soluo vo sendo recolhldas goLa-a-goLa, preparando-se asslm os
organelos de dlferenLe Lamanho e densldade.
Centr|fugao de equ|||br|o: Separa organelos lndependenLemenLe do seu Lamanho, mas de
modo dependenLe da densldade. A amosLra e cenLrlfugada num gradlenLe de sacarose ou de
cloreLo de ceslo aLe que os componenLes subcelulares aLln[am uma poslo de equlllbrlo, em
que a sua densldade e lgual a do sobrenadanLe envolvenLe. LsLa Lecnlca e uLll para a separao
de membranas dlferenLes e suflclenLemenLe senslvel para a separao de macromo|cu|as
com marcadores |stopos d|ferentes.

glna 60 de 6S

Metodo|og|a de estudo da c|u|a: An||se e |oca||zao de mo|cu|as
Separao de prote|nas
or e|ectroforese em ge| de po||acr||am|da (AGL), consegue-se separar dlferenLes proLelnas, aLraves
de uma malha que reLem proLelnas com dlferenLes caracLerlsLlcas por apllcao de um campo elecLrlco.
A elecLroforese em gel de pollacrllamlda dlvlde-se em:
Nat|va: As proLelnas so separadas sem a adlo de nenhum componenLe que alLere o seu
esLado, consoanLe Lrs facLores - massa, carga e forma.
Desnaturante: As proLelnas s mlgram no gel de acordo com a sua massa. Cs facLores carga e
forma so ellmlnados, devldo a aco de um detergente |n|co que promove a desnaLurao
das proLelnas.
L|ectroforese desnaturante: SDS-AGL
C SDS (dodecllssulfaLo de sdlo) e um deLergenLe lnlco desnaLuranLe que confere carga negat|va as
proLelnas. LsLe agenLe llga-se as paredes hldrofblcas das proLelnas, ellmlnando o factor carga. ara
alem dlsso, o SuS provoca o desenro|amento das prote|nas, ellmlnando o factor forma.
Aps ser apllcado SuS a amosLra proLelca, procede-se a admlnlsLrao de D11 (dlLloLrelLol) e -
mercaptoetano|. LsLes agenLes 0',&$)0'# /-$&/. "&. #'"$%,) ,' G&'10/0 8)"$'# ,%##&?*&0'$) ' 0',&5%0
'#$/# ?%4/HI'# J8)"$'# 7=7 0',&5%,/# / 7KC, posslblllLando a separao de subunldades proLelcas, e
flcando as proLelnas na forma monomerlca, negaLlvas e desenroladas. Asslm, esLes agenLes conLrlbuem
para a perda da Lrldlmenslonalldade.
SubsequenLemenLe, as amosLras proLelcas so apllcadas nos poos de gel, sendo esLabelecldo um
campo elecLrlco. uada a carga negaLlva conferlda pelo SuS, as proLelnas vo mlgrar para o plo poslLlvo
(e necessrlo Ler aLeno para no Lrocar os plos, o que levarla a perda das amosLras). roLelnas do
mesmo Lamanho Lendem a mlgrar pelo gel com velocldades slmllares, pols a sua esLruLura naLlva
perdeu-se pela apllcao do SuS e, sobreLudo, do uu1. LsLando os facLores carga e forma ellmlnados, as
proLelnas dlferem apenas pelo Lamanho: proLelnas malores sofrem um reLardamenLo malor, enquanLo
proLelnas menores mlgram mals.
Aps Ler ocorrldo mlgrao, procede-se a vlsuallzao das proLelnas. ara lsso, os gels de acrllamlda so
normalmenLe corados com n|trato de prata ou azu| de Coomass|e, que se llgam com grande
especlflcldade as proLelnas:
N|trato de rata: cor casLanha amarelada. Mals senslvel, deLecLa proLelnas aLe 10 ng (mals caro
e mals complexo).
Azu| de Coomass|e: cor azul. Menos senslvel, deLecLa proLelnas aLe 100 ng (mals baraLo e mals
slmples).
glna 61 de 6S

Determ|nao da Massa Mo|ecu|ar de uma rote|na
Aps ocorrer mlgrao proLelca, a poslo das proLelnas e comparada com a das proLelnas presenLes no
marcador de peso mo|ecu|ar presenLe, o qual conslsLe num con[unLo de proLelnas de massa molecular
conheclda. A LlLulo de exemplo, se deLecLarmos que a proLelna em esLudo enconLra-se dlsLalmenLe ao
marcador de 66 kua, conclulmos que a sua massa molecular e lnferlor a 66 kua. Lm Lermos mals
rlgorosos, e posslvel Lraar um grflco logarlLmlco da massa molecular do marcador em funo da
dlsLncla medlda, obLendo-se uma funo llnear.
Iocagem Isoe|ctr|ca
A focagem isoelctrica constitui uma espcie de electroforese na qual as protenas so separadas de
acordo com a sua carga |ntr|nseca. LsLe processo e, pols, usado para proLelnas de massas lguals (devldo
a dlferenLe composlo em amlnocldos, as proLelnas vo Ler cargas dlferenLes o que permlLe separar
proLelnas com peso molecular ldnLlco).
nesLe processo, as proLelnas so submeLldas a um gel com anf||tos (moleculas de pP esLvel),
formando um gradlenLe de pP su[elLo a cargas elecLrlcas. osLerlormenLe, su[elLam-se as amosLras a um
campo elecLrlco as proLelnas sero, enLo, aLraldas para o plo oposLo aLe aLlnglr uma zona desLe
gradlenLe em que perde a sua carga, porque at|nge o pn em que as cargas so ba|anceadas. nesse
ponLo o qual e deslgnado por ponto |soe|ctr|co (Ipn) -, a proLelna delxa de se mover pols delxa de
esLar su[elLa a aco do campo elecLrlco.
glna 62 de 6S

L|ectroforese 8|d|mens|ona|
A elecLroforese bldlmenslonal conslsLe na execuo sequenclal de uma focagem lsoelecLrlca e de um
SuS-ACL. Asslm, nesLe processo, as proLelnas so separadas em duas dlmenses - lnlclalmenLe de
acordo com a carga (focagem lsoelecLrlca) e, seguldamenLe, de acordo com a massa (SuS-ACL), de Lal
modo que cada ponLo passe a corresponder a uma proLelna dlferenLe. Apesar de ser mals complexa, a
Lecnlca revela-se mals eflcaz na separao de mlsLuras mals complexas de proLelnas (aLe 200 proLelnas).
Ident|f|cao de prote|nas
H#&/#$(753.//+(6
C L'#$'0"=1?)$$%"4 serve para ldenLlflcar proLelnas especlflcas. nesLe processo, as proLelnas so
lnlclalmenLe separadas por Lamanho aLraves de SuS-ACL (elecLroforese em gel de pollacrllamlda).
SubsequenLemenLe, as proLelnas so Lransferldas para uma membrana de n|troce|u|ose, a qual
apresenLa elevada aflnldade para proLelnas asslm, a Lransferncla permlLe obLer, na membrana, uma
repllca do gel. A qualldade da Lransferncla pode ser avallada pela colorao da membrana de
nlLrocelulose com onceau S.

glna 63 de 6S

Aps a Lransferncla, procede-se ao bloquelo da membrana com 8SA (albumlna serlca bovlna) Lal
bloquelo lmpede a ocorrncla de llgaes lnespeclflcas. SubsequenLemenLe, procede-se a lncubao
com anLlcorpo prlmrlo (+,,%(.53.//+(6), o qual deLecLa a proLelna a ldenLlflcar, no a danlflcando.
uepols, usam-se anLlcorpos secundrlos con[ugados com enzlmas que, quando llgadas, produzem um
corante (produLo de reao dos subsLraLos), permlLlndo a locallzao da proLelna (um processo slmllar
reglsLa-se na |munoc|toqu|m|ca).
Imunoc|toqu|m|ca
A lmunoclLoqulmlca permlLe a deLeco lmunolglca de uma proLelna dlrecLamenLe no seu local de
expresso da celula ou Lecldo, recorrendo ao uso de anLlcorpos, os quals se enconLram normalmenLe
con[ugados com:
I|uorocromos
Lnz|mas: Iosftase A|ca||na ou erox|dase
As Lecnlcas de lmunoclLoqulmlca dlvldem-se em:
Imunoc|toqu|m|ca D|recta: C anLlcorpo prlmrlo (que llga dlrecLamenLe ao anLlgenlo)
enconLra-se con[ugado com o marcador.
Imunoc|toqu|m|ca Ind|recta: C anLlcorpo prlmrlo llga-se ao anLlgenlo, enquanLo anLlcorpos
secundrlos acoplados a um marcador llgam-se ao anLlcorpo prlmrlo.
Auto-rad|ograf|a
A auLo-radlografla consLlLul o unlco meLodo capaz de dlsLlngulr moleculas qulmlcamenLe ldnLlcas,
produzldas ou degradadas em Lempos dlferenLes na celula. rocede-se, pols, a deLeco celular de
moleculas precursoras que lncorporaram radlolsLopos.
no processo de auLo-radlografla, o especlmen e coberLo por emulso foLogrflca (sals de bromeLo de
praLa) e, nos locals em que foram lncorporados radlolsLopos, esLa Lransforma-se em praLa meLllca
(deLecLvel em mlcroscopla de luz e elecLrnlca). Asslm, como os radlolsLopos no exlsLem
naLuralmenLe no maLerlal blolglco, apenas os locals que aparecem com esLa marcao lncorporaram
radlolsLopos. noLe-se alnda que os radlolsLopos sofrem deslnLegrao, lsLo e, vo perdendo energla,
moLlvo pelo qual devem apresenLar um Lempo de seml-vlda razovel.
Separao de c|dos nuc|e|cos
Cs c|dos nuc|e|cos Lm forma slmllar e apresenLam naLuralmenLe carga negaLlva devldo aos seus
grupos fosfaLo. Asslm, a separao e ldenLlflcao de cldos nuclelcos depende apenas da sua massa.
ConsequenLemenLe, nas elecLroforeses de unA no e necessrlo adlclonar qualquer componenLe para
conferlr/remover carga ao unA - aps a apllcao do campo eleLrlco, esLe mlgra naLuralmenLe aLraves
do gel em dlreco ao plo poslLlvo. Como expecLvel, as moleculas de unA mlgram consoanLe o seu
Lamanho, salvo se a molecula for clrcular, Lal como se verlflca nos plasmldeos, em que a forma Lambem
val lnfluenclar a mlgrao nesLes casos uLlllzam-se enz|mas de restr|o para obLer moleculas llneares
de unA. LsLas enzlmas reconhecem pallndromas (sequnclas de 4 a 8 nucleoLldeos que Lm a
particularidade de serem a mesma sequncia no sentido 53).

glna 64 de 6S

ara elecLroforese de cldos nuclelcos, podem se usar dols Llpos de gel:
Agarose: Malha mals larga, permlLlndo separar moleculas malores. C unA e corado com
bromeLo de eLlllo, o qual se lnLerpe enLre as bases.
Acr||am|da: Crlglna uma malha mals aperLada, permlLlndo dlsLlngulr moleculas que dlferem
num s nucleoLldeo (malor preclso).
Ident|f|cao de c|dos nuc|e|cos
I.%/1#$(753.//+(6
C I.%/1#$(753.//+(6 consLlLul o processo que permlLe a deLeco de moleculas de unA. Aps
desnaLurao a elevadas LemperaLuras, Lodas as moleculas so dlgerldas por enzlmas de resLrlo e
submeLldas a elecLroforese. As moleculas so, posLerlormenLe, Lransferldas para uma membrana de
nlLrocelulose com aflnldade para cldos nuclelcos. SubsequenLemenLe, a membrana e LraLada com uma
sonda hlbrldlzadora ou se[a, com uma molecula de unA lsolada cu[a sequncla e conheclda e ldnLlca
(ou complemenLar) a sequncla que se preLende avallar na amosLra (como as duas cadelas da dupla
hellce do unA so complemenLares, LanLo faz escolher uma sonda que se[a ldnLlca ou complemenLar a
sequncla procurada).
noLe-se que a sonda de unA e marcada de forma a que a sua presena possa ser deLecLada.
normalmenLe, essa marcao e felLa com base em subsLnclas radloacLlvas, grupos qulmlcos (Lals como
a dlgoxlgenlna ou bloLlna) ou grupos fluorescenLes. or flm, a locallzao e ldenLlflcada por auLo-
radlografla.
n|br|d|zao +( &+/%
A h|br|d|zao +( &+/% permlLe locallzar uma deLermlnada sequncla de cldos nuclelcos dlrecLamenLe no
Lecldo, e no por eleLroforese. ara lsso, uLlllza-se uma sonda marcada que hlbrldlza com o unA/8nA de
lnLeresse. As sondas de cldos nuclelcos marcados podem hlbrldlzar com:
Cromossomas (aps desnaLurao do unA)
Moleculas especlflcos de 8nA, de modo a deLermlnar os nlvels e padro de expresso desLes
8nA.

glna 6S de 6S

J.$/1#$(753.//+(6
C J.$/1#$(753.//+(6 e semelhanLe ao 7)&$>'0"=1?)$$%"4M permlLlndo deLecLar moleculas de 8nA. nesLe
processo, no e necessrla desnaLurao, uma vez que o 8nA [ consLlLul uma mo|cu|a cade|a s|mp|es.
LsLe meLodo necesslLa de exLraco de m8nA de uma celula ou con[unLo de celulas, sendo
frequenLemenLe usado para esLudos de expresso genlca (por exemplo, para deLermlnar se especlflcos
m8nAs esLo presenLes em dlferenLes Llpos de celulas). Lm Lermos processuals, o E)0$>'0"=1?)$$%"4
passa por:
1. Separao das moleculas por elecLroforese,
2. 1ransferncla para membrana com aflnldade a cldos nuclelcos por capllarldade,
3. Plbrldlzao com genes marcados por sondas no local exacLo a reconhecer.

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