UNIVERSIDAD REGIONAL AUTONOMA DE LOS ANDES

UNIANDES

FACULTAD DE CIENCIAS MDICAS
CARRERA DE ODONTOLOGIA

BIOLOGIA CELULAR Y MOLECULAR

MECANISMOS DE CATLISIS ENZIMATICA

DOCTOR: FAURI L. LLERENA BARRENO

INTEGRANTES: MARICELA CHICAIZA
PATTY SAMANIEGO
VCTOR RODRGUEZ

NIVEL: PRIMERO A

AMBATO - ECUADOR


MECANISMOS DE CATLISIS ENZIMATICA
INTRODUCCIN
Este informe presenta un estudio basado en el Mecanismo de Catlisis Enzimtica-Mecanismo de
Accin Enzimtica. Los catalizadores se han empleado por la humanidad durante ms de 2000
aos. En la edad media los conocimientos relacionados con las transformaciones qumicas eran
manejados a nivel de magia y poderes sobrenaturales por un grupo llamado alquimistas.
Observaron que la presencia de algunos elementos extraos en una mezcla, haca posible la
obtencin de algunos productos tiles al hombre. La acumulacin de experiencias y observaciones
en este campo de las transformaciones casi mgicas, llevo a la asimilacin de estos fenmenos en
una definicin propuesta por Berzelius en 1836. En 1894 Ostwald amplio la explicacin de
Berzelius indicando que los catalizadores son sustancias que aceleran la velocidad de las
reacciones qumicas sin consumirse en ellas mismas. Ms de 150 aos despus de los trabajos de
Berzelius, los catalizadores desempean un papel econmico importantsimo en el mercado
mundial. Utilizndose en procesos como convertidores catalticos en los escapes de automvil
para disminuir la contaminacin atmosfrica, en la sntesis del amoniaco, en la sntesis de cido
sulfrico, hidrogenacin de aceites y grasas vegetales, procesos de hidrotratamiento para
disminuir impurezas del petrleo, por mencionar algunos.
OBJETIVOS:
OBJETIVOS GENERALES
Conocer, comprender y valorar la accin que tienen las enzimas y pueda comprender cada uno de
los conceptos relacionados con las enzimas
Analizar la importancia de un catalizador para que una reaccin qumica se lleve a cabo
OBJETIVO ESPECIFICO
establecer la importancia que tiene un mecanismo de catalisis enzimtica
Conocer la accin de la temperatura sobre la actividad de las enzimas
Observar y interpretar la accin de la enzima
conocer las caracteristicas principales y principios de funcionamiento de los biocatalizadores
Deterninar la ubicacin de las enzimas
Conocer los tipos de enzimas
Determinacin los diferentes factores que influyen sobre la actividad enzimtica.





MECANISMO DE CATALISIS ENZIMATICA

Utilizando el diisopropilfluorofosfato (DFP) que detecta residuos de serina o anlogos de sustrato
como el toluensulfonilfenilalanina (TPCK) se ha encontrado que las enzimas poseen una pequea
regin del total con propiedades tridimensionales, que efecta la catlisis qumica.

A este sitio o hendidura que contiene residuos de aminocidos polares se denomina sitio o centro
activo.

Sus aminocidos constantes para cada enzima, que cuando son no polares aumentan la afinidad
con el sustrato, participan directamente en la ruptura o formacin de enlaces qumicos, formando
enlaces covalentes transitorios, por lo que se les denomina grupos catalticos.

Sin embargo, previa a la catlisis, el sustrato debe ser orientado en forma precisa en sus enlaces
sensibles, para que calce en el sitio activo y esto es funcin de otros aminocidos aledaos de la
enzima denominados grupos de unin.

Por otra parte el centro activo se forma por aminocidos contiguos o situados a distancia, pero
unidos por efecto de la estructura tridimensional. Por ejemplo el tripsingeno, es un precursor
enzimtico del tubo digestivo constituido por 229 residuos de aminocidos, que tiene un centro
activo formado por el residuo histidina en las posiciones 29 y 46 y que se unen con la serina
ubicada en la posicin 183.

Acetilcolinesterasa centro activo: - glu-ser-ala
Fosfatasa alcalina centro activo: - asp-ser- ala

Un mecanismo de regulacin de la catlisis enzimtica es la inhibicin por retroalimentacin, en la
que el producto inhibe a una de las enzimas claves del comienzo de la va metablica.

A esta regulacin se la denomina tambin inhibicin alostrica y a la enzima inhibida enzima
alostrica. La actividad enzimtica tambin puede ser regulada por sus interacciones con otras
protenas y por modificaciones covalentes y por fosforilacin.

MECANISMO DE ACCION ENZIMATICA.-

Modelo de Emil Fischer: este autor considera que la enzima es un molde tridimensional en
negativo que se acopla en forma rgida al molde tridimensional en positivo del sustrato. Por esta
razn a este modelo experimental se le conoce tambin como modelo de llave encerradura.









E
S
E
S
P
Modelo de ajuste inducido o de Koshland: este modelo supone que el sustrato induce cambios
conformacionales en la enzima, de modo que una vez que se orientan y unen la enzima y el
sustrato, ciertos enlaces dentro del sustrato sufren tensin fsica o electrnica, para acoplarse a
los de la enzima o bien ciertos grupos se sepultan en el. interior de la molcula. En ambos casos se
produce un debilitamiento de los enlaces del sustrato y desciende la energa necesaria para
romperlos. Se piensa que son los cofactores los que inducen esta modificacin conformacional. A
este modelo se lo denomina tambin modelo de mano en guante por el ajuste que se produce
entre ellos cuando una persona se los coloca. Esta flexibilidad se debe al hecho de que el sitio
activo est constituido por tres tipos de residuos:

Residuos de contacto
Residuos de especificidad
Residuos catalticos


FACTORES QUE INFLUYEN SOBRE LA ACTIVIDAD ENZIMATICA

Temperatura: en general las reacciones catalizadas por enzimas, se aceleran aumentado la
temperatura hasta un valor ptimo, luego de lo cual la velocidad de la reaccin desciende. Se
estima que por cada 10 C de temperatura que se incremente, la velocidad de la reaccin de
duplica y viceversa disminuye a la mitad, a lo que se denomina coeficiente trmico o Q10.

Potencial de Hidrgeno pH: cada enzima tiene un pH ptimo, en el cual la actividad cataltica es
mxima. Generalmente este pH oscila entre 5 y 9, pero existen enzimas que pueden trabajar fuera
de estos rangos en condiciones fisiolgicas. El pH influye porque afecta la ionizacin del sitio
activo, la ionizacin del substrato y los cambios de conformacin espacial de las enzimas.
Ejemplos:


Pepsina gstrica 1.5-2.5
Acetil colinesterasa 7
Fosfatasa alcalina 9.5
Catalasa 7.0-7.6

La desestabilizacin del pH incurre en un decrecimiento de la actividad cataltica, y en lmites
extremos al igual que la temperatura la enzima se desnaturaliza.

Concentracin de la enzima y coenzimas: la velocidad de la reaccin qumica es directamente
proporcional a la concentracin de enzima- coenzima, siempre que el sustrato est en exceso
(cintica de orden cero). Sin embargo, este efecto no es geomtrico sino que se cumple hasta
cuando la concentracin enzimtica es tan grande que capta todo el sustrato y se convierte
entonces un limitante por agotamiento del sustrato.






INHIBICION ENZIMATICA.-

Cualquier sustancia que disminuya la velocidad de una reaccin mediada por una enzima se llama
inhibidor. Pueden ser sustancias de naturaleza endgena o exgena como un medicamento.

Inhibicin irreversible: generalmente el inhibidor trabaja formando enlaces covalentes con la
enzima, e inactiva permanente a la enzima: Esto ocurre con los llamados gases de guerra, como el
diisopropilfluorofosfato (DFP) que se combinan irreversiblemente con los residuos de serina de la
enzima colinesterasa, impidiendo la transmisin del impulso nervioso Otro caso es el yodo
acetato que bloquea los residuos de cisteina de algunas enzimas.

Inhibicin reversible por competencia: en este caso la enzima se une a un anlogo de sustrato, es
decir a una sustancia estructuralmente parecida al sustrato original. Se establece una competencia
entre el original y el similar por el centro activo, pero no a los dos al mismo tiempo. En estos casos
el efecto del inhibidor puede ser revertido aumentando la concentracin del sustrato original, lo
que crea una mayor posibilidad de ligadura y si la Km que se aumenta, baja por este aumento de
sustrato original.

Inhibicin reversible no competitiva: En estos casos el inhibidor no se fija al mismo sitio que la
enzima con su sustrato original, sino en un sitio diferente. El inhibidor puede fijarse a la misma
enzima, pero como no afecta el centro activo, no se modifica la afinidad entre enzima y sustrato.
Esta inhibicin se revierte por aumento de la concentracin de sustrato original.

Inhibicin incompetitiva: tiene lugar cuando el inhibidor se une solo al complejo enzima enzima-
sustrato provocando solo una perturbacin de la velocidad mxima y levemente a KM:


Nomenclatura.-

Existen nombres tradicionales que se los conserva por su persistente uso en medicina. Se agrupan
aadiendo el sufijo ASA al nombre del sustrato de cual provienen, por ejemplo lipasa si actan
sobre los lpidos, ureasa sobre la urea, uricasa sobre el cido rico etc.

La unin Internacional de Bioqumica Clnica ha regularizado la nomenclatura estableciendo
nombres sistemticos:

El nombre de la enzima consta de dos partes. La primera designa el o los sustratos sobre los que
acta. La segunda termina en asa e indica el tipo de reaccin catalizada

Entre parntesis se escribe informacin adicional ejemplo descarboxilasa piruvica
(descarboxilante).

Se establece un dgito para el tipo de reaccin que cataliza. Un segundo dgito expresa la subclase
a la que pertenece. Un tercer digito a la subsubclase. El cuarto dgito expresa en cdigo de la
enzima especfica. Ejemplo EC2.7.1.1. denota: clase 2 transferasa, subclase 7 transferencia de
fosfato, 1 el alcohol como aceptor del fosfato y finalmente 1 es la enzima hexocinasa.


Clasificacion de las Enzimas.-

1.- Oxido reductasas: mecanismo de ganancia o prdida de electrones
Subclases: Deshidrogenasas: movilizacin de hidrgenos
Oxidasas: cambios en el anillo electrnico
Peroxidasas: descomponen el H2O2 en H2O + O
Hidroxilasas: incorporan oxgeno a los sustratos

2.- Transferasas: Transferencia de grupos qumicos deferentes del hidrgeno
Subclases: Metiltransferasas: grupos metilo
Acetiltransferasas: grupos acetilo
Glucociltransferasas; grupos glucocilo
Transaminasas: transferencia de grupos amino
Cinasas: transferencia de grupos fosforilo

3.- Hidrolasas: rompen enlaces qumicos por introduccin de molculas de agua
Subclases: Esterasas: unin ster
Fosfatasas: uniones ster con grupos fosfato
Glucocidasas: unin glucocdica
Peptidasas: unin peptdica

4.- Liasas: conversin de un sustrato en producto que contiene un doble enlace
Subclases: descarboxilasas
Aldehidoliasas
Cetoacidoliasas
Aminoliasas
5.- Isomerasas: catalizan reacciones de transferencia intramolecular
Subclases: Racemasas
Epimerasas
Isomerasas cis/trans
Mutasas
6.- Ligasas: catalizan reacciones de condensacin dependientes del ATP
Subclases: Aminocido RNA ligasas
Acido tiol ligasas
Ligasa- cido-amonaco
Ligasa- cido aminocido

LAS COENZIMAS.-

Las coenzimas son estructuras que expanden la capacidad de catlisis de una enzima, a la cual se
unen por enlaces covalentes o fuerzas no covalentes (grupo prosttico).

Se consideran como un segundo sustrato o cosustrato, por tener durante una reaccin, los mismos
cambios qumicos que tienen lugar en el sustrato y funcionan generalmente como fuentes para la
transferencia de grupos qumicos al experimentar oxidacin o reduccin.

De manera estricta, solo se consideran coenzimas o grupos prostticos, las molculas que no se
consumen en la reaccin, pues solo actan captando y liberando los grupos participantes. Una vez
que suelta un grupo queda en posicin de captar otro grupo qumico.

Parte de su estructura est dado por las vitaminas B, como por ejemplo nicotinamida, tiamina,
riboflavina y cido pantotnico, cido flico y cobalamida. No se conoce actividad de coenzima a
las vitaminas A, D, E, K y C.




Las principales coenzimas se describen a continuacin:

Coenzima Abreviatura Vitamina Otra estructura
Grupo
acarreado
Nicotinadenindinucletido NAD Nicotinamida
Vit B3
Adenosin
difosfato
Hidruros
Fosfato de
nicotinadenindinucletido
NADP Nicotinamida
Vit B3
Fosfoadenosin
difosfato
Hidruros
Flavinmononucletido FMN Riboflavina Vit
B2
Ortofosfato Hidrgenos
Flavindinucletido FAD Riboflavina
Vit B2
Adenosin
difosfato
Hidrgenos
Pirofosfato de tiamina TPP Tiamina Vit B1 Pirofosfato Aldehdos
Lipoil lisina L_-S-S Acido lipoico Lisina Acilo
Coenzima A Co.A Acido
pantotnico Vit
B5
Adenosin
difosfato
Acilo
Biocitina Biotina Vit B8 Lisina CO2
Coenzima B12 B12 deoxiadenosina metilos
Tetrahidrofolato FH4 Acido flico
Vit B9
- Fragmentos
de un carbn
Fuente: Bioqumica Laguna Pia p65.1979


DINUCLETIDO DE NICOTINAMIDA NAD.-

Llamado tambin DPN o TPN, participa en reacciones de xido reduccin. Utiliza hidruros
provenientes de un metabolito. Llamase hidruro a un tomo de hidrgeno, con su protn, su
electrn y otro electrn que proviene de otro tomo de hidrgeno.





Un ejemplo representativo es el caso de del cido pirvico:

COOH COOH
C = O + NAD + H+ CH OH + NAD+
CH3 CH3
Piruvato coenzima reducida lactato coenzima oxidada

El NADP participa en reacciones qumicas que involucran biosntesis especialmente de grasas.


Flavina de dinucleotido FAD
Ribitol - P - P - ribosa

Flavina adenina


Al igual que NAD participa en fenmenos de xido- reduccin, siendo el anillo de isoaloxazina o
flavina el componente crtico de su actividad


Pirofosfato de Tiamina TTP.-

Participa en el metabolismo intermediario de los hidratos de carbono y es la principal coenzima
de las descarboxilasas.




Coenzima A (Co. A).-

Tiene como precursor a la vitamina B5 o cido pantotnico, que se une por un extremo al ATP y
por el otro a la tioetanolamina, la cual contiene grupos sufidrilo que es el grupo activo de la
coenzima. Es de capital importancia en la biosntesis de cidos grasos.

Acido Lipoico.-

Es un cido carboxlico de 8 carbonos que contiene disulfuro. Participan en la descarboxilacin
oxidativa del alfa cetoglutarato y en la descarboxilacin oxidativa de la piruvato deshidrogenasa.
Coenzima Q Ubiquinona.-

Es una benzoquinona de membrana que tiene una cadena lateral isoprenoide de 10 carbonos. Es
un transportador de electrones en los sistemas redox del organismo.

LOS BIOCATALIZADORES Y SU UTILIZACION CLINICA.-

En las clulas, las enzimas se ubican en el sitio de operacin de la reaccin qumica que catalizan,
por ejemplo la glutamato deshidrogenasa (GD) se localiza en los organelos celulares formando
parte de las llamadas enzimas uniloculares. Otras enzimas se hallan tanto en los organelos como
en el citoplasma como la STGP, por lo que se les ha nominado como enzimas biloculares y
finalmente un tercer grupo enzimtico, solo es posible encontrarlos en el citoplasma como la
STGO por lo que reciben el nombre de enzimas citoslicas.

En su mayor parte, excepto algunas enzimas propias del plasma sanguneo, las enzimas se hallan
en los tejidos en los cuales ejercen su actividad biolgica. Su presencia en el plasma, es solo un
reflejo de la actividad tisular. A estas enzimas que circulan en el plasma sanguneo se los ha
clasificado en dos grandes grupos: Enzimas plasmticas funcionales si su sustrato se hallan en el
plasma sanguneo y en los elementos formes como la ceruloplasmina, plasmina,
seudocolinesterasa, lipoprotein lipasa etc.

A este grupo pertenecen las llamadas enzimas de secrecin, que no son otra cosa que
biocatalizadores que siendo producidos en un sitio anatmico, ejercen su actividad en otro tejido,
como ocurre con la amilasa del pncreas excrino que funciona en el intestino en su accin
degradativa de las unidades de glucosa.

Con la designacin de enzimas plasmticas no funcionales, nos referimos a aquellas enzimas, que a
pesar de no tener un sustrato en el plasma, se hallan en la circulacin general como reflejo del
tejido donde actan. Por ejemplo LDH del tejido cardiaco y cerebral, Fosfatasa cida de la prstata
etc.

Cuando una enzima penetra a la circulacin, su cintica puede variar en funcin de los cambios
hemodinmicas, dilucin o hemoconcentracin, adecuacin o no de sustratos disponibles,
variaciones posturales del individuo, congestin venosa, presencia de inhibidores, todos lo cuales
cambian la cintica de Menten en un orden variable, generalmente hasta un 15% de afinidad por
el sustrato y de su actividad fisiolgica. La va usual de eliminacin de las enzimas es la ruta renal.,
en un proceso que depende tanto del grado de filtracin renal como del peso molecular de la
enzima.

Generalmente, se acepta que las enzimas se eliminan directamente, si poseen un peso molecular
inferior a los 60.000 dantons, pero tambin en indispensable reconocer, que una buen parte de
enzima se reabsorbe en los tubos contorneados, por lo que la fraccin eliminada es muy pequea,
pero de importancia en la clnica, tal es el caso de la eliminacin de amilasa y lipasa en los
procesos inflamatorios agudos del pncreas. en los que sirve para seguir la evolucin de esta
patologa.

A pesar de que no existen mtodos para medir las cuantas intracelulares de enzimas, se presume
que las concentraciones sricas son generalmente paralelas a la concentracin intracelular. Si una
enzima se halla en concentracin elevada solo en un rgano dado, un aumento en su
concentracin srica, puede ayudar a determinar el rgano o la funcin afectada por los que se les
conoce como enzimas rgano especficas como la fosfatasa cida prosttica.
Cuando aumentan las enzimas rgano inespecficas, sus valores sricos se comparan con otras
enzimas para obtener informacin acerca del sitio probable de origen del incremento. Por ejemplo
en una lesin heptica se produce un incremento de STGO presente en varios tejidos, pero
muchas otras clulas daadas pueden causar la misma elevacin de otras enzimas. Si este
incremento de STGO se compara con otra enzima especfica como STGP tenemos una informacin
ms fidedigna del proceso heptico.

Las lesiones tisulares de gran magnitud pueden liberar ingentes cantidad de enzimas a la
circulacin como CPK en los traumatismo musculares, o bien a pesar de ser una lesin pequea
puede tambin ofrecer un alta significativa de enzima en el suero como se aprecia la TGP en los
casos de hepatitis focal. Hay que recordar que el laboratorio clnico no mide la cantidad de enzima
presente en la sangre, lo que cuantifica es la actividad enzimtica.

En el plasma podemos tener valores bajos de actividad enzimtica en Unidades Internacionales,
que generalmente ocurren en presencia de anomalas congnitas como la glucoronil transferasa,
disminucin en la produccin enzimtica en la hipoplasia renal, bajas por accin de inhibidores
como la inhibicin de la plasmina de la coagulacin por la alfa macroglobulina.

Lo ms usual en la clnica, es observar los incrementos enzimticos, sea por efectos fisiolgicos
como la fosfatasa alcalina de origen seo en el perodo de crecimiento o de la anhidrasa carbnica
en el ejercicio muscular, como por efectos de una patologa el incremento de fosfatasa cida en
los casos de cncer prosttico, la STGP en la hepatitis viral.

TRANSAMINASA GLUTAMO OXAL ACETICA O ASPARTATO AMINO TRANSFERASA (STGO)
Es una enzima intracelular con menores valores en la mujer, pero que se igualan con los del
hombre con el aumento de edad. Se distribuye ampliamente en los tejidos corporales y su
concentracin es elevada en el citoplasma de los tejidos que tienen un metabolismo alto como
corazn, hgado, rin, msculo esqueltico, eritrocitos, cerebro, pncreas. Es por consiguiente
una enzima rgano inespecfica y su valoracin clnica es til cuando se lo compara con otras
enzimas.

Poco se sabe sobre su sntesis, regulacin y excrecin, aunque una va de eliminacin escasa es la
ruta biliar. La holoenzima de hgado es un dmero formado por dos subunidades con un peso total
de 93 KDa y a cada monmero se une una molcula de pirofosfato de piridoxal como cofactor. Se
han descrito dos isoenzimas, una de origen mitocontrial formado por dos subunidades y otra de
origen citoplasmtico.

Al igual que STGP su funcin consiste en remover y transferir grupos amino (NH2) de los
aminocidos con el objeto de sintetizar nuevos aminocidos no esenciales. Especficamente
transfiere el grupo amino del cido asprtico al cido alfa ceto glutmico para formar como
productos finales el cido oxal actico y el cido glutmico.



Cuando las clulas que contienen STGO se rompen o se altera su actividad, por deficiencia de
oxgeno o de glucosa, la membrana plasmtica se vuelve permeable y la enzima escapa al plasma
sanguneo. Cuanto ms alto sea su concentracin intracelular, ms pronto y mas intensamente se
eleva en el plasma como ocurre en el dao cardaco.

TRANSAMINASA GLUTAMO PIRUVICA O ALANINA AMINOTRANSFERASA

Se encuentra con mayor frecuencia, pero no de manera exclusiva en hgado, por lo que en pocos
casos se incrementa sin efecto heptico. Se requieren lesiones hepticas ms graves o extensas
para causar valores anormales y por ello se dice que STGP es una enzima para hgado menos
sensible, pero mucho mas especfica que STGO.

Se localiza en hgado, msculo estriado, rin, corazn. Predomina en el citoplasma celular, pero
tambin se lo halla en las mitocondrias diferencindose entre s por sus propiedades cinticas y
fsicas.

Cataliza la transferencia de grupos amino de la alanina al cido alfa cetoglutrico formando como
productos cido pirvico y cido glutmico.

Presenta una variacin diaria en sus valores sricos entre un 10 a un 30%, siendo los valores un
45% mas altos en la tarde que a primera hora de la maana. (STGO 5-10%).Tiene una vida media
de 47 +_ 10 horas.




FOSFATASA ALCALINA O FOSFOMONOESTERASA (SPA)

Encontrada en casi todos los tejidos corporales, es sintetizado por el hueso (40-75%), hgado,
placenta, intestino, bazo y rin. Sin embargo los niveles sricos en su mayor parte, resultan del
aporte de las isoenzimas heptica y sea. Codificada por un nico gen que se encuentra en el
cromosoma 1, es tambin una enzima inespecfica. Otros dos genes situados en el cromosoma 2,
codifican la isoenzima de clulas germinales, o semejante a la placentaria. En las clulas se halla
unidas a las membranas celulares, donde parece estar implicada en la ruptura de compuestos que
contiene fosfatos y puede facilitar el movimiento de sustancias por la membrana plasmtica.

En los hepatocitos, la enzima encuentra unida a la superficie canalicular de las clulas y en el
hueso unido a los osteoclastos, para producir la ruptura del pirofosfato un inhibidor de la
mineralizacin sea. En el epitelio intestinal, se produce y libera al intestino en gran cantidad
luego de una ingesta grasa. Sin embargo, aparentemente gran parte de la isoenzima se une a los
antgenos ABO de los hemates, de modo que solo llegan al plasma pequeas cantidades, salvo en
el caso de individuos que poseen tanto el gen secretor como una gran cantidad de sustancia H
(grupos O o B). A pesar de lo expresado en forma muy curiosa, en las embarazadas la isoenzima
placentaria es baja en los grupos A y AB.
Su vida media es tambin diferente; minutos en el intestino, una da en el hueso y 7 das en la
forma placentaria. La variacin diaria de APL total oscila entre 5 a 10%, mientras que la isoenzima
sea presenta una variacin del 20%.

Funcionalmente a pH alcalino cataliza la hidrlisis de diferentes steres de fosfato, siendo
considerada como una enzima de secrecin. En el suero, el mayor componente est dado por la
isoenzima heptica, por lo que es de valor en el diagnstico de trastornos hepticos y del rbol
biliar.

GAMMA GLUTAMIL TRANSFERASA (GGT)

Es una enzima microsomal, que cataliza el transporte el transporte del grupo gamma glutamil de
un aminocido a otro o al agua. La enzima est generalmente unida a la membrana plasmtica de
clulas que muestran una gran capacidad de absorcin o secrecin, como los hepatocitos (en el
lado canalicular), los tbulos renales proximales, las clulas epiteliales intestinales, glndula
mamaria y las de la prstata, pero el mayor aporte a las cuantas sricas lo aporta el hgado.
Pequeas cantidades son elaboradas por intestino, bazo y sistema nervioso central se caracteriza
por ser una enzima sensible al alcohol, puesto que produce elevaciones rpidas en 18 horas sin
evidencia de dao heptico por la ingesta de alcohol.

5 NUCLEOTIDASA

Su rol fisiolgico lo hace canalizando la hidrlisis de la posicin 5 de pentosa de un nucletido.
Ampliamente distribuida su mayor porcentaje plasmtico es de origen hepatobiliar.

CREATIN KINASA (CPK)

Implicada en el almacenamiento de energa durante el reposo muscular, es una enzima con grupos
sulfidrilo en su sitio cataltico, que tambin participa utilizando como cofactor al magnesio, en la
elaboracin de ATP a partir de la fosfocreatina durante el trabajo muscular. Se localiza en msculo
cardaco, msculo esqueltico y cerebro y mucho menos en otros tejidos. Su utilidad clnica es vital
en los casos de patologa cardaca.



Se lo encuentra como un dmero con actividad cataltica de peso molecular 40 KDa, en la cual las
subunidades se denominan M (de msculo) y C (de cerebro). La combinacin de estas
subunidades conforman tres isoenzimas:

CK1 (CC) presente en cerebro (97-98%), prstata (95-100%), placenta (100%), pulmn (20-50%),
msculo intestinal (90-95%).

CK2 (MC) msculo cardaco anormal (10-15%, msculo esqueltico y respiratorio (3-7%), msculo
cardaco normal y cerebro (2-3%).otros.

CK3 (MM): se lo halla en msculo esqueltico-brazo-pierna (99-100%), msculo esqueltico
respiratorio y cardaco normal (93-97%), msculo cardaco anormal (85-90%), pulmn (30-60%,)
otros.

En la mitocondria existe otra isoenzima de CK de 64 KDa que puede formar oligmeros
denominados macro-CK2, pero que no se liberan al plasma.






DESHIDROGENASA LACTICA LDH

Se trata de una enzima que contiene zinc y que participa de la va metablica de gluclisis. De alta
concentracin intracelular, pero de bajas cuantas en el suero sanguneo es tambin una enzima
rgano inespecfica, que se libera por ruptura o aumento de la permeabilidad celular.

g

Se trata de un tetrmero formado por dos subunidades activas, H (corazn) y B (msculo) con
peso molecular de 134 KDA. y de cuya combinacin se originan cinco isoenzimas:

LDH 1: HHHH se halla en miocardio (45%), hemates (40%), corteza renal (35%), pulmn (10%)

LDH 2: HHHB presente en miocardio (40%), hemates (35%), corteza renal (30%), pulmn (15%),
hgado (5%)

LDH 3: HHBB localizado en pulmn (40%), corteza renal (25%), hemates (15%), miocardio-msculo
esqueltico e hgado (10%)

LDH 4: HBBB presente en pulmn y msculo esqueltico (30%), corteza renal (20%), hgado (15%),
hemates (10%), miocardio (5%)

LDH 5: BBBB tiene una mayor concentracin en hgado (70%), msculo esqueltico (60%), pulmn
(5%)

Otra forma de isoenzima de LDH con cuatro subunidades H se lo a encontrado en los
espermatozoides y lquido seminal, pero no se lo encuentra en el suero sanguneo. En el plasma
sanguneo los valores bajos normales, representan cuantas que proceden de la degradacin de los
hemates y plaquetas, con contribuciones variables de otros rganos. Su principal va de excrecin
en la ruta biliar.


FOSFATASA ACIDA ACP

Corresponde a un grupo de enzimas relacionadas entre s, cuya funcin es la hidrlisis de esteres
de fosfato a pH cido. Se hallan en todos los tejidos y sus isoformas son codificada por un gen
diferente, pero tienen una mayor concentracin en prstata, testculos, eritrocitos, plaquetas,
leucocitos, hgado, bazo.

De todos ellos los nicos rganos con actividad significativa enzimtica de fosfatasa cida son los
testculos, riones y bazo.

Al la electroforesis se han encontrado cinco bandas de esta enzima: la banda 1 que corresponde a
la fraccin prosttica. Las bandas 2 y 4 corresponden a la forma de la enzima presentes en los
granulocitos, la banda 3 que es la forma mas abundante en el plasma proviene de plaquetas,
eritrocitos y monocitos, y la banda 5 de la isoenzima presente en los osteoclastos y
probablemente en las clulas de Kupffer.

En condiciones normales las cuantas de fosfatasa cida, provienen fundamentalmente de
plaquetas y eritrocitos. Una condicin especial, es su presencia en el semen, pues parece que la
enzima es necesaria para catalizar los procesos de fosforilacin y defosforilacin de intermediarios
en el metabolismo de los espermatozoides.

AMILASA

Esta enzima cuya sntesis es condicionada por el cromosoma 1, tiene una vida media de 2 horas y
se excreta por la orina. Se han descrito dos isoenzimas llamadas amilasa P o pancretica y amilasa
S o extrapancretica, que tiene la misma composicin de aminocidos dispuestas en cadena nica.
Ambas isoformas contienen grupos sufidrilos y son metaloenzimas por contener al menos un
tomo de calcio por molcula, el cual es indispensable para su actividad cataltica. Sin embargo
cerca del 65% de la concentracin srica es amilasa de origen glandular salival. Se halla en la
saliva, jugo pancretico, hgado, rin, intestino, tejido adiposo, leche, semen. En la naturaleza se
han descrito la amilasa tipo beta presente en animales inferiores y plantas y la gamma amilasa
existente en los hongos. La forma alfa es la presente en los animales.

Las amilasas que revierten al tubo digestivo, tienen como funcin la hidrlisis de las uniones
glucocdicas alfa 1-4 de los polisacridos de la alimentacin.




LIPASA

Se trata de una enzima citoslica cuya funcin es la de provocar la hidrlisis de las grasas,
atacando los enlaces ster primarios para producir como productos finales los acilgliceroles. De
utilidad e sobre todo en la pancreatitis aguda, se elimina por va renal en donde toma un carcter
de pronstico de la enfermedad.

COLINESTERASA

Se trata de un grupo mal definido de enzimas presentes en todos los tejidos corporales. En el
plasma sanguneo existen cerca de 11 colinesterasas diferentes y dos acetil colinesterasas, que se
diferencian entre s por el sustrato sobre el cual actan, su pH ptimo y su migracin
electrofortica.

Las colinesterasas hidrolizan los steres orgnicos de los cidos grasos de cadena corta. La
colinesterasa verdadera es capaz de escindir la acetil colina, uno de los neurotransmisores ms
importantes de la transmisin del impulso nervioso y muestra una alta actividad en el sistema
nervioso central, eritrocitos, pulmn y bazo.

La seudocolinesterasa producida por el hgado, miocardio y pncreas, desempea un papel
importante en la ruptura de la succinil colina un relajante muscular empleado en ciruga. Se las
emplea para el diagnstico de ciertas intoxicaciones y bloqueos de las sinapsis nerviosas.

ALDOLASA

Pertenece a un grupo de enzimas que intervienen la va de la gluclisis, por lo que se trata de una
enzima rgano inespecfica al hallarse el proceso metablico en diferentes tejidos. Se han descrito
dos isoenzimas. Aldolasa A que desdobla la fructosa l-6 difosfato en dos triosas: el gliceroaldehido
y la hidroxiacetona y la Aldolasa B que desdobla la fructosa 1 fosfato en gliceroaldehido y
triosafosfato. Se trata de una enzima importante para el diagnstico de enfermedades musculares,
anemia megaloblstica y enfermedades hematopoyticas malignas.

INVESTIGACION

MECANISMO DE CATLISIS ENZIMATICA
CATLISIS: es el proceso a travs del cual se incrementa la velocidad de una reaccin qumica. El
proceso de catlisis implica la presencia de una sustancia. Esta sustancia se llama catalizador.
CATALIZADOR: es una sustancia que afecta la velocidad de una reaccin, reaccionando,
regenerndose y que puede ser recuperado al final de la reaccin. Si retarda la reaccin se llama
inhibidor.


CATALISIS ENZIMATICA: Estudia los mecanismos de catlisis por los cuales las protenas o cidos
nucleicos con actividad enzimtica pueden favorecer la reaccin de ciertos sustratos y su
conversin en productos.
Las enzimas poseen una pequea regin que efecta catlisis qumica y son:


SITIO O CENTRO ACTIVO: Contiene residuos de aminocidos polares.
Los aminocidos no polares aumentan la afinidad con el sustrato formando enlaces covalentes
transitorios denominados grupos catalticos.
El sustrato debe ser orientado en sus enlaces sensibles que calce en el sitio activo, a estos
aminocidos se denomina grupos de unin.
El centro activo se forma por aminocidos contiguos.
INHIBICIN POR RETROALIMENTACIN O INHIBICIN ALOSTRICA
La inhibicin regula la catlisis enzimtica en la que el producto inhibe a una de las enzimas claves
del comienzo de la va metablica. A la enzima inhibida se denomina enzima alostrica.
MECANISMO DE ACCIN ENZIMTICA

Para que una reaccin qumica tenga lugar, las molculas de los reactantes deben chocar con una
energa y una orientacin ordenada. La actuacin de la enzima permite que los reactantes
(sustratos) se unan a su centro activo con una orientacin ptima para que la reaccin se produzca
y modifica las propiedades qumicas del sustrato unido a su cambio activo, debilitando los enlaces
existentes y facilitando la formacin de otros nuevos.
Sustrato: es la sustancia sobre la que acta una enzima El sustrato se une al sitio activo de la
enzima, y se forma un complejo transformado en enzima-sustrato.
El sustrato por accin de la enzima es producto y es liberado del sitio activo, quedando libre para
recibir otro sustrato.
La unin del sustrato a la enzima se puede explicar por medio de dos mecanismos:
Modelo de Emil Fisher: La enzima es un molde tridimensional en negativo que se acopla en forma
rgida al molde tridimensional en positivo del sustrato. A este modelo tambin se lo denomina
modelo de llave en cerradura.




Modelo de ajuste inducido o de Koshland: El sustrato induce cambios conformacionales en la
enzima, se orienta y unen la enzima y el sustrato, sufren tensin fsica o electrnica. Se produce un
debilitamiento de los enlaces del sustrato y desciende la energa necesaria para romperlos. Se lo
denomina tambin modelo de mano en guante por el ajuste. La flexibilidad se debe a que el sitio
activo est constituido por tres tipos de residuos:
Residuos de contacto
Residuos de especificidad
Residuos catalticos






FACTORES QUE INFLUYEN SOBRE LA ACTIVIDAD ENZIMTICA
Temperatura: las reacciones catalizadas por enzimas, se aceleran aumentando la temperatura. Se
estima que por cada 10C la velocidad de la reaccin se duplica y viceversa disminuye a la mitad, a
lo que se denomina coeficiente trmico o Q10

Potencial de Hidrgeno pH: cada enzima tiene un pH ptimo. Este pH oscila entre 5 y 9. el pH
influye porque afecta la ionizacin del sitio activo, la ionizacin del substrato y los cambios de
conformacin espacial de las enzimas. Ej.
Pepsina 1.5 - 2.5
Acetil colinesterasa 7
Fosfatasa alcalina 9.5
Catalasa 7.0 - 7.6
La desestabilizacin del pH incurre decrecimiento de la actividad cataltica.

Concentracin de la enzima y coenzimas: la velocidad de la reaccin qumica es directamente
proporcional a la concentracin de enzima-coenzima cuando el sustrato est en exceso. Este
efecto cumple hasta cuando la concentracin enzimtica es tan grande que capta todo el sustrato
y se convierte un lmite por agotamiento del sustrato.






CONCLUSIN

Se concluye que un catalizador es una substancia la cual aumenta la velocidad de reaccin de un
reactivo, pero no altera la estequiometra de este mismo.

Existen diferentes tipos de catalizadores, la diferencia que existe entre un catalizador y una
catlisis es que la catlisis es el proceso a travs del cual se incrementa la velocidad de una
reaccin qumica y el catalizador es la substancia con la cual ocurre la catlisis.

Dentro de los Factores que incluyen las reacciones enzimticas tenemos: Cambios en el pH,
Cambios en la temperatura, Presencia de cofactores, Las concentraciones del sustrato y de los
productos finales, Activacin, Costes, Disponibilidad

LINKOGRAFIA

http://www.slideshare.net/jmsamboni/catalisis-enzimatica-hidrolisis-de-urea
http://www.slideshare.net/GRESIQ/catlisis
http://es.scribd.com/doc/33634981/Cinetica-Enzimatica
http://www.biologiasur.org/apuntes/base-fisico-quimica/base/enzimas/mecanismo.html
http://www.monografias.com/trabajos71/enzimas/enzimas2.shtml#ixzz2pTYwsdPC