CUESTIONARIO: contaminacin fecal

1. Diga las razones por las que la prueba de Kligler es importante en la

determinacin de E. coli.
Su importancia radica en que mediante la observacin del viraje de color amarillo nos
damos cuenta que el resultado lactosa es positiva, igualmente permite obtener material
para la prueba de IMVC para la identificacin de microorganismos indicadores de
contaminacin fecal.
2. Defina lo que es un M.O.S indicador de la contaminacin fecal y cul es la
importancia en los alimentos.
Sirve para alertar que ha ocurrido una contaminacin de tipo biolgica estos indicadores,
adems de no ser patgenos, deben cumplir los criterios siguientes:
- Estar universalmente presentes, en grandes concentraciones, en las heces de
personas y animales
- No proliferar en aguas naturales.
- Tener una persistencia en agua similar a la de los agentes patgenos fecales;
- Estar presentes en concentraciones mayores que las de los agentes patgenos
fecales
- Responder a los procesos de tratamiento de forma similar a los agente patgenos
fecales
- Poder detectarse fcilmente mediante mtodos sencillos y baratos.
3. Qu finalidad tienen las diluciones? Dnde se requieren ms diluciones en
una muestra o en una muestra procesada?
Las diluciones sirven para hacer posible que los microorganismos estn en menores
concentraciones y as sea ms fcil saber su cantidad aproximada. Se requieren ms
diluciones en una muestra fresca puesto que ha estado ms expuesta a los organismos,
en cambio una muestra procesada ya ha sido previamente tratada por lo que su nmero
de microorganismos es menor.
4. Exponga todo acerca de la influencia de los Coliformes ,Colifecales y E.Coli en
la salud del hombre.
Coliformes: Los problemas que se atribuyen a infecciones coliformes son causados
muchas veces por ciertas variedades de Escherichiacoli. La gravedad puede ser muy
variable. Los problemas van desde infecciones agudas, con sbita y alta mortalidad, hasta
ligeras infecciones, de naturaleza crnica con baja morbilidad y mortalidad. Las
infecciones pueden resultar en una enfermedad respiratoria, causada por infeccin de los
sacos areos, una septicemia (sangre) cuando la infeccin es generalizada, una enteritis
por infeccin intestinal o una combinacin de cualquiera de las tres o de todas.
E.Coli: Puede causar infecciones intestinales y extraintestinales generalmente graves,
tales como infecciones del aparato excretor, cistitis, meningitis, peritonitis, mastitis,
septicemia y neumona. La Escherichiacoli est dividida por sus propiedades virulentas,
pudiendo causar diarrea en humanos y otros animales. Otras cepas causan
diarreas hemorrgicas por virtud de su agresividad, patogenicidad y toxicidad. Causado
generalmente por la contaminacin de alimentos, y posterior mala coccin de los mismos,
es decir, a temperaturas internas y externas menores de 70 C.
5. Describa la funcin que desempean cada uno de los medios de cultivo
descritos en la presente prctica.
- Agar rojo violeta con sales biliales: En el medio de cultivo, la peptona y el extracto
de levadura aportan los nutrientes necesarios para el crecimiento bacteriano, las sales
biliares y el cristal violeta inhiben el desarrollo de la flora Gram positiva, la lactosa es
el hidrato de carbono fermentable, y el rojo neutro es el indicador de pH.
Los coliformes son bacterias que fermentan la lactosa, acidifican el medio y producen
un viraje del indicador de pH al color rojo intenso. Debido a esto, se observan como
colonias de color rojo prpura, de 1 a2 mm de dimetro, rodeadas, generalmente, de
una zona rojiza de bilis precipitada.
- Caldo lactosado verde brillante bilis: En el medio de cultivo, la peptona aporta los
nutrientes necesarios para el adecuado desarrollo bacteriano, la bilis y el verde
brillante son los agentes selectivos que inhiben el desarrollo de bacterias Gram
positivas y Gram negativas a excepcin de coliformes, y la lactosa es el hidrato de
carbono fermentable.
Es una propiedad del grupo coliforme, la fermentacin de la lactosa con produccin de
cido y gas.
- Mediokligler: En el medio de cultivo, la peptona de carne y la triptena, aportan los
nutrientes adecuados para el desarrollo bacteriano. La lactosa y la glucosa son los
hidratos de carbono fermentables. El tiosulfato de sodio es el sustrato necesario para
la produccin de cido sulfhdrico, el citrato de hierro y amonio, es la fuente de iones
Fe
3+
, los cuales se combinan con el cido sulfhdrico y producen sulfuro de hierro, de
color negro. El rojo de fenol es el indicador de pH, y el cloruro de sodio mantiene el
balance osmtico. El agar es el agente solidificante.
- Por fermentacin de azcares, se producen cidos, que se detectan por medio del
indicador rojo de fenol, el cual vira al color amarillo en medio cido. El tiosulfato de
sodio se reduce a sulfuro de hidrgeno el que reacciona luego con una sal de hierro
proporcionando el tpico sulfuro de hierro de color negro.
6. Reporte el fundamento de la tabla del NMP de MC Crady
Se utiliza habitualmente cuando se sospecha que el recuento de los microorganismos
que estamos buscando va a ser bajo (<1000/100 ml). Se basa en la determinacin de
la presencia o ausencia de un determinado tipo de microorganismo, en diferentes
cantidades de muestra. Se analizan en forma paralela por triplicado o quintuplicado
porciones de la muestra cada vez menores que se dejan crecer en medio lquido.
Despus de la incubacin, se observan y cuentan el nmero de tubos positivos.
Cada tubo positivo, significa que en la cantidad de muestra en l sembrada haba por
lo menos 1 microorganismo de los que se est contando. La interpretacin de los
resultados, se hace en base a una distribucin de tipo Poisson, utilizando para ello las
llamadas tablas del NMP.
7. Analizando 15g. de una muestra de tomate, en la investigacin de la
contaminacin fecal se ha encontrado el siguiente resultado.
MEDIO VRBA
Dilucin L - 1 L- 2
S.M.inf. 786
-2 589 286
-3 68 43
-4 13 8
Encontrar el nmero de Coliformes por gramo de muestra, y fundamente la eleccin de sus
datos para su clculo.
LECTURA N 01: M
1
= 68 x

= 68000
N
1
= 6.8 x

ufc / gr
LECTURA N 02: M
2
=286 x10
2
M
3
= 43 x10
3

N2 = 2.86 x

ufc / gr. = 28600 N3 = 4.3 x

ufc / gr = 43000
N3/N2 = 43000/28600 = 1.5
Np =

= 35800 = 3.58 x 10
4
ufc/g