METODOS INSTRUMENTALES

Los mtodos que utiliza la qumica analtica para la caracterizacin de la materia suelen
clasificarse en qumicos e instrumentales.



Los mtodos qumicos estn basados en interacciones es materia- materia, esto es, en
reacciones qumicas. Estos mtodos fueron durante un gran periodo de tiempo
esencialmente empricos, implicando, en la mayora de los casos, una gran destreza
experimental. Actualmente de utilizan conceptos, fenmenos y propiedades que han
contribuido a aumentar y consolidar la base sobre la que se asientan los antiguos
mtodos empricos, as como a desarrollar otros nuevos.
Por otro lado, la revolucin tecnolgica e industrial, a la vez que plantea nuevos
problemas, ha impuesto el desarrollo de nuevos mtodos, de forma que actualmente
puede afirmarse que todas las propiedades de la materia pueden utilizarse para el
establecimiento de un mtodo de anlisis. Surgen as una gran cantidad de mtodos
instrumentales, basados en interacciones materia-materia, que emplean algn
aparato distinto de la balanza y en la bureta para realizar la medida y para los cuales
no es esencial el concurso de una reaccin qumica.
Un mtodo analtico se considera fsico cuando no incluye reaccin qumica alguna y la
operacin de medida no modifica la composicin qumica del sistema, como, por
ejemplo, cuando se trata de medir la intensidad del color de una disolucin de
permanganato (la cual es proporcional a la concentracin).





BREVE PANORAMA HISTORICO.

Puede decirse que la aplicacin de las tcnicas instrumentales al anlisis comenz con
el siglo actual, pues en 1903, kuster y gruters sentaron las bases de las valoraciones
conductimetricas, desarrollndose posteriormente las valoraciones potencio mtricas
aplicadas a las reacciones redox y de precipitacin.
En la dcada de los treinta se construyeron los primeros electrodos de vidrio sensibles
a los iones de hidrogeno, lo cual constituyo un avance importante al hacer posible la
determinacin rpida y continua del pH. En 1922, Heyrovsky haba descubierto la
polarografia, lo que constituy un importante avance para el anlisis en el mbito de
trazas, as como efectuar numerosos anlisis de productos industriales en tiempo muy
corto, requisitos que no se conseguan con los tradicionales mtodos vi mtricos y
volumtricos.
La necesidad de solucionar estos problemas provoco el desarrollo espectacular de los
mtodos instrumentales que se produjo a partir de los treinta, si bien, los avances
conseguidos nicamente se notaron en los pases ms industrializaos. Al comenzar la
dcada de los cuarenta ya se utilizaban de forma rutinaria los espectrofotmetros de
ultravioleta e infrarrojo, los espectrmetros de emisin, los fluorimetros, los
polarografos, etc.

CARACTERISTICAS DE LOS METODOS INSTRUMENTALES.
Los mtodos qumicos cuantitativos tienen carcter absoluto. En ellos, la propiedad
medida es funcin directa de la concentracin o de la cantidad, de acuerdo con una
relacin de proporcionalidad.
P = KC
Donde P representa la magnitud de la propiedad medida, y C es la concentracin o la
cantidad. Adems, la constante K es nica, esto es, tiene un valor perfectamente
definido, deducibles de las leyes estequiometrias. En estos mtodos, basta una simple
medida para efectuar la determinacin.
As por ejemplo, un mtodo volumtrico, una sola lectura del volumen de reactivo
aadido desde la bureta puede ser suficiente para determinar la concentracin del
componente de inters.
Por su parte, los mtodos instrumentales tienen carcter relativo. Tambin se basan
en la medida de una propiedad, P (normalmente fsica), que es funcin de la
concentracin, P=KC. Sin embargo, a diferencia de los mtodos qumicos, la constante
de proporcionalidad no es nica, al depender de las condiciones experimentales. As,
por ejemplo en espectrofotometra, la absorbancia, A (propiedad medida) est
relacionada con la concentracin por:

A= e b C
Donde e es la absortividad y b el espesor de la muestra.

TIPOS DE CALIBRADOS:
Los tres mtodos de comparacin con patrones empleados ms frecuentemente son
los que utilizan curvas de calibrado obtenidas mediante series de patrones, el mtodo
de las adiciones estndar, y el mtodo del patrn interno.
-CURVAS DE CALIBRADO
La utilizacin de curvas de calibrado obtenidas a partir de series de patrones es,
posiblemente, el mtodo ms utilizado.
Consiste en medir la propiedad analtica de inters, P1, P2, P3, etc., en una serie de
muestras de composicin conocida, C1, C2, C3, etc., y preparadas todas ellas en las
mismas condiciones.

1. Curva de calibrado normal
Existen dos facetas de calibracin en el anlisis cualitativo, la calibracin instrumental
y la calibracin metodolgica. La calibracin instrumental se realiza con estndares
que no contienen el analito y se utiliza para asegurar el funcionamiento del instrumento
empleado, mientras que la calibracin metodolgica se realiza con estndares que
contienen el analito para establecer una relacin entre las caractersticas fsico-
qumicas del analito y las seales del instrumento.
En un proceso analtico se relaciona la seal y caractersticas del analito, de modo que
la calibracin se realiza al obtener la seal de respuesta como funcin de la
concentracin conocida del analito. Se representan los datos obtenidos y se obtiene la
grfica de la seal corregida frente a la concentracin del analito.
Lo normal es que la grfica tienda a una lnea recta, donde a medida que aumenta la
concentracin, la seal de respuesta es mayor (pendiente positiva). En el modelo de
curva de calibracin lineal, la pendiente vendr dada por la ecuacin matemtica:
y = mx + b13
Siendo m la pendiente, x la concentracin de analito e y la seal de respuesta.







Calibrado directo
Concentracin

Seal Analtica(Abs)
La sensibilidad de calibracin
es la pendiente de la curva de
calibrado. Por tanto en una
curva de calibrado lineal la
sensibilidad es siempre la
misma y no va a depender de
la concentracin, ya que para
que se cumpla y = mx + b, las
concentraciones deben tener
una incertidumbre
insignificante.
Cuando la grfica no se ajusta
a una ecuacin lineal, la
sensibilidad de calibracin no va a ser siempre la misma ya que variar al cambiar la
concentracin del analito.
Para obtener un buen modelo matemtico que defina a la curva de calibrado no lineal
es preciso tener un nmero elevado de datos.
Antes de medir la seal de la muestra es preciso corregir la respuesta analtica original
del instrumento con la medida de un blanco. El blanco debe ser idntico a la muestra
pero sin analito; con muestras complejas es difcil conseguir el blanco ideal.
Puesto que para realizar la curva de calibrado se introducen patrones con
concentraciones conocidas con exactitud, es necesario que la matriz de los patrones
sea lo ms parecida posible a la matriz de las muestras a analizar para minimizar los
efectos de interferencia que los componentes presentes en la muestra puedan causar
en la medida de absorbancia.
Estos errores son en muchas ocasiones inevitables, pero se pueden intentar reducir
con diversos mtodos como llevar a cabo una dilucin de la muestra o aadir agentes
que modifiquen la matriz o que la enmascaren. Con esta adicin, el agente introducido
reacciona formando un complejo con el agente que causa interferencias para que no
afecte a la determinacin.
y = mx + b14
Mtodo de adicin estndar: sencillo y mltiple
El mtodo de adiciones estndar consiste en aadir diferentes volmenes de una
disolucin estndar conocida del analito a varias alcuotas de la muestra.
Emplendose los estndares externos se supone que, cuando en la muestra y en el
estndar est presente la misma concentracin de analito se obtendr la misma
respuesta. ste mtodo resulta adecuado para las muestras complejas donde los
efectos de la matriz son importantes, porque no es necesario intentar adaptar las
matrices de los patrones a las matrices de la muestra. Simplemente se aade a varias
alcuotas de la muestra una cantidad conocida de analito.


2. Mtodo de adicin estndar sencillo
Consiste en tomar dos porciones de la muestra de manera que una porcin sirve como
referencia; se diluye un volumen (Vo) de muestra con una concentracin de analito
(Ca) desconocida hasta un volumen final (Vf) y se mide de manera habitual
(Smuestra), y a la segunda porcin de igual volumen Vo se le aade una cantidad
conocida (Vs) de la disolucin estndar del analito, con una concentracin conocida
(Cs) hasta el mismo volumen final (Vf). Se relacionan las dos respuestas(S y
Smuestra) con la concentracin desconocida (Ca) de la muestra:
Smuestra = KCaVo/ Vf
S = K(CaVo/Vf + CsVs/Vf)
Siendo Vo/Vf y Vs/Vf cocientes que representan la dilucin y K una constante de
proporcionalidad que es la pendiente de la curva de calibrado. K relaciona la seal
medida con la concentracin de analito.
Si el volumen de la disolucin patrn conocido (Vs) es menor que el volumen Vo de la
muestra, el efecto de la adicin del patrn a la matriz de la muestra ser insignificante
y las matrices de la muestra original y de la muestra a la que se le ha agregado la
disolucin patrn podrn ser consideradas idnticas. Siendo la concentracin del
analito la nica diferencia. En estas condiciones, el valor de K en ambas ecuaciones
ser el mismo, por lo que despejando K en ambas ecuaciones e igualando,
obtendremos la siguiente ecuacin para as conocer la concentracin de analito en la
muestra original Ca:
Smuestra / Ca(Vo/Vf) = S / Ca(Vo/Vf) + Cs(Vs/Vf)15
La representacin de S en funcin de Vs es una lnea recta de la forma S = a + mVs
Donde la pendiente m y la ordenada en el origen a, vienen dadas por:
m = KCs / Vf y
a = KCaVo / Vf
ste mtodo es ms arriesgado que el de adiciones estndar mltiples, ya que no hay
forma de verificar la linealidad con slo una porcin de la muestra, y los resultados
dependen de lo fiable que sea una medida.
3. Mtodo de adicin estndar mltiple
Para realizar el mtodo de adicin estndar mltiple se aaden cantidades conocidas
crecientes de la disolucin estndar pura del analito a varias alcuotas de la muestra
real.
De manera que todas tengan una concentracin de analito que es la suma de la
original y la aadida. Se obtiene una seal para cada alcuota y se representan en
funcin de las concentraciones del estndar aadido. As, se obtiene una recta de
calibrado. Si comparando la grfica de calibracin externa o normal y la obtenida por
adiciones patrn, se ve que es paralela a la obtenida con estndares puros, es decir,
con la misma pendiente, significa que no hay efectos de matriz (interferencias).
La concentracin de analito en la muestra se obtiene por extrapolacin de la recta de
calibrado, con lo que la precisin es menor que si se calculara por interpolacin, como
en el mtodo de patrn interno o de estandarizacin externa.
Otra desventaja de ste mtodo es que se requiere ms tiempo para realizar las
adiciones y las medidas, pero la ventaja es que se puede comprobar que se cumple la
relacin lineal entre la respuesta y la concentracin del analito. Se toman varias
alcuotas de la disolucin problema con el mismo volumen (Vo) y con una
concentracin del analito desconocida (Ca) y se introducen en diferentes matraces de
volumen final Vf
. A cada matraz, excepto a uno, se le aade un volumen variable de disolucin patrn
Vs con una concentracin de analito conocida. Se diluyen todas las disoluciones al
mismo volumen Vf
. Una vez diluidos se mide la seal de inters en cada disolucin, dando una seal de
medida S en el instrumento, y se relaciona con la concentracin de analito mediante:
S = K [Ca (Vo/Vf) + Cs (Vs/Vf)]


Las dos curvas de calibracin sern la representacin de S:
- En funcin del volumen aadido de solucin patrn Vs mediante S = a + mVs, que al
igual que en el mtodo de adicin estndar sencillo ser una lnea recta donde la
pendiente m es KCs/Vf y la ordenada en el origen a es KCaVo/Vf
. Como tanto Vo como Cs son conocidos, la abcisa en el origen (-CaVo/Cs) ya que es
el valor de Vs (X) cuando S=0) puede utilizarse para calcular la concentracin del
analito Ca de la muestra original que es la concentracin de analito que hay en el
matraz al cual no se le haba aadido disolucin patrn, por lo que la concentracin de
analito aadido Cs es cero.
- En funcin de las concentraciones de los patrones agregados despus de la dilucin
Cs(Vs/Vf). La representacin es una lnea recta segn S = a + mCs(Vs/Vf) donde la
pendiente m es K y la ordenada en el origen a es KCaVo/Vf.
. Como tanto Vo como Vf son conocidos, la abcisa en el origen (-CaVo/Vf) puede
utilizarse para calcular la concentracin del analito Ca de la muestra original.
4. Mtodo de patrn interno
En el mtodo de patrn o estndar interno se adiciona a las muestras, estndares y
blancos, una cantidad conocida de una especie de referencia. Es decir, una sustancia
patrn. La sustancia patrn tambin puede ser un componente mayoritario de las
muestras que est en una concentracin suficientemente elevada para que pueda ser
la misma en todos los casos. Para hacer la representacin grfica, se calcula el
cociente entre la respuesta del analito y la respuesta del patrn interno y en la grfica
se representan frente a las concentraciones de los patrones. En el eje y se
representan la relacin de respuestas y en el eje x la concentracin del analito de los
patrones. Si la concentracin del patrn interno es constante en las disoluciones con
diferentes concentraciones de analito, la curva de calibracin ser lineal.
El mtodo de patrn interno puede ser de adicin de un punto o de varios puntos, al
igual que el mtodo de adicin estndar. La ventaja principal de este mtodo es que si
se elige bien el patrn interno y se realizan bien las adiciones, se pueden minimizar los
errores instrumentales debido a que el analito y el patrn varan de la misma forma.
La dificultad para llevar a cabo este mtodo es encontrar a la sustancia con las
condiciones adecuadas para ser el patrn interno. Ya que se requiere que de una
seal similar a la del analito pero a la vez que sea lo suficientemente diferente como
para que el instrumento pueda diferenciarlas. Tambin se debe asegurar que no haya
patrn interno en la matriz de la muestra para asegurar que la nica procedencia del
patrn sea la cantidad aadida. Es importante que la seal sea reproducible, as como
que el patrn sea una sustancia estable y de gran pureza que genere una seal similar
a la del analito.
Este mtodo se suele utilizar para determinar elementos traza en metales por
espectroscopia de emisin.