24-10-2014

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Qumica Aplicada Qumica Aplicada
Alexandra Nobre
2014/2015
Mdulo Mdulo 7 7 Controlo Controlo de de Microrganismos I Microrganismos I
Tcnico de Anlise Laboratorial Tcnico de Anlise Laboratorial
Bactrias Bactrias
Esporulao bacteriana
Esporos
Endosporos
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Esporulao bacteriana
Endosporos
Um esporo resulta da desidratao da clula bacteriana
e da formao de uma parede grossa e resistente em
todo o citoplasma desidratado.
O esporo consegue suspender completamente a sua
atividade metablica, sobrevivendo em situaes adversas
como calor intenso e falta de gua.
Esporulao bacteriana
Endosporos
No processo de formao do
esporo, o cromossoma
duplica-se e uma das cpias
produzidas isolada do
restante da clula e envolta
por uma membrana
plasmtica.
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Esporulao bacteriana
Endosporos
Aps isso, h a formao de
uma grossa parede em torno
dessa membrana, constituindo
o esporo (assim chamado
porque se forma dentro da
clula).
Esporulao bacteriana
Endosporos
A outra poro do
contedo celular
degradada e a parede
rompe-se libertando o
esporo.
Em ambiente propcio, o esporo hidrata-se, reconstituindo
uma nova bactria.
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Esporulao bacteriana
Endosporos
Clula vegetativa
Endosporo
Esporulao bacteriana
Endosporos
Relevantes nas reas
de Medicina e
indstria alimentar
Resistentes ao calor
e esterilizao
qumica
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Esporulao bacteriana
Endosporos
Uma das formas de eliminar definitivamente os esporos
a autoclavagem, tcnica pela qual materiais so tratados
com vapor de gua a temperaturas acima de 120C
durante um perodo de, no mnimo, 20 minutos.
Esporulao bacteriana
Endosporos
Bacillus anthracis, uma bactria anaerbia facultativa
que causa a doena conhecida como antraz em gado
bovino, ovino e equino, podendo eventualmente ser
transmitida tambm a seres humanos.
Os seus esporos podem permanecer durante anos nas
pastagens infetando posteriormente o gado.
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Esporulao bacteriana
Endosporos
Bactrias do gnero Clostridium so anaerbias
obrigatrias e provocam doenas como:
ttano (Clostridium tetani),
gangrena gasosa (causada por Clostridium perfringens)
o botulismo (Clostridium botulinum).
Esporulao bacteriana
Endosporos
Clostridium botulinum
transmitida por alimentos industrializados mal
esterilizados (conservas, enchidos, enlatados).
Nas condies anaerbias em que o alimento de
encontra, os esporos germinam e originam populaes de
bactrias, que produzem a toxina botulnica (letal em
caso de ingesto.
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Exigncias nutritivas
Para a renovao do protoplasma (parte viva da clula) e
execuo da sua atividade, as bactrias necessitam de:
Fonte de energia
Fonte de matria-prima.
Exigncias nutritivas
Fototrficos Fototrficos: : utilizam a luz solar como fonte de energia
e convertem-na em energia qumica
Quimiotrficos Quimiotrficos: : retiram energia da oxidao de
molculas orgnicas e/ou inorgnicas
Fonte de Energia
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Exigncias nutritivas
Para a renovao da matria viva, os elementos
quantitativamente mais importantes so:
Fonte de matria-prima
Carbono
Hidrognio
Oxignio
Azoto
Enxofre
Fsforo
Exigncias nutritivas
Autotrficos Autotrficos: : nica fonte de Carbono o CO
2
ou HCO
3
(carbono inorgnico)
Heterotrficos Heterotrficos: : exigem fontes orgnicas de carbono
(lpidos, lcoois, amido, celulose,)
Fonte de Carbono
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Exigncias nutritivas
Resumo da classificao
Classificao
Fonte de
carbono
Fonte de energia Exemplos
Quimioautotrfico CO
2
Compostos
inorgnicos
Bactrias
nitrificantes
Quimioheterotrfico
Compostos
orgnicos
Compostos
orgnicos
Bactrias
saprfitas
Fotoautotrfico CO
2
Luz Cianobactrias
Fotoheterotrfico
Compostos
orgnicos
Luz
Bactrias no-
sulfurosas verdes
e prpuras
Exigncias nutritivas
Ies inorgnicos essenciais
Macronutrientes necessitam em maior quantidade de P,
S, K, Mg e Fe
P sntese do cido nuclico e fosfolpidos
S cistena e metionina (aminocidos); tiamina, biotina, coenzima A
(vitaminas)
K enzimas envolvidas na sntese de protenas
Mg estabilizador de ribossomas, membranas celulares e cidos
nucleicos
Micronutrientes Cu, Co, Zn, Mn, Na
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Exigncias nutritivas
gua
No constitui um nutriente mas indispensvel para o
crescimento das bactrias:
As bactrias alimentam-se atravs da passagem de
substncias em soluo pela membrana plasmtica.
Regula a presso osmtica
A maioria das bactrias morre por dessecao (excepto
esporos)
Crescimento bacteriano
Classificao quanto atmosfera (Oxignio)
AERBIAS (exigem presena de O
2
livre)
ANAERBIA RESTRITA (no tolera O
2
morre)
ANAERBIA NO-RESTRITA (no utiliza O
2
, mas ele
no txico)
ANAERBIA FACULTATIVA (cresce tanto na presena
quanto na ausncia de O
2
livre)
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Crescimento bacteriano
Classificao quanto temperatura
Microrganismos T tima (C) Exemplos
Psicrotrficos 20 a 30
Pseudomonas, Alcaligenes,
Flavobacterium, Micrococcus, os mais
importantes em alimentos refrigerados
Mesfilos 30 a 40
A maioria das espcies - Maior parte dos
patgenicos
Termfilos 45 a 65
algumas espcies de Bacillus e
Clostridium
Crescimento bacteriano
Classificao quanto ao pH
Microrganismos pH timo
Acidfilos 1 - 5,5
Neutrfilos 5,5 8
Alcalfilos 8 11,5
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Crescimento bacteriano
Reproduo: diviso binria assexuada
Crescimento bacteriano
Crescimento de uma cultura bacteriana
Considerando 1 nica bactria que sofre diviso binria, o
aumento da populao na cultura :
1 2 4 8 16 32
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Crescimento bacteriano
Crescimento de uma cultura bacteriana
Este aumento do nmero de clulas bacterianas pode
expressar-se atravs de uma progresso geomtrica:
1 2
1
2
2
2
3
2
n
n = n de geraes
Durante o crescimento ativo de uma cultura de bactrias
(sem morte), as clulas crescem exponencialmente
aumentando de acordo com esta progresso geomtrica.
Crescimento bacteriano
Tempo de gerao
o intervalo de tempo necessrio para que cada
microrganismo se divida.
Cada espcie tem o seu tempo de gerao.
Exemplos:
E. coli - 12,5 min (meio lquido)
Mycobacterium tuberculosis - 13 a 15 horas
fortemente influenciado pela composio nutricional
do meio de cultura e pelas condies fsicas de incubao.
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Crescimento bacteriano
Curva de crescimento (unicelulares, sistema fechado)
Representa o perodo de
adaptao fisiolgica dos
m.o. ao meio onde se
encontram (no h
multiplicao microbiana).
Fase lag (A)
Crescimento bacteriano
Curva de crescimento (unicelulares, sistema fechado)
Momento em que a
multiplicao dos m.o.
atinge o crescimento
mximo
Fase exponencial de crescimento (B)
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Crescimento bacteriano
Curva de crescimento (unicelulares, sistema fechado)
Perodo em que o nmero
de clulas que se
multiplicam igual ao
nmero de clulas que
morre.
A quantidade de clulas
viveis mantm-se
constante.
Fase estacionria mxima (C)
Crescimento bacteriano
Curva de crescimento (unicelulares, sistema fechado)
Quando as condies do
meio se tornam
imprprias para a
sobrevivncia microbiana.
Fase de morte (D)
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Crescimento bacteriano
Curva de crescimento (unicelulares, sistema fechado)
Crescimento bacteriano
Meios de cultura bacteriolgica
Para a cultura de
microrganismos em
laboratrio necessrio
existirem meios de
cultura apropriados que
simulem ou melhorem as
condies naturais do
ambiente em que esses
m.o. se desenvolvem.
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Crescimento bacteriano
Meios de cultura bacteriolgica
Um meio de cultura
um meio nutritivo capaz
de permitir a nutrio e
o crescimento dos m.o.
fora do seu ambiente
biolgico natural, ou
seja, uma preparao
de nutrientes utilizada
para o crescimento de
m.o. em laboratrio.
Crescimento bacteriano
Meios de cultura bacteriolgica
Composio
Tipos (objetivos funcionais, estado fsico)
Trabalho de
Pares