06/06/2013

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Universidade Federal do Esprito Santo
Centro de Cincias da Sade
Departamento de Cincias Farmacuticas
Introduo
Toxicologia
Prof Eduardo Frizzera Meira
Alguns nomes que contriburam para
identificao de novos agentes txicos
e teraputicos:
HIPCRATES: identificao
venenos e princpios de toxicologia
clnica (biodisponibilidade na
teraputica e superdosagem).
Fsico grego
(460-364 a.C.)
Breve Histrico
Fsico, farmacologista e
botnico grego (40-90 d.C.)
DIOSCRIDES: classificao
dos venenos conforme origem:
animal (vboras, sapos), vegetal (pio,
cicuta, acnito e digitalis) e mineral
(arsnio, antimnio, chumbo).
MITRIDATES: Primeiro a realizar
experincias toxicolgicas. Teste de
antdotos (envenenamento de
escravos).
Rei do Ponto (sia Menor)
(120-63 a.C.)
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AVICENA: discusses
mecanismos de ao de
venenos (neurotoxicidade
e efeitos metablicos).
Mdico rabe
(980-1037)
Fsico, mdico e
astrlogo suo
(1493-1541)
PARACELSUS: Postulado mais
conhecido:
Todas as substncias so
venenos; no h nenhuma que
no seja um veneno. A dose
correta diferencia o veneno do
remdio.
FONTANA (1720-1805): Estudos com
venenos de serpentes = Fundador da
Toxicologia Moderna.
BERNARD: Conceito de toxicidade de
substncias em rgos-alvo.
EHRLICH: Estudou toxicodinmica e
farmacodinmica. Identificou vrios
receptores = Fundador da Teoria dos
Receptores.
Sculo XVIII-XIX:
Claude Bernard
(1813-1878)
Ehrlich
(1854-1915)
Sculo XX: Avano Tecnolgico
na Sntese Qumica
Produtos farmacuticos, alimentares e agrcolas
Inmeros casos de intoxicao:
Sulfanilamida (1937 - EUA):
Morte de centenas de pacientes.
Intoxicao pelo solvente (dietilenoglicol)
utilizado na preparao do elixir.
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Sculo XX: Avano Tecnolgico
na Sntese Qumica
Produtos farmacuticos, alimentares e agrcolas
Talidomida (dcada de 50):
Crianas vtimas pela utilizao de talidomida por mulheres
na gestao.
Talidomida = teratognica aos fetos, principalmente nos
primeiros meses de desenvolvimento.
Lei 12.190 (2010): 227 vtimas R$50.000 em indenizao.
Enfoque atual
Autoridades governamentais de pases: testes obrigatrios
de toxicidade de todos os medicamentos, previamente ao
seu registro junto aos rgos competentes.
Obrigatoriedade de ensaios toxicolgicos vlida tambm
para as substncias pertencentes a outras categorias
(agrotxicos, domissanitrios e aditivos alimentares).
Segurana e Risco x Testes Toxicidade
Introduo
TOXICOLOGIA
Cincia que trata do efeitos nocivos
decorrentes das interaes de substncias
qumicas com organismos vivos.
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Conceitos Importantes
Toxicante
Substs. qumicas capazes de produzir um efeito
nocivo.
Xenobitico
Substs. qumicas estranhas ao organismo; que no
possuem papel fisiolgico conhecido.
Droga
Subst. capaz de modificar o sist. fisiolgico,
utilizada com ou sem inteno de benefcio ao
organismo.
Frmaco
Subst. (estrutura qumica conhecida) capaz de
modificar o sist. fisiolgico ou estado patolgico
em benefcio do organismo.
Antdoto
Agente capaz de antagonizar os efeitos txicos de
uma subst.
Ex.: A Cannabis sativa (maconha) seria uma droga e seu
principal constituinte psicoativo, o THC, um frmaco.
Conceitos Importantes
Toxicidade CAPACIDADE da substncia
qumica produzir efeito nocivo quando interage
com um organismo vivo.
Intoxicao MANIFESTAO do efeito nocivo
resultante da interao da substncia qumica com o
organismo vivo.
Fases da Intoxicao
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Fatores que influenciam na toxidade de
uma substncia qumica
Toda substncia pode ser considera txica
dependendo de alguns fatores como:
Condio de exposio
Dose administrada ou absorvida
Tempo e frequncia de exposio
Vias de administrao
Entretanto as substncias podem ser seguras
se forem usadas dentro dos nveis de tolerncia
Fatores que influenciam na toxidade de
uma substncia qumica
A toxicidade de uma substncia a um organismo
vivo considerada como a capacidade de
causar dano grave ou morte
Ex: chumbinho carbamatos e organofosforado
Organofosforados atuam inibindo as colinesterases
aumentando os nveis de acetilcolina na fenda
sinptica
Carbamatos ligam-se as estruturas proticas
Fatores que influenciam na toxidade de
uma substncia qumica
Os efeitos txicos produzidos por substncias qumicas
s se manifestam se o agente txico ou o produto de
sua biotransformao alcanar locais especficos do
organismo em concentrao e tempo suficiente para
produzir o efeito
Ex: os efeitos txicos dos aminoglicosdeos
desconhecido embora eles se acumulam nas clulas
corticais renais sendo capazes de provocar danos aos
tbulos proximais
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Fatores que influenciam na toxidade de
uma substncia qumica
A exposio funo da dose (concentrao) do agente
qumico e do tempo de interao com o organismo
Como podemos alterar as
concentraes e o tempo de
interao das substncias
qumicas no organismos?
Alterando as caractersticas qumicas
!!!!!!!!!
Diviso da Toxicologia
Analtica
ou Qumica
Clnica
ou Mdica
Experimental
- Identificao e/ou quantificao dos toxicantes
e/ou metablitos.
- Deteco de parmetros relacionados exposio
ao toxicante.
- mbito: Farmacutico/Bioqumico ou Qumico.
- Estudo de sintomas e sinais clnicos.
- mbito: Mdico ou Mdico Veterinrio.
- Identificar e compreender os mecanismos de ao
txica sobre o sistema biolgico e avaliar os efeitos
decorrentes dessa ao.
- Pesquisa em animais de experimentao.
- mbito: multiprofissional.
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reas de Atuao
Toxicologia Ambiental
Toxicologia Ocupacional
Toxicologia de Alimentos
Toxicologia de Medicamentos
Toxicologia Social
reas de Atuao
TOXICOLOGIA AMBIENTAL: estuda os efeitos
nocivos causados por agentes qumicos
contaminantes do ambiente (gua, solo e ar).
TOXICOLOGIA OCUPACIONAL: estuda os
efeitos nocivos causados por agentes qumicos
contaminantes do ambiente de trabalho.
TOXICOLOGIA DE ALIMENTOS: estuda substncias
txicas presentes nos alimentos, em especial de
origem natural, por adio ou contaminao durante
processo de produo.
TOXICOLOGIA DE MEDICAMENTOS: estuda os efeitos
nocivos causados por medicamentos/cosmticos,
decorrentes de uso inadequado ou da susceptibilidade
individual.
TOXICOLOGIA SOCIAL: estuda os efeitos nocivos
decorrentes do uso no-mdico de drogas ou
frmacos, causando prejuzo ao indivduo e
sociedade.
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Universidade Federal do Esprito Santo
Centro de Cincias da Sade
Departamento de Cincias Farmacuticas
Toxicocintica
Prof Eduardo Frizzera Meira
Definio
Toxicocintica
Quantidade AT
que atua no
organismo
[AT] no plasma
Absoro Distribuio Metabolismo Excreo
Agente Txico qualquer substncia, ou seus metablitos,
capaz de produzir efeito txico (nocivo) no organismo vivo
sob certas condies de exposio.
X
Vias de Introduo
Principais:
Transcutnea
Digestiva
Respiratria
Vias parenterais (intravenosa, intramuscular,
subcutnea) constituem meios normais de introduo de
agentes medicamentosos.
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Processo de Absoro
Passagem de substncias do local de contato
para a circulao sangunea.
Envolvendo travessia por vrias barreiras
biolgicas:
Barreiras/Membranas
Pele Pulmes TGI Capilares
Membranas Biolgicas
Lipossolveis so facilmente absorvidos atravs da
bicamada lipdica.
No-lipossolveis dependem de canais e poros
hidroflicos ou de sistemas transportadores especficos
para atravessar as membranas biolgicas.
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Mecanismos de Transporte
atravs das Membranas
No h gasto de energia
Dependem apenas do gradiente de
concentrao.
Compreendem:
FILTRAO
DIFUSO SIMPLES
1. Transportes Passivos
Filtrao
Passagem de molculas polares, hidrossolveis,
carregadas pela gua atravs de poros aquosos
da membrana.
importante o gradiente de concentrao, a
hidrossolubilidade e o dimetro dos poros.
Passam somente partculas menores que o
dimetro dos poros.
Difuso Simples
Passagem de molculas apolares, lipossolveis,
por difuso atravs da membrana.
Para eletrlitos fracos somente a sua forma no-
ionizada consegue transpor membranas.
pKa e pH do meio determinam maior ou menor
ionizao.
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2. Transporte Ativo
H consumo de energia
Movimento contra gradiente de concentrao
Mediado por protenas carreadoras
Protenas
Carreadoras
Contra
Gradiente
Gasto de
Energia
3. Pinocitose
Exigem energia celular, mas no necessitam de
carreadores.
Invaginao da membrana celular em torno de
partculas lquidas.
4. Difuso Facilitada
Protenas
Carreadoras
A Favor do
Gradiente
Sem Gasto de
Energia
um transporte ativo da membrana porm sem
gasto de energia (a favor do gradiente de
concentrao).
Substncia transportada por protena carreadora.
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Absoro pela Pele e Mucosas
Principais Locais de Absoro
Absoro de certas
substncias que podem
causar:
efeitos txicos locais como
irritao, corroso (cidos,
bases e certos oxidantes),
mutaes.
efeitos txicos sistmicos.
Exemplos: inseticidas
fosforados, nicotina.
Absoro pela via Respiratria
Absoro de partculas
slidas e lquidas,
gases e substncias
volteis.
Capilares alveolares:
membranas de fcil
travessia, grande
superfcie de absoro
e rica vascularizao.
Absoro de Partculas
Fator determinante = TAMANHO
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Ar Sangue
Absoro, dissoluo no sangue
e distribuio para os tecidos
Coeficiente de partio sangue/ar
Equilbrio
Relao de solubilidade
entre os dois meios
Grau de Absoro de Gases e Volteis
Fator determinante = SOLUBILIDADE NO SANGUE
Obs.: Pouco influi na
absoro de substncias
de alto coeficiente de
partio.
Substncias com Coeficiente
Fatores Limitantes
Circulao Sangunea e Perfuso Pulmonar
Substncia Coeficiente
de Partio
sangue/ar
Tempo de
Equilbrio
(min)
Fator
Limitante
Clorofrmio 15 Superior a 60 respirao
Etileno 0,14 8 a 21 circulao
Fatores limitantes da absoro de gases e vapores
por via respiratria
Substncias com Coeficiente
Fator Limitante
Frequncia Respiratria
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Absoro pelo Trato Digestivo
Acidental:
gua/alimentos
contaminados
Voluntria:
Ato suicida
Ingesto drogas
Barreira Intestinal
Presena de
microvilosidades,
que proporcionam
grande rea de
superfcie.
Fatores que afetam a absoro GI
Exemplos:
Barreira GI substncias lipoflicas (difuso passiva)
pH do meio e pKa eletrlitos fracos
Tempo esvaziamento e motilidade alimentos
Ciclo ntero-heptico
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Processo de Distribuio
Uma vez absorvido, o agente txico distribudo
pelo sangue aos diversos tecidos do corpo.
Intensidade/durao
do efeito txico
[AT] no
stio de ao
Fase Inicial e Final da Distribuio
Ex.:
- 2h aps administrao de Pb em animais, 50% da
dose se encontra no fgado.
- j aos 30 dias, 90% do metal que permanece no
organismo est ligado ao tecido sseo.
Tecidos mais
Irrigados
Tecidos menos
Irrigados
Maior quantidade Maior acmulo
(afinidade/poder de reteno)
Alguns fatores que interferem
na Distribuio
1. Propriedades fsico-qumicas do agente
txico:
Exemplo: Molculas lipossolveis atravessam
facilmente as membranas e as molculas polares
possuem distribuio restrita.
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Alguns fatores que interferem na
Distribuio
2. Ligao do agente txico s protenas
plasmticas:
grau de combinao proteca
permanncia no sangue
distribuio
Complexao com protenas:
- Albumina
- Lipoprotenas
- 1-glicoprotena cida
- -globulina
As protenas plasmticas so
indicadas conforme quantidade
relativa e mobilidade eletrofortica
Alguns fatores que interferem na
Distribuio
3. Fixao do agente txico a componentes
teciduais:
Nos tecidos, os agentes txicos fixam-se a vrios
componentes celulares de acordo com a sua natureza
qumica.
CO Hemoglobina
Pb e Flor Tecido sseo
Paraquat Tecido pulmonar
Organofosforados Tecido adiposo
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Volume de Distribuio
Extenso de Distribuio
Alto Vd
Baixo Vd
concentrao plasma
concentrao plasma
fixao protica
Obs.: Uma reduo do Vd pode aumentar concentrao
srica, podendo levar intoxicao.
Biotransformao
Agentes txicos pouco polares e
lipossolveis so biotransformados, em
geral, atravs de processos enzimticos
em substncias mais polares e
hidroslveis para serem facilmente
eliminados.
Vias de eliminao: urina, bile, fezes, ar
expirado, leite, suor e outras.
Biotransformao
Lipoflicas
Hidroflicas
Metablitos Polares
Sistemas enzimticos
Absoro
Excreo
Absoro
Excreo
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Tipos de Reaes
Inativao Bioativao
Detoxificao
Tipos de Reaes
Reaes de
Fase I
Reaes de
Fase II
Oxidao
Reduo
Hidrlise
Reaes de Conjugao
ou Sntese
Locais de Reaes
O fgado o rgo central do metabolismo dos agentes
txicos.
Outros rgos e tecidos: rins, pulmes, pele, mucosa
intestinal e plasma sanguneo.
Fraes Hepticas
PPT (9.000g)
Ncleo
Mitocndrias
Lisossomas
Membranas
Sobrenadante
Citosol (Frao Solvel)
PPT (105.000g)
Fragmentos RE
(Microssomas)
Reaes Biotransformao
Microssmica Citoslica
Fase I Fase II
Fgado homogeneizao
seguida de centrifugaes
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Reaes de Fase I
(microssmicas - RE)
Citocromo P-450
NADPH Citocromo
P-450 Redutase
Citocromo b5
Redutase
Componentes da Oxidase de Funo Mista:
Afinidade Vrios
Substratos
Transferncia de
Eltrons
Alternativa
Transferncia
de Eltrons
Sistema Citocromo P-450
Mecanismo de oxidao de substratos
pelo P-450
1
2
3
4
Ciclo cataltico do P450
1
2
3
4
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Exemplos oxidao via P450:
Mecanismo de reduo de substratos
pelo P-450
Tambm catalisa algumas reaes de reduo, que
ocorrem em condies de baixa concentrao de
oxignio.
Exemplos reduo via P450:
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Reaes de Hidrlise
Esterases:
Amidases:
(cido) (lcool)
(cido) (amina)
Desidrogenases, Redutases e
Oxidases
Alm das enzimas microssmicas, h tambm
enzimas citoslicas (solveis) que promovem
reaes de Fase I.
Reaes de Fase II (citoslicas)
Tipos de reaes sintticas:
1. Conjugao com cido glicurnico
2. Conjugao com cido sulfrico
3. Metilao
4. Acetilao
5. Conjugao com glutationa
6. Conjugao com aminocidos (glicina)
Agentes txicos ou seus
metablitos (fase I)
Grupo funcional de
substncia endgena +
Compostos altamente
polarizados e hidrossolveis
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1. Conjugao com cido Glicurnico
Enzima responsvel: Glicuroniltransferase
Substncia endgena: cido glicurnico ativado
UDPGA (cido UDP--D-glicurnico)
Substratos-alvo: lcoois/cidos carboxlicos, aminas e
grupos sulfidrlicos livres, formando os respectivos O, N e
S-glicuronatos.
Produtos excretados (rins e fgado): -glicuronatos
Exceo: uma reao microssmica (RE)
Ativao do cido Glicurnico
Exemplos conjugao com cido Glicurnico
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2. Conjugao com cido Sulfrico
Enzima responsvel: Sulfotransferases
Substncia endgena: cido sulfrico ativado
PAPS (3-fosfoadenosina-5-fosfossulfato)
Substratos-alvo: hidroxila nas suas molculas, como
fenis e lcoois alifticos.
Produtos excretados (urina): sulfatos orgnicos
ionizados
Reao: Citoslica
Ativao do cido sulfrico
3. Metilao
Enzima responsvel: Metiltransferases
Substncia endgena: Metionina ativada
grupo metila (-CH
3
)
Substratos-alvo: aminas, N-heterocclicos,
fenis e compostos contendo grupo sulfidrlico.
Reao: Citoslica
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Ativao da metionina
Exemplos
4. Acetilao
Enzima responsvel: Acetiltransferases
Substncia endgena: Acetilcoenzima A
grupo acila (-COCH
3
)
Substratos-alvo: principal via de biotransformao
das aminas aromticas e certas aminas alifticas.
Reao: Citoslica
Formao da acetilcoenzima A
Exemplo Acetilao
cido actico + Enzima A (HSCoA)
Acetilcoenzima A (CH3COSCoA)
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5. Conjugao com Glutationa
Enzima responsvel: Glutationa S-transferase
Substncia endgena: Glutationa
Glutationa = glicina + c. Glutmico + cistena
Substncias-alvo: ex.: bromobenzeno, clorofrmio
Produtos excretados (urina): conjugados
mercaptricos
Reao: Microssmica e Citoslica (5-40x maior)
Conjugao com glutationa e sua degradao
Fatores que modificam a
biotransformao
Classificados em internos e externos:
Internos: constitucionais (espcie, idade, peso, sexo,
gentica) e condicionais (estado nutricional,
temperatura corporal, estado patolgico).
Externos: constituem substncias que atuam sobre
sistemas enzimticos ativando-os ou inibindo-os.
Exemplo: hormnios esterides, inseticidas clorados,
barbitricos promovem induo enzimtica.
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Processo de Excreo
Processo pelo qual a substncia expulsa do
organismo.
Principais vias:
Renal (urina): excreta substncias hidrossolveis
TG (fezes): carregam substncias no-absorvidas no
TGI e produtos excretados na bile e pulmonar
Pulmonar: excreo de gases e vapores de
substncias
Excreo Renal
So basicamente trs os mecanismos
envolvidos na formao da urina e na
excreo de substncias:
1. Filtrao glomerular
2. Reabsoro tubular
3. Secreo tubular
Filtrao
Glomerular
Macromolculas
Complexao
Proteica
Hidrossolveis
Excreo
Lipossolveis
Reabsoro
Filtrao glomerular: passagem dos elementos
contidos no sangue, exceto elementos figurados e
macromolculas.
Maioria dos AT
(PM < 20.000
-
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Secreo Tubular: passagem de substncias do
sangue diretamente para a urina na altura dos tbulos
proximais, por mecanismos de transporte ativo.
Ex.: penicilina.
pH
Administrao
de HCO
3
-
Ionizao
Substncia
Carter cido
Excreo
Fator determinante da excreo renal
Ex.: Barbitricos,
cido acetilsaliclico
Biotransformao
Heptica
Bile
Excreo
Fecal
Reabsoro
Agentes txicos que alcanam o trato digestivo
podem ser absorvidos, exercendo ao txica.
A parte no-absorvida excretada nas fezes.
Substncias absorvidas
Excreo pelo TGI
Ciclo
ntero-heptico
Substncias
Gasosas e
Volteis
Inversamente
proporcional
solubilizao no sangue
Fatores
Limitantes
Ventilao Perfuso
Excreo Pulmonar