FARMACOTECNIA II

PROFESOR: JUAN FERNANDO PINILLOS MADRID

-lactoglobulina, goma rabe, y goma de xantano para emulsionar aceite de almendras
dulces: Formulacin y mecanismos de estabilizacin en emulsiones farmacuticas.
Elonore Bouyer, Ghozlene Mekhloufi, Nicolas Huang, Vronique Rosilio, Florencia Agnely.

En el area farmacutica, las emulsiones son ampliamente utilizados como sistemas de

administracin de frmacos por varias rutas (parenteral, oral, y tpica (piel y ojos)). Se
componen de mezclas de al menos un lquido disperso en otro en forma de gotitas, ambos
lquidos inmiscibles entre si, o pobremente miscible uno con el otro. El principal inters de
las emulsiones es encapsular una molcula de principio activo hidrfilo o lipfilo dentro de
la fase dispersa, lo que garantiza su proteccin contra el estrs ambiental y la degradacin
(oxgeno, la luz, enzimas, acidez, etc), y permitiendo su entrega controlada. Las
emulsiones tambin pueden enmascarar un olor o sabor desagradable, reducir la
toxicidad del frmaco, mejorar su penetracin a travs de la piel o comportarse como
sistemas de desintoxicacin para atrapar molculas txicas (contaminantes, pesticidas,
etc .) en la fase interna.
El principal desafo que plantea el uso de emulsiones es su inestabilidad termodinmica.
De hecho, son propensos a la desestabilizacin y la separacin de las fases. La adicin de
emulsionantes con propiedades interfaciales y / o viscosantes permite la formacin de la
emulsin y su estabilizacin. Las Emulsiones farmacuticas estn estabilizadas en su
mayora por agentes tensioactivos sintticos. Sin embargo, el uso de estos emulsionantes
sintticos pueden causar sntomas de toxicidad aguda en animales y seres humanos y
tienen un impacto ambiental. La mayora de los tensioactivos inducen reacciones cutneas
irritantes y pueden causar sntomas txicos en animales y humanos. Por ejemplo, la
posible unin de los tensioactivos aninicos a protenas, enzimas y membranas de
fosfolpidos puede resultar en cambios bioqumicos tales como una modificacin de la
estructura de la protena y la disfuncin de enzimas y membranas de fosfolpidos.
La Sustitucin de tensioactivos sintticos por molculas mucho mejores toleradas, sera
un gran avance. Es sorprendente observar que, hasta ahora, las emulsiones farmacuticas
no han evolucionado mucho en comparacin con los alimentos. En la industria alimentaria,
la introduccin de polmeros naturales tales como protenas y polisacridos como agentes

emulsionantes y / o agentes estabilizantes ha sido un enfoque que ha tenido xito para la

formulacin de emulsiones altamente estables. Todo esto permitido gracias a una mejor
comprensin de la fisicoqumica de estabilidad de la emulsin, que a su vez fue posible
gracias a la introduccin de nuevas tcnicas de caracterizacin tales como reologa
interfacial.
Los biopolmeros se utilizan actualmente en la industria alimentaria para estabilizar
emulsiones, y aparecen como candidatos prometedores en el campo farmacutico
tambin.
Los emulsionantes y estabilizantes usados comnmente para estabilizar emulsiones se
clasifican en cuatro categoras:

La primera clase se compone de iones no tensioactivos que pueden adsorber en la

superficie de la gotita sin afectar a la tensin interfacial o facilitar el proceso de
emulsificacin. Sin embargo, algunos pueden, en condiciones apropiadas, imponer
una ligera barrera electrosttica entre las gotas y de este modo contribuir a la
estabilizacin de la emulsin.
La segunda clase se compone de pequeos slidos coloidales no tensioactivos es
decir, de slice o partculas de arcilla; que se adsorben y forman una barrera fsica
entre las gotitas, retrasando o previniendo la coalescencia.
La tercera clase est constituido por tensioactivos monomricos clsicos tales
como dodecil sulfato de sodio. Estos disminuyen la tensin interfacial y aumentan
la estabilidad de la emulsin, pero pueden ser muy irritante y potencialmente
txico hacia el medio ambiente.
Por ltimo, la cuarta clase comprende tensioactivos tipo polmero. Adems de sus
propiedades generales de bajar la tensin interfacial, los polmeros inducen
interacciones estricas o electrostticas, cambios en la viscosidad o elasticidad,
mejorando as la estabilidad de la emulsin.

En las emulsiones estabilizadas con biopolmeros, las protenas actan generalmente

como los principales estabilizadores y los polisacridos contribuyen a travs de su
engrosamiento y propiedades estabilizadoras estricas. La mayora de los polisacridos
forman una red extendida en la fase continua que aumenta su viscosidad, tanto que
puede parecer a un gel, lo que frena los movimientos de las gotitas y su encuentro. Sin
embargo, algunos polisacridos tambin son capaces de adsorberse en la interfaz de las
gotitas por sus residuos hidrofbicos, disminuyendo asi la tensin interfacial y formando
una barrera estrica contra la coalescencia.

La combinacin en un mismo sistema de las propiedades de las protenas (adsorcin

rpida, disminucin significativa de la tensin interfacial) y polisacridos (repulsin
estrica o aumento de viscosidad) en condiciones apropiadas de concentracion, relacin
de protena : polisacrido, pH, fuerza inica, temperatura sera de gran inters para
mejorar la estabilidad de la emulsin.
Esta opinin tiene como objetivo resumir la contribucin de algunos agentes
estabilizantes naturales en la formulacion de emulsiones de aceite en agua (O/W), y para
discutir cmo se podra implementar este conocimiento para formular una nueva
generacin de emulsiones para aplicaciones farmacuticas que respondern a la creciente
demanda de excipientes naturales y el desarrollo sostenible.
Para el estudio se prepararon emulsiones con diferentes mezclas binarias de lactoglobulina (-lg), la principal protena de suero de leche, goma rabe (GA), un
exudado de rboles de Acacia, y goma de xantano (XG ), producida por la bacteria
Xanthomonas campestris, y se evalu su estabilidad durante un perodo de 6 meses por
mediciones de potencial zeta y granulometra en combinacin con Turbiscan y
observaciones de microscopa ptica.
1.

2.

3.

-LG: Forma pelculas elsticas interfaciales que impiden la coalescencia y adems

proporciona estabilizacin estrica que protege las gotitas dispersas contra la
coalescencia, la formacin de crema, y la floculacin.
GA: La goma rabe adsorbida en la interfaz aceite-agua puede prevenir la
floculacin y la coalescencia de gotas a travs de ambas fuerzas de repulsin
electrostticas y estricas.
XG: tiene caractersticas reolgicas inusuales en soluciones: alta viscosidad a bajo
cizallamiento, fuerte carcter reductor de la cizalla y comportamiento tixotrpico .
En condiciones de concentracin apropiados, la goma se utiliza para prevenir la
floculacin y la formacin de crema en emulsiones.

Se estudiaron cinco composiciones emulsionantes diferentes:

1)-lg

2)GA

3)XG

4)-lg: GA[ 2:1]

5)-lg: XG [1:1]

Despues se procedio a realizar emulsiones con 30 % p/p de aceite de alemndras dulces y

2,5 % p/p del polimero.
Evaluacin de la estabilidad de las emulsiones preparadas:
Las emulsiones que se analizaron fueron las que se matuvieron estables durante al menos
24 h. Todas las mediciones se realizaron en el primer da de la estabilidad y con

regularidad durante un perodo de 6 meses (excepto para las mediciones de potencial ),

siempre y cuandono se observara ninguna separacin de fases. Durante este perodo, las
emulsiones se almacenaron a temperatura ambiente y lejos de la luz.
Las medidas tomadas para estabilidad fueron

Mediciones Turbiscan: permite la deteccin de procesos de floculacin y la

coalescencia incluso en una fase muy temprana (invisible para el ojo).
Potencial
Tamao de gota: Difraccion laser-granulmetro lser Mastersizer

Posteriormente se procede a evaluar los mecanismos de estabilizacin:

Medidas de la tensin interfacial: Metodo de la placa de Wilhelmy

Medidas : remetro

RESULTADOS OBTENIDOS EN EL PRIMER DIA DE LA CARACTERIZACION D ELA EMULSION

Retrodifusin intensidades de las diferentes emulsiones en el primer da de la estabilidad cuando se

estabilizan con: ()- lg 1%, ()- lg 2,5%, () -LG: GA 2,5%, () GA 1 %, () GA 2.5%, () -lg: XG 1% y
() XG 1%

Micrografas de emulsiones estabilizadas con biopolmero (magnificencia 40 ). (a) primero das, y (b) 6
meses de estabilidad, a excepcin de -lg 2,5 (w / w%) (4 meses estabilidad). 1: -lg 2.5 % w/w, 2: GA
1 %w/w, 3: XG 1 % w/w, 4: -lg: GA [relacin 2: 1] 2.5 % w/w, y 5: -LG: XG [relacin 1: 1] 1 %w/w. La barra
de escala corresponde a 20 micras; d, da.

De las medidas turbiscan podemos decir que el porcentaje mximo de intensidad de

retrodifusin depende directamente de la fraccin de aceite, el ndice de refraccin, y el
tamao de los glbulos. En todos los sistemas estudiados, la fraccin de aceite, as como
el ndice de refraccin no variaron en el primer da de la estabilidad. Por tanto, es posible
vincular las diferencias de intensidad entre la retrodifusin de las muestras a los tamaos
de gota.
Los valores de intensidad retrodifusin iniciales estaban en siguiente orden creciente: XG
<-lg: XG <GA 2.5% <GA 1% <-lg: GA <-lg.
As, los tamaos de las gotas deben estar en el orden inverso: -lg <-lg: GA <GA 1% <GA
2.5% <-lg: XG <XG.
De las mediciones de potencial-, se podria decir que las emulsiones estabilizadas con XG y
-LG: XG deben ser los sistemas ms estables con respecto a sus valores altos- potencial.
De hecho, se mantuvieron estables a lo largo de 180 das.
Variacin del valor de la
intensidad retrodifusin en el
primer da de estabilidad para las
diferentes emulsiones
como
funcin de el valor del diametro
(d43).

Esta grfica me muestra la relacin entre la intensidad de retrodifusin de las diferentes

emulsiones en el primer da de la estabilidad (medida por el Turbiscan) y la medida del
diametro (d43). Es obvio que la intensidad retrodifusin disminuy con tamao de gota,
como se sugiri anteriormente.
Evolucin El tamao de gota
La evolucin temporal de los valores de d43 se examin para las emulsiones ms estables
es decir: emulsiones estabilizadas con -lg 2,5 %w/w, XG al 1 %w/w, y -lg: XG [relacin 1:
1] a 1%w/w.

Evolucin de los valores d43

obtenidos
para
emulsiones
estabilizadas con: () -lg 2,5 %w/w,
() XG al 1 %w/w , y () -lg: XG
[relacin 1: 1] a 1 %w/w por ms de
un perodo de 6 meses. Las lneas
continuas son ajustes de curva.

El grfico no muestra ninguna tendencia significativa de los valores de d43 a aumentar con
el tiempo a excepcin de emulsiones estabilizadas con XG. De hecho se puede
observacomo los valores de d43 de los glbulos para XG aumentaron ligeramente con el
tiempo.
Mediciones de tensin interfacial y de superficie.

Tiempo de evolucin de la tensin superficial de

Tiempo de evolucin de la tensin interfacial de

soluciones acuosa - aire: () XG 0,1%, () GA

2,5%, y () -lg 2,5%.

soluciones acuosa:aceite () XG 0,1%, (x) agua, () GA

2,5%, ()- lg 2,5%, y () -LG: GA 2.5 %.

Medidas reolgicas

Reogramas de: (a) (x) XG solucin al 1%, () GA solucin al 2,5%, () solucin de -lg 2,5%, (b) () -LG:
XG 1% de emulsin, () XG 1% de emulsin, () -LG: GA 2,5% de emulsin, () GA 2,5% de emulsin, ()
GA 1% de emulsin, (+)- lg 1% de emulsin, y () -lg 2,5% de emulsin.

Observando los diferentes reogramas podemos observar como: soluciones -LG y GA 2,5%
mostraron un comportamiento newtoniano con viscosidades absolutas de
aproximadamente 2 mPa.s. Emulsiones estabilizadas con -lg y GA tambin muestran un
comportamiento cuasi-newtoniano con viscosidades aparentes de aproximadamente 2 y 5
mPa.s, respectivamente. La presencia de glbulos de aceite indujo un ligero aumento en la
viscosidad de la emulsin GA. Por el contrario la emulsin estabilizada con -lg: GA exhibi
un comportamiento ligeramente reductor de la cizalla con un lmite elstico de 0,21 0,02
Pa.

Las viscosidades de las diversas emulsiones se pueden clasificar en el orden: -lg <GA <lg: GA <XG <-lg: XG. Estos valores explican la mejor estabilidad de las emulsiones que
contienen XG en comparacin con -lg solo, incluso si las gotitas formadas en las
emulsiones con -lg eran ms pequeos que los de las estabilizadas con XG.
Goma Xantano mejora claramente la viscosidad de la fase continua de las emulsiones y
les confiere un comportamiento reductor de cizalla. Por lo tanto, la viscosidad aparente
era bastante alta a baja fuerza de cizallamiento y disminuye cuando se aumenta la fuerza.

Representacin esquemtica de los diferentes mecanismos de estabilizacin obtenidos con (a) -lg a pH 4,2,
(b) GA a pH 4,2, (c) XG a pH 7, (d) -LG: GA a pH 4,2, y (e )- lg: XG a pH 7.

En las emulsiones estabilizadas con -lactoglobulina el mecanismo por el cual la

protena estabiliza las emulsiones consiste en su adsorbcin en la interfase aceiteagua, disminuyendo la tensin interfacial. Por otra parte, porque la protena se
carg positivamente a pH 4,2, repulsiones electrostticas ocurrieron entre las
gotitas de aceite, contribuyendo as a la estabilizacin.
En las emulsiones estabilizadas por Goma rabe, las mediciones interfaciales
confirmaron que la goma era capaz de adsorber en la interfase aceite-agua y
disminuir la tensin interfacial.
A pesar de su adsorcin en la interfase aire-agua, la Goma Xantano fue incapaz de
reducir el la tension en la interfase agua - aceite de almendra. Con respecto a las
mediciones reolgicas, parece que la estabilidad de las gotas de aceite se puede
atribuir principalmente a la alta viscosidad y el comportamiento reductor de cizalla
de la fase acuosa, es decir, a la red formada por las molculas de XG . La alta
viscosidad a baja velocidad de cizallamiento evita que las gotitas se encuentren y
por lo tanto reduce la velocidad de floculacin y los mecanismos de formacin de
crema.
En las emulsiones estabilizadas por -lg: GA Teniendo en cuenta los resultados
obtenidos, se puede concluir que gracias a las interacciones electrostticas
atractivas, GA pueden formar una segunda capa alrededor de las gotitas de aceite

ya cubiertos por -lg. Este mecanismo de estabilizacin bi-capa ha sido para

mejorar la estabilidad de la emulsin en comparacin con un biopolmero solo. Sin
embargo, en este caso, las emulsiones estabilizadas por -lg: GA presentan una
formacin de crema a los 3 das. Se requieren otros experimentos para optimizar
las concentraciones de biopolmero para evitar la floculacin.
En las emulsiones estabilizadas por -lg: XG las molculas de -lg se adsorben
primero en la interfase, la adicin de XG mejora la estabilidad de la emulsin a
partir de 20 das a ms de 6 meses mediante la modificacin de la reologa de la
fase continua, sin reducir el tamao de gota. A pH = 7, -lg estaba muy por encima
de su punto Isoelectrico y fue altamente cargado negativamente. Como tambin se
carga negativamente XG, se pueden generar fuerzas repulsivas electrostticasentre
los dos polimeros mejorando la adsorcion de -lg en presencia de XG, resultando
en una mejor superficie y propiedades viscoelsticas. Es un resultado muy
interesante, ya que muestra la posibilidad de obtener biopolmeros emulsiones
estabilizadas sin aadir ningn agente tensioactivo sinttico, ni el uso de un
homogeneizador de alta presin.

Se puede concluir que:

Las emulsiones estabilizadas por GA y -lg: GA exhibieron una estabilidad bajo.
emulsiones estabilizadas por -lg las fases se separan despus de unos 20 das. Por
el contrario, las emulsiones que contienen XG no mostraron ninguna separacin de
fases para el perodo de 6 meses estudiado.
Los mecanismos de estabilizacin se dedujeron de la tensin interfacial y las
mediciones de reologa, y las observaciones microscpicas. XG mostr propiedades
de superficie limitada, especialmente en la interfaz aceite-agua, pero se form una
red de polmero en agua con una alta tensin de fluencia y contribuy al
comportamiento reductor de cizalla de las emulsiones. Su capacidad para atrapar
las gotas de la emulsin explicara la mayor estabilidad de sus emulsiones, en
comparacin con emulsiones estabilizadas por -lg y GA que exhiben un
comportamiento cuasi-Newtoniano con una viscosidad ms baja.
Se identificaron diferentes mecanismos de estabilizacin. Considerando que tanto
-lg y GA son adsorbidos en la interfase, la adsorcin ms larga de GA perjudica la
estabilidad de la emulsin. Cuando se uso la mezcla de -LG y GA, una capa
interfacial doble se form por adsorcin interfacial de la protena, seguido por la
unin a travs de interacciones electrostticas atractivas del polisacrido.
XG estabiliza las gotitas de aceite principalmente a travs de la modificacin de
propiedades reolgicas de la emulsin. Finalmente, el ltimo mecanismo es la de

una capa adsorbida -LG en la interfase aceite-agua y molculas libres de XG en la

fase acuosa que modifican la reologa de la emulsin.
La eficacia de los biopolmeros para estabilizar emulsiones fue del orden GA <-LG:
GA <-lg <XG = -LG: XG.
Este trabajo demuestra que al variar la naturaleza de los biopolmeros y su combinacin,
es posible obtener diversos comportamientos interfaciales y reolgicas. Estas propiedades
se pueden utilizar para formular nuevas emulsiones farmacuticas sin surfactante
sinttico y ms respetuosa hacia el desarrollo sostenible.
El creciente inters y la demanda de los consumidores en los productos naturales incita a
los industriales a invertir en esta direccin. El anterior articulo muestra las potencialidades
de los biopolmeros para la formulacin y la estabilizacin de emulsiones farmacuticas.
De hecho, debido a la versatilidad y gran nmero de biopolmeros disponibles, las
emulsiones estabilizadas por protenas y / o polisacridos parecen ser un enfoque muy
prometedor para industria farmacutica en la misma forma que ya estn en la industria
alimentaria.

Elonore Bouyer, Ghozlene Mekhloufi, Nicolas Huang, Vronique Rosilio, Florencia

Agnely. -Lactoglobulin, gum arabic, and xanthan gum for emulsifying sweet
almond oil: Formulation and stabilization mechanisms of pharmaceutical
emulsions. Colloids and Surfaces A: Physicochemical and Engineering Aspects.
Volumen 433. 20 de septiembre de 2013. pginas 77-87. Disponible en :
http://www.sciencedirect.com/science/article/pii/S0927775713003786