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DIRECTOR
JOS RGULO CARTAGENA VALENZUELA
CONTENIDO
pg.
1.
2.
2.1
2.1.1
2.1.2
2.1.3
2.1.4
2.1.5
2.1.6
2.1.7
INTRODUCCIN...............................................................................................27
REVISIN DE LITERATURA ..........................................................................33
GENERALIDADES DEL CULTIVO DE GUANBANA ...............................34
Clasificacin taxonmica ....................................................................................34
Morfofisiologa del rbol de guanbana.............................................................35
Clima y suelo para el cultivo de la guanbana ....................................................35
Produccin de guanbana en Colombia .............................................................36
Cosecha de la guanbana....................................................................................36
Poscosecha de la guanbana ...............................................................................36
Calidad de la guanbana .....................................................................................37
2.2
2.2.1
2.2.1.1
2.2.1.2
2.2.1.3
2.2.1.4
2.2.1.5
2.2.2
2.2.2.1
2.2.2.2
2.2.2.3
2.2.2.4
2.2.2.5
2.2.2.6
2.2.2.7
2.2.2.8
2.2.2.9
2.2.3
2.2.3.1
2.2.3.2
2.2.4
2.2.4.1
2.2.4.2
2.3
2.3.1
2.3.2
2.3.3
2.3.4
2.4
2.4.1
2.4.2
2.4.3
2.4.4
2.4.4.1
2.4.4.2
2.4.4.3
2.4.4.4
2.4.5
2.4.5.4
Esfuerzo .............................................................................................................92
Deformacin ......................................................................................................92
Coeficiente de Poisson ......................................................................................93
Mdulo de elasticidad o de Young ...................................................................94
Modelacin y simulacin de las propiedades reolgicas por elementos
finitos .................................................................................................................95
Fundamentos de los elementos finitos...............................................................96
Tipos de elementos finitos.................................................................................97
Formulacin de los elementos finitos con el principio de energa potencial
mnima o ley de Rayleight-Ritz......................................................................103
Aplicaciones de los elementos finitos en productos biolgicos ......................108
2.5
2.5.1
2.5.2
2.5.3
2.6
2.6.1
2.6.2
2.6.2.1
2.7
3.
3.1
3.2
OBJETIVOS....................................................................................................129
OBJETIVO GENERAL ..................................................................................131
OBJETIVOS ESPECFICOS ..........................................................................131
4.
4.1
4.2
4.3
4.4
4.4.1
4.4.1.1
4.4.1.2
4.4.1.3
4.4.1.4
4.4.1.5
4.4.2
4.4.2.1
4.4.2.2
4.4.2.3
4.4.2.4
4.4.2.5
4.4.2.6
MATERIALES Y MTODOS........................................................................132
LOCALIZACIN ...........................................................................................133
MATERIAL VEGETAL .................................................................................134
DISEO EXPERIMENTAL...........................................................................134
MTODOS......................................................................................................136
Mtodos para la caracterizacin fisiolgica ...................................................136
Medida de la tasa de respiracin......................................................................136
Valoracin de etileno.......................................................................................136
Evaluacin de la prdida fisiolgica de peso...................................................137
Determinacin de los compuestos voltiles por Microextraccin en Fase
Slida del Espacio de Cabeza y Cromatografa Gaseosa acoplada a
Espectrometra de Masas (HS-SPME; GC-ME) ............................................137
Determinacin de los compuestos voltiles por nariz electrnica...................138
Mtodos para la caracterizacin fsico-qumica ..............................................143
Determinacin del crecimiento de las frutas de guanbana ............................143
Medida del color..............................................................................................143
Determinacin del rendimiento de la guanbana ............................................143
Slidos solubles totales, acidez total y pH ......................................................144
Determinacin de la actividad enzimtica de la polifenoloxidasa ..................144
Determinacin de la actividad enzimtica de la pectinmetilesterasa ..............145
4.4.3
2.4.5.1
2.4.5.2
2.4.5.3
4.4.5
Mtodos para la caracterizacin estructural ...................................................157
4.4.5.1 Microscopia electrnica de barrido como tcnica de valoracin
estructural ........................................................................................................157
4.4.5.2 Aplicacin de los rayos X como tcnica de medida no destructiva en las
frutas ................................................................................................................157
4.4.6 Mtodo para la caracterizacin sensorial.........................................................159
5.
5.1
5.1.1
5.1.2
5.1.3
5.1.4
CARACTERIZACIN FSICO-QUMICA.....................................................177
Formacin y crecimiento de las frutas de guanbana........................................177
Color de la epidermis y endocarpio de la guanbana ......................................178
Rendimientos de la guanbana ..........................................................................180
Slidos solubles totales (SST), acidez total y pH..............................................181
Actividad enzimtica de la polifenoloxidasa (PFO)..........................................183
Actividad enzimtica de la pectinmetilesterasasa (PME) .................................183
5.3
CARACTERIZACIN REOLGICA .............................................................185
5.3.1 Firmeza ..............................................................................................................185
5.3.2 Modelacin y simulacin de la firmeza.............................................................186
5.4
CARACTERIZACIN NUTRACETICA ....................................................192
5.4.1 Vitamina C.........................................................................................................192
5.4.2 Capacidad antioxidante .....................................................................................193
5.4.3 Fenoles totales ..................................................................................................194
5.5
CARACTERIZACIN ESTRUCTURAL........................................................197
5.5.1 Microscopia electrnica de barrido (SEM) ......................................................197
5.5.2 Evaluacin no destructiva con rayos X de la guanbana en poscosecha...........202
5.6
CARACTERIZACIN SENSORIAL ..............................................................206
5.6.1 Anlisis sensorial...............................................................................................206
6.
CONCLUSIONES.............................................................................................209
7.
APORTES SIGNIFICATIVOS A LA CIENCIA .............................................215
8.
RECOMENDACIONES ...................................................................................218
BIBLIOGRAFA ...........................................................................................................221
ANEXOS .......................................................................................................................252
LISTA DE ANEXOS
Anexo A Tutorial para la determinacin de la firmeza
Anexo B Tutorial para el manejo del programa de cmputo autodesk inventor
professional 11.0 tecnologa ansys para la modelacin y simulacin de esfuerzos y
deformaciones en materiales biolgicos
LISTA DE FIGURAS
pg.
Figura 2.1 Clasificacin de las frutas de guanbana (Annona muricata L.) en
categoras, Extra (A); Categora I (B); y Categora II (C)...............................................37
Figura 2.2 Metabolismo general de la respiracin ........................................................39
Figura 2.3 Oxidacin de la glucosa ...............................................................................40
Figura 2.4 Rutas metablicas para la respiracin anoxignica, con produccin de
etanol (A), y produccin de cido lctico (B) ...............................................................40
Figura 2.5 Ciclo de los cidos tricarboxilicos o de Krebs.............................................41
Figura 2.6 Comportamiento respiratorio de frutas climatricas y no climatricas......42
Figura 2.7 Influencia de la temperatura en la respiracin .............................................47
Figura 2.8 Disminucin de la respiracin en funcin de la temperatura para frutas
de papaya americana (Asimina triloba L.) ......................................................................48
Figura 2.9 Efecto de recubrimiento comestible sobre frutas de aguacate (Persea
americana Mill) ..............................................................................................................48
Figura 2.10 Tasa de respiracin para una fruta climatrica (aguacate) (A), y para
una fruta no climatrica (fresa) (B) ................................................................................49
Figura 2.11 Estructura molecular del etileno ................................................................50
Figura 2.12 Biosntesis de etileno a partir del amino cido metionina. Los agentes
promotores de etileno se denotan por () y los inhibidores de la sntesis de la
produccin de etileno son denotados por ( ).................................................................52
Figura 2.13 Detoxificacin del HCN por la -cianoalanina sintasa..............................52
Figura 2.14 Protenas receptoras de etileno y activacin de la seal ...........................53
Figura 2.15 Modelo de accin del etileno .....................................................................54
Figura 2.16 Compuestos qumicos generadores de etileno ...........................................54
Figura 2.17 Comportamiento de la produccin de etileno y de la tasa respiratoria
en frutas de Annona muricata L. ....................................................................................56
Figura 2.18 Reacciones tpicas del etileno tiles para ser aplicadas como
mecanismos de inhibicin de la maduracin en frutas ...................................................57
Figura 2.19 Estructuras moleculares de los cidos orgnicos inhibidores de la
sntesis de etileno, cido amino actico (A) y cido amino etoxi vinil glicina (B) .......57
Figura 2.20 Evolucin de la produccin de etileno, concentracin del ACC,
actividad enzimtica de la ACC-Sintasa y ACC-Oxidasa, para frutos de maracuy
(Passiflora edulis S.) durante el perodo de poscosecha almacenados a 25C. Las
barras verticales representan el error estndar de tres repeticiones.................................58
Figura 2.21 Efecto de la temperatura sobre la produccin de etileno (A) y actividad
de la enzima ACC-Sintasa en frutas de kiwi (Actinidia chinensis Planch)(B) ...............59
Figura 2.22 Estructura del 1- Metilciclopropeno ..........................................................59
Figura 2.23 Estructura molecular del 2,5-Norbornadieno y del Diazociclopentadieno.60
Figura 2.24 Relacin del etileno con otras hormonas durante la poscosecha en
frutas climatricas............................................................................................................61
Figura 2.25 Rutas metablicas para la obtencin de voltiles en los vegetales
(flechas punteadas
indican varios pasos intermedios) .............................................68
Figura 2.26 Partes del sistema de SPME.......................................................................69
Figura 2.27 Proceso de SPME-GC: inmersin directa (A), HS-SPME (B),
desorcin trmica en GC (C) ...........................................................................................70
Figura 2.28 Proceso general de la nariz electrnica ......................................................71
Figura 2.29 Principio de funcionamiento de los sensores en la nariz electrnica.........72
Figura 2.30 Micrografas de la pelcula de un sensor de xido metlico,
mostrando las partculas de estao (Sn) antes de la oxidacin (A), y las de xido
Figura 2.61 Microfotografia de una rodaja de manzana liofilizada (A) y una rodaja
de manzana deshidratada a 70C durante 36 horas (B) .................................................121
Figura 2.62 Radiografia de una fruta de pera (Pyrus communis L. cv. Conference)
sana (A) y una afectada internamente (B) ....................................................................125
Figura 2.63 Escala lineal no estructurada con apoyos para la medida sensorial de
la intensidad de un atributo............................................................................................128
Figura 4.1 Microextraccin en fase slida del espacio de cabeza (HS-MEFS), para
las frutas de guanbana (Annona muricata L. cv. Elita) ..............................................138
Figura 4.2 Nariz electrnica utilizada en el estudio de voltiles de guanbana
(Annona muricata L. cv. Elita) en poscosecha.............................................................139
Figura 4.3 Respuesta de los 10 sensores en un anlisis de gases (donde los colores
de los sensores corresponden a W1C, W5S, W3C, W6S, W5C, W1S, W1W,
W2S, W2W, W3S y el color morado pertenece al aire de dilucin) ........................141
Figura 4.4 Conductividad relativa (G/G0) como respuesta de los sensores para
un tiempo de referencia .................................................................................................142
Figura 4.5 Flujograma del proceso de extraccin y cuantificacin de la enzima
polifenol oxidasa ...........................................................................................................145
Figura 4.6 Flujograma del proceso de extraccin y cuantificacin de la enzima
pectinmetilesterasa.........................................................................................................146
Figura 4.7 Prueba de firmeza por compresin unidireccional para guanbana
(Annona murica L. cv. Elita) ........................................................................................147
Figura 4.8 Curva tpica de fuerza vs deformacin para hallar la firmeza ..................148
Figura 4.9 Determinacin del coeficiente de Poisson para las frutas de
guanbana (Annona murica L. cv. Elita).......................................................................149
Figura 4.10 Flujograma para la extraccin y cuantificacin de vitamina C por
HPLC .............................................................................................................................151
Figura 4.11 Flujograma para la preparacin de las muestras para evaluar la capacidad
antioxidante total ...........................................................................................................152
Figura 4.12 Flujograma para la determinacin de la capacidad antioxidante por
ABTS .............................................................................................................................154
Figura 4.13 Flujograma para la determinacin de la capacidad antioxidante por
FRAP .............................................................................................................................156
Figura 4.14 Flujograma para la determinacin de fenoles totales...............................157
Figura 4.15 Aplicacin de la radiografa convencional a frutas de guanbana
(Annona murica L. cv. Elita), esquema general (A), aplicacin de rayos-X (B) ........159
Figura 5.1 Comportamiento respiratorio y produccin de etileno, para las frutas
de guanbana (Annona muricata L. cv. Elita), almacenadas a 23C y 65% de HR
promedio. Los smbolos muestran la media y las barras verticales los valores de
la D.E. para n=12 por da...............................................................................................162
Figura 5.2 Prdida fisiolgica de peso en frutas de guanbana (Annona muricata
L. cv. Elita) almacenadas a 23C y 65% de HR. Los smbolos muestran la media
y las barras verticales los valores de la D.E. para n=12 por da................................164
Figura 5.3 Cromatogramas de los compuestos voltiles usando la tcnica de MEFSEC/CG-EM en frutas de guanbana (Annona murica L. cv. Elita) para cuatro estados de
madurez, fruta inmadura (A), fruta en madurez intermedia (B), fruta madura (C), y fruta
sobremadura (D). Los nmeros de los picos corresponden a la identificacin de los
compuestos presentada en las Tablas 5.4; 5.5; 5.6 y 5.7, respectivamente ...................166
Figura 5.4 Respuesta de los sensores de la nariz electrnica para frutas de guanbana
(Annona muricata L. cv. Elita) inmadura (da 1 de poscosecha ) para 88 s de tiempo
de referencia (A). Diagrama de barras con los colores caractersticos de cada sensor
9
10
12
LISTA DE TABLAS
pg.
Tabla 2.1 Tipos de frutas de guanbana (Annona muricata L.) en funcin del peso ...38
Tabla 2.2 Clasificacin de algunas frutas de acuerdo a su ndice de respiracin y
comportamiento en poscosecha .......................................................................................42
Tabla 2.3 Clasificacin de las frutas de acuerdo a su ndice de respiracin..................42
Tabla 2.4 Efecto de la temperatura sobre la velocidad de respiracin y el
factor Q10 ........................................................................................................................46
Tabla 2.5 Tasa respiratoria del banano (Musa paradisiaca L.) en funcin de la
temperatura ......................................................................................................................47
Tabla 2.6 Clasificacin de algunas frutas de acuerdo a su produccin de etileno.........62
Tabla 2.7 Prdida fisiolgica de peso que afecta la calidad comercial en vegetales.....66
Tabla 2.8 Determinacin de algunas caractersticas fsico-qumicas en vegetales .......76
Tabla 2.9 Rendimiento en pulpa para algunas frutas.....................................................78
Tabla 2.10 Principales enzimas relacionadas con los cambios presentados en las
frutas durante la maduracin o poscosecha ....................................................................83
Tabla 2.11 Relacin de Poisson para algunos materiales biolgicos ............................94
Tabla 2.12 Valores del mdulo de Young para algunos alimentos ...............................95
Tabla 2.13 Evaluacin de las caractersticas reolgicas en algunas frutas....................95
Tabla 2.14 Composicin de la pulpa de guanbana por 100 g de parte
comestible......................................................................................................................111
Tabla 2.15 Capacidad antioxidante para algunas frutas de inters comercial .............117
Tabla 2.16 Caractersticas los microscopios ptico, electrnico de transmisin
y de barrido....................................................................................................................119
Tabla 4.1 Sensores usados y sus aplicaciones en la nariz electrnica PEN3 ..............140
(Annona muricata L. cv. Elita) almacenadas a 23C y 65% HR ..................................163
Tabla 5.1 Compuestos voltiles en frutas de guanbana (Annona muricata L. cv. Elita)
inmaduras detectados por MEFS-EC/CG-EM ..............................................................167
Tabla 5.2 Compuestos voltiles en frutas de guanbana (Annona muricata L. cv. Elita)
en madurez intermedia detectados por MEFS-EC/CG-EM .........................................167
Tabla 5.3 Compuestos voltiles en frutas de guanbana (Annona muricata L. cv. Elita)
maduras detectados por MEFS-EC/CG-EM................................................................168
Tabla 5.4 Compuestos voltiles en frutas de guanbana (Annona muricata L. cv. Elita)
sobremaduras detectados por MEFS-EC/CG-EM.........................................................168
Tabla 5.5 Participacin de las principales fracciones de la fruta de guanbana (Annona
muricata L. cv. Elita) almacenadas a 23C y 65% de HR. Los valores muestran la media
la D.E. para n=12........................................................................................................180
Tabla 5.6 Propiedades mecnicas de las frutas de guanbana (Annona muricata L.
cv. Elita) almacenadas a 23C y 65% de HR. Los valores muestran la
media D.E. para n=6...................................................................................................186
Tabla 5.7 Fuerza de falla de la modelacin y simulacin por elementos finitos,
factor de seguridad, fuerza de ruptura experimental promedio para la firmeza en
frutas de guanbana (Annona muricata L. cv. Elita) almacenadas a 20C y 65% de
HR..................................................................................................................................191
13
GLOSARIO DE ABREVIATURAS
AAT Enzima alcohol Acil Transferasa
ABA cido abscsico
AC cido cinmico
ACC Acido aminociclopropano carboxlico
ACC-Oxidasa Enzima aminociclopropano carboxlica que participa en la sntesis de
etileno
ACC-Sintasa Enzima aminociclopropano carboxlica que participa en la sntesis de
etileno
Ado-Met Sintasa Enzima adenosil metionina sintasa
ACP Anlisis de componentes principales
ADL Anlisis discriminativo lineal
AEAC Capacidad antioxidante en equivalentes de cido ascrbico
AG cido giberlico
AH Accin de los antioxidantes
AIA cido indol actico
AJ cido jasmnico
AOA cido amino actico
AVG cido amino etoxi vinil glicina
BSA Suero de albmina de bovina
CG-ME Cromatografa de gases-Espectrometra de masas
DACP Diazociclopendadieno
DMO Densidad mineral sea
DMS Diferencia mnima significativa
DXA Absorciometra de rayos X de doble energa
FAO Organizacin para la Agricultura y la Alimentacin de las Naciones Unidas
14
15
ON xido ntrico
OMS Organizacin Mundial de la Salud
PFO Enzima polifenoloxidasa
PME Enzima pectinmetilesterasa
Q10 Coeficiente de temperatura
QR Cociente respiratorio
S-Ado-Met S-adenosil metionina
SEM Microscopia electrnica de barrido
SPME Micro extraccin en fase slida
SST Slidos solubles totales
TEAC Capacidad antioxidante en equivalentes trolox
TEM Microscopia electrnica de transmisin
TS Enzima terpeno sintasa
U.E. Unidades experimentales
UV Ultra violeta
VHV Voltiles de hojas verdes
Vmx Velocidad mxima
16
GLOSARIO DE TRMINOS
ABSORBANCIA Es la cantidad de intensidad de luz que absorbe una muestra
ABSORCIN FOTOELCTRICA Se produce cuando un fotn incidente colisiona
con un electrn unido a un tomo del medio absorbente
ALMACENAJE HIPOBRICO
presin de vaco
17
18
19
GLOSARIO DE UNIDADES
atm Atmsfera
BTU Unidades trmicas britnicas
ha Hectrea
kg Kilogramo
kGy Kilogray
kJ Kilo joule
kVp Kilo voltios de potencia
mAs Miliamperios por segundo
MeV Megaelectronvoltios
mmol Milimol
Mpa Megapascal
nL Nanolitro
nm Nanmetro
Ohm Ohmnios
Pa Pascal
ppb Partes por billn
ppm Partes por milln
ton Tonelada
g Microgramo
L Microlitro
mol Micromol
Brix Grados Brix
K Grados Kelvin
20
RESUMEN
Se utilizaron frutas de guanbana (Annona muricata L. cv. Elita) obtenidas de huertos
establecidos en la zona agroindustrial del Valle del Cauca, (Colombia), sector rural
del municipio de Pradera, Agrcola Varahonda, Finca la Espaola, localizada a 1.070
msnm. 23C de temperatura promedio, 1.225 mm de precipitacin promedio anual,
radiacin solar media de 4,8 Wm-2da y humedad relativa promedio de 83%. Las
frutas fueron colectadas en igual grado de madurez, correspondiente a 16 semanas luego
de la formacin del erizo
pectimetilesterasa), nutraceticas
21
Las coordenadas de color L*, a* y b*, son indicadores del estado de madurez de las
frutas de guanbana, por consiguiente podran ser utilizadas como medida instrumental
rpida, no destructiva, aplicable en campo como ndice de cosecha objetivo.
Al explorar tcnicas de modelacin y simulacin de la firmeza por elementos finitos y
relacionar estos resultados con las determinaciones experimentales, se pudo encontrar
de forma aproximada la fuerza de fractura de las frutas de guanbana en poscosecha,
sin afectarlas fsicamente, lo cual convierte esta aplicacin en una alternativa no
destructiva para evaluar la firmeza, til en procesos de almacenamiento, transporte y
empaque. La firmeza mostr un comportamiento decreciente, con valores de 79,43 N
para el da 0 y de 3,62 N para el da 9 de poscosecha.
La evaluacin nutracetica de la guanbana, present valores relativamente altos de
capacidad antioxidante, siendo estos de 898 mol Trolox100 g de parte comestible y de
1196 mol Trolox100 g de parte comestible, para los das 5 y 9 de poscosecha
respectivamente, igualmente se encontr alta correlacin con la concentracin de
fenoles totales y crecimiento de la vitamina C con la maduracin, aspectos que hacen de
sta fruta un alimento de gran valor funcional, lo cual podra potencializar su consumo.
La aplicacin de los rayos X, permiti evaluar algunas afectaciones internas, los ejes
principales de maduracin y cambios con la maduracin, situacin que posibilita el uso
de esta tcnica cmo una alternativa no destructiva y no invasiva para la clasificacin de
frutas internamente afectadas, ofreciendo la posibilidad de ser incorporada a las lneas
de procesamiento.
La actividad de investigacin desarrollada en esta Tesis Doctoral, se constituye en un
aporte integral al estudio de la poscosecha de la guanbana cv. Elita. Es deseo del
personal involucrado en la elaboracin de la misma, que esta informacin sirva para
hacer avanzar el conocimiento cientfico en el rea de la ciencia y tecnologa aplicada a
la poscosecha de frutas tropicales.
23
INTRODUCCIN
CAPTULO 1
24
INTRODUCCIN
En el mundo el consumo de frutas y hortalizas es creciente al igual que la poblacin, la
Organizacin Mundial
120
25
La gran diversidad de climas, pisos trmicos y suelos, al igual que los equilibrados
balances hdricos en muchas de las zonas del pas, privilegian a Colombia para el
cultivo de frutas y facilitan sus posibilidades para los mercados internacionales. No
obstante, se podra inferir que se tiene una gran subutilizacin de los recursos naturales
existentes, lo cual pone al pas en condiciones inmejorables para desarrollar este sector
productivo, actualmente se presenta un desaprovechamiento del rea de
vocacin
fincas, cuya principal actividad econmica sea la produccin de frutas (Cano, 2004). El
cultivo de frutas representa un rengln que ofrece magnificas oportunidades, tanto en el
mercado interno, como para exportacin;
agropecuario involucrando
(Mercado et al. 1998), reolgicas (Zeebroeck et al. 2004), nutraceticas (Asami et al.
2003), macro y micro estructurales (Hernndez et al. 2007), sensoriales (Marn et al.
26
2009) y bioqumicas (Moya et al. 2004), las cuales estn directamente asociadas a la
calidad general del producto. Es por esto que se hace necesario el conocimiento
detallado y sistemtico de las variables poscosecha, que afectan el proceso de
maduracin, debido a que de ello depende la vida til de los vegetales perecederos y
por tanto, todas las consecuencias que de esta situacin se derivan, destacando la
seguridad alimentaria de la poblacin y los ingresos de los sectores agroindustriales
involucrados (Productores, transportadores, comercializadores y consumidores).
En la presente investigacin se ha trabajado con guanbana cv. Elita, como fruta de
estudio debido a la gran importancia que tiene este producto, lo cual se podra reflejar
en una mejora econmica para el sector,
comportamiento en poscosecha, se puede
almacenamiento del producto en fresco, adems para intervenir de manera acertada esta
etapa con fines de conservar las caractersticas organolpticas.
La guanbana es una fruta tropical extica, altamente perecedera, con prdidas
alrededor de 30% en poscosecha (Ramrez, 2008), de marcada importancia comercial
especialmente para consumo interno, con una vida til mxima luego de recolectada
de 6 a 8 das, en condiciones ambientales normales de la ciudad de Medelln (24C y
65% de HR), susceptible al dao por fro, de alto consumo interno y potencialmente
comercializable para el exterior, por sus excelsas caractersticas sensoriales. Adems
conocidas las caractersticas poscosecha de la guanbana, podrn ser tiles en el estudio
y aplicacin de procesos de transformacin y conservacin; por tanto, articular los
complejos procesos ocurridos durante la maduracin y contextualizarlos con miras a
poder intervenirlos
27
debido a que
la fruta, a partir de la integracin de las reacciones que rigen los cambios durante la
maduracin de la fruta.
La estandarizacin y puesta a punto de los protocolos y prcticas desarrolladas durante
el estudio, podrn ser replicables a otros productos agrcolas de inters comercial,
ampliando el horizonte de accin de la ciencia y tecnologa al campo de la poscosecha
de frutas y hortalizas.
29
REVISIN DE LITERATURA
CAPTULO 2
30
El rbol de
guanbana por la forma de fijar el CO2 atmosfrico, se cataloga cmo planta C3, se
comporta cmo caducifolio en condiciones de estrs por agua, desnutricin o bajas
temperaturas. Particularmente por sta razn, se considera semicaducifolio. Su fase
reproductiva o de fructificacin, en condiciones silvestres es marcadamente estacional y
bajo condiciones de riego y manejo agronmico apropiado, la produccin se torna
continua, hacindose menos pronunciados los picos estacinales de produccin. Su
ptimo desarrollo se da en altitudes menores a 1.200 msnm, con temperatura media
entre 25 y 28C, humedad relativa entre 60 y 80 %. Crece y produce bien en una amplia
gama de condiciones edficas (Morton, 1987; Miranda, 1995; Rami et al. 1995;
Miranda et al. 1998; Escobar y Snchez, 2000; Pinto et al. 2005).
La fruta es climatrica, considerada cmo tropical extica, con caractersticas
sensoriales excelsas que le brindan un potencial para su utilizacin bien cmo producto
fresco o transformado (Chaparro et al. 1992; Pinto, 2006).
31
El
mercado de esta fruta tropical extica es cada vez ms amplio, tanto para consumo
interno cmo para el exterior, bsicamente por sus excelsas caractersticas sensoriales
(Ministerio de Agricultura y Desarrollo Rural, 2008).
2.1.6
Poscosecha de la guanbana.
agroindustrial que involucra todas las actividades encaminadas a ofrecer una fruta de
excelente calidad al consumidor,
por prcticas
inadecuadas, hacen de este producto un material vegetal muy importante para ser
estudiado (Ramirez, 2008). La calidad inicial de la fruta cosechada no puede ser
mejorada aplicando tecnologas durante el periodo poscosecha, pero si es posible
mantener dicha calidad utilizando sistemas de conservacin; cmo por ejemplo,
33
N-metilcoridina,
N-metilcorituberina),
acetogeninas;
Extra: lesiones <5% del rea superficial, atribuibles a golpe de sol y rudimentos
estilares (espinas) quebrados.
Categora II: lesiones <25% del rea superficial, atribuibles a golpe de sol y
rudimentos estilares quebrados, frutas deformes (NTC 5208, 2003). La Figura 2.1
muestra las frutas para cada categora.
A
B
C
Figura 2.1. Clasificacin de las frutas de guanbana (Annona muricata L.) en
categoras, Extra (A); Categora I (B); y Categora II (C) (Fuente: NTC, 5208)
34
Las frutas de guanbana se clasifican en funcin del peso por categoras cmo se
muestra en la Tabla 2.1.
Tabla 2.1. Tipos de frutas de guanbana (Annona muricata L.) en funcin del peso
Tipo
Peso (g)
A
1.100
B
1.101-1.700
C
1.701-2.300
D
2.301-3000
E
3001-3.600
F
3.601-4.300
G
4.301
(Fuente: Icontec, 2003)
Todos los calibres se ajustan a las categoras extra, I y II.
35
demandas energticas que requiere la fruta para su actividad funcional vital, adems
para la sntesis de otros metabolitos secundarios importantes y que cumplen el papel
nutracetico en las frutas. Las tres etapas principales de este complejo proceso se
muestran en la Figura 2.2 (Flores, 1994; Kader, 2002).
36
37
acetilo, se reducen cuatro aceptores de electrones (tres NAD+ y un FAD) y se forma otra
molcula de ATP.
En el ciclo de los cidos tricarboxilicos o de Krebs, los carbonos donados por el grupo
acetilo se oxidan a CO2 y los electrones pasan a los transportadores de electrones. Lo
mismo que en la gluclisis, en cada paso interviene una enzima especfica. La coenzima
A es el nexo entre la oxidacin del cido pirvico y el ciclo de Krebs. A modo de
resumen: en el ciclo de Krebs se producen una molcula de ATP, tres molculas de
NADH y una molcula de FADH2 que representan la produccin de energa de este
ciclo. Se necesitan dos vueltas del ciclo para completar la oxidacin de una molcula de
glucosa. As, el rendimiento energtico total del ciclo para una molcula de glucosa es
dos molculas de ATP, seis molculas de NADH y dos molculas de CO2, cmo se
muestra en la Figura 2.5 (Pesarakli, 2002).
Figura 2.5. Ciclo de los cidos tricarboxilicos o de Krebs (Fuente: Costa, 2008)
De acuerdo al ndice de respiracin, definido cmo la tasa de produccin de CO2 por
unidad de peso de fruta y por unidad de tiempo, y al comportamiento fisiolgico en
poscosecha,
(Salisbury y Ross, 1992; Medlicott, 1996; Kader, 2002); el CO2 extra durante el
38
39
ndice de respiracin
a 5C (mg CO2kg-1h-1)
Muy baja
<5
Baja
5 10
Moderada
10 20
Alta
20 40
Muy alta
40 60
Extremadamente alta
> 60
(Fuente: Kader, 2002)
En funcin del ndice de respiracin se ha establecido el calor desprendido por los
vegetales, de acuerdo a las ecuaciones 2.2 y 2.3,
relacin para el clculo de la respiracin, segn las ecuaciones 2.4 y 2.5 (Saltveit,
1999).
Prdida de peso (g/kg-h) = mg CO2 kg-1 h-110-368
Ecuacin 2.4
Equivalente a,
40
VO 2 =
VmO 2 x[O2 ]
[CO2 ]
KmO 2 x1 +
Kmc
CO 2
KmuCO 2
Ecuacin 2.6
Donde:
VCO 2 = RQOX VO 2 +
VmCO 2( f )
1+
[O2 ]
Ecuacin 2.7
KmcO 2 ( f )
(f)
R
Q10 = 2
R1
Donde:
42
10
T2 T1
Ecuacin 2.8
CO2 producido
Ecuacin 2.9
O2 consumido
43
6CO2 + 6H2O; QR = 1
44
Tabla 2.5. Tasa respiratoria del banano (Musa paradisiaca L.) en funcin de la
temperatura
Temperatura de
Tasa de respiracin
almacenamiento en C
en (ml CO2 kg-1h-1)
10
26,13
15
34,22
20
38,52
25
44,31
30
56,43
(Fuente: Bhande et al. 2008)
45
Figura 2.9. Efecto del recubrimiento comestible sobre frutas de aguacate (Persea
americana Mill) (Fuente: Maftoonazad et al. 2007)
Donde una molcula de C6 H 12O6 es oxidada, lo cual significa que 180 g de sustrato (1
mol) ms 192 g de O2 (6 moles), producen la formacin de 264 g de CO2 (6 moles),
108 g de agua (H2O) (6 moles) y liberan 686 Kcal mol-1 equivalente a 2.872 KJ mol-1,
sta es una reaccin exergnica, con una energa libre negativa y representa la
respiracin oxignica. Esto significa que por cada mol de O2 absorbido de 32 g, se
producen 114 Kcal de energa, necesaria para llevar a cabo todos los procesos y
cambios metablicos de la fruta durante su maduracin (Hernndez, 2002; Lencki,
2004).
La Figura 2.10 A y B muestra para una fruta climatrica y una no climatrica el
comportamiento respiratorio tpico durante la etapa de poscosecha a 20C de
temperatura.
46
Figura 2.10. Tasa de respiracin para una fruta climatrica (aguacate) (A), y para una
fruta no climatrica (fresa) (B) (Fuente: Ritenour et al. 1997 y Nei et al. 2005),
respectivamente
Puede apreciarse cmo las frutas climatricas presentan un pico respiratorio el cual
normalmente coincide con su punto de sazn o madurez de consumo (Figura 2.10A),
mientras que las frutas no climatricas presentan tendencia decreciente continua durante
su perodo de poscosecha (Figura 2.10B) (Wills, 1999).
Para frutas de algunas especies de Annonaceas cmo chirimoya (Annona cherimola M.)
se ha encontrado una tasa de respiracin de 220 mL de CO2kg-1h-1 a los tres das de
estar almacenada a 22C y un comportamiento tpico de una fruta climtrica (Paull,
1996).
47
1992).
S = 0,25692 - 0,009136 t 0.000188 t Ecuacin 2.11
Donde:
S = Solubilidad en mL de etileno/litro de agua
t = Temperatura en C
La Figura 2.11 muestra la estructura molecular del etileno o etileno.
Figura 2.11. Estructura molecular del etileno (Fuente: Morrison y Boyd, 1998)
El C2H4 tiene un doble origen: biolgico y no biolgico, segn se trate del producido
por el metabolismo de la fruta y procedente de microorganismos, o proceda
exgenamente de la combustin en numerosos procesos industriales en los que se
emplean combustibles fsiles (Azcon-Bieto y Talon,
2003). Es considerado el
48
2.2.2.1 Biosntesis de etileno. El proceso ha sido estudiado por diversos autores (Yang
y Hoffman, 1984; Kevin, 2002; Stearns y Glick, 2003; Cara y Giovannon, 2008). El
C2H4 se genera en los rganos de las plantas superiores, la tasa de produccin depende
del tipo de tejido y de su estado de desarrollo. En general las regiones meristemticas,
nodales y las frutas durante su maduracin, son las regiones ms activas en la
biosntesis (Bradford, 2008).
La Figura 2.12 muestra las reacciones del proceso y los agentes generadores e
inhibidores del
C2H4, el cual se biosintetiza a partir del aminocido metionina (Lieberman, 1979),
exactamente a partir de los carbonos 3 y 4 (Abeles, 1972), por accin de la enzima
Adenosil Metionina Sintasa (Ado-Met sintasa) generando S-Adenosil Metionina (SAdo-Met), con requerimiento de ATP, el (S-Ado-Met) es el precursor de cido amino
ciclo propano carboxlico (ACC), la etapa limitante en la ruta es la conversin de (SAdo-Met) a (ACC), catalizado por la (ACC-Sintasa). El grupo tiometilo (CH3-S) de la
metionina, es reciclado a travs del Ciclo de Yang por medio de la va de 5metiltioadenosina, llegando nuevamente hasta metionina; esta va cclica involucra el
consumo de energa (ATP) y de (O2). La ltima etapa de la va formadora de C2H4, la
cataliza la enzima oxidasa (ACC-Oxidasa) que requiere O2 cmo sustrato y oxida el
(ACC) para producir C2H4, CO2 y cido cianhdrico (HCN), el cual es detoxificado a
cianoalanina por la cianoalanina sintasa para prevenir su acumulacin txica. Cuando se
tiene una concentracin alta de (ACC) cmo control natural de la produccin de C2H4,
se produce una malonilacin del (ACC) generando el N-Malonil-ACC, el cual es
precursor de otros metabolitos secundarios (Cervantes, 2002; Kevin et al. 2002).
49
Figura 2.12. Biosntesis de etileno a partir del amino cido metionina. Los agentes
promotores de etileno se denotan por () y los inhibidores de la sntesis de la
produccin de
etileno son denotados por ( ) (Fuente: Soberon et al. 2005)
Glick,
2003;
El mecanismo de accin del C2H4 sobre las protenas receptoras ocurre a nivel de la
membrana celular, el cual una vez establecido inactiva reguladores negativos CTR1
que inhiben la accin receptora, situacin que se presenta en el citosol, el receptor
proteco EIN2 transduce la seal a nivel de la membrana nuclear, lo que requiere de una
activacin inica de calcio (Ca), de esta manera origina la accin del factor de
transcripcin EIN3 que enlaza otras protenas para
51
Reaccin
Cl
OH
P
OH
H2C
CH2
Cl
H3PO 4
OH
B
CH3 - CH2-OH
Etileno + Agua
Figura 2.16. Compuestos qumicos generadores de etileno (Fuente: Abeles et al. 1992)
2.2.2.4 Determinacin de etileno. Young et al.
52
C2H4 en los materiales vegetales. Greef et al. (1976), utilizaron cromatografa gaseosa
para encontrar el lmite mnimo de deteccin, encontrando para las condiciones de
experimentacin aplicadas, lmites de deteccin entre 0,1 y 0,01 ppb de manera
reproducible, siendo este el mtodo comnmente usado para determinar C2H4 en
productos biolgicos por ser seguro y sensible. Murayama et al. (1998), estudiaron por
cromatografa gaseosa, la influencia de la produccin de C2H4 sobre algunos cambios en
la pared celular y la firmeza de dos cultivares de pera Pyrus communis L. (cv.
Marguerite marillet y cv. La france), encontrando que la mxima produccin de C2H4
para el cv. Margarita marillet fue de 4 lkg-1h-1 y para el cv. La france fue de
12 lkg-1h-1,
para ambos
cv. la
firmeza
present
disminucin
continua
durante toda la etapa de poscosecha, siendo los frutos del cv. La france los que
mostraron mayor ablandamiento. Pham-Tuan et al. (2000), emplearon la tcnica
instrumental de cromatografa gaseosa para la determinacin de C2H4 en productos
biolgicos con niveles de deteccin de ppt de forma segura y reproducible, utilizando
un sistema de deteccin de ionizacin de llama (FID), y una columna capilar con
material adsorbente carboxen 1000. Reyes et al. (2005), han investigado para frutos de
chicozapote (Manilkara zapota L.) la relacin existente entre los cambios fsicos y
qumicos producidos durante la etapa de poscosecha o de maduracin y la produccin
de C2H4 determinada por cromatografa gaseosa, encontrando una produccin mxima
de 6,4 lkg-1h-1 en el da siete, previo al pico climatrico, el cual se present en el da
ocho con una tasa respiratoria de 21,3 mL de CO2 kg-1h-1.
La presencia de otros gases metablicos cmo el CO2, presenta inconvenientes para la
determinacin de C2H4, debido a que inhibe su produccin (Bassi y Spencer, 1979). La
cromatografa gaseosa acoplada con espectrometra de masas ha sido utilizada para
determinar C2H4 y otros voltiles en championes (Turner et al. 1975).
El etileno h sido valorado durante la etapa de maduracin de la guayaba (Psidium
guajava L.) y su concentracin se h relacionado con la evolucin del color de la piel de
(Atta-Aly et al. 2000). En frutas de papaya (Carica papaya L.) se estudio la relacin
de la tasa respiratoria y la produccin de C2H4 durante su etapa de pos recoleccin,
encontrando picos mximos de produccin de 90 mg CO2kg-1h-1 y 14,4 gkg-1h-1
para C2H4 (Archbold y Pomper, 2003).
Para frutas de Annona sp. se ha determinado la produccin de C2H4 y su relacin con la
tasa respiratoria durante la etapa de poscosecha, este comportamiento se muestra en la
Figura
2.17.
catalticas de oxidacin, que han sido utilizadas en algunos casos cmo mecanismo de
inhibicin de su accin y de esta manera retrasar los procesos de maduracin de los
vegetales, la Figura 2.18 presenta las reacciones tpicas del C2H4 (Soberon et al. 2005).
54
H2C
CH2
O2
O2
O
CO2
Ag
HO
Oxido de etileno
H2O
OH
cido oxalico
CH2
Cl
Cl
Na2CO 3
OH
HO
Dicloroetano
Etilen Glicol
KMnO4
H2C
CH2
OH
HO
MnO2 + H 2O
Etilen Glicol
H2SO 4
H2C
CH2
H3C
OH
Etanol
Figura 2.18. Reacciones tpicas del etileno tiles para ser aplicadas cmo mecanismos
de inhibicin de la maduracin en frutas (Fuente: Soberon et al. 2005)
2.2.2.6 Inhibicin del etileno. La sntesis del C2H4 puede ser inhibida por cidos
orgnicos cmo el cido amino actico (AOA) y el cido amino etoxi vinil glicina
(AVG), los cuales impiden la accin de la enzima (ACC-Sintasa) (Yang y Hoffman,
1984). Esta enzima esta constituida por una familia multignica dependiente de fosfato
piridosal cmo cofactor (Kevin et al. 2002).
La Figura 2.19 muestra la estructura molecular de los cidos amino actico (AOA) y
amino etoxi vinil glicina (AVG).
56
El etileno puede ser inhibido en su accin a travs de iones Ag+, con la aplicacin de
nitrato de plata (AgNO3) o tiosulfato de plata (Ag (O3S2)2-3) siendo este ltimo, el ms
utilizado por su menor toxicidad (Basolo et al. 1980; Ichimura et al. 2009), el cual
interfiere con el cofactor proteico (Cu), requerido por las mtalo protenas receptoras de
C2H4 (Nieves et al. 2007), otras sustancias han sido utilizadas para contrarrestar la
accin del C2H4, destacando el uso del 1- Metilciclopropeno (1-MCP) (Ella et al. 2003;
Cliff et al. 2009) cmo un inhibidor competitivo del C2H4 por el sitio activo de la
protena receptora. En frutas de ann (Annona squamosa L.) se aplic 1-MCP, en
concentraciones de 30, 90, 270 y 810 nLL-1 durante 12 h y se almacenaron a 25C por
4 das, encontrando que la firmeza de las frutas tratadas fue superior respecto al control
(Benassi et al. 2003). Concentraciones de 1 LL-1 de 1- MCP se utilizaron con el fin
de mantener las caractersticas sensoriales en frutas de caqu (Diospyros chinensis
Blume) y su relacin con la concentracin de taninos y la astringencia de las frutas
durante la etapa de poscosecha ha sido valorada (Besada et al. 2007). La Figura 2.22
muestra la estructura qumica del 1- Metilciclopropeno.
57
CH3
vehculos absorbentes, cmo slica gel, alumina y diferentes tipos de arcillas (Abeles et
al. 1992). En frutas de kiwi se ha aplicado con fines de retardar la maduracin (Ben-
Ross,
jasmnico (AJ) y oxido ntrico (ON), se han encontrado efectos antagnicos durante la
poscosecha de las frutas (Lieberman, 1979; Retamales, 2007). La Figura 2.24 muestra
de manera general el comportamiento del C2H4 durante la poscosecha y su relacin con
algunas de las principales fitohormonas.
58
Figura 2.24. Relacin del etileno con otras hormonas durante la poscosecha en frutas
climatricas (Fuente: Adaptado de Pott, 2007)
2.2.2.8 Efectos del etileno sobre la maduracin de las frutas. Entre los numerosos
efectos fisiolgicos del C2H4, se destacan los que afectan directamente la maduracin,
cmo son la estimulacin de la respiracin, la influencia en el metabolismo pctico,
favoreciendo el aumento de pectinas solubles y por tanto la reduccin de la dureza del
endocarpio, degradacin de la clorofila, despolimerizacin de polisacridos de alto peso
molecular, prdida o disminucin de cidos, taninos y fenoles (Wills, 1984). Debido a
ello, el C2H4 es el principal agente inductor de maduracin en frutas climatricas y
puede causar la maduracin prematura de algunos productos, se recomienda no
transportar ni almacenar frutas y hortalizas de muy alta o alta produccin de C2H4 con
productos que son sensibles al mismo (Kader, 2002). Almohadillas de KMnO4,
soportado sobre silica gel son normalmente utilizadas para absorber el C2H4 durante el
transporte y almacenamiento de frutas al igual que la adecuada aireacin para la
remocin del aire concentrado de C2H4 (Linskens y Jackson, 1995).
Entre los principales efectos negativos de la accin del C2H4 en las frutas, se destacan
los siguientes:
59
Manchas en la epidermis.
Entre los principales efectos positivos de la accin del C2H4 en las frutas, se destacan
los siguientes:
produccin de C2H4, las frutas se pueden clasificar segn la Tabla 2.6 (Kader, 2002).
Tabla 2.6. Clasificacin de algunas frutas de acuerdo a su produccin de etileno
Muy baja
C2H4 en mgkg-1h-1
a 20C
< 0,1
Baja
Meda
0,1 1,0
1,0 10
Alta
10 100
Muy alta
> 100
Frutas
prdida de peso en plantas enteras sembradas en materos fue inicialmente realizada por
Stephen Hales (1727) quien midi la prdida de peso en rboles de manzana, limn y
otras plantas herbceas. Varios estudios fueron realizados durante la segunda mitad del
siglo XIX, de los cuales los ms conocidos son las de Von Hhnel, publicado en 1881 y
1884. La prdida de peso esta relacionada con la tasa de transpiracin, que hace
referencia a la difusin del agua y otras sustancias voltiles de las frutas, producto de la
naturaleza de su metabolismo (respiracin, transpiracin), los gases se difunden en el
aire que rodea el vegetal, debido al movimiento de molculas de zonas de mayor
concentracin a zonas de menor concentracin, hasta que se alcanza la condicin de
60
equilibrio, las estructuras a partir de las cuales ocurre este proceso son; los hidtodos,
estomas, lenticelas y la cutcula (Salisbury y Ross, 1992; Flores, 1994; Kader, 2002).
La prdida de agua en forma de vapor y otras sustancias voltiles en las frutas se
produce a travs de la epidermis, esta difusin metablica de los gases la describe la
primera ley de Fick, que establece que el flujo de un gas a travs de una barrera de
tejido es proporcional al gradiente de concentracin (Lammertyn et al. 2003).
2.2.3.1 Ley de difusin de Fick. La velocidad a la cual una sustancia difunde a travs
de un rea, depende no solamente del tamao y forma de la molcula, sino tambin del
gradiente de concentracin de la sustancia. Lo cual quiere decir que a medida que
disminuye la distancia, aumenta la velocidad de difusin, el gradiente de difusin se
expresa cmo - dc/dx, donde C es la concentracin (molL) y x es la distancia (cm).
Con dm/dt equivalente a la velocidad a la que m moles de soluto atraviesan la barrera o
plano de referencia, para el caso de las frutas correspondiente al rea superficial (A), en
un tiempo t (seg), se puede escribir la primera ley de Fick de acuerdo a la ecuacin 2.12.
dm
dc
Ecuacin 2.12
= D * A
dt
dx
Donde:
dm/dt = Velocidad de difusin (molcm-2s-1)
D = Coeficiente de difusin, o tasa de difusin especfica (mols-1).
A = rea superficial (cm2)
dc/dx = Flujo (molL-1) (Hernandez, 2007).
El coeficiente de difusin D, se puede calcular cmo funcin de la presin y la
temperatura a partir de la ecuacin 2.13.
n
T P
D = D 0 Ecuacin 2.13
T0 P0
Donde:
D0 = Difusividad a temperatura T0 de 0C y Presin P0 de 1 atm
T = Temperatura del ambiente en C + 273K
P = Presin del ambiente (atm)
61
T
D = D 0 Ecuacin 2.14
T0
Con la ecuacin 2.14 se puede calcular para una temperatura de almacenamiento, el
coeficiente de difusividad para un vegetal, teniendo en cuenta aspectos cmo el
diferencial de presin de vapor entre el sistema en este caso el vegetal y el medio
ambiente, al igual que las condiciones del aire circundante, la humedad relativa y la
temperatura (Inzunza, 2009).
2.2.3.2 Transpiracin y transferencia de calor. La transpiracin se puede expresar
Donde:
62
K = Constante de transpiracin
Pv = Presin parcial del vapor de agua en el vegetal
Pa = Presin parcial del vapor de agua en el aire circundante
rv = Resistencia del vegetal a la difusin del vapor de agua (Salisbury y Ross, 1992).
La prdida de agua puede ser una de las principales causas de deterioro ya que da por
resultado no solo prdidas comerciales, sino tambin causa prdidas en apariencia
debido al arrugamiento por disminucin en la turgencia de las estructuras celulares, la
calidad textural se ve afectada por ablandamiento, flacidez y falta de firmeza de las
frutas. El sistema drmico juega un papel importante en la regulacin de la prdida de
agua de los vegetales, presentando barreras naturales que permiten controlar o
contrarrestar las prdidas de agua, por ejemplo
cmo en frutas de patilla (Citrullus lanatus Thunb) y meln (Cucumis melo L.), pelos
unicelulares
vellosidades
epidrmicas
(kiwi y durazno),
falsas espinas o
63
Tabla 2.7. Prdida fisiolgica de peso que afecta la calidad comercial en vegetales
Producto
Sabor, marchitamiento
Encogimiento
Marchitamiento, amarillamiento
Encogimiento
Marchitamiento
Marchitamiento, deterioro
Encogimiento
Marchitamiento
Encogimiento
Encogimiento
Encogimiento
Marchitamiento
(Fuente: Thompsom et al. 1998)
64
La Figura 2.25 presenta un esquema general de las rutas para la obtencin de sustancias
voltiles en vegetales.
Figura 2.25. Rutas metablicas para la obtencin de voltiles en los vegetales (flechas
punteadas
indican varios pasos intermedios) (Fuente: Marn y Cespedes, 2007)
La extraccin,
extraccin de los analitos de la matriz mediante una fibra de slice fundida que est
66
El modelo matemtico que explica la dinmica del proceso de absorcin cuando la fibra
se introduce en la muestra fue desarrollado por Louch y Pawliszyn, (1992), en l se
confirma la relacin lineal que existe entre la cantidad de analito absorbida por la fibra
en el estado de equilibrio y la concentracin de ste en la muestra (Buchberger y
Zaborsky, 2007). La ecuacin 2.18 muestra la relacin de adsorcin del analito en
funcin de la concentracin y el volumen de la fibra.
n = Kfs Vf Co Ecuacin 2.18
Donde:
n = moles de analito absorbidos por la fibra
Kfs = Coeficiente de particin del analito entre la fibra y la muestra
Vf = Volumen de la fibra
Co = Concentracin inicial de analito en la muestra
La cantidad de analito extrada (n) es directamente proporcional a la concentracin de
analito en la muestra e independiente del volumen de muestra (Louch y Pawliszyn,
1992; Buchberger y Zaborsky, 2007).
67
Figura 2.27. Proceso de SPME-GC: inmersin directa (A), HS-SPME (B), desorcin
trmica en GC (C) (Fuente: Pealver, 2002)
68
instrumento que puede oler, es decir, es capaz de realizar anlisis cualitativos y/o
cuantitativos de una mezcla de gases, vapores, olores y aromas. La NE es un equipo de
olfato artificial que permite distinguir y reconocer aromas utilizando sensores. Un
dispositivo de este tipo tiene al menos 4 partes con diferentes funciones: la primera
realiza la adecuacin de la mezcla gaseosa y el muestreo; la segunda, compuesta por el
conjunto de sensores de gas que hacen la deteccin; la tercera, integrada por los
sistemas electrnicos de control que se encargan de la adecuacin de la seal y la
general de las etapas que involucra una determinacin de compuestos voltiles con NE
(Rodrguez et al. 2009).
Figura 2.28. Proceso general de la nariz electrnica (Fuente: Rodrguez et al. 2009)
Los sensores son parte fundamental en la NE, estn constituidos por dos partes
principales, un elemento sensible activo, cuyas propiedades cambian con el gas que se
desea detectar y un elemento transductor de la seal, que convierte los cambios del
material activo en una seal elctrica cuantificable. Entre los principales materiales que
constituyen los sensores se encuentran:
Fibra ptica
Polmeros conductores
Cristal de cuarzo
xidos de metales semiconductores
69
Las pelculas de los sensores al oxidarse por la accin de los gases adsorbidos,
presentan modificacin en la nano estructura, mostrando variacin en la conductividad
y por lo tanto en la emisin de la seal elctrica que se transduce, situacin que
presenta gran reproducibilidad y correspondencia con voltiles especficos, La Figura
2.30 muestra los cambios estructurales en un sensor de xido de estao (SnO2) al sufrir
el proceso de oxidacin (Rodrguez et al. 2009).
70
A
B
Figura 2.30. Micrografas de la pelcula de un sensor de xido metlico, mostrando las
partculas de estao (Sn) antes de la oxidacin (A), y las de xido de estao despus del
proceso de oxidacin (B) (Fuente: Rodrguez et al. 2009)
La sensibilidad de un sensor
R = A[C ]
Ecuacin 2.19
Donde:
R = Resistencia elctrica del sensor
A y = Constantes caractersticas para cada gas
[C] = Concentracin del gas
La identificacin de un patrn medido se realiza utilizando un software o algoritmo de
reconocimiento que compara este patrn medido con aquellos almacenados en la
memoria durante la etapa de aprendizaje. Un proceso similar al que ocurre en el olfato
biolgico de los mamferos. Distintas muestras de olor se miden con la NE y su patrn
sensorial caracterstico (huella digital olfativa o diagrama) es etiquetado con un nombre
y almacenado en la memoria del computador. Estas etiquetas con su nombre son
mostradas por la NE cuando la misma detecta un olor similar, a esto se le llama
reconocer. Los sensores han sido desarrollados con buena selectividad para reconocer
grupos de compuestos, cmo por ejemplo, sulfuros orgnicos, compuestos
hidrocarbonados, alcoholes, metano e hidrogeno (Airsense, 2006; Brezmes, 2006).
Funcionamiento de la nariz electrnica. Una bomba succiona la muestra de gas
a travs de la matriz de sensores (bomba 1), para la dilucin de los gases una segunda
bomba (bomba 2) introduce aire limpio al sistema sensor, este aire limpio tambin se
utiliza
purgar el sistema.
para
En la Figura 2.31 se muestra el diagrama general
71
para el
La NE ha sido manipulada
en
la evolucin de los
72
los cuales
una medida rpida, funcional y muy prctica del estado de madurez, no obstante se
recomienda que este acompaado, de por lo menos otras dos caractersticas fsicoqumicas. En general se aplican tcnicas sensoriales e instrumentales, siendo estas
ltimas de gran utilidad en el manejo en poscosecha de frutas y hortalizas (Planella,
1987; Lana et al. 2006; Salvador et al. 2007).
Los cambios de color debidos a la maduracin de las frutas, estn relacionados con el
metabolismo del vegetal, que se manifiesta con la degradacin de algunos pigmentos y
aparicin o afloramiento de otros, lo cual es motivado por aspectos, genticos de la
especie, fenotpicos y ambientales (Taiz y Zeiger, 2002; Cox et al. 2004).
El color de un alimento, incluyendo las frutas puede ser identificado a partir del sistema
CIELab o L, a, b donde L corresponde a la luminosidad, con escala de 0 a 100,
a concierne al intervalo de colores entre el verde y el rojo, y b representa al
intervalo de colores entre el azul y el amarillo, con cuyas combinaciones se puede
expresar cualquier color y su evolucin en el tiempo (Restrepo, 1995; Hernndez et al.
2009). La Figura 2.32 presenta el espacio de color CIELab a partir del cual se
pueden determinar las coordenadas para cualquier alimento (Williams, 2002).
73
La Figura 2.33 muestra los resultados de una investigacin en la que se evalu el color
de tomates durante la etapa de poscosecha y la relacin con la concentracin de
pigmentos carotenoides tipo licopeno (Valero, 2007).
Diversos investigadores, han evaluado los cambios en el color y lo han relacionado con
otros aspectos fsico-qumicos del vegetal durante la etapa de poscosecha, la Tabla 2.8
presenta un resumen de algunos de los trabajos realizados.
74
Evaluaciones realizadas
Color, SST, firmeza
Color, firmeza, clorofila
Color, firmeza, peso
Color, SST, humedad
Mango
Kiwi
Color, carotenos
Color, carotenos,
clorofila
Color, SST, sensorial
Color, clorofila
Mangostino
Banano
Autor (es)
Tadesse et al. 2002
Cox et al. 2004
Muskovics et al. 2006
Ong et al. 2006
Ornelas-paz et al. 2008
Montefiori et al. 2008
y 60% de HR (Ruiz y
Guadarrama, 1992).
75
primaria de las frutas es la pulpa (Guzmn y Segura, 1991). Se define por pulpa, el
producto pastoso, no diluido, ni concentrado, ni fermentado, obtenido por la
desintegracin y tamizado de la fraccin comestible de frutas frescas, sanas, maduras y
limpias (Camacho y Romero, 1996; Gallo, 1997).
El rendimiento en pulpa vara en funcin del tipo de fruta, del cultivar y en muchas
ocasiones, de su estado de desarrollo o ndice de madurez (Mrquez et al. 2007). Cada
especie de fruta posee un rendimiento en pulpa especfico y atributos muy particulares,
que la caracterizan fsico-qumica y sensorialmente (Camacho y Romero, 1996). La
Tabla 2.9 presenta el rendimiento en pulpa expresado cmo porcentaje, para algunas
frutas en madurez de consumo.
Tabla 2.9. Rendimiento en pulpa para algunas frutas
Fruta
Rendimiento (%)
Banano
65
Boroj
74
Ctricos
50
Curuba
60
Fresa
80
Guanbana
55
Guayaba
69
Lulo
61
54
Mango
30
Maracuy
74
Mora
75
Papaya
73
Pia
64
Tomate de rbol
(Fuente: Camacho, 1995)
Lo ideal es que las frutas posean alto rendimiento en pulpa, un elevado valor de SST
expresados cmo grados Brix, representados mayoritariamente por azcares del tipo,
sacarosa, glucosa y fructosa, para algunos casos es importante una alta acidez y
acentuadas las caractersticas sensoriales de color, sabor, aroma y apariencia (Camacho
y Romero, 1996; Mrquez,
76
realizados para investigar los cambios ocurridos en las frutas durante su etapa de
poscosecha con respecto a la concentracin de SST, cidos orgnicos y el pH, debido a
que son aspectos muy relevantes en la calidad y aceptacin del producto (Wu et al.
2005; Alonso et al. 2007; Usenick et al. 2008). La principal reaccin durante la
maduracin, para la sntesis de azcares, es la hidrlisis del almidn a carbohidratos
ms simples del tipo disacridos y monosacridos, mediada por la accin de un paquete
enzimtico donde sobresale la accin de y amilasas (Kader, 2002). La Figura 2.35
muestra la reaccin general de la hidrlisis del almidn, constituido por cadenas de
amilosa y amilopectina, las cuales son desdobladas hasta molculas ms simples de
monosacridos cmo glucosa (DeMan, 1999).
77
Figura 2.36. Evolucin de los azcares totales en sapote (Pouteria sapota (Jacq.) H.E.
Moore & Stearn) durante su periodo de poscosecha (Fuente: Adaptada de Tejacal et al.
2007)
Figura 2.37. Evolucin de la concentracin de cido mlico (A) y ctrico (B) en frutos
de banano (Musa paradisiaca L.) almacenados a 20C (Fuente: Adaptado de Liu et
al. 2004)
78
Figura 2.38. Cambios en la acidez total titulable (A) y en el pH (B), en frutas de papaya
de montaa (Vasconcellea pubescens A. DC.) almacenadas a 20C (Fuente: Adaptado
de Moya et al. 2004)
En frutas de guanbana
la tasa
79
80
81
Figura 2.41. Reaccin general de la PFO sobre los sustratos fenlicos (Fuente: Garcia
et al. 2006)
Dentro de las que enzimas que afectan de forma directa la textura de las frutas, se
encuenta la pectin metil esterasa (PME), de la cual se han identificado dos isoformas,
las cuales han sido purificadas a partir de frutas de guanbana (PME I y PME II), siendo
la PME I ms estable al calor que la PME II a pH de 7,5; los valores de estabilidad
trmica D y Z, fueron evaluados para el intervalo de temperatura entre 45 a 75C, el
valor D para la isoenzima PME I fue de 5,8 min y de 3,3 min para la isoenzima PME
II (Arbaisah et al. 1997).
2.4 CARACTERIZACIN REOLGICA DE LAS FRUTAS
82
forma directa con la calidad y aceptacin de los productos (Muller, 1973; Sharma et
al. 2003).
Los materiales biolgicos, cmo las frutas desde su cosecha y en las prcticas de
manipulacin, transporte y acondicionamiento (poscosecha), estn sometidos a diversas
condiciones de fuerzas o cargas aplicadas, las cuales pueden ocasionar gran dao
mecnico y afectar su calidad y precio. Por tanto, identificar las magnitudes de esas
cargas y esfuerzos resulta determinante, para mejorar las tcnicas de empaque,
transporte, manejo y control de dao mecnico, y as conservar su calidad. Los modelos
reolgicos pueden dar razn de ese comportamiento mecnico, al someter el producto
a fuerzas de fractura, aplicando compresin en direccin transversal y longitudinal;
admitiendo, que dicho comportamiento puede estar afectado por una combinacin de
mltiples factores o caractersticas fsicas, qumicas, trmicas y mecnicas a las cuales
se encuentran sometidos los productos agrcolas y alimentos en general, los cuales
pueden considerarse materiales de ingeniera de naturaleza visco elstica y
caracterizados por su anisotropa (Abbott y Lu, 1996; Bourne, 2002; Ciro et al. 2005).
De acuerdo a Mohsenin, (1986) y Stroshine, (1999) en los productos biolgicos, cmo
frutas y hortalizas, la respuesta a la imposicin de diferentes cargas o esfuerzos es una
informacin necesaria para el desarrollo de procesos mecanizados de cosecha,
transporte, manejo en planta, control de calidad, requerimientos de empaque,
almacenamiento, procesos de transformacin y control de dao mecnico.
Oliveros, (1995) y Stroshine, (1999) plantean que los materiales biolgicos presentan
un comportamiento visco elstico, es decir que dependiendo de las condiciones de
carga a que sean sometidos, pueden exhibir un comportamiento combinado de lquido
y slido.
Mouquet, (1995) establece la caracterizacin reolgica para ser aplicada en alimentos,
donde se destacan las pruebas de penetracin y de compresin, las cuales tienen cmo
uso fundamental, la medida de la deformacin, firmeza y fractura del material.
La fractura de un material slido puede considerarse cmo una propiedad mecnica
donde ocurre una separacin en dos o ms partes bajo la accin de un determinado
83
esfuerzo (Dieter, 1986; Smith, 1996; Dowling, 1998). Adems Anderson, (2000)
argumenta que un material se fractura cuando suficiente esfuerzo y trabajo son
aplicados para romper las estructuras que mantienen los materiales unidos, donde la
resistencia del espcimen es superada por la fuerza empleada.
La fractura de un vegetal, es un dao mecnico ocasionado por una fuerza externa que
puede ocasionar cambios de sabor, alteracin qumica del color, incluso sin llegar a
romper la superficie del producto (Anderson, 2000).
La fractura frgil es aquella en la cual no existe o es muy pequea la deformacin
plstica, antes de la fractura y es caracterizada por una baja absorcin de energa,
mientras que en la fractura dctil, existe una deformacin plstica con alta absorcin de
energa antes de la ruptura (Craig, 1999; Bourne, 2002).
Dentro de los atributos reolgicos se encuentra la textura y firmeza de las frutas, las
cuales
las caractersticas
bioqumicas de cada vegetal. Los cambios sufridos por los procesos normales de
maduracin, hacen compleja la evaluacin; por lo tanto, se deben hacer estimaciones
durante toda la etapa de vida til o poscosecha del material biolgico, para conocer con
certeza su comportamiento (Abbott y Harker, 2005).
2.4.1 Modelo mecnico de Maxwell. El comportamiento reolgico de los slidos
viscoelsticos
84
Donde:
= Coeficiente de viscosidad del lquido en el amortiguador (Pas)
= Esfuerzo normal (Pa)
E = Mdulo del resorte que representa un cuerpo elstico (Pa)
Para el modelo mecnico de Maxwell, se puede establecer el comportamiento del
esfuerzo con respecto al tiempo, cmo lo presenta la Figura 2.43 (Castro, 1999).
Figura 2.43. Comportamiento del esfuerzo con respecto al tiempo de acuerdo al modelo
mecnico de Maxwell (Fuente: Castro, 1999)
85
E1
E2
E3
En
Ee
Donde:
= Coeficiente de viscosidad del lquido en el amortiguador (Pas)
E = Mdulo del resorte que representa un cuerpo elstico (Pa)
Este modelo sometido a alta velocidad de deformacin ha sido representado por la
ecuacin 2.20.
n = n n Ecuacin 2.20
Donde:
n = Esfuerzo aplicado en el elemento n
n = Viscosidad del elemento n
n = Velocidad de deformacin del elemento n
86
v =
v
Ecuacin 2.21
+
K
K=
Despejando K; se tiene:
v K
+
Ecuacin 2.22
v v
K=
Ecuacin 2.23
K
+
Ecuacin 2.24
v v
Donde:
= Esfuerzo
v = Velocidad de aplicacin del esfuerzo
= Deformacin
v = Velocidad de deformacin
K = Constante elstica
= Viscosidad
= Tiempo de relajacin
Equivalentemente:
87
v
Ecuacin 2.25
v
= K Ecuacin 2.26
De acuerdo a la ecuacin 2.26 se puede apreciar que cumple la ley de Hooke para un
slido ajustndose a un comportamiento elstico, lo anterior para cualquier velocidad
finita donde el segundo trmino de la ecuacin 2.24 tiende a cero (Castro, 1999; De
Hombre y Castro, 2007).
Otros modelos han sido propuestos para el estudio del comportamiento mecnico de los
slidos viscoelsticos dentro de los que se destacan, el de Kelvin y Burger (Osorio,
2004).
2.4.2 Modelo de Kelvin.
Donde:
= Coeficiente de viscosidad del lquido en el amortiguador (Pas)
= Esfuerzo (pa)
E = Mdulo del resorte que representa un cuerpo elstico (pa)
El modelo generalizado de Kelvin corresponde a n elementos conectados en serie con
un resorte inicial y un elemento viscoso final, tal cmo lo presenta la Figura 2.47
(Mohsenin, 1986).
88
E0
E1
E2
E3
T1= 1/ E1
T2= 2/ E2
T3= 3/ E3
En
Donde:
= Coeficiente de viscosidad del lquido en el amortiguador (Pas)
= Esfuerzo (Pa)
E = Mdulo del resorte que representa un cuerpo elstico (Pa)
T = Tiempo (s)
2.4.3
Modelo de Burger.
89
E0
Er
Donde:
= Coeficiente de viscosidad del lquido en el amortiguador (Pas)
= Esfuerzo (Pa)
E = Mdulo del resorte que representa un cuerpo elstico (Pa)
2.4.4 Curvas de esfuerzo vs deformacin. La curva tpica de esfuerzo deformacin
especimen cumple la ley de Hooke y se ajusta a los criterios planteados para el modelo
mecnico de Maxwell, en esta zona se presenta una adaptacin del tejido a la carga
aplicada, manifestndose a travs de la expulsin de gases y humedad de los
macroporos de la epidermis del vegetal, en ella se determina el Mdulo de Young o
90
sometido a evaluacin, el rea total bajo la curva representa el consumo energtico del
proceso (Dieter, 1986; Smith, 1996; Dowling, 1998; Sharma et al. 2003).
2.4.4.1
materiales en ingeniera, dentro de los que se destacan, el esfuerzo aplicado tal cmo lo
muestra la ecuacin 2.27.
F
Ecuacin 2.27
A
Donde:
= Esfuerzo aplicado
F = Fuerza aplicada
A = rea de la seccin transversal de aplicacin de la fuerza
En funcin del modo de aplicacin del esfuerzo, este puede ser de compresin, de
tensin, axial, normal, de corte, tangencial, e isotrpico (Sharma et al. 2003).
2.4.4.2 Deformacin. La deformacin se considera cmo un desplazamiento relativo de
91
L
Ecuacin 2.28
L0
Donde:
= Deformacin
L = Cambio de longitud
L0 = Longitud original
Figura 2.50. Principio de aplicacin de la deformacin axial y lateral para el clculo del
coeficiente de Poisson (Fuente: Sharma et al. 2003)
D
D
= L = 0 Ecuacin 2.29
A L
L0
Donde:
= Coeficiente de Poisson
L = Deformacin lateral
92
A = Deformacin axial
biolgicos.
Tabla 2.11. Relacin de Poisson para algunos materiales biolgicos
Material
Relacin de Poisson
Queso cheddar
0,5
Patata rallada
0,49
Manzana rallada
0,37
Trozos de pan
0,0
(Fuente: Adaptada de Lewis, 1993)
E=
Ecuacin 2.30
Donde:
93
Muchos investigadores han evaluado algunos indicadores reolgicos en frutas y los han
relacionado con la calidad total y otras propiedades fsico-qumicas, la Tabla 2.13
presenta el resumen de algunos de estos trabajos.
Tabla 2.13. Evaluacin de las caractersticas reolgicas en algunas frutas
Alimento
Manzanas
Tomates
Hojuelas de maz
Cebolla
Manzanas
Manzanas
Peras
Grosellas
Tomate de rbol
Frutos de palma de aceite
Guanbana
Determinacin
Fuerza de compresin
Fuerza de relajacin
Fuerza de fractura
Propiedades micromecnicas
Pruebas de compresin
Fuerza de fractura
Evolucin de la firmeza
Fuerza de fractura
Fuerza de fractura
Fuerza de fractura
Viscosidad de la pulpa
Autor
Khan y Vincent, 1993
Errington et al. 1997
Padilla, 2003
Vanstreels et al. 2005
Guillermin et al. 2006
Harker et al. 2006
Hayama et al. 2006
Goyal et al. 2007
Mrquez et al. 2007
Owolarafe et al. 2007
Romero et al. 2007
El mtodo o anlisis por elementos finitos denominado cmo FEM o FEA, se empez a
94
mecnicos, pueden ser descritos por leyes fsicas en trminos de ecuaciones algebraicas,
diferenciales o integrales (Reddy, 1993). Las determinaciones en diferentes cuerpos
sometidos a cargas trmicas, aerodinmicas o mecnicas, son algunos de los problemas
prcticos que se pueden afrontar mediante el estudio de estos fenmenos fsicos
(Zienkiewicz y Taylor, 2000).
El desarrollo de modelos matemticos de un proceso, consiste en mostrar cmo se
comporta a travs de mtodos numricos, de tal manera que se puedan modelar las
caractersticas matemticamente (Ramirez y Roldn, 1996). Algunos mtodos de
solucin a problemas con elementos finitos son: el mtodo de Rayleigh-Ritz, Garlekin
y mtodos directos de (Chandruplatla y Belegundu, 1999).
El mtodo de elementos finitos plantea la solucin a problemas complejos mediante un
proceso sistemtico de funciones de aproximacin del dominio, y se fundamenta en tres
principios bsicos:
Las geometras complejas del dominio del problema son representadas cmo una
coleccin de geometras simples del sub-dominio, llamadas elementos finitos.
95
Sobre cada elemento finito la funcin de aproximacin es derivada, de tal manera que
alguna funcin continua puede ser representada por una combinacin lineal de
polinomios algebraicos.
Las relaciones algebraicas entre los coeficientes no determinados (valores nodales) son
obtenidas por ecuaciones de gobierno que satisfacen la solucin (Baran, 1988).
El mtodo de elementos finitos puede ser visto cmo una aplicacin del mtodo de
pesos residuales o de Rayleigh-Ritz, en la que la funcin de aproximacin se lleva a
ecuaciones de polinomios algebraicos y los valores de los parmetros no determinados
representan la solucin para un nmero finito de puntos seleccionados, llamados nodos
sobre la frontera y el interior de cada elemento. Este es el mtodo aplicado para la
solucin de problemas que involucran esfuerzos y deformaciones en los materiales
(Reddy, 1993).
Las funciones de aproximacin en la solucin por elementos finitos son derivadas,
usando conceptos de la teora de interpolacin, el grado de la funcin de interpolacin
depende del nmero de nodos en el elemento y del orden de la ecuacin diferencial
(Reddy, 1993; Barn, 1988).
El objetivo general en el anlisis por elementos finitos es aproximar con suficiente
grado de precisin, la solucin de unos valores de las incgnitas de la ecuacin que
representa el dominio de un sistema fsico continuo.
96
ms tpicamente utilizados, pueden ser de dos nodos, de tres nodos o ms, el cual se
resuelve a partir de ecuaciones lineales (Spyrakos, 1996).
Elementos simples unidimensionales. La Figura 2.52 presenta un elemento simple
Estos elementos estn definidos por una ecuacin general, tal cmo lo muestra la
ecuacin 2.31
= 1 + 2 Ecuacin 2.31
= i
= j
x = Xi
x = Xj
97
Las condiciones expuestas expresan las ecuaciones generales 2.32; 2.33 y 2.34
= 1 + 2 Ecuacin 2.32
i = 1 + 2 X i Ecuacin 2.33
= 1 + 2 X
Ecuacin 2.34
1 = i 2 X i Ecuacin 2.35
Donde:
Es un escalar
Sustituyendo en la ecuacin 2.34 y reorganizando apropiadamente se obtiene la
ecuacin 2.36.
2 =
( j i )
(X j X i )
( j i )
L
Ecuacin 2.36
( i X j j X i )
(X j X i )
( i X j j X i )
L
=
=
98
( i X j j X i )
L
( X j X ) i
L
( j i ) X
( X X i ) j
L
L
Ecuacin 2.37
(X j X)
L
(X X i )
N2 =
L
Se puede expresar en trminos de los nodos, una ecuacin general de acuerdo a la
expresin de la ecuacin 2.38.
= N i i + N j j Ecuacin 2.38
nodos en el lado medio. Estos elementos tienen lados rectos y tres nodos uno en cada
esquina, la Figura 2.54 presenta un elemento simple bidimensional con su
nomenclatura.
2000)
99
y = Yi
= i
x = X j y y = Yj y = j
x = Xk
y = Yk
= k
i = 1 + 2 X i + 3 Yi Ecuacin 2.39
j = 1 + 2 X j + 3 Y j Ecuacin 2.40
j = 1 + 2 X j + 3 Y k Ecuacin 2.41
Despejando y reemplazando apropiadamente, de manera similar a lo realizado para
elementos simples unidimensionales, se obtiene la ecuacin en trminos de los nodos
Ni Nj y Nk tal cmo lo presenta la ecuacin 2.42.
= N i i + N j j + N k k Ecuacin 2.42
Reacmodando en trminos matriciales se puede expresar la ecuacin 2.43.
= [N ]{} Ecuacin 2.43
Donde:
[N] = [N i N j N k ]
i
especifica un vector fila y = k representa un vector
j
columna.
Luego despejando
y 3
1 =
1
( X j Y k X k Y j ) i + ( X k Y i X i Y k ) j + ( X i Y j X j Y i ) k Ecuacin
2A
2.44
100
2 =
3 =
1
(Yj Yk ) i + (Yki Yi ) j + (Yi Yj ) k Ecuacin 2.45
2A
1
( X k X j ) i + ( X i X k ) j + ( X j X i ) k Ecuacin 2.46
2A
Xi
Yi
1 Xj
Y j = 2 A Determinante 2.1
1 Xk
Yk
1
[ai + bi x + ci y ] Ecuacin 2.47
2A
Nj =
1
a j + bj x + c j y
2A
Nk =
1
[a k + bk x + ck y ] Ecuacin 2.49
2A
Ecuacin 2.48
Los coeficientes para las ecuaciones nodales, pueden ser acmodados de acuerdo a los
arreglos algebraicos que se presentan en las ecuaciones 2.50 para ai bi y ci ; 2.51 para aj
bj y cj y 2.52 para ak bk y ck.
ai = ( X j Yk X k Y j )
bi = (Y j Yk )
a j = ( X k Yi X i Yk )
b j = (Yki Yi )
c i = (X k X k ) Ecuacin 2.50
c j = (X i X k ) Ecuacin 2.51
a k = ( X i Y j X j Yi )
bk = (Yi Y ji )
c k = (X j X i ) Ecuacin 2.52
101
Los elementos simples en tres dimensiones tienen los cuatro nodos rotulados con i, j, k
y l, con i, j, y k en el sentido contrario al de las manecillas del reloj, y el nodo l
ortogonal a este plano, el rotulado del tetraedro se muestra en la Figura 2.55.
La ecuacin general polinomial para el elemento simple tridimensional tetradrico se
muestra en la expresin 2.53, donde se aprecian las cuatro incognitas, 1, 2, 3 y 4.
= 1 + 2 x + 3 y + 4 z Ecuacin 2.53
Los coeficientes pueden ser determinados por la aplicacin de cuatro condiciones
nodales, las cuales producen el sistema de ecuaciones 2.54; 2.55; 2.56 y 2.57, donde se
tiene un sistema de cuatro ecuaciones
acmodo matricial.
i = 1 + 2 X i + 3 Yi + 4 Z i Ecuacin 2.54
j = 1 + 2 X j + 3 Y j + 4 Z j Ecuacin 2.55
k = 1 + 2 X k + 3 Yk + 4 Z k Ecuacin 2.56
l = 1 + 2 X l + 3 Yli + 4 Z l Ecuacin 2.57
El sistema puede ser resuelto usando la regla de Cramer (consistente en resolver un
sistema lineal de ecuaciones en trminos de determinantes), el reacmodo matricial de
las ecuaciones
1
1
[C] =
1
Xi
Xj
Xk
Xl
Yi
Yj
Yk
Yl
Zi
Z j
Determinante 2.2
Zk
Zl
= 1 + 2 x + 3 y + 4 z = [1 x
1
z ] * 2 Determinante 2.3
3
4
traccin,
compresin y esfuerzo a los que puede ser sometido un material, los conceptos
tratados en las ecuaciones 2.27; 2.28; 2.29 y 2.30, sobre deformacin, modulo de Young
o de elasticidad y coeficiente de Poisson son retomados en este tema (Cook, 1974;
Ramaswamy y Marcotte, 2005).
El fundamento bsico para el mtodo de elementos finitos, de acuerdo a la
minimizacin de energa potencial o ley de Rayleight-Ritz, se basa en la diferencia entre
la sumatoria de la energa interna de deformacin con respecto al trabajo externo
realizado sobre el material que involucra deformaciones internas (Moaveni, 1999).
Este mtodo es aplicado en la formulacin de modelos en mecnica de slidos, cuando
estos son sometidos a cargas y sufren deformaciones, cmo puede ser el caso de una
fruta. Durante la deformacin, algn trabajo realizado por las fuerzas externas es
103
Figura 2.56. Diferencial de volumen para el modelo del slido de Hooke para la
aplicacin del principio de energa potencial mnima (Fuente: Moaveni, 1999)
Llamando: =
Donde:
= Esfuerzo
F = Fuerza
A = rea
104
F
Ecuacin 2.60
A
Lo que implica:
A*E
F = A*E* F =
l
l
De la Figura 2.56 se puede entonces deducir la ecuacin 2.61.
F = Ky Ecuacin 2.61
K=
AE
Ecuacin 2.62
l
d = Fdy = Ky dy =
0
1
1
1
1
1
d = y dxdzdy = y dV = E 2 y dV Ecuacin 2.63
2 V
2
2
Donde:
E = Mdulo de elasticidad o de Young
= Deformacin
dV = Diferencial de volumen
Esta energa interna del material depende entonces del volumen del elemento
considerado y de las caractersticas propias del mismo, dentro de las que se destacan la
densidad del material, el modulo de Young y del coeficiente de Poisson que involucra
la deformacin, tal cmo lo muestra la ecuacin 2.63.
El trabajo externo (W) es otro concepto fundamental para la aplicacin y el clculo de
los elementos finitos, esta definido por el producto de la fuerza actuante (F) por la
distancia o desplazamiento ocasionado (u) cmo lo describe la ecuacin 2.64.
105
W = F u Ecuacin 2.64
ocasionado por las fuerzas externas (W) para m nodos, por consiguiente se pueden
escribir las ecuaciones 2.65 y 2.66.
n
e =1
e i =1 W Ecuacin 2.65
m
e i =1 F u Ecuacin 2.66
e =1
n
=
u i u i
n
e =1
e i =1 F u i
m
1
1
E 2 y dV = E 2 V
2 V
2
u i +1 u i
l
e =
u 2 i +1 2u i +1 u i + u 2 i
1
1
u ui
EAl i +1
= EAl
2
l
2
l2
106
1
= EA(u 2 i +1 2u i +1 u i + u 2 i )
2l
1
e
EA
(u i u i+1 )
= EA(2u i 2u i +1 ) =
u i 2l
l
Equivalentemente derivando para los desplazamientos (ui+1) se tiene:
e
1
EA
(u i+1 u i )
= EA(2u i +1 2u i ) =
u i +1 2l
l
Las expresiones anteriores muestran cmo influyen las caractersticas geomtricas, el
mdulo de elasticidad y los desplazamientos en los gradientes de energa interna de
deformacin de los materiales.
Para la minimizacin del componente del trabajo realizado por las fuerzas externas, en
los nodos (i e i+1), de un elemento del material, en funcin de los desplazamientos se
tiene:
W
(Fi u i ) = Fi
=
u i u i
Para el nodo (i + 1), se obtiene la siguiente expresin:
W
Determinante 2.4
=
u Ke Ke u i +1 Fi +1
107
Algunos
ndice
medidas
resultados experimentales, encontrando una prediccin de los daos por impacto y una
diferencia del 5% de la modelacin con respecto a los datos experimentales.
Las frutas se enmarcan dentro del tipo de productos nutraceticos y funcionales, es decir
son aquellos alimentos que adems de satisfacer las necesidades biolgicas, contribuyen
decididamente para la buena salud (Mazza, 2000; Scheneider, 2001; Insel et al. 2004;
Jonesa y Jew, 2007).
2.5.1 Vitamina C. La vitamina C o cido ascrbico es uno de los principales
110
Concentracin
78,0 a 82,0
1,6 a 3,2
0,6 a 1,2
11,5 a 17,9
0,2 a 0,3
0,4 a 0,9
4,2 a 6,6
0,6
3,4
28
0,9
22 a 25
0,07
0,07
Unidad
g
g
g
g
g
g
g
g
mg
mg
mg
mg
mg
mg
(Fuente: ICBF, 1996)
111
la muestra, se haya la
Iniciacin:
Propagacin:
Terminacin:
Un estudio cintico de la accin de los antioxidantes (AH) plantea que stos inhiben la
reaccin en cadena actuando cmo donadores de tomos de hidrogeno o aceptores de
radicales libres, reaccionando con los radicales ROO y no con los radicales R. La
ecuacin 2.72 presenta esta reaccin (Rojano, 1997).
ROO + AH ROOH + A Ecuacin 2.72
112
Los radicales que se originan de los antioxidantes (A) son poco reactivos y estos se
estabilizan por mecanismos especficos, en funcin del tipo de antioxidante del que
provengan; por consiguiente, inhiben o retardan las reacciones de oxidacin para la
formacin de radicales libres en la etapa de iniciacin o interrumpiendo la propagacin
(Suaterna, 2001; Huang et al. 2005).
La actividad antioxidante es usada cmo parmetro para caracterizar diferentes
materiales vegetales. Esta se relaciona con compuestos capaces de proteger un sistema
biolgico del efecto potencialmente daino de procesos que causan excesiva oxidacin
involucrando especies reactivas del oxigeno (Wang et al. 1996; Wang y Hsin, 2000;
Strail et al. 2007).
Los mtodos ms aplicados para medir la capacidad antioxidante en frutas son el ABTS
y el DPPH. Ambos presentan una excelente estabilidad en ciertas condiciones, aunque
tambin muestran diferencias. El DPPH puede obtenerse directamente sin una
preparacin previa, mientras que el radical catin ABTS+ debe ser generado tras una
reaccin que puede ser qumica, enzimtica o electroqumica. Con el radical catin
ABTS+ se puede medir la actividad de compuestos de naturaleza hidroflica y lipoflica
(Re et al. 1999; Kuskoski et al. 2005), mientras que el DPPH solo puede disolverse en
medio orgnico. El radical catin ABTS+ tiene adems la ventaja de que su espectro
presenta mximos de absorbancia a 414, 654, 754, y 815 nm en medio alcohlico,
mientras que el DPPH presenta un pico de absorbancia a 515 nm, cada mtodo relaciona
la generacin de un radical diferente actuando a travs de una variedad de mecanismos
(Kuskoski et al. 2005).
La generacin del radical catin ABTS+ (2,2- azino-bis - 3 - etilbenzotiazolin 6 sulfonato de amonio) forma la base de uno de los mtodos espectrofotomtricos que han
sido aplicados para medir la actividad antioxidante total de soluciones de sustancias
puras, bebidas, mezclas, extractos de alimentos.
113
Inhibicin (%) = 1 (
Amuestra Ablanco
) *100 Ecuacin 2.73
AR
Donde:
Amuestra = Es la absorbancia de la muestra (que contiene el radical presente)
Ablanco= Es la absorbancia del blanco (etanol + buffer)
AR = Absorbancia de referencia (que contiene el radical y el solvente de la muestra)
114
IC50 de trolox
Ecuacin 2.74
IC50 del fruto
Donde:
IC50 de trolox = Es la concentracin (moles de trolox/L de solvente) a la cual el
antioxidante trolox inhibe el 50% de los radicales presentes.
IC50 de la fruta = Es la concentracin (mg de fruta/L de solvente) a la cual los
antioxidantes presentes en la fruta inhiben el 50% de los radicales presentes.
La Figura 2.57 presenta los resultados de una investigacin donde se evaluaron varios
vegetales de consumo masivo con respecto a su capacidad antioxidante para las
fracciones liposolubles e hidrosolubles (Pineda et al. 1999).
Figura 2.57. Capacidad antioxidante total para algunos vegetales de consumo masivo
(Fuente: Pineda et al. 1999)
La capacidad antioxidante para frutas de cactus en poscosecha (Opuntia ficus Mill, cv.
Gialla) ha sido evaluada para los das 0, 3, 6 y 9, encontrando valores de 2,28; 2,18;
2,24 y 2,30 respectivamente, expresado en (TEACg-1 de materia seca), los resultados
no presentaron diferencia significativa para un nivel de confianza del 95% (Piga et al.
2003). Para frutas de mora en grado de madurez de consumo, se pudo establecer una
capacidad antioxidante total del 51,9% comparada con un agente antioxidante patrn de
capacidad antioxidante del 100% (Mrquez, 2004).
Otros investigadores han estudiado la evolucin de la actividad antioxidante durante la
etapa de maduracin o en poscosecha en diferentes productos. Para frutas de araz
(Eugenia stipitata Mc Vaugh) en poscosecha, almacenadas a 25C durante 6 das, se ha
evaluado la capacidad antioxidante, la cual mostr un incremento hasta la madurez de
115
(Vargas et al. 2005). En tres cultivares de naranjas dulces (Citrus sinensis (L.) Osbeck)
aplicando el mtodo de reduccin de hierro cmo cuantificacin del poder antioxidante
(FRAP), se pudo encontrar que la actividad antioxidante decrece con la maduracin de
la fruta (Huang et al. 2007). Frutas de mango que fueron almacenados en atmsferas
modificadas durante 20 das a 10C, se pudo encontrar que con los das poscosecha la
capacidad antioxidante expresada en
Fresa
TEAC
(mol Trolox100 g-1 de peso
fresco)
259168
FRAP
(mol Fe 100 g-1 de peso
fresco)
335238
Mora
184610
232553
Ciruela
182528
205725
roja
86153
8296
Uva
84925
11816
Naranja
34313
3948
Manzana
28219
31524
Pera
25514
3447
Tomate
18139
16432
2+
Banano
(Fuente: Proteggente et al. 2002)
2.5.3 Compuestos fenlicos totales. Young y King (1999), hacen una caracterizacin
116
117
nm. Los resultados se expresan en mg de cido glico por 100 g de pulpa de fruta
(Kuskoski et al. 2005; Strail et al. 2007).
La concentracin de compuestos fenlicos totales, ha sido estudiada para productos
vegetales (Ju y Bramlage, 1999; Asami et al. 2003; Kulkarni y Aradhya, 2005; Cocci
et al. 2006; Mousavinejad et al. 2009).
diferencia entre los semi maduros y los maduros (Dragovic-Uzelac et al. 2007). En
frutas de durian se pudo establecer que la concentracin de compuestos fenlicos total
crece con la maduracin (Arancibia-Avila et al. 2008). Recientemente en dos cultivares
de poma (Punica granatum L.) se ha evaluado la evolucin de polifenoles totales
durante la etapa de poscosecha, obteniendo cmo resultado que en ambos cultivares la
concentracin total de polifenoles disminuye con la maduracin, no obstante al evaluar
independientemente las antocianinas se pudo comprobar que este compuesto creci
(Shwartz et al. 2009).
2.6 CARACTERIZACIN ESTRUCTURAL DE LAS FRUTAS
2.6.1 Microscopa cmo tcnica de valoracin.
La microscopa proporciona
propias
mediante
de 39 m con
Acevedo et al. (2008) estudiaron los cambios fisicos por SEM en la microestuctura de
rodajas de manzanas sometidas durante su etapa de poscosecha a procesos de secado,
congelamiento y afectacin textural, encontrando que todos estos procesos cambian la
integridad celular y producen una afectacin de la microestructura de las manzanas.
La Figura 2.61 presenta los cambios microestructurales debidos al proceso de secado
al que fueron sometidas las frutas de manzana.
120
Figura 2.61. Microfotografia de una rodaja de manzana liofilizada (A) y una rodaja de
manzana deshidratada a 70C durante 36 horas (B) (Fuente: Adaptado de Acevedo et
al. 2008)
componentes de las frutas o para detectar defectos internos en frutas enteras y otros
vegetales (Scatter, 1997; Lammertyn et al. 2003; Kotwaliwale et al. 2006; Kotwaliwale
et al. 2007; Rojas-Argudo, 2007).
Con los rayos X se pueden descubrir granulaciones, daos por fro, presencia de
hongos, daos biolgicos, defectos internos y posibilitan evaluar en determinaciones
sucesivas los cambios que ocurren durante la maduracin ligados a la composicin de la
fruta y a sus caractersticas internas (Wilson, 1991; Stuppy et al. 2003; Hwua et al.
2005; Palou et al. 2007). La rotacin apropiada de la fuente de rayos X y el detector
permite generar respuestas tridimensionales conocidas cmo tomografas, de gran
122
Ecuacin 2.76
Donde:
A = Es el nmero masa del slido
P = Es la densidad en gcm-3
Se debe considerar que los rayos X son afectados por la distancia entre la fuente o tubo
de rayos X y el objeto de anlisis, de tal forma que la intensidad de los rayos X, es
inversamente proporcional al cuadrado de la distancia entre la fuente y el material, cmo
lo muestra la ecuacin 2.77.
I 1 ( D2 )
=
Ecuacin 2.77
2
I2
D1
2
( )
Donde:
I = Es la intensidad de la radiacin en (Gy) por unidad de rea
D =Es la distancia en (m) entre la fuente y el especimen
I1 = Es la intensidad de la radiacin a la distancia D1
I2 = Es la intensidad de la radiacin a la distancia D2
I ( X ) = I 0 e ( x ) Ecuacin 2.78
Donde:
I(X) = Es la intensidad de la radiacin, en funcin del espesor del material (X)
I0 = Es la intensidad incidente
= Es el coeficiente de atenuacin.
Para expresar el factor de atenuacin de los rayos X al entrar en contacto con los
materiales, se ha planteado el factor medio de reduccin de la intensidad de la radiacin
incidente, de acuerdo a la ecuacin 2.79.
= X Ecuacin 2.79
ln I ( X )
I
0
Al considerar el punto medio del espesor del material se puede plantear las expresiones
siguientes:
I (X )
I0
= 1 ; obteniendo, = ln 2
con, X1/2 el espesor medio del material
X 1/ 2
2
m = = ln 2 X Ecuacin 2.80
1/ 2
Cuanto mayor es la densidad del material, menor es el espesor necesario para producir
una atenuacin de la radiacin, hay mayor absorcin de la radiacin y se presenta mayor
radio opacidad en la radiografa. Por consiguiente, en el caso de las frutas el cambio que
se presenta en la densidad cmo consecuencia de la maduracin, se manifiesta con
diferencias en el coeficiente de atenuacin y esto se puede utilizar para la evaluacin de
los cambios durante la maduracin, debido a que durante esta etapa disminuyen los
espacios porosos del vegetal y en consecuencia, la absorcin de radiacin se incrementa
pudindose contrastar estos cambios en una placa radiogrfica (Attix, 1986; Bull et al.
1997; Eisberg, 1999; White y Pharoah, 2001; Galle et al. 2003; Rickards y Cameras,
2005).
La deteccin de daos internos en los materiales biolgicos, cmo las frutas, depende
de la energa aplicada, lo que est directamente asociado con el tipo de producto, su
124
Figura 2.62. Radiografia de una fruta de pera (Pyrus communis L. cv. Conference) sana
(A) y una afectada internamente (B) (Fuente: Lammertyn et al. 2003)
La evaluacin sensorial de los alimentos incluidas las frutas, se ha definido cmo una
disciplina cientfica usada para medir, analizar e interpretar las reacciones percibidas
por los sentidos de las personas hacia ciertas caractersticas de un alimento cmo son;
sabor, olor, color y textura, por lo que el resultado de este complejo de sensaciones
125
captadas e interpretadas son usadas para medir la calidad de los alimentos (Ferratto y
Mondito, 2006).
Dentro de los mtodos utilizados para evaluar calidad se encuentran los siguientes:
Escalas objetivas; basadas en instrumentos de medicin
Mtodos subjetivos; basados en el juicio humano
Toda vez que la seguridad e higiene de un alimento est garantizada, lo satisfactorio de
sus propiedades organolpticas pasa a ser el criterio ms importante, y determina la
eleccin y fidelidad del consumidor hacia un producto o marca (Ferrratto y Mondito,
2006).
Entre los mtodos objetivos o instrumentales el color es la nica propiedad sensorial
que puede ser medida, de forma instrumental, ms efectivamente que de manera
subjetiva visual; existen otros equipos cmo los texturmetros universales, y tambin
otra gran variedad de pruebas encaminadas a determinar parmetros reolgicos cmo la
dureza, fibrosidad, harinosidad, adhesividad y jugosidad. Hay otras evaluaciones
instrumentales, de amplio uso, denominadas tcnicas semi-objetivas, se incluyen dentro
de este grupo a las cromatografas y las valoraciones fsico-qumicas y bioqumicas,
indicadoras de la composicin cualitativa del producto (vitaminas, elementos minerales,
protenas, cidos, azcares, colorantes, edulcorantes, etc.) que estn ntimamente ligadas
a las propiedades sensoriales y aceptabilidad del alimento (Engelen et al. 2007).
Todas estas tcnicas pueden en el mejor de los casos llegar a tener una buena
correlacin en sus medidas con el juicio humano o sensorial, pero parece muy difcil por
el momento, que puedan sustituir al ser humano. En ltima instancia son las personas
las que deben valorar la calidad de un alimento, expresar la compleja apreciacin
sensorial y valorar su grado de satisfaccin al ser degustado (Engelen et al. 2007).
Dentro de las principales caractersticas sensoriales de los alimentos se destacan, el olor,
captado por el sentido del olfato, ocasionado por las sustancias voltiles liberadas del
producto; el color, percibido por el sentido de la vista, correspondiente a la luz reflejada
por la superficie del alimento; el gusto, percibido por las papilas gustativas residentes
en la lengua, las cuales se encargan de detectar segn su ubicacin, sabores amargos,
dulces, salados y cidos (Anzalda, 1994).
126
Plocharski, 2004).
La ejecucin de las pruebas sensoriales tiene las siguientes recomendaciones generales:
Controlar las condiciones del ambiente de prueba, la preparacin, la presentacin de
las muestras y los aspectos informativos.
El laboratorio de evaluacin sensorial debe tener reas bsicas de preparacin,
degustacin, y discusin, tambin condiciones generales de iluminacin, ventilacin y
aislamiento del ruido.
La preparacin de las muestras debe cumplir con limpieza y exactitud; si la muestra
es slida, la cantidad apropiada es de 30 g.
Para la presentacin de las muestras se debe utilizar codificacin apropiada, de tal
forma que no permita su identificacin y utensilios que no impartan olores o sabores.
El lavado bucal con agua fresca es necesario y esperar 3 a 5 minutos entre una
muestra y otra, por lo general no deben darse a probar ms de cinco muestras al mismo
127
tiempo, ya que esto puede ocasionar fatiga lo cual puede repercutir en las respuestas de
los jueces.
Controlar la temperatura de las muestras, ya que generalmente deben servirse a la
temperatura a la cual suele ser consumido el alimento, las frutas se presentan a los
jueces a temperatura ambiente.
Se debe controlar el horario para las pruebas, las evaluaciones sensoriales no deben
hacerse a horas muy lejanas o cercanas a las comidas ya que el juez puede dar una
calificacin no confiable.
Evitar el uso de vehculos, o sea sustancias o alimentos en los que se incorpora, unta o
mezcla el producto a evaluar, ya que las caractersticas sensoriales del vehculo podran
interferir con las de la muestra (Watts et al. 1992; Restrepo, 1995).
Para la evaluacin sensorial de los atributos en las frutas, se recomienda una escala no
estructurada, en la cual se cuenta con puntos extremos o apoyos, mnimo y mximo; y
el juez debe expresar su apreciacin de la intensidad del atributo (sabor, color, aroma y
textura), marcando sobre la lnea comprendida entre ambos extremos una pequea raya
vertical en el punto donde considera que corresponde la calificacin que otorga al
producto, cerca del mnimo, del centro, o del mximo, segn sea la intensidad del
atributo sensorial, la longitud de la escala debe estar en el intervalo de 12 a 15 cm
(Anzalda, 1994; Cayot, 2007).
La Figura 2.63 muestra la escala lineal no estructurada con apoyo en los extremos,
recomendada para evaluar la intensidad de una caracterstica de una fruta.
Figura 2.63. Escala lineal no estructurada con apoyos para la medida sensorial de la
intensidad de un atributo (Fuente: Watts et al. 1992)
128
OBJETIVOS
CAPTULO 3
129
130
3. OBJETIVOS
3.1 OBJETIVO GENERAL
MATERIALES Y MTODOS
CAPTULO 4
132
Este captulo presenta la descripcin del material vegetal utilizado, las caractersticas
climticas de la zona de cultivo. Los procedimientos detallados de manera secuencial de
cada uno de los experimentos realizados para el logro de los objetivos propuestos, se
referencian los equipos y programas de cmputo, al igual que los procedimientos
estadsticos y rutinas utilizadas.
4. MATERIALES Y MTODOS
4.1 LOCALIZACIN
133
El material vegetal para las evaluaciones de aroma y vitamina C, fue puesto a madurar
en las condiciones de experimentacin del Laboratorio de Frutas y Hortalizas de la Sede
Medelln, consistentes en 23C y 65% de HR, en promedio y luego las
frutas
134
calidad de la fruta, cmo las fsico-qumicas, tambin fueron realizadas en una poca de
baja produccin correspondiente al mes de Noviembre, teniendo para estos anlisis
resultados para tres periodos de tiempo diferentes.
Experimentales (U.E.), a las cuales se les hizo el seguimiento diario de: tasa de
respiracin, produccin de etileno y prdida fisiolgica de peso, para dos pocas de
cosecha.
pocas de cosecha diferentes, teniendo un total de 180 U.E. para las evaluaciones
estndar de calidad, slidos solubles totales (SST), acidez total, pH, color externo e
interno y para la caracterstica reolgica de firmeza. La determinacin micro estructural
de la epidermis y endocarpio solo se realiz para dos pocas de cosecha.
3ra Etapa: 3 U.E. fueron utilizadas para la evaluacin interna, utilizando la tcnica no
4ta Etapa: Los compuestos voltiles y la vitamina C, fueron determinados para una
4.4 MTODOS
4.4.1 Mtodos para la caracterizacin fisiolgica
4.4.1.1 Medida de la tasa de respiracin. La tasa de respiracin fue determinada por
hora de experimentacin a 23C, de acuerdo a las ecuaciones 4.1 y 4.2, los resultados
se expresaron en mg de CO2kg-1h-1 (Adaptado de Herridge y
et al. 2003).
CO2 + H2O H2CO3 Ecuacin 4.1
H2CO3 + 2 NaOH Na2CO3 + 2H2O Ecuacin 4.2
4.4.1.2 Valoracin de etileno.
fueron
relacionadas con una curva de calibracin construida con un gas estndar de 20 ppm de
concentracin marca Oxgenos de Colombia S.A.. La produccin de etileno para las
frutas de guanbana fue expresada en L de etilenokg-1h-1 (Martinez-Madrid et al.
1999; Cruz-Medina et al. 2007).
4.4.1.3 Evaluacin de la prdida fisiolgica de peso. La prdida fisiolgica de peso,
se realiz para 6 U.E. para dos pocas de cosecha, de acuerdo a la etapa 1 del diseo del
experimento, por gravimetra se evalu el peso diariamente y se compar con el peso
inicial o para el da 0, se utiliz una balanza analtica marca Ohaus, Modelo Nadigator
1121 (Schtzer et al. 2007).
4.4.1.4 Determinacin de los compuestos voltiles por Microextraccin en Fase
Slida del Espacio de Cabeza y Cromatografa Gaseosa acoplada a Espectrometra
de Masas (CG-EM). Los compuestos voltiles fueron analizados para los estados de
137
obteniendo 30 g totales de pulpa sin semillas, se homogenizaron durante 5 min, para ser
depositados en un frasco mbar de 110 mL de capacidad, el cual fue sellado y dejado
en reposo durante 20 min cmo tiempo de equilibrio a temperatura de laboratorio, la
cual fu de 20C. Luego para la microextraccin en fase slida, se introdujo en el
espacio de cabeza la fibra del tipo DVB/CAR/PDMS de 30 m de espesor, la cual se
dej inmersa en el recipiente durante 30 min como tiempo de extraccin de los voltiles.
A continuacin se retir y se coloc de inmediato en el puerto de inyeccin de un GCME-QP5050 Shimadzu, con un tiempo de desorcin de 5 min. Las condiciones de
operacin del cromatgrafo fueron de 250C para el puerto de inyeccin y la
interfase,
temperatura
inicial
-1
calentamiento de 4Cmin
del
horno de
50C,
con
una velocidad de
Figura 4.1. Microextraccin en fase slida del espacio de cabeza para las frutas de
guanbana (Annona muricata L. cv. Elita)
138
IK= 100 [CPm + [CPM - CPm][TRc TRPm / TRPM - TRPm] Ecuacin 4.1
Donde:
CPm = Nmero de carbonos de la parafina menor
CPM = Nmero de carbonos de la parafina mayor
TRc = Tiempo de retencin del compuesto
TRPm = Tiempo de retencin de la parafina del menor nmero de carbonos
TRPM = Tiempo de retencin de la parafina del mayor nmero de carbonos
Utilizando la serie de parafinas homologadas (C7 C26) (Duque y Morales, 2005).
Los
139
voltiles de guanbana
Nombre
del sensor
W1C
Descripcin general
W5S
W3C
W6S
W5C
W1S
W1W
W2S
W2W
10
W3S
Compuestos aromticos
Gas de
referencia
Tolueno
10
mgkg-1
NO2 1mgkg-1
Benceno
mgkg-1
H2 100 gkg-1
Propano 1mgkg-1
CH4 100 mgkg-1
Los sensores expresan la respuesta cmo una resistividad en (Ohm) cmo consecuencia
de los cambios en la conductividad ocurridos por la induccin de la absorcin de las
molculas de las sustancias voltiles de la fase gaseosa, el lmite de deteccin de los
sensores es de 1 ppm, los sensores son calentados a 400C mediante una resistencia,
por lo cual las sustancias son llevadas a combustin y transformadas en CO2 y agua, de
esta manera son evacuadas.
De cada fruta, en los diferentes estados de madurez (inmaduro, madurez intermedia,
maduro y sobremaduro) se extrajeron 4 g de pulpa, se homogenizaron y depositaron en
un vial de volumen de 40 mL, el tiempo de acondicionamiento del espacio de cabeza
fue de 20 min, el flujo de gas fue 200 mLmin, la corrida para cada deteccin fue de 100
s, el tiempo de flujo de aire para limpieza de los sensores fue de 10 min. Se instal un
140
10
-1
septum en la parte superior del vial, donde se insertaron dos agujas de tamao (20 G),
una con el sistema de filtro con carbn activado para la limpieza del aire y otra por
donde se conduce el gas con los voltiles, con una conexin a un tubo de tefln de 3
mm de dimetro interno, que va desde el espacio de cabeza hasta la caja de sensores de
la nariz electrnica, el gas con los voltiles producidos por la fruta es succionado por
una bomba que lo extrae del espacio de cabeza y lo impulsa hasta la matriz de sensores
(bomba 1), para la dilucin de los gases una segunda bomba (bomba 2) introduce aire
limpio a la matriz de sensores, este aire limpio tambin se utiliza para purgar el
sistema y llevar el equipo hasta la lnea base, para una nueva determinacin.
Las seales de todos los sensores para cada medicin (correspondientes a 6 para cada
estado de madurez, por 4 estados de madurez, por 10 sensores, para un total de 240
datos), se almacenaron
141
Figura 4.3. Respuesta de los 10 sensores en un anlisis de gases (donde los colores de
los sensores corresponden a W1C, W5S, W3C, W6S, W5C, W1S, W1W, W2S,
W2W, W3S y el color morado pertenece al aire de dilucin)
La respuesta de los sensores en el plano cartesiano para un eje de referencia vertical
Figura 4.4. Conductividad relativa (G/G0) cmo respuesta de los sensores para un
tiempo de referencia
Para el estudio de los resultados obtenidos con la nariz electrnica para los diferentes
estados de madurez, por medio del ACP, utilizado para reducir la dimensionalidad del
conjunto de datos y poder explicar la variabilidad, es aplicado para el anlisis
exploratorio de los datos y para construir modelos predictivos, esta basado en la
mxima varianza y en la mnima correlacin. A partir de la aplicacin del ACP se
realiz una transformacin lineal para construir un nuevo sistema de coordenadas para
el conjunto original de datos, en el cual se represent en el eje X, la varianza de mayor
142
ha sido el hecho ms
crecimiento fue determinado por la medida del dimetro ecuatorial y la longitud polar,
las medidas fueron realizadas cada dos semanas durante 16 semanas, para 12 frutas
seleccionadas al azar, el tiempo cero fue el correspondiente a la formacin del erizo
(Higuchi et al. 1998).
4.4.2.2 Medida del color. Para la medida del color se utiliz un espectrofotmetro de
esfera X-Rite, modelo SP-60, con una abertura de 4 mm, iluminante D-65 y observador
de 10 cmo referencia,
143
representa la cromaticidad verde (-) a rojo (+) y b* representa la cromaticidad azul (-) a
amarillo (+). A cada U.E. se le realizaron tres medidas ecuatoriales en la epidermis o
piel y se expresaron cmo promedio aritmtico, igualmente para el endocarpio o pulpa
una vez fue procesada la fruta (Almela et al. 2000).
4.4.2.3 Determinacin del rendimiento de la guanbana.
Se aplic el mtodo
Homogenizar 3 min
Filtrar en papel filtro Whatman No. 1
Centrifugar a 12.000 rpm 20 min a 0 C
Extractar 400 L del sobrenadante y adicionar 200 L de buffer de fosfatos de pH
7,0 ms 560 L de solucin de Catecol
Para el blanco reemplazar los 560 L
de Catecol por agua destilada
Homogenizar 30 s
Llevar a bao termostatizado a 30 C, 3 min
Leer absorbancia a 420 nm, durante 5 min, cada 20 s
145
tres min a 4C, luego la mezcla fue centrifugada a 13.000 rpm durante 10 min a 4C. El
sobrenadante (extracto enzimtico) fue colectado y ajustado a pH 7,5 con NaOH 0,1 N.
Una alcuota de 100 L fue tomada del extracto enzimtico y se le adicionaron 200 L
de solucin de NaCl 0,15 M, 200 L de agua destilada, 100 L de solucin de azul de
bromotimol del 0,01 % y 1000 L de solucin de pectina 0,01 % ajustada a pH 7,5 con
NaOH 0,1 N. Se homogeniz durante 30 s en un equipo marca Mixtral LR-19314 y se
ley la absorbancia a una longitud de onda de 620 nm, para el tiempo 0 y tiempo de 3
min, en un espectrofotmetro marca Genesys 10 UV-VIS. La diferencia entre la
absorbancia a tiempo 0 y a los 3 min represent el diferencial de absorbancia que
expresa la actividad enzimtica en mol de cido galacturnico por min. La Figura 4.6
presenta el flujograma del proceso para la extraccin y cuantificacin de la enzima
pectinmetilesterasa
Homogenizar 3 min
Centrifugar a 13.000 rpm 10 min a 4C
Extractar el sobrenadante y ajustar a pH 7,5 con NaOH 0,1 N
Homogenizar 30 s
Leer absorbancia a 620 nm a tiempo 0 y tiempo de 3 min
146
Figura 4.7. Prueba de firmeza por compresin unidireccional para guanbana (Annona
murica L. cv. Elita)
147
la
p
Ecuacin 4.2
V
Donde:
D = Densidad (gcm-3)
P = Peso (g)
V = Volumen (cm3 )
Coeficiente de Poisson. El coeficiente de Poisson fue determinado para 6 U.E.
diariamente, durante el periodo de poscosecha, utilizando un analizador de textura TAXT2i Stable Micro Systems y el Sofware Texture Expert Excced, Versin 2,64, con
148
el clculo del
coeficiente de Poisson fue realizado a partir de la ecuacin 4.1 (Sharma et al. 2003;
Ciro et al. 2005).
D
D
L
L
Ecuacin 4.3
Donde:
Figura 4.9. Determinacin del coeficiente de Poisson para las frutas de guanbana
(Annona murica L. cv. Elita)
Mdulo de Young o Coeficiente de Elasticidad (E). Fue calculado de acuerdo a la
149
0,531F (1 2 ) 4 2
E=
3
d Ecuacin 4.4
D2
Donde:
E = Mdulo de Young o Coeficiente de Elasticidad (Nm2)
F = Fuerza (N)
= Coeficiente de Poisson (adimensional)
D = Deformacin del material, extractada de la curva promedio experimental de
esfuerzo vs deformacin para cada da de evaluacin de la firmeza, en la zona elstica
del material (m)
d = Dimetro promedio de la esfera inscrita en el punto de contacto de aplicacin de la
fuerza, entre el material y la sonda (m)
Para el ngulo de contacto de 90 entre el material y el eje de aplicacin de la fuerza, se
tiene una constante equivalente a 0,531.
El lmite elstico puede ser considerado cmo el esfuerzo que el material es capaz de
resistir antes de ocurrir la deformacin correspondiente al punto de inflexin, por lo
tanto para
No. 1 a
continuacin el filtrado se hizo pasar por una membrana de 0,45 m de tefln marca Xpertec, luego se tomaron 20 L para ser inyectados directamente al HPLC-JASCO
975, equipado con una bomba PU-980, columna METACHEM-Metacarb 87H,
detector JASCO UV-Vis 9757, las condiciones de operacin fueron de 254 nm de
150
(Jimenez, 2009).
La Figura 4.10 muestra el flujograma del proceso de extraccin y cuantificacin de
vitamina C.
Tomar 30 g de la parte ecuatorial de
cada U.E. macerar 5 min
Inyectar 20 L al HPLC
solucin del 2 % p/v de pulpa de guanbana de la zona ecuatorial, fue preparada, para
ello la pulpa se licu con etanol (Merck), durante 3 min en un equipo Osterizer
Modelo-4665, posteriormente se filtr en papel Whatman No. 1 y se centrifug a 2000
g durante 10 min a 23C en un equipo INDULAB. El sobrenadante fue recuperado y
151
se utiliz directamente para las pruebas de capacidad antioxidante total por los mtodos
ABTS, FRAP y fenoles totales, de acuerdo a los procedimientos que se describen a
continuacin.
La Figura 4.11 presenta el flujograma general del proceso de preparacin de la muestra.
Licuar 3 min
Obtener el sobrenadante
Figura 4.11. Flujograma para la preparacin de las muestras para evaluar la capacidad
antioxidante total
Evaluacin de la actividad antioxidante total por capacidad atrapadora del
radical catinico ABTS+. El compuesto ABTS (2,2- azino-bis(3 etilbenzotiazolin)-
152
Agitar 30 s
153
Inhibicin (%) = 1 (
Amuestra Ablanco
) *100
AR
Ecuacin 4.5
Donde:
Amuestra = Es la absorbancia de la muestra (con el radical presente)
Ablanco = Es la absorbancia del blanco (etanol)
AR = Absorbancia de referencia (que contiene el radical y el solvente de la muestra)
Se grafic la concentracin de las
inhibicin y se hizo una regresin simple para hallar la concentracin capas de inhibir la
mitad de los radicales libres, denominada IC50 correspondiente a la inhibicin del 50
% de los radicales presentes, se calcul el IC50 en mg de fruta fresca/litro de solvente,
para cada U.E. y da de poscosecha.
Los resultados de la capacidad antioxidante se expresaron en equivalentes trolox, para
lo cual se realiz una curva patrn preparando varias concentraciones entre 0 M y 18
M, las cuales se hicieron reaccionar con el radical ABTS+ y se ley absorbancia
despus de 30 min a una longitud de onda de 734 nm, se calculo el % de inhibicin de
cada una de las soluciones de trolox
TEAC =
IC50 de trolox
IC50 del fruto
Ecuacin 4.6
Donde:
IC50 de trolox: Es la concentracin (moles de trolox/L de solvente) a la cual el
antioxidante trolox inhibe el 50 % de los radicales libres presentes.
154
(solucin de pulpa de fruta) para reducir (por transferencia electrnica) el radical Fe+3 a
Fe+2, presente en un complejo formado por el TPTZ (2,4,6-tripyridyl-s-triazina) de
concentracin 1 mM (Sigma) y FeCl3 de concentracin 2Mm (Merck), contenidos en un
buffer de cido actico-acetato de sodio 0,3 M a un pH de 3,4. Se tomaron 50 L de
muestra y 500 L del reactivo, se mezclaron y agitaron por 30 s en un agitador Mixtral
LR-19314. Luego de 8 min se ley la absorbancia a una longitud de onda de 593 nm,
(longitud de onda a la cual el complejo reducido presenta su mxima absorbancia), en
un espectrofotmetro JENWAY modelo 6405 UV-Vis. Los resultados se expresaron
cmo AEAC (Capacidad Antioxidante en Equivalentes de cido Ascrbico: mol cido
ascrbico/100 g de fruta fresca). Para la interpretacin y cuantificacin de la actividad
antioxidante de las soluciones de pulpa de fruta, se construy una curva de calibracin
con cido ascrbico (C6H8O6) cmo compuesto de referencia entre 0 y 500 mol de
C6H8O6, los resultados fueron expresados cmo valor FRAP en (mol de C6H8O6/100 g
de fruta fresca) (Aubad et al. 2007).
La Figura 4.13 presenta
Agitar 30 s
155
Tomar 50 L de muestra
Los anlisis de la micro estructura celular, fueron realizados por medio de microscopa
156
El equipo de rayos X utilizado fue un AJEX 135 H/A Meditech Ltd, en condiciones
de operacin de 56 kVp (kilovoltios de potencia) y 0,7 mAs (miliamperios por
segundo). El intervalo de energa utilizado para el estudio, vari entre 30 y 70 keV,
seleccionando 56 kVp cmo la energa de mejor resolucin, de acuerdo a la
visualizacin de las radiografas, realizada en todos los casos por el mismo especialista.
157
Las frutas utilizadas para la afectacin interna, fueron colocadas con el dao principal
perpendicular a la radiacin.
158
159
RESULTADOS Y DISCUSIN
CAPTULO 5
160
5.1
CARACTERIZACIN FISIOLGICA
161
CO2
C2H4
se
presenta
un
primer
pico
162
constante
hasta el
163
prdida fisiolgica de peso expresada en % con respecto al peso inicial, para las frutas
de guanbana almacenadas a 23C y 65% de HR.
165
Figura 5.3. Cromatogramas de los compuestos voltiles usando la tcnica de MEFSEC/CG-EM en frutas de guanbana (Annona murica L. cv. Elita) para cuatro estados de
madurez, fruta inmadura (A), fruta en madurez intermedia (B), fruta madura (C), y fruta
sobremadura (D). Los nmeros de los picos corresponden a la identificacin de los
compuestos presentada en las Tablas 5.1; 5.2; 5.3 y 5.4, respectivamente
Las Tablas 5.1; 5.2; 5.3 y 5.4 muestran los resultados de los compuestos voltiles
encontrados en frutas frescas de guanbana inmaduras, en madurez intermedia, maduras
y sobremaduras, el ndice de Kovats (IK) fue calculado a partir de la aplicacin de la
166
Tabla 5.1. Compuestos voltiles en frutas de guanbana (Annona muricata L. cv. Elita)
inmaduras detectados por MEFS-EC/CG-EM
Pico Compuesto
IK Abundancia relativaa
1
Acetato de etilo
<803
+++
2
Butanoato de metilo
<803
+
3
2-Metil-4-pentenal
803
++++
4
(E)-2-Hexenal
844
+
5
3-Hexenol
854
+++
6
2,4-Hexadienal
913
+
7
Hexanoato de metilo
926
++
8
3-Hexenoato de metilo 934
++
9
2-Hexenoato de metilo 967
+
10 Acetato de hexenilo
1009
+
a
Abundancia relativa = + <5%; ++ 5-10%; +++ 10-30%; ++++ 30-60%
Tabla 5.2. Compuestos voltiles en frutas de guanbana (Annona muricata L. cv. Elita)
en madurez intermedia detectados por MEFS-EC/CG-EM
Pico Compuesto
IK Abundancia relativaa
1
Acetato de etilo
<739
+
2
Butanoato de metilo
<739
+++
3
2-Butanoato de metilo 739
+++
4
2-Metil-4-pentenal
855
+
5
Hexenoato de metilo
927
++++
6
2-Hexenoato de metilo 967
+++
7
Acetato de 3-hexenol
1010
+
8
1,4-Cicloheptadieno
1048
+
9
-Terpinolene
1103
+
10 Octanoato de metilo
1128
+
a
Abundancia relativa = + <5%; ++ 5-10%; +++ 10-30%; ++++ 30-60%
167
Tabla 5.3. Compuestos voltiles en frutas de guanbana (Annona muricata L. cv. Elita)
maduras
Tabla 5.4. Compuestos voltiles en frutas de guanbana (Annona muricata L. cv. Elita)
sobremaduras detectados por MEFS-EC/CG-EM
Pico Compuesto
IK
Abundancia relativaa
1
Butanoato de metilo
<724
++
2
2-Butanoato de metilo
724
+
3
2-Butoxietanol
908
+
4
Butirolactona
915
+
5
Hexanoato de metilo
926
++++
6
2-Hexanoato de metilo
967
+++
7
Hexanoato de etilo
1003
+
8
Hexenoato de etilo
1046
+
9
Nonanal
1106
+
10 2-Octanoato de metilo
1172
+
11 2-(2-Butoxietanol)
1192
+
12 2-Fenoxietanol
1249
++
13 2-Oxanona
1640
++
a
Abundancia relativa = + <5%; ++ 5-10%; +++ 10-30%; ++++ 30-60%
Los compuestos detectados para todos los estados de madurez pertenecen a steres,
aldehdos, alcoholes, terpenos y cetonas, siendo mayoritariamente los
steres las
sustancias presentes, mostrando tendencia creciente con los das de poscosecha, excepto
en la etapa de sobremadurez. En frutas inmaduras (da 1 de poscosecha) se encontr
(60%) de steres, predominando el Acetato de etilo, (30%) de aldehdos, predominando
el 2-metil-4-pentenal, (10%) de alcoholes, predominando el 3-hexenol. Para frutas en
madurez intermedia (da 3 de poscosecha) se hall (70%) de steres, predominando el 2168
butanoato de metilo, (10%) para aldehdos, alquenos y terpenos, siendo los compuestos
representativos el 2-metil-4-pentenal, el
1,4-cicloheptadieno y el -Terpinolene,
presenta los resultados de los sensores para el anlisis de voltiles en fruta inmadura
(da 1 de poscosecha) con un tiempo de referencia de 88 segundos.
169
Figura 5.4. Respuesta de los sensores de la nariz electrnica para frutas de guanbana
(Annona muricata L. cv. Elita) inmadura (da 1 de poscosecha ) para 88 s de tiempo de
referencia (A). Diagrama de barras con los colores caractersticos de cada sensor para
el tiempo de referencia establecido (B). Valores numricos de la conductividad relativa
en (Ohm) y del factor de dilucin para el aire de referencia (C)
170
Figura 5.5. Respuesta de los sensores de la nariz electrnica para frutas de guanbana
(Annona muricata L. cv. Elita) en madurez intermedia (da 3 de poscosecha ) para 88 s
de tiempo de referencia (A). Diagrama de barras con los colores caractersticos de cada
sensor para el tiempo de referencia establecido (B). Valores numricos de la
conductividad relativa en (Ohm) y del factor de dilucin para el aire de referencia (C)
171
Figura 5.6. Respuesta de los sensores de la nariz electrnica para frutas de guanbana
(Annona muricata L. cv. Elita) madura (da 6 de poscosecha) para un tiempo de
referencia de 88 s (A). Diagrama de barras con los colores caractersticos de cada sensor
para el tiempo de referencia establecido (B). Valores numricos de la conductividad
relativa en (Ohm) y del factor de dilucin para el aire de referencia (C)
Para las frutas maduras, Figura 5.6 se hall un crecimiento en la respuesta de los
sensores 2 (W5S),
172
Figura 5.7. Respuesta de los sensores de la nariz electrnica para frutas de guanbana
(Annona muricata L. cv. Elita) sobremadura (da 9 de poscosecha) para un tiempo de
referencia de 88 s (A). Diagrama de barras con los colores caractersticos de cada sensor
para el tiempo de referencia establecido (B). Valores numricos de la conductividad
relativa en (Ohm) y del factor de dilucin para el aire de referencia (C)
Conductividad relativa
(G/Go)
sensores.
Sensor 1
Sensor 2
Sensor 3
Sensor 4
Sensor 5
Sensor 6
3,5
3,0
2,5
2,0
1,5
Sensor 7
Sensor 8
Sensor 9
Sensor 10
1,0
0,5
0,0
0
9 10
Figura 5.8. Valores de las medias de cada sensor (n=6) para los diferentes estados de
madurez en frutas de guanbana (Annona muricata L. cv. Elita) almacenadas a 23C y
65% de HR
173
Se puede apreciar en la Figura 5.8, cmo algunos sensores son de mayor impacto en las
determinacin de la huella olfativa de las frutas de guanbana para los distintos estados
de madurez; por consiguiente, este patrn de comportamiento puede ser utilizado para la
clasificacin e identificacin del material vegetal en poscosecha (Gmez et al. 2007;
Hernndez et al. 2007).
Anlisis de componentes principales (ACP). Este mtodo estadstico se utiliz para
evaluar la capacidad del estudio de voltiles por nariz electrnica de separar los grupos
pertenecientes a cada estado de madurez, durante la etapa de poscosecha de guanbana.
La Figura 5.9 presenta los resultados del ACP en 2 dimensiones.
Puede apreciarse en la Figura 5.9 cmo el ACP mostr buena separacin entre los
grupos correspondientes a los das poscosecha 1, 3, 6 y 9, excepto para los grupos de
frutas maduras y sobremaduras, donde se present traslape en la separacin. El ACP1
correspondiente al eje X, explic el 87,50%, mientras que ACP2 eje Y, explic el
11,37%
174
Figura 5.10. Anlisis discriminante lineal (ADL) para frutas de guanbana (Annona
muricata L. cv. Elita) almacenadas a 23C y 65% de HR
Los resultados del ADL mostrados en la Figura 5.10 evidencian separacin entre los
grupos de frutas: inmaduras, madurez intermedia, maduras y sobremaduras, lo cual
permite establecer que la nariz electrnica es un buen instrumento para identificar y
clasificar por estados de madurez las guanbanas. Se puede apreciar cmo la varianza
es explicada mayoritariamente por el componente principal 1 con 99,97%, por tanto se
considera altamente eficiente el mtodo de ADL para la separacin de los grupos
(Garcia, 2009).
El anlisis HJ-Biplot es un procedimiento estadstico multivariante que proporciona
representaciones grficas de n muestras (estados de madurez) y p variables (sensores)
en un espacio de baja dimensin, usualmente el plano (Figura 5.11) (Gabriel, 1971;
Crdenas et al. 2007).
175
Figura 5.11. Representacin HJ-Biplot para la respuesta de los 10 sensores del anlisis
de voltiles por nariz electrnica para frutas de guanbana (Annona muricata L. cv.
Elita) almacenadas a 23C y 65% de HR
Puede apreciarse en la Figura 5.11 cmo los estados de madurez presentan una buena
separacin en la dimensin 1, los grupos de los sensores del anlisis de voltiles (2, 6 y
8) tienen una correlacin negativa con el grupo de sensores (1, 3, 4 y 5) aspecto que
est en concordancia con el ADL. En la dimensin 2 sobresalen los sensores 7 y 9, los
cuales
dimensin 1 los estados de madurez, se podra establecer que el grupo de sensores (1, 3,
4, 5, 7 y 10), contribuyen a la respuesta de los voltiles para las frutas de guanbana
inmaduras y en madurez intermedia, donde la huella olfativa podra estar caracterizada
por sustancias aromticas mientras que el grupo de sensores (2, 6, 8 y 9) aportan en la
clasificacin de voltiles de las frutas de guanbana maduras y sobremaduras,
tipificadas por alcoholes, voltiles nitrogenados e hidrocarburos de bajo peso molecular.
Puede observarse que la dimensin 1 del HJ-Biplot (Figura 5.11) representa la
evolucin en el tiempo de la composicin de los gases voltiles en las frutas de
guanbana tras la poscosecha. En la parte izquierda del primer eje (direccin negativa),
se ubican las muestras con altos contenidos de sustancias aromticas y bajos contenidos
de alcoholes (guanbanas inmaduras y de madurez intermedia), en contraste con las
muestras ubicadas a la derecha (direccin positiva), las cuales se caracterizan por altos
contenidos de alcoholes, voltiles nitrogenados e hidrocarburos de bajo peso molecular
y bajos contenidos de sustancias aromticas (guanbanas maduras y
176
30
Longitud (cm)
25
20
15
Longitud Polar
10
Longitud Ecuatorial
5
0
0
10 12 14 16 18
Figura 5.12. Curvas de crecimiento para frutas de guanbana (Annona muricata L. cv.
Elita) con los modelos matemticos polinomiales, los smbolos muestran la media y las
barras verticales los valores del E.E. para n=12 por da
5.13
presenta los resultados encontrados para los valores triestimulos del color L*a*b*, para
la epidermis y el endocarpio de las frutas de guanbana.
Piel
Pulpa
96
Coordenada L*
Coordenada L*
50
40
30
20
10
0
1
69
10
10
Coordenada a*
4
2
0
-2 0
-4
Coordenada a*
78
60
0
10
-6
-8
-10
0
0
10
-1
-2
25
Coordenada b*
25
Coordenada b*
87
20
15
10
5
20
15
10
5
0
0
0
10
10
Figura 5.13. Valores para la epidermis o piel de las coordenadas del color L* (A), a*
(C) y b* (E) y para el endocarpio o pulpa L* (B), a* (D) y b* (F), para frutas de
guanbana (Annona muricata L. cv. Elita) almacenadas a 23C y 65% de HR. Los
smbolos representan la media y las barras verticales los valores de la D.E. para n =
18, correspondiente a 6 evaluaciones por da poscosecha para 3 tiempos de cosecha
178
encontrados para la luminosidad, estn acordes con los de Islam et al. (1996) y Umme
et al. (1997).
En la epidermis la coordenada a* present los valores ms negativos para las frutas
inmaduras (da 0 de poscosecha), luego tiene un comportamiento creciente que se
intensifica con la madurez y sobremadurez, presentando valores positivos en la ltima
etapa de poscosecha, lo cual quiere decir que hay prdida de la tonalidad verde, aspecto
que probablemente se encuentra asociado con la disminucin de clorofila b,
por
0
1
2
3
4
5
6
7
8
9
70,92,7
69,83,3
66,86,6
68,93,8
65,51,4
63,32,5
60,02,2
61,51,2
60,13,1
59,83,4
18,91,37
20,51,22
20,61,31
18,61,94
17,21,59
21,51,87
19,71,63
22,81,60
21,81,77
22,02,71
4,80,90
4,11,15
4,80,86
4,30,83
4,91,22
5,10,57
4,90,85
4,61,04
4,20,98
5,21,13
La Tabla 5.5 presenta los resultados de las fracciones de la frutas de guanbana para
cada da de poscosecha, el rendimiento en pulpa para el da 6 (fruta madura) del 60% es
superior al reportado por Camacho, (1995) de 55% pero inferior al establecido por la
Norma Tcnica Colombiana (NTC, 5208) de 74%, el nmero promedio de semillas fue
de 129, se encontraron valores entre 58 y 250 unidades, el peso promedio de las
semillas fue de 0,87 0,11 g. El resto de participacin corresponde al corazn o eje
central de la fruta y prdidas debidas al procesamiento. Un estudio realizado en otros
cultivares de guanbanas registra valores promedio en nmero de semillas de 175 con
intervalo entre 90 y 266 unidades (Laboren, 1994).
5.2.4 Slidos solubles totales (SST), acidez total y pH. Los factores fsico-qumicos
180
16
14
12
10
8
6
4
2
0
0
10
Figura 5.14. Evolucin de los slidos solubles totales para guanbanas (Annona
muricata L. cv. Elita) almacenadas a 23C y 65% de HR. Los smbolos representan la
media y las barras verticales los valores de la D.E. para n=18
181
La Figura 5.15 presenta la acidez total de la guanbana, la cual aument durante toda
la etapa climatrica hasta alcanzar el mximo de 0,74% en el da 6 de poscosecha,
coincidiendo con la madurez de consumo. El pH present comportamiento inverso a la
acidez lo que es normal, debido a que a mayor acidez menor pH, el mnimo valor en el
pH se obtuvo consecuentemente para el da 6 de poscosecha. De acuerdo a los valores
encontrados la guanbana se podra clasificar cmo una fruta de acidez intermedia
(Camacho, 1995). En la etapa posclimatrica la disminucin de la acidez, puede ser
debida probablemente al consumo de stas molculas orgnicas, en los diferentes ciclos
metablicos para proporcionar la energa requerida por la fruta, adems muchos de los
cidos orgnicos participan cmo precursores de sustancias voltiles, que intensifican su
presencia durante este perodo (Park et al. 2006). Los valores encontrados para la
acidez total se encuentran ligeramente inferiores a los reportados por De Lima et al.
(2003) y estn acordes con respecto a la acidez y el pH a los encontrados por Hernndez
et al. (1988). Los valores de acidez y pH, cumplen con la Norma Tcnica Colombiana
(NTC, 5208).
5.2.5 Actividad enzimtica de la polifenoloxidasa (PFO). La actividad enzimtica
182
183
probablemente a la accin de otra serie de enzimas, que tienen que ver con la hidrlisis
de las estructuras moleculares de la pared celular, cmo la poligalacturonasa y la
celulasa, las cuales presentan un crecimiento en su actividad metablica, en la etapa de
sobremaduracin de las frutas (Abu-Bakr et al. 2003).
184
Figura 5.18. Efecto de los das poscosecha sobre la firmeza de frutas de guanbana
(Annona muricata L. cv. Elita) almacenadas a 23C y 65% de HR. Los smbolos
representan la media y las barras verticales los valores de la D.E. para n=18
De acuerdo a la Figura 5.18 se puede apreciar cmo las frutas de guanbana durante la
poscosecha presentan gran variabilidad en su firmeza. Para productos inmaduros (da 0)
con 80 N en promedio, la resistencia a la penetracin es muy alta inclusive hasta el da
2 de poscosecha, del da 2 hasta el 4, se present el mayor descenso en la firmeza, a
partir del da 4 el comportamiento es ligeramente decreciente, con pendiente suave,
obteniendo resultados para las frutas maduras entre 7,48 y 4,72 N para los das 5 y 7
respectivamente; para las sobremaduras (da 9), la fuerza de firmeza mostr un valor
promedio de 3,62 N, situacin que caracteriza al tejido cmo extremadamente blando;
el comportamiento de la firmeza, estuvo acorde con lo planteado por Ciro et al. (2007).
Para otros cultivares de guanbana se han reportado valores de 60 N para el da 0 de
poscosecha y comportamientos similares durante el resto del perodo (De Lima et al.
2003). Los cambios ocurridos a nivel de la pared celular donde hay hidrlisis de los
compuestos pcticos por accin de las enzimas PME, poligalacturonasa y celulasa, que
a su vez desagregan polmeros de alto peso molecular, cmo celulosa y hemicelulosa y
la prdida de turgencia celular debida a la transpiracin
0
1
2
3
4
5
6
7
8
9
Densidad
(gcm-3)
0,9820,016
0,9860,023
0,9890,022
0,9910,032
0,9960,014
0,9970,042
0,9980,052
1,0070,029
1,0130,041
1,0150,036
Coeficiente
de Poisson
0,40,038
0,40,045
0,410,041
0,420,039
0,430,043
0,430,031
0,430,033
0,450,054
0,470,040
0,470,043
Mdulo de
Young (Gpa)
1,16*10-3
1,03*10-3
9,62*10-4
6,03*10-4
2,29*10-4
1,04*10-4
8,12*10-5
8,12*10-5
8,10*10-5
5,33*10-5
Lmite de
Elasticidad (Mpa)
1,86*10-2
1,65*10-2
1,54*10-2
9,6*10-3
3,7*10-3
1,3*10-3
1,3*10-3
1,3*10-3
1,2*10-3
8,5*10-4
(Villamizar, 2001).
EL coeficiente de
Poisson evidenci un crecimiento con la maduracin de las frutas, al sufrir una mayor
deformacin lateral (D) frente a una misma disminucin longitudinal (L) aplicada a
cada da de poscosecha. El Mdulo de Young decreci con el paso de los das en
poscosecha de las frutas de guanbana, debido a que la resistencia del material con la
maduracin disminuye, siendo ms fcilmente deformable para esfuerzos menores, esto
experimentalmente se nota al tener dentro del material, regiones ms amplias en el eje
de deformacin, aspecto que se relaciona con la prdida de firmeza continua evaluada
186
Figura 5.19. Aplicacin experimental (A) y simulada (B) de la fuerza con el enmallado
del slido con elementos finitos tetraedrales
187
188
189
Fuerza de falla
simulada (N)
75
65
60
40
14
7
5
5
4,5
3,5
Factor de
seguridad
0,862
0,884
0,884
0,844
0,856
0,835
0,916
0,918
0,920
0,870
Fuerza de ruptura
experimental (N)
79,43
70,74
66,13
41,56
11,46
7,48
5,27
4,72
4,42
3,62
190
90
80
70
60
50
40
30
20
10
0
Firmeza experimental
Firmeza simulada
10
transporte, empaque
191
32
30
28
26
24
22
20
0
10
192
La
muestra resultados
consistentes para los dos mtodos empleados (ABTS Y FRAP), la menor capacidad
antioxidante de los estados iniciales, puede estar relacionada con la mayor actividad de
la enzima polifenoloxidasa (Figura 5.16) debido a que su accin encuentra menos
agentes opositores relativos. La evolucin de la actividad antioxidante, present un
comportamiento creciente hasta el da 5 de poscosecha aspecto relacionado con la alta
actividad metablica propia de la maduracin y del perodo climatrico, el descenso
durante los das 6, 7 y 8 puede estar asociado a la condensacin de los compuestos
fenlicos con aldhedos, lo que probablemente se manifiesta con la disminucin de los
compuestos fenlicos y en la actividad enzimtica (Huang et al. 2007), el incremento
nuevamente mostrado de la actividad antioxidante en la sobremadurez, probablemente
pueda ser atribuido en gran medida a la accin del cido ascrbico (Vitamina C)
presente, el cual exhibi alta concentracin relativa durante esta etapa (Proteggente et
al. 2002). Los resultados encontrados para la capacidad antioxidante en las frutas
maduras de guanbana coinciden con los reportados por Kuskoski et al. (2005). Los
193
la poscosecha de la guanbana.
70
60
50
40
30
20
10
0
10
Figura 5.25. Evolucin de los fenoles totales en (mg de cido glico100 g de parte
comestible) en frutas de guanbana (Annona muricata L. cv. Elita) almacenadas a
23C y 65% de HR. Los smbolos representan la media y las barras verticales los
valores del E.E. para n=6
194
Alothman et al. 2009). Para las frutas de guanbana durante la poscosecha se ha podido
establecer este vnculo a partir de la evaluacin de los cambios presentados.
195
196
G
Figura 5.27. Microfotografas por SEM del da 0 de poscosecha para frutas de
guanbana (Annona muricata L. cv. Elita) almacenadas a 23C y 65% de HR. Se
puede apreciar la epidermis externa, probablemente una estructura estomtica cerrada y
estructuras de primordios de tejidos estilares (A y B), epidermis interna (C y D),
microestructuras del endocarpio (E, F y G)
198
H
I
Figura 5.28. Microfotografias por SEM del dia 3 de poscosecha para frutas de
guanbana (Annona muricata L. cv. Elita) almacenadas a 23C y 65% de HR. Se
puede apreciar la epidermis externa (A y B), epidermis interna (C), evolucin de la
microestructura interna de los tejidos celulares, pared celular y grnulos de almidn (D,
E, F, G, H y I)
199
perifricas de las frutas de guanbana y por tanto ese podra ser considerado cmo un
eje principal de maduracin, lo cual podra relacionarse con la disminucin de la
firmeza de las frutas en esta direccin. La Figura 5.28 (H y I) presenta algunos
desacmodos de los tejidos de la pared celular, aspecto que tambin ha sido estudiado y
verificado por SEM para (Prunus domestica L.) (Nunes et al. 2008)
La Figura 5.29A muestra la epidermis externa donde claramente se puede apreciar una
estructura de transpiracin probablemente un estoma abierto, condicin que para sta
etapa de poscosecha se podra relacionar con los altos ndices de respiracin
200
tipo
pectinasas, celulasas y expansinas, actan para metabolizar estas sustancias de alto peso
molecular de carcter insoluble, cmo protopectinas para convertirlas en molculas ms
simples, cmo cidos pcticos o pectnicos de carcter soluble total o parcial en los
fluidos celulares (Camacho, 1995; Konopacka y
1993).
Figura 5.31 muestra la evolucin interna de los tejidos de la fruta de guanbana durante
la etapa de poscosecha o maduracin.
A
B
C
D
E
Figura 5.31. Radiografas de la evolucin de la maduracin en la fruta de guanbana
(Annona muricata L. cv. Elita) almacenadas a 23C y 65% de HR. Da 0 (A), da 3
(B), da 5 (C), da 7 (D), y da 10 de poscosecha (E)
202
A medida que transcurren los das de poscosecha, se puede apreciar una mayor radio
opacidad (zonas ms blancas), lo que podra ser debido a un aumento de la densidad de
los tejidos internos del vegetal, lo cual se denota por una mayor fluidez (White y
Pharoah, 2001) situacin atribuible a procesos enzimticos de degradacin de la pared
celular (Majumed y Mazumdar, 2002), particularmente ocasionados por la
pectinmetilesterasa y la poligalacturonasa (Sonegoa et al. 1995), que actan sobre los
compuestos pcticos responsables de la arquitectura celular, la degradacin de los
tejidos amilceos insolubles, los cuales por la accin de la y amilasa se hidrolizan a
compuestos ms simples del tipo mono y disacridos de carcter altamente
hidrosolubles que tambin contribuyen a que con el transcurrir de la etapa de
poscosecha se presente mayor fluidizacin de los tejidos, la Figura 5.31 (D y E),
correspondiente a la fruta madura y sobremadura respectivamente, denota una radio
opacidad creciente
A
B
Figura 5.32. Fruta de guanbana (Annona muricata L. cv. Elita) en madurez ideal a
los 7 das de poscosecha (A), zonas tpicas de maduracin (B)
De acuerdo a la Figura 5.32 y en funcin de la densidad de la fruta y su radio opacidad,
se pueden establecer unos ejes de evolucin de la maduracin, uno se desarrolla de la
periferia hacia el interior y el de mayor relevancia, desarrollado a partir de la zona
peduncular desde el eje central hacia el exterior en forma radial (denotado por la zona
en rojo), lo que coincide con lo expuesto en otras investigaciones (Ogawa et al. 2003).
203
Marcador
metlico
A
B
C
Figura 5.33. Fruta de guanbana (Annona muricata L. cv. Elita) afectada por insectos
y antracnosis (Colletotrichum gloeosporioides L.) (A), radiografa que muestra las
afectaciones internas del tejido (B), radiografa de un fruto sano en madurez de
consumo (C)
Puede apreciarse en la Figura 5.33B cmo en la parte inferior del marcador metlico
introducido cmo referencia, se nota un rea ms radio lucida correspondiente a la
afectacin biolgica, probablemente ocasionada por insectos, mientras que la zona
correspondiente a la mayor afectacin por antracnosis, se
204
En la Figura 5.34 se aprecia la fruta afectada por el pasador de la guanbana; por otra
parte, en la Figura 5.35 a partir de la aplicacin de rayos X se pueden visualizar las
zonas atacadas por el perforador (rectngulo rojo).
Los contrastes encontrados en la Figura 5.35, son debidos a las diferentes densidades
del material al ser atravesado por la radiacin, las reas ms oscuras o de menor
absorcin, representan franjas de menor densidad del vegetal, van de la parte externa al
centro de la fruta, estas tipifican regiones en forma de tneles, ocasionados por el
organismo invasor, las cuales son caractersticas de este tipo de dao (Parsi, 2004).
205
5.6
CARACTERIZACIN SENSORIAL
sensorial durante
15
10
5
0
0 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10
15
10
5
0
0
15
9 10
10
5
0
0
10
15
10
5
0
0
10
C
D
Figura 5.36. Evaluacin sensorial para el olor (A), la textura bucal (B), el color (C) y el
sabor (D), para frutas de guanbana (Annona muricata L. cv. Elita) almacenadas a
23C y 65% de HR. Los smbolos representan la media y las barras verticales los
valores de la D.E. para n=12
Los compuestos voltiles percibidos por los nervios olfatorios de los jueces representan
la calidad sensorial en cuanto al aroma de la fruta, puede apreciarse en la Figura 5.36A
cmo los jueces no evaluaron positivamente los olores encontrados en las frutas
inmaduras y en madurez intermedia, solo a partir del da 4 de poscosecha le atribuyen
una buena calidad sensorial al olor, intensificndose para el da 5 y permaneciendo
constante hasta el da 8, mostrando un descenso pronunciado en la calidad aromtica en
el da 9, correspondiente a fruta sobremadura, relacionando este aspecto con los
voltiles identificados tanto por el mtodo
206
no se presenta
diferencia entre los conceptos emitidos por los jueces, para las evaluaciones sensoriales
del aroma de las muestras correspondientes a los das 5, 6, 7 y 8, lo cual quiere decir
que en cualquiera de estos das, las frutas son evaluadas cmo de muy buena calidad
sensorial, con respecto al atributo sensorial del olor.
La Figura 5.36B muestra el comportamiento de la evaluacin sensorial de la textura
bucal, aspecto estrechamente relacionado con la firmeza de la fruta y por consiguiente
con la actividad de las enzimas pcticas, especialmente con la PME. La textura bucal
hace referencia al grupo de reacciones que se presentan en la cavidad bucal. Los jueces
encontraron que cuando la guanbana est inmadura es muy dura y por lo tanto tiene un
calificacin sensorial desfavorable, situacin que cambia
a partir del da 4 de
207
En la Figura 5.36D se puede ver el efecto de los das poscosecha sobre las frutas de
guanbana en lo concerniente al sabor, atributo sensorial de gran importancia, no solo
en las frutas, sino en cualquier otro alimento. La evaluacin sensorial del sabor depende
de una combinacin de sensaciones complejas, que involucran bsicamente los rganos
sensoriales olfativos y de las papilas gustativas ubicadas en la cavidad bucal,
especialmente las orientadas a percibir los sabores cidos, dulces y sus contrastes. Es
importante resaltar cmo para los jueces la calidad sensorial del sabor fue alcanzada
para el da 5 de poscosecha, permaneciendo constante hasta el da 7, lo cual quiere decir
que en ese intervalo de das de poscosecha, se tiene una calidad sensorial ideal de
consumo. Se puede relacionar la calidad sensorial del sabor, con el pico climatrico
principal presentado en el da 6 de poscosecha, donde adems se obtuvieron los valores
mximos de SST y un adecuado balance de acidez, presentando 13Brix y 0,8% de
acidez. La evaluacin sensorial en poscosecha de frutas ha sido estudiada para tomate
de rbol (Cyphomandra betacea S.) (Mrquez et al. 2007), en fresa (Fragaria vesca L.)
y uchuva (Physalis peruviana L.) (Restrepo, 2008).
208
CONCLUSIONES
CAPTULO 6
209
6. CONCLUSIONES
estados de madurez y estudiar las contribuciones de los sensores en la respuesta total del
anlisis de sustancias voltiles por nariz electrnica para el perodo de poscosecha de
las frutas de guanbana cv. Elita.
Con respecto a las caractersticas fsico-qumicas, se destacan los siguientes aspectos
hallados.
El patrn de crecimiento de la guanbana mostr un tpico comportamiento sigmoidal
nico, con longitud polar promedio de 27 cm y dimetro ecuatorial promedio de 21 cm,
alcanzando su crecimiento mayoritario en la semana 8 y la madurez de cosecha en la
semana 16.
Las coordenadas de color L*, a* y b*, posibilitaron clasificar el estado de madurez de
las frutas de guanbana. En cuanto a la madurez de consumo, sta se alcanz en el da 6
de poscosecha, el cual coincidi con el pico climatrico principal y con un rendimiento
en pulpa del 60%.
Los valores encontrados para la calidad fsico-qumica, en cuanto SST, acidez total de
expresada cmo cido mlico y pH, se encuentran dentro de los recomendados por la
Norma Tcnica Colombiana para frutas de guanbana
211
transporte, empaque
el consecuente
establecidos de estas caractersticas nutraceticas para la guanbana cv. Elita, sta fruta
212
se podra catalogar cmo una fruta de alta capacidad antioxidante y rica en polifenoles,
lo cual la potencializa cmo un alimento nutracetico con gran funcionalidad, por ser su
consumo de comprobado beneficio para la salud humana.
Las frutas de guanbana cv. Elita, evaluadas por rayos X durante su etapa de
poscosecha o maduracin, presentaron mayor radio opacidad y absorbieron mayor
radiacin, presentando dos ejes principales de maduracin, uno originado en la zona
peduncular que se expande de forma radial hacia el interior de la fruta y otro que inicia
en la parte perifrica ecuatorial y se desplaza hacia el interior. De igual manera los
daos internos y posibles afectaciones anormales presentes en el interior de las frutas
pudieron ser visualizados e identificados, cmo reas ms oscuras, lo cual puede ser
atribuible a espacios de mayor radio lucidez (zonas de menor densidad), con presencia
de aire e interrupcin de la arquitectura del tejido celular de las frutas.
213
214
APORTES SIGNIFICATIVOS A LA
CIENCIA
CAPTULO 7
215
Expresar los comentarios considerados positivos sobre las propias ejecuciones, puede
resultar presuntuoso, no es la idea de ste captulo, simplemente se pretenden destacar
algunos de los principales desarrollos realizados, que hacen un aporte relevante a la
ciencia de la fisiologa de poscosecha en vegetales, particularmente a las frutas de
guanbana (Annona muricata cv. Elita), extensibles al amplio espectro de las frutas
tropicales.
El contextualizar y articular todas las caractersticas evaluadas para frutas de guanbana
cv Elita, vegetal para el cual se desconocen muchas de las estimaciones realizadas, es un
importante aporte para el conocimiento de este material. La relacin de los parmetros
fisiolgicos con la variacin de los aspectos fsico-qumicos y con la calidad sensorial
total de las frutas, son un referente para el conocimiento integral del producto.
Establecer el perfil de voltiles que se producen con la maduracin de las frutas de
guanbana cv. Elita, detectar las sustancias que tipifican la etapa de poscosecha y
relacionar stas valoraciones con los resultados obtenidos con un instrumento de ltima
generacin como la nariz electrnica, es una notable aplicacin desarrollada, que pone
el tema en el tope del conocimiento mundial y se constituye en un novedoso aporte para
la ciencia de las sustancias voltiles y para la fisiologa vegetal de la guanbana.
El aporte cientfico con la modelacin y simulacin de la firmeza de la fruta de
guanbana, mediante la aplicacin de elementos finitos, se constituye en una de las
principales contribuciones cientficas de la investigacin. Fue necesario utilizar
novedosos programas de cmputo de aplicacin en ingeniera mecnica, los cuales se
adaptaron para ser empleados en el material biolgico, de naturaleza compleja como la
guanbana cv. Elita. El campo de aplicacin que esta parte de la investigacin abre, es
amplio, debido a que puede ser aplicable en las reas de almacenamiento, transporte,
empaque, entre otras. Con el conocimiento virtual de la resistencia a la fractura de las
frutas, se podrn establecer las cargas mximas de soporte, que resiste el material
biolgico, sin afectarse, situacin que redundar en el beneficio del manejo en
poscosecha para las frutas de guanbana y la reduccin de las altas prdidas que se
presentan en la actualidad.
216
217
RECOMENDACIONES
CAPTULO 8
218
8. RECOMENDACIONES
Emplear los rayos X como tcnica de control para monitorear daos internos en frutas
de guanbana, en lneas de proceso en poscosecha, previo anlisis de los costos totales
involucrados, con el fin de separar frutas afectadas y poder evitar que las frutas con
problemas internos puedan llegar al mercado, previniendo el consecuente perjuicio para
la agroindustria.
Aplicar los protocolos y prcticas desarrolladas en la investigacin a otros productos
agrcolas de inters comercial, ampliando el horizonte de accin de la ciencia y
tecnologa al campo de la poscosecha de frutas y hortalizas, con fines de desarrollar este
219
220
BIBLIOGRAFA
221
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249
250
ANEXO A
TUTORIAL PARA LA DETERMINACIN
MATERIALES BIOLGICOS
DE
LA
FIRMEZA
EN
Figura A1. Ingreso al programa de cmputo Textura Expert Exceed para el anlisis de
firmeza en frutas de guanbana (Annona muricata L.)
251
Una vez seleccionada la opcin correr la prueba, se elige entrar los pasos manualmente
(Enter settings manually), tal como se muestra en la Figura A3.
252
Una vez ingresados los parmetros, se selecciona, entrar los pasos manualmente (Enter
settings manually), conforme a la Figura A6
253
254
La Figura A11 muestra la manera de anclar para seleccionar y obtener los resultados de
la grfica.
Una vez anclada la curva se procesan los datos, por la opcin (Process Data) como se
aprecia en la Figura A12.
255
En la Figura A13 se muestran los resultados mas relevantes que se deben procesar,
donde se destaca la fuerza mxima o de ruptura del material.
256
Luego por la opcin anlisis de textura (T.A) normalmente sobre la misma muestra se
ejecutan otros anlisis, o en otras muestras, tal como se presenta en la Figura A16.
257
El programa de cmputo presenta los resultados resumidos para todos los anlisis
realizados, en una tabla, la cual se debe guardar como formato de hoja electrnica para
su procesamiento posterior, como se muestra en la Figura A18.
REFERENCIA BIBLIOGRFICA
258
ANEXO B
TUTORIAL PARA EL MANEJO DEL PROGRAMA DE CMPUTO Autodesk
Inventor Professional 11.0 Tecnologa ANSYS PARA LA MODELACIN Y
SIMULACIN DE ESFUERZOS Y DEFORMACIONES EN MATERIALES
BIOLGICOS.
1. MODELACIN DEL ANLISIS DEL ESFUERZO Y DEFORMACIN DE
LA GUANBANA POR ELEMENTOS FINITOS
1.1 CONSTRUCCIN
PROFESSIONAL
DEL
SLIDO
EN
AUTODESK
INVENTOR
Figura B1. Entorno del programa de cmputo Autodesk Inventor Professional 11.0
Tecnologa ANSYS
259
260
261
Una vez finalizado el dimensionamiento del slido, se selecciona el comando atrs, para
construir el slido de revolucin (volumen de la guanbana), esta operacin se ilustra en
la Figura B6.
262
Finalizada esta operacin se forma el slido, en este caso guanbana, como se muestra
en la Figura B8.
263
Figura B9. Comandos para la asignacin de las caractersticas externas del slido
La Figura B10 muestra el slido con las caractersticas propias de una fruta de
guanbana.
264
Una vez creado el slido con las caractersticas propias de la fruta como: tamao, forma
y apariencia, se procede a alimentar el programa con las propiedades
fsicas y
Una vez definidas las caractersticas propias del material, se debe acondicionar para la
aplicacin de las fuerzas y restricciones o apoyos, para lo cual se escogen
estratgicamente los sitios dentro de la pieza.
265
266
267
268
Figura B16. Simulacin de la aplicacin de las fuerzas y deformacin del material con
el programa de cmputo Autodesk Inventor Professional 11.0 Tecnologa ANSYS
1.5 RESULTADOS DE LA MODELACIN Y SIMULACIN
269
270
El esfuerzo principal mximo, muestra los valores de esfuerzo que son normales al
plano en el cual, el esfuerzo de corte es cero, la Figura
comportamiento.
271
272
Masa de la pieza
Volumen de la pieza
Valor de relevancia de malla
Nodos
Elementos
2,605 kg
2,658e+006 mm
0
1861
1161
Tipo
Magnitud Vector
0, N ; X
Fuerza 1
Fuerza de superficie
80, N
0, N ;Y
80, N ; Z
Sin restriccin, X
Restriccin fija 1 Restriccin fija de superficie 0, mm
Sin restriccin, Y
0, mm, Z
273
Mnimo
1,346e-004 MPa
-2,477e-002 MPa
-4,796e-002 MPa
4,487e-004 mm
1,102
Mximo
4,356e-002 MPa
8,018e-003 MPa
7,106e-004 MPa
2,974e-002 mm
N/A
REFERENCIAS BIBLIOGRFICAS
274