Laboratorio Analtica II

Grupo A2 / Pareja 3

INFORME ANALTICO PRCTICA 3

1.- Informacin muestra.
Fecha anlisis:
Referencia muestra:
Aspecto de la muestra:
Referencia laboratorio:

31/09/2014
Refresco carbonatado aromatizado con quinina marca comercial.
Lquido incoloro, transparente con gas.
Laboratorio Analtica II, Universidad de Valencia.

2.- Objetivo del anlisis.

Estudio de las variables que afectan a la fluorescencia molecular: seleccin de longitudes de onda y
estudio de la linealidad. Determinacin de quinina en un agua tnica.
3.- Metodologa.
Tcnica analtica:
Instrumentacin empleada:
Mtodo:

Espectroscopa de fluorescencia molecular.

Espectrofotmetro UV-Vis y espectrofluormetro.
Calibracin sencilla con estndares externos.

4.- Tabla de Resultados.

QUININA

Concentracin(ppm)

Muestra 1

47.2281

Muestra 2

48.7110

Muestra 3

50.6964

MEDIA s

48.8785 1.7402

QUININA

Concentracin(ppm)

MEDIA ts/ n

49 4

5.- Resultado final.

6.- Firmas.

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7.- Anexo.

Primero preparamos el patrn de Quinina de 200ppm en 250mL.

Conociendo la peso molecular del sulfato de quinina y de la quinina, 782.92g y 324.417g

respectivamente, calculamos el peso necesario para la disolucin patrn teniendo en cuenta la
presencia de dos molculas de quinina por cada una de sulfato.
( 782.92) g
1
200mgL 0.250 L=60.3325 mg
(324.417 2) g

Realizamos la pesada de sulfato de quinina con un peso de 61.7mg. Siendo la concentracin de

nuestro patrn 204.5332 ppm.

Con la disolucin patrn de 200ppm (tericos) preparamos 10 patrones dentro de un intervalo de

concentracin 0 a 10ppm en medio sulfrico 0.05M.

Primero preparamos un patrn intermedio de 25ppm aforando 6.25mL de nuestro patrn de 200ppm
en un aforado de 50mL. Con este ltimo realizamos los patrones de la determinacin. Los
volmenes y concentraciones se detallan en la Tabla 1 en aforados de 25mL.
Tabla 1. Volmenes usados y concentraciones de los patrones.
PATRONES
Vol. aplicado
Con. (ppm)

(mL)
P0.5

0.5

0.5

P1

P1.5

1.5

1.5

P2

P2.5

2.5

2.5

P3

P5

P8

P10

10

10

El espectro de fluorescencia de la quinina, tiene anillos aromticos conteniendo grupos funcionales

que son sensibles al pH. Los cambios en la emisin de los compuestos de este tipo provienen del
nmero de especies resonantes diferentes que estn asociadas con las formas cidas o bsicas de
la molcula. Estas formas resonantes proporcionan mayor estabilidad al primer estado excitado
producindose la fluorescencia a una mayor longitud de onda por lo que aadiremos a cada patrn
y muestra un volumen de 5mL de cido sulfrico 0.5M para obtener 0.05M en la disolucin.

Preparamos tres rplicas de muestra, primero eliminando gas disuelto en el bao de ultrasonidos,
ya que a menudo reduce la intensidad de emisin de una disolucin fluorescente debido a sus
propiedades oxidantes y sus caractersticas paramagnticas. y luego teniendo en cuenta que la
concentracin esperada de quinina oscilar entre 50 y 100ppm diluimos la muestra por triplicado
buscando una concentracin de 1ppm aadiendo 0.4mL en un aforado de 25mL y aforando tras
aadir 5mL de Sulfrico 0.5M.

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Teniendo en cuenta que la quinina, en medio sulfrico, presenta un mximo de absorcin hacia
350nm procedemos a obtener el espectro de absorcin de una disolucin de quinina de 5ppm en
medio sulfrico 0.05M utilizando una longitud de onda de excitacin de 350nm.

Detectamos dos mximos de excitacin a 254nm y a 346nm.

Luego registramos el espectro de emisin a la longitud mxima de emisin y localizamos el mximo

a 452nm.Los datos se detallan en tabla 2.
Tabla 2.Localizacin longitudes de onda de emisin y excitacin idneos.
TIPO DE MEDICIN
(nm)
INTENSIDAD (mA)

MXIMOS EXCITACIN
MXIMOS EMISIN

254

484.595

346

453.372

452

509.649

451

448.696

Con el par de ondas seleccionadas (excitacin 254nm, emisin 452nm) procedemos a las
mediciones de los patrones, 10 blancos para el calcular los lmites de cuantificacin y deteccin y la
muestra. Los datos obtenidos se incluyen en la tabla 3.
Tabla 3. Medidas obtenidas de los patrones, blancos y muestra.
CONC. PAT.(ppm)
Intensidad (mA)
Int. Blanco

Int. Muestra

0.5

114.66

1.36

M1

138.75

166.76

0.85

M2

141.23

1.5

222.48

0.83

M3

144.55

263.05

0.44

2.5

333.82

0.46

333.49

0.26

513.72

0.63

698.38

0.39

10

676.83

0.50
0.28

Con las medidas de los 10 blancos calculamos los lmites de deteccin y cuantificacin mediante las
frmulas:

10+ 3 S D
LD = X

10+ 10 SC
LC = X

Obtenemos un resultado de 1.61 mA para el lmite de deteccin y 3.952 mA para el lmite de

cuantificacin. Siendo unos valores adecuados por considerarse el limite de concentracin ms bajo
para mediciones cuantitativamente precisas y encontrarse este por debajo de las medidas
obtenidas.

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Para estudiar la linealidad representamos en una grfica la intensidad frente a la concentracin y en

otra la desviacin de la linealidad frente al valor relativo.(grfico 1 y 2)

700

600

0,5

500

Diferencia

Intensidad

Grfico 1 y 2. Representacin de la Int frente a la Conc. Y representacin de las diferencias frente al valor relativo.
1,5
800

400
300
f(x) = 62,87041x + 135,22570
R = 0,94281

200
100

0
-0,5
-1
-1,5
-2

0
0

10

10

Valor Relativo

Concentracion (ppm)

Un simple vistazo es suficiente para concluir que los puntos no se ajustan a un recta, R se aleja
demasiado de la unidad y las diferencias son demasiado grandes y dispersas.

Parece razonable pensar que los 5 primeros puntos representados pueden ajustarse a una recta.

Representamos en una grfica la intensidad frente a la concentracin y en otra la desviacin de la

linealidad frente al valor relativo esta vez incluyendo los 5 primeros puntos.(grfico 3 y 4)

Grfico 3 y 4. Representacin de la Int frente a la Conc. Y representacin de las diferencias frente al valor relativo.(5 primeros puntos)
400

350
0,5

Diferencia

Intensidad

300
250
200
150
f(x) = 106,92200x + 59,77100
R = 0,99428

100
50

0
-0,5
-1

0
0,5

0,7

0,9

1,1

1,3

1,5

1,7

1,9

2,1

2,3

2,5

0,5

0,7

0,9

1,1

1,3

1,5

1,7

1,9

2,1

2,3

Valor Relativo

Concentracion (ppm)

Observando ambas grficas se puede observar el buen ajuste lineal que se obtiene en este intervalo
de datos, muy poco error y poca dispersin de las diferencias.

El dato 6 no lo incluimos pues su error supera el 5% respecto al ajuste.

(380.537333.49)
100=12.36%
380.537

2,5

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Con la ecuacin obtenida del ajuste de los datos dentro del intervalo lineal procedemos a la
interpolacin de los datos de la muestras obteniendo la concentracin de la disolucin, luego
teniendo en cuenta las diluciones efectuadas y la concentracin real del patrn calculamos la
concentracin real de nuestra muestra. Con los tres resultados calculamos la media y el error. Mirar
tabla 4.
Tabla 4. Datos relativos a la muestra.
N MUESTRA
Int(mA)

[ ] Disolucin (ppm)

[ ] Muestra (ppm)

[ ] Corregida

M1

138.75

0.738660

46.16625

47.237307

M2

141.23

0.761854

47.615875

48.720563

M3

144.55

0.792905

49.5565625

50.706275

MEDIA s

48.8881 1.74

MEDIA s / n

(48.9 1.7)ppm

El resultado se ajusta a la concentracin de quinina esperada en una tnica comercial.(45-80)ppm.