INTRODUCCIN

En el gnero Pasteurella se incluyen en la actualidad 20 especies que son,

fundamentalmente, microorganismos patgenos de animales y que en
ocasiones causan infecciones en el hombre. La mayora de stas estn
producidas por Pasteurella multocida, aunque tambin, con menor frecuencia,
pueden afectar al hombre, Pasteurella canis, Pasteurella stomatis y Pasteurella
dagmatis.
Pasteurella multocida, la especie tipo del gnero, es un cocobacilo pleomrfico
gramnegativo. En la tincin de Gram puede observarse como formas cocoides
o como
bacilos cortos o filamentosos, con una tpica tincin bipolar, que pueden
aparecer sueltos o agrupados en parejas o cadenas cortas. Pasteurella
multocida es anaerobio facultativo, inmvil, crece bien en medios de agar
sangre, chocolate y Mueller-Hinton, pero no en agar McConkey, eosina azul de
metileno (EMB), ni en otros medios selectivos o diferenciales empleados para
el aislamiento de enterobacterias. Tras 24 h de incubacin en agar sangre,P.
multocida crece formando colonias lisas de 12 mm de dimetro, de un color
gris azuladobrillante, no hemolticas y en ocasiones mucosas. El crecimiento en
medio de agar sangre y la caracterstica tincin bipolar ayudan a diferenciar P.
multocida del gnero Haemophilus, con el que puede confundirse en la
observacin microscpica inicial. Como la mayora de las especies del gnero,
P. multocida da las reacciones de oxidasa y catalasa positivas,reduce los
nitratos a nitritos y es tpicamente sensible a la penicilina.
Mannheimia
Especie de bacterias gramnegativas, anaerobias facultativas, en forma de
bastoncillos, normalmente comensales en la flora de bovinos y OVINOS. Pero
en condiciones de estrs fsico o fisiolgico, puede causar mastitis en ovejas
ypasteurelosis neumnica o NEUMONIA ENZOTICA DE LOS BECERROS
en bovinos. Su nombre anterior era el depasteurella haemolytica.
Bordetella
El microorganismo llega al tracto respiratorio y se adhiere a la superficie
epitelial (cilios) de la traquea y bronquios. Esta unin esta mediada,
fundamentalmente, por la hemaglutinina, aunque tambin intervienen la
pertactina, las fimbrias y la toxina pertusis All se multiplica con rapidez e
interfiere con la accin ciliar pero no invade la sangre Produce toxinas y
sustancias que irritan las clulas superficiales (toxina dermonecrotica,
citotoxina traqueal) produciendo tos y linfocitosis. La citotoxina traqueal
produce tambin ciliostasis, por lo que se altera la defensa mucociliar Aparecen
zonas de necrosis en el epitelio e infiltracin polimorfonuclear, inflamacin

peribronquial y neumona intersticial Los bronquios ms pequeos se obstruyen

con moco y producen atelectasia y disminucin de la oxigenacin, lo cual
determina la aparicin de convulsiones po0r ultimo la toxina pertusis y la
adenilato ciclasa son capaces de inhibir a las celualas fagociticas

OBJETIVOS
GENERAL: estas bacterias no entricas es decir que atacan el tracto
respiratorio en los animales son muy comunes en los seres que nos interesan
es decir en los animales por eso es de suma importancia saber identificarlas y
como aislarlas para poder tener la certeza de saber a que nos enfrentamos
cuando realicemos un diagnostico clnico

PARTICULARES:
Seguir identificando si son gram + o gram
Saber como cultivarla en nuestro agar
Identificar como se ven a microscopio
Adquirir el conocimiento acerca de cuales bacterias son las que afectan
a nuestros pacientes

MATERIAL
GENERAL: Asas bacteriolgicas graduadas, asas bacteriolgicas rectas,
portaobjetos, papel secante, solucin desinfectante, marcador permanente,
Mechero, Estufa Bacteriolgica a 37 C (temperatura constante). Microscopio
ptico binocular de campo claro (con objetivos de 4X, 10X, 40X, 100X), tiras de
papel filtro.

SECCIN:
1 cultivo en agar de Pasteurella multocida
1 cultivo en agar de Mannheimia haemolytica
1 cultivo en agar de Bordetella Bronchiseptica

POR EQUIPO:

Agar Sangre
Agar MacConkey.
Agar de Triple Hierro y Azcar (TSI)
Medio Sim
Urea
Base de rojo de Fenol con Lactosa, glucosa, manitol y maltosa.
Medio MIO.
Reactivo de Oxidasa
Reactivo de Indol
Tren de tincin de Gram
Reactivo de KOH al 3%

METODOLOGA
Se observ la morfologa colonia y las reacciones que se observan en cada
medio de cultivo de agar sal y manitol y a si esto ; poder escoger la bacteria u
hongo del cual se dio mayor crecimiento para poder cultivar de nuevo en agar
sangre , y MacConkey asi para poder observar que crecimiento se observara a
si mismo se cultivaron en TSI , SIM ,URE , MIO etc utilizando en estas la
prueba de saliva que se realiz en los integrantes de cada uno del equipo en
est obteniendo mayor crecimiento de bacterias en la muestra tomada en el
compaero Uriel cambiando de un color morado a negro llegando a la
conclusin de que se deba a su tipo de metabolismo .
Tambin se realiz tincin de gram de una de las bacterias obtenidas se
observ la morfologa y si se obtuvo grm positiva o gram negativa en este caso
el quipo obtuvo gram positiva.
Asi fue la realizacin del cultivo de estos los tubos se metieron al horno para
poder observar que creci bacteria creci tomando las muestras de los conejos
enfermos.

RESULTADOS
En los agares cultivados, logramos obtener crecimiento de bacterias las cuales
podemos decir que podran ser patgenas, como lo fue el caso de la salmonela
que se encontr en uno de los agares. En el caso de los agar-sangre se
registr crecimiento de bacterias hemolticas ya que su desarrollo fue mayor en
el ya citado medio de cultivo.

CONCLUSIN
Podemos concluir que dicha prctica nos permiti identificar diferentes tipos de
bacterias (hemolticas, etc.) que crecieron dentro de conejos enfermos, al igual
que encontrar bacterias hemolticas en exudados de saliva de los compaeros.

CUESTIONARIO
1. Menciona las principales diferencial morfolgica de entre la
enterobacterias y bacterias Gram negativas que afectan el tracto
respiratorio?

Las Enterobacterias son una familia amplia de bacterias Gram negativas que
provienen del intestino, su morfologa es principalmente bacilar, la mayora son
motiles, son anerobios facultativos, carecen de la enzima citocromo oxidasa y
por ello son oxidasa negativos.

La manera de orientarse en la identificacin del genero de las enterobacterias,

es por medio de un conjunto de pruebas bioqumicas denominadas IMVIC que
consisten por las pruebas: Indol, Rojo de metilo, Voges Proskauer y Citratos.

Streptococcus pneumoniae
Es la etiologa ms frecuente en las neumonas bacterianas adquiridas fuera
del Se trata de un coco gram positivo agrupado de dos en dos y en cadenas
cortas. Su disposicin ms tpica es en diplococos y con cpsula comn a las
dos clulas. En las tinciones puede detectarse la cpsula porque alrededor de
cada diplococo queda un pequeo espacio sin teir. La cpsula constituye un
factor de virulencia para la bacteria y adems se utiliza para clasificar las
diferentes cepas en funcin de sus serotipos.

Moraxella catarrhalis
Se trata de un coco gram negativo que se asocia en parejas. En la tincin de
gram se observan siempre agrupadas de dos en dos dando una imagen que
recuerda un grano de caf. Rara vez son responsables de infeccin de vas
respiratorias altas a excepcin de la otitis media. Se encuentran ms
frecuentemente asociadas a neumonas. Suelen crecer mejor con alta
concentracin de CO2 y forman colonias grandes, extendidas y -hemolticas
que se asemejan a las de Staphyllococcus aureus.

Legionella pneumophila
Es un bacilo gram negativo que se tie muy dbilmente y que crece con
enorme dificultad en los cultivos. Necesita medios muy enriquecidos. El ms
usado es el medio BCYE con carbn que aumenta la tensin superficial
facilitando el crecimiento de las colonias. Tambin contiene extractos de
enriquecimiento, antibiticos, antifngicos y sales de hierro. Tras varios das de
incubacin forma colonias mucosas verdeazuladas.
Muchas especies no patgenas del mismo gnero se parecen mucho a
L.pneumoplila desde el punto de vista bioqumico. Esta circunstancia unida a la
dificultad de crecimiento hace que el diagnstico serolgico para este germen
tenga un papel importante. Suelen aplicarse pruebas de ELISA para detectar
anticuerpos especficos. Estn en desarrollo tcnicas de identificacin a travs
de PCR y por anlisis de cidos grasos.
Mycobacterium tuberculosis

Agente responsable de la tuberculosis. Es un bacilo con cidos miclicos en su

pared, y por tanto con propiedades de cido-alcohol resistencia. No se tie con
la tincin de gram y suele aparecer con aspecto traslcido en las
preparaciones. M.tuberculosis no slo causa infecciones pulmonares sino que
tambin puede diseminarse por prcticamente todo el cuerpo desarrollando
tuberculosis renal, meningitis tuberculosa, etc. La presencia de bacilos cidoalcohol resistentes en el esputo justifica por si solo la aplicacin de tratamiento
contra la tuberculosis. La presencia de infiltrados pulmonares caractersticos,
as como de sangre en el esputo pueden apoyar el diagnstico.

2. Qu medios de cultivo y pruebas complementarias necesitaras para

confirmar el gnero y especie de los agentes bacterianos antes
mencionados?

Streptococcus pneumoniae
Cuando crece en agar sangre desarrolla a-hemlisis, y forma un halo verdoso
alrededor de cada colonia. Aunque crece en aerobiosis lo hace ms
intensamente cuando se enriquece la atmsfera con CO2. Como todos los
estreptococos necesita sangre para crecer. Las pruebas fenotpicas que lo
identifican definitivamente son la sensibilidad a optoquina y la produccin de
una autolisina en presencia de desoxicolato sdico que produce su
autodestruccin cuando se aplica bilis sobre las colonias.
Legionella pneumophila
crece con enorme dificultad en los cultivos. Necesita medios muy enriquecidos.
El ms usado es el medio BCYE con carbn que aumenta la tensin superficial
facilitando el crecimiento de las colonias.
Mycobacterium tuberculosis
El cultivo de esta bacteria es lento y complicado. Por ese motivo los esputos
requieren un pretratamiento especfico cuando se solicita al laboratorio el
cultivo de micobacterias. Los esputos deben descontaminarse para eliminar lo
mejor posible el resto de flora, deben clarificarse para disminuir la viscosidad y
deben centrifugarse para concentrar las micobacterias ya que en ocasiones los
inculos pueden ser pequeos. Se utilizan medios de cultivo muy ricos y muy
selectivos para micobacterias. Los medios de Lowestein-Jensen y de MiddleBrook son los ms empleados. Se incuban de tres a seis semanas tras las
cuales se observan colonias secas y rugosas. El lentsimo crecimiento hace
intiles las pruebas bioqumicas, por eso la identificacin se realiza con sondas
de ADN especficas de especie.

Medios de cultivo orientados a enterobacterias:

Agar Sulfito Bismuto conocido como: SB

Agar Salmonella-Shigella conocido como: SS

Agar Xilosa, Lisina, Desoxicolato, conocido como: XLD

Agar XLD

Agar Rojo de Violeta con Bilis y Dextrosa, conocido como: VRBD.

Agar Eosina Azul de Metileno conocido como: EMB.

Agar Mac Conkey conocido como: MC

Agar Verde Brillante conocido como: VB

Agar verde brillante

BIBLIOGRAFIA

Diagnostico microbiolgico Texto y Atlas

Panoamericana. Autor Elmer W. Koneman

en

color.

Editorial

Medica

Revista Mdica del Hospital Nacional de Nios Dr. Carlos Senz Herrera
http://www.scielo.sa.cr/scielo.php?script=sci_arttext&pid=S101785461998000100001

http://www.danival.org/600%20microbio/5000micro_dvf/micro_dvf_32.ht
ml

UNIVERSIDAD AUTNOMA DEL ESTADO DE MXICO

CENTRO UNIVERSITARIO UAEM AMECAMECA

LICENCIATURA DE MDICO

VETERINARIO

ZOOTECNISTA

ASIGNATURA: BACTERIOLOGIA Y MICOLOGIA

5 REPORTE DE PRCTICA
EQUIPO: 3

INTEGRANTES:
BAUELOS MARTINEZ MARCO URIEL
GARCA ROSAS GENESIS JAEL
GONZALEZ MENDEZ MARIA
MEZA SALAZAR ANDRES MANUEL
MORA OLIVARES DULCE ITZEL
ROMO ORTIZ KRYSTAL
FECHA DE ENTREGA: 30 DE ABRIL DEL 2013