INMOVILIZACION DE ENZIMAS POR EL MTODO DE ATRAPAMIENTO EN AGAR

I.

INTRODUCCIN

La tecnologa enzimtica tiene como objetivo la superacin de todos aquellos inconvenientes que
parecen retrasar la aplicacin de las enzimas en estos procesos a escala industrial, las enzimas son
protenas cuya funcin biolgica es catalizar las reacciones que suceden en las clulas. Esta rea
tiene aplicaciones desde tiempos remotos como la fermentacin, actualmente en diferentes
industrias a diferentes niveles, ya que implica la utilizacin de sistemas enzimticos diversos que
optimizan el procesamiento en la obtencin de detergente, aditivos alimenticios, productos
qumicos y farmacuticos. La tecnologa enzimtica representa como alternativa biotecnolgica
basada en que las industrias desarrollen productos de calidad homognea, aprovechen
ptimamente sus materias primas, aceleres sus procesos de produccin, minimicen desperdicios y
disminuyan el deterioro del medio ambiente. En los ltimos aos, la biotecnologa ha
experimentado grandes avances y, paralelamente sus aplicaciones industriales en la obtencin de
productos qumicos, en la industria alimentaria y farmacutica. Los procesos catalizados por
enzimas en la industria son cada da ms numerosos, ya que presentan una serie de ventajas
frente a los catalizadores convencionales no biolgicos: Presentan una gran actividad cataltica;
Muestran una gran especificidad de sustrato (incluso este reo selectividad y regio especificidad);
Son muy activos a temperatura ambiente y presin atmosfrica. A pesar de estas claras ventajas,
el empleo de enzimas no se ha generalizado en los procesos qumicos industriales debido a que la
mayora de las enzimas no son estables en las condiciones de trabajo. Por otra parte al ser solubles
en agua, su separacin de los sustratos y productos es difcil, y por tanto, no se pueden reutilizar.
Con la inmovilizacin de las enzimas se han podido superar estos ltimos inconvenientes,
permitiendo que el proceso biotecnolgico sea econmicamente rentable
II.

III.

OBJETIVOS
Aprender tcnicas de inmovilizacin de enzimas y aplicar los conocimientos adquiridos
para tratar las enzimas
Establecer la efectividad de enzimas inmovilizadas y sin inmovilizar
Determinar el tiempo de residencia del sustrato en el sistema de la enzima inmovilizada
Establecer tiempos de catlisis de la enzima en cada uno de los sistemas(inmovilizada y
sin inmovilizacin)

MATERIALES Y METODOS
cultivo de sacchromyces cereviseae (18-24 horas )
agar noble 4%
aceite refrigerado a 4C entre 30y 40 minutos
bao termosttico 45C
probeta
pipeta
vaso de precipitacin
Atrapamiento en Agar-Agar
Se licuo el agar y se verti 20 ml de ello en 20 ml de cultivo de saccharomyces cerevisae a
temperatura de 45 C.

IV.

Posteriormente extraer con la jeringa el mezclado y por dejar caer gotas sobre el aceite
refrigerado.
Los pelletes formados se sec con papel bulki
Luego se conserv los pellets a 4C para ser usado despus

RESULTADOS

Produccion de pelletes por el metodo de atrapamiento en agar

Imagen: 01

Imagen: 02

Separacin de los pelletes en papel bulki

V.

DISCUSION

Aunque se han desarrollado y aplicado muchas tcnicas de inmovilizacin a numerosos enzimas, se

reconoce que no existe un mtodo universal vlido para todos los enzimas en todos los casos. No
obstante, gracias a toda la informacin disponible en la actualidad, se pueden hacer generalizaciones
sobre cada mtodo de inmovilizacin y as, podremos seleccionar el ms adecuado para cada
aplicacin especfica. La eleccin ha de tener en cuenta las condiciones de la reaccin biocatalizada, el
tipo de reactor que se vaya a utilizar, el tipo de sustrato que tenga que ser procesado y otros factores

VI.

VII.

CONCLUSION
La ventaja de la inmovilizacin es que aumenta su resistencia a la desnaturalizacin haciendo
que su uso y aplicacin se extiendan, especialmente a niveles industriales.
Se conoci uno los principales mtodos para inmovilizacin de enzimas.
Se aprendi a trabajar con uno de los mtodos de inmovilizacin de enzimas.
Se logr inmovilizar a las enzimas con un mtodo tradicional, las cuales a estas condiciones
lograron consumir el sustrato(azcar) hasta dejarlo a un nivel constante
REFERENCIAS BIBLIOGRAFICOS
http://farmacia.ugr.es/ars/pdf/125.pdf(12/11/14)
http://ri.ues.edu.sv/6058/1/10102929.pdf(12/11/14)
1. Lpez, E., 1999. Tratamientos enzimticos en la Industria. UNED pp 23-40.
http://www.ciiq.org/varios/peru_2005/Trabajos/I/2/1.2.11.pdf(12/11/14)

ANEXOS
Atrapamiento
Consiste en la retencin fsica de la enzima en las cavidades interiores de una matriz slida porosa
constituida generalmente por prepolmeros fotoentrucruzables o polmeros del tipo poliacrilamida,
colgeno, alginato, carraginato o resinas de poliuretano. El proceso de inmovilizacin se lleva a cabo
mediante la suspensin de la enzima en una solucin del monmero. Seguidamente se inicia la
polimerizacin por un cambio de temperatura o mediante la adicin de un reactivo qumico. El
atrapamiento puede ser en geles o en fibras, que suelen ser ms resistentes que los geles. En el primer
caso, la enzima queda atrapada en el interior de un gel, mientras que en el segundo caso la enzima se
encuentra ocluida dentro de las microcavidades de una fibra sinttica. El atrapamiento, de gran
sencillez desde el punto de vista experimental, requiere poca cantidad de enzima para obtener
derivados activos. Como ventaja adicional, la enzima no sufre ninguna alteracin en su estructura. De
todas formas, el atrapamiento requiere un control riguroso de las condiciones de polimerizacin, as
como la comprobacin de que la naturaleza qumica del proceso no altera los grupos reactivos de la
protena.