TP C01.

Bleu de mthylne dans un collyre

Objectifs
Doser par talonnage laide dun spectrophotomtre le bleu de mthylne contenu dans une
solution pharmaceutique.

Prsentation de la dmarche
La solution pharmaceutique tudie est ici le collyre bleu LAITER, il contient de lhydroxyde de
mthylthioninium. Le bleu de mthylne est le chlorure de mthylthioninium. Les spectres dabsorption des
solutions de collyre bleu LAITER et de bleu de mthylne sont identiques.

La manipulation consiste :
- tracer la courbe dtalonnage donnant l'absorbance A en fonction de la concentration massique c
en bleu de mthylne ;
- mesurer labsorbance de cette solution, dduire de la courbe dtalonnage la concentration
massique correspondante. Cette concentration massique quivaut celle dun collyre qui
contiendrait du bleu de mthylne, il devient alors possible de dterminer la concentration
massique en hydroxyde de mthylthioninium.

Protocole
Matriel et produits
2 burettes gradues de 25 mL
6 tubes essai et porte-tubes
Spectrophotomtre et cuves
Solution de bleu de mthylne de concentration massique 5,00 mg.L -1 obtenue par dilution dune
solution mre 1,00 g.L-1 (les concentrations doivent tre prcises)
Collyre contenant de lhydroxyde de mthylthioninium1
Protocole
partir d'une solution mre de bleu de mthylne de concentration massique c0 = 5,00 mg.L-1, raliser
une chelle de teintes constitue par 10,0 mL de chaque solution fille suivante :
Numro de la
solution
Concentration
massique
(mg.L-1)

5,0.10-1

1,0

2,0

3,0

4,0

5,0

Raliser les dilutions dans des tubes essais laide de burettes pour prlever les volumes deau et
de solution mre.
A laide du spectrophotomtre, mesurer labsorbance A des solutions prpares.
Rgler pralablement le spectrophotomtre la longueur donde = 660 nm et rgler le zro avec
une cuve contenant de leau distille.
Le collyre a t dilu 100 fois, mesurer labsorbance de la solution dilue ainsi prpare.
Remarque :
- Compte-tenu du cot du collyre il est propos aux lves la solution dj dilue qui, comme le
collyre, est conserve au frais et dans un flacon brun, labri de la lumire.

1 Dans le collyre bleu LAITER tudi la concentration massique de lhydroxyde de mthylthioninium est de
200 mg.L-1.

Il est alors possible de demander aux lves comment procder pour raliser cette dilution
sachant que, par exemple, 200 mL de solution ont t prpars partir du collyre.

Exemples de questions (exploitation de la manipulation)

1. partir du spectre de la solution mre de bleu de mthylne de concentration massique c0 = 2,50
mg.L-1, ci-dessous, justifier la valeur de la longueur donde choisie pour raliser les mesures au
spectrophotomtre.

Le pic d'absorption du bleu de mthylne se situe 660 nm

2. De la courbe dtalonnage dduire la concentration massique dun collyre qui contiendrait du bleu
de mthylne

3. Le bleu de mthylne utilis pour raliser la solution mre a pour formule C 14H18ClN3S,3H2O, cest
un sel trihydrat de masse molaire molculaire 373,90 g.mol -1. Sachant que la masse molaire
molculaire de lhydroxyde de mthylthioninium est 301,35 g.mol-1, en dduire la concentration
massique en hydroxyde de mthylthioninium du collyre tudi.
Comparer lindication porte sur lemballage.

lments de rponse
Courbe dtalonnage du bleu de mthylne :
Numro de la
solution
Concentration
massique
(mg.L-1)
Absorbance

solution de
collyre

5,0.10-1

1,0

2,0

3,0

4,0

5,0

0,053

0,128

0,243

0,374

0,488

0,659

0,314

A 0.8
0.6
0.4
0.314
0.2
0
0

2 2,45
2,45

c (mg.L-1)

Labsorbance mesure pour la solution pharmaceutique dilue vaut 0.314 ; ce qui, sur la courbe
dtalonnage de la solution de bleu de mthylne, situe sa concentration massique 2,45 mg.L -1.
La solution commerciale a donc pour concentration massique en bleu de mthylne :
2,45 x 100 = 245 mg.L-1.

Il sagit en fait de celle dun collyre qui contiendrait du bleu de mthylne.

La concentration massique en hydroxyde de mthylthioninium est alors :

245.301,35
c=
= 197 mg.L-1
373,90
,
valeur trs proche de celle figurant sur lemballage (200 mg.L -1).
Spectre de la solution dilue de collyre bleu LAITER :

Formules topologiques du bleu de mthylne et de l hydroxyde et mthylthioninium :

N
,Cl-

bleu de mthylne : chlorure de mthylthioninium

, HO
S

hydroxyde de mthylthioninium