DETERMINACIN DE PROTENAS

TOTALES, ALBMINA Y UREA

PROTENAS
Las protenas son compuestos macromoleculares
que se encuentran disueltos en el plasma o suero y
que desempean funciones tales como: actan en
defensa contra agentes invasores formando los
anticuerpos; transportan metabolitos, hormonas y
sustancias relativamente insolubles; actan como
elementos estructurales y contribuyen a mantener
la presin coloidosmtica del plasma.
Se

observan

hipoproteinemias

en

situaciones

patolgicas tales como desnutricin, infecciones prolongadas y en casos de prdidas

renales. En estos casos se observa tambin hipoalbuminemia. Las hiperproteinemias se
presentan en casos tales como el mieloma mltiple, y las hiperalbuminemias se relacionan
con estados de deshidratacin. Las protenas son un constituyente muy importante de las
clulas y los tejidos del cuerpo humano. Se componen de aminocidos. Hay diferentes
tipos de protenas condiferentes funciones, son as protenas los enzimas, algunas
hormonas, la hemoglobina, el LDL (transportadora de colesterol), el fibringeno, el
colgeno, las inmunoglobulinas, etc. Las protenas del suero se dividen en dos fracciones
Albmina y Globulinas.
La albmina es la protena de ms concentracin en la sangre. La albmina transporta
muchas molculas pequeas (bilirrubina, progesterona, y medicamentos), y tiene tambin
la funcin de mantener la presin sangunea ya que favorece la presin osmtica coloidal
para mantener lquidos en el torrente sanguneo y que no pasen a los tejidos,
manteniendo un equilibrio.
Las globulinas se pueden dividir en alfa-1, alfa-2, beta y gamma globulinas. La albmina
representa el 60% de las protenas que contiene el suero, el resto son las globulinas.El
resultado de la determinacin de protenas totales puede reflejar el estado nutricional,
enfermedad renal, enfermedad heptica, y otras varias condiciones. Si las protenas
totales dan un resultado anormal deben practicarse pruebas posteriores para identificar
qu fraccin proteica es la anormal, y as poder proceder a un diagnstico especfico.
Tambin se solicita para investigar la causa de una acumulacin anormal de lquido en los
tejidos (edema).

Determinacin de protenas totales

Los enlaces peptidicos de las protenas reaccionan con el ion cprico en medio
alcalino,para dar un complejo color violeta con mximo absorcin a 540nm, cuya
intensidad es proporcional a la concentracin de protenas totales en la muestra
Muestra: Suero o Plasma
Lectura :540nm

Agua Destilada
Estndar
Muestra
Reactivo EDTA/Cu

Blanco
50ul

Standard

Muestra

50 ul
3,5 ml

3,5 ml

El reactivo tiene que ser llevado a la incubadora a 37C por 10 minutos.

50 ul
3,5 ml

ALBMINA
Muestra: Suero o Plasma
Lectura :625nm
Blanco
Estndar
Muestra
Reactivo B

UREA

3,5 ml

Standard
10 ul
3,5 ml

Muestra
10 ul
3,5 ml

Mezclar la varilla y mantener los

tubos por 10 a 15 minutos y 28 (

La concentracin sangunea de amoniaco es superior en

los infantes que en los adultos, debido a que el desarrollo
de la circulacin heptica se termina despus del
nacimiento. La hiperamonemia es una entidad que se
presenta con frecuencia debido a defectos congnitos
en el ciclo de la urea. El error innato del metabolismo ms
comn es la deficiencia en ornitina transcarbamilasa. La
hiperalimentacin es una causa mucho ms frecuente
de hiperamonemia en infantes. Con frecuencia, se
diagnostica el sndrome de Reye por un amoniaco
sanguneo elevado en ausencia de otra causa
demostrable.
Los pacientes adultos muestran elevadas concentraciones de amonaco sanguneo en las
etapas terminales de: la cirrosis heptica, la falla heptica y la necrosis del hgado aguda
y subaguda. Se presagia el comienzo de la encefalopata heptica por una elevacin en
el amonaco sanguneo. Se ha demostrado que la medicin en lquido cefalorraqudeo
(LCR) de la glutamina, correlaciona bien con el desarrollo de la encefalopata heptica.
Tambin se puede utilizar la medicin de la glutamina en el LCR, para diferenciar la
encefalopata heptica de la sptica. Sin embargo, no es comn la medicin de la
glutamina en el LCR. La excrecin de amonaco urinario se eleva con la acidosis y se
disminuye en la alcalosis, puesto que la formacin de sales de amonio es un mecanismo
importante para excretar el exceso de iones hidrgeno. Daos en los tbulos renales
distales, tal como ocurre en la falla renal, la glomerulonefritis, el hipercorticoidismo y la
enfermedad de Addison, conllevan a una excrecin de amonaco disminuida sin
presentar cambios en los niveles sanguneos de amonaco.
Puesto que la urea se sintetiza en el hgado, en la enfermedad heptica sin dao en la
funcin renal, se presenta nitrgeno ureico srico bajo, aunque la relacin urea a
creatinina se puede conservar normal. La elevacin en el nitrgeno ureico srico no
implica necesariamente dao renal, puesto que la deshidratacin puede llevar a
concentraciones de nitrgeno ureico tan altas como 600 mg/L. En los infantes que reciben
una frmula alta en protenas pueden tener niveles de nitrgeno ureico de 250 a 300
mg/L. Naturalmente, enfermedades como la glomerulonefritis aguda, la nefritis crnica, el
rin poliqustico y la necrosis renal elevan el nitrgeno ureico.
La ureasa cataliza la hidrlisis de la urea dando amonio y CO2. El amonio formado se
valora mediante una reaccin enzimtica (GLDH), pasando NADH a NAD+.La disminucin
de la absorbancia frente al tiempo es proporcional a la concentracin de urea.

FUNDAMENTOS DEL MTODO

La ureasa descompone especficamente la urea produciendo dixido de carbono y
amonaco. Este reacciona en medio alcalino con salicilato e hipoclorito para dar
indofenol color verde.