Sabas qu?

Enfoque en la obtencin de muestras de suero

BD PAS MXICO, CENTROAMRICA Y CARIBE Volumen 4

Obtencin de muestras de suero con

calidad para favorecer la eficiencia
del proceso y la calidad del resultado
Contenido
La muestra de sangre, un
componente esencial para
el anlisis
Obtencin de muestras
de suero
La obtencin de muestras
de suero y sus retos
Tubos para la obtencin
de muestras de suero
Separadores de suero
y aceleradores de
coagulacin
Tiempo de centrifugacin
y fuerza centrfuga relativa
(FCR)
La importancia de la
obtencin de la muestra
de suero para el
laboratorio clnico
Recomendaciones

La muestra de sangre, un componente esencial para el anlisis

La muestra de sangre es un componente esencial en la prestacin de la asistencia sanitaria. Cada da, los
trabajadores de la salud recolectan millones de muestras de sangre para realizar los anlisis de laboratorio,
incluyendo una amplia gama de analitos y de parmetros biolgicos para ayudar en el diagnstico y seguimiento
de un padecimiento o de una enfermedad. Una prueba de laboratorio se realiza en su mayor parte utilizando una
muestra de sangre del paciente, dicha muestra puede ser utilizada en una de las tres diferentes preparaciones,
sangre completa, plasma o suero, existiendo diversos criterios que determinan cual muestra es la ms adecuada
para el anlisis.

Obtencin de muestras de suero

La muestra de suero es obtenida a partir de sangre completa, la cual es separada
en sus diversos componentes mediante un proceso de centrifugacin, dicho
proceso es dividido en tres etapas principales: pre-centrifugacin, centrifugacin
y post-centrifugacin. Para poder llevar acabo la etapa de centrifugacin debe
haber finalizado el proceso de coagulacin de la sangre. Es muy importante
asegurarse de que la muestra de sangre ha coagulado completamente antes
de ser centrifugada.
Normalmente, el tiempo de espera para que la sangre coagule completamente
es de cuando menos 30 minutos. Sin embargo, los pacientes que estn con
terapia anticoagulante o aquellos con deficiencias en la coagulacin tendrn
procesos de coagulacin ms largos.

La muestra de suero est desprovista de

factores de coagulacin, pero enriquecida
con los componentes celulares y productos
metablicos de plaquetas.

Proceso de centrifugacin
10

30

Cmo puede ayudar BD?

Pre-centrifugacin

Centrifugacin

Post-centrifugacin

BD PAS MXICO, CENTROAMRICA Y CARIBE Volumen 4

La obtencin de muestras de suero

y sus retos

Tubos para la obtencin de suero

Tubos de tapn rojo

Es recomendable que la muestra de sangre para la obtencin de suero

sea extrada con un sistema cerrado al vaco, el cual incluye el tubo para
la recoleccin. Existen diferentes tubos al vaco con los cuales el laboratorio
clnico puede realizar la obtencin de muestras de suero, sin embargo, la
seleccin del tipo de tubo depende en gran medida de la toma de muestra,
del proceso del laboratorio (manual, automatizado o robotizado), del tiempo
de respuesta requerido para la emisin del resultado y de la prioridad para el
procesamiento de la muestra (muestras STAT/urgentes).

Adicionados con partculas de slice como activador de la

coagulacin, permiten la completa formacin de cogulo
en un periodo de 60 minutos. Ideales para procesos donde
no se requiere el uso de tubos primarios y en donde la etapa
de pre-centrifugacin puede establecerse en periodos ms
largos, teniendo un tiempo de contacto de suero/clulas
menor a 2 horas.
Tubos con gel separador

Por todo lo anterior, aunque la obtencin de muestras de suero es

aparentemente un procedimiento sencillo donde slo basta recolectar y
centrifugar la muestra, en realidad involucra mltiples variables que pueden
generar un gran impacto, afectando la estabilidad y calidad de la muestra,
la eficiencia del proceso y la confiablidad del resultado, implicando entonces
mltiples retos en la obtencin de muestras de suero al laboratorio clnico.

Contiene una barrera de gel inerte y estn adicionados con

partculas de slice para activar la coagulacin. Permiten la
completa formacin del cogulo en un periodo de 30 min.
Ideales para procesos automatizados donde se requiere el
uso de tubos primarios y en donde la muestra recolectada
involucra un tiempo de contacto suero/clulas mayor a 2
horas (toma de muestra en sucursales).
Tubos con trombina

Contienen una barrera de gel inerte y estn adicionados con

trombina como acelerador y activador de la coagulacin.
Permiten la completa formacin del cogulo en un tiempo
de 5 min. Ideales para procesos automatizados donde se
requiere el uso de tubos primarios y en donde la muestra
recolectada involucra un tiempo de contacto suero/
clulas menor a 2 horas (toma de muestra en sucursales)
y para muestras con una alta prioridad de proceso (STAT/
Urgentes) as como para uso con pacientes con terapia
anticoagulante o con tiempos largos de coagulacin.

Tiempo de centrifugacin
y fuerza centrfuga relativa (FCR)

Separadores de suero, activadores y

aceleradores de la coagulacin
Separadores de suero: son divididos en 2 categoras, los que se utilizan
para separar la muestra durante la etapa de centrifugacin como las barreras
de gel y los que se utilizan post-centrifugacin, como:
Barreras de gel: El uso de gel como barrera fsica inerte controla la
viscosidad y gravedad especfica, siendo un intermediario entre el suero y
el cogulo, evitando el contacto y contaminacin del suero con el paquete
celular. La formacin de la barrera de gel depende de la FCR que se aplique
al centrifugar, misma que es establecida por el fabricante y puede ir desde
1000g hasta 2500g.
Partculas de slice: Son adicionadas como un activador de coagulacin
en las paredes del tubo, su tiempo de accin ocurre en un periodo de 30 a
60 minutos.
Trombina: Es adicionada como acelerador y activador de la coagulacin
generando la completa formacin de cogulo en un tiempo de 5 minutos.
Todos estos sistemas estn disponibles en una gran variedad de tubos.

La centrifugacin de la muestra es una etapa fundamental para la obtencin

de muestras de suero con calidad. Las velocidades de centrifugacin sern
determinadas conforme a la fuerza centrfuga relativa (FCR) del tubo utilizado
y al tipo de centrfuga utilizada en el proceso. La FCR es expresada en
gravedades, siendo el trmino ms utilizado para determinar las revoluciones
por minuto (rpm). Las rpm por lo tanto son limitadas y dependientes del tipo
de tubo, modelo de centrfuga, rotor y cabezal especfico.
La FCR est relacionada con el ajuste de la velocidad de la centrfuga (rpm)
mediante la siguiente ecuacin:
rpm=

RCF x 105
1.2 x r

Donde r se expresa en cm y es la distancia radial desde

el centro del cabezal de la centrfuga hasta el fondo del tubo.

La centrifugacin se realiza comnmente entre 20 y 22 C, especialmente

si durante la centrifugacin incrementa la temperatura ocasionada por el
aumento en el nmero de rpm requeridas para la separacin de la muestra.
Por otro lado, los avances en la tecnologa incluyen separadores como las
barreras de gel y aditivos que proveen una adecuada separacin de la
muestra a diferentes velocidades y tiempos de centrifugacin, considerando
las propias necesidades del proceso de anlisis.

Sabas qu?
La importancia de la obtencin de la muestra de suero para el proceso de laboratorio clnico.
La obtencin de muestras de suero con calidad y la reduccin del tiempo
de respuesta para la entrega de resultados son iniciativas importantes para
muchos laboratorios clnicos. Estas iniciativas estn enfocadas principalmente
en acortar el intervalo de tiempo entre la extraccin de la muestra y la fase de
anlisis, sin afectar su calidad, involucran aspectos muy importantes que suelen
pasar desapercibidos y con frecuencia quedan fuera de control, teniendo un
impacto en todo el proceso de anlisis, as como en la calidad y confiabilidad
del resultado.
Un aspecto muy importante para la obtencin de suero es el tiempo de
espera para la formacin completa del cogulo, el cual, en condiciones
normales es de al menos 30 minutos. La necesidad de cumplir con este
tiempo, genera en el laboratorio la decisin de mantener o no a las
muestras en un tiempo de espera haciendo que el tiempo empleado
para la etapa de pre-centrifugacin de la muestra sea ms largo, lo que
afecta el proceso de anlisis haciendo que ste se retrase, impactando
directamente el tiempo de respuesta para la entrega de resultados. Este
impacto es an mayor cuando se trata de muestras de prioridad (STAT) o
de muestras urgentes que provienen de las reas de emergencia o terapia
intensiva donde el obtener un resultado en el menor tiempo posible es de
vital importancia.

Por otro lado, el tiempo requerido para la formacin completa del cogulo tendr tambin un impacto directo en la calidad de la muestra. Si este tiempo no
es el adecuado y la muestra es centrifugada antes de alcanzar la formacin
completa del cogulo, se tendr como resultado la obtencin de muestras de
suero con una pobre calidad y con presencia de contaminantes, principalmente
fibrina y hemolisis, por lo que el laboratorio se ver en la necesidad de re-centrifugar y reprocesar las muestras. Por lo anterior no slo se retrasar nuevamente
el proceso de anlisis y el tiempo de respuesta para la emisin de resultados
sino que tambin se podr incurrir en costos innecesarios por re-procesos.
De esta manera, la calidad y confiablidad de los resultados generados por el
laboratorio clnico son completamente dependientes del reconocimiento de
la presencia de la problemtica pre-analtica. La consecuencia de obtener
resultados errneos puede conducir a un diagnstico inapropiado y derivar en
una posible terapia inadecuada y en otros problemas prevenibles.
La obtencin de una muestra de suero de alta calidad ser por lo tanto, el
resultado de un adecuado y controlado proceso preanaltico de centrifugacin,
lo que implica que el laboratorio enfrente grandes retos en la obtencin de
muestras de suero de alta calidad para el anlisis y para mejorar la eficiencia en
el tiempo de respuesta para la entrega de resultados.

Incidencia de errores preanalticos y muestras comprometidas en el proceso de centrifugacin

Muestras con hilos de fibrina presentes en el suero
posterior a la centrifugacin

26%

74%

Muestras con hilos de fibrina suspendidos en el suero

Muestras comprometidas para las pruebas de qumica clnica

76%

24%

Muestras de suero limpias

Grfico 1. Calidad de muestra. % de muestras con presencia de hilos de fibrina

presentes en el suero posterior a la centrifugacin de un total de 42 muestras verificadas
en un hospital de 3er nivel.

Muestras con dos o ms errores preanalticos

Muestras sin errores preanalticos

Grfico 2. Muestras comprometidas. % de muestras comprometidas para las pruebas

de qumica clnica de un total de 42 muestras verificadas, de las cuales el 26% podra a
ocasionar un impacto en el desempeo del analizador.

Recomendaciones del CLSI para la obtencin de las muestras de suero

Pre-centrifugacin
P Los tubos deben ser invertidos suavemente de 5 a 10 veces para mezclar el contenido con el aditivo, esto evitar la formacin de fibrina posterior a la

centrifugacin.

P Mantener a los tubos en una posicin vertical para promover la completa formacin del cogulo disminuyendo la agitacin del tubo, esto prevendr la

formacin de fibrina por la adhesin del cogulo al tapn del tubo as como el potencial de hemolisis.

P Las muestras no centrifugadas enviadas al laboratorio para anlisis, debern llegar en un tiempo lmite para ser centrifugadas y proteger la estabilidad de

los metabolitos. De no ser posible, la muestra debe ser centrifugada en el sitio donde se realiz la recoleccin, posteriormente enviar la muestra separada
al laboratorio bajo las condiciones apropiadas.

Centrifugacin
P Las muestras debern estar completamente coaguladas antes de la centrifugacin (30 min). Rodear el cogulo con un aplicador para desprenderlo de las

paredes del tubo no es recomendable ya que incrementa el potencial de hemolisis.

P Determinar las rpm requeridas para centrifugar el tubo siguiendo las recomendaciones del fabricante ya que los tubos pueden requerir diferentes

velocidades y tiempos de centrifugacin.

P Aumentar las rpm para acelerar la separacin puede ocasionar un calentamiento excesivo en la centrfuga, lo que afectar la estabilidad de la muestra

y el desempeo del tubo.

Post-centrifugacin
P La muestra de suero debe ser fsicamente separada del contacto con las clulas tan pronto como sea posible, esto a menos de que exista evidencia

concluyente que indique que los periodos largos de contacto no contribuyen a un error en el resultado. El tiempo de contacto no debe ser mayor a
2 hrs, para ello es recomendable el uso de separadores.

P Los tubos primarios no deben ser re-centrifugados. Algunas mediciones, principalmente el potasio, pueden resultar en valores falsamente incre-

mentados. Si la re-centrifugacin es requerida el suero debe ser transferido a otro tubo para ser centrifugado.

P Para el uso de tubos con separadores como la barrera de gel es importante seguir las recomendaciones del fabricante.
P El laboratorio debe establecer los criterios para el rechazo de muestras no adecuadas para el anlisis. Lo anterior cuando se tenga una incorrecta

identificacin de la muestra, un inapropiado volumen, el uso de tubos no adecuados, presencia de hemolisis y un inapropiado almacenamiento y
transportacin.

Cmo puede ayudar BD?

Los diversos retos que enfrentan los trabajadores de laboratorio clnico para el procesamiento de las muestras de sangre para la obtencin de suero, han
sido documentados en la literatura cientfica, ayudando a comprender y mejorar el control de la problemtica especfica relacionada al tiempo de espera
para la adecuada y completa formacin del cogulo, el contacto prolongado de la muestra de suero con las clulas, la presencia de hemolisis, el uso de
aditivos y de dispositivos de separacin de suero.
Una parte fundamental para la obtencin de muestras de suero con calidad es el reconocimiento y control de las variables que afectan el proceso de
obtencin, lo que ayudar a reducir las fuentes de error y contribuir a la prctica mdica de los resultados de las pruebas del paciente.
BD comprende la importancia de un resultado a partir de la obtencin de muestras de suero, ofreciendo soluciones que favorezcan la disminucin y el
control de variables que afectan en el proceso preanaltico para la obtencin de muestras de suero.
Seleccionar adecuadamente los tubos para la obtencin de suero teniendo como base el mismo proceso en el laboratorio clnico, as como el adecuado
proceso para la centrifugacin, separacin y transporte de las muestras, contribuir en gran medida a mejorar la eficiencia del proceso y la calidad del
resultado.
Por todo ello, y como parte del compromiso de apoyar a la mejora de los procedimientos de recoleccin de muestras y a la calidad de las muestras de
suero, BD ofrece tubos para la obtencin de muestras de suero diseados para las diferentes necesidades de recoleccin y de proceso del laboratorio
clnico. Estos tubos contienen activadores y aceleradores de coagulacin para una adecuada y completa formacin del cogulo, as como barreras de gel
que protegen la muestra de suero del contacto prolongado con las clulas, adems de poder ser utilizados como tubos primarios para la mayora de los
sistemas automatizados proporcionando beneficios y soluciones a los retos que rodean a la obtencin de la muestra de suero:

Muestra de mejor calidad

Tiempos de respuesta cortos
Seguridad del paciente y del trabajador de la salud
Satisfaccin del paciente
Optimizacin de recursos

Referencias:
H18-A4 Procedures for the Handling and Processing of Blood Specimens for Common Laboratory Test; Approved Guideline- Fourth Edition, Vol. 30 No. 10.
Heparin Plasma Testing in Clinical Chemistry, Archivo BD, VS7584.
Phlebotomy Handbook, Diana Garza, Kathleen Becan-McBride, fourth edition, 1996.
W.G. Guder, S. Narayanan, H. Wisser, B Zawta. Samples: From the Patient to the Laboratory. GitVerlag.
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