URI UNIVERSIDADE REGIONAL INTEGRADA DO ALTO URUGUAI E DAS

MISSES
CAMPUS DE FREDERICO WESTPHALEN
PR - REITORIA DE ENSINO
DEPARTAMENTO DE CINCIAS EXATAS E DA TERRA
CURSO DE QUMICA INDUSTRIAL

RELATRIOS DE PROCEDIMENTOS EXPERIMENTAIS

NEILA PEREIRA

Frederico Westphalen,julho de .2014

NEILA PEREIRA

RELATRIOS DE PROCEDIMENTOS EXPERIMENTAIS

Relatrio de Procedimentos Experimentais realizado

na disciplina de Microbiologia e Controle de Qualidade,
realizados no Laboratrio de Microbiologia, do Departamento
de Cincias Exatas e da Terra da URI Campus

Professor: Cassiano Bussata

Frederico Westphalen, julho de 2014

Sumrio

Contagem total de microorganismos aerbios mesfilos, termfilos

e psicotrficos..................................................................................
Introduo........................................................................................
Discusso dos resultados..................................................................
Concluso..........................................................................................
Bibliografia........................................................................................
Teste de Antibiograma.......................................................................
Introduo..........................................................................................
Referencial Terico............................................................................
Metodologia.......................................................................................
Concluso...........................................................................................
Bibliografia.........................................................................................

Objetivo
Determinar a contagem de microorganismos aerbios mesfilos, psicrficos e
termfilos em alimentos.
Materiais necessrios:
- gua peptonada (frasco com 225mL e tubos com 9 Ml)
- Placas com PCA (Plate Count Agar)
- gar PCA
- Pipetas sorolgicas de 1mL
- Semeador
- Agitador de tubos
- Cmara de fluxo laminar
- Etanol 70%
- Bico de Bunsen
- Placas de Petri estreis vazias
- Estufa regulada a T] = 35C + 2C, T = 7C=-+- 1C, T = 55 +-2C, T =32C +-1C
Procedimento:
O mtodo de contagem de microorganismos em placas um mtodo geral, que pode
ser utilizado tanto para a contagem de grandes grupos microbianos, como os aerbios
mesfilos psicotrficos, termfilos, os bolores e leveduras e os clostrdios sulfito
redutores, dentre outros, como tambm para a contagem de gneros e espcies em
particular, como Staphylococcus aureus, Bacillus cereus e Clostridium perfringens, por
exemplo. Essa versatilidade decorrente do princpio do mtodo, que se baseia na
premissa de que cada clula microbiana presente em uma amostra ir formar, quando
fixada em um meio de cultura slido adequado, uma colnia visvel e isolada. Variando
o tipo de meio ( meio de enriquecimento, meio seletivo, meio seletivo-diferencial) e as
condies de incubao (temperatura e atmosfera), possvel selecionar o grupo, gnero
ou espcie que se deseja contar. Como as clulas microbianas muitas vezes ocorrem em
agrupamentos (pares, ttrades, cachos, cadeias, etc.), no possvel estabelecer uma
relao direta entre o numero de colnias e o nmero de clulas A relao correta feita
entre o nmero de colnias e o nmero de unidades formadoras de colneas (UFC),
que podem tanto ser clulas individuais como agrupamentos caractersticos de certos

microorganismos. Nos alimentos processados, a contagem padro demonstra o nvel

geral de higiene durante a fabricao, condies de armazenamento e transporte, etc,
daquele alimento, enquanto em produtos no processados pode ter indicador da
qualidade do alimento A preciso do mtodo por ser limitada pela incapacidade de
alguns microorganismos forma em colnias visveis no meio e condies utilizadas,
como tambm, pela presena de substncias inibidoras produzidas por microorganismos
da prprio alimento durante o crescimento no gar. Quando presentes em nmero
elevados, os psicotrficos podem causar uma variedade de alteraes em produtos
conservados sob refrigerao. A maioria dos organismos psicotrficos so destrudos
pelo calor, portanto, sua presena pode significar subprocessamento trmico ou
contaminao ps-processamento em produtos pasteurizados. A elevao do seu
nmero est associada a uma estocagem prolongada sob refrigerao ou manuteno a
frio inadequada ou ainda, pode significar risco de alterao tanto para produtos
processados como no processados. Microorganismos termfilos so aqueles que
podem sobreviver de forma significativa ao tratamento trmico. Usualmente o
tratamento trmico inclui temperaturas de pasteurizao ou superiores. A presena de
termfilos em grande nmero est relacionada com a qualidade higinica de matriaprima ou processamento trmico insuficiente.

Preparao das amostras e diluies:

- Usou-se 6 tubos de ensaio que continham 9 ml de gua peptonada cada;
-Dois tubos de ensaio contendo duas espcies bacterianas E.Coli e S. aureu.
-Os tubos de ensaio contendo gua peptonada foram enumerados 10(-1,-2,-3,-4,-5 e -6)
-Em seguida foi pego 9 placas de Petri contendo PCA, enumeradas da seguinte maneira,
10(0) duas placas10 (-1,-2,-3,-4,-5,-6).
-O bico de Bunsen foi aceso para no haver contato com as bactrias.
-Foi pego o tubo contendo as bactrias e posto no agitador de tubos para misturar a
amostra e em seguida pipetamos 1mL e colocado na placa de 10 (0) e espalhado com a
ala de Ag e no tubo 10(-1) e agitado.
-Com a mistura do tubo 10(-1) foi pipetado 1 mL e posto na placa 10(-1) e pipetado
novamente para colocar no tubo 10(-2).
-Com a mistura do tubo 10(-2) pipetamos um mL e posto nas duas classes 10(-3) e no
tudo 10 (-4)
-Com a mistura do tubo 10(-3) pipetamos 1 mL e colocamos nas duas placas 10(-3) e no
tubo 10(-4)

-Com a mistura do tubo 10(-4) pipetamos 1 mL e colocamos mais duas placas 10(-4)
pipetamos 1 mL e colocamos mais duas, placas 10(-4) e no tubo 10(-4) e no tubo 10(-5)
-Com a mistura do tubo 10(-5), pipetamos 1 mL e colocamos nas duas placas 10(-5) e
no tubo 10(-5)
Em seguida as placas foram colocadas na estufa,onde permaneceu pelas prximas 24
horas.
Contagem:
-Foi pego as placas com numerao 10 (-5 e -6) para fazer a contagem de colnias e as
placas foram divididas em duplicatas para facilitar nas contagens;
-Na primeira placa foram contadas 618, somando um total de 1036;
-Na segunda placa foram 555 por quadrante, totalizando 2220
- A mdia das duas placas ficou: 1036+2220= 3250/2= 1628 UFC/Ml ou 1,62x10(8)
Resultado e Concluses:
A placa que continha o nmero de colnias dentro dos limites de colnias, foi a de
diluio 10-5. O nmero de colnias encontradas foi de 1628, o que significa que nessa
amostra , tnhamos 1,62 x 10-8 UFC/g. A Instruo Normativa 51 do Ministrio da
Agricultura, impe um valor mximo de 3 x 105 UFC/g para os microrganismos
mesfilos aerbios estritos, o que significa que a amostra analisada est dentro dos
padres estabelecidos.

Bibliografia

Teste de Antibiograma
Objetivo:
Verificar se as colnias de bactrias so sensveis a antibiticos ou no analisando o
espectro de sensibilidade/resistncia a drogas de uma bactria quanto a determinao da
concentrao mnima inibitria.
Materiais necessrios:
- Discos de antibiograma
- Uma colnia de bactrias (Staphylococcus aureus)
- Placas com PCA
- Estufa
-Bico de Bunsen
-Espalhador
-Tabelas com os valores esperados de halos inibitrios
Procedimento:
Para inicio temos que ter o meio de cultivo que so denominados de Agar, e o Agar
utilizado para a realizao do teste de antibiograma o Agar Mueller Hinton, que
adicionado placa de Petri.
-Foi embebedado swab em uma soluo bacteriana, em seguida foi espalhado
suavemente em todas as direes da placa. Aguardou-se uns minutos at a superfcie do
gar secar.
Com o auxlio de uma pina flambada e resfriada colocar os discos de papel
impregnados com antibiticos e concentrao padronizada sobre a superfcie do meio
inoculado, exercendo uma leve presso com a ponta da pina para uma boa adeso dos
discos.
As placas foram incubadas na estufa. Na semana seguinte, com o auxlio de uma rgua,
mediu-se os dimetros dos halos inibitrios de cada disco e consultou-se a tabela
apropriada para identificar se a bactria em anlise sensvel, intermedirio ou
resistente ao antimicrobiano testado.

Staphylococcus aureus:
ANTIBITICO
BAC 10
OXA 01
CLO 30
ATM 30
NOV 30

HALO
16 mm
13 mm
11 mm
6 mm
17 mm

PARECER
Resistente
Intermedirio
Intermedirio

Resultados e concluses
O teste realizado houve algumas borras, pois no foi bem espalhado, houve formao de
halo de inibio, pois o antibitico presente no disco foi eficiente contra algumas
bactrias. J em outras no houve nenhuma ao.
O antibiograma um teste laboratorial realizado para detectar com mais preciso a
bactria a ser eliminada, dizendo em melhores palavras e mais simples, um exame que
ir verificar por meios de tcnicas especificas a bactria que esta hospedada no paciente
e causando sintomas especficos. O resultado deste teste pode demorar de quatro a cinco
dias. As amostras que podem ser utilizadas para realizao do teste so: saliva, sangue,
urina, fezes, tecidos ou expectorao.
O antibiograma e um teste laboratorial de suma importncia para auxiliar o mdico a ter
uma melhor direo para saber qual o medicamento correto a prescrever para o paciente,
pois, com este exame ele saber se a bactria pesquisada est sensvel ou resistente aos
antimicrobianos testados no antibiograma. Com este teste, o mdico tem menos chances
a erros de prescrio, de no prescrever um medicamento em que a bactria j seja
resistente a este, e obtendo assim um tratamento eficiente e rpido.

Bibliografia
http://www.portaleducacao.com.br/farmacia/artigos/38901/antibiograma-o-quee#ixzz35W1vA0BR