ESTADSTICA EN QUMICA

INSTRUCCIONES PARA EL TRABAJO 2

Anlisis de varianza para estudiar la velocidad de extraccin del colorante de la

remolacha
Este trabajo busca desarrollar habilidades tanto en aspectos experimentales como en el
tratamiento de los datos, para una situacin que aparece frecuentemente en el quehacer
investigativo: la distincin de relaciones causa-efecto. Hay que comparar efectos para
distinguir entre estos, el causado por el ruido y el causado por una variable especfica. Se
desea saber si el cambio que se registra en la respuesta de un experimento est ligado
directamente al cambio hecho deliberadamente en una variable experimental, o si se origina
simplemente por una fluctuacin debida al azar, al cambio aleatorio de las variables que no
estn bajo control y que en conjunto constituyen el error experimental. El conjunto de
parmetros y herramientas empleados para facilitar estas conclusiones se denominan
anlisis de la varianza y se abrevian como ANOVA, por sus siglas en ingls (analysis of
variance). El proceso a estudiar en este trabajo es la extraccin lquido-slido del colorante
de la remolacha. El observable es la velocidad de extraccin del colorante. Esta velocidad
se determina a partir de mediciones de la absorbancia de la solucin extractora, en funcin
del tiempo. La velocidad de cambio de la absorbancia es directamente proporcional a la
velocidad de extraccin del colorante. El montaje experimental consiste en un tubo de
ensayo que se coloca en un bao de temperatura constante y que contiene cierta cantidad
conocida de remolacha sumergida en una solucin de extraccin de composicin conocida.
Los fragmentos de remolacha actan en este experimento como contenedores de colorante,
que se halla en vacuolas dentro de las clulas. Al cortar la remolacha para obtener estos
fragmentos, se cortan paredes celulares y con esto se libera algo de colorante. Por esto, en
la preparacin de los materiales para el experimento, hay que cortar la remolacha un da
antes y dejar los fragmentos en agua durante la noche, para retirar todo el colorante que
haya quedado libre. De esta forma, durante el experimento, toda coloracin de la solucin
puede atribuirse a que se modific la permeabilidad de la pared celular y el colorante de la
solucin solamente proviene del interior de las clulas.
Se estudiar el efecto de 5 variables sobre la velocidad de la extraccin. Los experimentos
sern realizados por grupos de estudiantes. Cada grupo estudiar un conjunto diferente de
tres de las 5 variables, mientras que mantiene en un nivel fijo (un valor intermedio) las dos
variables restantes. Los entregables o resultados que se espera encontrar en el informe
son:
- El estudio de la existencia de datos anmalos y su tratamiento.
- El anlisis de la varianza y sus conclusiones.
- La comparacin del error experimental determinado con base en los duplicados, con el
error experimental determinado segn las rplicas del punto central.
Las 5 variables a estudiar son:
1. Fraccin de etanol en agua
2. Temperatura (0, 20 y 40C)
3. Cantidad de NaCl
4. Cantidad de detergente
5. Cantidad de vinagre
En la Tabla 1 aparecen los integrantes de cada grupo y las 3 variables asignadas para
estudio. En cada caso, las 2 variables que no son objeto de estudio por el grupo, tomarn un

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valor fijo, equivalente al valor del nivel intermedio, codificado como 0. La Tabla 2 es la lista
de soluciones empleadas para combinar y obtener los diferentes niveles de las variables. La
Tabla 3 describe los 20 experimentos a realizar por cada grupo de estudiantes. Aparecen 5
columnas para las variables de la extraccin del colorante de la remolacha. Las 2 primeras
variables, de izquierda a derecha, corresponden a las que el grupo no va a estudiar y se
mantienen en el nivel 0 (nivel intermedio). Las siguientes 3 variables son las asignadas al
grupo y toman niveles de 1 o -1 para las primeras 8 combinaciones y de 0 para los
experimentos del punto central. Para las variables etanol, NaCl, vinagre y detergente, los
niveles bajo (-1), intermedio (0), y alto (1), se obtienen al tomar 1, 2, o 3 mL de la solucin
correspondiente de la Tabla 2. En todos los casos, el volumen se completa a 13 mL con
agua. Cada experimento se realiza en un tubo de ensayo que se mantiene en un bao de
agua de temperatura constante. Para el xito del experimento es de gran importancia lograr
esta temperatura efectivamente constante.
Tabla 1. Composicin de los grupos y variables a estudiar.
Grupo Integrantes
Variables
1
Toro Londoo Marlly Lorena
Temperatura, etanol, NaCl
Prez Silva Ana Milena
2
Daniela Carolina Monsalve Lpez
Temperatura, NaCl, detergente
Esteban David Plata Caballero
3
Jonathan Jose Ramirez Navarro
Temperatura, NaCl, vinagre
Linda Lorena Garca Galn
4
Angelica Natalia Riao Castaeda
Temperatura, etanol, detergente
Jose Leonardo Guerrero Nio
5
Laura Nathalia Diaz Rozo
Temperatura, etanol, vinagre
Leidy Lorena Galeano Tirado
6
Gladys Roco Cepeda Marn
Temperatura, vinagre, detergente
Luis Eduardo Acua Garcia
7
Michell Andrey Jimnez Caballero
Detergente, NaCl, vinagre
Juan Sebastin Serrano Garca
8
Carlos David Crdenas Vega
Etanol, NaCl, vinagre
Vctor Alfonso Delgado Bolaos
Tabla 2. Soluciones base para condiciones
experimentales
N
Solucin
A Agua
B Vinagre blanco
C Solucin de sal saturada 36 g /100 mL
D Etanol al 70%
E Solucin de detergente, 0,1%
Tabla 3 Diseo experimental a realizar por cada grupo de estudiantes
DISEO EXPERIMENTAL 23 con duplicado y cuatro rplicas en el centro

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Experimento Variable no
N
estudiada 1
1-2
0
3-4
0
5-6
0
7-8
0
9-10
0
11-12
0
13-14
0
15-16
0
17
0
18
0
19
0
20
0

Variable no
estudiada 2
0
0
0
0
0
0
0
0
0
0
0
0

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Variable
estudiada 1
-1
-1
1
1
-1
1
-1
1
0
0
0
0

Variable
estudiada 2
-1
1
1
-1
-1
-1
1
1
0
0
0
0

Variable
estudiada 3
-1
-1
-1
-1
1
1
1
1
0
0
0
0

Un aspecto experimental importante es el montaje de un bao de agua en el que los tubos de

ensayo se vayan a mantener con algn sistema de soporte estable. Para lograr una
estabilidad trmica aceptable, la cantidad de agua en el bao debe superar 1 L. Primero se
establece el soporte para los tubos, luego se agrega el agua y se inicia el calentamiento.
Cuando se alcanza en el bao la temperatura deseada, se sumergen en ste los tubos de
ensayo.
La desviacin estndar relativa que se calcula con las rplicas debe ser menor del 10%.
Normalmente, la causa de las desviaciones relativas grandes es la inestabilidad de la
temperatura. El procedimiento recomendado es el siguiente: Una vez sumergidos los tubos,
llenos con la mezcla de soluciones A a E hasta 13 mL, pero sin remolacha, se espera hasta
que el termmetro muestre que la temperatura del bao est estable en el nivel deseado. Se
dejan transcurrir por lo menos 10 minutos para que los tubos alcancen la temperatura del
bao. Se procede entonces a agregar los fragmentos de remolacha y se registra este
momento como el tiempo cero del experimento. Otro aspecto a controlar para reducir el error
experimental es la cantidad de remolacha y la uniformidad de los fragmentos. Se requiere
que en cada tubo haya la misma cantidad de remolacha y que su rea superficial sea la
misma. Para esto, se utiliza un sacabocados con el que se obtienen cilindros de remolacha,
que se cortan a una longitud fija (15 mm) para usar en todos los experimentos.
Cada grupo de trabajo tiene libertad sobre la manera de realizar el montaje experimental y
sobre el procedimiento a utilizar para determinar la velocidad de la extraccin.
El tratamiento de los datos busca establecer cules son los efectos significativos y cul es su
tamao.
_________________________________________________________________________
Optimizacin del rendimiento de extraccin del colorante de la remolacha
En continuacin al anlisis de varianza realizado en el trabajo 2, este trabajo permite
desarrollar habilidades tanto en aspectos experimentales como en el tratamiento de los
datos, para la optimizacin de la extraccin liquido-slido del colorante de la remolacha. Se
ilustran en este caso el diseo factorial fraccionario y la metodologa simplex. En una
primera etapa se utiliza un diseo factorial fraccionario para encontrar entre 5 variables,

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cules son las 2 que mayor efecto tienen sobre el rendimiento de la extraccin. En la
segunda etapa se utiliza el procedimiento de optimizacin simplex para determinar de
manera emprica las condiciones que permiten alcanzar el mayor valor del rendimiento. El
observable es la velocidad de extraccin del colorante. Esta velocidad se determina a partir
de mediciones de la absorbancia de la solucin extractora, en funcin del tiempo. La
velocidad de cambio de la absorbancia es directamente proporcional a la velocidad de
extraccin del colorante. El montaje experimental consiste en un tubo de ensayo que se
coloca en un bao de temperatura constante y que contiene cierta cantidad conocida de
remolacha sumergida en una solucin de extraccin de composicin conocida.
Se estudiar el efecto de las siguientes 5 variables sobre la velocidad de la extraccin
1. Porcentaje de etanol en agua
2. Temperatura (0, 20 y 40C)
3. Cantidad de NaCl
4. Concentracin de agente tensoactivo (detergente)
5. pH
Cada experimento se realiza en un tubo de ensayo que se mantiene en un bao de agua de
temperatura constante. Para el xito del experimento es de gran importancia lograr esta
temperatura efectivamente constante. Un aspecto experimental clave es el montaje de un
bao de agua en el que se van a mantener con algn sistema de soporte estable los tubos
de ensayo. Para lograr una estabilidad trmica aceptable, la cantidad de agua en el bao
debe superar 1 L. Primero se establece el soporte para los tubos, luego se agrega el agua y
se inicia el calentamiento. Cuando se alcanza en el bao la temperatura deseada, se
sumergen en ste los tubos de ensayo.
La desviacin estndar relativa que se calcula con las rplicas debe ser menor del 10%.
Normalmente, la causa de las desviaciones relativas grandes es la inestabilidad de la
temperatura. El procedimiento recomendado es el siguiente: Una vez sumergidos los tubos,
se espera hasta que el termmetro muestre que la temperatura del bao est estable en el
nivel deseado y se dejan transcurrir unos 10 minutos para que los tubos alcancen la
temperatura del bao. Se procede entonces a agregar los fragmentos de remolacha y se
registra este momento como el tiempo cero del experimento.
Cada grupo de trabajo tiene libertad sobre la manera de realizar el montaje experimental y
sobre el procedimiento a utilizar para determinar la velocidad de la extraccin.
El tratamiento de los datos busca establecer cules son los efectos significativos y cul es su
tamao, por el mtodo de los productos punto. Si se aplica un diseo factorial con 2 niveles y
duplicado, el nmero de experimentos a realizar es 64. Debido a que esto requiere bastante
tiempo, se puede hacer un nmero menor de experimentos, aunque con el costo de perder
algo de informacin. La primera reduccin consiste en no hacer duplicados. A cambio, se
hacen rplicas en el punto central (todas las variables se usan en su nivel intermedio), para
estimar el error experimental. En lugar de hacer 32 duplicados, se hacen 5 repeticiones del
experimento en el punto central. En este caso, se sacrifica el detalle de la determinacin del
error experimental en cada punto experimental y se trabaja bajo la suposicin de que el
tamao del error experimental en el punto central es el mismo en todos los otros puntos. As
las cosas, el nmero de experimentos a realizar sera de 32+5 = 37, que todava es un
nmero alto. Una siguiente reduccin es hacer la mitad de los experimentos del diseo

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factorial. O sea, hacer 16 en lugar de los 32. Esto se conoce como diseo factorial
fraccionario. El costo es la prdida de informacin, porque los efectos que se calculan con
estos datos son efectos combinados o confundidos. Dependiendo de cules son los 16
experimentos que s se realizan, se obtienen diferentes combinaciones de efectos. En lo que
se denomina resolucin III, los efectos binarios como X 1X2, se confunden con los efectos
primarios (X1, X2). En la resolucin IV, se confunden entre s los efectos binarios. La que
es ms conveniente es la resolucin V, porque all los efectos binarios se confunden con los
ternarios y los efectos primarios se confunden con los cuaternarios, pero no hay confusin
entre primarios y secundarios, que son los ms importantes. En muchos sitios de internet
aparecen los detalles de cmo saber cules son los experimentos a realizar para lograr una u
otra resolucin. Un ejemplo es el siguiente sitio, del instituto nacional de estndares de los
EE.UU.
(NIST):
http://www.itl.nist.gov/div898/handbook/pri/section3/pri334.htm
(y
subsecciones siguientes a esta pgina). Para este trabajo, se utilizar la tabla de
experimentos para el diseo factorial fraccionario 2 5-1 (la mitad del diseo factorial para 5
variables) con resolucin V, que aparece en el manual del NIST.
Tabla 1. Diseo experimental factorial fraccionario para 5 variables en 2 niveles, con
resolucin V.
X1
X2
X3
X4
X5
--------------------------------------------1
-1
-1
-1
+1
+1
-1
-1
-1
-1
-1
+1
-1
-1
-1
+1
+1
-1
-1
+1
-1
-1
+1
-1
-1
+1
-1
+1
-1
+1
-1
+1
+1
-1
+1
+1
+1
+1
-1
-1
-1
-1
-1
+1
-1
+1
-1
-1
+1
+1
-1
+1
-1
+1
+1
+1
+1
-1
+1
-1
-1
-1
+1
+1
+1
+1
-1
+1
+1
-1
-1
+1
+1
+1
-1
+1
+1
+1
+1
+1
Cada grupo aplicar el diseo factorial fraccionario que aparece en la Tabla 1, para las 5
variables y adems realizar 5 rplicas del experimento 0 0 0 0 0 para estimar el error
experimental. La diferencia de un grupo de estudiantes a otro, es cul es el significado de X 1
a X5 en cada caso. La Tabla 2 contiene la informacin sobre cul es para cada grupo la
correspondencia entre las variables X1 a X5 de la Tabla 1 y las 5 variables. El procesamiento
de los datos para el anlisis de la varianza se realiza por el procedimiento de los productos
vectoriales con columnas de signos. Para cada uno de los efectos primarios, binarios, etc., se
construye una columna de signos y el efecto es el producto punto con el vector y, dividido
por la mitad del nmero de experimentos (8). Para saber cules efectos son significativos se
aplica la prueba F o se utiliza el grfico de distribucin normal.

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Tabla 2. Composicin de los grupos y variables a estudiar.

Grupo
Integrantes
X1, X2, X3, X4, X5
MARLLY LORENA TORO LONDOO, ANA
1
Temperatura, fuerza inica,
MILENA PEREZ SILVA
%EtOH, pH, detergente
DANIELA CAROLINA MONSALVE LOPEZ,
2
Temperatura, detergente, fuerza
ESTEBAN DAVID PLATA CABALLERO
inica, %EtOH, pH
LINDA LORENA GARCIA GALAN, JONATHAN Temperatura, detergente, %EtOH,
3
JOSE RAMIREZ NAVARRO
pH, fuerza inica
4
Temperatura, pH, fuerza inica,
LAURA NATHALIA DIAZ ROZO, ANGELICA
detergente, %EtOH
NATALIA RIAO CASTAEDA
5
Temperatura, pH, %EtOH,
LEIDY LORENA GALEANO TIRADO, JOSE
detergente, fuerza inica
LEONARDO GUERRERO NIO
6
Temperatura, pH, detergente,
LUIS EDUARDO ACUA GARCIA, GLADYS
%EtOH, fuerza inica
ROCIO CEPEDA MARIN
MICHELL
ANDREY
JIMENEZ
CABALLERO,
7
Temperatura, %EtOH, fuerza
JUAN SEBASTIAN SERRANO GARCIA
inica, detergente, pH
VICTOR
ALFONSO
DELGADO
BOLAOS,
8
Temperatura, %EtOH, pH,
CARLOS DAVID CARDENAS VEGA
detergente, fuerza inica
La Tabla 3 es la lista de soluciones empleadas para combinar y obtener los diferentes niveles
de las variables. Para las variables etanol, NaCl (fuerza inica), jugo de limn (pH), y
detergente (tensoactividad), los niveles bajo (-1), intermedio (0), y alto (1), se obtienen al
tomar 1, 2, o 3 mL de la solucin correspondiente de la Tabla 3. En todos los casos, el
volumen se completa a 13 mL con agua. Cada experimento se realiza en un tubo de ensayo
que se mantiene en un bao de agua de temperatura constante.
Tabla 3. Soluciones base para condiciones
experimentales
N
Solucin
A Agua
B Jugo de limn
C Solucin de sal saturada 36 g /100 mL
D Etanol al 70%
E Solucin de detergente, 1%
Una vez se conoce cules son los efectos significativos, se toman las 2 variables que ms
efecto tienen sobre la velocidad de extraccin. Con base en los valores ya medidos de esta
velocidad, se seleccionan los niveles de las otras 3 variables, de forma que la regin de
trabajo corresponda a un valor alto de la velocidad de extraccin. Dentro de esta zona se
aplica el procedimiento simplex para modificar sistemticamente los valores de los 2
factores seleccionados y buscar las condiciones bajo las que se obtiene el valor mximo de
la velocidad de extraccin del colorante de la remolacha.
Los entregables o resultados que se espera encontrar en el informe son:
- El estudio de la existencia de datos anmalos y su tratamiento.

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El anlisis de la varianza y sus conclusiones sobre cules efectos son significativos.

La descripcin detallada de los pasos seguidos para hallar el punto ptimo por medio
del procedimiento simplex.