PROYECTOINTEGRADO

DELABORATORIO
CURSO4ESO
DEPARTAMENTO
BIOLOGAGEOLOGA

ELABORADOPOR:

MDOLORESMARTNEZCUEVAS
MDELMARMOREDAMORENO

BLOQUEI
TCNICASGENERALES

Normas generales de uso del laboratorio

Para el desarrollo de las prcticas es conveniente tener en cuenta algunas normas elementales
que deben ser observadas con toda escrupulosidad.
1. Antes de realizar una prctica, debe leerse detenidamente para adquirir una idea clara de su
objetivo, fundamento y tcnica. Los resultados deben ser siempre anotados cuidadosamente
apenas se conozcan.
2. El orden y la limpieza deben presidir todas las experiencias de laboratorio. En consecuencia, al
terminar cada prctica se proceder a limpiar cuidadosamente el material que se ha utilizado.
3. Cada grupo de prcticas se responsabilizar de su zona de trabajo y de su material.
4. Antes de utilizar un compuesto hay que fijarse en la etiqueta para asegurarse de que es el que
se necesita y de los posibles riesgos de su manipulacin.
5. No devolver nunca a los frascos de origen los sobrantes de los productos utilizados sin
consultar con el profesor.
6. No tacar con las manos y menos con la boca los productos qumicos.
7. Todo el material, especialmente los aparatos delicados, como lupas y microscopios, deben
manejarse con cuidado evitando los golpes o el forzar sus mecanismos.
8. Los productos inflamables (gases, alcohol, ter, etc.) deben mantenerse alejados de las llamas
de los mecheros. Si hay que calentar tubos de ensayo con estos productos, se har al bao
Mara, nunca directamente a la llama. Si se manejan mecheros de gas se debe tener mucho
cuidado de cerrar las llaves de paso al apagar la llama.
9. Cuando se manejan productos corrosivos (cidos, lcalis, etc.) deber hacerse con cuidado para
evitar que salpiquen el cuerpo o los vestidos. Nunca se vertern bruscamente en los tubos de
ensayo, sino que se dejarn resbalar suavemente por su pared.
10. Cuando se quiera diluir un cido, nunca se debe echar agua sobre ellos; siempre al contrario:
cido sobre agua.
11. Cuando se vierta un producto lquido, el frasco que lo contiene se inclinar de forma que la
etiqueta quede en la parte superior para evitar que si escurre lquido se deteriore dicha etiqueta
y no se pueda identificar el contenido del frasco.
12. No pipetear nunca con la boca. Se debe utilizar la bomba manual, una jeringuilla o artilugio
que se disponga en el Centro.
13. Las pipetas se cogern de forma que sea el dedo ndice el que tape su extremo superior para
regular la cada de lquido.
14. Al enrasar un lquido con una determinada divisin de escala graduada debe evitarse el error
de paralaje levantando el recipiente graduado a la altura de los ojos para que la visual al enrase
sea horizontal.
15. Cuando se calientan a la llama tubos de ensayo que contienen lquidos debe evitarse la
ebullicin violenta por el peligro que existe de producir salpicaduras. El tubo de ensayo se
acercar a la llama inclinado y procurando que sta acte sobre la mitad superior del contenido
y, cuando se observe que se inicia la ebullicin rpida, se retirar, acercndolo nuevamente a
los pocos segundos y retirndolo otra vez al producirse una nueva ebullicin, realizando as un
calentamiento intermitente. En cualquier caso, se evitar dirigir la boca del tubo hacia la cara o
hacia otra persona.
16. Cualquier material de vidrio no debe enfriarse bruscamente justo despus de haberlos
calentado con el fin de evitar roturas.
17. Los cubreobjetos y portaobjetos deben cogerse por los bordes para evitar que se engrasen.

Preparacin de colorantes
1. Acido-Alcohol: (decolorante para tincin Ziehl-Neelsen)
o cido clorhdrico concentrado ..........................................................3 ml
o Etanol 95% ....................................................................................97 ml
2. Azul de metileno: Colorante de contraste para tincin de flagelos.
o Azul de metileno................................................................................1 g
o Agua destilada...............................................................................100 ml
3. Azul de metileno de Loeffler: Tinciones simples.
o Solucin de hidrxido potsico al 1%.................................................1 ml
o Azul de metileno, sol. saturada en etanol al 95%...............................30 ml
o Agua destilada...............................................................................100 ml
4. Colorante para esporas:
o Solucin acuosa saturada de verde malaquita
5. Colorante para flagelos de Leifson:
o Solucin A
Fucsina bsica .........................................................................1,2 g
Etanol 95%.............................................................................100 ml
o Solucin B
cido tnico................................................................................3 g
Agua destilada.........................................................................100 ml
o Solucin C
Cloruro sdico..........................................................................1,5 g
Agua destilada.........................................................................100 ml
Para preparar la solucin de uso, se mezclan cantidades iguales de las soluciones
A, B y C y se guarda en frasco cerrado hermticamente en la nevera donde es
estable durante varias semanas.
6. Cristal violeta: Para tincin Gram y tincin simple.
o Cristal violeta (violeta de genciana)....................................................0,5 g
o Agua destilada.................................................................................100 ml
7. Eosina: Para observacin de clulas sanguneas.
o Eosina...............................................................................................0,3 g
o cido actico glacial......................................................................0,025 ml
o Agua destilada...................................................................................100 ml
8. Fucsina diluida: Para tincin Gram y tincin simple.
o Fucsina fenicada de Ziehl-Neelsen......................................................10 ml
o Agua destilada.................................................................................100 ml
9. Fucsina fenicada de Ziehl-Neelsen: Para tincin cido-alcohol resistente.
o Fucsina bsica......................................................................................1 g
o Etanol 95%........................................................................................10 ml
o Fenol 5% en solucin acuosa............................................................100 ml
10. Hematoxilina: Para observacin de clulas sanguneas.
o Hematoxilina.........................................................................................2 g
o Agua destilada......................................................................................1 l
11. Lactofenol: Para preparaciones microscpicas en fresco de mohos.
o cido lctico.....................................................................................100 ml
o Fenol................................................................................................100 g
o Glicerol.............................................................................................200 ml
o Agua.................................................................................................100 ml

12. Lactofenol al Azul Algodn: Para preparaciones en fresco y tinciones de mohos.

o Solucin de azul algodn
Sol. saturada de azul algodn (a
azul anilina soluble)......................10 ml
Glicerol.....................................................................................10 ml
Agua.........................................................................................80 ml
Mezclar esta solucin con lactofenol a partes iguales
13. Lugol: Solucin de yodo para tincin Gram.
o Yodo...................................................................................................1 g
o Yoduro potsico..................................................................................2 g
o Agua destilada.................................................................................300 ml
14. Orcena A: Tincin de cromosomas.
o Orcena................................................................................................2 g
o cido actico.....................................................................................45,8 ml
o cido clorhdrico 1 mol/l......................................................................8,3 ml
o Agua..................................................................................................45,8 ml
15. Orcena B: Tincin de cromosomas.
o Orcena................................................................................................2 g
o cido actico.....................................................................................55 ml
o Agua..................................................................................................55 ml
16. Safranina: Colorante de contraste para tincin Gram (preferible a la fucsina) y esporas.
o Safranina.........................................................................................0,25 g
o Agua destilada..................................................................................100 m
17. Sudn III: Tincin especfica de grasas.
o Alcohol etlico...................................................................................100 ml
o Sudn III...................................................................................hasta saturacin
18. Verde de metilo actico: Igual composicin que la eosina (num. 7)

MANEJODELMICROSCOPIOPTICO
MATERIAL
MicroscopioPTICO
Portaycubre
Papeldeperidicoyfotocopiaenlaqueaparezcanlaspartesdelmicroscopio.
Pandemoldeyplacadecultivo(paraprepararlaprcticasiguiente.)
Nota.Estedaseprepararlasiguienteprctica(observacindelmohodelpan)porloqueelalumnado
debercogeruntrozodepandemoldeyhumedecerlo.Despusexponerlodurantevariosminutosal
aire,colocarloenelinteriordeunaplacadecultivocerradaysitarlaplacaenunlugarclidoyoscuro
dondepermanecerhastalasemanasiguiente.
REALIZACINDELAPRCTICA
1Identificaentumicroscopiolaspartesqueaparecenenelesquemayaprendesusnombresparaquete
resultenconocidascuandomsadelantenosrefiramosaellas.
2Montajedeunapreparacinficticia:

Corta un trozo de peridico (ms o menos cuadrado de 1 cm de lado) en el que se encuentre

algunaletra.
Echaunpardegotasdeaguaenelcentrodelportaysobreellasdepositaeltrozodeperidicosin
quesearrugue.
Coloca el cubre sobre la muestra poniendo cuidado de que no se formen burbujas. Para ello
debemosbajarlogradualmente.

3Observacindelapreparacin(enfoquedelmicroscopio):
Moverelespejo,diafragmaycondensadorhastaconseguirunailuminacinadecuada.
Colocarlapreparacinsobrelaplatinasujetndolaconlaspinzasyobservandoquelaletraestderecha.
ElegirelobjetivodeMENORAUMENTOgirandoelrevlver.
Mirandolateralmente(noporelocular)giraelmacromtricoparasubirlaplatinalomsposible;
perosinquellegueatocarlapreparacinalobjetivo.
Observandoporelocular,moverelmismotornilloMUYDESPACIOyensentidocontrario,hasta
obtenerunavisinsuficientementedestacadadelamuestra.
Una vez realizado ste enfoque aproximado, utilizar el tornillo micromtrico para un ajuste
perfectodelenfoque.
Enquposicinsevelaletra?............................................................................
Muevelapreparacinhacialaderecha.Haciaquladosemuevelaletra?.Ysimueves
lapreparacinhacialaizquierdahaciadndesemuevelaletra?................
Estefenmenopuedesobservarlomoviendolapreparacinhaciaadelanteyhaciaatrs.
GiraelrevlverparacambiaraunobjetivodeMAYORAUMENTO(notarsquelohascolocadoen
ellugardebidocuandolleguesaunligerotopeyademsseveaselcampototalmenteiluminado).
Ajustaelenfoqueconelmicromtrico.
Cambia la letra de posicin con respecto a la visin con el objetivo anterior?............... Por
consiguiente:LAIMAGENALMICROSCOPIOPTICOSIEMPRESEVE.

 Con este segundo objetivo ves la letra entera o por el contrario ves parte de
ella?................................................ En ste caso cmo es el rea de observacin mayor o
menor?.....................................Portanto:
A MS AUMENTO LA IMAGEN SE VE ..GRANDE PERO EL CAMPO VISUAL
ES
Anotalosiguiente:
Eloculardelmicroscopioutilizadotiene..aumentos.
Elprimerobjetivotiene.aumentosyelsegundo..aumentos.
Porlotanto:
Enlaprimeraobservacinlaletrasevioconaumentos.
Enlasegundaobservacinlaletraseviocon..aumentos.
Utilizadelamismaforma,otroobjetivomayor.
ACTIVIDAD
Nombracadaunadelaspartesdelmicroscopioptico.

PRCTICA
MANEJODELALUPA.OBSERVACINDEHONGOSCONLUPABINOCULAR.
ESTUDIODELMOHODELPAN.OBSERVACINDEUNCHAMPION
MATERIAL
LupaBINOCULARyfotocopiaenlaqueaparezcanlaspartesdelalupa.

Pandemolde,aguaychampiones.
Placadecultivoylancetas.
Cuchillaocuchillos.
Materialparalaprximaprctica:lechuga,espinacas,hortalizas,hojarascamarchitasysucias.
Se llena un vaso con agua corriente. Agregar unas hojas de hortalizas, lechugas, acelgas, hojarasca, marchitas y
sucias.Sedejarhastalaprximasemana.Sedebeevitarlosrayosdirectosdelsolytemperaturasdemasiadoaltas
obajas.Elrecipientenosedebecerrarhermticamente.
REALIZACINDELAPRCTICA:OBSERVACINDELMOHODELPAN
Observacindelmohodelpan.Elpunto1debernhacerlolasemanaanterior.
Debescogeruntrozodepandemoldeyhumedecerlo.Despusexponlodurantevariosminutosalaire,colcalo
enelinteriordeunaplacadecultivocerradaysitalaplacaenunlugarclidoyoscuro.
Primero,sedepositansobreelpanesporasmicroscpicaspresentesenelaire.Alencontrarlascondicionesde
humedadapropiadas,germinan.Pocodespusseformanlashifas,quenoposeentabiques.Elconjuntodehifas
quesedesarrollansedenominamicelio.Alcabodeunosdasemiceliocubrirlasuperficiedelpanolafruta.

Cogeconunalancetaunapequeamuestradelmohoy,despusdecolocarlasobreunaplaca,
obsrvalaconlalupabinocular.

ACTIVIDAD
Quobservas?Dibjalo.
Realizadosdibujos,unodeobservacindirectayotrodelavisinatravsdelalupa.
Nota:Lashifassemejanpequeasraces,sonlosrizoides,quepenetranenelinteriordelpan,dondeabsorbenlos
nutrientestrassegregarenzimasdigestivas,quesonlasresponsablesdelcoloryolorcaractersticosdelosmohos.
Observars la presencia de puntos negros, son los esporangios, situados en el borde de una hifa area, que se
desarrolla por encima de los rizoides. Cuando el esporangio madura libera unas 50.000 esporas, que son
transportadasporelairehastaqueencuentranunlugarapropiadoparagerminar.
REALIZACINDELAPRCTICA:OBSERVACINDEUNCHAMPIN
En las setas el micelio es subterrneo. La parte area, muy desarrollada, constituye el aparato reproductor del
hongo.Enlsedistinguendospartes:piysombrerillo.
Cortaconlacuchillaelsombrerilloyobsrvalobajolalupabinocular.Enlacarainferiordelsombrerilloaparecen
diminutosporosenlaslaminillasdondeseformanlaesporas.Separaconunaspinzasalgunalaminillayobsrvala
conelbinocular.
ACTIVIDAD

Dibujaunalupabinocularindicandosuspartes.

Realizadosdibujos,unodeobservacindirectayotrodelavisinatravsdelalupa.

FICHADETRABAJOPARAELALUMNADO
ACTIVIDAD
Nombracadaunadelaspartesdelmicroscopioptico.

ACTIVIDAD

Dibujaunalupabinocularindicandosuspartes.

Realizadosdibujos,unodeobservacindirectayotrodelavisinatravsdelalupa.

PRCTICAOBSERVACINYTINCINDEPROTOZOOS
MATERIAL
Microscopioptico/Pipeta/Portasycubres/Vasodeprecipitado/Hojarasca
Azuldemetileno,rojoneutro/Cuentagotas
REALIZACINDELAPRCTICA.PRIMERAPARTE:OBSERVACINDEPROTOZOOSSINTEIR
Sellenaelvasoconaguacorriente.Agregarunashojasdehortalizas,lechugas,acelgas,hojarasca,marchitasy
sucias.Sedejaduranteunasemanaenellaboratorio.(Serealizlasemanaanterior).Sedebeevitarlosrayos
directosdelsolytemperaturasdemasiadoaltasobajas.Elrecipientenosedebecerrarhermticamente.
Conlapipeta,tomarunasgotasdelquidodelainfusinenlascercanasdelosrestosvegetales.Conlaspinzas
finaspuedetomarsealgnresiduovegetal,muypequeo,enavanzadoestadodedescomposicin.Sedeposita
elproductoobtenidoenunportacolocandoelcubreencimadejndolocaercomosecierranlastapasdeun
libro,paraevitarqueseformenburbujasdeaire.Losbordesdelcubresesecanconunatiradepapeldefiltro.
Setomaunagotadeaguadelainfusinconuncuentagotasysedepositasobreelportaobjetos.Silagotase
tomadelasuperficie,habrmayorabundanciadeparamecios.Sisetomadelfondo,predominarnlasamebas.
ACTIVIDAD
Tratadeidentificartodoslosorganismosqueencuentres,hazundibujodeellosyanotalosaumentosconque
loshasobservado.
REALIZACINDELAPRCTICA.SEGUNDAPARTE:TINCINDEPROTOZOOS.
1. Sedisuelveenlainfusinuncoloranteparamicroscopia.
Losmscomunessonelazuldemetileno,elverdedemetiloacticooellugo,perotienenelinconvenientede
mataalosinfusoriosynosepuedeobservarsumovimiento.Elrojoneutrolostiesinmatarlos.(vasenota)
Setomaunagotadelainfusinconuncuentagotasysedepositaenelportaobjetos.
2. Seenfocaconelmicroscopioaumentandosucesivamentelosaumentoshastallegaralosadecuadosque
permitanunavisinntida.Sebuscaunazonaenlaquehayasuficientecantidaddeinfusorios.(Conviene
estarobservandounratohastaqueelojosehayacostumbradoadescubrirlosportozoos).
3. Seobservandistintasclasesdeprotozoos?
ACTIVIDAD
Dibjeseaproximadamentelovisto.
NOTA
Los tintes vienen normalmente en polvo o hay que hacer alguna mezcla. Conviene tener alguna orientacin
paraelcasodequehayaqueprepararlos.
Azuldemetileno
Sisedisponedeazuldemetilenoenpolvo,sedisolverenuntubodeensayoconaguaunapuntadepaletao
bisturhastaqueladisolucintengaunaspectoparecidoalatinta.(Hayquetomarpoqusimopolvodeazulde
metileno).
Rojoneutroyverdedemetilo
Siestnenpolvodisolverenaguacomoenelcasoanterior.Paraelverdedemetiloaadirunasgotasdecido
actico(ovinagre).

TCNICASDESEPARACIN

TCNICASDESEPARACIN

Decantacin.Consisteensepararmezclasheterogneasdelquidosolquidosyslidosquetengan
densidadesdistintas.Alquedarenreposolosmaterialessedepositandistintasalturas.
Estatcnicaestbasadaenunapropiedadespecficadeloscuerposllamadadensidadqueesel
cocienteentrelamasayelvolumen.
Filtracin.Consisteensepararsustanciasdeunasuspensin.Elfiltropermiteelpasodellquido(o
gas)eimpideeldelaspartculasslidas.
Basadoenlapropiedadespecficadeloscuerposllamadoestadofsicodelamateria.
Destilacin.Consisteensepararloscomponentesdeunadisolucinlquidacuyospuntosde
ebullicinseandistintos.Alhervirseevaporalasustanciaconelpuntodeebullicinmsbajo.
Basadaenelpuntodeebullicin.
Extraccin.Consisteensepararmezclasheterogneas.Basadenlasolubilidadenundisolvente.
Cromatografa.Consisteenarrastrarcadasustanciadelamezcalporundisolventealolargodeuna
sustanciaabsorbente(papeldefiltro)aunavelocidaddistinta.
Basadoenlapropiedadespecficadeloscuerposllamadasolubilidad.

PRACTICA
CLCULODEVOLUMENENUNAMEZCLA
RECUERDA:
Adiferenciadeloscompuestos,unamezclaestformadaporlaunindesustanciasencantidadesvariablesyque
noseencuentranqumicamentecombinadas.Porlotanto,unamezclanotieneunconjuntodepropiedadesnicas,
sino que cada una de las sustancias constituyentes aporta al todo sus propiedades.
Lasmezclasestncompuestasporunasustancia,queeselmedio,enelqueseencuentranunaomssustanciasen
menorproporcin.Sellamafasedispersantealmedioyfasedispersaalassustanciasqueestnenl.
Deacuerdoaltamaodelaspartculasdelafasedispersa,lasmezclaspuedenserhomogneas(lasdisoluciones)o
heterogneas(emulsiones,suspensionesycoloides).
ACTIVIDAD1
Seguroqueconocesmuchosejemplosdemezclas,nombradiezyclasifcalasenhomogneasoheterogneas.
EJEMPLOS:lasangre,elaguadelmar,elaire,..
Homogneas

Heterogneas

ACTIVIDAD2

PRCTICA
SEPARACINDECOMPONENTESDEUNAMEZCALPORFILTRACIN
RECUERDA:
Independientedeltipodemezcla,loscomponentesdelamisma,puedenserseparadosconciertafacilidadatravs
delastcnicasdelaboratorio,sinquecambienlaspropiedadesfsicasyqumicasqueestostienen.
Filtracin:Atravsdematerialesporososcomoelpapelfiltro,algodnoarenasepuedesepararunslidoquese
encuentrasuspendidoenunlquido.Estosmaterialespermitensolamenteelpasodellquidoreteniendoelslido.
ACTIVIDAD1:Cmohacerunfiltrosencillo
Materiales:Papeldelfiltro,tijeras,embudo

ACTIVIDAD2:Cmohacerunfiltrodeagua
Materiales:
Dosvasosdeyogurconorificiospequeosenlabase,gravagruesa,gravafina,arena,dosvasosdeprecipitado,
dosembudos.
Procedimiento:

ACTIVIDAD3
Remueveagualodosaypon100ccenunaprobeta.chalosatravsdelosdistintostiposdefiltros.
a) Culdelosfiltrosesmejor?
b) Enqutehasbasadoparadecidirculeselmejorfiltro?

PRCTICA
SEPARACINDELOSCOMPONENTESDEUNAMEZCA:DECANTACIN
INTRODUCCIN
Ladecantacinsirveparasepararunamezclaheterogneaydecomponentesdedistintasdensidades.Ennuestroexperimentousaremos
doscomponenteslquidosdedistintasdensidades,aguayaceite,evidentementeelaceiteesmsdensoqueelaguaydebidoaelloelaceite
quedaarribacuandoseseparanenelembudodedecantacin.

MATERIALES
Embudodedecantacin

3Vasosdeprecipitado

Probetagraduada

Soporteuniversal

Aguayaceite

Varilladevidrio

Nuezdoble.Secolocaenelpaloverticaldelsoporteuniversalyassostienelapinzainmvil.
Pinzametlica.Secolocaenlanuezdobleysirveparasujetarelembudodedecantacin.
Elmontajedebequedarcomoapareceenlasfotografassiguientes:

METODOLOGA
1.
2.

3.
4.

Primeromontaremoselembudocomoseindicaenlafotografa.
Sielembudoquevamosautilizaresde250mldebemosmedir100mldecadacomponenteconlaprobeta,perosielembudoes
pequeoysucapacidadesde150ml,lacantidaddeloslquidossersolode50mlcadauno.Dichoslquidosseaadenenunvaso
deprecipitadoysemezclanbienconunavarilladevidrio.
Aadimoslamezclaalembudodedecantacinyesperamosaqueamboslquidosseseparen.
Unavezseparados,vamosavaciarelembudo.Paraellocolocamosunvasodeprecipitadodebajodelembudoyconmucho
cuidadoabrimoslallavedelembudoparaquecaigaelprimerlquidoyunavezquehayaterminadodecaercerramoslallavepara
quenosecueleniunmilmetrodelotrolquido.Unavezquetenemoselaguaennuestrovasodeprecipitado,ahorahacemoslo
mismoparaelaceite,colocamoselotrovasodebajodelembudodedecantacinyabrimoslallaveparaqueelaceitecaiga.

ACTIVIDADES
1.
2.
3.

Observaquelasmedidasdeaguayaceitecuntosmililitrosobtienesdecadalquido?
Porquamboslquidosnosemezclan?
Dibujaunembudodedecantacin.

PRCTICASEGUNDAPARTE
SEPARACINDELOSCOMPONENTESDEUNAMEZCA:FILTRACINII
INTRODUCCIN
Lamezclaestformadaporsalyarena,esunamezclaheterognea,sepuedendistinguirsusdoscomponentes.La
arenanoessolubleenagua,lasalsiloes.
MATERIALES

Embudo

Vasodeprecipitado

Baseysoporte

Varilladevidrioparaagitar

Papelparafabricarelvidrio

METODOLOGA
1. Sepreparaunpapeldefiltroyseelaboraunfiltroquesecolocaenelembudo
2. Elembudosecolocaenelsoportevertical.
3. Seechalamezcladesalyarenaenunvasodeprecipitadoymezclamos.
4. Seaadeaguaalamezcla(lasalsedisuelveenaguaylaarenapermaneceenelfondo).Conlaayudade
unavarilladevidrioremoveremoslanuevamezclahastaquelasalquedecompletamentedisueltaenel
agua.
5. Parasepararladisolucindesalenaguaserecurrealafiltracindondelaarenaquedaretenidaenelpapel
defiltroylasalpuedesepararsedelaguaporevaporacindeldisolvente.
Sidisponemosdecristalizadorharemoslosiguiente:
a) Colocaremoselembudoenelsoporteydebajocolocaremoselcristalizador.Seechalamezclayseesperaa
quecaigatodoelaguaalcristalizador.Estoocurreporquelasdisolucionesnopuedenserseparadas
medianteelmtododefiltracin.
b) Dejamoselcristalizadoratemperaturaambienteyseesperaaqueelaguaseevapore,quedandoenel
cristalizadorlasal.
c) Medianteestosdosmtodos(filtracinycristalizacin)esposiblesepararlamezcladesalyarena.

PRCTICA
EXTRACCINDEYODOCONGASOLINA
SEPARACINDELOSCOMPONENTESDEMEZCASHOMOGNEAS
Lasolubilidaddeunasustanciaesunapropiedadquedependedeldisolventequeinterviene.Ladistintasolubilidad
queunasustanciapresentasegneldisolvente,eslabasedelprocesodeseparacindesustanciasquesellama
extraccin.Medianteestatcnicaseextraenlasesenciasyperfumesdelasplantasyflores,elcafyengenerallas
infusiones.

OBJETIVO
Extraerelyododisueltoenelaguautilizandolapropiedaddequeelyodoesmssolubleengasolinaqueenagua.
Despusbastardejarevaporarlagasolinaparaobtenerelyodopuro.

MATERIAL

Dostubosdeensayo
Unvidriodereloj
Yodoslido
Gasolina
Agua

MTODO
1.
2.
3.
4.
5.

Disuelveunoscristalitosdeyodoenaguaenuntubodeensayo.Qucolortieneladisolucin?
Aadegasolinaaladisolucinanterioryagitalamezcla.
Dejareposaryobservaquequedandoscapas.Culquedaarriba?Dequcolorsoncadauna?
Separalacapasuperioryrecgelaconcuidadoenotrotubodeensayo
Colocaunaporcindellquidoextradoenunvidrioderelojydjaloevaporaratemperaturaambiente.Se
observarcomoseformancristalesdeyodo

ACTIVIDAD
Escribebrevementeentcuadernoloquehasrealizadoydibujaloquehasobtenido.

PRCTICA
SEPARACINDELOSCOMPONENTESDELACLOROFILAPORCROMATOGRAFA
OBJETIVO
Separarlassustanciascomponentesdelaclorofila:xantofila,clorofilaA,clorofilaBycarotenoutilizandola
propiedaddequeloscomponentestienendiferentevelocidaddedifusinenelpapeldefiltro.

MATERIAL

Unvasodeprecipitado
Unapajita
Unmortero
Papeldefiltro(faseslida)
Alcoholetlico(eluyente)
Hojasverdes

MTODO
1. Tomaunashojasverdes(deyedraoespinacas),tritralasenunmorteroyaadeunapequeacantidadde
alcoholetlico.Vierteunpocodeestadisolucinenunacpsuladepetriycolocauntrozodepapelde
filtro.Dblalodeformaquequedevertical.
2. Dejapasarundayobservaloqueocurre.Comprobarsquesehanseparadocuatrobandasdediferente
colorquecorrespondenenordendescendentea:xantofilas(coloramarilla),clorofilaB(colorverde
oscuro),clorofilaA(colorverdeclaro)ycarotenos(amarilloanaranjado)
3. Elmontajequedardelasiguienteforma:

ACTIVIDAD
Describeloquehasrealizadoydibujaloquehasobtenido.

SEPARACINDELOSCOMPONENTESDELACLOROFILAPORCROMATOGRAFAII
SEPARACINDELOSDIFERENTESCOMPONENTESDELATINTADEUNAROTULADORPOR
CROMATOGRAFA
INTRODUCCIN
Latintaestcompuestaporlamezcladevarioscompuestosdediferentescolores.Cadaunodeellostieneuna
solubilidaddiferenteeneletanolquevamosautilizar.
MATERIALES
Papeldefiltro
Vasodeprecipitado.

Etanol
METODOLOGA
Hacemosunamanchaconunrotuladorenelpapeldefiltro.
Sujetamoslatiradepapelconunlpizylacolocamossobrelabocadeunvasodeprecipitadoeintroducimossu
extremoeneletanolquehayenelfondodelmismo
Eldisolventecomienzaasubirporelpapel(capilaridad)yarrastraacadacomponentedelamezclaadiferente
velocidaddebidoalasolubilidaddiferenteencadacaso,separandoloscolores.

BLOQUEII
CITOLOGA

PRCTICA
OBSERVACINDECLULASDELAEPIDERMISDECEBOLLA(Alliumcepa)

Introduccin
Lasclulasdelaepidermisdelashojasinternasdelbulbodecebollas,sondeformaalargadaybastante
grandes.Lamembranacelularcelulsicasedestacamuyclara.Losncleossongrandesymuyvisibles,en
suinteriorsepercibengranulaciones,sonlosnuclolos.Elcitoplasmatieneaspectobastanteclaro,enel
quesedistinguenalgunasvacuolasgrandesdbilmentecoloreadas

Material
Microscopio

Frasco lavador

Papel de filtro

Cubreobjetos

Portaobjetos

Bistur

Pinzas de diseccin

Trozo de cebolla

Cuentagotas

Caja de Petri

Colorante: verde metilo

Procedimiento
1.Tomauntrozodecebollaymarcaconincisionesdelbisturunapequeacuadrculaenlaparteinterior
deltrozodecebolla.
2.Extraeconayudadelapinzauntrozodelafinapelculaquehayentrelashojasdelacebolla.
3. Pon una gota de agua en el portaobjetos y coloca encima la fina piel extrada. Procura que no se
arrugue.Ponleuncubreobjetosencima.
4.Colocaelportaobjetosenelmicroscopio.
Recuerda!Debesempezarsiempreenfocandoelmnimoaumento.
5.Giraelrevlverdelmicroscopioalaumentomedioydibujaloobservado.
6.Sacaelportaobjetosdelmicroscopio,levantaelcubreobjetosycolocaelportaobjetosencimadeuna
placadePetri.

7.Aadeunasgotasdeverdedemetilo.Espera5minutos.(Semuestraenlasfotografasanteriores)

8.Conunaspinzassujetaelportayretiraelexcesodecolorantevertiendoaguaconelfrascolavador
encimadelamuestra.Secalosalrededoresdelamuestraconpapelfiltro.

9.Aadeunasgotasdeaguayprocuraquenoseformenburbujasdeaire.

10.Colocaelcubresobreelportaobjetosycolocalapreparacinenel
microscopioaunos200400aumentosparaobservarbienelresultado.

Actividades
Dibujaloquevesycontestalassiguientescuestiones:

1.-Indica qu dibujo representa mejor la imagen que has observado en el microscopio.

2.- Cules son las partes de la clula que has observado claramente?
3.- Por qu no se observan otros componentes de la clula?

PRCTICA
OBSERVACINDELAEPIDERMISDELAHOJADELIRIO(Irisgermanica)

Introduccin
Lasclulasdelaepidermisdelahojadeliriosonalargadaseincoloras,tienenncleosbienvisibles.Cada
estomaestformadopordosclulassimtricasarrionadas,clulasestomticas,stassonlasnicasde
laepidermisquecontienengranosdeclorofila.Entreestasdosclulassepercibeunorificiodeforma
oval,elostiolo.Siaparecengranosdecloroplastosenlasclulasdelaepidermispertenecenal
parnquimacloroflicodelaclula.

Material
Microscopio

Frasco lavador

Papel de filtro

Cubreobjetos

Portaobjetos

Bistur

Pinzas de diseccin

Trozo de epidermis de
lirio

Cuentagotas

Caja de Petri

Colorante: verde metilo

Preparacin
1. Hacerunaincisintransversal,conunacuchilla,demediocentmetrodelongitud,eneltercio
superiordelahoja.Conlaspinzastirardeunodelosbordesdelcorterasgandoensentido
longitudinaldelahoja.Sedesprenderfcilmenteunafinamembrana,queeslaepidermisdela
hoja.
2. Serecortanpequeosfragmentos
3. Colocarla sobre el porta con un par de gotas de agua y taparla con el cubre presionando con
cuidado.
4.Observaralmicroscopio,primeroconlosmnimosaumentos,luegopasaraaumentosmayores.

Actividades
Dibujaloquehasobservadoindicandolosaumentos.

PRCTICA
OBSERVACINDECLULASDELAMUCOSABUCALHUMANA

Introduccin
Lamucosabucalconstituyeuntejidoepitelialoderevestimiento.Esdetipopluriestratificadodedescamacin,porloque
es sencillo obtener muestras de sus clulas. Al microscopio se observan con facilidad tras teirlas, ya que son
transparentes,ydestacasuncleoredondeadoycentral.

Materiales
Microscopio

Cubeta

Pocillodemontar

Cuentagotas

Soportetinciones

Azuldemetileno

Mechero

Portaycubreobjetos

Agujaenmangada

Tcnicadelapreparacin
Introducir un dedo en la cavidad bucal. Paspar suavemente con la ua la car interna del carrillo. Limpiar el producto
obtenido, del borde interno de la ua, con una aguja. Depostese sobre una gotita de agua en un portaobjetos. Hacer
suavementeunaextensinfrotandoconlaagujasobreelporta.Calentarhastaladesecacin,alallamadelmechero,sin
quellegueaquemarelportasobreeldorsodelamano.Colocarelportasobreelsoportedetincinencimadelacubeta.
Agregarunasgotasdeazuldemetilenosobretodaelreadeextensinrealizada.Djeseactuarelcoloranteunparde
minutos.Inclinandoelportaverterelcoloranteenlacubeta.Irrigarconelcuentagotasunasgotasdeaguaparalavarla
preparacin hasta que no suelte color. Poner unas gotas de agua limpia en el centro de la preparacin. Poner un
cubreobjetos,deformaqueestecaigacomosecierranlastapasdunlibro;dejandocaersuavementeelcubreseevitaque
quedenburbujasdeaireentreelportayelcubre.

Observacinalmicroscopio
Fijarlapreparacinsobrelaplatinahaciendousodelaspinzasdepresin.Empleandoaumentosdbileslocalizarelrea
delapreparacinmsidneaparalaobservacin(enfocarlasclulasaisladasquesonlasquemejorseobservan.Cambiar
aotroobjetivoconaumentomsfuerte.
Elmaterialobservadoprocededelacapasuperficialdelepiteliodelamucosabucal.Ensumayorasonclulasmuertaso
clulasendegeneracin.Elazuldemetilenotieintensamenteelncleo,yconmenoscolorelcitoplasma,quesueleser
algogranuloso.

Actividades
Dibuja en tu cuaderno de actividades lo que observes en el microscopio anotando el nmero de aumentos que has
utilizado.
Debesverunaimagensimilaralaquesemuestraacontinuacin,dondeseobservanclaramentelosncleos,lamembrana
yelcitoplasma.

Nota:ademsdeclulasdelamucosaesposibleobservarbacteriasdelamucosabucal(Streptococos).

PRCTICA 14:OBSERVACIN DE BACTERIAS FIJADAS Y

TEIDAS POR TINCIN SIMPLE

OBJETIVOS

1. Realizar una tincin simple de bacterias procedentes de distintas muestras naturales.

2. Realizar dos tipos de fijaciones bacterianas y saber en qu casos se recomienda una u otra.
3. Observar la morfologa bacteriana y aprender a distinguir los distintos tipos de
agrupaciones que existen.
4. Practicar con el microscopio al mximo aumento y con el correcto empleo del aceite de
inmersin

MATERIAL

Material de
Laboratorio

Reactivos
Material biolgico

Mechero Bunsen o de alcohol

Asa de siembra o aguja enmangada
Pinzas
3 Portaobjetos
Cubeta de tincin
Microscopio y aceite de inmersin

Azul de metileno al 1%
Muestras bacterianas de origen natural: yogur, vinagre,
sarro dental, etc.

PROCEDIMIENTO

A) BACTERIAS DEL YOGUR

El yogur es un producto lcteo producido por la fermentacin natural de la leche. A escala
industrial se realiza la fermentacin aadiendo a la leche
dosis del 3-4% de una asociacin de dos cepas bacterianas:
el Streptococcus termophilus, poco productor de cido, pero
muy aromtico, y el Lactobacillus bulgaricus, muy
acidificante. En esta preparacin se podrn, por tanto,
observar dos morfologas bacterianas distintas (cocos y
bacilos) y un tipo de agrupacin (estreptococos, cocos en
cadenas arrosariadas). Adems, el tamao del lactobacilo
(unos 30m de longitud) facilita la observacin aunque no se tenga mucha prctica con el
enfoque del microscopio.
1. Despus de encender el mechero, esteriliza el asa de siembra con la llama del mechero,
toma una mnima porcin de yogur en una pequea gota de agua y realiza un frotis
(extenderla sobre todo el portaobjetos.).
2. Pasar el portaobjeto por la llama del mechero para fijar la muestra, sin dejar de moverlo
para impedir la fractura del cristal.
3. Aadir una gota de azul de metileno al 1 % obre la preparacin durante 1-2 minutos.
4. Lavar la muestra con el frasco lavador, cuidadosamente, para eliminar el exceso de
colorante.
5. Dejar evaporar el agua sobrante moviendo la preparacin en abanico.
6. Aadir una gota de aceite de inmersin a la muestra, colocarlo sobre el microscopio y
observar al mximo aumento del microscopio.

A) BACTERIAS DEL VINAGRE

El vinagre es una solucin acuosa rica en cido actico resultante de la fermentacin
espontnea del vino o de bebidas alcohlicas de baja graduacin. La acetificacin del vino es

producida por bacterias aerbicas del cido actico, principalmente Acetobacter aceti, aunque
tambin Gluconobacter. Se trata de bacilos rectos con flagelos polares.
1. Tomar con una aguja enmangada una pequea porcin de madre de vinagre natural o de
la telilla que se forma sobre la superficie de los vinos agriados.
2. Extender la muestra en el portaobjetos con una gota de agua y hacer el frotis.
3. Fijar con calor y secar al aire moviendo en abanico.
4. Teir 5 minutos con azul de metileno, lavar el exceso de colorante y secar.
5. El montaje puede hacerse con una gota de glicerina o de agua antes de colocar el cubre;
tambin puede observarse sin cubre mediante la tcnica de inmersin.

B) BACTERIAS DEL SARRO DENTAL

El sarro dental es un depsito consistente y adherente localizado sobre el esmalte de los
dientes. Est constituido principalmente por restos proteicos, sales minerales y bacterias junto con
sus productos metablicos. La flora bacteriana de la cavidad bucal es muy variable dependiendo
de las condiciones que se den en el momento de hacer la preparacin, pero suelen abundar
bacterias saprfitas, pudindose observar gran variedad de morfologas: espiroquetas,
cocobacilos, diplococos y bacilos.
1. Con un palillo de dientes extrae una muestra del sarro dental, raspando la punta sobre los
dientes y disolver la muestra en una gota de agua que previamente se ha colocado sobre
el portaobjetos.
2. Dejar secar y fijar con calor.
3. Teir 2-3 minutos con azul de metileno, lavar el exceso de colorante y secar.
4. Observar al microscopio con aceite inmersin.
Guarda las preparaciones, para poder compararlas con la tincin de gram que vas a realizar en la
siguiente prctica.

CUESTIONES

1. Haz un esquema de la preparacin del yogurt localiza los dos tipos de bacterias que producen el yogur (relaciona
el nombre cientfico con la forma de la bacteria) Haz un esquema de la preparacin del vinagre y compara la
forma de las bacterias Acetobacter con las observadas en la preparacindel yogurt.
2. Dibuja lo que ves en el microscopio en cada una de las preparaciones.
3. De qu color aparecen teidas las bacterias?
4. Identifica los tipos de bacterias presentes en las muestras.
5. Qu forma tienen?aparecen aisladas o agrupadas?. Tipo de asociacin
6. Haz un recuento de cada uno de los tipos bacterianos de cada una de las preparaciones y exprsalo en forma de
porcentaje. Cul es la bacteria mayoritaria en cada caso?.

PRCTICA
PREPARACIN DE UN MEDIO DE CULTIVO

PROCEDIMIENTO
a) Preparacin del medio

1.- Monta la rejilla, el mechero y el vaso de precipitado como se indica la figura. Se aaden todas las
sustancias constituyentes del medio en el vaso de precipitado, exceptuando la gelatina o el agar, y se pone
en el fuego hasta la ebullicin.

Material de
Laboratorio

Sustancias
constituyentes del
medio

Papel de aluminio.
Algodn hidrfilo.
Papel de filtro.
Tres placas de Petri.
Tres tubos de ensayo.
Mechero Bunsen o de alcohol
Trpode y rejilla
Embudo.
Vaso de precipitado.
Asa de siembra o aguja enmangada
Esterilizador ( puede ser una olla a presin)
Estufa

60 cc de agua.
0.6 g de glucosa.
1,5 g de pastillas de caldo de pollo ( lpidos y protenas)
3 hojas de gelatina o 3 g de agar.
Bicarbonato.

PRCTICAPORQUDEBEMOSLAVARNOSLASMANOS?
INTRODUCCIN
Comosabes,lavarselasmanos,sobretodoantesdecomerodetocarzonasdelapielconheridas,esmuyimportante
peroculeslarazn?.Conestasencillainvestigacinpodrsdeducirlafcilmente.

MATERIALES
Rotuladorindeleble.TresplacasdePetriconmediodecultivo
Servilletasdepapel.
Las placas de Petri son unas cajas transparentes con tapadera, dentro de las cuales se coloca una sustancia (medio de
cultivo) que sirve para alimentar a los microorganismos. Gracias a este medio de cultivo los microorganismos pueden
desarrollarseyreproducirsehastaaumentarenormementesunmeroyformarcoloniasobservablesasimplevista.
1.

RotulalasplacasdePetridelunoaltres.

2.

Destapa la placa 1 y pasa la yema de los

dedos sobre el medio de cultivo. Despus
cierralaplaca.

3.

Lvatelasmanossoloconaguayscalascon
una servilleta de papel. Toca el medio de
cultivo de la placa 2 como en el punto
anterioryluegocirrala.

4.

Lvate ahora las manos con agua y jabn, y

repitetodoelprocesoconlaplaca3.

5.

Coloca las tres placas boca abajo en una

estufa de cultivo a 2832C. para evitar
confusionesanotaconunrotuladorenlabase
de cada placa las condiciones en las que
estabanlosdedoscorrespondientes(sinlavar,
lavadosconagua,lavadosconaguayjabn)

6.

Pasadas48horasobservalasplacasdePetri.

ACTIVIDADES

1.

Quobservasenlasplacas?Aquesdebido?

2.

Analizalosresultadosdelastresplacasyextraeconclusionesquepuedanteneraplicacinenlavida
cotidiana.

3.

TepareceadecuadoquelosorganismosencargadosdelaSanidadPblicaexijanelcumplimiento
denormasmuyestrictasparamanipularalimentos?Porqu?

4.

Citaalgunassituacionesenlasqueresulteimprescindibleadoptarmedidashiginicas.


BLOQUEIII
GENTICA

PRCTICAOBSEVACINDEMITOSISDECLULASVEGETALESENDIVISIN
INTRODUCCIN
Paraobservarlamitosisenclulasvegetalesseutilizantejidosmeristemticos,enlosquelasclulasse
multiplican constantemente, por lo que ser fcil sorprender algunas clulas en distintas fases
mitticas.
MATERIALES
Racesdecebolla/Alubias,garbanzosolentejasVasodeprecipitadoPalillosdedientes
PlacadepetriPapeldefiltroEstufaCuchillaVidriorelojAgujaenmangada
OrcenaacticaClH1NMecheroPortaobjetosCubreobjetos
PROCEDIMIENTO
1. Empezaremos observando el proceso de divisin celular o mitosis. Se emplearn como material
biolgicoraicillasdecebolla,aunquetambinsepodranutilizarlasracesobtenidasapartirde
otros bulbos (ajos, puerros, jacintos, tulipanes, etc). Para conseguir races en crecimiento se
colocaelbulbodecebolla(alquepreviamentesehabrneliminadolasracessecas)sobreunvaso
deprecipitado(siesnecesariosesujetamedianteunospalillos).Sellenaelvasoconaguahasta
que toque superficialmente la zona donde van a crecer las raicillas. Al cabo de 2 o 3 das
empezarnacrecerlasraces.

2. Por otro lado, se

utilizar
como
material biolgico
semillas de diversas
especies:
alubias,
garbanzos, lentejas,
etc.
Para
la
germinacin de las
semillas,seponenen
unaplacadepetriconunosdiscosdepapeldefiltroempapadodeagua.Lasplacasseintroducen
enlaestufaa2325Chastaqueseproduzcalagerminacin.Encasodenodisponerdeestufaen
ellaboratoriodelinstituto,seprocederdelasiguientemanera:unavezestnlassemillasenla
placa de petri las meteremos en el frigorfico 48 horas y despus las dejaremos a temperatura
ambiente.Graciasalchoquetrmicoaceleraremoselprocesodegerminacin.Cuandolasraces
tengan1cmseretirandelaplacayseeligenlassemillasnocontaminadasporhongos.

3. Elige una raz joven (de unos 2 cm), lvala

con agua y corta la punta a 5 mm del
extremo.
4. Coloca la punta de la raz en un vidrio de
reloj. Para ablandar los tejidos e iniciar la
tincin,secubrelarazconorcenaacticay
clorhdrico 1N en la proporcin de 9:1, es
decir,9gotasdeorcenaporcadagotadeHCl.Siestasrealizandolatincinenracesdesemillas
tambinsepodranutilizarloscolorantes:carmnacticoohematoxilina.

5. Lahidrlisisdebehacerseencaliente,aunos60.Paraello,calientaelvidrioderelojalallamadel
mechero,justohastaqueempiecenadesprendersetenuesvapores,teniendomuchocuidadode
que no hierva. Retralo para que se enfre durante 8 minutos y repite esta operacin 3 veces,
aadiendomsorcenasihicierafalta,demodoqueellquidocubraentodomomentolapunta
delaraz.
6. Sacalaraicillaconlaagujaenmangadaycolcalasobreelportaobjetos.Conlacuchillacortael
pice a unos 2 mm. El resto se descarta ya que las clulas meristemticas se encuentran en el
extremo,bajolacofia.
7. Aadeunasgotasdecidoacticoal45%(orcenaB)paraterminardeablandarlostejidos.
8. Limpiaconpapeldefiltrolosposiblesresiduosdelcolorante.Colocaelcubreobjetosyrealizaun
squashoaplastamiento.Paraellositalapreparacinenunpapeldefiltrodobladoypresionacon
eldedopulgarparaaplastareltejidoyeliminarelexcesodecolorante.Sialretirarelpapelde
filtrosevequelamuestranoquedasuficientementeaplastada,sepuedepresionarelcubreenla
zona donde est la raicilla con la parte posterior de la aguja enmangada. En cualquier caso hay
queevitarqueelcubreobjetossedeslicesobreelportaobjetosenelcursodelapresin,ysedebe
conseguirunamonocapadeclulasatravsdelaquepaselaluz.
9. Observa al microscopio. Al principio con un aumento pequeo, para localizar las clulas
meristemticasmejorteidasyenunsoloplano.Luego,conmayoraumento,tratardeidentificar
clulasencadaunadelasfasesmitticas.

Actividades
1. Dibujaconciertodetalle,unaclulaencadaunadelasfasesdelamitosis:profase,metafase,
anafaseytelofase.
2. Contestaalassiguientescuestiones:
a. Porquesmsfcilencontrarmitosisenlasclulasqueseencuentranenelextremodelas
raicillasynoaparecenenlaszonasmsalejadas?
b. Enqumomentodelamitosisseidentificanmejorloscromosomasparasurecuento?

PRCTICA
OBSEVACINDEMEIOSISDECLULASVEGETALESENDIVISINYRECUENTOCROMOSMICO
INTRODUCCIN
Para ver clulas en meiosis habr que recurrir a los rganos reproductores: estambres o carpelos,
dondeseproducenlosgametos.
Los capullos florales de diversas especies de las familias liliceas o compuestas son especialmente
adecuados,porelnmeroytamaodesuscromosomas.
MATERIAL
Igualalmaterialdelaprcticaanterior(materialparateirrazdecebolla)
CapullosfloralesTubosdeensayoEtanolcidoacticoCloroformo
Portaobjetos
PROCEDIMIENTO
1.Seeligenbotonesfloralestodavaenunestadodedesarrolloincipiente,antesdequesellegueaabrir
laflor.
2.Parainterrumpirlameiosissedebenfijarlasclulas.Paraellosesumergenentubosdeensayoconuna
mezclasdeseispartesdeetanol,trespartesdecidoacticoyunapartedecloroformo(fijadorCamoir).
Es ente estado se puede conservar el material de estudio durante meses e incluso aos. (Es preferible
mantenerloenfro).
3.Lavarelmaterialdeestudioconaguayextraerlasanteras.
4. Colocar las anteras directamente en un portaobjetos y proceder a ablandar los tejidos y a teir
siguiendoelmismomtodoqueenlarazdecebolla.
5. Observar al microscopio. Para ver con nitidez los cromosomas ser necesario utilizar el objetivo de
inmersin.
6.Ademsdeclulasenmitosis,habrtambinalgunasclulasenmeiosis.Apartirdeunaclulaenla
que se diferencien bien todos los cromosomas trata de hacer un recuento cromosmico, teniendo en
cuentaqueelnmerovarasegnsetratedeclulasenmitosisoendiferentesestadiosdelameiosis.
ACTIVIDADES
Contesta la siguiente cuestin: Cuntos cromosomas presentarn las clulas resultantes de la
meiosisenlasanterasdeunaflordecebollasi2n=16?
Hazundibujoindicandoloqueobservas.

PRCTICA
AISLAMIENTO Y OBSEVACIN DEL ADN
La base material de la herencia es el ADN, sustancia cida que se encontr en el ncleo de las clulas eucariotas
(de ah el nombre de cido nucleico). All, se asocia a protenas formando los filamentos de cromatina (visibles
cuando la clula est en reposo) que se enrollan sobre s mismos para dar lugar a los cromosomas, que son
visibles cuando la clula se divide.
La estructura de la cromatina es filamentosa, por lo que cuando aislamos ADN, este aparece a nuestros ojos como
pequeos hilos. Mediante tincin posterior del material aislado, podremos observar esta estructura al microscopio.
Vamos a extraer los filamentos de cromatina de los ncleos celulares de un tejido animal y a separar las protenas
del ADN a las que se encuentra asociado formando dichos filamentos, que se organizan en cromosomas en la
divisin celular. A continuacin procederemos a su tincin y observacin microscpica.

MATERIAL
Hgado de ternera o de pollo Mortero

Arena lavada fina

2 Matraces

Gasa

Embudo

Vaso de precipitado

Papel de filtro

Batidora (no es imprescindible)

Cloruro sdico al 10% Orcena actica o hematoxilina

Detergente lavavajillas Etanol de 96% Pipeta Varilla

Portaobjetos y cubreobjetos

PROCEDIMIENTO
1. Corta un trozo de hgado de ternera o de pollo de unos tres centmetros de lado (unos 10 gramos de
peso) y prtelo en fragmentos lo ms pequeos posible. Depostalos en un mortero, al que aadirs unos
50 ml de agua y unos gramos de arena lavada fina. Muele el material hasta que se transforme en una
masa semilquida de aspecto homogneo. Si dispones de una batidora, es preferible obtener el extracto
batiendo en ella el hgado y el agua; conseguirs romper las membranas celulares.
2. Deja reposar la mezcla para que sedimenten las partculas de arena y los restos de tejido ms
gruesos. Toma el sobrenadante y virtelo sobre un matraz pequeo, a travs de un embudo en el que
habrs dispuesto como filtro un par de trozos de gasa. Repite la operacin de filtrado varias veces,
pasando a otro matraz, hasta que queden separados todos los restos de partculas slidas del tejido y
dispongas, al menos, de unos 10 ml de extracto filtrado.
3. Toma 5 ml y aade 5 ml de cloruro sdico al 10%. El medio hipertnico hace que los ncleos celulares
liberen su contenido. Mezcla y deja actuar unos minutos.
4. Deposita 5 ml de esta mezcla en un vaso de precipitado y aade 2 ml de detergente de lavavajillas.
Mezcla suavemente y deja en reposo cinco minutos; este detergente inico separar las protenas del
ADN. Observa la formacin de una fina telilla.
5. Agrega 10 ml de etanol de 96 fro, dejndolo resbalar con la pipeta por las paredes del vaso. Se va
separando el fluido en dos fases. Inmediatamente, haz rotar una varilla, con suavidad, sobre s misma y
en la misma direccin. Es preferible que la varilla sea de seccin cuadrada.
6. En la interfase entre el extracto y el alcohol, va precipitando el ADN y se va enrollando en la varilla,
hasta mostrase a simple vista como una maraa de filamentos blanquecinos.
7. Deposita algunos de estos filamentos bien extendidos en un portaobjetos. Aade unas gotas de
orcena actica o de hematoxilina y deja teir unos cinco minutos. Coloca el cubreobjetos y limpia los
restos de colorante con papel de filtro.
8. Lleva al microscopio la preparacin obtenida y observa a pequeos y medianos aumentos, localizando
zonas en que los filamentos estn ms sueltos. Finamente, observa con los mayores aumentos.
ACTIVIDAD
Describe y dibuja lo que observas.

EXTRACCIN DE ADN
OBJETIVOS
Observacin de que la estructura de la cromatina es filamentosa, por lo que cuando aislamos ADN,
este aparece a nuestros ojos como pequeos hilos.

La base material de la herencia es el ADN, sustancia cida que se encontr en el ncleo de las
clulas eucariotas (de ah el nombre de cido nucleico). All, se asocia a protenas formando los filamentos
de cromatina (visibles cuando la clula est en reposo) que se enrollan sobre s mismos para dar lugar a
los cromosomas, que son visibles cuando la clula se divide.
MATERIAL
Mortero
Matraz pequeo
Gasas
Pipeta y propipeta
Material de
Probeta
Laboratorio
Vaso de precipitado
Varilla de vidrio, preferentemente de seccin cuadrada
Gasa o tela para filtrar, tambin puede usar un filtro de
caf.
Arena lavada
Cloruro sdico 2M
Reactivos
SDS o Detergente de lavavajillas
Etanol a 96 fro
Material biolgico
Hgado de pollo

PROCEDIMIENTO

1.

Corta un trozo de hgado de ternera o de pollo de unos tres centmetros de lado (unos l0 g de peso) y prtelo en fragmentos
lo ms pequeos posible (figura1). Depostalos en un mortero, al que aadirs unos 50 ml de agua y unos gramos de arena
lavada fina. Muele el material hasta que se transforme en una masa semilquida de aspecto homogneo (figura 2). Si
dispones de batidora, es preferible obtener el extracto batiendo en ella el hgado y el agua; conseguirs romper las
membranas celulares.

FIGURA 1

FIGURA 2

2.

Deja reposar la mezcla para que sedimenten las partculas de arena y los restos de tejido ms gruesos. Toma el
sobrenadante y virtelo sobre un matraz pequeo, a travs de un embudo en el que habrs dispuesto como filtro
un par de trozos de gasa o de tela. Repite la operacin de filtrado varias veces, pasando a otro matraz, hasta que
queden separados todos los restos de partculas slidas del tejido y dispongas, al menos, de unos l0 ml de
extracto filtrado (figura 3). Mide el volumen final de filtrado que has obtenido con la probeta (figura 4).

FIGURA 4

FIGURA 3

3. Aadir al filtrado un volumen igual de cloruro sdico 2M. Con ste medio hipertnico conseguimos producir el
estallido de los ncleos para que queden libres las fibras de cromatina (figura 5). Mezcla y deja actuar unos minutos.

FIGURA 6

FIGURA 5

4.A continuacin se aade 1 centmetro cbico de SDS (figura 6). (Nota: Si no se dispone de este producto puede sustituirse por
un detergente de vajillas, tipo Mistol o similar). La accin de este detergente inico es formar un complejo con las protenas y
separarlas del ADN. As nos quedar el ADN libre de las protenas que tiene asociadas. Mezcla suavemente y deja en reposo
cinco minutos. Observa la formacin de una fina telilla.
5. Por ltimo hay que proteger el ADN de enzimas que puedan degradarlo y para aislarlo hay que hacer que precipite en
alcohol. Aadir 50 centrmetros cbicos de alcohol de 96 muy fro. Hay que hacerlo de forma que el alcohol resbale despacio
por las paredes del vaso y se formen dos capas. En la interfase, precipita el ADN (figura 7).
6. Introducir una varilla de vidrio e ir removiendo en la misma direccin. En la fotografa nmero 9 se indica con mayor
precisin las capas. Sobre la varilla se van adhiriendo unas fibras blancas, visibles a simple vista, que son el resultado de la
agrupacin de muchas fibras de ADN (figura 8).

FIGURA 7

FIGURA 8

7.- Resuspender elADN obtenido en etanol en un tubo de ensayo.

CUESTIONES

Al finalizar la experiencia se obtiene un mucus blanco y fibroso que sera el

ADN. Es posible que la molcula de ADN se visualice a simple vista? Por
qu?.
A partir de la respuesta anterior, qu se supone que contiene el ADN
obtenido en la experiencia?
Describe los resultados obtenidos y las estrategias seguidas en el proceso.
De qu fuentes se puede extraer ADN?
Encontrariamos diferencias si hubiesems extrado el ADN de una muestra
vegetal?

FIGURA 9

BLOQUEIV
BIOQUMICA

IDENTIFICACINDENUTRIENTESPRESENTESENLOSALIMENTOS
Todoslosseresvivosestnconstituidosporlosmismostiposdenutrientes:agua,salesminerales,glcidos,lpidos,
protenasycidosnucleicos.Comoessabido,estoscompuestossehallanencontinuarenovacinysonprecisos
nuevos aportes para compensar las prdidas que se producen, para llevar a cabo los procesos de crecimiento y
paraobtenerlaenerganecesariaparalaactividadvital.
En esta prctica vamos a detectar e identificar la existencia de algunos nutrientes importantes presentes en los
alimentos.

MATERIALES
Tubosdeensayo.PipetasMecheroBunsenBalanzaEstufadedesecacinVidriosdereloj
SolucindeFehlingASolucindeFehlingB.SolucindeLugolSolucindeNaOHal20%SudnIII
Acetona
Distintosalimentos:patata,miel,huevo,jamnYork,salchicha,pan,manzana,aceite,lecheentera.

PROCEDIMIENTO
EXPERIMENTO1.AGUA.
Elaguaeslamolculamsabundanteenlosorganismosvivosyrepresenta,asmismo,unaltoporcentajedelpeso
delosalimentosquees,precisamente,loquevamosadeterminarconesteexperimento.
1. Corta distintos alimentos en trozos pequeos o toma pequeas cantidades de ellos, colcalos en cpsulas de
porcelanadiferentesypsalos.
2.Anotalosvaloresobtenidos,acontinuacin,introducelascpsulasenlaestufadedesecacina80.
3.Alcabode24horas,scalasyvuelveapesarlas.Anotalosnuevosvaloresobtenidos
4.Convienedejarlascpsulasconlosalimentosenlaestufaotras24horasparacomprobarqueelpesonovara.Si
estonofueraas,nicamentedebesanotarelvalorobtenidocuandosemantieneconstante.
ACTIVIDADES
1.Culeselporcentajedeaguapresenteenlosdistintosalimentosestudiados?
2.Citaalimentosqueconozcascongrancantidaddeagua.
EXPERIMENTO2.GLCIDOSSENCILLOS
Alimentosnecesarios:mielypatata
Los monosacridos y algunos disacridos son glcidos reductores, cuya presencia se puede poner de manifiesto
fcilmente pormedio de unareaccinredox,llevadaacaboentreellosysulfatode cobre(II).Lassoluciones de
estasaltienencolorazul.Traslareaccinconelglcidoreductor,seformaxidodecobre(I)decolorrojo.Deesta
forma,elcambiodecolorindicaquesehaproducidolacitadareacciny,portanto,queelglcidoestpresente.
1.Ponenuntubodeensayounapequeacontidaddemielyunpocodeaguacalienteparadiluirla.Unavezhecha
la dilucin, aade con una pipeta 1ml de solucin de Fehling A(que contiene sulfato de cobre (II)) y 1mL de
solucin de Fehling B (que lleva hidrxido de sodio para alcalinizar el medio y permitir la reaccin ). Utiliza una
pipetadiferenteparacadasolucin.
2.Calientaalallamadelmecheroyobservaelresultado.
3.Repiteelexperimentoconunpocodepatatamachacadaydispersaenaguacaliente.
ACTIVIDADES

1.Describelosresultadosobtenidosencadacaso.
EXPERIMENTO3.ALMIDN
Elalmidnesunpolisacridovegetalqueadquiereunacoloracinazuloscuracaractersticaconelyodo.Conayuda
deunapipeta,aadeunasgotasdelugol(yododisueltoensolucindeyodurodepotasio)aunostrozosdepatata,
salchichayjamndeYork.
ACTIVIDADES
1.Describelosresultadosobtenidosencadacaso.
EXPERIMENTO4.LPIDOS
Los lpidos son insolubles en agua, pero solubles en disolventes orgnicos como la acetona. Por otra parte, el
colorantedenominadoSudnIIItieespecficamenteloslpidosdecolorrojo.
1.Ponendostubosdeensayo2mLdeaceite.
2. Aade a uno de ellos 2 mL de agua, y al otro, 2 mL de acetona. Agita bien ambos tubos y djalos reposar.
Observaelresultado.
3.Acontinuacin,aadeunasgotasdeSudnIIIacadatubo.
Precaucin: antesdeagitareltuboconlaacetona,tpalaparaevitarqueelproductoentreencontactoconlos
dedos.
ACTIVIDADES
1.Describelosresultadosobtenidosencadacaso.
EXPERIMENTO5.PROTENAS
Lasprotenasproducenunacoloracinvioletacaractersticaconelsulfatodecobre(II)enmediobsico.
1.Depositaunos3mLdeclaradehuevoenuntubodeensayo(esconvenientediluirlaenpococonagua)yaade
3mLdelasolucindeNaOHyunasgotasdeunasolucindesulfatodecobre(puedeservirlasolucindeFehling
A).Agitayobservaelresultado.
2.RepiteelexperimentoconuntrozodejamndeYorktriturado.
ACTIVIDADES
1.Describelosresultadosobtenidosencadacaso.
EXPERIMENTO6.IDENTIFICACINDENUTRIENTESENLALECHE
Tratadeidentificarlosnutrientesinvestigadosenlosexperimentosanterioresenunalimentodeconsumodiario
comolaleche.Paraello,depositacuatromuestrasendiferentestubosdeensayo,dondeestudiarslapresenciade
glcidos reductores, almidn, lpidos y protenas. Pon adems otra muestra en una cpula de porcelana para
averiguarelcontenidodeagua.
ACTIVIDADES
1.Describelosresultadosobtenidosencadacaso.

RECONOCIMIENTODELAVITAMINAC
MATERIALES
Solucindeindofenol:0,5gdeinofenosenunpocodealcoholetlico.Diluirhasta500mLconaguadestilada.
ProbetaCuatrotubosdeensayo
Zumodemanzana(1)Zumodeuva(2)Zumodelimn(3)Zumodepomelo(4)Cuentagotas
PROCEDIMIENTO
1. Vierte 5mL de solucin de indofenol en cada uno de los tubos de ensayo, previamente rotulados con los
nmeros1,2,3y4.
2.Aadeelzumodemanzana,gotaagota,enelprimertubodeensayo,hastaqueelindofenolpierdasucolor.
Anotaelnmerodegotasqueechaste.
3.Repitelaoperacinanteriorconlostreszumosrestantesylostubos2,3y4.Anotaencadacasolasgotasde
zumoqueaadisteparaqueelindofenolperdierasucolor.
El indofenol es un lquido azul que pierde color en presencia de la vitamina C. Cuanto mayor sea la cantidad de
vitamina C contenida ya en el zumo, menor ser la que hay que aadir para que el indofenol se descolore por
completo.
ACTIVIDADES
1.VaralacantidaddevitaminaCenloszumosdefrutas?
2.QuzumocontienemsvitaminaC?
3.QuzumocontienemenosvitaminaC?