REVISIONES

REV ESP PATOL 2008: Vol 41. n." 1; 11-22

La apariencia ptica de las clulas y los tejidos patolgicos

desentraada a travs del microscopio electrnico.
Bases ultraestructurales de la microscopa ptica
The light microscopic appearance of pathologic cells and tissues revealed
through the electron microscope
Josep Lloreta Trull
RESUMEN

SUMMARY

El microscopio electrnico aporta informacin detallada sobre la estructura de las clulas y los tejidos, asi
como sobre las variaciones funcionales que experimentan
en situaciones normales y patolgicas. Estos datos tienen
una traduccin directa en el aspecto de esas mismas clulas en las secciones histolgicas convencionales. En este
articulo, se revisan las principales caractersticas pticas
del citoplasma, del ncleo y de la matriz extracciular y se
correlacionan con los rasgos ultraestructurales subyacentes. Conocer el substrato ultraestructural puede ser de
gran utilidad para conseguir que la informacin que se
obtiene con el microscopio ptico sea ms cuantiosa y
ms precisa.

The electron microscope provides detailed information

on cell and tissue structure, as well as on their functional
modifications under physiologic and pathologic conditions.
All these findings have a direct translation into how these
same ceils look under the light microscope. In the present
article, the main light microscopic features of the cell cytoplasm, the nucleus, and the extracellular matrix are reviewed, in the context of the underlying ultrastructural changes. Acquaintance with this ultrastructural background may
prove extremely helpful to withdraw more abundant and
more precise information from conventional light microscopy.

Palabras clave: Microscopa electrnica, clulas claras,

clulas rabdoides, clulas granulares, clulas espumosas.

Key words: Electron microscopy, clear cells, rhabdoid

cells, granular cells, foamy cells.

Rev Esp Patol 2008; 41 (I): IJ-22

INTRODUCCIN

CITOPLASMA

Una cualidad inherente a la microscopa electrnica

de transmisin es que permite una mejor comprensin de
la causa del aspecto ptico de las clulas y los tejidos
normales, as cotno de sus cambios fisiolgicos o patolgicos. Asi. a travs de la microscopa electrnica, es
posible adquirir un conocimiento ms profundo de las
razones que subyacen en las diferencias de color, textura
y aspecto de las clulas y tejidos que caracterizan las distintas enfermedades. El propsito de esta revisin es
correlacionar ios principales fenotipos celulares con su
substrato ultraestructural. tanto por lo que se refiere a sus
caractersticas citoplasmticas como nucleares, as como
a algunos aspectos del estroma adyacente (1-5).

1. Citoplasma eosinfilo
La eosinofilia traduce la existencia de un pH predominantemente bsico. Por tanto, aquellas estructuras que
tengan un elevado contenido proteico sern eon frecuencia eosinoflicas, debido al predominio de su radical
NH3. Un aspecto eosinfilo puede estar asociado con
distintas texturas (granular, esmerilada, fibrilar. etc.). en
funcin de cual sea la organela o estructura predominante en dicha clula.
La textura granular est relacionada, en general,
con la presencia de estructuras abundantes, relativamente pequeas y uniformes (fig. 1). Las organelas que con

Recibido el 3/1/07. Aceptado el 29/3/07.

Servicio de Anatoma Patolgica. Hospital del Mar. Universitt Pompeu Fabra. Barcelona.
jliorelaitfiimas.imim.es

Lloreta Trull J

Fig. 1: Ctopla.-.m.is C^IMIIOI iL>-, iir.iiiularcy ;il Imngcn plj.'a I muiente granular tpica de un oncocitoma. b) Imagen ultraesiruciural del mismo
tumor, con el citoplasma niasivomenlc ocupado por niilocondrias. c) Clulas acinares del pncreas con aspecto eosinfilo granular en la mitad apical del citoplasma y color basfilo en la mitad basal, d) Las reas eosinfitas corresponden a los granulos de zimgeno y las basfilas al retculo
rugoso, e) Aspecto granular eosinfilo plido en un carcinoma con clulas en anillo de sello, f) La relativa palidez del citoplasma de estas clulas
se debe al grado variable de hidraiacin que presentan los granulos de mucgeno. que equivale a las diferencias en densidad electrnica que presentan al microscopio electrnieo.

mayor frecuencia se asocian con este aspecto son las cin de los radicales que predominen, los granulos de
mitocondrias (oncocitomas), los lisosomas (tumores de secrecin pueden ser tambin basofllicos, pero la mayoclulas granulares) y los granulos de secrecin. En ftin- ra de ellos son de aspecto eosinfilo. El ejemplo para-

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digmtico lo constituyen los granulos de zimgeno del
pncreas, que presentan un contorno redondo y una textura electrondensa muy compacta. Los granulos de mucina tienden a ser plidos o casi transparentes si estn
hidratados, lo que, en el microscopio electrnico, se traduce por un aspecto finamente reticulado y una escasa
densidad electrnica. No obstante, cuando la hidratacin
de la mucina es escasa o nula, las clulas en anillo de
sello poseen un citoplasma granular intensamente eosinfilo. que se corresponde con un aspecto eicctrondenso
al microscopio electrnico. Los granulos exocrinos son
habitualmente ms fciles de identificar al microscopio
ptico y confieren una granularidad ms grosera, mientras que los granulos endocrinos dan lugar a una apariencia granular mucho ms fina y sutil, prcticamente
imperceptible. Por ltimo, puede tambin observarse una
apariencia granular ms tosca en aquellos citoplasmas
que contienen abundantes organelas de distintos tipos
(reticulo, mitocondrias, lisosomas, etc.) dispuestas de
manera desordenada (2).
El aspecto en vidrio esmerilado puede observarse tanto en clulas neopisicas como no ncoplsicas.
Entre las ltimas se incluyen algunas alteraciones hepticas inducidas por frmacos o por virus, que dan lugar a
los hepatocitos esmerilados. Este aspecto suele estar asociado con abundante reticulo endoplasmtico liso. sta
es tambin una organela muy abundante en clulas endocrinas secretoras de esteroides. Estas clulas pueden
mostrar un aspecto variable al microscopio, que traduce
su estadio funcional: cuando predomina el aspecto esmerilado debido a un acumulo masivo de reticulo liso, se
trata de clulas en fase de sintesis; por el contrario, cuando predominan las vacuolas de grasa, suele tratarse de
clulas menos activas (3). Otro tipo de estructura cuyo
acumulo homogneo puede dar lugar a un aspecto esmerilado son los filamentos intermedios. Es lo que ocurre
por ejemplo en los queratoacantomas o en algunos hepatocarcinomas. Finalmente, la presencia de vesculas muy
finas puede tambin resultar en una morfologia esmerilada al microscopio ptico, tal como ocurre en algunos
tumores endocrinos con reticulo liso microvesiculado o
en algunos carcinomas de clulas renales de tipo cronifobo (6).
Los citoplasmas de aspecto fibrilar suelen deberse
tambin a la presencia de filamentos intermedios (fig. 2).
Asi. los tonofilamentos son haces de citoqueratina. particularmente frecuentes en carcinomas de clulas escamosas, pero tambin presentes en muchos otros tumores epiteliales, mesoteliomas y sarcomas sinoviales. En el carcinoma escamoso, existen habitualmente clulas con una
gran profusin de dichos tonofilamentos, que a menudo
forman agregados perinucleares concntricos. Esta disposicin da Itigar a la apariencia caracteristica de las clulas
disqueratsicas y puede tambin detectarse mediante luz
polarizada (fig. 2A). En clulas no escamosas, es poco

frecuente que el acumulo de tonofilamentos d lugar a

una imagen detectable al microscopio ptico (7).
Una proliferacin de clulas fusiformes, en tejidos
blandos, que presente un citoplasma de textura fibrilar
tendr a menudo un fenotipo muscular liso (figs. 2C y D)
o miofibroblstico. La intensidad de la eosinofilia se
correlaciona con la cantidad de filamentos de actina de
estas clulas. Asi. los miofibroblastos tienden a ser ms
plidos que las verdaderas clulas musculares lisas y,
adems, en los miofibroblastos. existen reas ocupadas
por reticulo endoplasmtico rugoso (RER), por lo que
presentan con frecuencia aspecto heterogneo, con texturas distintas en diferentes partes del citoplasma. Por otro
lado, en aquellas proliferaciones rabdomioblsticas con
citoplasmas ms abundantes, el aspecto suele ser intensamente eosinfilo, debido a la combinacin de abundantes haces de actina y miosina. Puede ocurrir, no obstante, que un tumor de esta naturaleza contenga cantidades relativamente grandes de lipidos y glucgeno
entremezclados con el componente filamentoso, con la
consiguiente traduccin ptica (8). Por ltimo, en e! sistema nervioso central, el aspecto fibrilar es muy caracteristico de los astrocitos y sus proliferaciones, que contienen haces ondulados de proteina fibrilar acida glial. En
los gemistocitos. estas colecciones de filamentos son tan
abundantes que dan lugar a un aspecto esmerilado o
parecido a clulas rabdoides,
El llamado fenotipo rabdoide fue descrito por primera vez para definir las clulas caracteristieas de un
tumor renal que es una entidad clinicopatolgica bien
definida de la infancia. Posteriormente, se describieron
en otros rganos tumores con un aspecto parecido y con
diversos fenotipos (9,10). El aspecto rabdoide puede
variar de fibrilar a esmerilado y se refiere a la presencia de un rea redondeada bien definida en el citoplasma, que rechaza el ncleo hacia la periferia y que caractersticamente se asocia con la presencia de un nuclolo prominente. La correlacin ultraestructural de este
aspecto consiste en ovillos paranucleares de filamentos
intermedios (habitualmente vimentina) entre los que se
identifican numerosas organelas atrapadas (fig. 2B). Se
ha sugerido que esta caracterstica podra ser el reflejo
de una alteracin en la organizacin del citoesqueleto,
que se producira en clulas en vas de degeneracin o
con la vitalidad comprometida. Pueden observarse tambin ovillos de filamentos en tumores que no llegan a
adoptar un aspecto rabdoide. En estos casos, se detecta
una positividad paranuclear, puntiforme, con anticuerpos para citoqueratinas o vimentina. ste es un dato
muy til en tumores neuroendocrinos, por ejemplo en el
carcinoma de clulas de Merkel con el anticuerpo de
para citoqueratina 20 o en el carcinoma de clulas
pequeas de pulmn con el anticuerpo para CAM 5.2,
y tambin en algunos tumores de Ewing y en algunos
melanomas.

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Llorctii Trull J

^F
Fig. 2: Citopla.sma eosinfilos fibriliires: a) Ccluia escamosa con un masivo acumulo de tono fi lamentos que da lugar a las imgenes caractcrislicas de disqueratosis. b) Clulas de im tumor rabdoide. con ovillos paranuclcares de filamentos intennedio.s () entremezclados con algunas organelas. c) Proliferacin de clulas fusiformes eon citoplasma fibritar eosinfilo y ncleo de contorno irregular, d) Estas clulas poseen abundantes
filamentos de actina y su contraccin es responsable de las invaginaciones del ncleo, caracteristicas de las proliferaciones de msculo liso o de
miofibroblastos. e) Imagen histolgica de un tumor de partes blandas con ncleos de eromatina den.sa y contorno irregular, f) La presencia de sarcmcras dispuestas de manera asimtrica es caracteristica del rabdomiosarcoma y su contraccin desordenada da lugar a irregularidades extremas
del contomo nuclear, que suelen ser ms acusadas en uno de los polos del ncleo.

La presencia de cristales o cristaloides puede ser

responsable de la tincin eosinofllica de una determinada clula. Este hecfio es particularmente frecuente
en clulas plasmticas, en las que las grandes cantida-

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des de inmunoglobulinas que se acumulan en el reticulo rugoso se disponen en una estructura homognea o
granular, correspondiente a los cuerpos de Russell del
microscopio ptico. Otras estructuras tpicas son tos

La apariencia ptica de las clulas y los tejidos patolgicos desentraada a travs del microscopio electrnico
cristaloides de Reinke, que suelen ser poligonales e
identifican las clulas de Leydig y los tumores que
derivan de las mismas. Al microscopio electrnico,
estos cristaloides muestran un caracterstico aspecto
enrejado. Otro ejemplo de cristales o cristaloides que
confieren tonalidad eosinfila al citoplasma es el de
los cristales que caracterizan al sarcoma alveolar de
partes blandas, en el que estas estructuras, que son de
forma romboidal o cuadrangular y presentan una textura en fino enrejado, coexisten con granulos de prosecrecin. En hematoxilina y eosina, son cristales levemente eosinofilicos y su presencia se pone de manifiesto de manera ms clara por su intensa positividad
con la tcnica de PAS (4).

2. Citoplasma claro
Las clulas elaras denominadas vegetaloides reciben este nombre por su aspecto vacio (gs. 3A y B). Las
organelas de estas clulas se concentran tanto alrededor
del ncleo como en la periferia, junto al plasmalema. Las
verdaderas clulas claras se caracterizan por contener
grandes acmulos de glucgeno, que suelen extraerse al
menos en parte durante e! procesado de ios tejidos (II).
Los fijadores a base del alcohol tienden a conservar
mejor el glucgeno, pero no son de uso universal ya que.
por ejemplo, no permiten el estudio ultraestructural a
partir de material parafinado en caso de que sea necesario. Existen carcinomas de clulas claras (de rion, pulmn, tero y ovario entre otros), sarcomas de clulas claras (principalmente el melanoma de partes blandas) y
melanomas de clulas claras, entre otras posibilidades.
En la literatura, el trmino de clulas claras ba sido
asociado a prcticamente todos los tipos de tumor, pero
esta denominacin tiene que utilizarse en el contexto
adecuado para que tenga sentido. En ocasiones, tendr
implicaciones clnico-patolgicas, pero en otros casos no
es ms que un detalle anecdtico o una presentacin
peculiar que bay que conocer para no diagnosticar errneamente un tumor determinado.
El otro substrato principal de las clulas con citoplasma claro se debe a la presencia de cambios degenerativos y artefactos y, por lo tanto, es del todo inespecfico.
Uno de los primeros cambios degenerativos de la clula
es la dilatacin del RER. debida a la entrada de agua por
alteracin de los mecanismos de control bidroelectrolitico. Aunque no siempre es un fenmeno degenerativo, el
aspecto en forma de macrovesiculas que se observa en el
citoplasma de algunas clulas puede ser una clave diagnstica para algunos tumores, como ocurre con las clulas fisaliferas del cordoma, pero este hallazgo debe
situarse en el contexto adecuado (4). Por ltimo, una
conservacin deficiente, una inclusin agresiva o una
excesiva temperatura de la parafina pueden producir

aclaramiento citoplasmtico. a menudo asociado a otras

alteraciones que permiten identificar el origen artefactual de este cambio.
El aspecto claro puede deberse tambin a vacuolizacin celular verdadera, no degenerativa. sta suele
adoptar la forma denominada citoplasma espumoso.
Con frecuencia, este aspecto se debe a la presencia de
vacuolas lipidicas. La mayor parte de lpidos suele
extraerse en el proceso de inclusin en parafina. En ocasiones, las vacuolas lipidicas no estn delimitadas por
una membrana celular, como es el caso del carcinoma de
clulas renales de tipo clulas claras, en el que los lipidos pueden combinarse eon glucgeno. Del mismo
modo, en los liposarcomas de clulas redondas, las
vacuolas lipidicas carecen de membrana a su alrededor.
No obstante, estas vacuolas muestran una menor tendencia a fusionarse que en otras formas mejor diferenciadas
de tumor adiposo. As, los lipoblastos suelen contener
vacuolas de diferentes tamaos debido a la coalescencia
de los lpidos libres en el citosoi (8) (figs. 3E y F). Por el
contrario, en otros tumores las vacuolas lipidicas estn
delimitadas por una membrana y suelen ser el resultado
de un proceso de fagocitosis. Estas vacuolas lipidicas son
en realidad lisosomas secundarios y tienden a ser mucho
ms isomtricas que las vacuolas de lipido no rodeadas
por membrana. Suelen encontrarse en reacciones bistiocitarias de naturaleza diversa o en proliferaciones histiocitarias neoplsicas, asi como en algunos tumores epiteliales, tales como la variedad cromoniica o papilar del
carcinoma de clulas renales. Aunque estas son situaciones en las que las vacuolas citoplasmticas son caractersticas, es necesario sealar que en la mayora de tumores malignos es posible encontrar tanto acmulos lipidicos libres en el citosoi, resultado de alteraciones en el
metabolismo oxidativo de dichas clulas, como vacuolas
con membrana, producto de fagocitosis por parte de las
clulas tumorales, y por tanto ambas formas de presentacin deben ponerse en el contexto adecuado para que
resulten de utilidad diagnstica. Algunos granulos de
secrecin, tales como los de mucina. pueden tambin dar
lugar a un aspecto vacuolizado, si bien no son vacuolas
totalmente vacias como las que se observan en el caso de
los lipidos. Por otra parte, como se ha sealado ms arriba, las vesculas pueden ser demasiado pequeas para
que sean apreciables por microscopa ptica y entonces
dan lugar a un aspecto en vidrio esmerilado. En otras
ocasiones, en cambio, la presencia de vesculas se asocia
a una textura ptica delicadamente espumosa. Una de las
situaciones en las que esta caracterstica constituye una
clave diagnstica es el carcinoma de clulas renales de
tipo cromfobo. En algunos de estos tumores, dichas
vacuolas coexisten con abundantes mitocondrias. con lo
que las reas espumosas se combinan con reas granulares eosinfiias en el mismo citoplasma y en ocasiones se
plantea el diagnstico diferencial con un oncocitoma (6)

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F l g . 3 : C i t o p l a s m a s c i a m s : a) C f l i i l j s d e L'iiupLismii C I J I O <<vcgi.'iiil(iiilc>i ai un faK-iiioma lic c l u l a s runlcs tipo c l u l a s claras, b) A l m i c r o s c o p i o

electrnico, estas cluas contienen cantidades vjinabics ele glucgeno y lipidos no rodeados de membrana, que ocupan el citoplasma (*) y rechazan
las organelas liacia la periferia o hacia la zona paranuclear, c) Clulas de un carcinoma renal de tipo cromfobo que muestran reas Lniensamenle ensinfilas y otras ms claras y finamente espumosas, d) Las reas de aclaramiento celular o de aspeciii espumoso en estos tumores contienen las caractersticas vesculas isomtricas. La eosinofilia se debe a la coexistencia de cantidades variables de niiloeondrias, e) Tumor de parles blandas con clulas redondas vacuoladas y estroma niixoide. f) Se trata de clulas que contienen abundantes vacuolas de tipldo. Como el lipido se encuentra libre en
el eitosol. cuando las gotas entran en contado tienden a fisionarse en gotas de mayor tamao, rasgo caracterstico de diferenciacin adiposa.

(figs. 3C y D). Por otra parte, los cambios degenerativos

pueden ser tambin responsables de una falsa vacuolizacin que suele relacionarse con vesiculacin artefactual
de RER y tambin, de manera muy frecuente, con la presencia de mitocondrias hinchadas y degeneradas (3).

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Las luces intracelulares y los espacios inracelulares semejantes a luces constituyen hallazgos que, aunque no dan lugar a un aspecto claro del citoplasma, pueden tratarse en esta seccin porque de algn modo producen reas claras en el interior de las clulas (fig. 4).

La apariencia ptica de tas clulas y los tejidos patolgicos desentraada a travs del microscopio electrnico

l-iy. 4: Lucc^ \cidadLTas y falsas: a) Carcinoma lic alui grado coii espacios que .semejan luces glandulares pero podrian ser falsas luces porque
contienen clulabi necrlicas. b) Al microscopio electrnico, se hacen mucho ms obvias las imgenes de refuerzo apical de la imagen ptica, indicativas de la existencia de un ribete en cepillo y. por tanto, de diterenciaein glandular verdadera, c) Tumor mediastinico con aspecto cordonal opitelioide y luces intra e intercelulares, d) Estas luces contienen pseudpodos ineurvados. filopodios y proyecciones circulares, tipicos de la diferenciacin endotelial de un hemangioendotelioma epilelioide. e) Imagen pliea de un iumor de la pared intestinal que presenta mltiples vacuolas
citoplasmtieas semejantes a luces, f) El examen del materiai recuperada dei bloque de parafina demuestra que se trata de artefactos de retraccin
en las clulas de un tumor estromal.

Las luces intracelulares son caractersticas de las proliferaciones glandulares o de vasos sanguineos. Aunque la
presencia de luces intracelulares suele denominarse en
anillo de sello, hay que subrayar que las verdaderas
clulas en anillo de sello contienen en realidad abundan-

tes granulos de mucina que rechazan el ncleo. Del mismo modo, es necesario recordar que, si bien las luces
intracelulares en clulas epiteliales suelen considerarse
diagnsticas de adcnocarcinoma pobremente diferenciado, pueden observarse tambin en clulas epiteliales nor-

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Ltoreta Trull J

males., especialmente eti cltilas foliculares de tiroides,

clulas epiteliales de mama y clulas uroteliales de la
vejiga urinaria. Las luces intracelulares glandulares suelen tener microvellosidades en su superficie y, en especial en el caso de los tumores mamarios, acmulos de
secreciones densas en el centro de la luz (cuerpos
magenta de la citoiogia de estas lesiones). La angiognesis normal, con la apertura progresiva y convergencia
de espacios luminales para formar canales, es reproducida por los tumores vasculares. Tambin, en este caso.
pueden observarse microvellosidades en la luz, pero
estn asociadas con filopodios y lamelipodios (proyecciones irregulares cilindricas o laminadas, respectivamente), que permiten distinguir este tipo de luces de las
de origen epitelial glandular (figs. 4C y D). Es importante no interpretar cualquier tipo de espacio vacio intracelular como una luz ya que muehos artefactos de procesamiento pueden resultar en agujeros, especialmente
como consecuencia de la retraccin desigual que se produce en e! citoplasma de clulas con abundantes filamentos, como son las clulas del epitelio escamoso o las
clulas musculares lisas (12) (figs. 4E y F).

Cuando se observan citoplasmas de tincin basofTIica mal definida, de aspecto sucio o empastado, el substrato suele corresponder a diversas combinaciones heterogneas de orgnulos. incluyendo RER y ribosomas.
Con frecuencia, el aspecto sucio se debe a cambios degenerativos. sta es la base del denominado fenmeno de
clulas claras y clulas oscuras en el que las clulas
oscuras se encuentran en estado ms avanzado de degeneracin que las ms claras (figs. 5C y D). Esta apariencia, que ptiede observarse tanto al microscopio ptico
como al microscopio electrnico, fue la responsable, en
los primeros aos de la microscopa electrnica, de que
en muchas descripciones de njmores de distinta naturaleza se consideraran errneamente estos dos aspectos como
dos subpoblaciones celulares con significado biolgico.

CONTORNO CELULAR Y SUPERFICIE

DE LA CLULA

En muchos tumores epiteliales y algunos no epiteliales, especialmente en algunos sarcoma.s, las clulas se
encuentran agregadas entre s de manera compacta.
Este aspecto suele deberse a la presencia de abundantes
uniones intercelulares, ya sea en forma de desmosomas,
3. Citoplasma basoflico
uniones adhrentes o uniones estrechas. Tal apariencia es
indicativa, por lo general, de una histognesis epitelial verExisten situaciones en las que una textura granular
puede asociarse a una mayor afinidad por la hematoxili- dadera (en sentido amplio que incluye las proliferaciones
na (figs. 5A. B. C y D). En la mayoria de estos casos, la de clulas endoteliales y mesoteliales) (13,14). En otros
basofilia granular se debe a que el citoplasma est car- casos, no obstante, puede ser simplemente el resultado de
gado con abundantes cisternas de RER. Las cisternas de interdigitaciones celulares, directa aposicin de las memRER se encuentran presentes prcticamente en todas las branas de las clulas adyacentes o unin entre clulas
clulas, pero slo dan lugar a un citoplasma basoflico mesenquimales por las denominadas densidades subplasen aquellas en las que la sntesis proteica es elevada, malmicas en tndem. Esta ltima especial i zac i 6n es un
como es el caso de las clulas plasmticas, las neuronas, hallazgo frecuente en los tumores musculares lisos o miofibroblsticos. Asi pues, la estrecha aposicin de clulas
las clulas acinares del pncreas o las de la glndula
salival. Estas clulas y los tumores relaeionados con las suele ser habituatmente resultado de uniones bien estrucmismas pueden tener un citoplasma caractersticamente turadas, aunque existen mltiples excepciones a esta regla.
En muchos tumores, pueden observarse espacios intergranular azulado en las secciones teidas con hematoxicelulares
bien organizados, especialmente luces intercelulina y eosina. Aunque la mayoria de los granulos de
lares
y
rosetas.
De manera parecida a lo ocurre con las
secrecin son eosinoflicos, los granulos serosos de las
luces
intracelulares.
las luces intercelulares pueden
glndulas salivales y. en ocasiones, tambin los del pnobservarse
tanto
en
proliferaciones
epiteliales glandulares
creas pueden ser intensamente basoflicos. Esta caracteristica puede ser til para identificar un tumor como car- como en tumores vasculares. Cuando un tumor forma
cinoma de clulas acinares, en ctialquiera de estas dos estructuras glandulares bien definidas, ello es un signo de
localizaciones, aunque los granulos no son tan abundan- polarizacin celular, con la formacin de complejos de
tes en este tipo de tumor como en las clulas acitiares unin en los dotninios laterales y especializaciones de
normales de estos mismos rganos (13). Por ltimo, superficie en los dominios apicales: microvellosidades y,
algunos granulos lisosomales. restos apoptticos y gru- ms raramente, cilios. Sin embargo, la formacin artefacmos cromatnicos de clulas fagocitadas pueden impar- tual de espacios centrales de necrosis en nidos slidos de
tir una apariencia granular azul intensa al citoplasma. clulas tumorales puede dar lugar a una falsa impresin de
Asi se observa en algunas reacciones histiocitarias y, de diferenciacin glandular. En ocasiones, coexisten ambos
manera espordica, en algunos tumores, habitualmente fenmenos, luees glandulares verdaderas con restos necrtumores de alto grado con abundantes fenmenos de ticos centrales. Para reconocer una luz glandular verdadera, puede ser til identificar la presencia de un fino ribete
necrosis o apoptosis.

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La apariencia ptica de las clulas y los tejidos patolgicos desentraada a travs del microscopio electrnico

I ii;. 5: ,1) i. ..i III.i-. lu>lbr]nL's con citoplasmas fibrilares de predominio basoflico pero ein.
M Se trata de miofibroblastti en los que predomina el retculo rugoso (basfilo), combinado con proporciones variables de lilaiiieiilon de aelina (*) (eosinfilos). c)
Fenmeno de clulas claras y oscuras en un tumor neuroectodrmico. d) Imagen ultraestructural correspondiente que demuestra la naturaleza
degeneraliva de este fenmeno, e) Tumor con extensas reas eosinfitas intercelulares de aspecto fibrilar. f) Estas zonas corresponden a acmulos
de prolongaciones eon microtbulos, vesicuias y granulos eiectrondensos, tipicos de rosetas verdaderas en un neuroblastoma.

eosinoflico en la superficie apical, debido a la presencia

de microvellosidades, que no suele observarse en espacios
pseudoglandulares (figs. 4A y B).
Los tumores adenoniatoides suelen presentar un
aspecto al microscopio ptico que los asemeja a tumores
vasculares. Siti embargo, un examen cuidadoso de las

superficies apicales de las luces y espacios que presentan

estos tumores pone de manifiesto la existencia de un fino,
irregular y mal definido ribete en cepillo que se debe a las
caractersticas microvellosidades largas y tortuosas de
estas clulas, en ocasiones acompaadas de secrecin
a2nalada muy tenue, que corresponde al cido hialurnico

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Lloreta Trull J
que segregan. Este conjunto de rasgos pueden observarse
tambin en mesoteliomas epiteliales eonvencionales. En
ellos., las uniones de tipo desmosoma o unin estrecha
suelen situarse en cl dominio lateral de las clulas mesoteliales. pero prximas al dominio basal, lo que da lugar
a que estas tpicas microvellosidades se originen en la
mayor parte del permetro de diebas clulas (14). Ello
produce con frecuencia a un efecto en tachuela, con tin
ribete denso de microvellosidades en la mayor parte del
contorno celular, rasgo que es ms aparente con anticuerpos para determinadas protenas vellositarias, como el
IIBME-1 (7). Aunque es muy caracterstica, la presencia
de largos procesos celulares no se encuentra en todos los
mesoteliomas ni es exclusiva de los mismos. El trmino
descriptivo tumor de clulas en anmona se acu al
principio para referirse a carcinomas metastticos a ganglio linftico que mostraban esta caracterstica ultraestructural. Posteriormente, se aplic a muchos otros tipos
de tumor, tales como melanomas o distintas variedades de
linfoma no-Hodgkin (linfoma con linfocitos vellosos y
linfoma de clulas grandes de tipo villopdieo) (7).
En las proliferaciones vaseulares, pueden observarse
grados y estadios variables de angiogness. Los espacios
vasculares ms incipientes no suelen estar conectados al
flujo sanguneo y. por tanto, las luces vasculares que se
observan en este tipo de tumores suelen encontrarse vacas, lo que puede llevar al diagnstico diferencial con tumores glandulares epiteliales o con cl ya mencionado tumor
adenomatoide. El citoplasma ms plido y los ncleos ms
vesiculares, a menudo ndentados, de las clulas endoteliales, pueden ser de utilidad para llegar al diagnstico correcto. Asimismo, adems de estructuras de aspecto microvellositario, el examen ultraestruetural pone de manifiesto la
existencia de pseudpodos y lamclipodios que son caracteristicos de clulas endoteliales y excluyen la posibilidad de
un tumor glandular (4) (figs. 4C y D).
Otras estructuras intercelulares son las que se observan fundamentalmente en tumores neuronales o neuroectodcrmicos, en forma de rosetas verdaderas y pseudorosetas. Las primeras estn constituidas por conglomerados de prolongaciones celulares que crean un
caracterstico patrn fibrilar (figs. 5E y F). En microscopa ptica, estos procesos celulares pueden ser difciles
de distinguir de estructuras similares pero constituidas
por acmulos radiales de colgena, que se observan en
algunos tumores miofibroblsticos o schwannanos. En
estos casos, el aspecto ultraestructural de las clulas
adyacentes es habitualmente muy distinto, ya que en los
tumores con diferenciacin neurona! se observan mierotbulos dispuestos longitudinalmente, vesculas sinpticas y ocasionales granulos electrondensos; en los tumores miofibroblsticos se observa el caracterstico aspecto
bifenotpieo. con abundante reticulo endoplasmtico
rugoso y acmulos de actina (gs. 5A y B) y, en los
tumores de nervio perifrico, las prolongaciones celula-

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Rev Esp Patoi 2008: Vo 41. n. " /. 1 -22

res rodeadas eompletamente por lmina externa y tambin, de manera ocasional, formando mesoaxones. Existen, por otro lado, las llamadas pseudo-rosetas que pueden corresponder bien a espacios pseudoglandulares creados por clulas neuronales o neuroepiteliales y, en
especial, ependimarias, o bien a estructuras papilares en
las que las clulas se disponen de manera radial alrededor de un vaso sanguneo central. El primer tipo de pseudo-roseta puede ser particularmente difcil de distinguir.
con el microscopio ptico, de las pequeas glndulas o
estructuras acinares de un carcinoma poco diferenciado.
En el examen ultraestructural, las pseudo-rosetas ependimarias son fciles de reconocer por sus microvellosidades y cilios abundantes (blefaroplastos) (15).

MORFOLOGA NUCLEAR
El aspecto del neleo es una de las principales flientes
de informacin tanto en Citopatologa como en Histopatologa (16). Del mismo modo, en microscopa electrnica,
las sutiles variaciones en la textura, la forma y el contorno del ncleo suelen ser de gran valor. Asi. el grado de
condensacin y granularidad de la cromatina suele relacionarse con la ploida y con cl predominio de heterocromatina. Los ncleos plidos o de aspecto homogneo grisceo
suelen contener un predominio de eueromatina, mientras
que la cromatina grosera o la llamada cromatina en sal y
pimienta suelen deberse a grados variables de compactacin de la beteroeromatna. En cuanto a las caractersticas
del nuclolo, la cantidad de cromatina asociada al mismo
determinar si ste presenta su caracteristica tonalidad
eosinfila (cuando hay poca cromatina asociada) o basfila (cuando la cromatina asociada es ms abundante). Aunque suele ser difcil apreciarla al mieroseopio ptico, la
existencia de mltiples nuclolos suele relacionarse con
alteraciones en los mecanismos moleeulares de ensamblaje del nueleolo, problemas que son ms frecuentes en clulas tumorales. Tanto la preseneia de nuclolos mltiples
eomo otras earacteristcas nucleolares, tales como el aspecto serpenteante caracteristeo del seminoma (nueleolo
irregular, de estructura abierta, de aspecto disperso y con
escasa cromatina asociada), pueden observarse con facilidad mediante microscopa electrnica. La correlacin de
estos rasgos ultraestructurales con la morfologa ptica es
ms fcil en preparaeiones citolgicas, pero puede valorarse tambin en cortes de parafina. Por ltimo, los nuclolos
de gran tamao, en especial cuando estn adosados a la
membrana nuclear, suelen asociarse con una intensa actividad de sntesis proteea, frecuente tanto en tumores malignos como en tejidos en regeneracin (3). As mismo, se ha
demostrado que, en las clulas tumorales, el tamao nucleolar se correlaciona con la actividad proliferativa (17).
En ocasiones, resulta difcil distinguir pticamente
el nueleolo de determinadas inclusiones nucleares.

La apariencia ptica de las clulas y los tejidos patolgicos desentraada a travs del microscopio electrnico

Fig. 6: a) Ncleo de un carcinoma bronquioloalveolar, con las caractersticas inclusmncs nucleares verdaderas mieroUibulares, responsables de
tirados variables de aclaramiento nuclear al microscopio ptico, b) Tpicos bolsillos nucleares propios de clulas linfoides, pero que no indiean
necesariamente su eareter maligno, c) Lintbeilo T con delicadas irregularidades del eontomo nuclear, d) Imagen ultraestructural de un estroma
mixoiile: la proporcin de eolgeiia es muy baja y predominan los mucopolisacridos, que adoptan un earaeteristico aspeeto reticulado.

especialmente algunas inclusiones vricas, pero un examen cuidadoso puede poner de manifiesto el componente azulado de cromatina asociado al nuclolo, que
distingue a esta estructura de las inclusiones vricas ms
frecuentes. En algunos tumores, la presencia de inclusiones nucleares visibles al mieroseopio ptico es una
caracterstica diagnstica muy til. Las inclusiones
nucleares verdaderas deben distinguirse de las denominadas pseudoinclusiones nucleares (2-4). Estas ltimas
son en realidad invaginaciones o protrusiones del citoplasma que producen una deformidad en el contorno
nuclear. ste es el tipo de inclusin que se observa
caractersticamente en el melanoma, en sarcomas pleomrficos y en el carcinoma papilar de tiroides, entre
otros tumores. Por otro lado, las inclusiones nucleares
verdaderas pueden deberse a mltiples substratos
ultraestructurales., los ms caractersticos de los cuales
son los agregados filamentosos de los adenocarcinomas
endometriales y los agregados microtubulares del carcinoma bronquioloalveolar (2-4) (fig. 6A), Estas estructuras se encuentran realmente dentro del ncleo y. por tanto, cuando se examinan al microscopio electrnico se

hace evidente que no estn delimitadas por la eubierta

nuclear ni por cromatina, a diferencia de lo que ocurre
en las psetidoinclusiones (7).
El contorno nuclear es una caracterstica ctolgca
importante en mtichos tumores. As,, un ntcleo con aspecto rugoso simtrico, con pliegues difusos en todo su permetro, suele ser caracterstico de los lnfocitos T (fig, 6C),
pero tambin muchos lnfocitos B tienen irregularidades
nucleares, especialmente los centrocitos y los lnfocitos
del manto. En el caso de los linfoctos B. los plegamentos
de la cubierta nuclear no suelen ser tan complejos ni difusos. Una clave ultraestructural clsica en el diagnstico de
lnfoma es la presencia de deleadas invaginaciones perifricas entre el citoplasma y la cubierta nuclear, que dan
lugar a las denominadas proyecciones y bolsillos nucleares (nuclear pockets) (fig. 6B). Muchos subtipos de
clulas reticulares se caracterizan por plegamentos c invaginaciones nucleares pero en estas clulas la eucrotnatina
predomina sobre la heterocromatina (2-4).
Las irregularidades de la cubierta nuclear siguen algunos patrones caractersticos que ayudan a comprender el
aspecto ptico del ncleo y que pueden ayudar a identificar

Rev Esp Patol 200fi: Vol 41. n. " /, 11-22

21

Lioreta Trull J

la clula de origen. As, itn contomo tiuclear simtricamente plegado es tpico de las clulas musculares lisas y de los
miofibroblastos, ya que se debe a la contraccin espontnea
e irregular de estas clulas, en las que los filamentos de actina se encuentran distribuidos de manera homognea. Por
otro lado, los ncleos del rabdomiosarcoma suelen estar
desplazados a la periferia de la clula y presentan plegamientos asimtricos, con hendiduras ms prominentes en el
polo en que el citoplasma es ms abundante y ms rico en
actina y miosina. que se contraen de manera desorganizada.
Por ltimo, ios melanomas y los sarcomas pleomrficos
pueden presentar irregularidades tan extremas del contomo
nuclear que resultan visibles al microscopio ptico (8).

MATRIZ INTERCELULAR
Al igual que ocurre en el tejido normal, el aspecto
ptico de la matriz intercelular de ios tumores depende
del equilibrio entre la cantidad de componentes fibrilares
y amorfos y del grado de hidratacin de estos ltimos.
As, puede tener un aspecto denso o hialinzado si predominan los haces de colgena densamente empaquetados, con una textura fibrilar u ondulada, pero tambin
cuando se acumula abundante material de membrana
basal {colgeno tipo IV), lo que habitualmente da lugar a
un aspecto ms amorfo y eosinfiio. Por otro lado, un
estroma laxo o mixoide se relaciona con el predominio
de una matriz extracelular amorfa, rica en proteoglucanos y cido hialurnico (fig. 6D). Dependiendo de la
cantidad de agua que retienen estas molculas altamente
hidroflicas, as como de la cantidad de colgeno asociado, el aspecto ser ms o menos mucoide y la tincin
ser ms o menos basoflica o eosinoflica (3).
Hasta aqu, hemos revisado algunos aspectos de la
morfologa de las clulas y tejidos tanto normales como
patolgicos, en los que existe una buena correlacin
entre la microscopa ptica y su contrapartida electrnica. Es posible entender mejor y obtener una informacin
ms precisa y provechosa de los datos que proporciona la
microscopa ptica, si se conoce el substrato ultraestructural de las diferentes enfermedades. El microscopio
electrnico constituye una herramienta ideal para la
comprensin de las bases patogenticas y de la morfognesis de los distintos procesos patolgicos. Por todo ello.
es muy recomendable que los patlogos, especialmente
durante el periodo de formacin, puedan familiarizarse
con las imgenes que proporciona este instrumento.

AGRADECIMIENTOS
A los tcnicos Lus Magn y Maria Andrea Garca
por su excelente labor en el laboratorio de microscopia
electrnica.

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Rev Esp Patol 200S: Vol 41. n." I: 11-22

AI Dr. Sergio Serrano. Jefe del Servicio de Anatoma

Patolgica del Hospital del Mar, por su decisiva apuesta
por la microscopia electrnica a lo largo de los aos.
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