Extraccin de ADN

Integrantes:
Mara Jess Aedo
Fernanda Castro
Sofa Cofr
Gabriela Ramrez
Javiera Romero
Curso: 4H
Fecha de Entrega: 22/04/2013

Introduccin

En el presente trabajo se dar a conocer el procedimiento realizado para la

extraccin de ADN de un tejido biolgico, de esta manera, se dar a conocer la manera en
que el ADN puede ser adquirido, ya que, siguiendo los pasos de una manera ptima, y con
impecables condiciones , el resultado ser el adecuado.
Adicionalmente, se analizarn los resultados con el objetivo de comprender
cun apropiada fue la condicin en que este experimento fue realizado.
Finalmente, se pondr a disposicin la conclusin para as obtener una visin
clara y concisa de lo que es necesario en la extraccin de ADN y qu significa que este
pueda ser obtenido a partir de un tejido.
Para comenzar, es necesario explicar qu es el ADN: En una clula animal,
es el componente bsico de la cromatina eucariota de este tipo de clula, no se encuentra de
forma libres el ncleo sino que delimitado por el membrana, adems cabe mencionar que
no se encuentra solo ADN en la cromatina pues tambin existen protenas bsicas como las
histonas.

La membrana nuclear o tambin llamada carioteca de la clula animal es un tipo de

membrana doble la cual posee poros que permiten el intercambio de molculas entre el
ncleo y el citoplasma.
Por lo que, para llevar al cabo el experimento y lograr la extraccin del ADN
debemos provocar la ruptura de los tejidos (moliendo), el estallido de los ncleos (gracias a
la accin del lavalozas) y la separacin de las protenas asociadas al ADN (con el uso del
alcohol).

Desarrollo

I.- Trabajando con el mtodo cientfico.

Es necesario seguir cada paso; son indispensables cada uno de los materiales?
Los materiales estn dado segn la funcin por lo que son fundamentales para que
cumpla el objetivo del experimentos, conseguir la extraccin del ADN por lo que el orden
es cruciales, tambin creemos que no es un factor las cantidades solo que deben ser
proporcionales a todos los componentes pues no se le puede agregar al lavalozas la misma
cantidad de sal pues debe tener un punto exacto en donde cumpla una funcin isotnica.

Es fundamental la concentracin lavalozas en el experimento de la extraccin

de ADN en la clula animal?
Debemos decir que el detergente en su uso diario es utilizado para limpiar,
removiendo grasas y residuos gracias al sulfato de sodio que poseen la mayora de estos
productos, en el experimento no cumple una funcin muy diferente, pues es la encargada de
separar la grasa (lpido) y las protenas que constituyen la membrana que rodean la clulas
y el ncleo. Sin el uso del lavalozas no se lograra todo esto pues no se lograra romper la
membrana no logrando la salida del ADN. Sin embargo la cantidad no es muy til en este
caso

Para qu ocupamos el alcohol?

El alcohol se ocupa para lograr separar el ADN, pues poseen una mayor afinidad,
estabilizndola y evitando que se rompa y adhiera con el resto de los componentes que son
dejados en la solucin acuosa. El uso del alcohol debe ser el debido pues no se debe realizar
de forma muy fuerte pues no cumplir la funcin, no permitiendo as ver a simple vista el
ADN.

Procedimiento:
Preparar una mezcla que contenga 10 ml de detergente lquido y 1.5 gramos de sal.
Agregar agua destilada hasta obtener un volumen 100 ml. Disolver la sal agitando la
solucin lentamente.
Cortar en pequeos trozos un pedazo de panita y moler con un mortero.
Cubrir la panita con 100 ml de la solucin preparada en el primer paso.
Colocar el vaso que contiene la mezcla en un refrigerador por 5 minutos.
Filtrar la mezcla a travs de gasa o filtro de caf.
Agregar etanol fro en la relacin de por 1 volumen de extracto se agregan 2
volmenes de alcohol fro. Dejar que se desplace por las paredes del tuvo de precipitado
dispuesto en forma diagonal.
Dejar dos a tres minutos sin alterar.
Con una pipeta o varilla se puede obtener el ADN extrado.

Procedimientos 1-2-3-4:
El experimento tuvo que ser realizado dos veces, puesto que la primera vez no se coloc la
cantidad adecuada de lava lozas, lo que produjo que no se observara la reaccin esperada.
La segunda vez, se introdujeron las cantidades necesarias de cada componente, lo que
deriv a que los procedimientos 5-6-7-8 arrojaran los resultados que sern explicados a
continuacin.
Procedimientos 5-6-7-8: Despus de formar la mezcla utilizando las cantidades adecuadas,
la dividimos en dos tubos de ensayo. A uno le agregamos el alcohol de forma rpida, lo que
produjo que no se observara resultado alguno; en cambio, al segundo vertimos el alcohol
lentamente, por lo que se logr un producto filamentoso.
Luego de seguir los pasos, se consigue ver claramente el ADN, ya que este, de forma
paulatina, fue subiendo hasta llegar a la superficie de la mezcla, distinguindose
enormemente de la mezcla.

Seguir los pasos de la manera adecuada y utilizar las proporciones apropiadas es esencial e
imprescindible para un buen resultado. La extraccin de ADN se llev a cabo con xito, ya
que, como puede apreciarse en la fotografa, este se desprende y sube a la superficie. Su
apariencia es un color blanco y con forma de fibrilla.

II.- Responde las siguientes preguntas que ayuden a comprender los resultados obtenidos.
Qu es el germen de trigo, cmo se obtiene?
Un grano de trigo se divide en tres partes: el salvado, el germen y el endospermo. El
germen de trigo es el embrin del trigo, una excelente fuente de ADN y es la principal
fuente de cidos grasos esenciales y de vitaminas en el trigo. El germen es la semilla de la
cual nacer una nueva planta. Es la parte ms nutritiva del grano del trigo que se utiliza
como un complemento idneo para mantener el equilibrio nutricional.

Qu es la panita?
Corresponde al hgado entero del animal, limpio y con aspecto sano. Coloracin
homognea de rojo a caf, slo puede presentar cortes debido a la inspeccin sanitaria.

Por qu se solicita que el germen de trigo y la panita estn crudos para la

experimentacin?
El germen de trigo para ser tostado tiene que estar sometido a temperaturas de
150C, por lo que el cido nucleico es desnaturalizado y de la misma forma ocurre con una
panita cocida que debe estar sometida a altas temperaturas. Esto se debe a que cuando la
temperatura es elevada aumenta la energa cintica de las molculas con lo que se
desorganiza la envoltura acuosa de las protenas, y se desnaturalizan. Asimismo, un
aumento de la temperatura destruye las interacciones dbiles y desorganiza la estructura de
la protena, de forma que el interior hidrfobo interacciona con el medio acuoso y se
produce la agregacin y precipitacin de la protena desnaturalizada.

Por qu se us detergente lquido? Qu funcin cumple en la

experimentacin?
Cada clula est rodeada por un saco que es la membrana celular y el ADN se
encuentra dentro de un segundo saco que corresponde al ncleo. Para extraer el ADN
debemos romper estos dos sacos, por lo que necesitamos detergente. El detergente y las
grasas tienen una estructura similar: La cabeza, la cual tiene afinidad con el agua, y las
colas que no tienen afinidad con esta.

La membrana de las clulas tienen dos capas de molculas de lpidos (grasas) con
protenas atravesndolas. Cuando el detergente entra en contacto con la grasa forma una
estructura en forma de esfera con las cabezas hacia afuera y las colas hacia adentro. En este
caso, cuando el detergente entra en contacto con la clula, captura los lpidos y protenas
rompiendo los sacos y dejando libre el ADN.

Por qu la temperatura del agua no puede ser superior a 60C?

Porque se produce la desnaturalizacin del ADN que esta consiste en que cuando
la temperatura alcanza un punto de fusin del ADN de doble hebra la agitacin trmica es
capaz de romper las fuerzas de unin entre estas produciendo una desnaturalizacin, por lo
que el ADN desnaturalizado es de una sola hebra. En este proceso se rompen los puentes de
hidrgeno que unen las cadenas produciendo su separacin, pero no se rompen los enlaces
de fosfodiester covalentes que forman la secuencia de la cadena.

Qu funcin cumple el alcohol en la experimentacin?

El alcohol al ser menos denso que la mezcla flotar, dirigindose a la superficie
por lo que se formaran dos capas separadas, luego de esto el ADN se desplazar a arriba
para unirse al alcohol y as poder distinguirlo y tomar las muestras.

III.- Investigar.
1.- Qu utilizacin se le da a la extraccin de ADN en distintos mbitos como
medicina, policial, etc?
Se puede decir que la Extraccin del ADN es uno de los procedimientos ms
avanzados y tiles empleados en gentica. Tal procedimiento se hace dividiendo las hebras
de cido desoxirribonucleico (ADN) de todos los seres vivos.
Separando la estructura celular de un material gentico, separando el ADN de otros
restos celulares producidos por la divisin y aislamiento del ADN de otros cidos nucleicos
y componentes protenicos. La separacin de la estructura celular de un material se realiza
triturando o golpeando. Este proceso tambin se llama sonicacin. Luego, se agrega
detergente, proteasa y RNasa para eliminar otros residuos de la mezcla. Luego el ADN se
expone agregndole alcohol en el que es insoluble.
Este procedimiento efectivamente tiene numerosos usos:
Uno de sus usos ms beneficiosos es la Ingeniera Gentica en animales. Esto se
realiza ajustando el cdigo gentico del animal e introduciendo caractersticas que
posiblemente harn al animal ms ideal, vivir ms, producir ms cras, etc. Adems, la
ingeniera gentica tambin incorpora la clonacin, la cual trata de una copia exacta de un
animal que posee rasgos que desean copiar. Esto adems es usado para duplicar clulas
HeLa, las cuales son clulas humanas esenciales utilizadas para estudiar diversas
enfermedades como el cncer y el VIH y tambin para buscar cura para dichas
enfermedades.
Otro buen uso de la extraccin de ADN es la Creacin de Medicamentos que
pueden utilizarse en humanos. Cuando los animales evidencian cierta inmunidad a las
enfermedades a las cuales los humanos son susceptibles, se rene el material gentico de
ellos y se realiza la extraccin de ADN. Despus la caracterstica provechosa de los
animales se extrae y procesa incorporndole protenas que ayudan a tratar enfermedades en
personas y una mezcla de otros procesos. El resultado final es un frmaco usado para tratar
enfermedades en humanos derivado de un subproducto animal como lo es la leche.

La extraccin del ADN tambin es utilizada para el Diagnstico Mdico. Un

ejemplo de esto es la amniocentesis, en la cual se pueden diagnosticar enfermedades
genticas antes de que el beb nazca. Algunas de estas enfermedades son la fibrosis
qustica, el sndrome de Down, anemia falciforme y la enfermedad de Tay-Sachs entre
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otras. Luego de que el beb nace, se lleva a cabo otro procedimiento de laboratorio para
diagnosticar otras enfermedades metablicas usando la extraccin de ADN realizada en la
revisin del recin nacido. Otra aplicacin de la extraccin de ADN en este campo es la
determinacin de VIH en una persona que no presenta sntomas de la enfermedad pero que
es
un
portador
del
virus.
Finalmente, la extraccin de ADN se utiliza para combinar materiales genticos con
esos encontrados en la escena de un crimen para descubrir la identidad de la vctima,
identificar al asaltante y hasta reivindicar a personas que fueron acusadas falsamente.
Este avance en gentica promete un sinfn de posibilidades para mejorar la forma en
que vivimos, lo que comemos y brindamos tratamientos para una gran cantidad de
enfermedades que anteriormente eran incurables. Lo ms probable es que en las prximas
dcadas la calidad de vida sea ms favorable con la tecnologa de la extraccin del ADN.
Efectivamente no es imposible soar ms all de lo que podemos imaginar con estas
innovaciones hechas para mejorar nuestras vidas.

Conclusin
Luego de realizar los pasos de acuerdo al protocolo establecido, se puede concluir y
aceptar la hiptesis, ya que la cantidad de cada uno de los productos aplicados es
sumamente importante, debe ser una cantidad especfica puesto que si no, no se cumplir
con la funcin que estos tienen en el experimento.
En esta prctica se logro el objetivo principal y planteado que es la extraccin del
ADN en este caso fue de tejido animal, todo esto siguiendo una serie de pasos para poder
lograrlo, as se pudo separar de otros componentes como protenas, lpidos, carbohidratos y
se pudo distinguir cual era cual y el resultado final fue la extraccin y separacin del ADN
que se obtuvo en una forma de fibrillas.
Adicionalmente, al observar el resultado obtenido, se puede obtener otras
conclusiones como:
-El ADN es una molcula muy larga y tiende a agruparse, esto permite extraerla y
visualizarla con facilidad.
-La extraccin de ADN requiere de un proceso secuencial, en el cual se trata de aislar a esta
molcula de los dems componentes de esta clula.
-Todo el proceso realizado provoca el desenrollamiento del ADN que tiene la apariencia de
material fibroso.
-El proceso de extraccin de ADN es un procedimiento de extraccin de cidos nucleicos.
-Los reactivos (el detergente, la sal, el alcohol y el agua destilada) juegan un papel
importante, cada uno tiene ciertas funciones que, en conjunto, hacen posible la extraccin
de ADN.

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Glosario

ADN: acido desoxirribonucleico en su estructura presenta dos cadenas helicoidal y

es considerado la base de la herencias pues l que contienen el material gentico.
Clula eucarionte: se le denominan a todas las clulas con un ncleo delimitado por
una doble capa lipdica (envoltura nuclear).
Carioteca: es la membrana nuclear formada por una doble membrana, la cual
permite la comunicacin ncleo citoplasma atreves de poros nucleares, es propio de la
clulas eucariontes.
Sulfato de sodio: es una de las siete principales clases de constituyentes en
detergentes o lavalozas y su principal uso es de agente humectante, efectivo en soluciones
cidas y alcalinas y en aguas duras.
Alcohol: isoamilico, es decir un compuesto orgnico incoloro muy afn con el ADN
es por esto que su uso es crucial.

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Bibliografa

http://www.cobach-elr.com/academias/quimicas/biologia/biologia/curtis/libro/c5e.htm
http://es.scribd.com/doc/89884605/LA-CELULA-ANIMAL-Y-SUS-PARTES
http://webs.uvigo.es/mmegias/5-celulas/4-cromatina.php
http://www.profesorenlinea.cl/Ciencias/Celula.htm
http://www.monografias.com/trabajos91/informe-experimento-extraccion-adn/informeexperimento-extraccion-adn.shtml
http://mx.answers.yahoo.com/question/index?qid=20070803062017AAOHboT

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ndice

Introduccin..1-2
Desarrollo...3-9
Conclusin.10
Glosario..11
Bibliografa.12