Regeneración de Tejido Nervioso Central

Ctedra: BIOMATERIALES II
Departamento: Bioingeniera
Carrera: Bioingeniera
Primer Cuatrimestre de 2014

Facultad de Ingeniera
Universidad Nacional de Entre Ros (UNER)
REGENERACIN DE TEJIDO
NERVIOSO CENTRAL
Bsqueda Bibliogrfica
Alumnos: ABALO VIRGILIO, Juan jos

MALDONADO, Matas Sebastin
Carrera: Bioingeniera -U.N.E.R -Fac. de Ingeniera - Oro Verde - Paran-Entre Ros - Argentina - Junio 2014
Abalo Virgilio, Juan J.; Maldonado, Matias S. Regeneracin de tejido nervioso central - 2014
Pg. 2
A. NDICE
A. NDICE...................................................................................................2
B. OBJETIVOS DEL TRABAJO................................................................4
C. ACTIVIDADES.......................................................................................5
D. RESUMEN.............................................................................................9
D. ABSTRACT....11
E. INTRODUCCIN...12
F. CAPTULOS.........................................................................................13
Captulo 1: TEJIDO NERVIOSO CENTRAL (TNC) Y LESIONES..........................................13
1.1 Composicin y estructura del Tejido Nervioso Central................................................13
1.1.1 Neuronas13
1.1.2 Clulas de la gla..14
1.2 Lesiones del tejido Nervioso Central.............................................................................15
1.2.1 Enfermedades
cerebrovasculares.16
1.2.2 Afecciones neuronales16
1.2.3 Traumatismos17
Captulo 2: SCAFFOLDS UTILIZADOS EN REGENERACIN DE TNC.................................. 19
2.1 Tipos de scaffolds........................................................................................................... 19
2.1.1 Scaffolds de origen natural.............................................................................................19
2.1.2 Scaffolds de origen sinttico...........................................................................................20
2.2 Tcnicas de fabricacin..................................................................................................21
2.2.1 Unin de fibras................................................................................................................ 21
2.2.2 Liofilizacin..................................................................................................................... 21
2.2.3 Moldeado por solucin....................................................................................................21
2.2.4 Procesamiento de alta predin.......................................................................................22
2.2.5 Lixiviacin de partculas.................................................................................................22
2.2.6 Separacin de fases.......................................................................................................22
2.2.7 Electrospinning............................................................................................................... 23
2.2.8 Prototipado rpido..............................................................................................................23
2.3 Novedades en scaffolds..................................................................................................24
2.3.1 Matrigel........................................................................................................................... 24
2.3.2 Neurogel......................................................................................................................... 25
2.3.3 Nanofibras de cido polilctico.......................................................................................26
Captulo 3: CLULAS EMPLEADAS EN REGENERACIN DE TNC...................................28
3.1 Embriologa del tejido nervioso..........................................................................................28
3.2 Obtencin y cultivo de clulas............................................................................................29
3.3 Siembra celular................................................................................................................ 30
3.3.1 Siembra in vitro...............................................................................................................30
3.3.2 Siembra in situ (o in vivo)................................................................................................30
Carrera: Bioingeniera - U.N.E.R - Facultad de Ingeniera - Oro Verde - Paran - Entre Ros - Argentina - Jun. 2014
Pg. 3
Captulo 4: FACTORES PARA PROMOCION DE LA REGENERACIN..............................31

4.1 Neurotrofinas................................................................................................................... 31
4.1.1 Factor de crecimiento nervioso (NGF)............................................................................32
4.1.2 Factor neutrfico derivado del cerebro (BDNF)...............................................................32
4.1.3 Glial Growth Factor (GGF)..............................................................................................32
4.2 Otros factores de crecimiento........................................................................................32
4.2.1 Neurotrofina-3 (NT-3)......................................................................................................32
4.2.2 Neurotrofina-4 (NT-4)..33
4.2.3 Vascular Endothelial Growth Factor (VEGF)...................................................................33
4.2.4 Fibroblast Growth Factor (FGFs)....................................................................................34
Captulo 5: FARMACOS ANTINFLAMATORIOS...................................................................36
5.1 Frmacos suministrados en los scaffolds..........................................................................36
5.2 Mtodos de suministro....................................................................................................36
5.2.1 Degradacin/difusin......................................................................................................36
5.2.2 Suministro por afinidad...................................................................................................36
5.2.3 Inmobilizacin del frmaco en el scaffold........................................................................37
5.2.4 Estimulacin elctrica.....................................................................................................37
G. CONCLUSIONES................................................................................39
H. BIBLIOGRAFA...................................................................................40
H.1 Bibliografa de autor.......................................................................................................40
H.2 Bibliografa de instituciones..........................................................................................42
I. GLOSARIO............................................................................................44
1.1 Glosario alfabetizado en Ingls......................................................................................44
1.2 Glosario alfabetizado en castellano...............................................................................47
J. CLAVES DE BSQUEDA....................................................................50
K. ANEXOS..............................................................................................51
K.1 Ttulos y resmenes........................................................................................................51
Pg. 4
B. OBJETIVOS DEL TRABAJO

B.1) Objetivos generales de aprendizaje cognitivo
B.1.1) Conocer y comprender las terminologas y simbologas bsicas, castellanas e inglesas,
utilizadas en el tema.
B.1.2) Aplicar los conocimientos generales aprendidos durante el cursado de las asignaturas
Comportamiento Fsico de Biomateriales y Biomateriales y Biocompatibilidad a una
investigacin bibliogrfica sobre el tema: Regeneracin de tejido nervioso central.
B.1.3) Analizar la composicin y las lesiones mas comunes del TNC
B.1.4) Analizar los materiales tipos y mtodos de fabricacin de scaffolds para regeneracin
de TNC
B.1.5) Analizar las clulas empleadas en la regeneracin de TNC
B.1.6) Analizar los diferentes factores para la promocin del TNC
B.1.7) Analizar los diversos frmacos antiflamatorios y los mtodos de suministro
B.1.8) Sintetizar lo aprendido en la realizacin de este trabajo a travs de la realizacin de un
resumen.
B.1.9) Evaluar lo aprendido en la realizacin de este trabajo a travs de la elaboracin de
conclusiones.
B.2) Objetivos particulares

B.2.1) Evolucionar desde los fundamentos impartidos en las asignaturas Comportamiento
Fsico de Biomateriales y Biomateriales y Biocompatibilidad a los ltimos conocimientos sobre
Ingeniera de tejidos en regeneracin de tejido nervioso central expresados en publicaciones
de los ltimos 5 aos.
B.2.2) Profundizar en el tema Ingeniera de Tejido Nervioso de la asignatura Biomateriales y
Biocompatibilidad que tenga amplias perspectivas de desarrollo en el futuro.
Pg. 5
C. ACTIVIDADES
2014-03-27
Domicilio particular de Juan Abalo
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Motor de Bsqueda: WorldCat
Clave de bsqueda utilizada: biomateriales sistema nervioso central
Cantidad de archivos obtenidos: 5
Resultados obtenidos:
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2014-03-27
Bsqueda en internet
Clave de bsqueda utilizada: scaffolds regeneration neural
Cantidad de archivos obtenidos: 1.772
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Clave de bsqueda utilizada: scaffolds brain acrylate
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2014-04-01
Biblioteca de la Matas Maldonado
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Clave de bsqueda utilizada: scaffolds regeneration acrylate
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2014-04-06
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Clave de bsqueda utilizada: scaffolds regeneration neural
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2014-04-07
Bsqueda en internet
Motor de Bsqueda: Google Acadmico
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Motor de Bsqueda: google
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http://www.google.com.ar/url?
sa=t&rct=j&q=&esrc=s&source=web&cd=1&ved=0CC8QFjAA&url=http%3A%2F
%2Friunet.upv.es%2Fbitstream%2Fhandle%2F10251%2F1857%2FtesisUPV2272.pdf
%3Fsequence%3D1&ei=JQV0U7j1PImosASE_4DADA&usg=AFQjCNEsdfPeNx5tymTQJCNjvgimzVS5w&sig2=GWnbmnN0sa6LKt8WtVysZQ&bvm=bv.66917471,d.cWc&cad=r
ja
2014-05-24
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Motor de Bsqueda: Google
Clave de bsqueda utilizada: regeneracion tejido neuronal
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Pg. 9
D. RESUMEN
El sistema nervioso central (SNC) es uno de los sistemas ms complejos del cuerpo humano
y tiene importancia decisiva en el control de variadas funciones corporales. Si se producen
lesiones en el tejido adulto prcticamente no se observa un proceso de regeneracin celular y
refuncionalizacin, salvo en el hipocampo y bulbo olfatorio. La ingeniera de tejidos (TE
Tissue engineering) ofrece una alternativa novedosa al producir tejido vivo compatible con el
receptor.
Las enfermedades cerebrovasculares, las afecciones neuronales (30.000.000 personas a
nivel mundial slo para Alzheimer y Parkinson) y las lesiones abiertas provocadas por agentes
mecnicos pueden ser sucesos anisomrficos o isomrficos. Cada caso desencadena un
mecanismo de reparacin diferente, basado en la destruccin o no de la gla limitans.
Una de las estrategias para controlar la progresin de tejido es el uso de scaffolds
polimricos: estructuras tridimensionales con poros de 100 a 300 m de dimetro, que
facilitan el transporte y depsito de clulas, proveen soporte mecnico e, incluso, pueden
liberar sustancias. Los scaffolds deben ser biocompatibles, biodegradables y de buena
resistencia mecnica. Algunos de los mtodos para su fabricacin son la unin de fibras,
liofilizacin, moldeado por solucin, procesamiento de alta presin, lixividacin, separacin de
fases y electrospinning y se usan, sobre todo, con materiales sintticos, dentro de los cuales
el cido hialurnico, el acrilato y el cido polilctico son los ms novedosos.
Entre los 2 y los 16 aos de vida se da un proceso de muerte neuronal en corteza y
eliminacin de sinapsis selectivas, iniciando un perodo en el cual la plasticidad se manifiesta
como aprendizaje o como respuesta a cambios internos o ambientales. La ausencia de
nuevas mitosis sumadas a la inhibicin en la regeneracin ante traumas debido a la
cicatrizacin glial, hacen necesario el abordaje de tcnicas que permitan insertar nuevas
clulas con potencial para diferenciarse. stas pueden obtenerse de clulas extradas de
zonas del encfalo donde se acumulan con cualidades pluripotenciales o ser extradas, por
ejemplo, de tejido embrionario. A su vez, se estimula el desarrollo tanto in vivo como in vitro de
clulas gliales y neuronas
Los factores de crecimiento (GF) NGF, BDNF, NT-3 y NT-4 son fundamentales para el
mantenimiento de un microambiente favorable para la supervivencia, diferenciacin celular y
el crecimiento axonal y dendrtico, actuando como factor quimioatrayente para guiar los conos
de crecimiento axonal y facilitar las nuevas sinapsis. Debido a que los GF no pueden
sobrevivir el tiempo necesario una vez implantados, se ha sugerido que el andamio libere
material gentico en forma de ADN desnudo o en su forma poliplexa para generar que las
clulas sembradas las liberen. VEGF, GGF y FGFs han sido encapsulados en andamios de
PLGA y liberados sostenidamente en el sitio de implante, expresando grandes potenciales
angiognicos.
Para reducir las reacciones inflamatorias crnicas y las respuestas inmunes en la zona del
implante del scaffold se utilizan frmacos. La dexametasona (DEX), un esteroide sinttico, y la
hormona -MSH son las drogas comnmente utilizadas para tal fin. Se demostr que la
liberacin de -MSH de scaffolds de degradacin-difusin inhibi la produccin de oxido
ntrico por parte de la microgla estimulada con lipopolisacridos, lo que revel que el proceso
Pg. 10
de fabricacin no afect la actividad biolgica de stas protenas. Estudios in vitro evidencian

que la liberacin de DEX, mediante la estimulacin elctrica de andamios, reduce la cantidad
de astrocitos reactivos presentes y no tiene influencia negativa sobre la viabilidad neuronal.
La presente bsqueda bibliogrfica ha abierto puertas por las cuales se puede ahondar
profundamente en un futuro prximo, bajo el marco de investigacin y desarrollo de tejidos in
vitro e in vivo. Han sido comprendidos y manipulados conceptos claves para poder
desempear dicho trabajo interdisciplinario con mdicos, bioqumicos y todo profesional con
incumbencias en el rea. Se comprendi la importancia de la constante renovacin de
informacin bibliogrfica por parte del investigador, ya que los avances que lideran la
vanguardia de la ingeniera de tejidos se manifiestan en vertiginosos lapsos de tiempo que
comprenden unos pocos meses.
Pg. 11
D. ABSTRACT
Central nervous system (CNS) is one of the most complex systems of the human body and is
critical in the control of various body functions. If damage to the adult tissue is virtually no cell
regeneration and refuncionalizacin except in the hippocampus and olfactory bulb was seen
occurring. Tissue engineering (TE - Tissue engineering) offers a new alternative to produce
living tissue consistent with the receptor.
Cerebrovascular diseases, neural disorders (30,000,000 people worldwide just for Alzheimer's
and Parkinson's) and open lesions caused by mechanical agents can be isomorphic
anisomrficos or events. Each event triggers a different repair mechanism based on the
destruction or the glia limitans.
One strategy to control the progression of tissue is the use of polymer scaffolds: three
dimensional structures with pores of 100 to 300 microns in diameter, to facilitate the transport
and deposition of cells, providing mechanical support, and even can release substances. The
scaffold should be biocompatible, biodegradable and good mechanical strength. Some of the
methods for their manufacture are fiber bonding, freeze molding solution, high pressure
processing, lixividacin, phase separation and electrospinning and used, particularly synthetic
materials, in which the hyaluronic acid, acrylate and polylactic acid are the newest.
Between 2 and 16 years of life a process of neuronal death occurs in cortex and selective
elimination of synapses, initiating a period in which the plasticity is manifested as learning or in
response to internal or environmental changes. The absence of new in addition to inhibiting
mitosis in regeneration to trauma due to glial scarring, necessitate addressing techniques to
insert new cells with potential to differentiate. These can be obtained from cells removed from
areas of the brain stem where qualities accumulate or be extracted, for example, embryonic
tissue. In turn, the development is stimulated both in vivo and in vitro of neurons and glial cells
Growth factors (GF) NGF, BDNF, NT-3 and NT-4 are essential for the maintenance of a
favorable microenvironment for survival, cell differentiation and axonal and dendritic growth,
acting as a factor chemoattractant to guide growth cones axonal and facilitate new synapses.
Since the GF can not survive the time required once implanted, it is suggested that the
released genetic material scaffold as naked DNA or in its form to generate poliplexa that the
release seeded cells. VEGF, GGF and FGFs have been encapsulated in PLGA scaffolds and
released steadily over the implant site, expressing great potential angiogenic.
To reduce chronic inflammatory reactions and immune responses in the scaffold implant drugs
are used. Dexamethasone (DEX), a synthetic steroid, and -MSH hormone is commonly used
for this purpose drug. It was demonstrated that -MSH release from scaffolds inhibited
degradation-diffusion of nitric oxide production by lipopolysaccharide-stimulated microglia,
which revealed that the fabrication process did not affect the biological activity of these
proteins. In vitro studies show that the release of DEX, by electrical stimulation of scaffolds,
reducing the amount of reactive astrocytes present and has no negative influence on neuronal
viability.
This literature search has opened doors through which you can delve deep into the near
future, within the framework of research and development of in vitro and in vivo tissues. They
are understood and manipulated keys to play this interdisciplinary work with physicians,
biochemists and all professional concepts incumbency in the area. The importance of the
constant renewal of bibliographic information by the researcher was understood, as
breakthroughs leading the forefront of tissue engineering are manifested in rapid time frames
comprising a few months.
Pg. 12
E. INTRODUCCIN
El Sistema Nervioso Central puede sufrir lesiones de orgenes variados, desencadenando
respuestas fisiolgicas especficas. Sin embargo, Greenfield las dividi en anisomrficas e
isomrficas. Las primeras responden a lesiones provocadas por agentes mecnicos que
destruyen la frontera entre el SNC y el resto del organismo y las segundas, en cambio, se
deben a factores endgenos y conservan la gla limitans.
Si bien en ambas lesiones la respuesta es mediada por clulas diferentes e incluso el volumen
de tejido perdido difiere, coinciden en que prcticamente no se observa un proceso de
regeneracin celular y refuncionalizacin, salvo en el hipocampo y bulbo olfatorio.
Una alternativa posible para sortear la falta de regeneracin son los autoinjertos, pero se han
observado fallas propias de la edad del tejido implantado, la falta de coincidencia entre el
tamao de la zona donante y la receptora, formacin de neuromas y falta de recuperacin
funcional. As mismo, los injertos alognicos aislados de cadveres han generado rechazo al
implante.
La ingeniera de tejidos (TE Tissue engineering) ofrece una alternativa novedosa al producir
tejido vivo compatible con el receptor. Se funda en el criterio de que los problemas ante una
lesin son la imposibilidad de guiar a las clulas madres para sustituir a las neuronas muertas
y la inhibicin para generar nuevas conexiones. Con base en esto se trabaja explotando los
beneficios de combinar scaffolds polimricos biodegradables, factores de promocin y clulas
de origen neural.
En esta bsqueda bibliogrfica nos proponemos revisar la evolucin de esta aplicacin
tecnolgica, sus posibles alcances y perspectivas a futuro.
Pg. 13
F. CAPTULOS
Captulo 1: TEJIDO NERVIOSO CENTRAL (TNC) Y LESIONES
1.1 Composicin y estructura del Tejido Nervioso Central
El sistema nervioso es una red compleja de estructuras especializadas cuyo fin es controlar y
regular el funcionamiento de los rganos y sistemas, coordinando su interrelacin y la del
organismo con el medio externo. Diferentes tipos de estmulos, tanto internos como externos,
pueden desencadenar un complejo mecanismo de procesamiento y generar una respuesta
mediante cambios en msculos o glndulas (Infermera Virtual, 2008).
Desde el punto de vista anatmico, el sistema nervioso se divide en central (SNC) y perifrico
(SNP). El sistema nervioso central est compuesto por el encfalo y la mdula espinal y se
halla contenido en la cavidad craneana y el conducto vertebral, respectivamente. El sistema
nervioso perifrico se compone de nervios craneanos, raqudeos y perifricos, ganglios y
terminaciones nerviosas especializadas (tanto motoras como sensitvas).
En el SNC las regiones caracterizadas por asociaciones ms o menos densas de somas de
neuronas reciben el nombre de ncleos. En la superficie del cerebro y del cerebelo estas
regiones nucleares estn extendidas en forma aplanada y all constituyen la corteza
correspondiente. Las regiones del SNC compuestas sobre todo por prolongaciones de
neuronas, es decir por vas de conduccin, a simple vista aparecen relativamente claras y se
designan con el nombre de sustancia blanca (Ross P., 2007). En la mdula espinal, esta
distribucin se de en forma invertida, ubicndose la sustancia gris en el centro de la misma,
adoptando forma de mariposa (Nieuwenhuys V., 2009).
La proteccin del TNC est a cargo tanto del crneo como de las meninges. stas ltimas son
tres capas de tejido conjuntivo que rodean al encfalo y a la mdula y delimitan el espacio por
donde circula el lquido cefalorraqudeo (LCR) (Quiroga A., 2013).
El LCR ofrece proteccin contra lesiones fsicas y qumicas y transporta oxgeno, glucosa y
otras sustancias qumicas necesarias obtenidas por filtracin de la sangre, colaborando con
los astrocitos en la nutricin (Infermera Virtual, 2008).
El tejido nervioso est compuesto por dos tipos celulares: las neuronas son las que poseen
las propiedad de excitabilidad elctrica, generando potenciales de accin o impulsos en
respuesta a estmulos y las clulas gliales son las encargadas de brindar sostn, nutricin y
proteccin a las neuronas (Gonzlez E., 2005).
1.1.1
Neuronas
La neurona, como cualquier otra clula, tiene un cuerpo celular que contiene el ADN en sus
cromosomas. Proyectndose desde el cuerpo celular brotan hasta 10 mil o ms
prolongaciones llamadas dendritas, cada una de las cuales puede recibir mensajes de
muchas otras. Estas ramificaciones reciben informacin, pero tambin se emite una
prolongacin de mayor longitud, el axn, que se encarga de llevar informacin hacia otras
neuronas. A pesar de su longitud, el axn puede tener dimetros muy pequeos, del orden de
0.1 a 1m (Bustamante Zuleta E., 2007).
Algo caracterstico de este tipo de clulas es su propiedad para generar vesculas con
molculas de neurotransmisores (encargados del transporte de informacin en el proceso de
sinapsis qumica), por lo que son abundantes los aparatos de Golgi, las mitocondrias y los
lisosomas (Gonzlez E., 2005).
Pg. 14
Tambin se diferencian de otras clulas por su capacidad para generar potenciales de accin
cuando son estimuladas. Este proceso es posible porque entre las macromolculas que, como
protenas integrales, ocupan todo el espesor del axolema se encuentran: la bomba de sodiopotasio, capaz de transportar activamente sodio hacia el extracelular intercambiandolo por
potasio; los canales para Na sensibles a voltaje, que determinan la inversin del voltaje de la
membrana ya que al abrirse y permitir la entrada de Na+ hacen que el interior de la membrana
se vuelva positiva; canales para K sensibles a voltaje, cuya activacin contribuye al retorno a
la polaridad inicial, por salida de iones K desde el interior del axoplasma (Web interactiva de
biologa celular y tisular, 2010).
El potencial de accin es favorecido por el recubrimiento del axn mediante una sustancia
grasa llamada mielina, resultado de la superposicin de capas de membrana celular
provenientes de las clulas de Schwann en el SNP y de los oligodendrocitos en el SNC. Su
utilidad radica en impedir que los iones intervinientes en la despolarizacin de la membrana
se liberen hacia el exterior celular, permitiendo un mayor recorrido del pulso de
despolarizacin (Donna Mergler, 2005).
Segn la cantidad de prolongaciones que se extiendan desde el cuerpo neuronal, las
neuronas pueden clasificarse en:
Multipolares: tienen un axn y dos dendritas o ms. Dentro de este grupo se

encuentran las interneuronas y las neuronas motoras.
Bipolares: poseen un axn y una sola dendrita. No estn fuera del TNC.
Unipolares: tienen un solo axn que se divide cerca del soma neural en dos
prolongaciones largas. La mayora estn en los ganglios raqudeos y en los ganglios
de los nervios craneanos (Sobotta W., 2006).
El papel principal de la neurona es transferir informacin entre las clulas nerviosas. A su vez,
se especializan en recibir seales intracelulares y del entorno, lo cual le permite modificar sus
propiedades, estableciendo cambios moleculares y celulares durante el desarrollo y definir as
los procesos por los cuales el nmero de clulas, su posicin, su forma y sus patrones de
conectividad varan durante la vida embrionaria y la vida posnatal inmediata. Si bien esta
especializacin hace que existan innumerables tipos de neuronas, aquellas que tienen una
funcin similar o estn localizadas en una determinada regin del SN son muy parecidas en
tamao y en estructura (Bustamante Zuleta E., 2007).
1.1.2
Clulas de la gla
La poblacin de clulas de la gla o nerogla, destinada al soporte estructural y de barrera y al

mantenimiento de las condiciones locales que hacen posible la funcin neuronal, est
constituida en el SNC por los astrocitos protoplasmticos y fibrosos, los oligodendrocitos, la
microgla y la neuroglia epitelial (Gmez de Ferraris M, 2006).
Astrocitos
Los astrocitos protoplasmticos aparecen sobre todo en la sustancia gris del SNC. Estn
conectados a travs de nexos y poseen muchas prolongaciones ramificadas, algunas de las
cuales llegan hasta los vasos sanguneos. Algunos se ubican cerca de la superficie del SNC y
forman, con sus prolongaciones laminares, una membrana limitante glial.
Los astrocitos fibrosos se encuentran sobre todo en la sustancia blanca del SNC. Poseen
prolongaciones finas y largas y con frecuencia tambin alcanzan los vasos sanguneos y la
superficie del SNC (Sobotta W., 2006).
Pg. 15
Sus funciones son variadas e incluyen mantener el ambiente qumico apropiado para que se
generen los potenciales de accin, aportar nutrientes a las neuronas, captar el exceso de
neurotransmisores, participar en el metabolismo de los neurotransmisores, mantener el
equilibrio de Calcio y Potasio, participar en la migracin de las neuronas durante el desarrollo
enceflico y ayudar a formar la barrera hematoenceflica (Gonzlez E., 2005).
Oligodendrocitos
Son las clulas encargadas de producir a mielina en el SNC mediante capas concntricas de
membrana plasmtica oligodendroctica. Son clulas pequeas con prolongaciones
relativamente escasas en comparacin con los astrocitos. Con frecuencia se alinean en
hileras entre los axones y un solo oligodendrocito puede mielinizar uno o varios axones
cercanos (Ross P., 2007).
Microgla
Son clulas que se encuentra en todas las regiones del sistema nervioso central y destacan
por sus ncleos pequeos y alargados y por sus largas prolongaciones. En la sustancia gris
las clulas de la microgla acompaan a los capilares sanhuneos formando largas series.
Poseen movimiento ameboide y almacenan lpidos, hierro, pigmentos y otras sustancias
paraplasmticas (Ncher Carda V., 2010).
El origen de estas clulas es comn al de los macrfagos y los monocitos, de lo que se
desprende que su funcin principal en el SNC sea proteger a las clulas de enfermedades al
fagocitar microbios y eliminar desechos de clulas muertas (Gonzlez E., 2005).
Neurogla epitelial
Son clulas que revisten cavidades del sistema nervioso como las ependimarias, los
coroidocitos que revisten los plexos coroideos, etc. (Gmez de Ferraris M, 2006).
El epndimo tapiza los ventrculos enceflicos y el conducto central de la mdula espinal. Lo
conforman clulas cbicas o cilndricas que poseen cinocilios abundantes y solo estn unidas
por nexos y zonulae adherentes. A travs de ellas es posible un intercambio de lquido entre el
tejido enceflico y la luz ventricular (Sobotta W., 2006).
Un tipo especial de clulas ependimarias conforman los plexos coroideos y desempean un
papel fundamental en la produccin de lquido cefalorraqudeo. Estn unidas por medio de
zonulae occludentes y en la regin apical poseen microvellosidades caractersticas
abundantes (Sobotta W., 2006).
1.2
Lesiones del Tejido Nervioso Central
Las lesiones del TNC pueden diferenciarse segn sus efectos morfolgicos en isomrficas o
anisomrficas.
Las lesiones isomrficas son aquellas que no daan directamente la glia limitans. La iniciativa
en la respuesta a las lesiones isomrficas la lleva principalmente la microgla, que prolifera
abundantemente durante los 3 a 5 das que siguen a la lesin y se diferencia en microgla
reactiva y macrfagos. Despus de la respuesta microglial inicial, aparecen astrocitos
reactivos, que evitan a la microgla reactiva y se disponen a su alrededor.
Las lesiones anisomrficas son las provocadas por agentes mecnicos y generan una
discontinuidad importante, con prdida de tejido. Destruyen la frontera entre el SNC y el resto
del organismo (la glia limitans), as como la barrera hematoenceflica local. Tras una lesin de
Pg. 16
este tipo, las clulas sanguneas y protenas del suero invaden el rea lesionada y
posteriormente se desencadena un proceso que termina por eliminar tanto las clulas
lesionadas inicialmente como las aledaas (muerte neuronal secundaria). Finalmente los
astrocitos prximos a la zona forman una trama que se asemeja a la gla limitans y los
fibroblastos del tejido conjuntivo adyacente depositan colgeno, completando la formacin de
una cicatriz glial (Sampietro, Manuel, 2003).
Una categorizacin derivada de las causas que generan una lesin puede llevar a definir
cuatro tipos diferentes, las cuales incluyen enfermedades cerebrovasculares, afecciones
neuronales, problemas en la regeneracin neuronal y traumatismos.
1.2.1
Enfermedades cerebrovasculares
Abarca todos los problemas donde se ven afectados los vasos sanguneos que irrigan al
cerebro. La apopleja es el trastorno ms grave, ya que casi el 30% de las personas muere
por esta enfermedad (Icarito, 2010).
Existen varias causas que provocan una apopleja:
- La interrupcin del suministro de sangre al cerebro: esto provoca que las neuronas no
reciban el oxgeno y los nutrientes que necesitan. Al no ocurrir esto, las neuronas se daan y
son incapaces de comunicarse con las partes del cuerpo a las que benefician, produciendo la
prdida de funciones temporal o permanente. Esta causa es ms recurrente en adultos
mayores (Morales Bastos C, 2002).
- La extravasacin: esto es, la salida de la sangre de su conducto normal (vasos sanguneos)
en la superficie del cerebro o en la parte ms profunda de su tejido. Esta salida perturba el
funcionamiento normal del cerebro, ya que comprime e inflama el tejido. Es ms frecuente en
la gente joven (Gonzlez Hernndez A., 2010).
- Formacin de un cogulo sanguneo o trombo: esto parte por la acumulacin de depsitos
grasos dentro de las paredes arteriales, comprimiendo el vaso sanguneo y estimulando la
formacin de un cogulo o trombo. A esto se le denomina
trombosis. En el caso de que un cogulo bloquee una arteria del cerebro se produce un
ataque de apopleja.
- Por mbolo: en este caso, el bloqueo de una arteria cerebral, que tiene como resultado una
apopleja, puede ser causado por un fragmento de material (mbolo) que se ha desplazado
por la corriente sangunea, instalndose en un vaso. El mbolo puede ser parte de un cogulo
de las arterias arteriosclerticas del cuello o del corazn. El bloqueo de los vasos diminutos
(que son los que llegan a los lugares ms profundos del cerebro) es otra alteracin de los
vasos sanguneos, pudiendo conducir a bloqueos localizados conocidos como ataques
lagunares, que tienen como resultado algn tipo de demencia. Estos bloqueos pueden ser
provocados por la presin sangunea alta o la diabetes. Otra perturbacin, comn y conocida,
es la migraa que no provoca prdida de las funciones cerebrales (Soc. Boliviana de Card.,
2011).
1.2.2 Afecciones neuronales
Cuando en el cerebro y la mdula espinal se produce por alguna razn un cambio estructural,
bioqumico o elctrico, aparecen trastornos que provocan prdida de sensacin, debilidad y
descoordinacin. Algunas enfermedades neuronales son:
- La esclerosis mltiple (EM): es uno de los trastornos ms comunes del sistema nervioso
central, que implica episodios repetitivos de inflamacin del tejido nervioso cerebral y espinal.
Se desconoce la causa exacta, pero se cree que deriva de un dao a la vaina de mielina
Pg. 17
(sustancia protectora que rodea a las neuronas). Es una enfermedad progresiva, lo que
significa que la lesin se va agravando con el paso del tiempo.
- La epilepsia: es un episodio de convulsiones o ataques que alteran la funcin cerebral,
produciendo cambios en el comportamiento. Son causadas por una excitacin anormal en las
seales elctricas del cerebro. Estas pueden provocarse por una situacin temporal, como el
consumo de drogas, niveles anormales de sodio o glucosa en la sangre. En otras ocasiones,
los ataques de epilepsia se presentan por una lesin cerebral (accidente cerebrovascular o
traumatismo craneal), por una anomala hereditaria o trastornos degenerativos (mal de
Alzheimer).
- El mal de Parkinson: es un dao progresivo, que se presenta por la destruccin gradual de
las clulas nerviosas de la parte del cerebro que usa el qumico llamado dopamina (controla el
movimiento muscular). Esta prdida de clulas causa debilidad y rigidez muscular e interfiere
en el habla, el andar y en la realizacin de tareas cotidianas.
- Meningitis: enfermedad caracterizada por la inflamacin de las meninges. Generalmente es
de origen infeccioso. Esta enfermedad se confirma con el estudio del lquido cefalorraqudeo
(estudio citoqumico y cultivo).
- Demencia: consiste en la prdida de las capacidades sicolgicas, a causa de lesiones en el
tejido nervioso central y sus arterias (infartos, hemorragias, etc.). Por lo general, ocurre a
personas de ms de 65 aos.
El 55% de los casos de demencia se deben a la enfermedad de Alzheimer o demencia senil,
en la que el dao cerebral se debe a la produccin anormal de la protena amiloide. Entre sus
sntomas principales estn la desorientacin, dificultad para la marcha y alteraciones del
lenguaje y memoria (Quiroga F., 2008).
- Narcolepsia: es un desorden del sueo originado en disfunciones moleculares del cerebro y
marcado por un incontrolable deseo de dormir durante el da. Los ataques, que consisten en
sueos vvidos y atemorizantes, pueden ocurrir en cualquier momento, an en medio de una
conversacin, y producir una incapacidad temporal de movimiento antes de despertar.Tambin
causa debilidad muscular repentina, llamada cataplexia.
- Poliomielitis: es un mal viral que ataca a las clulas motoras de la mdula espinal o del
tronco cerebral, principalmente de los nios, dejando secuelas profundas, a veces
irreversibles (Soc. Boliviana de Card., 2011).
1.2.3 Traumatismos
Estas lesiones aparecen de forma sbita y en casi el 80 por ciento tienen un origen
traumtico. Las causas ms habituales son: los accidentes de trfico, los deportivos y los
laborales (Medicina21, 2014).
Lesin en la mdula.
Un traumatismo puede presionar la mdula o, en casos ms graves, llegar a
seccionarla. Es lo que diferencia las lesiones incompletas de las completas.
Lesiones incompletas: Uno o ms de los anillos seos de la columna se rompen o se
desplazan y presionan la mdula espinal. En este caso, quedarn algunos msculos
activos por debajo de la lesin y el afectado mantendr parte de la sensibilidad y la
movilidad.
Lesiones completas: Las vrtebras llegan a seccionar la mdula y se produce una
interrupcin total de las vas nerviosas y, por consiguiente, la prdida de sensibilidad y
una parlisis muscular total por debajo del nivel de la lesin (Randall M., 2007).
Traumatismo craneoenceflico
Pg. 18
El dao que sufre el cerebro tras un golpe recibe el nombre de traumatismo

craneoenceflico. Los tejidos se lesionan por el impacto que se produce sobre el
crneo o por el movimiento de aceleracin y desaceleracin que hay en el cerebro.
Tras un traumatismo grave es frecuente que se produzca una prdida de consciencia o
coma. Las consecuencias son ms graves en funcin de la intensidad y la duracin del
coma. La lesin puede afectar a todo el cerebro y comporta:
- Dficits fsicos: en el mbito sensorial, la sensibilidad, la coordinacin motora, el tono
muscular, el control de los esfnteres, etc.
- Trastornos de la conducta y dficits cognitivos: en la concentracin, la memoria, el
razonamiento, cambios de carcter, impulsividad, falta de iniciativa, etc (NeuroWikia,
2014).
Pg. 19
Captulo 2: SCAFFOLDS UTILIZADOS EN REGENERACIN DE TNC

El soporte celular (scaffold) es uno de los pilares de la ingeniera de tejidos. Se trata de una
matriz con forma y propiedades mecnicas similares a las del tejido a reemplazar, que ser
encargada de contener al conjunto de clulas funcionales y proveer a la estructura una
estabilidad provisional para el crecimiento e integracin tisular. En general tambin requieren
propiedades adicionales segn la funcin y el tejido a suplantar. De gran importancia son: 1. la
habilidad de transportar nutrientes, factores regulatorios y desechos hacia y desde las clulas,
2. la biodegradabilidad a una tasa controlable y similar a la de regeneracin del tejido, 3. la
promocin de interaccin entre el scaffold y las clulas, de adhesin celular y de deposicin
de matriz extracelular, 4. la biocompatibilidad, 5. la no toxicidad y 6. la facilidad de
manufactura. Estas propiedades son mayormente encontradas en los biopolmeros (Barron y
Pandit, 2003) (Fuchs et al., 2001)
Las lneas de investigacin son variadas. Por un lado pueden usarse scaffolds biolgicos
(matrices descelularizadas de vlvulas animales xenoinjertos- o humanas homoinjertos-),
pero adems se estudian materiales no biodegradables (como el tejido granular cicatrizal
subcutneo) e incluso biodegradables (biopolmeros y compuestos que imitan la matriz
extracelular). En el ltimo caso, propiedades fundamentales del material son su porosidad
(determinante de la velocidad neta de reabsorcin), la posibilidad de invasin y proliferacin
de clulas del paciente y las condiciones adecuadas para la sntesis de matriz propia
(Flameng, 2005).
2.1 Tipos de scaffolds
2.1.1 Scaffolds de origen natural
Los materiales naturales poseen muchas propiedades que los hacen atractivos para
aplicaciones de tejido neural. Muchos de estos materiales contienen sitios para la adhesin
celular, lo que permite la infiltracin de clulas.
Estos materiales tambin exhiben propiedades similares a los tejidos blandos que estn
reemplazando. Dado que estos materiales se obtienen a partir de fuentes naturales, deben ser
purificados para asegurarse que no haya respuesta de cuerpo extrao despus de la
implantacin (Willerth S., 2007).
Agarosa y alginato: son de origen natural, polisacridos lineales obtenidos a partir de algas
marinas y algas respectivamente. Estos materiales se obtienen fcilmente y pueden ser
reticulados para formar andamios tridimiensionales (Balgude A.P. et al., 2001).
El quitosano, celulosa (metil-celulosa y nitro-celulosa): son polisacridos que poseen
propiedades similares y se han caracterizado para su uso en aplicaciones de ingeniera de
tejidos. La celulosa es el ms abundante de los polisacridos, siguindole la quitina.
La metil-celulosa puede formar andamios termosensibles, lo que permite que sea entregada
en una forma inyectable. Aunque no es tan ampliamente utilizada, la nitro-celulosa une
protenas de forma no especfica, por lo que es conveniente para el cargamento de drogas.
Debido a su naturaleza sensible al pH, el quitosano puede er inducido para formar geles a pH
neutro. El quitosano se puede funcionalizar mediante la qumica adecuada para modificar an
ms estos andamios (Crompton K. E. et al., 2007).
Colgeno: es una de las protenas ms comunes del medio extracelular y se ha caracterizado
extensamente como un andamio potencial para la ingeniera de tejido neural. El colgeno
Pg. 20
puede ser aislado de mamferos, incluyendo ratas, bovinos y seres humanos. Al cambiar el pH
de las soluciones de colgeno, se puede inducir la formacin del gel. El colgeno
desnaturalizado, conocido como gelatina, tambin ha sido evaluado para su uso como un
andamio potencial (Gamez E. et al., 2004). Los geles de colgeno son materiales naturales,
pero podra surgir una respuesta inmune si se utiliza el trasplante de especies cruzadas. Estos
andamios contienen sitios para la adhesin celular y pueden ser modificados covalentemente.
Adems, las propiedades de andamios se pueden variar mediante el uso de diferentes
concentraciones de colgeno (Wissink M et al., 2001)
Fibrina: sirve como matriz de cicatrizacin producto de heridas posteriores a una lesin y su
precursor, el fibringeno, se puede obtener de una mezcla de plasma. Forma andamios de
fibrina cuando la trombina escinde al fibringeno en monmeros de fibrina que se ensambla
para formar un andamio no covalente. Factor XIIIa crea enlaces covalentes cruzados, que
estabilizan el andamio. De manera similar al colgeno, los andamios de fibrina contienen sitios
para la adhesin celular y las propiedades del andamio varan dependiendo de la
concentracin de fibrina utilizada.
Fibronectina: se obtiene a partir de plasma humano o bovino y es una glicoprotena de alto
peso molecular que se puede unir al colgeno, la fibrina y la heparina. Se encuentra en su
forma soluble en la sangre y participa en el proceso de cicatrizacin de la herida. Puede
agregarse para formar esteras, que pueden ser utilizadas como medios de andamiaje para la
reparacin de tejido neural. Estas esteras contienen poros direccionados para permitir la
orientacin de las neuronas de regeneracin y proporcionar sitios de adhesin celular y
pueden absorber los factores de crecimiento e incluso almacenarlos (Subramanian A. et al,
2009).
cido hialurnico: es un glicosaminoglicano lineal que se encuentra en el medio extracelular
en cerebro, por lo que es una opcin atractiva para la ingeniera de tejidos en el sistema
nervioso central (SNC). A pesar de ser generalmente no adhesiva a las clulas, contiene
algunos sitios para la adhesin celular y es no inmunognico. Tambin ayuda a promover la
curacin de heridas, lo cual es importante en la promocin de la reparacin de tejidos. Una
desventaja del uso de cido hialurnico es que es soluble en agua, por lo que es difcil
desarrollar una versin inyectable sin aadir componentes adicionales para ayudar a reticular
un andamio estable (Parra Cid C. et al, 2014).
2.1.1 Scaffolds de origen sinttico
Los materiales sintticos tienen muchas ventajas para el uso como medios de andamiaje.
Estos polmeros se pueden adaptar para producir una amplia gama de propiedades
mecnicas y mejorar las tasas de degradacin. Tambin se pueden disear para minimizar la
respuesta inmune. Por ltimo, los polmeros sintticos se pueden hacer reaccionar juntos para
combinar las propiedades que son nicas para cada uno.
Poli-etilenglicol (PEG): tambin conocido como poli-xido de etileno (PEO), es un polister
que se resiste a la adsorcin de protenas y la adhesin celular (Parra Cid C. et al, 2014).
Estas caractersticas ayudan a minimizar la respuesta inmune despus de la implantacin.
Adems, este polmero tambin puede ayudar a las membranas celulares de sellado despus
de
la
lesin,
por
lo
que
es
til
para
limitar
la
muerte
celular.
Se puede utilizar PEG para sintetizar geles hidroflicos con diferentes tasas de degradacin y
de liberacin de frmacos. Estos geles pueden ser modificados para aadir sitios de adhesin
celular (Dhandayuthapani B. et al., 2011).
Poli-etileno-co-acetato de vinilo (EVA): polmero biocompatible no degradable, a menudo se
utiliza como un andamio liberacin controlada de frmacos. La estabilidad de EVA hace que
sea una eleccin de material deseable para la administracin de frmacos durante un perodo
de tiempo prolongado. Se utiliza normalmente para hacer microesferas para la administracin
de frmacos, mientras que ms recientemente se ha investigado para otras aplicaciones de
Pg. 21
ingeniera de tejidos neuronales, como la reparacin de la lesin del nervio perifrico

(Dhandayuthapani B. et al., 2011).
cido poli-gliclico (PGA)/ cido poli-lctico (PLA): polmeros sintticos biodegradables, que
pueden hacerse reaccionar para formar el copolmero de poli (cido lctico-co-gliclico).
Despus de la implantacin, los enlaces ster que forman la cadena principal del polmero se
pueden hidrolizar, causando que el andamio se degrade en subproductos metabolicos. Estos
subproductos pueden ser absorbidos por el cuerpo y pueden causar cambios de pH alrededor
del sitio de implantacin. La velocidad de degradacin de los andamios puede ser alterado
variando la relacin de PGA y PLA en el andamio (Athanasiou K. A. et al., 1996).
Poli-metacrilato de 2-hidroxietilo (PHEMA)/poli-2-hidroxietil metacrilato-co-metil metacrilato
(PHEMA-MMA): polmeros no degradables. Como resultado, los andamios hechos de PHEMA
y PHEMA-MMA permanecen estables despus de la implantacin. Tales andamios pueden ser
moldeados en una variedad de formas, incluyendo el ser modificado para contener canales
que
se
pueden
llenar
con
drogas
teraputicas
o
protenas.
Las propiedades mecnicas tambin pueden ser modulados mediante la adicin de mltiples
capas de PHEMA para fortalecer el andamio (Tsai E.C. et al., 2006).
Polipirrol (Ppys): polmero que se compone de estructuras de anillo de pirrol conectados.
Adems de ser biocompatible, Ppy tambin es altamente conductor, por lo que es conveniente
para el uso en aplicaciones de prtesis neuronales. Se puede moldear en una variedad de
formas y permite la adhesin celular (Parra Cid C. et al, 2014).
2.2 Tcnicas de fabricacin
2.2.1 Unin de fibras
Pueden construirse matrices porosas tridimensionales mediante la unin de fibras de polmero
en sus puntos de cruce utilizando un polmero secundario. Por ejemplo, las fibras de PGA se
han unido mediante la incorporacin en la solucin de PLA, de refrigeracin, y la posterior
eliminacin de PLLA (Martnez Ramos C. et al, 2012). Sin embargo, las dificultades residen
para
esta
tcnica
en
el
control
de
la
porosidad
o
eleccin de los disolventes.
2.2.2 Liofilizacin
La liofilizacin (o freeze-drying) es uno de los procesos de porificacin de materiales ms
usados en la actualidad. Se basa en el secado por congelamiento del material, en el cual se
procede a congelar un material disuelto y posteriormente reducir la presin hasta lograr la
sublimacin (cambio de estado de lquido a gas) del solvente presente en la muestra. En el
caso de la liofilizacin de polmeros, esto producir poros homogneos con tamaos
dependientes de la temperatura, el vaco y el tiempo aplicados durante el proceso. Un ejemplo
de esto es el uso de scaffolds de colgeno con glicosaminoglicanos (condroitin-6-sulfato,
C6S). Se demostr que a partir de los 100 um de tamao de poro, la disminucin de la
proliferacin de tejido seo es muy sensible al aumento del tamao de los poros, lo que
muestra que el tamao de poros debe ser controlado estrictamente. Para esto puede utilizarse
el siguiente proceso: degasificar la muestra para evitar burbujas, enfriar la muestra a tasa
constante hasta una temperatura final bajo cero (-10 a -60C), templar a 10C por un
determinado tiempo (que modificar el tamao del poro) y sublimar el agua por aplicacin de
vaco (Murphy, Ciara et al., 2010).
2.2.3 Moldeado por solucin
El solvent-casting (moldeado por solucin) es el ms comn de los procesos de moldeado. Se
basa en la disolucin de un polmero en un solvente (cloroformo, cloruro de metileno) que
Pg. 22
pueda ser posteriormente extrado (por secado por vaco, evaporacin, insolubilizacin del
polmero y lavado, etc) sin daar la morfologa y estructura del material (Xingeng M. et al.,
2009).
2.2.4 Procesamiento de alta presin
El procesamiento de alta presin se lleva a cabo mediante la aplicacin de un gas, tal como
dixido de carbono, al polmero seco a alta presin que forma una solucin de fase nica de
polmero / gas. La presin se reduce a continuacin para crear inestabilidad termodinmica
del CO2, lo que resulta en la nucleacin y el crecimiento de las clulas de gas para generar
poros dentro de la matriz de polmero disuelto. La principal ventaja de este mtodo es que
excluye el uso de disolventes orgnicos. Dado que la tcnica no incluye un proceso de
calentamiento, tambin es til para la incorporacin de biomolculas sensibles al calor (Hyun
J.,
Tae
Gwan
P.,
2007).
La estructura porosa es bastante uniforme ya que el gas de CO2 se disuelve
homogneamente con el polmero y tambin acta como un plastificante que induce el
embalaje de cadenas polimricas, resultando en una mayor resistencia mecnica. Sin
embargo, este mtodo da lugar a la interconectividad insuficiente de poros dentro de la matriz,
con una superficie no porosa en la mayora de los casos. Para superar este problema, se
modifica esta tcnica mediante la combinacin con el mtodo de lavado de partculas
(Dhandayuthapani B. et al., 2011).
2.2.5 Lixiviacin de partculas
La lixiviacin es un proceso de porificacin que se vale de un porgeno (como el NaCl,
tamizado para obtener un tamao de poro determinado). El mismo se deposita sobre un
molde y se inyecta a presin la solucin polimrica, de modo que cubra todos los espacios
entre los cristales salinos. Luego se procede a evaporar el solvente por aplicacin de vaco,
de modo de obtener una estructura polimrica alrededor de los cristales de las sales. Por
ltimo se eliminan los cristales salinos por disolucin (leach out) por lavado continuo con
agua. Como resultado se obtiene una estructura moldeada y porosa. Uno de los problemas de
esta tcnica es la dificultad para eliminar completamente el porgeno. Ante esto, se han
propuesto tcnicas de lixiviado capa por capa, fciles de lavar (Gong et al., 2011)
Para resolver el problema de la interconexin de los poros y el control del tamao de poro se
propuso usar microesferas como porgeno para el lixiviado. En un estudio se usaron
microesferas de gelatina y microesferas de parafina, obteniendo poros esfricos bien definidos
(ver figura). Estos scaffolds mostraron mejores propiedades mecnicas y resistencia al flujo
que los scaffolds con poros no esfricos no homogneos (Draghi et al., 2005). Adems, para
mejorar la dispersin de las sales y la cobertura del polmero de todo el volumen entre las
partculas porificadoras puede usarse un proceso de leaching centrifugado, que evita las
burbujas de aire en la estructura final mejorando las propiedades mecnicas y evitando la
concentracin de tensiones (Xingeng Miao et al., 2009).
2.2.6 Separacin de fases
Tcnica de porificacin basada en la separacin termodinmica de soluciones homogneas
de polmeros en una solucin de alta concentracin polimrica y otra de baja concentracin a
travs de la liofilizacin. Tiene la ventaja de no usar porificadores, los cuales suelen ser
txicos y no permitir la adhesin y crecimiento celular, pero utiliza solventes orgnicos que
pueden dificultar tambin la celularizacin. Puede realizarse por exposicin a un solvente
inmiscible o por enfriamiento por debajo de la curva binodal de solubilidad. Estos mtodos son
llamados emulsificacin y secado por congelamiento y separacin de fases inducida por
temperatura (TIPS), respectivamente (Martnez-Prez et al., 2011).
Pg. 23
La emulsificacin consiste en formar una emulsin entre una solucin polimrica (por ejemplo,
PLA con diclorometano, naftaleno u otro solvente orgnico de bajo punto de fusin) y un
solvente inmiscible (como agua) por mezcla a alta velocidad (1.000 a 30.000 rpm). Se procede
a moldear la mezcla para permitir su conformacin, y luego se enfra rpidamente por
inmersin en nitrgeno lquido, solidificando la estructura lquida (solventes). Se procede a
realizar la liofilizacin por vaco constante (entre 0,1 y 6 mbar) y a baja temperatura (por
debajo del punto triple del solvente) durante varios das. De este modo los solventes (solucin
polimrica pobre) se subliman y lentamente son separados (Niu et al., 2013).
En cualquiera de los procedimientos anteriores se puede controlar la morfologa y tamao de
los poros modificando la composicin, la solucin, la temperatura y el vaco al que se
someten. Mayor cantidad de solvente lograr estructuras ms dbiles pero ms porosas.
Temperaturas inmediatamente inferiores que la de fusin del solvente lograrn una separacin
por nucleacin y crecimiento, formando poros esfricos y poco conectados, mientras que
temperaturas ms bajas lograrn poros filamentosos o cilndricos muy bien interconectados.
Vacos ms bajos (0,1 mbar) lograrn ms rpida sublimacin, obteniendo poros ms
pequeos e interconectados. Cualquiera de los mtodos puede ser sometido a templado para
lograr ampliacin de los dominios porosos. Pueden lograrse porosidades mayores al 90%, con
tamao de poros pequeos (de hasta 1-10 um de dimetro) o grandes (de 100 um, poco
homogneos y difciles de obtener) (Patel, Bonde y Srinivasan, 2010)
2.2.7 Electrospinning
El proceso de electrospinning permite obtener fibras por medio de estiramiento coaxial de una
solucin viscoelstica. Estas fibras poseen dimetros que van desde los micrmetros hasta
los nanmetros, rangos en los que es posible encontrar caractersticas nicas, entre las que
se encuentra: rea superficial muy grande en relacin al volumen, flexibilidad en la superficie,
alta porosidad, poros interconectados y elevado rendimiento mecnico.
El tpico montaje para la ejecucin de esta tcnica consta de un capilar a travs del cual debe
ser expulsada la solucin polimrica (aguja, cono, etc), una fuente de alto voltaje que posee
dos electrodos los cuales deben conectarse uno al lugar de salida de la solucin y otro
directamente al plato colector (lamina de metal, mandril rotativo, etc).
Figura 1: Ilustracion tpica de la tcnica de Electrospinning e imagen microscpica del formado (Gong
G., 2012)
La tcnica consiste en hacer girar soluciones de polmeros a travs de altos campos

elctricos, aplicando suficiente fuerza elctrica como para superar las fuerzas de tensin
superficial en la solucin del polmero cargado
2.2.8 Prototipado rpido
Pg. 24
El prototipado rpido (RP) ha introducido recientemente un nuevo mtodo en la fabricacin de

scaffolds de ingeniera de tejidos bien diseados. RP utiliza un modelo de diseo asistido por
computadora para la construccin de una arquitectura de 3 dimensiones de capa por capa,
con un control preciso de las caractersticas morfologicas, as como la composicin qumica y
las propiedades mecnicas. Esta tcnica permite la produccin de andamios que se
personalizan en tamao y forma de acuerdo a los requerimientos especficos que son
altamente reproducibles (Yang S. et al, 2002).
2.3 Novedades en scaffolds
2.3.1 Matrigel.
Esta matriz sinttica se obtiene de una lnea celular Engelbreth-Holm-Swarm de ratas
atmicas. Se compone de laminina, colgeno IV, heparan sulfato proteoglicano y entactina;
adems posee factores de crecimiento de baja concentracin, tales como EGF, FGF, TGF-,
IGF-I, entre otros. Estos componentes facilitan la adhesin celular y su diferenciacin. El
matrigel ha sido aplicado para el crecimiento de clulas de Schawn y en la regeneracin
axonal, tal vez por el efecto que tienen los factores de crecimiento que pueden ser aplicados,
55 ya que se ha visto que alguno de los componentes de este bioma-terial tiene efecto
inhibitorio para el crecimiento axonal como la laminina y el heparan sulfato proteoglicano
(Parra Cid C. et al, 2014)
Segn Daniel D. Dewitt y colaboradores (Dewitt D. et al, 2009), estudios comparativos
realizados sobre cultivos in vitro de clulas de Schwann sobre matrices compuestas
puramente por Colgeno tipo I y matrices mixtas, conformadas por Colgeno I y Matrigel
arrojan resultados ms favorables para esta ltima combinacin. Incorporaciones de 50% en
volumen de Matrigel representan un incremento en el tiempo de crecimiento de cerca de 4,2
veces respecto a la misma aplicacin solo con Colgeno I, luego de 14 das de cultivo.
Observaciones similares establecen disminuciones de 35-50% en el nmero de clulas en
cultivo, respecto a porcentajes que rondan el 88% en scaffolds nicamente conformados por
Colgeno
I
(Dewitt
D.
et
al,
2009).
Dewitt y sus colaboradores tambin observaron mejoras en cuanto a rigidez y a distribucin
de fibras en los ensayos con Matrigel, por lo que concluyen que este compuesto es una base
eficiente para el desarrollo de scaffolds como soporte de neuronas y clulas de Scwann.
En estudios realizados por Kunlin Jin et al. (Kunlin J. et al, 2009) donde se implantaron
Clulas Neuronales Progenitoras (NPC- Neuronal stem/progenitor cells) derivadas de clulas
embrionarias humanas sobre distintos tipos de receptores, los resultados obtenidos respecto
al uso de Matrigel son positivos. Las clulas fueron implantadas con (1) fluido cerebroespinal
artificial (CSF), (2) scaffolds de Matrigel, (3) NPCs, (4) NPCs ms scaffolds de Matrigel y (5)
Pg. 25
Figura 2. Evolucin de tejido neuronal de rata utilizando Matrigel en diferentes mezclas ( Kunlin J. et al,
2009)
NPCs cultivadas y administradas en Matrigel sobre tejido neural de rata infartado. Los
resultados arribados indican mayor eficiencia en las pruebas hechas con combincaciones de
NPC y Matrigel, observndose reduccin del espacio infartado, supervivencia de clulas
transplantadas, diferenciacin primaria de las clulas implantadas, obtencin de respuesta
electrofisiolgica en la zona implantada y mejora en el comportamiento de la zona afectada.
Una de las desventajas de este tipo de scaffolds es que el Matrigel no es una matriz bien
definida (se obtiene como derivado de tejido natural de ratas) , y por lo tanto puede producir
variabilidad en los resultados experimentales (Hughes C. et al, 2010).
2.3.2 Neurogel
NEUROGEL es un polmero biocompatible, completamente sinttico, con 96% de agua.
Sus caractersticas esenciales son su estructura porosa y el hecho de que permite la difusin
de molculas de una manera que es una reminiscencia de propiedades del cerebro
embrionario (Neurogel, 2014).
Este biopolmero es un hidrogel de estructura porosa formado por poly (N-2-[hidroxipropilo]
metacrilamida) (PHPMA). Este biomaterial es biocompatible y no es txico. Por las
caractersticas que posee, ha sido utilizado en la reparacin de mdula espinal (de hecho,
surge como incentivo de la bsqueda de un "tejido sinttico que pudiera funcionar como una
matriz de crecimiento de apoyo para las fibras nerviosas daadas, y regenerar una conexin a
las clulas que controlan los msculos de las extremidades) (Neurogel, 2014).
Diversos estudios avalan la viabilidad del Neurogel como scaffold para regeneracin de tejido
nervioso tanto en mdula espinal como en corteza. En un estudio reportado por Perticini y
colaboradores (Perticini V. et al, 2013) se utiliz este biomaterial para la reconexin espinal en
un modelo de lesin medular en rata y se evalu la recuperacin motora. Ellos observaron
una mejora en las ratas que fueron implantadas con el biomaterial a las seis semanas y
posteriormente encontraron una preservacin de la mielina en este grupo de ratas; sin
embargo, este biomaterial tiene como desventaja que no es biodegradable (Zhoong Y,
Bellamkonda R., 2008) pero s puede ser excretado por el sistema renal hasta alcanzar el
lmite del peso molecular de 40,000 Da; otra desventaja es que este hidrogel no puede
gelificar in situ, por lo que el mtodo del implante es invasivo (Perticini V. et al, 2013).
En un implante realizado en una cavidad central de mdula lesionada de rata, luego de seis
meses, se observ como el Neurogel cubra toda la zona central de la lesin (Xian J. et al,
2013). En otro estudio realizado sobre una lesin entre el septum y el hipocampo de ratas,
despus de seis meses de realizada la ciruga reconstructiva no se observaron signos de
toxicidad. El crecimiento hacia el interior llena completamente la cavidad de la lesin,
proporcionando una continuidad estructural a travs del defecto. El tejido fue bien integrado
con el hipocampo, la corteza, cuerpo estriado dorsal, tlamo dorsal y septum (Xian J. et al,
2013).
Pg. 26
Figura 3. NEUROGEL injerto dentro de la mdula espinal: las clulas invadieron la estructura porosa
del gel y se diferenciaron para crear una neotejido (Neurogel, 2014)
2.3.3 Nanotubos de cido polilctico.

La utilizacin de cido polilctico como polmero e incluso como scaffold no es un hecho
novedoso. Una de sus principales ventajas respecto materiales como PHEMA o PHEMAMMA, es su propiedad de poseer una superficie hidrofbica, caracterstica que mejora la
adhesin
celular
(Martnez
Ramos
C.
et
al,
2012).
Sin embargo, estudios recientes han vislumbrado su potencia como Scaffold en funcin de su
tasa de liberacin de lactato (Martnez Ramos C. et al, 2012).
En relacin a esto ltimo, se sabe que si bien la glucosa es el principal sustrato metablico de
las clulas del sistema nervioso central, stas tambin poseen la capacidad de incorporar
otros sustratos metablicos. La gliclisis, seguida de la fermentacin lctica produce dos
molculas de lactato por cada glucosa degradada. Cuando la tasa glicoltica se ve
incrementada, parte del lactato producido es transportado al espacio extracelular en donde
existen tejidos capaces de incorporar lactato utilizndolo para proveer energa al ser oxidado a
piruvato e incorporarlo al ciclo del cido ctrico (Mir Pino M., 2011). En los ltimos aos esta
idea ha adquirido importancia, apuntando a que las neuronas seran clulas que
preferentemente consumiran este monocarboxilato (Bousier-Sore MG. et al, 2007).
Un estudio muy reciente realizado en la Universidad de Barcelona (lvarez Z. et al, 2014)
sugiere la novedosa tcnica de implementar scaffolds polimricos sobre la base de la mezcla
PLDLLA 70/30 (70% levgiro, 30% destrgiro).
Figura 4. Microscopa electrnica de emisin de nanofibras de PLDLLA (lvarez Z. et al, 2014).
Este estudio arroja algunas conclusiones ms que alentadoras: demuestra que tanto el
PLA70/30 como el L-Lactato liberado son necesarios para mantener el metabolismo e inducir
la angiognesis; las fibras de PLA son hidrofbicas y pueden sintetizarse con el mismo
tamao, forma y carga negativa superficial que las clulas radiales de la gla y los astrocitos,
controlando la polimerizacin de la laminina. A su vez, concluye que las ventajas en el uso de
PLDLA respecto al clsico PLA radican en disminucin del ordenamiento, menor cristalinidad y
una alta tasa de degradacin (lvarez Z. et al, 2014).
La laminina depositada alrededor del polmero tambin puede ayudar a guiar la direccin de la
formacin de brotes endoteliales y la estabilizacin de nuevos vasos sanguneos en el interior
del andamio (Simon-Assmann P et al., 2011).
Pg. 27
Figura 5. (A) Imagen de control posterior al implante. (B) Estado de implante despus de 1 ao. (C) y
(D) imgenes de clulas gliales (GFAP= Protena cida Fibrilar Gliar) (lvarez Z. et al, 2014).
Pg. 28
Captulo 3: CLULAS EMPLEADAS EN TE

3.1 Embriologa del tejido nervioso
El sistema nervioso comienza su desarrollo embriolgico en la tercera semana, 19 das de
gestacin (embrin de aproximadamente 1,5 mm. de longitud). Este proceso llamado
neurulacin ocurre en la regin dorsal del embrin. Al comenzar la tercera semana, la notocorda
en desarrollo y el mesodermo adyacente estimulan al ectodermo que est encima de ellos. Este
complejo proceso de induccin notocordal hace que el ectodermo se engruese, formndose as
la placa neural (Curso de Neuroanatoma, 2010).
Una vez completado el proceso inductivo, la placa neural se alarga desde su sitio de origen
craneal al nodo primitivo hasta la membrana bucofarngea. Alrededor del 19 da de desarrollo
los bordes laterales de la placa neural se elevan y forman los pliegues neurales; la porcin
media entre los pliegues neurales forma el Surco neural. Hacia el final de la tercera semana
los pliegues neurales se elevan an ms, se acercan y se fusionan irregularmente en la lnea
media formando el tubo neural como se muestra en la figura 1. La fusin empieza en la
regin cervical y sigue hacia ceflico y caudal. Mientras ocurre la fusin, los bordes libres del
ectodermo superficial se separan del tubo neural. Posteriormente, ambos bordes se unen y
forman una capa continua en la superficie que dar origen al epitelio epidrmico (Henrquez
D., 2011).
Debido a que la fusin de los pliegues neurales no ocurre simultneamente a lo largo de ellos,
la luz del tubo neural comunica con la cavidad amnitica en sus extremos ceflico y caudal a
travs de los neuroporos craneal (anterior) y caudal (posterior). El cierre del neuroporo craneal
se realiza el da 25 (perodo 18-20 somitos). Por su parte el neuroporo caudal se cierra el da
27 (perodo de 25 somitos). El cierre de ambos neuroporos coincide con el establecimiento de
la circulacin sangunea hacia el tubo neural (Henrquez D., 2011).
Figura 6. Formacin del tubo neural (Henrquez D., 2011).
El tubo neural ser el que se convertir por diferenciacin en encfalo y mdula espinal,
mientras que las crestas neurales formarn la mayor parte del sistema nervioso perifrico.
Una vez formado el tubo neural queda con una cavidad en su interior que en el adulto,
permanece en el cerebro a nivel de los ventrculos laterales, en el encfalo en el tercer
ventrculo, en el tronco enceflico en el cuarto ventrculo y en la mdula en el canal central de
la mdula.
Posteriormente, existe una etapa de regionalizacin del Sistema Nervioso, mediada por la
accin de sustancias qumicas (factores neuralizantes y regionalizantes), que actan sobre el
genoma de clulas ectodrmicas. Una vez cerrado el tubo, se regionaliza diferencindose en
su porcin anterior en tres vesculas primarias, y en su porcin posterior en la Mdula Espinal.
La zona que queda por encima de la notocorda se denomina encfalo epicordal, lo que origina
el Prosencfalo, Mesencfalo, Romboencfalo y la mdula espinal. Es decir, al trmino de la
3 semana vamos a encontrar un embrin que presenta en su tubo neural 3 dilataciones, el
Prosencfalo o cerebro anterior, Mesencfalo o c. medio y Romboencfalo o cerebro
posterior. Las posteriores etapas se resumen en la figura 2.
Pg. 29
Figura 7. Formacin de los diversos componentes del SNC (Henrquez D., 2011).
La Proliferacin ocurre cuando el tubo neural esta constituido por un epitelio de aspecto
pseudoestratificado, cuyas clulas conectan sus extremos apical y basal a las membranas
limitantes externas e internas. La duracin e intensidad es caracterstica de cada especie, en
humanos ocurre principalmente a fines del tercer trimestre de gestacin y se prolonga hasta el
primer ao de vida postnatal. Grandes cantidades de neuronas aparecen desde el tercer
trimestre de gestacin, hasta el primer ao de vida postnatal, debido a la diferenciacin del
neuroepitelio, el cual produce Neuroblastos (clulas totipotenciales), que pasan por etapas
Apolar, Bipolar, Multipolar, hasta llegar a Neuronas Maduras. El Neuroepitelio, lo primero que
produce son los Neuroblastos, y cuando dejan de producirlos, comienzan a producir
Glioblastos, que son precursores de tres tipos de clulas propias del Sistema Nervioso, entre
ellas: Astrocitos Protoplasmticos, Astrocitos Fibrosos y Oligondendrocitos (Curso de
Neuroanatoma, 2010).
Alrededor del 4 mes aparecen las clulas de microgla, que no tienen origen ectodrmico.
Derivan del mesnquima circundante y se caracterizan por ser pequeas y muy fagocticas.
Llegan a la sustancia blanca y gris del SNC luego de la aparicin de los vasos sanguneos.
Durante el desarrollo del SNC, se generan ms neuronas de las que existen en el adulto. De
hecho, ms de un 50% de las neuronas en desarrollo, mueren antes de entrar en
funcionamiento. Por ejemplo, ms de la mitad de las motoneuronas inferiores que sinaptan
con msculo esqueltico mueren a las pocas horas despus de establecida la unin. Esta
muerte es resultado de una especie de competencia entre las neuronas por captar las
cantidades limitadas de factor neurotrfico liberado por las clulas musculares, lo que
ocasiona una muerte celular programada de las neuronas que no captan lo suficiente. Este es
un medio eficaz para ajustar el nmero de neuronas al nmero de clulas efectoras que
inervarn.
3.2 Obtencin y cultivo de clulas
Las clulas madres embrionarias (ESC) humanas son clulas pluripotentes derivadas de la
masa celular interna de embriones de preimplantacin. Pueden expandirse a un gran nmero
manteniendo al mismo tiempo su potencial para diferenciarse en diversos tipos de clulas
somticas de las tres capas germinales, incluyendo clulas madres neuronales (NSC)
(Egozcue J., 2012).
Tambin es posible obtener en el adulto clulas madres neuronales, extrayndolas de reas
restringidas del sistema nervioso central. Se ha demostrado que existe un pool de NSC en la
Pg. 30
capa subgranular de la circonvolucin dentada del hipocampo y en la zona subventricular

(SVZ) de los ventrculos laterales (Martnez Ramos C. et al, 2012).
3.3 Siembra celular
3.3.1 Siembra in vitro
Su-Chun Zhang et al han descripto la diferenciacin de NSC in vitro. Para iniciar la
diferenciacin, colonias de ESC fueron separas y cultivadas en suspensin como cuerpos
embrionarios. Dichos cuerpos se diferenciaron, en presencia de factor FGF-2 (factor de
crecimiento de fibroblastos), y formaron estructuras similares a tubos neurales. Luego asilaron
precursores neuronales por digestin enzimtica selectiva y adicionalmente se purificaron
sobre la base de la adhesin diferencial. Tras la retirada de FGF-2 se han diferenciado
neuronas, astrocitos y oligodendrocitos. Demostraron adems que la fuerte adhesin clulaclula en las estructuras neuroepiteliales y su baja adhesividad al tejido de cultivo sustrato
permite el aislamiento selectivo de clulas neuronales sin contaminacin significativa por parte
de otras clulas de linaje somtico (Su Chun Z. et al, 2001).
3.3.2 Siembra in situ
Kunlin Jin et al transplantaron NSC humanas inmersas en scaffolds en cerebros infartados de
ratas. Para preparar el pool celular, las NSC se mantuvieron en un medio de proliferacin
compuesto por 2 mmol/litro de L-Glutamina, 50 mg/ml de penicilina/estreptomicina, 10 ng/ml
del factor inhibidor de la leucemia y 20 ng/ml de FGF-2. En estas condiciones las clulas
expresaron tanto nestina como una cantidad menor de 1% de marcadores de linaje neuronal
maduro (calbidina, GFAP astroglial y OX4 oligodendroglial) (Kunlin J. et al, 2009).
A fin de determinar si las clulas trasplantadas podran diferenciar lo suficiente como para
exhibir la funcin neuronal, algunos NSC derivadas de ESC humanas fueron transfectadas
con un vector que contiene GFP (protena fluorescente verde) antes de ser transplantadas
junto con el scaffold al cerebro infartado de rata. Kunlin Jin et al identificaron 20 clulas
positivas para GFP y encontraron que el 40% de las clulas visualiza potenciales de accin
espontneos y corrientes post-sinpticas excitatorias, en consecuencia con las propiedades
neuronales fisiolgicas (Kunlin J. et al, 2009).
Pg. 31
Captulo 4: FACTORES PARA LA PROMOCIN DE LA REGENERACIN

4.1 Neurotrofinas
Las neurotrofinas, o factores neurotrficos, son una familia de factores de crecimiento. Son
protenas o polipptidos de sealizacin secretados para promover respuestas celulares
especficas, como la migracin, proliferacin y diferenciacin celular. Son producidos por
secrecin celular ante seales, y actan por unin a receptores transmembrana de las clulas
blanco. Estos receptores producen respuestas por segundos mensajeros (mediadores
celulares) que transducirn la seal y activarn el aparato gentico desencadenando una
respuesta biolgica. Por su corta vida media y lenta difusin sealizan slo a corto rango
espacial y temporal a travs de la ECM (respuesta no endcrina). Su actuacin sobre
determinado grupo de clulas depende del nmero y tipo de receptores de membrana de las
mismas y de la transduccin intracelular de la seal (Discher et al., 2009).
Figura 8. Va regulatoria desencadenada por factores de crecimiento. 1. Secrecin por la clula

productora. 2. Interaccin con la ECM. 3. Interaccin con protenas receptoras de la membrana (en este
caso, integrinas). 4. Mecanismo de regulacin interna (mediadores celulares citoplasmticos, expresin
gentica nuclear) (Lee, Silva y Mooney, 2010)
Los factores neurotrficos han sido estudiados principalmente en relacin con sus funciones
en la regulacin de los mecanismos moleculares que permiten la supervivencia y
diferenciacin de poblaciones neuronales especficos durante el desarrollo embrionario. En los
ltimos aos se ha encontrado un creciente nmero de evidencias experimentales que
demuestran las aportaciones fisiolgicas de las neurotrofinas a la vida adulta de la persona,
entre las cuales destacan su papel en la plasticidad neuronal, en el mantenimiento de la
memoria, en la estimulacin de la sntesis y en la liberacin de los neurotransmisores y
neuropptidos, y como un mecanismo de proteccin neuronal durante el dao degenerativo,
que incluye el restablecimiento de los axones y dendritas, y el mantenimiento de la
homeostasis celular (Asal Camacho M., 1997).
Pg. 32
4.1.1 Factor de crecimiento nervioso (NGF)

Es una protena presente en el sistema nervioso y otros sistemas del cuerpo humano,
necesaria para la supervivencia y desarrollo de las neuronas en el perodo embrionario.
Adems dirige el crecimiento de las vas nerviosas haca sus rganos efectores durante el
perodo fetal. Por ejemplo, ms de la mitad de las motoneuronas inferiores que sinaptan con
msculo esqueltico mueren a las pocas horas despus de establecida la unin. Esta muerte
es resultado de una especie de competencia entre las neuronas por captar las cantidades
limitadas de factor neurotrfico liberado por las clulas musculares, lo que ocasiona una
muerte celular programada de las neuronas que no captan lo suficiente. Este es un medio
eficaz para ajustar el nmero de neuronas al nmero de clulas efectoras que inervarn
(Facultad de Medicina, 2014) (Lorigados Pedre L. et al, 2004).
Esta protena est constituida por un complejo pentamrico con dos subunidades , una
subunidad y dos subunidades , todas asociadas no covalentemente. La subunidad (NGFm), que es la responsable de la actividad biolgica del NGF, es un homodmero de 118
aminocidos y 26,5 kDa. La protena comienza en la porcin amino terminal con serina y
termina con arginina en la porcin carboxilo terminal. Cada cadena del homodmero presenta
tres puentes disulfuros intracatenarios y se asocia con la otra cadena a travs de
interacciones no covalentes. Longo FM et al, han comunicado que las subunidades y
podran estar vinculadas con la regulacin de los procesos de liberacin y degradacin del NGFm y brindar proteccin contra la accin de proteasas (Lorigados Pedre L. et al, 2004).
4.1.2 Factor neurotrfico derivado del cerebro (BDNF)
En los seres humanos, el BDNF es abundante en el cerebro, y en la periferia se lo puede
encontrar tanto en el suero como en el plasma. Los niveles en suero son hasta 200 veces
mayores que en el plasma. Las plaquetas contienen gran cantidad de BDNF, por lo tanto la
diferencia entre suero y plasma podra reflejar la cantidad de BDNF almacenado en las
plaquetas. Se conoce que el BDNF cruza la Barrera Hematoenceflica (BHE) en ambas
direcciones, siendo el BDNF circulante de origen neuronal y glial (Binder D. et al, 2004).
EL BDNF presenta gran afinidad por los receptores de membrana de la familia de las tirosinas
quinasa TrkB y en menor medida a los receptores p75. Est asociado a funciones de
modulacin de la diferenciacin neuronal, la supervivencia y la funcin en el desarrollo del
SNC y SNP, adems acta fomentando la angiognesis y la hematopoyesis, y tiene un rol
importante en la plasticidad neuronal en la adultez (Binder D. et al, 2004).
4.1.3 Glial growth factor (GGF)
El GGF acta en el desarrollo embrionario clulas de la cresta neural en clulas gliales,
estimulando su crecimiento y maduracin morfolgica.
4.2 Otros factores de crecimiento
4.2.1 Neurotrofina-3 (NT-3)
Es el nico entre las neurotrofinas en el nmero de neuronas que potencialmente puede
estimular, dada su capacidad de activar dos de los receptores de las neurotrofinas tirosina
quinasa (TrkC y TrkB). Previene la muerte de las neuronas sensoriales durante la etapa
proliferativa en la neurognesis (Asal Camacho M., 1997).
Pg. 33
4.2.2 Neurotrofina-4 (NT-4)

Es una protena, un dmero formado por dos cadenas idnticas de 130 aminocidos que estn
unidas fuertemente por interacciones hidrofbicas Posee afinidad por los receptores del tipo
tirosina quinasa TrkB y se encarga de la diferenciacin y proliferacin de neuronas y de
clulas de la neuroglia (Asal Camacho M., 1997).
4.2.3 Vascular endothelial Growth factor (VEGF)
Este factor es el ms citado en los trabajos de investigacin y acta sobre los vasos
sanguneos, fomentando el crecimiento endotelial. Inhibe la invasin celular de los tejidos,
pero aumenta la migracin celular, hecho que se condice con su actuacin tarda en la
formacin de los cojines endoteliales que conformarn las vlvulas cardacas primitivas. De
este modo, al no actuar e un principio permite la invasin celular del tejido, y su actuacin
posterior fomenta la motilidad celular de los miofibroblastos para la remodelacin de la ECM
segn las tensiones aplicadas (Chiu et al., 2010)
La composicin de la ECM es crucial para la mediacin de la respuesta de factores de
crecimiento, ya que esta puede regular la presentacin de los factores mediante la unin de
los factores a la ECM. En algunos factores de crecimiento existen dominios de unin con la
heparina, que hacen fundamental la composicin adecuada de la matriz en la sealizacin.
Esta unin con heparina representa reacciones ms lentas que los factores sin dominios de
unin con heparina, los cuales presentan una ms rpida difusin. Adems, la ECM regula el
anclaje y motilidad de las clulas, adaptando el tejido a su estructura. Por ejemplo las
integrinas, protenas de membrana con dominios de unin con ECM, regulan activamente la
angiognesis y sealizacin de tejido endotelial (Place, Evans y Stevens, 2009).
La concentracin local de factores puede regular respuestas clula-clula, como las uniones
mediadas por cadherinas que son aumentadas para suprimir la proliferacin celular slo
cuando un determinado factor disminuye su concentracin por debajo de un umbral. Adems,
la angiognesis mediada por VEGF es controlada por sealizacin notch, que suprime los
picos de concentracin de VEGF. La inhibicin local de los notch por DAPT (un inhibidor de
sealizacin notch) promueve la angiognesis por crecimiento endotelial gracias a una mayor
captacin de VEGF (Chen et al., 2011).
Un resumen del proceso se muestra en la figura:
Pg. 34
Figura 9. Factores de crecimiento involucrados en la angiognesis o endotelizacin de scaffolds (Place,

Evans y Stevens; 2009).
4.2.4 Fibroblast growth factor (FGFs)

Son una familia de 22 factores que se unen a 18 ligandos celulares (receptores de FGF
(FGFR) con quinasas de tirosina transmembrana) de gran potencial regenerativo y de
reparacin de tejidos por proliferacin de fibroblastos y mitognesis en general, incluyendo
piel, vasos, msculos, tejido adiposo, tendones y ligamentos, cartlago, hueso, diente y nervio.
El principal camino de seales que activa es de RAS/MAP. Se degradan fcilmente in vivo, por
lo que se recomienda su uso encapsulado. Acta simultneamente con heparina o heparnsulfato para activar los FGFR (Lee, Silva y Mooney, 2010).
La sealizacin intracelular se produce por fosforilacin de tirosina (tyr-P), que sirven como
disparadores de varias reacciones en cadena. Las tyr-P puede servir como sitio de
reclutamiento de SH2 (Src homology-2) o PTB (unin de fosfotirosina), que anclan protenas o
sealizan enzimas. Los caminos de fosforilacin pueden ser 3: 1. RAS/MAP (mitogen
activated protein), regula expresin gentica, mitosis, diferenciacin y apoptosis; 2. PI3
kinasa/AKT (fosfoinositida 3 kinasa), determina supervivencia y polaridad celular; 3. PLCgamma (fosfolipasa C gamma), aun no se saben las consecuencias de este ltimo camino,
pero se sugiere que induce la adhesin celular (Yun et al., 2010).
Los FGF participantes del crecimiento, desarrollo y reparacin valvular son, hasta adonde se
sabe, el FGF1 y el FGF2:
-
aFGF (FGF cido) o FGF1: factor proliferativo celular (en especial endotelial, epitelial
y fibroblstico), que tiene un rol importante en la migracin celular (quimiotaxis).
Participa activamente en la angiognesis (con ms potencia que VEGF y PDGF) por
promocin de proliferacin endotelial y de organizacin fsica tubular. Tambin revierte
la transicin endotelial-mesenquimal producida por la TGF1 (Ramos, 2010).
Pg. 35
bFGF (FGF bsico) o FGF2: produce migracin, proliferacin y supervivencia de

clulas endoteliales, as como migracin y proliferacin de fibroblastos y clulas
miognicas, procesos esenciales para proliferacin de vasos sanguneos nuevos,
hueso, nervios, msculo y piel. Participa activamente en la angiognesis (Kottakis et
al., 2011).
Pg. 36
Captulo 5: FARMACOS ANTINFLAMATORIOS

5.1 Frmacos suministrados en los scaffolds
Uno de los frmacos ms comnmente utilizado para reducir la inflamacin crnica y la
respuesta inmune que acompaa implantes neurales es la dexametasona, un esteroide
sinttico. La dexametasona se usa comnmente para el tratamiento de otras enfermedades
inflamatorias como la artritis y la esclerosis mltiple, y en la actualidad se como una alternativa
prometedora para aplicaciones de ingeniera de tejidos neuronales (Wadhwa R. et al, 2006).
Otro frmaco anti-inflamatorio, -hormona estimulante de melanocitos (MSH), tambin ha
sido investigada para su uso en conjuncin con implantes neuronales. Su accin consiste en
inhibir la produccin de citocinas inflamatorias que inducen la activacin del factor de
transcripcin nuclear kappa B (Ichiyama T. et al, 1999).
Rolipram es un frmaco anti-inflamatorio inhibidor de la 4-fosfodiesterasa que aumenta la
neuroproteccin despus de una lesin en mdula espinal (Griswold D. et al, 1993). En este
tipo de lesiones tambin suele usarse Metilprednesolona (Viness P. et al, 2012), esteroide
sinttico, del grupo de los corticoides, que inhibe la formacin del cido araquidnico.
5.2 Mtodos de suministro
Se han desarrollado muchos mtodos de administracin de frmacos mediante scaffolds para
su uso en la ingeniera de los diferentes tejidos del sistema nervioso. El mtodo de
administracin de frmacos se debe seleccionar basado en la aplicacin, material del scaffold
y el frmaco en s. No todos mtodos de entrega son compatibles con todos los materiales del
scaffold y de drogas, por lo que se debe tener cuidado en el diseo de nuevos tipos de
andamios (Willerth S., 2007).
5.2.1 Degradacin/difusin
Uno de los mtodos ms comunes en la liberacin controlada es el de utilizar las propiedades
fsicas del material del scaffold para regular la cantidad de frmaco suministrado. Para crear
liberacin controlada, el frmaco a suministrar se mezcla con los precursores del scaffold
durante la fabricacin. En tales sistemas, las propiedades del andamio, tales como tamao de
poro o densidad de reticulacin, regular la liberacin por difusin. La velocidad de degradacin
de andamio tambin puede afectar la cantidad de frmaco que se libera a travs del tiempo.
5.2.2 Suministro por afinidad
Como una alternativa a depender de las propiedades fsicas de un material para regular la
liberacin, los sistemas de entrega basados en afinidad utilizan interacciones no covalentes
entre el frmaco deseado y el andamio para proporcionar la liberacin controlada. Uno de los
principales ejemplos de un sistema de entrega basado en afinidad es un sistema de unin a
heparina, el cual puede ser utilizados para entregar cualquier droga protenica que se une a la
heparina.
Tales sistemas de suministro fueron inicialmente diseadas para la liberacin del factor de
crecimiento bsico de fibroblastos (bFGF), pero recientemente han sido utilizados en
conjuncin con los scaffolds de fibrina para el tratamiento de lesiones del sistema nervioso
perifrico y central [6]. Este siste,a consta de cuatro componentes, un scaffold (por ejemplo
fibrina), un pptido bi-dominio, heparina, y un factor de crecimiento como se ve en la figura
(Wadhwa R. et al, 2006).
Pg. 37
Figura 10. modelo de suministro por afinidad (Willerth S., 2007).
El pptido consta de un sustrato de factor XIIIa, que permite la incorporacin covalente en los
scaffolds de fibrina, y un dominio de unin a heparina derivada de la anti-trombina III. Este
pptido se une a la heparina, orientndola hacia el interior. La heparina, a su vez, se puede
unir a la droga deseada.
5.2.3 Inmovilizacin del frmaco en el scaffold
Un enfoque diferente para la administracin de frmacos implica la unin covalente del
frmaco diana en el material de soporte. De esta manera, el frmaco no se pierde por difusin
y el curso temporal de la liberacin sera comparable a la vida til del scaffold.
Una consideracin importante en el diseo de tales sistemas de administracin es tratar que
la fijacin del frmaco al scaffold no perjudique su funcionalidad. As mismo, tambin deben
tomarse las precauciones necesarias para que en el proceso de formado no se afecte el sitio
de unin entre ambos. Adems, es importante asegurarse de que el frmaco no necesita ser
internalizado por la clula para producir el efecto deseado (Willerth S., 2007).
Una forma de inmovilizacin covalente de protenas al scaffold es mediante el uso de un
proceso fotoqumico. Este mtodo ha sido utilizado por varios investigadores en la unin del
factor NGF a una variedad de materiales, incluyendo pHEMA, PPy, y polidimetilsiloxano
(PDMS) (Sakiyama-Elbert S., 2000).
Figura 11. Fijacin fotoqumica entre el factor NGF y la Polipirrolina (Sakiyama-Elbert S., 2000).
En otro modo de fijacin se usa dextrano activado con metaperyodato de sodio, lo que le
permite formar enlaces covalentes con algunos factores (Sakiyama-Elbert S. et al, 2007).
5.2.4 Estimulacin elctrica
Este mtodo consiste en la libaracin de frmacos ente estimulacin elctrica, que a menudo
se utiliza durante la colocacin de estos implantes. Una variante es el uso de dexametasona
Pg. 38
incorporada en pelculas de PoliPirrolina (PPy) cultivadas en la parte superior de pelculas de

oro mediante el uso de electro-polimerizacin (Wadhwa R. et al, 2006). La liberacin
controlada de la dexametasona de las pelculas Ppy se produce despus de la aplicacin de
un estmulo elctrico. En estudios in vitro se demostr que la liberacin de dexametasona
redujo la cantidad de astrocitos reactivos presentes, aunque no tiene efecto negativo en la
viabilidad de las neuronas. Adems, el recubrimiento no alter la impedancia del electrodo.
Esta estrategia y sus variantes son tiles para el diseo de recubrimientos de implantes
neuronales y tambin pueden tener aplicaciones en la promocin de la regeneracin de otras
lesiones en el sistema nervioso (Willerth S., 2007).
Pg. 39
G. CONCLUSIONES
Mediante este trabajo pudimos observar la enorme cantidad de informacin disponible sobre
el tema elegido, que sin embargo se encuentra muy dispersa. La realizacin de una
investigacin bibliogrfica termina siendo imprescindible para introducirnos en el tema y
obtener un enfoque general del estado del arte dentro del campo de la ingeniera tisular
aplicada regeneracin neuronal. En este sentido, slo despus de haber revisado una gran
cantidad de bibliografa logramos compenetrarnos con la terminologa y los conceptos usados
ms ampliamente, para luego poder relacionarlos y volcarlos en un informe general.
Adems, pudimos relacionar conceptos bsicos de la asignatura con distintas aplicaciones
reales. En la lectura de papers y trabajos sobre el tema encontramos valiosa la visin general
que nos haba aportado el estudio de las diferentes propiedades de los materiales y sus
utilidades.
Pensamos que, por un lado, los conceptos adquiridos pueden ser tiles como punto de partida
para una futura investigacin en profundidad. Por otro lado, el mtodo de investigacin
aplicado resultar til en nuestro futuro profesional, cuando necesitemos informarnos sobre
cualquier tema cientfico sobre el cual debamos trabajar. Asimismo, la metodologa grupal
aporta un enfoque importante ya que los trabajos cientficos en general requieren de la
participacin de varios profesionales.
Respecto a la temtica abordada, se concluye que si bien la ingeniera de tejidos es un
mtodo que lleva aos de desarrollo, cada vez se est ms cerca de desarrollar tcnicas que
permitan entender como trabaja el tejido neuronal y como puede trabajarse en su
regeneracin ante lesiones que incluso generen prdidas abultadas de tejido. La identificacin
de zonas con clulas pluripotenciales en la capa subgranular de la circonvolucin dentada del
hipocampo y en la zona subventricular de los ventrculos laterales es una muestra de cuanto
han evolucionado las tcnicas de investigacin y lo positivas que son las proyecciones a
futuro respecto de la capacidad de regenerar completamente el tejido nervioso.
Pg. 40
H. BIBLIOGRAFA
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Pg. 44
I. GLOSARIO
1.1. Glosario alfabetizado en Ingls
amphibolic: anfiblico: proceso que involucra reacciones catablicas y anablicas.
aneurysm: aneurisma: ensanchamiento o abombamiento anormal de una porcin de una
arteria debido a una debilidad en la pared del vaso sanguneo.
angiogenesis: angiognesis: angiognesis es el proceso fisiolgico que consiste en la
formacin de vasos sanguneos nuevos a partir de los vasos preexistentes.
anisotropy: anisotropa: es la propiedad general de la materia segn la cual diferentes
propiedades varan segn la direccin en que son examinadas.
antigenicity: antigenicidad: particularidad del antgeno que hace que ste sea reconocido por
un determinado anticuerpo.
apoptosis: apoptosis: muerte celular programada.
aptamers: aptmeros: Los aptmeros son oligonucletidos de cadena sencilla con tamaos
entre 70 y 100 nucletidos capaces de reconocer de forma especfica y con alta afinidad a
varios tipos de molculas diana mediante un plegamiento tridimensional de su cadena.
aterosclerosis: ateroesclerosis: es un sndrome caracterizado por el depsito e infiltracin de
sustancias lipdicas en las paredes de las arterias de mediano y grueso calibre.
atherosclerotic plaques: placas de ateroma: Las placas de ateroma o ateromas son lesiones
focales que se inician en la capa ntima de una arteria.
atomization: atomizacin: pulverizacin de lquidos.
autocrine: autcrino: se aplica a un tipo de secrecin qumica que afecta a la misma clula
que secret la sustancia, como una hormona, por ejemplo.
autolisis: autolisis: proceso biolgico por el cual una clula se autodestruye, ya sea porque no
es ms necesaria o porque est daada y debe prevenirse un dao mayor.
bioactive: bioactivo: Relativo o perteneciente a una sustancia que tiene un efecto en el tejido
vivo o causa una reaccin en l.
biodegradability: biodegradabilidad: propiedad de un producto o sustancia que le permite
descomponerse en los elementos qumicos que lo conforman, debido a la accin de agentes
biolgicos, como plantas, animales, microorganismos y hongos, bajo condiciones ambientales
naturales.
biomechanics: biomecnica: rea de conocimiento interdisciplinaria que estudia los modelos,
fenmenos y leyes que sean relevantes en el movimiento y al equilibrio (incluyendo el
esttico) de los seres vivos.
biomimetic: biomimtica: ciencia que estudia a la naturaleza como fuente de inspiracin,
nuevas tecnologas innovadoras para resolver aquellos problemas humanos que la naturaleza
ha resuelto, mediante los modelos de sistemas (mecnica), procesos (qumica) y elementos
que imitan o se inspiran en ella.
Pg. 45
calcification: calcificacin: La calcificacin es una acumulacin de calcio en tejidos del

organismo.
chemotaxis: quimiotaxis: fenmeno en el cual las bacterias y otras clulas de organismos uni
o multicelulares dirigen sus movimientos de acuerdo con la concentracin de ciertas
sustancias qumicas en su medio ambiente.
chondrogenic: condrognico: generador de cartlago.
chondroid metaplasia: metaplasia condroide: transformacin citolgica de las clulas de un
tejido diferenciado en clulas de otro tipo de tejido que puede tener un parentesco prximo o
remoto, en este caso, tejido cartilaginoso.
chronic: crnico: se aplica a enfermedades de larga duracin y por lo general de progresin
lenta.
coalescence: coalescencia: posibilidad de dos o ms materiales de unirse en un nico cuerpo.
coacervation: coacervacin: proceso de formacin de micelas
composites: resinas compuestas: son materiales
heterogneamente y que forman un compuesto.
sintticos
que
estn
mezclados
congenital: congnito: cualquier rasgo o identidad presente en el nacimiento adquirido durante

la vida intrauterina.
cryopreservation: criopreservacin: proceso en el cual clulas o tejidos son congelados a muy
bajas temperaturas, generalmente entre -80 C y -196 C (el punto de ebullicin del nitrgeno
lquido) para disminuir las funciones vitales de una clula o un organismo y poderlo mantener
en condiciones de vida suspendida por mucho tiempo.
decellularization: descelularizacin: extraccin de todas las clulas del rgano de un paciente
manteniendo la matriz extracelular del rgano.
embolism: embolismo: obstruccin rpida y brusca de una arteria por un mbolo.
endocarditis: endocarditis: enfermedad que se produce como resultado de la inflamacin del
endocardio, es decir, un proceso inflamatorio localizado en el revestimiento interno de las
cmaras y vlvulasbien sea nativas o protsicascardacas.
endocrine: endcrino: propiedad de las glndulas tambin llamadas de secrecin interna, que
vierten sus secreciones directamente a la sangre, o relacionado con ellas.
endothelialization: endotelizacin: generacin de tejido endotelial sobre la superficie de
prtesis o stents.
etiology: etiologa: se refiere a las causas de las patologas.
fusiform: fusiforme: en forma de huso (antiguo instrumento utilizado para hilar); con forma
alargada, elipsoide, y con las extremidades ms estrechas que el centro.
genotypic: genotpico: relacionado a la informacin gentica que posee un organismo en
particular.
Pg. 46
glycosylated: glicosilado: se aplica a sustancias que poseen un glcido adherido a su

molcula.
hemodynamic: hemodinmica: estudio de la dinmica de la sangre en el interior de las
estructuras por las que circula.
hemostasis: hemostasia: conjunto de mecanismos aptos para detener los procesos
hemorrgicos.
hydrophilic: hidroflico: que posee afinidad por el agua.
hydrophobic: hidrofbico: que es repelido por el agua.
hypertrophy: hipertrofia: aumento del tamao de un rgano cuando se debe al aumento
correlativo en el tamao de las clulas que lo forman.
hypotonic: hipotnico: solucin con baja concentracin de soluto.
immiscible: inmiscible: sustancias que en ninguna proporcin pueden formar una fase
homognea.
ischemia: isquemia: sufrimiento celular causado por la disminucin transitoria o permanente
del riego sanguneo y consecuente disminucin del aporte de oxgeno (hipoxia), de nutrientes
y la eliminacin de productos del metabolismo de un tejido biolgico.
juxtacrine: yuxtcrino: Relativo a una relacin hormonal en la cual la clula excretora es
adyacente a una clula efectora.
leaching: lixiviacin: tambin conocida como extraccin slido-lquido, es un proceso en el que
un disolvente lquido pasa a travs de un slido pulverizado para que se produzca la
disolucin de uno o ms de los componentes solubles del slido.
machinable: maquinable: se aplica a los materiales que soportan los procesos de maquinado,
tales como fresado, torneado, limado, etc.
metaplasia: metaplasia: transformacin citolgica de un epitelio maduro en otro que puede
tener un parentesco prximo o remoto.
mitogenesis: mitognesis: induccin de mitosis celular.
nanofibers: nanofibras: fibra polimrica con dimetro inferior a 500 nanmetros.
neovascularization: neovascularizacin: Desarrollo de nuevos vasos sanguneos.
Nucleation: nucleacin: comienzo de un cambio de estado en una regin pequea pero
estable.
osteogenic: osteognico: Compuesto de u originado a partir de cualquier tejido que participa
en el desarrollo, crecimiento o reparacin de un hueso.
pathology: patologa: rama de la medicina encargada del estudio de las enfermedades.
phenotypic: fenotpico: relacionado a la expresin de la informacin gentica que posee un
organismo.
Pg. 47
proteolytic: proteoltico: Dcese de una sustancia que disuelve las materias albuminoides o
proteicas.
quiescent: quiescente: Que est quieto pudiendo tener movimiento propio.
regurgitation: regurgitacin: filtracin de sangre a travs de una vlvula que no cierra
completamente.
SCF (supercritical fluids): fluidos supercrticos: cualquier sustancia que se encuentre en
condiciones de presin y temperatura superiores a su punto crtico que se comporta como un
hbrido entre un lquido y un gas, es decir, puede difundir como un gas (efusin), y disolver
sustancias como un lquido (disolvente).
sintering: sinterizado: tratamiento trmico de un polvo o compactado metlico o cermico a
una temperatura inferior a la de fusin de la mezcla, para incrementar la fuerza y la resistencia
de la pieza creando enlaces fuertes entre las partculas.
surfactant: tensoactivo: sustancias que influyen por medio de la tensin superficial en la
superficie de contacto entre dos fases (p.ej., dos lquidos insolubles uno en otro).
tachycardia: taquicardia: incremento de la frecuencia cardiaca.
thermoplastic: termoplstico: material plstico que a temperaturas relativamente altas se
vuelve deformable o flexible, se derrite cuando se calienta y se endurece en un estado de
transicin vtrea cuando se enfra lo suficiente.
thromboembolism: tromboembolismo: situacin clnica que ocurre cuando se genera un
cogulo en el interior del sistema vascular y permanece in situ (trombosis) o es desplazado
hacia delante en el torrente circulatorio (embolia).
thrombosis: trombosis: cogulo en el interior de un vaso sanguneo y uno de los causantes de
un infarto agudo de miocardio. Tambin se denomina as al propio proceso patolgico, en el
cual, un agregado de plaquetas o fibrina ocluye un vaso sanguneo.
tumorigenesis: tumorognico: que genera tumores.
valve prolapse: prolapso valvular: valvulopata (cardiopata valvular) caracterizada por el
desplazamiento de una valva anormalmente engrosada de una vlvula cardaca.
valvuloplasty: valvuloplastia: procedimiento teraputico mediante el cual una vlvula
estentica recupera su apertura, mediante el inflado de un globo en la luz de la vlvula,
insertado mediante un catter.
zoonoses: zoonosis: enfermedad que puede transmitirse de animales a seres humanos.
1.2. Glosario alfabetizado en castellano

Aneurisma: aneurysm.
Anfiblico: amphibolic.
Angiognesis: angiogenesis.
Anisotropa: anisotropy.
Pg. 48
Antigenicidad: antigenicity.
Apoptosis: apoptosis.
Aptmeros: aptamers.
Arterosclerosis: aterosclerosis.
Atomizacin: atomization.
Autcrino: autocrine.
Autlisis: autolisis.
Azeotrpica: azeotropic.
Bioactivo: bioactive.
Biocompatibilidad: biocompatibility.
Biodegradabilidad: biodegradability.
Biomecnica: biomechanics.
Biomimtico: biomimetic.
Calcificacin: calcification.
Coalescencia: coalescence.
Resinas compuestas: composites.
Condrognico: chondrogenic.
Congnito: congenital.
Criopreservacin: cryopreservation.
Crnico: chronic.
Descelularizacion: decellularization.
Elastlisis: elastolysis.
Embolia: embolism.
Endocarditis: endocarditis.
Endcrina: endocrine.
Endotelizacin: endothelialization.
Etiologia: etiology.
Fenotpico: phenotypic.
Fluidos supercrticos: SCF (supercritical fluids).
Fusiformes: fusiform.
Genotpico: genotypic.
Glicosilada: glycosylated.
Hemodinmica: hemodynamic.
Hemostasia: hemostasis.
Hidrofilico: hydrophilic.
Hidrofobico: hydrophobic.
Hipertrofia: hypertrophy.
Pg. 49
Hipotnica: hypotonic.
Inmiscible: immiscible.
Isquemia: ischemia.
Lixiviacin: leaching .
Maquinable: machinable.
Metaplasia: metaplasia.
Metaplasia condroide: chondroid metaplasia.
Mitognesis: mitogenesis.
Nanofibras: nanofibers.
Neovascularizacin: neovascularization.
Nucleacin: Nucleation.
Osteognicos: osteogenic.
Patologia: pathology.
Placas de ateroma: atherosclerotic plaques.
Prolapso valvular: valve prolapse.
Proteolticas: proteolytic.
Quiescentes: quiescent.
Quimiotaxis: chemotaxis.
Regurgitacin: regurgitation.
Sinterizacin: sintering.
Taquicardia: tachycardia.
Tensoactivo: surfactant.
Termoplstico: thermoplastic.
Tromboembolismo: thromboembolism.
Trombosis: thrombosis.
Tumorognesis: tumorigenesis.
Valvuloplastia: valvuloplasty.
Yuxtcrina: juxtacrine.
Zoonosis: zoonoses.
Pg. 50
J. CLAVES DE BSQUEDA
1) regeneracin neuronas acrilato
2) scaffolds regeneration neural
3) scaffolds brain acrylate
4) scaffolds regeneration acrylate
5) scaffolds regeneration neural
6) Sistema nervioso central
7) lesiones sistema nervioso central
8) solvent casting particulate leaching melt molding
9) tejido nervioso central
10) Tissue Engeniering
Pg. 51
K. ANEXOS
K.1. Ttulos y resmenes
lvarez Z. et al, 2014, Neurogenesis and vascularization of the damaged brain using a
lactate-releasing biomimetic scaffold. Biomaterials 35 (2014) 4769e4781
Abstract
Regenerative medicine strategies to promote recovery following traumatic brain injuries are currently
focused on the use of biomaterials as delivery systems for cells or bioactive molecules. Thisstudy shows
that cell-free biomimetic scaffolds consisting of radially aligned electrospun poly-L/DL lactic acid
(PLA70/30) nanofibers releaseL-lactate and reproduce the 3D organization and supportive function of
radial glia embryonic neural stem cells. The topology of PLA nanofibers supports neuronal migration
whileL-lactate released during PLA degradation acts as an alternative fuel for neurons and is required
for progenitor maintenance. Radial scaffolds implanted into cavities made in the postnatal mouse brain
fostered complete implant vascularization, sustained neurogenesis, and allowed the long-term survival
and integration of the newly generated neurons. Our results suggest that the endogenous central
nervous system is capable of regeneration through thein vivo dedifferentiation induced by biophysical
and metabolic cues, with no need for exogenous cells, growth factors, or genetic manipulation.
Anuradha S. et al, 2009, Development of biomaterial scaffold for nerve tissue engineering:
Biomaterial mediated neural regeneration. Journal of Biomedical Science2009, 16:108
Abstract
Neural tissue repair and regeneration strategies have received a great deal of attention
because it directly affects the quality of the patient's life. There are manyscientific challenges to
regenerate nerve while using conventional autologous nerve grafts and from the
newlydeveloped therapeutic strategies for the reconstruction of damaged nerves. Recent
advancements in nerve regeneration have involved the application of tissue engineering
principles and this has evolved a new perspective to neural therapy. The success of neural
tissue engineering is mainlybased on the regulation of cell behavior and tissue progression
through the development of a synthetic scaffold that is analogous to the natural extracellular
matrix and can supportthree-dimensional cell cultures. As the natural extracellular matrix
provides an ideal environment for topographical, electrical and chemical cues to the adhesion
and proliferation ofneural cells, there exists a need to develop a synthetic scaffold that would
be biocompatible, immunologically inert, conducting, biodegradable, and infection-resistant
biomaterial to support neurite outgrowth. This review outlines the rationale for effective neural
tissue engineering through the use of suitable biomaterials and scaffolding techniques for
fabrication of a construct that would allow the neurons to adhere, proliferate and eventually
form nerves.
Hughes C. et al, 2010, Matrigel: a complex protein mixture required for optimal growth of cell
culture. Proteomics. 2010 May;10(9):1886-90. Disponible en:
http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/20162561
Biodegradable polymer scaffolds provide an excellent approach to quantifying critical factors
necessary for restoration of function after a transection spinal cord injury. Neural stem cells
(NSCs) and Schwann cells (SCs) support axonal regeneration. This study examines the
compatibility of NSCs and SCs with the poly-lactic-co-glycolic acid polymer scaffold and
uantitatively assesses their potential to promote regeneration after a spinal cord transection
injury in rats. NSCs were cultured as neurospheres and characterized by immunostaining for
nestin (NSCs), glial fibrillary acidic protein (GFAP) (astrocytes), bIII-tubulin (immature
neurons), oligo-dendrocyte-4 (immature oligodendrocytes), and myelin oligodendrocyte
(mature oligodendrocytes), while SCs were characterized by immunostaining for S-100. Rats
with transection injuries received scaffold implants containing NSCs (n17), SCs (n17), and
Pg. 52
no cells (control) (n8). The degree of axonal regenration wasdetermined by counting

neurofilament-stained axons through the scaffold channels 1 month after transplanta-tion.
Serial sectioning through the scaffold channels in NSC- and SC-treated groups revealed the
presence of nestin, neurofilament, S-100, andbIII tubulinpositive cells. GFAP-positive cells
were only seen at the spinal cordscaffold border. There were significantly more axons in the
NSC- and SC- treated groups compared to the control group. In conclusion, biodegradable
scaffolds with aligned columns seeded with NSCs or SCs facilitate regeneration across the
transected spinal cord. Further, these multichannel biodegradable polymer scaffolds effectively
serve as platforms for quantitative analysis of axonal regeneration.
Hyun J., Tae Gwan P., 2007, Surface engineered and drug releasing pre-fabricated scaffolds
for tissue engineering, Advanced Drug Delivery Reviews 59 (2007) 249262.
A wide range of polymeric scaffolds have been intensively studied for use as implantable and
temporal devices in tissue engineering. Biodegradable and biocompatible scaffolds having a
highly open porous structure and good mechanical strength are needed to provide an optimal
microenvironment for cell proliferation, migration, and differentiation, and guidance for cellular
in-growth from host tissue. A variety of natural and synthetic polymeric scaffolds can be
fabricated in the form of a solid foam, nanofibrous matrix, microsphere, or hydrogel.
Iodegradable porous scaffolds can be surface engineered to provide an extracellular matrix
mimicking nvironment for better cell adhesion and tissue in-growth. Furthermore, scaffolds can
be designed to release bioactive molecules, such as growth factors, DNA, or drugs, in a
ustained manner to facilitatetissue regeneration. This paper reviews the current status of
surface engineered and drug releasing scaffolds for tissue engineering.
Kunlin J. et al, 2009, Transplantation of human neural precursor cells in Matrigel scaffolding
improves outcome from focal cerebral ischemia after delayed postischemic treatment in rats. J
Cereb Blood Flow Metab. Mar 2010; 30(3): 534544. Disponible en:
Transplantation of neural cells is a potential approach for stroke treatment, but disruption of
tissue architecture may limit transplant efficacy. One strategy for enhancing the ability of
transplants to restore brain structure and function is to administer cells together with
biomaterial scaffolding. We electrocoagulated the distal middle cerebral artery in adult rats
and, 3 weeks later, injected one of the following into the infarct cavity: artificial cerebrospinal
fluid, Matrigel scaffolding, human embryonic stem cell-derived neuronal precursor cells,
scaffolding plus cells, or cells cultured in and administered together with scaffolding. Five
weeks after transplantation, the latter two groups showedB50% andB60% reductions,
respectively, in infarct cavity volume. Rats given cells cultured in and administered together
with scaffolding also showed (1) survival and neuronal differentiaion of transplanted cells
shown by immunostaining for neuronal marker proteins and cleaved caspase-3, and by patchclamp recording, 8 weeks after transplantation and (2) improved outcome on tests of
sensorimotor and cognitive functions, 4 to 9 weeks after transplantation. These results indicate
that transplantation of human neural cells together with biomaterial scaffolding has the
potential to improvethe outcome from stroke, even when treatment is delayed for several
weeks after the ischemic event.
Jong B., et al, 2010, Dexamethasone inhibits proliferation of adult hippocampal neurogenesis
in vivo and in vitro. Brain Research 1027 (2004) 110
Abstract
Activation of glucocorticoid receptor (GR) induces a reduction of adult hippocampal
neurogenesis found in dentate gyrus (DG). However, the nature of specific effects by
Pg. 53
glucocorticoid in hippocampal neurogenesis is not known. In this report, we show differential

effects of dexamethasone (DEX), a glucocorticoid receptor agonist, on proliferation and
functional differentiation of adult hippocampal progenitor cells in DG. Two-month-old adult rats
received daily injections of DEX for 9 days and were sacrificed 12 h and 28 days after the ninth
injection. Proliferation assays showed that DEX inhibited proliferation of neural progenitor cells
and the inhibitory effects of DEX was not detected 28 days after recovery. Functional
differentiation studies using B-cell lymphoma protein-2 (Bcl-2), brain-derived neurotrophic
actor (BDNF), p-ERK, and neuronal nuclear protein (NeuN) antibodies revealed that the
expressions of Bcl-2 and BDNF were not significantly different between control and DEXtreated rats. In contrast, however, the activation of extracellular signal-regulated kinase (ERK)
wasdownregulated 12 h, but not 28 days, after the DEX treatment. When adult hippocampal
progenitor cell cultures were treated with subchronic DEX, proliferation of the progenitor cells
was suppressed. Taken these in vitro and in vivo results together, it is concluded that
glucocorticoid receptor activation blocks only proliferation, but not differentiation, in
hippocampal neurogenesis.
Lorigados Pedre L. et al, 2004, El factor de crecimiento nervioso en la neurodegeneracin y
el tratamiento neurorrestaurador. REV NEUROL 2004; 38: 957-71
Summary.Aims. The purpose of this work was to gather the information currently available
about the content of nerve growthfactor (NGF) in experimental models of neurodegeneration
and in neurodegenerative diseases, including Alzheimers, Parkinsons and Huntingtons
diseases, as well as to analyse how NGF content is affected by the application of different
neurorestorative therapies (transplant and trophic therapy) in these neurological entities.
Development.Neurotrophins are proteins that promote the differentiation, growth and survival
of many populations of peripheral neurons and the central nervous system during development
and adulthood. NGF is the best known and most widely researched member of this family,
which is also made up of the growth factor derived from the brain and neurotrophins 3, 4/5, 6
and 7. In the last few decades, significant progress has been made in the knowledge available
about the biological role played by these factors, their molecular characterisation and
regulation, as well as their signalling mechanisms. Yet, little is known about the role played by
the neurotrophic factors in neurodegenerative diseases or whether the levels of these factors
are modified following the use of neurorestorative treatment. Conclusions. Neurodegenerative
disorders, especially Parkinson and Alzheimer, are accompanied by modifications in the levels
of NGF that depend on the extent to which the disease has progressed. A model of the
hanges in NGF content during neurodegenerative processes is also proposed.
Martnez Ramos C. et al, 2012, Channeled scaffolds implanted in adult rat brain. Published
online 00 Month 2012 in Wiley Online Library (wileyonlinelibrary.com). DOI:
10.1002/jbm.a.34273
Abstract
Scaffolds with aligned channels based on acrylate copolymers, which had previously
demonstrated good com-patibility with neural progenitor cells were studied as coloniz-able
structures bothin vitro with neural progenitor cells and in vivo, implanted without cells in two
different locations, in the cortical plate of adult rat brains and close to the subven-tricular zone.
In vitro, neuroprogenitrs colonize the scaffold and differentiate into neurons and glia within its
channels.
When implantedin vivo immunohistochemical analysis by confocal microscopy for neural and
endothelial cells markers demonstrated that the scaffolds maintained continuity with the
surrounding neural tissue and were colonized by GFAP-positive cells and, in the case of
scaffolds implanted in con-tact with the subventricular zone, by neurons. Local angio-genesis
was evidenced in the interior of the scaffolds pores. New axons and neural cells from the adult
Pg. 54
neural niche abundantly colonized the biomaterials inner structure after 2 months, and minimal
scar formation was manifest around the implant. These findings indicate the biocompatibility of
the polymeric material with the brain tissue and open possi-bilities to further studies on the
relevance of factors such as scaffold structure, scaffold seeding and scaffold placement for
their possible use in regenerative strategies in the centralnervous system. The development of
neural interfaces with minimized glial scar and improved tissue compatibility of the implants
may also benefit from these results.
Parra Cid C. et al, 2014, Biomateriales, pieza clave en la reparacion de las lesiones celulares.
Investigacin en discpacidad Vol. 3, Nm. 1 Enero-Marzo 2014 pp 25-32
Resumen
La lesin medular es un padecimiento discapacitante que afecta al ao a 12,000 personas,
teniendo un impacto en la vida social, laboral, econmica y de salud de cada uno de ellos.
La etiologa de este padecimiento es diversa; sin embargo, la mayor parte de las lesiones es
ocasionada por traumatismos en el rea de la mdula espinal causado por accidentes
vehiculares, laborales, cadas, entre otros. Existen diversos tratamientos; sin embargo,
ninguno ayuda a la regeneracin. Una alternativa es la ingeniera de los tejidos, que utiliza las
herramientas y tecnologas que estn a su alcance para reparar el tejido daado mediante el
uso de biomateriales que sirven de soporte para las clulas y que permiten el crecimiento
axonal en la lesin medular, ayudando as a la reparacin del tejido. Este trabajo, con base en
las investigaciones sobre diversos materiales a nivel mundial, abordar el tema de los
biomateriales que actualmente se estn proponiendo para la reparacin del tejido nervioso en
la mdula espinal, adems de que se compararn y expondrn sus principales cualidades y
caractersticas para la reparacin en la lesin medular y analizar la importancia clnica que
stos tendrn en un futuro.
Randall M., 2007, Tratamiento de las lesiones del sistema nervioso central. Surg Clin N Am 87
(2007) 119 156
Resumen.
El descubrimiento de que nuevas neuronas continan generndose en el cerebro adulto ha
modifica-do el concepto de plasticidad cerebral y ha revelado nuevos mecanismos que
garantizan la homeostasis del sistema nervioso.
Desarrollo. La neurognesis, proceso que involucra la generacin de nuevas neuronas, se ha
demostrado en el hipocampo y en el bulbo olfatorio de mamferos adultos, lo cual sugiere la
persistencia de clulas troncales neuronales a lo largo de toda la vida. Los precursores
primarios se han identificado en zonas especializadas denominadas nichos neurognicos. De
mane-ra interesante, la clula que da origen a las nuevas neuronas en el cerebro adulto
expresa marcadores de clulas gliales, un linaje celular lejano al de las neuronas. Trabajos
realizados durante el desarrollo del cerebro han demostrado que la gla ra-dial no slo origina
astrocitos, sino tambin neuronas, oligodendrocitos y clulas ependimales. Adems, se sabe
que la gla radial tambin es la precursora de las clulas troncales neuronales del cerebro
adulto. Conclusiones. En conjunto, estos datos soportan la idea de que las clulas troncales
se desarrollan de un linaje neuroepitelial-gla radial-astroctico. As, la identifi-cacin de los
precursores primarios, tanto en el cerebro en desarrollo como en el cerebro adulto, es
fundamental para com-prender el funcionamiento del sistema nervioso y, con esto, desarrollar
estrategias de reemplazo neuronal en el cerebro adul-to que lo requiera.
Sakiyama-Elbert S. et al, 2007, Development of growth factor fusion proteins for cell-triggered
drug delivery, FASEB J. 15 (7) (2001) 13001302.
Abstract
Pg. 55
A series of polymeric biomaterials, including poly(methyl acrylate), chitosan, poly(ethyl crylate)

(PEA), poly(hydroxyethyl acrylate) (PHEA), and a series of random copolymers containing
ethyl acrylate, hy-droxyethyl acrylate, and methyl acrylate were testedin vitroas culture
substrates and compared for their effect on the differentiation of neural stem cells (NSCs)
obtained from the subventricular zone of postnatal rats. Immunocytochemical assay for
specific markers and scanning electron microscopy techniques were employed to determine
the adhesion of the cultured NSCs to the different biomaterials and the respective neuronal
differentiation. The functional properties and the membrane excitability of differentiated NSCs
were investigated using a patch-clamp. The results show that the substrates surface chemistry
influences cell attachment and neuronal differentiation, probably through its influence on
adsorbed laminin, and that copolymers based on PEA and PHEA in a narrow composition
window are suitable substrates to promote cell attachment and differentiation of adult NSCs
into functional neurons and glia.
Simon-Assmann P et al., 2011, Role of laminins in physiological and pathological
angiogenesis. Int J Dev Biol 2011;55:455
Biodegradable polymer scaffolds provide an excellent approach to quantifying critical factors
necessary forrestoration of function after a transection spinal cord injury. Neural stem cells
(NSCs) and Schwann cells (SCs) support axonal regeneration. This study examines the
compatibility of NSCs and SCs with the poly-lactic-co-glycolic acid polymer scaffold and
uantitatively assesses their potential to promote regeneration after a spinal cord transection
injury in rats. NSCs were cultured as neurospheres and characterized by immunostaining for
nestin (NSCs), glial fibrillary acidic protein (GFAP) (astrocytes), bIII-tubulin (immature eurons),
oligo-dendrocyte-4 (immature oligodendrocytes), and myelin oligodendrocyte (mature
ligodendrocytes), while SCs were characterized by immunostaining for S-100. Rats with
transection injuries received scaffold implants containing NSCs (n17), SCs (n17), and no
cells (control) (n8). The degree of axonal regeneration was determined by counting
neurofilament-stained axons through the scaffold channels 1 month after transplanta-tion. erial
sectioning through the scaffold channels in NSC- and SC-treated groups revealed the resence
of nestin, neurofilament, S-100, andbIII tubulinpositive cells. GFAP-positive cells were only
seen at the spinal cordscaffold border. There were significantly more axons in the NSC- and
SC- treated groups compared to the control group. In conclusion, biodegradable scaffolds with
aligned columns seeded with NSCs or SCs facilitate regeneration across the transected spinal
cord. Further, these multichannel biodegradable polymer scaffolds effectively serve as
platforms for quantitative analysis of axonal regeneration.
Soria J., et al, 2009, Uso de biomateriales con fines neurorregenerativos. Aplicacin en
modelo experimental de traumatismo craneoenceflico. Trauma V. 20 N2.
Resumen
Objetivos:Evaluar el rendimiento de los biomateriales polimricos basados en cido
hialurnico y su utilidad en el Sistema Nervioso Central, sirviendo como soporte, para la
supervivencia y diferenciacin celular.
Material y Metodos: Con el fin de evaluar la viabilidad de los soportes polimricos y
acanalados, se realizaronexperimetos in vitro e in vivo mediante el implante en corteza
cerebral de ratas Wistar. Mediante tcnicas in-munocitoqumicas e histolgicas se procedi al
anlisis de la viabilidad de los soportes.
Resultados:Tras el cultivo pudimos constatar la viabilidad celular sobre los biomateriales, asi
como su poten-cial utilidad para la regeneracin in vivode estructuras vasculares y neurales.
Conclusiones:La posibilidad de regenerar estructuras vasculares y neurales a travs del
implante de biomate-riales basados en cido hialurnico, constituye un avance en la
utilizacin de biomateriales en el Sistema Ner-vioso Central
Pg. 56
Su Chun Z. et al, 2001, In vitro differentiation of transplantable neural precursors from human
embryonic stem cells. Nature biotechnology (2001). Volume 19
The remarkable developmental potential and replicative capacity of human embryonic stem
(ES) cells promise an almost unlimited supply of specific cell types for transplantation
therapies. Here we describe the in vitro differentiation, enrichment, and transplantation of
neural precursor cells from human ES cells. Upon aggregation to embryoid bodies,
differentiating ES cells formed large numbers of neural tubelike structures in the presence of
fibroblast growth factor 2 (FGF-2). Neural precursors within these formations were isolatedby
selective enzymatic digestion and further purified on the basis of differential adhesion.
Following withdraw-al of FGF-2, they differentiated into neurons, astrocytes, and
oligodendrocytes. After transplantation into the neonatal mouse brain, human ES cellderived
neural precursors were incorporated into a variety of brain regions, where they differentiated
into both neurons and astrocytes. No teratoma formation was observed in the transplant
recipients. These results depict human ES cells as a source of transplantable neural recursors
for possible nervous system repair.
Willerth S., 2007, Approaches to neural tissue engineering using scaffolds for drug delivery.
Advanced Drug Delivery Reviews 59 (2007) 325338
This review seeks to give an overview of the current approaches to drug delivery from
scaffolds for neural tissue engineering applications. The challenges presented by attempting to
replicate the three types of nervous tissue (brain, spinal cord, and peripheral nerve) are
mmarized. Potential scaffold materials (both synthetic and natural) and target drugs are
discussed with the benefits and drawbacks given. Finally, common methods of drug delivery,
including degradable/diffusion-based delivery systems, affinity-based delivery systems,
mmobilized drug delivery systems, and electrically controlled drug delivery systems, are
examined and critiqued. Based on the current body of work, suggestions for future directions of
research in the field of neural tissue engineering are presented.
Xingeng Miao, DongChoon Sin et al., 2009, Polyurethane (PU) scaffolds prepared by
solvent casting/particulate leaching (SCPL) combined with centrifugation. Materials Science
and Engineering C, 2010, vol. 30, pp. 78-85.
Abstract
Simultielectrode arrays implanted into brain tissue for long-term recording lose electrical
connectivity due to the post-implantation inflammatory reaction. This inflammatory reaction
creates a physical and electrical gap between the electrode and the surrounding neurons. In
this study, novel nitrocellulose-based coatings were developed for the sustained delivery of the
anti-inflammatory neuropeptide a-melanocyte stimulating hormone (a-MSH). a-MSH was
incorporated in micron-scale nitrocel-lulose coatings and slow, sustained release over 21 days
was attained in vitro. The a-MSH released on day 21 was still bioactive, and successfully
inhibited nitric oxide (NO) production by LPS-stimulated microglia. The amount of initial drug
loading directly affected the release rate, with higher initial loading increasing the mass
released but not the percent of drug released. The surface morphology and thickness of the
coatings were examined by scanning electron microscopy (SEM) and profilometry. In addition,
impedance measurement showed that the a-MSH loaded nitrocellulose coatings reduced the
magnitude of electrode impedance at the biologically relevant frequency of 1 kHz. In
conclusion, nitrocellulose-based, bioactive coatings that release anti-inflammatory agents
without increasing the impedence of the electrode were successfully fabricated. These
coatings have the potential to reduce inflammation at the electrodebrain interface in vivo, and
acilitate long-term recordings from Si-multi-electrode arrays.
Pg. 57

Regeneración de Tejido Nervioso Central

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Figura 10. modelo de suministro por afinidad (Willerth S., 2007).

incorporada en pelculas de PoliPirrolina (PPy) cultivadas en la parte superior de pelculas de

Quiroga F., 2008, Trastornos psiquitricos comunes en enfermedades neurolgicas. [Citado

Infermera Virtual, 2008, Sistema Nervioso: anatoma. Dsiponible en:

calcification: calcificacin: La calcificacin es una acumulacin de calcio en tejidos del

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