Tipos de microscopa

Microscopa ptica ( longitud de onda: 400-700nm) Espectro de luz

visible
+ Imagen 2D (Microscopios 1,2,3)
1Microscopio de fondo claro
Se ve todo claro menos la preparacin
Usa como fuente de luz directa una bombilla o la luz solar
La muestra a observar debe ser fina para que pueda ser atravesada por la luz
Los microorganismos se suelen teir (por contraste).

2Microscopio de fondo oscuro

Se ve todo oscuro menos el objeto observar que se ve claro
Se usa para ver microorganismos vivos sin teir como espiroquetas (Efecto Tindall)
Tiene la lente objetivo y un dispositivo que hace que el condensador y el foco de
rayo luminoso No entre un cono de luz, sino que tiene un dispositivo que slo deja
pasar los rayos ms divergentes.
Este rayo de luz pasa por la muestra, y si hay objeto, entonces lo difracta, vindose
el objeto blanco ya que desva estos rayos

3Microscopio de contraste de fases o de fondo claro con dispositivo

de Zernicke
Transforma las variaciones del ndice de refraccin luminosa en distintas
intensidades luminosas.
Se pueden observar microorganismos vivos.
Es un microscopio ptico modificado que permite contrastar sustancias de
diferente grosor o densidad.

El resultado es una imagen con distintos grados de brillo y oscuridad.

Con ste mtodo, el material denso aparece brillante, mientras que las partes de la
clula que tienen una densidad parecida a la del agua (casi nula) aparecen oscuras.
Se utiliza para visualizar microorganismos y estructuras celulares sin necesidad de
usar colorantes o matarlos.

+ Imagen 3D (Microscopios 4,5,6)

4Microscopio de contraste diferencial inteferencial o de Nomarsky
Utiliza luz polarizada
La luz pasa por un prisma dividindolo en 2 rayos que pasan por la muestra

5Microscopio de fuerza atmica

Tiene un sensor que coge fuerzas atmicas repulsivas, basndose en dispositivos
electromagnticos.
Se construye un modelo digitalizado de la imagen.

6Microscopio Confocal
Se basa en mejorar la relacin entre la seal y el ruido de la imagen
Acopla una fuente de luz lser a un microscopio ptico
Un rayo lser se refleja en un espejo que lo dirige a un punto de la muestra muy
preciso. Mediante la iluminacin concreta de un solo plano de la muestra, la
intensidad de iluminacin disminuye rpidamente por encima y por debajo de ese
plano, y como consecuencia la luz perdida en los otros planos es mnima.

Las imgenes obtenidas de las diferentes capas se pueden almacenar y luego

superponer digitalmente para reconstruir la imagen tridimensional de la muestra
completa, a esto se le llama microscopa de barrido confocal.

Microscopa ultravioleta
1- Microscopio de Luz ultravioleta
Mayor claridad y nitidez que el microscopio ptico
Usa lentes de cuarzo, no de vidrio
La emisin de luz es a longitud de onda ms corta (200-300nm)
Necesitamos mecanismos accesorios de visin para ver la imagen
2- Microscopio de Fluorescencia
La emisin de luz es a 300-400 nm
A la luz se le da un colorante fluorescente ( Rodamina o aureoamina)
Usa lentes de cristal (vidrio)
Emite luz ultravioleta, pero lo que llega arriba es luz visible

Microscopa electrnica
Usa chorros de electrones
Disminuye el poder de resolucin, por lo que aumenta la calidad o nitidez de
la muestra a observar.
La longitud de onda se rebaja a 0.04nm

El microscopio electrnico es como un microscopio de fondo claro invertido. Se

trata de un filamento de tungsteno que suelta electrones, que pasan a travs de un
solenoide de campo magntico (imn) que abre el chorro de luz, y as puede
amplificar el chorro de electrones, sto equivale a la lente objetivo, ya que el chorro
de electrones se recoge en una pantalla fotorreceptora o fotoconvertidora.

1Microscopio de transmisin (MET)

Las lentes son electromagnticas, operndose en todo momento a alto vaco, en
este estado la muestra se deshidrata muy rpido, lo cual nos deforma las
estructuras, por lo que no nos permite el anlisis de muestras vivas.
Adems los electrones NO tienen gran poder de penetracin, por eso requiere de
cortes muy finos.

2Micoscopio de Barrido (MEB)

Usa campos electromagnticos
El ctodo o foco emisor tambin se encuentra arriba, pero existe otra lente
magntica que nos dirige un chorro especfico de electrones.
La muestra se cubre de sales de metales pesados (como oro o platino)
Los electrones pasan por el generador de barrido, es una zona que continuamente
cambia de polaridad, y ste chorro de electrones es como una cortina que se abre y
cierra continuamente.
Este choque de electrones genera una imagen de la superficie de la muestra, y esto
se recoge en una pantalla fotoconvertidora.