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PRESENTACIN
Durante la evaluacin de la competencia tcnica de los laboratorios de calibracin y de
ensayo, la demostracin de la trazabilidad y la estimacin de la incertidumbre de las
mediciones, requiere la aplicacin de criterios tcnicos uniformes y consistentes.
Con el propsito de asegurar la uniformidad y consistencia de los criterios tcnicos en la
evaluacin de la trazabilidad y la incertidumbre de las mediciones, la entidad mexicana
de acreditacin, a. c., solicit al Centro Nacional de Metrologa que encabezara un
programa de elaboracin de Guas Tcnicas de Trazabilidad e Incertidumbre de las
Mediciones.
Los Subcomits de los Laboratorios de Calibracin y de Ensayo se incorporan a este
programa y su participacin est orientada a transmitir sus conocimientos y experiencias
tcnicas en la puesta en prctica de las Polticas de Trazabilidad y de Incertidumbre
establecidas por ema, mediante el consenso de sus grupos tcnicos de apoyo. La
incorporacin de estos conocimientos y experiencias a las Guas, las constituyen en
referencias tcnicas para usarse en la evaluacin de la competencia tcnica de los
laboratorios de calibracin y ensayo.
En este programa, el CENAM se ocupa, entre otras actividades, de coordinar el programa de
las Guas Tcnicas; proponer criterios tcnicos sobre la materia; validar los documentos
producidos; procurar que todas las opiniones pertinentes sean apropiadamente consideradas
en los documentos; apoyar la elaboracin de las Guas con eventos de capacitacin; asegurar
la consistencia de las Guas con los documentos de referencia indicados al final de este
documento.
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NDICE
Pgina
PRESENTACIN...2
GRUPO DE TRABAJO QUE PARTICIP EN LA ELABORACIN.....4
NDICE....6
1. PROPSITO DE LA GUA TCNICA ............................................................................ 7
2. ALCANCE DE LA GUA TCNICA ............................................................................... 8
3. MENSURANDO .............................................................................................................. 10
4. MTODO Y/O SISTEMA DE MEDICIN.................................................................... 12
5. CONFIRMACIN METROLGICA Y CALIFICACIN DE EQUIPOS.................... 14
6. TRAZABILIDAD DE LA MEDICIN........................................................................... 17
7. INCERTIDUMBRE DE MEDICIN .............................................................................. 21
8. VALIDACIN DE MTODOS ...................................................................................... 23
9. BUENAS PRCTICAS DE LABORATORIO ............................................................... 25
10. BIBLIOGRAFA ............................................................................................................ 26
11. AGRADECIMIENTOS...................................................................................................27
12. ANEXOS ........................................................................................................................ 27
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Radiacin
policromtica
Materia
Espectro de
absorcin
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Fuente de
energa
Monocromador
Compartimiento
de muestra
Detector
Amplificador y
registrador
y/o
computadora
Manual: Para esta operacin son utilizadas celdas de vidrio o de cuarzo (dependiendo
de la longitud de onda que indica el mtodo) donde se coloca la muestra y sta a su
vez se introduce en un compartimiento especfico del espectrofotmetro. El espesor
de las celdas utilizadas comnmente es de un cm, sin embargo, es factible contar con
espesores hasta de 10 cm de espesor, teniendo influencia directa en la cantidad de luz
absorbida por la muestra.
3. MENSURANDO
Un ejemplo de mensurando que puede ser medido a travs de la tcnica de medicin de
espectrofotometra ultravioleta - visible se describe en la Tabla de trazabilidad de las
Mediciones Analticas de los mtodos de ensayo, Anexo 1.
Los evaluadores deben solicitar a los laboratorios la identificacin clara y precisa del (los)
mensurando(s) sujeto(s) al alcance de la acreditacin, incluidos en los Mtodos de Medicin
que utiliza la Tcnica de Medicin objeto de esta gua, empleando el formato de la tabla del
Anexo 1.
En la elaboracin de los informes de resultados de ensayo, en caso de que los mtodos de
ensayo o los clientes requieran la expresin del mensurando en unidades diferentes a las del
SI, se debe reportar el resultado en las Unidades SI [3] y a su vez en las unidades
equivalentes como parte del Informe de Resultados
Ejemplo, X mg/kg (Y libras/barriles).
Gua Tcnica sobre Trazabilidad e Incertidumbre en las Mediciones Analticas
que emplea la tcnica de Espectrofotometra de Ultravioleta-Visible 2004-06-28
Fecha de emisin 2004-05-28, fecha de entrada en vigor 2005-01-03, revisin 00.
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Para mayor informacin ver captulo I, artculos 5 y 6 de la Ley Federal sobre Metrologa y
Normalizacin (LFMN) y la NOM 008 SCFI 2001.
Ver Glosario de trminos (Anexo 2) para las definiciones correspondientes.
3.1 Intervalo de trabajo de los mtodos de medicin
Los evaluadores deben verificar los intervalos de trabajo de los mtodos de medicin que
emplea la tcnica de espectrofotometra de Ultravioleta -Visible, solicitando la
documentacin que proporcione evidencia de la determinacin del intervalo de trabajo de los
mtodos de medicin por parte del laboratorio, ste debe estar basado en la validacin parcial
total del mtodo y debe ser coherente con la aplicacin del resultado del ensayo (ver Anexo
2, Glosario de Trminos para las definiciones correspondientes).
El intervalo de trabajo de los mtodos de medicin debe tomar en cuenta los lmites mximos
permisibles o las especificaciones de la Norma a la que se evale su conformidad, las
especificaciones de procesos que se estn evaluando o los requerimientos de los clientes del
laboratorio, los cuales idealmente deben estar en la seccin media del intervalo de trabajo.
Por ejemplo: Si el limite mximo permisible para cianuros en aguas residuales es de
0,07 mg/L, el intervalo de trabajo ideal es de 0,01 a 1 mg/L
3.2 Incertidumbre
Los evaluadores deben verificar que la estimacin de incertidumbre de los mtodos de
medicin que emplea la tcnica de espectrofotometra de Ultravioleta -Visible, solicitando la
documentacin que proporcione evidencia de la estimacin de incertidumbre por parte del
laboratorio, basndose en lo que se estipula en la seccin 7 de esta Gua Tcnica.
Para el caso de las acreditaciones iniciales, ampliaciones o actualizaciones de mtodos de
ensayo renovaciones hacia la NMX-EC-17025-IMNC-2000[2], el laboratorio deber iniciar
su proceso de estimacin de incertidumbre en la validacin parcial del mtodo y tener un
plan de implantacin de acuerdo al captulo 4 inciso 4.2.3 de las Polticas Referentes a la
Trazabilidad e incertidumbre de mediciones de la ema, para cuantificar todos aquellos
componentes de incertidumbre que contribuyan significativamente a la incertidumbre final
de la medicin. Esto ltimo debe ser realizado segn el punto 7 de esta gua.
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2. Material volumtrico
Etapa de medicin
12. Materiales de Referencia Certificados (MRC)
13. Controles de calidad, en caso aplicable (blancos, muestras de control de
calidad, duplicadas, adicionadas, replicas, etc).
14. Curva de calibracin (material volumtrico, algoritmo empleado en la
calibracin)
15. Confirmacin metrolgica de balanzas y dems instrumentos en donde
aplique (Ver capitulo 5 de esta Gua).
16. Calificacin de Equipos e Instrumentos de Medicin Analtica (CEIMA)
donde aplique (Ver capitulo 5 de esta Gua).
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Los RMC en este sentido se refieren normalmente a los requerimientos del mtodo de ensayo
acreditado para satisfacer las necesidades del cliente del laboratorio, en cuanto al desempeo
y especificaciones de los equipos a utilizarse.
Ver definiciones correspondientes a la confirmacin metrolgica en el Glosario de Trminos
(Anexo 2).
El evaluador debe solicitar la documentacin que contenga los requisitos metrolgicos del
cliente (RMC) considerados en el proceso de CM.
Ejemplo de algunos RMC:
Intervalo de trabajo, sesgo, incertidumbre, estabilidad, deriva, resolucin, entre otros.
Ver en el Anexo 3 un ejemplo especfico.
El evaluador debe solicitar la documentacin que contenga las caractersticas metrolgicas
del equipo de medicin (CMEM) consideradas en el proceso de CM.
Ejemplo de documentos que contengan CMEM:
Certificado de calibracin, Informe de calibracin.
El evaluador debe solicitar los registros de la verificacin metrolgica.
El evaluador debe solicitar las evidencias y documentos usados para determinar los
intervalos de CM y verificar que los mismos intervalos de la CM estn basados en los datos
obtenidos en el historial de las confirmaciones metrolgicas.
Los intervalos de CM deben ser revisados y ajustados a las necesidades de aseguramiento
continuo con los RMC. Los intervalos de calibracin y de CM pueden ser iguales.
l evaluador debe solicitar evidencia de que la confirmacin metrolgica (CM) sea realizada
cada vez que el instrumento sea reparado, ajustado o modificado.
En el Anexo 3 se encuentra un ejemplo de confirmacin metrolgica, incluye el diagrama del
proceso de la confirmacin metrolgica y tablas que muestran los RMC bsicos de algunos
instrumentos de medicin, para realizar el proceso de Confirmacin Metrolgica.
En el caso de los siguientes componentes de los sistemas de medicin empleados en la (s)
tcnica(s) de esta Gua, el laboratorio:
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Debe seguir los lineamientos de la CM, para los termmetros, as como para las
balanzas analticas que se utilicen para pesar muestras y materiales de referencia.
Debe seguir los lineamientos de la CM, para el material volumtrico que se utilice
para la preparacin de los materiales de referencia (disoluciones de trabajo), salvo
que dichas disoluciones sean preparadas gravimtricamente.
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6. TRAZABILIDAD DE LA MEDICIN
6.1 Trazabilidad, calibracin, patrones y Materiales de Referencia Certificados (MRC)
Consultar el Glosario de Trminos (Anexo 2) para las definiciones correspondientes.
La trazabilidad del resultado de una medicin est relacionada con la diseminacin de la
unidad correspondiente a la magnitud que se mide. La expresin del valor de una magnitud
incluye la referencia a una unidad de medida, la cual ha sido elegida por acuerdo, y por tanto,
las medidas de la misma magnitud deben estar referidas a la misma unidad. An cuando la
definicin de trazabilidad no impone limitaciones sobre la naturaleza de las referencias
determinadas, es conveniente lograr la uniformidad universal de las mismas mediante el uso
de las unidades del Sistema Internacional de Unidades, SI, las cuales ya han sido convenidas
en el marco de la Convencin del Metro. En Mxico, es obligatorio el uso del Sistema
General de Unidades, el cual contiene las unidades del SI.
Los elementos de la trazabilidad en este tipo de mediciones son:
a. El resultado de la medicin cuyo valor es trazable. (La trazabilidad es hacia el SI,
mediante los valores de los MRC con su incertidumbre)
Gua Tcnica sobre Trazabilidad e Incertidumbre en las Mediciones Analticas
que emplea la tcnica de Espectrofotometra de Ultravioleta-Visible 2004-06-28
Fecha de emisin 2004-05-28, fecha de entrada en vigor 2005-01-03, revisin 00.
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Por ejemplo:
Carta de trazabilidad para la medicin de la concentracin de masa Cromo
hexavalente por espectrofotometra de ultravioleta - visible
Magnitud: cantidad de
sustancia
Unidad : mol
MRC K2Cr2O7Cr(VI)
Magnitud: fraccin de masa
Unidad: g/g
U rel = 0,03 %
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7. INCERTIDUMBRE DE MEDICIN
Consultar el Glosario de Trminos (Anexo 2) para las definiciones correspondientes.
Los ensayos usualmente tienen el propsito de llevar a cabo la evaluacin de la conformidad
con requisitos establecidos, mediante la comparacin de stos con los resultados de sus
mediciones, esto no los excluye de una declaracin de la incertidumbre de medicin en los
resultados, adems de ser una parte indispensable en la expresin de un resultado de
medicin. Los resultados de tal evaluacin pueden ser conforme o no conforme.
7.1 Elementos de la incertidumbre[4] de la medicin
Una tabla con los componentes de incertidumbre que contenga al menos, para cada
uno de ellos la incertidumbre de la medicin, su variabilidad, la distribucin de
probabilidad que se le asocie, el coeficiente de sensibilidad y su contribucin a la
incertidumbre estndar combinada de la medicin. La tabla tambin debe mostrar la
incertidumbre estndar combinada y expandida.
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3.
Calibracin
(Trazabilidad)
4. Medicin
Concentracin de
masa
8. VALIDACIN DE MTODOS
Consultar el Glosario de Trminos (Anexo 2) para su definicin.
La validacin examina las caractersticas de desempeo de un mtodo para establecer
cualquier limitacin que pueda esperarse del mtodo cuando se aplique a un tipo especfico
de muestras [8].
Los parmetros recomendados para la validacin de un mtodo de ensayo (prueba) que
incluye mediciones por espectrofotometra de ultravioleta -visible son:
1. Recuperacin
2. Sensibilidad
3. Selectividad
4. Robustez
5. Lmite de deteccin
6. Lmite de cuantificacin
7. Intervalo lineal y de trabajo
8. Reproducibilidad
9. Repetibilidad
10. Sesgo (En algunos casos evaluado a partir de recuperacin)
11. Incertidumbre (de acuerdo al punto 7 de esta Gua)
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Para el caso de los mtodos incluidos en esta Gua, los parmetros para realizar una
validacin parcial son los siguientes:
1.
2.
3.
4.
5.
6.
7.
8.
Recuperacin
Lmite de deteccin
Lmite de cuantificacin
Intervalo lineal y de trabajo
Reproducibilidad (medicin durante al menos tres das)
Repetibilidad
Sesgo (En algunos casos evaluado a partir de la recuperacin)
Incertidumbre (de acuerdo al punto 7 de esta gua)
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GRADO DE VALIDACIN O
REVALIDACIN REQUERIDA
Completo
Completo
Parcial o completo
Parcial o completo
Parcial o completo
Parcial
Parcial
Parcial
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10. BIBLIOGRAFA
[1] NMX-Z-055:1996 IMNC Metrologa Vocabulario de trminos fundamentales y
generales, equivalente al documento International Vocabulary of Basic and General
Terms in Metrology, BIPM, IEC, IFCC, ISO, IUPAC, IUPAP, OIML, 1993.
[2] NMX-EC-17025-IMNC-2000 (ISO/IEC 17025:1999) Requisitos generales para la
competencia de los laboratorios de ensayo y calibracin.
[3] NOM-008-SCFI 2002 Sistema General de Unidades de Medida.
[4] Eurachem-Citac Guide Quantifying Uncertainty in Analytical Measurement 2nd.
Edition, 2000.
[5] Manual de Buenas Prcticas de Laboratorio, CENAM, CNM-MRD-PT008, 2nd.
Edicin, 5 impresin, septiembre 2002.
[6] PROY NMX CC 10012 IMNC 2003 (ISO 10012-2002) Sistemas de Gestin de
Mediciones, -Requisitos para Procesos de Medicin y Equipos de Medicin
[7] Calificacin de Calificacin de Equipo de Instrumentos Analticos, DI-2-PTC-620RAT-001-2004, CENAM, abril del 2004.
[8] Mtodos analticos adecuados a su propsito. Gua de laboratorio para validacin de
mtodos y tpicos relacionados. CNM-MRD-PT-030, CENAM, 1998.
[9] Polticas referentes a la trazabilidad e incertidumbre de mediciones, 2002, Serie
documentos, ema,
http://www.ema.org.mx/ema/pdf/PROCEDIMIENTOS/TRAZABILIDAD%20E%20
INCERTIDUMBRE%20SC-2002-12-12.pdf
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11. AGRADECIMIENTOS
Agradecimiento especial a los responsables de la elaboracin de esta Gua:
LVAREZ TAPIA Rubn, LABORATORIO SAS
MORENO RAMREZ Ma. Genoveva, CENAM
SEGOVIANO REGALADO Francisco, CENAM
12. ANEXOS
1.-Ejemplo de tabla de trazabilidad e incertidumbre de los mtodos de ensayo (prueba) que
se solicita acreditar ms comnmente.
2.-Glosario de trminos
3.-Ejemplo del proceso de confirmacin metrolgica para una balanza analtica
4.-Ejemplo de Calificacin (CEIMA) para la Calificacin de Espectrofotmetros ultravioleta
visible.
5.-Ejemplo de estimacin de incertidumbre
6.- Buenas prcticas de laboratorio en espectrofotometra ultravioleta visible.
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No.
NOMBRE DE LA PRUEBA
(1)
(2)
SUBCOMIT (3)
MATRIZ (4)
REFERENCIA
TCNICA DE MEDICION -
ANALITO,
COMPUESTO
MAGNITUD (6)
UNIDADES (7)
NORMA (8)
Concentracin de
masa fraccin
de masa
mg/L
NMX-AA-044SCFI-2001
DOCUMENTO (9)
PARMETRO (5)
DETERMINACIN DE
CROMO
HEXAVALENTE EN
AGUAS NATURALES,
RESIDUALES Y
RESIDUALES
TRATADAS
agua
naturales,
Agua
potables,
residuales,
residuales
CROMO
HEXAVALENTE
ESPECTROFOTOMETRIA
tratadas
volumen
volumen
masa
(1)
(2)
(3)
(4)
Nmero consecutivo
Nombre de la prueba
Nombre del subcomit
Especificar la matriz en la cual se encuentra el analito o compuesto. Por ejemplo:
Leche, suelo, agua, aceite, cermica, etc.
(5) Nombre del analito o compuesto
(6) Indicar en las filas: el nombre de la magnitud de inters, nombre de aquellas
magnitudes que son medidas para determinar el valor del mensurando, nombre de
aquellas magnitudes de influencia que participan en la prueba. Usar tantas filas como
sea necesario.
(7) Unidades correspondientes al valor del mensurando, a aquellas magnitudes que son
medidas para determinar el valor del mensurando, a aquellas magnitudes de
influencia que participan en la prueba.
(8) Norma(s) en la que se basa la medicin de la magnitud correspondiente.
(9) Nombre del (los) documento(s) (procedimiento interno, mtodo de referencia
nacional o internacional), en el que se basa la medicin de la magnitud
correspondiente.
(10) Nombre de la tcnica de medicin o tcnica analtica utilizada para realizar la
medicin de la magnitud correspondiente
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ESPECTROFOTOMETRO
UV/VIS, pipeta, matrz,
balanza
METROLGICA (14)
Si
CEIMA
ESTIMACIN DE LA
INCERTIDUMBRE
O
CONFIRMACIN
MEDICIN (13)
INSTRUMENT
CALIBRADO (12)
MTODO DE
CEIMA /
REFERENCIA
VALIDACIN
MRC o Patrn
(11)
INSTRUMENTO Y/O
de Referencia
TRAZABILIDAD (15)
SISTEMA DE MEDICIN
OBSERVACIONES
(16)
Si
pipeta
CM
Si
matraz
balanza
CM
CM
Si
Si
(11) Nombre del instrumento o sistemas instrumentales de medicin que se utilizan para
efectuar la medicin de cada magnitud.
(12) Nombre del instrumento y/o material volumtrico calibrado
(13) Indicar si requiere validacin
(14) Instrumento o Equipo que requiere CEIMA o CM
(15) Forma de establecer trazabilidad
(16) Indicar si requiere estimar incertidumbre
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Ensayo (Prueba)
DEFINICIN
Operacin tcnica que consiste en la
determinacin de una o ms caractersticas o
desempeo de un producto, material, equipo,
organismo, fenmeno fsico, proceso o servicio
dado, de acuerdo a un procedimiento
especificado.
Procedimiento tcnico especfico para desarrollar
un ensayo (prueba).
Qu solicita el evaluador?
Este no se localiza en ningn
documento, el evaluador no lo
debe solicitar.
El evaluador lo debe solicitar
como documento de referencia,
(generalmente una norma,
indicado en el alcance de la
acreditacin) para compararlo
con el procedimiento interno.
Se encuentra descrito
generalmente dentro del
documento de referencia. El
evaluador no lo debe solicitar.
Mtodo de medicin
Procedimiento de medicin
Se encuentra descrito
especficamente dentro del
procedimiento interno.
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Ref [6]
ENSAYO (PRUEBA): Operacin tcnica que consiste en la determinacin de una o ms
caractersticas o desempeo de un producto, material, equipo, organismo, fenmeno fsico,
proceso o servicio dado.
[Gua ISO/IEC 2, NMX-Z-109-IMNC-1996
CRITERIO: Las Pruebas (ensayos) pueden ser cualitativas o cuantitativas, pueden tambin
ser la determinacin de las caractersticas de desempeo de un proceso o servicio, sin
embargo, en lo relativo a las pruebas analticas cuantitativas, la prueba (ensayo) incluye
siempre un Mtodo de Medicin y por lo mismo, los conceptos de Trazabilidad e
Incertidumbre se aplican a este tipo de mtodos de prueba (ensayos).
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CRITERIO: Para los propsitos de esta Gua, los mtodos de prueba en qumica
analtica cuantitativa (ver definicin), siempre incluyen un mtodo de medicin.
Para los fines de acreditacin, el nombre de la identificacin del mtodo de medicin
es el mismo que el empleado para el mtodo de prueba que se quiere acreditar.
[VIM, NMX Z-055 IMNC 1996]
METODO PRIMARIO: Por definicin un mtodo primario de medicin es un mtodo que
tiene la ms alta calidad metrolgica, cuya operacin se describe y se entiende
completamente, para el cual se tiene una declaracin completa de incertidumbre en trminos
de unidades del SI, y cuyos resultados son, por lo tanto, aceptados sin referencia a un patrn
de la misma magnitud que es medida.
[Metrologa, 2001, 38, 289-296]
MTODO DE REFERENCIA: es un mtodo ampliamente investigado, que describe clara y
exactamente las condiciones y procedimientos necesarios, para la medicin de uno o ms
valores de la propiedad, que han demostrado tener exactitud y precisin de acuerdo con su
propsito de uso y que puede, por lo tanto, ser usado para evaluar la exactitud de otros
mtodos por la misma medicin, permitiendo en particular la caracterizacin de un MR.
[3.10 Gua ISO 30]
CRITERIO: En la ema este trmino se ha aplicado a los mtodos que se acreditan.
Desde el punto de vista metrolgico y en esta gua el significado es el establecido en
esta definicin.
PATRN: Medida materializada, instrumento de medicin, material de referencia o sistema
de medicin destinado a definir, realizar, conservar o reproducir una unidad o uno o ms
valores de una magnitud para servir de referencia.
[VIM 6.1, NMX Z-055 IMNC 1996]
CRITERIO: Para los propsitos de esta gua y en lo que se refiere a mediciones
qumicas (mediciones de cantidad de sustancia), los patrones de medicin son
Materiales de Referencia Certificados (MRC).
PRINCIPIO DE MEDICION: Es la base cientfica de una medicin, por ejemplo, el efecto
termoelctrico en la medicin de temperatura, el efecto Doppler en la medicin de velocidad,
el efecto Raman en la medicin del nmero de onda de vibraciones moleculares.
Gua Tcnica sobre Trazabilidad e Incertidumbre en las Mediciones Analticas
que emplea la tcnica de Espectrofotometra de Ultravioleta-Visible 2004-06-28
Fecha de emisin 2004-05-28, fecha de entrada en vigor 2005-01-03, revisin 00.
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NOTAS
1
A stas les llama condiciones de repetibilidad.
2
La repetibilidad se puede expresar cuantitativamente con la ayuda de las
caractersticas de la dispersin de los resultados.
REPRODUCIBILIDAD (DE LOS RESULTADOS DE MEDICIONES): Proximidad de la
concordancia entre los resultados de las mediciones del mismo mensurando, con las
mediciones realizadas haciendo variar las condiciones de medicin.
[VIM 3.7, NMX Z 055 IMNC 1996]
NOTAS
1
Para que una expresin de la reproducibilidad sea vlida, es necesario
especificar las condiciones que se hacen variar.
2
Las condiciones que se hacen variar pueden ser:
- el principio de medicin;
- el mtodo de medicin;
- el observador;
- el instrumento de medicin;
- el patrn de referencia;
- el lugar
- las condiciones de uso;
- el tiempo.
3
La repetibilidad puede ser expresada cuantitativamente con la ayuda de las
caractersticas de la dispersin de los resultados.
4
Los resultados considerados aqu son, habitualmente, los resultados
corregidos.
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(20 200) g
< 0,000 40 g
Repetibilidad
< 0,000 03 g
Resolucin
0,000 01 g
(0 210 )g
< 0,000 1 g
Repetibilidad
Resolucin
0,000 01 g
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El equipo adquirido es enviado a calibracin solicitando que la calibracin (B) sea realizada
en el intervalo de trabajo de 20 a 200 g y en intervalos de 20 g.
Producto de la calibracin se obtienen las caractersticas metrolgicas del equipo de
medicin (CMEM). A continuacin se muestra el ejemplo de lo que se emite en un
certificado o informe de calibracin para una balanza analtica (C).
Prueba de carga excntrica:
Variacin mxima de lectura obtenida en la prueba de carga excntrica.
Resolucin
0,02 mg
Carga
100 g
Variacin mxima
0,16 mg
Carga
100g
200g
Repetibilidad
0,000 01 g
0,000 04 g
Pruebas de repetibilidad:
Resolucin
0,01 mg
0,01 mg
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Una vez que se tienen los datos de la calibracin, se realiza la verificacin metrolgica, la
cual consiste en comparar las caractersticas metrolgicas del equipo de medicin, CMEM, y
los requisitos metrolgicos del cliente, RMC, (E). En la tabla 4 se muestra el ejemplo.
CMEM
(20 200 )g
Mximo 0,000 15 g
Mxima 0,000 04 g
0,00001 g
Verificacin
metrolgica
Cumple
Cumple
No cumple
Cumple
Carga
100 g
Variacin mxima
0,000 03 g
Carga
100g
200g
Repetibilidad
0,000 01 g
0,000 02 g
Pruebas de repetibilidad:
Resolucin
0,01 mg
0,01 mg
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Correccin
(g)
- 0,000 06
-0,000 12
-0,000 20
-0,000 25
-0,000 29
-0,000 32
-0,000 36
-0,000 37
-0,000 36
-0,000 34
20
40
60
80
100
120
140
160
180
200
Incertidumbre
(g)
0,000 08
0,000 09
0,000 09
0,000 11
0,000 09
0,000 11
0,000 12
0,000 12
0,000 15
0,000 12
CMEM
Verificacin
metrolgica
(20 200 )g
Cumple
Incertidumbre
< 0,000 40 g
Mximo 0,000 15 g
Cumple
Repetibilidad
< 0,000 03 g
Mxima 0,000 02 g
Cumple
0,00001 g
Cumple
Resolucin
0,000 01 g
Como resultado de la verificacin metrolgica, se concluye que las CMEM cumplen los
RMC, se documenta la Confirmacin Metrolgica (F), se realiza la identificacin del estado
de calibracin (D) y se concluye que la balanza puede ser utilizada para el propsito para el
cual fue confirmada.
El la figura 1 se muestra el diagrama del proceso de confirmacin.
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Verificacin metrolgica
Certificado informe
de calibracin
Identificacin del
estado de calibracina
F
El equipo
cumple con los
requisitos?
Si
Documento de
verificacin/confirma
cin
No
Acciones y decisiones
Calibracin
No
Es posible
ajustarlo o
repararlo?
Identificacin
del estado
Si
Ajuste o
reparacin
Informe de prueba:
Verificacin fallida
Cliente b
Devolucin al
cliente
Fin
49 de 73
CD
x
x
x
CI
x
x
x
CO
x
CF
x
x
x
x
x
x
x
x
x
x
x
x
x
x
x
x
x
x
x
x
x
x
x
x
50 de 73
Especificacin
Funcional
Fuente
Monocromador
Intervalo de longitud de
onda (175 - 3200) nm
Ancho de banda (0,05 5,0) nm
Alcance Fotomtrico en
absorbancia () de 6,0
Compartimiento y/o
Introduccin de
muestra
Detector
Fuente de
alimentacin
Especificacin
del Proveedor
seleccionado.
CD
Cumple
175-3200 nm
0,05-5,0 nm
6,0
1 cm
Reproducibilidad
Fotomtrica en un
0,0004 - 1
intervalo de absorbancia
() 0,0004 - 1
Exactitud fotomtrica en
un intervalo de
0,003 - 1
absorbancia () de
0,002 -0,5
0,003 - 1 y 0,002 - 0,5
Reproducibilidad de
longitud de onda 0,02
0,02 nm
nm
Exactitud en longitud de
0,15 nm
onda 0,15 nm
Luz espurea 0,00008 % 0,00008 % T a
T a 220 nm
220 nm
Ruido 0,000050 a RMS 0,000050 a RMS
a 500 nm.
a 500 nm.
Estabilidad fotomtrica
0,0002 /h
0,0002 /h despus de 1 h. despus de 1 h.
Instalacin elctrica (127 (127 10) V;
10) V; Mx. VA 300
Mx. VA 300
No
cumple
x
x
x
x
x
x
51 de 73
Especificacin
Resultado
Cumple
(0,05 - 5,0) nm
0 - 6,0)
(175 - 3200)
nm
1 nm
6,0
x
x
0,0004 - 1
0,005
0,003 - 1
0,002 - 0,5
0,005
0,05
0,02 nm
0,02 nm
0,15 nm
0,15 nm
(175 - 3200) nm
0,00008 % T a 220 nm
0,000050 a RMS a
500 nm.
0,0002 /h despus de
1 h.
0,00008 % T a
220 nm
0,000050 a
RMS a 500
nm.
0,0002 /h
despus de 1 h.
No
cumple
x
x
x
52 de 73
Resultado
Cumple
(175 - 3200) nm
0,005
0,05
0,015 nm
0,02 nm
0,00008 % T a 220 nm
0,0002 /h despus de 1
h.
No
cumple
x
x
x
Resultado
0,005
0,05
Cumple
No
cumple
0,0002 /h despus de 1
x
h.
Luz espuria 0,00008 % T a 220 nm
0,00008 % T a 220 nm
x
* La exactitud se puede verificar con MRC por ejemplo: disolucin de xido de holmio,
disolucin de platino cobalto, filtro de vidrio de didimio.
Con la cual se puede realizar las cartas de control.
Estabilidad 0,0002 h despus de 1 h.
NOTA:
Para las pruebas involucradas en la Calificacin de desempeo, se recomienda donde
aplique, realizar grficos de cartas de control.
53 de 73
Cr (VI ) = ( x B ) * fd n * fc
Donde
Cr(VI)
(x- B)
fdn
fc
(1)
54 de 73
Preparacin de la
disolucin de referencia
certificada para control.
Tratamiento de muestra
( digestin, extraccin)
Preparacin de
MRC de
Calibracin
analtica UV-Vis
Medicin en UV-Vis
Resultados
55 de 73
Concentracin
Concentracin
Cr(VI)
Cr(VI)
mg/L
mg/L
Factor de
Dilucin
fdn(muestra)
Calibracin especificacin
de la pipeta
Temperatura
Repetibilidad
Volumen 2
(aforo)
reproducibilidad
Precisin
n muestras
Sn(m)
Sn(m)
MRC de
Control
fC
Repetibilidad
Preparacin de
Estndar de Control
(ECd)
Precisin
Repetibilidad
Volumen 1
(alcuota)
Factor de
dilucin
(fd EC)
Material de
Referencia
Certificado
Reproducibilidad
Temperatura
Repetibilidad
Calibracin
especificacin del matraz
Volumen 2
(aforo)
Temperatura
Repetibilidad
Repetibilidad
56 de 73
= b1 + b0
(2)
( b0 )
b1
(3)
Donde
La concentracin de masa (mg/L) de Cr(VI), resultado de la curva de calibracin.
Es la respuesta observada del instrumento, en este caso la unidad es la absorbancia.
bo La ordenada al origen
b1 La pendiente calculada.
La incertidumbre debida a la curva de calibracin puede calcularse por varios mtodos, (Ver
apndice E.3 de Eurachem/CITAC Guide Second edition 2000) el que se ejemplificara aqu
es la incertidumbre obtenida a partir de los datos de la curva de calibracin de una lnea
recta.
Gua Tcnica sobre Trazabilidad e Incertidumbre en las Mediciones Analticas
que emplea la tcnica de Espectrofotometra de Ultravioleta-Visible 2004-06-28
Fecha de emisin 2004-05-28, fecha de entrada en vigor 2005-01-03, revisin 00.
57 de 73
x1
x1,y1
Donde n = i * j
x2
Concentraciones
Curvas de calibracin
y1
y2
yj
...
xi
xi,yj
Figura 3
Para este arreglo se realiza la regresin lineal y calculamos b1 y bo
El ejemplo mostrado esta basado en la Eurachem/CITAC Guide Second edition 2000.
Con los datos obtenidos, para la elaboracin de la ecuacin de la lnea recta en la curva de
calibracin, se estima la incertidumbre, de una concentracin de masa del elemento qumico
a medir " " , en base al calculo de regresin lineal de la curva de calibracin, con una
repuesta " ". Como se muestra en la ecuacin 4
u ( Cr (VI )B ) =
Donde:
u((Cr(VI)-B)
S
b1
p
n
(Cr(VI)-B)
MRC
Sxx
S
b1
1 1 ( (( Cr (VI ) B MRC )
+ +
p n
S XX
(4)
58 de 73
[y (b
n
S=
j =1
+ b1 *
)]
(5)
n2
(6)
S XX = ( j )
n
j =1
Donde:
S
desviacin estndar residual del calculo dela regresin lineal.
j Las "i" lectura observadas correspondientes a iMRC conocidas con las que se calibro
el instrumento
Las " i" lecturas ajustadas correspondientes a iMRC conocidas del instrumento en las
curvas de calibracin.
bo Ordenada al origen de la curva de calibracin.
b1 Pendiente calculada de la curva de calibracin.
n
Numero total de datos ( i*j)
sxx suma de cuadrados de los residuales de las concentraciones obtenidas por la curva de
calibracin.
Cada
una de las concentraciones de las diluciones de referencia (MRC) empleadas en
i
la curva de calibracin.
El promedio de las concentraciones de las disoluciones de referencia empleadas en
u MRC =
U EXP
k
(7)
59 de 73
Donde:
uMRC incertidumbre estndar del MRC
UEXP incertidumbre expandida reportada en el certificado
Factor de cobertura.
k
En caso que se realicen un nmero n de diluciones, para obtener la concentracin requerida
del MRC en estudio en la curva de calibracin, se debe considerar la incertidumbre de las
mismas y combinarse con la incertidumbre estndar del MRC en forma relativa y cuadrtica
con la incertidumbre del MRC, basndose en la regla 2 indicada en el captulo 8, Seccin
8.2.6 de Eurachem/CITAC Guide Second edition 2000.
Ver el punto 2 en donde se describe la estimacin de incertidumbre en un proceso de
dilucin.
Pueden llegar a usar una o ms diluciones con lo cual se tendran una o mas fuentes de
incertidumbre, dependiendo del nmero de diluciones a realizar, el modelo matemtico para
encontrar el valor del MRC se muestra en la ecuacin 8.
(8)
dilMRC
u
= MRC
MRC
u
u
+ fd1 + ............. fd n
fd 1
fd n
(9)
u B =
Donde:
SB
N
SB
n
(10)
60 de 73
4.2.1.5.Incertidumbre combinada.
u ( b ) = u ( ( B ) ) + (u B ) + (u MRC )
2
(11)
Donde
u((-B)) Incertidumbre del mesurando por la curva de calibracin del instrumento
uMRC
Incertidumbre del material de referencia certificado (1.3)
Incertidumbre por la correccin del blanco (Cuando aplique) (1.4)
uB
NOTA IMPORTANTE: Dependiendo de cada laboratorio y su mtodo, en este punto se
pueden considerar otras fuentes de incertidumbres, siempre y cuando sean significativas tales
como los factores del instrumento: sensibilidad y reproducibilidad, y entonces sern
combinadas de forma cuadrtica con la u((x)i
4.3.2. Factor de dilucin
u u
= V 1 + V 2
fd 1
V1 V2
u fd 1
(13)
61 de 73
u fdn
= 1
fd n
fdn
u fdn
(14)
uv =
S
n
(15)
Donde
S Desviacin estndar de las pesadas del volumen transferido.
n Nmero de mediciones.
62 de 73
[(T T20 ) * V ]
(16)
Donde
T
Temperatura del agua C al momento de la medicin
T20 20 C, temperatura de referencia
1
Coeficiente de expansin del volumen del agua C-1.
Volumen de la pipeta
V
3. Tolerancia del material volumtrico (Tol) se toma de la especificacin del material
volumtrico correspondiente que proporciona el proveedor y para convertir a incertidumbre
estndar se asume una distribucin rectangular dividiendo entre raz de 3.
Tol
(17 )
u t1 =
3
Donde
Tol Tolerancia especificada por el fabricante.
3 Distribucin triangular.
En el caso de emplear material volumtrico calibrado, este valor es sustituido por la
incertidumbre del material volumtrico calibrado (UV) y se localiza en el certificado de
calibracin, para convertirla a incertidumbre estndar se divide por el factor de cobertura k
indicado en el certificado de calibracin.
U
u
= V
Tol
k
(18)
u Vn
Vn1
u
= R
mm
u Exp . Liq
+
Vn
u tol
+
Vn
(19)
63 de 73
Donde:
uVn
Vn
uR
mm
u tol
Vn
MRCp
cn
( 20 )
ecp
Donde:
fc
Factor de correccin
La concentracin del material de referencia certificado.
MRC
El promedio de las concentraciones resultado de las mediciones experimentales
cn exp
del MRC ne mg/L.
La estimacin de incertidumbre relativa del factor de dilucin, se realiza combinando las
incertidumbres estndar de la concentracin de masa del MRC (MRC) y la incertidumbre
estndar de la concentracin de masa experimental (de n mediciones) del MRC, de forma
relativa y cuadrtica, de acuerdo a la ecuacin (17).
u
prepMRC
fc
u prepMRC
=
prep
u exp MRC
+
exp
(21)
64 de 73
uMRC = UMRC / k
-Cuando el MRC a emplear requiera una preparacin preliminar, como una dilucin
varias diluciones para llegar a la concentracin de masa deseada, se integrarn tantos
factores de dilucin (fdn) como sea necesario al modelo matemtico que define la
concentracin de masa final del MRC.
(23)
u
= MRC
MRC
u
u fd1
+
+ .......... ... fd n
fd n
fd1
(24)
u exp MRC =
S exp MRC
(25)
Donde:
Gua Tcnica sobre Trazabilidad e Incertidumbre en las Mediciones Analticas
que emplea la tcnica de Espectrofotometra de Ultravioleta-Visible 2004-06-28
Fecha de emisin 2004-05-28, fecha de entrada en vigor 2005-01-03, revisin 00.
65 de 73
SB
n
Sm
n
(26)
i = ( B ) * fd n * fc
(27)
i
( B )l
u fdn 2 u fc 2
+
+
fd n fc
(28)
Donde
(-B) La incertidumbre de la curva de calibracin (punto 1)
u fdn
ufc
66 de 73
i =i +
i
Donde
i
( 26 )
ui = ucombinada * i
(29)
U EXP = u i * k
(30)
Nota:
El valor del factor de cobertura cambia con el nivel de confianza considerado.
4.2.6. En la tabla 1 se muestra una propuesta de formato de informe de estimacin de
incertidumbre en la medicin.
Tabla 1
Tabla de fuentes de incertidumbre en la Medicin de Cromo (VI) en Aguas Residuales.
N
(x-B)
fdn
fr
Reprod.
Magnitud de
Valor
entrada Xi
estimado
Fuente de
xi
incertidumbre
Concentracin
de la muestra a
partir de la curva
Cx-B
Concentracin
del MRC a partir
de la curva
Concentracin
de la curva Cx
Concentracin
del blanco a
partir de la curva
CB
factor de
dilucin,
factor de
correccin.
Reproducibilidad
de la medicin
unidades
Fuente de
informacin
Incertidumbre
original
Tipo de
distribucin
Incertidumbre Contribucin
estndar u(xi)
ui(y)
67 de 73
Magnitud de entrada
Valor estimado
Xi Fuente de
xi
incertidumbre
unidades
Curva de calibracin
0,1989
mg/L
factor de dilucin, fd
10
mL
Incertidumbre de la
concentracin de la
muestra a partir de la
curva
Reproducibilidad de la
medicin, Cm
Concentracin de
masa, CrVI
Concentracin
de masa, CrVI
4.3.7
2,010
Fuente de
informacin
Mediciones
repetidas
Mediciones
repetidas
mg/L
Mediciones
repetidas
mg/L
Mediciones
repetidas
2,01
mg/L
2,01
mg/L
Incertidumbre
original
Tipo de
distribucin
Incertidumbre
estandar u(xi)
Contribucin
ui(y)
0,00045
A, normal
0,0023
0,00225
0,03672
A, normal
0,037
0,00367
0,0086
A, normal
0,00079
A, normal
0,0008
0,000394
U rel
0,0086
0,017
U expandida considerando un factor
de cobertura K=2
0,034
fd
Serie1
C(x-B)
0,00000
0,00100
0,00200
0,00300
0,00400
Contribucin ui(y)
Figura 1
5.0 Referencias
68 de 73
69 de 73
Las buenas prcticas de laboratorio forman parte del proceso de control de calidad, cubren
aspectos sencillos del trabajo diario en el laboratorio, deben documentarse y habilitarse
formalmente, cubren aspectos como: mantenimiento, registros, manejo y disposicin de
muestras, control de reactivos, limpieza del material de vidrio, ambiente, etc.
1. Requisitos en el laboratorio
Condiciones ambientales.
En un rea libre de polvo y vapores corrosivos para instalar el instrumento
para una mxima estabilidad y un mantenimiento mnimo.
Mantener la humedad relativa del ambiente entre 45% y 60 %
Mantener la temperatura del laboratorio entre 17 C y 25 C.
Evitar la exposicin del instrumento a los rayos solares.
Disponer de un cuarto bien iluminado.
Espacio
Colocar el instrumento en una mesa de dimensiones adecuadas.
Disponer de una mesa de preferencias antivibratoria, plana, limpia y seca.
Gua Tcnica sobre Trazabilidad e Incertidumbre en las Mediciones Analticas
que emplea la tcnica de Espectrofotometra de Ultravioleta-Visible 2004-06-28
Fecha de emisin 2004-05-28, fecha de entrada en vigor 2005-01-03, revisin 00.
70 de 73
Condiciones elctricas
Consultar los requerimientos elctricos especificados en al manual del
instrumento.
Evitar fluctuaciones de la potencia elctrica, utilizando reguladores de poder.
Disponer de conexin a tierra fsica
Seguridad
Utilizar guantes, bata de laboratorio, lentes de seguridad .
Nunca realizar ajustes al instrumento o reemplazar partes esenciales, lo debe
de hacer el tcnico de servicio.
El servicio deber estar a cargo de un especialista.
Almacenar residuos qumicos en lugares especiales para ello nunca en en el
laboratorio
Trabajar en campana de extraccin cuando sea necesario
Mantener etiquetadas todas las sustancias qumicas utilizadas en el
laboratorio.
2. Limpieza del material de vidrio
Analitos inorgnicos
Enjuagar el material con agua (3 veces)
Llenar con HNO3 20 % (v/v), dejar reposar durante toda la noche
Desechar el HNO3 y enjuagar con agua (5 veces)
Dejar el material lleno con agua durante toda la noche
Desechar el agua y poner a secar en un rea limpia
Analitos orgnicos
Lavar el material con agua y jabn libre de fosfatos
Enjuagar con agua; puede ser de la llave; posteriormente enjuagar con agua de
medicin (3 veces)
Enjuagar con acetona (2 veces) grado reactivo.
Enjuagar con el disolvente que se utilizar en la medicin, por ejemplo:
Medicin de sustancias activas al azul de metileno (SAAM), enjuagar el
material con cloroformo.
Casos especiales. En la medicin de cianuros es importante que el material no
contenga restos de cido.
Enjuagar con acetona si el material presenta restos de grasas, an cuando se
van a medir analitos inorgnicos.
3. Limpieza de las celdas
Gua Tcnica sobre Trazabilidad e Incertidumbre en las Mediciones Analticas
que emplea la tcnica de Espectrofotometra de Ultravioleta-Visible 2004-06-28
Fecha de emisin 2004-05-28, fecha de entrada en vigor 2005-01-03, revisin 00.
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4.
Las celdas son la base de cualquier anlisis por espectrofotometra
Los residuos de anlisis previos causan desviaciones en los resultados, baja
sensibilidad y precisin pobre
Limpiar regularmente las celdas.
Mantener juegos de celdas igualadas
Utilizar guantes para su manipulacin
Evitar tocar las ventanas pticas que ocasione depsitos de grasa o huellas
dactilares
Limpiar las celdas antes y despus de su uso.
Al final de un da de medicin, limpiarlas, secarlas y guardarlas en su
contenedor.
Guardar las celdas en un desecador.
No utilizar cepillos para la limpieza exterior de las celdas.
No utilizar aire comprimido para secarlas.
5. Cuidados del Espectrofotmetro
Antes de encender el espectrofotmetro, asegurarse que el compartimiento de
muestra est vaco.
Si se cuenta con sistemas de muestreo (celdas de flujo o automuestreadores),
verificar que no obstruyan el paso de la radiacin.
Seguir el procedimiento de encendido recomendado por el fabricante por
ejemplo encender el espectrofotmetro, posteriormente la computadora y
finalmente la impresora.
Dejar el instrumento encendido al menos 30 minutos (o lo recomendado por
el fabricante), antes de empezar con las mediciones.
Establecer un programa de calibraciones y verificaciones instrumentales
Establecer un programa de mantenimiento preventivo
Los servicios debern ser realizados por personal especializado
Mantener un listado de los consumibles ms comunes
Mantenerlo limpio y libre de polvo
Limpiar inmediatamente cualquier sustancia que se derrame sobre el
espectrofotmetro o en el compartimiento de muestra.
Nunca dejar las celdas con muestra dentro del instrumentoMantener las
ventanas pticas limpias, realizando la limpieza con papel para lentes
utilizando un poco de alcohol etlico
Establecer un programa de calificacin (CEIMA)
Establecer un programa de mantenimiento preventivo
72 de 73
6. Preparacin de muestras.
Considerar:
La naturaleza de la muestra
El componentes que se desea determinar
Los dems constituyentes presentes
La exactitud de longitud de onda deseada.
El tiempo disponible.
Una disolucin del analito(s) de inters adecuada para la medicin
espectrofotomtrica debe tener las siguientes propiedades:
1. Las especies absorbentes debern tener estabilidad por un periodo de
tiempo razonable, que permita realizar mediciones repetibles.
2. La inestabilidad se puede deber a diferentes factores: oxidacin,
descomposicin fotoqumica, disolvente, pH, temperatura
3. Disolucin: establecer un tiempo determinado y realizar todas las
mediciones iguales.SolubilidadLas disoluciones deben ser totalmente
solubles.
Las mediciones de coloides o material insoluble, producirn resultados sin
repetibilidad, debido a que sigue reaccionando o hidrolizndose el material
con el disolvente.
Se produce dispersin de la radiacin.
Algunos productos insolubles pueden ser extrados en disolventes diferentes.
Disolventes comunes
Agua.
Disoluciones de HCl, H2SO4, NaOH aprox. 0,1 eq/L
Disoluciones amortiguadoras de pH que no contengan sustancias absorbentes
por ejemplo mezclas de fosfato dicido de sodio con fosfato cido de sodio,
tiles en el intervalo de 4,5 a 8,9 de pH.
Disolventes orgnicos, grados espectroscpico, por ejemplo piridina, benceno,
cloroformo, alcohol etlico etc.
73 de 73