UNIVERSIDAD PRIVADA DE

TACNA
FACULTAD DE INGENIERIA

ESCUEL PROFESIONAL DE
INGENIERIA AGROINDUSTRIAL

Practica de Laboratorio
Coloracin Gram de Bacterias

NOMBRE: DIEGO SAUDO ROBLEDO

CURSO: MICROBIOLOGIA DE ALIMENTOS

Coloracin Gram Bacteria

I.

Introduccin
El tamao de la mayora de las clulas bacterianas es tal que resultan
difciles de ver con el microscopio ptico. La principal dificultad es la
falta de contraste entre la clula y el medio que la rodea. El modo ms
simple de aumentar el contraste es la utilizacin de colorantes.
Si se desea simplemente aumentar el contraste de las clulas para la
microscopa, son suficientes los procedimientos que usan unos solo
colorantes llamados de tincin simple. Sin embargo, a menudo se
utilizan mtodos que no tien de igual modo todas las clulas, es el
proceso denominado tincin diferencial. Uno muy usado en microbiologa
es la tincin Gram. Basndose en su reaccin a la tincin Gram, las
bacteras pueden dividirse en dos grupos: grampositivas y
gramnegativas. Esta tincin tiene gran importancia en taxonoma
bacteriana ya que indica diferencias fundamentales de la pared celular
de las distintas bacterias.
Mientras que las bacterias gramnegativas son constantes en su reaccin,
los microorganismos grampositivos pueden presentar respuestas
variables en ciertas condiciones (son gramlbiles). Por ejemplo, los
cultivos viejos de algunas bacterias grampositivas pierden la propiedad
de retener el cristal violeta, y en consecuencia, se tien por la safranina
apareciendo como gramnegativas. Anlogo efecto se produce en
ocasiones por cambio en el medio del organismo, o por ligeras
modificaciones en la ejecucin de la tcnica. Por este motivo, es preciso
atenerse, en la prctica, al procedimiento establecido.

II.

Objetivos
Estudiar y comprender el fundamento de la coloracin Gram.
Identificar materias Gram positivo y Gram negativo.
Realizar la tcnica de la coloracin Gram.

III.

Marco terico
El universo que descubri Leeuwenhoek estuvo conformado por
bacterias y protozoarios de diversas caractersticas. Es por ello que hoy
en da sabemos que hay millones de microorganismos que se
encuentran en todos los lugares de nuestro planeta, en al agua dulce y
salada, por tanto viven en el aire, agua y tierra, se les halla tambien en
los alimentos, en el exterior y el interior de los seres vivos. Tambin
causan enfermedades y otros que son beneficiosos para nosotros.

Por eso es de vital importancia conocer sobre estos microorganismos.

Especialmente hablaremos sobre bacterias, tipos, caractersticas y
diferencias entre gramnegativas y positivas.
Las bacterias pertenecen al filum de las Shizomycophyta, se les llama
tambin microbios o grmenes. Son de pequeo tamao. Casi siempre
son unicelulares.
Estan recubiertas por una pared celular de naturaleza quitinosa en su
superficie externa. Poseen prolongaciones filamentosas que les permiten
desplazarse otras tienen flagelos.
La pared celular que rodea a las bacterias es compleja y existen dos
formas bsicas: pared celular grampositiva con una gruesa capa de
pptidoglucano y una pared gramnegativa con una delgada capa de
pptidoglucano, as como una membrana externa.
Algunas bacterias carecen de pared celular y compensan su ausencia
sobreviviendo tan solo al interior de clulas del organismo anfitrin o en
un ambiente hipertnico.
Para clasificar a las bacterias debemos tener en cuenta su tamao,
forma, disposicin espacial, propiedades.
Se encuentran en todos los lugares de nuestro planeta, en al agua dulce
y salada, por tanto viven en el aire, agua y tierra, y se les halla tambien
en los alimentos y en el exterior y el interior de los seres vivos.
Encontramos tambin bacterias que pueden provocar enfermedades
potencialmente mortales. La enfermedad puede deberse a los efectos
txicos de los productos bacterianos o a la invasin de regiones
corporales que acostumbran a ser estriles.

IV.

Materiales y mtodos

Porta objetos
Cubre objetos
Cristal violeta
Lugol
Alcohol Acetona
Safranina
Mechero
Asa de Kolle
Aceite de Cedro

Materiales Biolgicos

Equipo

Capa bacteriana

* Microscopio

 Yogurt
Sarro dentario

V.

Metodologa

Muestra
(Muestra fijada)

Fija la muestra en
el mechero
Cristal violeta 2 min.
Lavar con agua
destilada.

Lugol 1 min.
Lavar con agua d.

Alcohol Acetona 20
seg.
Lavar con agua d.

Safranina 1 o 2 min.

Secar
Observar al microscopio.

Gram Positiva

Gram Negativa

Fotos:

- Aplicacin del yogurt en el porta

objetos.

- Cristal violeta, lugol, acetona y

safranina.

- Aplicacin del cristal violeta en

la muestra.

-Aplicacin del lugol en la muestra.

- Aplicacin de la acetona en la
muestra.

- Aplicacin de la safranina en la
muestra.

- Secado de la muestra.

- Observacin detenida de la
muestra en el microscopio.

- Aplicacin del aceite de cedro en

la muestra.

- Muestra del Yogurt.

- Muestra del sarro dentario.

VI.

Resultados

En la muestra de yogurt se encontr lactobacilus y Staphylococcus

aureus.
En la muestra de la copa bacteriana se vio esporas y levaduras y se
observ que era Gram positivas.
El sarro dental nos result Gram negativo, observando bacterias de
forma cocoide en los borde de la clula epitelial (clula eucariota).

VII.

Conclusiones

Las bacterias son causantes de infecciones y enfermedades.

ALgunas son beneficiosas para la agricultura, industria, salud y la
investigacin.
Para observar y distinguir este tipo de celulas se utiliza la Tincin de
Gram( en honor al medico dans Hans Christian Gram)

VIII.

Bibliografa

www.biologia.edu.ar/bacterias/micro4.htm
www.bio-nica.info/biblioteca/BacteriasEnfermedades.pdf
http://www.danival.org/600%20microbio/6000notasmicro/tincion/tincion_
gramneg.html