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1. Maceracin
Es la permanencia en contacto, por un perodo ms o menos prolongado, del mosto con las
partes slidas (hollejo, semillas, etc.), la que puede desarrollarse a diferentes temperaturas segn la
elaboracin que se est realizando.
Durante este perodo de contacto se transfieren componentes de una parte a la otra de la uva
y viceversa, en forma parcial. De los slidos se transfieren sustancias de gran importancia para el
futuro vino, como ser: compuestos fenlicos (cidos fenlicos, antocianos, sustancias tnicas y sus
precursores: catequinas y leucoantocianos), enzimas y pectinas.
La mayora de dichas sustancias son tiles: color, sustancias tnicas, minerales, aromas, etc.,
pero hay otras como las sustancias amargas, herbceas, acres, que resultan indeseables y que deben
ser evitadas, por lo que en la medida de lo posible, se debe tratar de controlar adecuadamente este
fenmeno.
2. Actividad enzimtica
Los racimos de uva que maduran en los viedos permanecen protegidos del oxgeno
atmosfrico que les rodea, gracias a la eficaz barrera del hollejo que los protege, no teniendo ms
contacto con la atmsfera que a travs de los fenmenos de respiracin o intercambio gaseoso
producidos en los rganos verdes de la planta. Desde el primer instante de la rotura de los granos y
hasta el final de la vida del vino, la accin del oxgeno est presente en las temidas oxidaciones y
2.1.2. Lacasa: es una enzima segregada por el hongo Botrytis cinerea, agente principal de la
podredumbre de la uva, por lo cual los fenmenos de oxidacin son mucho ms importantes cuando la
vendimia es atacada por dicha enfermedad. El poder oxidante de esta enzima es superior al de la
Tirosinasa, puede oxidar a un gran nmero de sustratos fenlicos y molculas que pertenecen a otras
familias qumicas. Es capaz de oxidar en quinona al complejo entre la molcula del fenol y el glutatin
por lo que ste ltimo no intervendra como trampa de quinonas. Al contrario que la tirosinasa, la
laccasa es estable al pH del mosto y posee mayor resistencia al SO2, A partir de los mismos
compuestos fenlicos de inicio, la cantidad formada de productos de condensacin marrones es ms
importante que durante la oxidacin por tirosinasa.
Es una enzima extracelular, es de fcil extraccin y su actividad puede ser medida por
espectrofotometra. Esto permite determinar eficazmente la calidad de las entradas de la vendimia
midiendo su actividad. Se caracteriza por su accin sobre los p-difenoles (hidroquinonas).
Acta sobre o-difenoles y el cido ascrbico, los monofenoles son tambin oxidados, excepto el
cido p-hidroxibenzoico. Los compuestos fenlicos del vino son fuertemente oxidados por la Laccasa
(antocianos y taninos), no as por la Tirosinasa cuya accin en este sentido es poco importante. La
accin de la Laccasa es la causa principal de la quebradura oxidsica en los vinos.
La laccasa tiene actividad ptima al pH del mosto y pierde estabilidad por encima de 7,0. Se ha
constatado que este clarificante mineral agregado al mosto es eficaz para eliminar la actividad de la
Tirosinasa por sus propiedades de absorcin pero no tiene ninguna accin sobre la Laccasa, cuando
es agregada sobre la vendimia tinta proveniente de uvas podridas.
2.1.3. Oxigenasas: el olor a hoja verde, pasto recin cortado o nota herbcea, es un fenmeno muy
conocido que se produce durante el triturado de los tejidos vegetales, como las hojas, pero tambin los
frutos. Cuatro actividades enzimticas intervienen de manera secuencial. Una acil hidrolasa, libera en
primer lugar cidos grasos y lpidos de membrana. Luego una lipoxigenasa cataliza la fijacin del
oxgeno en esos cidos grasos insaturados en C18. Los perxidos obtenidos son luego laminados en
aldehdos en C6, una parte de los cuales es reducida en los alcoholes correspondientes por la alcohol
deshidrogenasa de la uva. Ellos son los responsables de los olores caractersticos. La enzima del
laminado se liga a fracciones de la membrana, los tenores en aldehdos son proporcionales a la
importancia de la maceracin de las partes slidas. Para limitar su concentracin en la vinificacin en
blanco, es necesario obtener lo ms rpidamente posible un mosto de suficiente limpidez. (<200 NTU).
2.2.1.1. Pectinmetilestearasa o pectasa (PE): libera las funciones cidas de las unidades
galacturnicas, con acumulacin de metanol en el mosto. Es termoestable, la PE tiene un pH ptimo de
7 a 8, si bien presenta una actividad reducida con respecto al pH del mosto.
2.2.1.2. Poligalacturonasa (PG): pueden ser exo o endo segn el punto de accin. Cataliza la
hidrlisis glucosdica de los cidos poligalacturnicos derivados de la desmetoxilacin de las pectinas.
Las exo-poligalacturonasas ejercen su accin hidroltica de manera secuencial a partir de un extremo
de la cadena poligalacturnica, mientras que las endo actan al azar en el interior de las cadenas.
Aunque, en este ltimo caso, la hidrlisis de la cadena sea parcial disminuye rpidamente la viscosidad
del mosto.
2.2.1.3. Enzimas pectin liasa: durante la infeccin de la uva, el hongo Botrytis cinerea,
sintetiza enzimas para la degradacin de las paredes celulares. Produce una liasa que corta las
cadenas pcticas por -eliminacin. Tiene un pH ptimo de actividad cercano a 5. Los mostos
originados en uvas putrefactas son en consecuencia muy pobres en sustancias pcticas y su
viscosidad resultad en su mayor parte de la presencia de un polisido secretado por este hongo, el
glucano.
Este grupo de enzimas participan en la clarificacin espontnea de los mostos (durante el
desborre) y de los vinos (durante la conservacin). Por ello es indispensable conservarlas lo ms
posible y evitar su destruccin por calentamiento de la vendimia o del mosto. En caso de que las
enzimas naturales se encuentren en cantidad insuficiente o que fuesen destruidas, se puede salvar el
inconveniente agregando preparaciones comerciales de enzimas.
La clarificacin por degradacin enzimtica de las pectinas solubles, desemboca en la
acumulacin de alcohol metlico y de cido galacturnico en el mosto. Por supuesto que esta
acumulacin ser tanto mayor, cuando ms larga sea la maceracin, mayor la cantidad de enzimas
presentes y ms elevada la temperatura del medio.
Las enzimas pectolticas producidas por la uva o el hongo son poco sensibles al SO2. No son
inhibidas a concentraciones menores a 400 mg/L. Al pH del mosto actan por debajo de sus
actividades mximas, normalmente al 40 60% en el intervalo de pH 3,0 3,5 a 23CTiene una
temperatura ptima de accin entre 35 a 50C, presentan mxima actividad, pero por debajo de los
10C su actividad es muy dbil y por encima de los 70C es nula. En cuanto a la bentonita: disminuye
la actividad debido al fenmeno de adsorcin parcial.
Modo de accin
de la pectin
metil estearasa
Modo de accin
de la
poligalacturonasa
Modo de accin
de la
pectinoliasa
Muchas preparaciones tambin tienen actividad celuloltica para mejorar la ruptura de la pared
celular. El uso de enzimas pcticas ayuda a evitar el desarrollo de la turbidez debida a pectinas en los
vinos, y tambin se aaden para mejorar el rendimiento en mostos, tanto en el escurrido como en la
prensada.
2.2.2 Enzimas proteasas: la uva en estado de madurez es particularmente rica en protenas.
Una parte de dichas protenas son insolubles por lo que son eliminadas durante la decantacin en el
caso de la vinificacin en blanco. Las proteasas son susceptibles a hidrolizar las protenas bajo formas
solubles.
Los polisacridos producidos por la botrytis tienen un efecto inhibidor de las levaduras de
fermentacin, ralentizando el metabolismo de los hongos unicelulares y estimulando la formacin de
cido actico y glicerina. Estas sustancias conocidas antiguamente con botriticinas se han identificado
como fitoalexinas, fungicidas naturales producidos por los mismos vegetales atacados y como
respuesta a la agresin del hongo. En funcin de que la vendimia atacada es capaz de formar una
enzima especfica, como es la -D-glucanasa, es que se han estudiado sus propiedades y se
desarrollaron enzimas exgenas para el tratamiento de los vinos procedentes de vendimias
botritizadas.
glucosidasas, glucanasas y ureasas; que se aplican casi siempre por adicin en lugar de valerse de
enzimas inmovilizadas. Los mostos y vinos presentan algunas condiciones poco habituales para la
actividad de las enzimas debido a su pH, fuerza inica, contenidos de SO2, etanol y fenoles. En los
intervalos de temperaturas ms favorables para el tratamiento de los vinos, a menudo tienen actividad
baja y por ello, aadir las enzimas en solucin da lugar a bajas concentraciones y hace falta ms
tiempo de tratamiento.
Las variaciones en la actuacin de las enzimas que se aaden a algunos mostos, se atribuyen
a la actividad de las proteasas de los mostos, que se sabe que varan dentro de y entre las variedades
y en presencia de infecciones fngicas.
3.1. POR QUE UTILIZAR PREPARADOS ENZIMATICOS INDUSTRIALES EN ENOLOGA?
Los preparados enzimticos comerciales sirven fundamentalmente para ampliar y mejorar los
fenmenos espontneos que se presentan durante la vinificacin. En efecto, en los preparados
industriales hay muy pocas enzimas que no existen en la uva, en las levaduras o en la flora microbiana
contaminante. Entre las enzimas nuevas que aportan los preparados comerciales hay que mencionar
las pectinoliasas, las -D-glucanasas y algunas glicosidasas. Respecto a otros tipos de actividades
enzimticas, la debilidad de los niveles de actividad encontrados en la uva en las levaduras justifica la
incorporacin de enzimas producidas por microorganismos industriales a fin de acelerar y optimizar los
fenmenos buscados por el enlogo. De todos modos, en el caso de calentamiento de la vendimia, que
supone una inactivacin completa de las enzimas de la uva, puede resultar indispensable el empleo de
preparados de enzimas pectolticas comerciales.
Las primeras aplicaciones de glicohidrolasas industriales en enologa han sido la continuacin
del empleo de pectinasas para la extraccin y clarificacin de los zumos.
3.2. EL DESBORRE DE MOSTOS EN LA VINIFICACIN EN BLANCO
Las pectinas actan de coloides protectores en los mostos, lo cual mantiene a las partculas en
suspensin. Este fenmeno, en el que intervienen la viscosidad del mosto y las interacciones
electrostticas entre molculas cargadas todava no es bien conocido. En cualquier caso, se admite,
que la degradacin de las cadenas homogalacturnicas bajo la accin conjunta de la endo-PG y la
PME facilita la decantacin rpida de los fangos. Los preparados comerciales que tratan de acelerar el
desfangado deben tener alta riqueza en estos dos tipos de enzimas. Tambin la adicin de
pectinoliasas de origen fngico puede modificar la naturaleza de los mecanismos del desfangado. El
empleo de enzimas pectolticas comerciales para favorecer el desborre es actualmente una prctica
bastante utilizada. Despus del calentamiento de la vendimia, la adicin de enzimas pectolticas es
indispensable para conseguir el desfangado en plazos razonables.
3.3. LA MEJORA DE LOS RENDIMIENTOS EN MOSTO DURANTE EL PRENSADO
Tambin este procedimiento ha sido previamente desarrollado en la industria de zumos de
frutas ricas en pectinas. La actividad enzimtica debe permitir el debilitamiento de las membranas
celulares de la uva. Si parece confirmarse la intervencin de las enzimas pectolticas en la mejora del
rendimiento en el prensado tambin la presencia de celulasas y hemicelulasas tiene un efecto positivo
en el rendimiento de zumo.
3.4. LA MEJORA DE LAS EXTRACCIONES EN LA MACERACIN
En realidad este fenmeno es bastante similar al precedente, pues el efecto buscado es
tambin una degradacin profunda de la red poliosdica de las membranas celulares de la piel con el fin
de aumentar la extraccin del potencial aromtico y polifenlico de la vendimia. Los preparados
comerciales llamados de maceracin-licuefaccin deben ser particularmente ricos en celulasas, y
hemicelulasas adems de las pectinasas que hay en la mayora de los preparados enzimticos
Uno de los principales objetivos del enlogo que utiliza un preparado de maceracinIicuefaccin es conseguir mejor extraccin de los antocianos o sea del color de los vinos. Pero las
celulasas incluyen a las B-D-glucosidasas que pueden dirigir la hidrlisis y la degradacin de los
antocianos. Por tanto es necesario utilizar B-D-glucosidasas de poca afinidad con los flavonoides
3.5. LA LIBERACIN DE AROMA A PARTIR DE PRECURSORES GLICOSILADOS
Los preparados comerciales de pectinasas, celulasas, hemicelulasas o gluconasas contienen
glicosidasas relacionadas con la liberacin de aromas, aunque a veces en pequea cantidad. Una de
las ventajas tcnicas de las glicosidasas de Aspergillus sp. guarda relacin con su gran estabilidad al
pH cido del mosto, al contrario que las enzimas de la uva y de las levaduras.
El empleo de preparados enzimticos ricos en glicosidasas durante la fermentacin permite
enriquecer el medio en compuestos aromticos que proceden de la hidrlisis de glicsidos. El inters
de este procedimiento bioqumico reside en el hecho de que se puede dominar la extraccin del
potencial aromtico de la uva en un tiempo relativamente corto. El efecto de las enzimas aparece en
pocos das esta liberacin rpida de los compuestos aromticos debera acelerar la aparicin del
bouquet de envejecimiento, ya que la actividad de estas molculas parece estar paralizada mientras
estn unidas a los azcares.
La actividad endo-poligalacturonasa permanece constante a niveles pequeos mientras que la
actividad PME aumenta con la madurez de la uva. Estas dos enzimas estaran localizadas
fundamentalmente al nivel de la piel antes de su liberacin en los mostos desde las primeras etapas del
tratamiento de la vendimia
La fragilidad de las membranas celulares durante la maduracin del grano de uva representa
un fenmeno importante para el tcnico pues el debilitamiento de las estructuras parietales favorece la
extraccin de los polifenoles (antocianos y taninos).
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