Asignatura: INMUNOLOGA HUMANA

Curso 2

Segundo semestre

Departamento: Pediatra, Inmunologa, Obstetricia-Ginecologa, Nutricin-Bromatologa,

Psiquiatra e Historia de la Ciencia.

Tema 20.

SISTEMA INMUNE ASOCIADO A MUCOSAS

1. Estructura del MALT:

a. Ontogenia y funciones del MALT
b. Placas de Peyer
c. IgA en la mucosa intestinal

2. El epitelio intestinal: funcin inmunolgica

a. Absorcin y presentacin de antgeno

3. Clulas linfoides intestinales:

a. Linfocitos intraepiteliales
b. Linfocitos de la lmina propia mucosa

4. Citocinas de la inmunidad mucosa

5. Tolerancia oral a alimentos

Objetivos de aprendizaje
I)

Identificar y caracterizar las estructuras linfoides asociadas a las superficies

mucosas, particularmente en el intestino delgado.

II)

Identificar las vas de entrada, procesamiento y presentacin de antgenos que

llegan a las superficies mucosas.

III)

Describir los elementos y la capacidad funcional de los compartimentos

celulares del epitelio y la lmina propia de la mucosa intestinal.

IV)

Comprender la forma en la que el sistema inmune de las mucosas discrimina

entre antgenos inocuos y flora comensal, y microorganismos patgenos.

INTRODUCCIN

(diapositivas 2)

Las membranas mucosas son la principal puerta de entrada de microorganismos,

alergenos, y carcingenos, y ejercen de funcin de barrera selectiva entre el organismo y el
medio externo. Adems de las que recubren las vas areas, urinaria y genital, las glndulas
mamaria y salivares, y la conjuntiva ocular, la mucosa gastrointestinal es la superficie ms
extensa y vulnerable, con un rea cercana a los 400 m2 (200 veces mayor que la piel),
cubierta por una capa nica de clulas epiteliales. La primera funcin del intestino es la
obsorcin de nutrientes, y alberga gran cantidad de microorganismos (flora comensal) que
tiene efectos beneficiosos para el husped. El tejido linfoide asociado a la mucosa mucosa
gastro-intestinal es el ms complejo y numeroso en cuanto a las clulas que contiene.
Un rasgo fundamental de del sistema inmune de las mucosas es su capacidad para
proteger frente a la entrada de patgenos y la infeccin, a la vez que evita el desarrollo de
respuestas que lleven al dao tisular y la inflamacin frente a protenas inocuas de la dieta
y la microbiota normal. La intensa actividad inmunolgica, secundaria a la flora comensal
y los alimentos, ha sido crucial para modelar dos mecanismos principales de defensa antiinflamatoria adaptativa: (a) exclusin inmune, mediada por anticuerpos de IgA secretora,
que limitan el contacto con el epitelio y la penetracin de patgenos y otros antgenos
potencialmente dainos; y b) tolerancia oral, por mecanismos que suprimen las respuestas
proinflamatorias frente a antgenos inocuos y la flora comensal, mediadas por clulas Th2
(IgE), Th1 (reacciones de hipersensibilidad retardada, IgG), y Th17.
2

1) ESTRUCTURA DEL TEJIDO LINFOIDE ASOCIADO A MUCOSAS

1a) Ontogenia y funciones del GALT

(diapositiva 3,4)

El tejido linfoide asociado a la mucosa gastro-intestinal (GALT) aparece en la vida

intrauterina, y se desarrolla plenamente despus de nacer, con caractersticas estructurales y
funcionales adaptadas a su localizacin entre el organismo y el medio externo, que
determinan la forma de entrada y procesamiento de antgeno, las propiedades de
recirculacin celular; y la capacidad funcional de los compartimentos celulares. En sentido
extricto, slo los sitios de induccin est constituidos por tejido linfoide organizado, como
las placas de Peyer (PP) y los ndulos linfticos mesentricos (NLM), lugares especficos
para la captacin y presentacin de antgenos de la luz intestinal, donde se generan clulas
B productoras de IgA y linfocitos T efectores, que salen a la circulacin perifrica, y
vuelven despus a la mucosa intestinal por migracin y extravasacin selectiva, asentando
en los sitios efectores, que son los compartimentos celulares de la lmina propia y el
epitelio. La homeostasis y el control de las respuestas inmunes en el intestino depende en
gran medida de la separacin fsica y funcional entre los sitios de induccin y efectores.
1b. Placas de Peyer

(diapositiva 5)

Estas estructuras linfoepiteliales, formadas en la vida intrauterina a partir de clulas

hematopoyticas y clulas estromales de la pared intestinal. A diferencia de otros tejidos
linfoides secundarios, no tiene cpsula fibrosa ni linfticos aferentes, y estn recubiertas de
un epitelio especializado de clulas M que toman directamente antgeno de la luz intestinal.
En el intestino delgado, hay alrededor de 200, y cada una contiene varios agregados de
clulas B (folculos linfoides), rodeados por reas de linfocitos T (35-40%) y gran nmero
de clulas presentadoras de antgeno (CPA). La entrada del antgeno y su presentacin por
CPA a los linfocitos T CD4+, lleva a la generacin y proliferacin de linfoblastos B
especficos de antgeno, va interacciones CD40L/CD40, y la liberacin de citocinas,
comoTGF, importante en el cambio de isotipo (IgM a IgA).
Los precursores de clulas productoras de IgA, linfocitos T activados y CPA con
antgeno, salen por linfticos eferentes hasta NLM, y a travs del conducto torcico, llegan
a la circulacin sangunea, para recircular y extravasarse en la mucosa intestinal y otros

tejidos exocrinos. El proceso est regulado por la expresin selectiva por los linfocitos de
la integrina 47, y el receptor de quimiocinas CCR9, que interaccionan con la adresina
vascular MAdCAM-1 y CCL25, expresados en clulas del endotelio vascular y enterocitos
del intestino, respectivamente, pero no en otros tejidos linfoides. Una subpoblacin de
linfocitos T expresan la integrina E7 (CD103), y son retenidos en el epitelio al
interaccionar con la cadherina-E. En los sitios efectores (LP), la diferenciacin terminal a
plasmocitos productores de IgA est favorecida por linfocitos T CD4+ productores de
TGF y otras citocinas (IL5, IL6, IL10), factores liberados por las CPA locales, con un
papel relevante para el cido retinoico.

(diapositiva 6)

1c. IgA en la mucosa intestinal

La IgA secretora (IgAs) es la inmunoglobulina predominante en las secrecciones, y es
sintetizada por clulas productoras de IgA en las glndulas exocrinas y la LP mucosa, la
mayora IgA1 (70-90%), y el resto IgA2. A diferencia de la IgA srica (monomrica), ms
del 90% de la IgAs est formada por un dmero de IgA, estabilizado por la cadena J; y el
componente secretor (CS). El CS es una glicoproteina sintetizada por clulas epiteliales del
tracto gastrointestinal, forma parte del receptor para inmunoglobulinas polimricas (pIgR)
en la membrana basolateral. La LP contiene la mayora de las clulas productoras de
inmunoglobulinas del organismo, y producen hasta 40 mg/kg/dia de IgAs en el intestino
humano adulto. Para ejercen su funcin, la IgA dimrica (e IgM) sufre translocacin a las
secrecciones externas mediante un mecanismo trasepitelial activo. Tras su sntesis en la LP,
la IgA se une al receptor pIgR y el complejo es internalizado por el enterocito, transportado
en una vacuola y liberado el la regin apical, donde se escinde el pIgR para liberar en
complejo IgA-CS, mientras que el resto del receptor es degradado. (diapositiva 7)
La sIgA es resistente a la actividad proteoltica de la luz gastrointestinal y protege la
superficie mucosa mediante un mecanismo conocido como exclusin inmune, al actuar
como anticuerpo neutralizante de toxinas, virus y microorganismos. Su capacidad de unin
al receptor pIgR favorece el transporte transepitelial activo en la mucosa e higado, capaz de
aclarar o arrastar antgenos hacia el exterior. Adems, su efecto anti-inflamatorio incluye la
competicin con otros anticuerpos que activan la va clsica del complemento (IgG, IgM) o
la inhibicin de la quimiotaxis mediada por polimorfonucleares y fagocitosis.

2.- EL EPITELIO INTESTINAL: FUNCIN INMUNOLGICA (diapositiva 8)

La barrera epitelial intestinal est formada por una monocapa de clulas columnares,
con adaptaciones fsicas y bioqumicas para mantener la integridad. Su renovacin es
constante a partir de precursores pluripotenciales de la base de las criptas de Lieberkuhn,
que dan lugar tambin a clulas caliciformes (productoras de mucina), clulas de Paneth
(migran al fondo de las criptas), y clulas enteroendocrinas (migran al extremo de las
vellosidades). Los enterocitos son responsables de la absorcin de nutrientes y la secrecin
de electrolitos, y forman una barrera selectiva, donde el flujo trans- y paracelular est
regulado por diversos mecanismos que adaptan la permeabilidad a las necesidades
fisiolgicas. Otros factores que contribuyen a la funcin barrera son las uniones estrechas
(formadas por estructuras polipeptdicas), las mucinas del glicocalix, las microvillosidades,
y los pptidos antimicrobianos (defensinas, lisozima, lactoferrina). Adems, el mecanismo
de exclusin inmune mediado por IgAs, contribuye activamente a la proteccin.
El epitelio es un elemento central de la inmunidad innata de mucosa. Los enterocitos,
y las clulas dendrticas (CDs), expresan receptores de reconocimiento de patrones (RRP),
en especial TLR, presentes en un espectro amplio de estructuras de microorganismos, cuya
interaccin altera el fenotipo celular y activa respuestas rpidas. Los beneficios de la
colonizacin bacteriana en el establecimiento y regulacin de la barrera epitelial estn
mediados en gran parte por estas interacciones. Clulas epiteliales polarizadas controlan los
efectos proinflamatorios de las seales RRP que llegan de la zona apical, pero cuando hay
invasin bacteriana, la interaccin con RRP en la membrana basolateral activa la va NFkB
y la produccin de defensinas. Los enterocitos podran actuar como CPA no profesionales
que, en ausencia de inflamacin, tendran un efecto tolerognico, y secretan factores como
TSLP (linfopoyetina del estroma tmico) que regula la funcin de las CDs.

(diapositiva 9)

3.- CLULAS LINFOIDES INTESTINALES

La mucosa intestinal contiene linfocitos T (CD4+, CD8+), clulas productoras de
IgA, macrfagos y clulas dendrticas (CPA), y mastocitos. Los linfocitos T se distribuyen
entre los tejidos de induccin (PP, NLM) y los compartimentos celulares de la LP y epitelio

(sitios efectores), y su nmero total es superior al del tejido linfoide perifrico. El intestino
contiene, adems, gran cantidad de CDs que, junto a las clulas M que recubren las PP, son
responsables de la captacin y transporte de antgenos.

(diapositiva 10)

3a.- Linfocitos intraepiteliales (LIE).

En intestino delgado, los LIE estn intercalados entre las clulas del epitelio (en una
proprcin de 1 por cada 4-9 enterocitos), lo que representa alrededor del 50% del total de
linfocitos T del organismo. Es una poblacin no homognea de caractersticas particulares:
la mayora tienen fenotipo CD3+CD8+ y expresan TCR, y el resto, TCR+ y fenotipo
CD4-CD8- CD8+. En estudios in vitro, se comportan como clulas citotxicas. Los LIE
convencionales, TCR CD8, provienen de rganos linfoides secundarios y son
clulas de memoria (CD45RO) reactivas frente a antgenos extraos. Otros LIE TCR+
CD8+, podran migrar directamente del timo, y podran tener efectos anti-inflamatorio y
protector de la integridad mucosa, tras reconocer antgenos propios de los enterocitos o
expresados como seales de estrs. Por ejemplo, las molculas MHC-clase I no
convencionales MICA, que activan fenmenos de citotoxicidad mediados por el receptor
NKG2D/CD94, para eliminar los enterocitos alterados que comprometen la funcin barrera
epitelial.
3b.-Clulas dendrticas

(diapositiva 11)

Se han identificado varias subpoblaciones de CDs intestinales localizadas en PP, LP

y NLM, estudiadas principalmente en el ratn, con propiedades diferentes a las de otros
tejidos, como el bazo. Son clulas de gran flexibilidad, cuya naturaleza y funcin est
condicionada por seales del microambiente local, especialmente del epitelio, e intervienen
en la homeostasis y control de las respuestas frente a bacterias comensales y patgenas.
Todas expresan la molcula CD11c y pueden clasificarse por la presencia o no de CD11b y
CD8 (PP) o del receptor de E-cadherina CD103 (LP, NLM). En la LP, estn situadas en
zonas estratgicas para captar antgenos que atraviesan el epitelio, o tomarlo directamente
de la luz intestinal. En las PP, las clulas M del epitelio especializado transfieren antgeno a
las CDs, que migran a los NLM, donde promueven la diferenciacin de linfocitos CD4+
reguladores, a travs de mecanismos que dependen del cido retinoico y TGF. Al inducir
la expresin de 47, determinan tambin su migracin selectiva al intestino.

3c.- Linfocitos de la lmina propia

(diapositiva 12)

La LP es la capa de tejido conectivo situada entre el epitelio y la muscularis

mucosa, cuya estructura est formada por clulas de msculo liso, fibroblastos, linfticos y
vasos sanguneos. Contiene linfocitos T, macrfagos, clulas dendrticas, neutrfilos, y
mastocitos, y la mayora (70-80%) de las clulas productoras de inmunoglobulinas del
organismo, especialmente IgA. Estas clulas T proceden de las PP, su principal fenotipo es
CD3+ CD4+ (60-70%), la mayora son TCR+ (95%), y muchas expresan el marcador
CD45RO de clulas memoria. Son clulas productoras de citocinas, con un patrn de tipo
Th1 (en especial, IFN), pero tambin IL4 o IL10. Se trata de autnticas clulas efectoras,
capaces de colaborar con las clulas B en la sntesis de IgA, y de ejercer funciones
reguladoras para el mantenimiento de la tolerancia oral.

4.- CITOCINAS DE LA INMUNIDAD MUCOSA

(diapositivas 12, 13)

La composicin celular de los tejidos efectores en la LP mucosa y su capacidad

funcional juegan un papel importante en la regulacin de la inmunidad local. De acuerdo al
perfil de citocinas producido, los linfocitos T CD4+ pueden dividirse en Th1 (IFN, IL12),
y Th2 (IL4, IL5, IL10, IL13), con capacidad de inhibicin recproca, y ms recientemente,
Th17, que no producen IFN o IL4, sino IL17. En el intestino, se han identificado tambin
linfocitos T que sintetizan TGF (Th3) o IL10 (Tr1). Las citocinas locales juegan un papel
fundamental en la diferenciacin de clulas T CD4`+, siendo IL12 e IL4 los principales
factores implicados. En las PP, a diferencia de lo que ocurre en otros tejidos perifricos, los
linfocitos T producen citocinas de forma espontnea (IFN, IL4, IL5, IL10).
Los LIE producen citocinas (IL2, IFN, IL5, TGF) que podran modular la cintica
y expresin de marcadores de membrana en los enterocitos (MHC-clase II, clase I-like). La
resistencia epitelial al paso de macromolculas aumenta por TGF e IL10, y las citocinas
proinflamatorias (IFN, IL6, TNF) tienen el efecto contrario. Adems, IFN e IL4, con la
contribucin de TNF, IL1, IL1 y TGF, aumentan la expresin del receptor para
inmunoglobulinas polimricas (pIgR). El estmulo va RRP de las clulas epiteliales lleva a
la secrecin de IL1, IL1, IL5, IL6, IL7, IL15, TNF, y citocinas antiinflamatorias TGF

e IL10. La funcin de TGF es primordial, interviene en la inmunoregulacin local, induce

la expresin de E7, y tiene accin supresora sobre clulas Th1 y otras, adems de ser un
factor de cambio de isotipo en la diferenciacin de clulas B para la sntesis de IgA.
Las CDs de los NLM, y LP intestinal, probablemente bajo la influencia de TSLP
epitelial, promueven la direrenciacin de clulas T reguladoras, al inducir la expresin de la
molcula Foxp3, en presencia de TGF. Tambin contribuyen a la secrecin de IgA,
mediante la produccin de citocinas (IL6, TGF, IL10) y factores de cambio de isotipo
(APRIL). Sin embargo, en determinadas condiciones, algunas subpoblaciones de CDs
pueden desencadenar respuestas protectoras, o de inflamacin. Las CDs no condicionadas
induciran preferentemente la diferenciacin de clulas productoras de TGF e IL10,
mientras que la presencia de citocinas como IL12, IFN, o IL4, llevaran a la polarizacin
Th1/Th2. Por el contrario, la diferenciacin Th17 podra requerir la presencia de TGF, y
de las citocinas proinflamatorias IL6, IL21, e IL1, adems de IL23.

5.- TOLERANCIA ORAL A ALIMENTOS

(diapoditivas 14)

En condiciones normales, la ingestin de alimentos no se acompaa del desarrollo de

respuestas inmunes, sino de un estado de falta de respuesta a estos antgenos (tolerancia
oral). Hay estudios en modelos animales, y algunas observaciones en humanos; aunque
especies diferentes podran utilizar mecanismos distintos para mantener la tolerancia oral.
En estos modelos, donde la sensibilizacin mucosa no ocurre en ausencia de NLM, pero si
de PP, se ha observado que la administracin de dosis bajas de antgeno, a travs del
epitelio, lleva a la diferenciacin de linfocitos Th2 (IL4, IL10), o que producen TGF, y la
generacin de clulas T especficas de antgeno, que migran a los NLM regionales donde
inducen supresin de Linfocitos T efectores va TGF. Por el contrario, dosis altas de
antgeno, a travs de las PP, o por entrada directa a la circulacin sistmica (prdida de
integridad epitelial), induce delecin o anergia de linfocitos Th1 especficos en los NLM.
Los microorganismos vivos podran entrar preferentemente a travs de las clulas M
de las PP, dando lugar a la inmunizacin activa y a la induccin de respuestas de IgAs,
mientras que las protenas solubles de la dieta lo haran difusamente a travs del epitelio,
dando lugar a la tolerancia oral. Este fenmeno puede explicarse por tres mecanismos:

delecin clonal (apoptosis de clulas efectoras, va Fas/FasL), anergia clonal (inactivacin

funcional, por ausencia de seales coestimuladoras), e induccin de clulas T reguladoras
(CD4+ CD25+) tipo Th3 y Tr1. La hiptesis ms extendida sugiere que en condiciones
normales, mantenida la integridad epitelial, la tolerancia oral a los alimentos podra reflejar
el hecho de que estos antgenos no estimulen la inmunidad innata (va PRR) y sean
presentados a los linfocitos T CD4+ en ndulos linfoides regionales, por CDs
condicionadas por factores del microambiente local (TSLP, TGF) .

(diapositiva 15)

La prdida de tolerancia oral ocurre cuando la barrera intestinal o la funcin inmune

mucosa estn alteradas, especialmente en individuos geneticamente susceptibles, o durante
un perodo variable despus del nacimiento. Una presentacin de antgeno no habitual,
infecciones, o cambios en la flora comensal, exponen a la mucosa a potentes sustancias
inmunoestimuladoras y activan mecanismos de la inmunidad innata, pueden desencadenar
la inflamacin crnica del intestino, mediadas por respuestas de anticuerpos IgG/IgE,
reacciones de hipersensibilidad celular (Th1) o dependientes de Th17.

BIBLIOGRAFA
-Brandzaeg P, Kiyono H, Pabst R, Russell MW. Terminology: nomenclature of
mucosal-associated lymphoid tissue. Mucosal Immunol 2008; 1:31-7.
-Fagarasan S, Honjo T. Intestinal IgA synthesis. Regulation of the front-line body
defenses. Nat Rev Immunol 2003;3:63-72
-Fujihashi K, McGhee JR. TH1/TH2/TH3 cells for regulation of mucosal immunity.
En: Mestecky J, Lamm ME, Strober W, Bienenstock J, McGhee JR, Mayer Ll (eds).
Mucosal immunology. Elsevier-Academic Press. 2005 (3 edicion), pp539-58.
-Iwasaki A. Mucosal dendritic cells. Annu Rev Immunol 2007;25:381-418.
-MacDonald TT, Monteleone G. Human gut associated lymphoid tissues. En:
Mestecky J, Lamm ME, Strober W, Bienenstock J, McGhee JR, Mayer Ll (eds). Mucosal
immunology. Elsevier-Academic Press. 2005 (3 edicion), pp407-14.
-Mowat AMcI. Anatomical basis of tolerance and immunity to intestinal antigens.
Nat Rev Immunol 2003;3:331-41.

Nomenclatura recomendada para los compartimentos celulares del tejido

linfoide asociado a la mucosa intestinal

Abreviatura preferida

Explicacin

LP

Lmina propria
Estroma de tejido conectivo situado por encima de la
muscularis mucosae en el intestino

Compartimento LIE

Epitelio surperficial
La mucosa del intestino delgado contiene la mayora de los
linfocitos intraepiteliales

FAE

Epitelio asociado a los folculos

Recubre la parte superior de las estructuras del MALT
y contiene un nmero variable de clulas M

MALT

Tejido linfoide asociado a mucosas

Principal sitio de induccin, se subdivide segn
regin anatmica (abajo). Composicin variable

GALT

Tejido linfoide asociado al intestino

PP

Placas de Peyer

ILF

Folculo linfoide aislado (solitario)

PPs e ILFs constituyen la mayor parte del GALT,
junto al apndice, cuya funcin se ha estudiado menos

NALT

Tejido linfoide asociado a nasofaringe

Anillo de Waldeyer (adenoide, amigdalas palatinas)

BALT

Tejido linfoide asociado a bronquios

No se encuentra en el pulmn adulto humano normal

MLN

Ndulo linfoide mesentrico

(tomado de Brandtzaeg P. et al. Mucosal Immunol, 2008;1:38)

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Nomenclatura recomendada para las molculas relacionadas con la

funcin inmune secretora (a)

Abreviatura preferida

Explicacin

-sIgA (o S-IgA)

IgA Secretora

-sIgM (o S-IgM)

IgM Secretora

-pIgA

IgA Polimrica
Se refiere principalmente a dmeros de IgA,
tambin a polmeros ligados a la cadena J que
contienen IgA

-cadena J

Cadena de unin

-SC

Componente Secretor
Se han descrito 3 formas de SC: de membrana;
ligado (a IgA o IgM); y libre

-pIgR

Receptor de Ig polimrico
Lo mismo que SC de membrana

pIgA = dmero/polmero de IgA;

pIgR = receptor de Ig polimrico;
SC = componente secretor;
SIgA = inmunoglobulin A secretora;
SIgM = inmunoglobulina M secretora.

(a) Aprobado por el Subcomit IUIS/WHO sobre nomenclatura de IgA

(tomado de Brandtzaeg P. et al. Mucosal Immunol, 2008;1:38)

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