I.

INTRODUO
As atividades a serem desenvolvidas no PROGRAMA DE BIOSSEGURANA
devem permitir o aprendizado e o crescimento do estudante na sua rea profissional.
Os lquidos biolgicos e os slidos, os quais manuseamos nos laboratrios, so,
quase sempre, fontes de contaminao. Os cuidados que devemos ter para no haver
contaminao cruzada dos materiais, no contaminar o pessoal do laboratrio, da
limpeza,
os equipamentos, o meio ambiente atravs de aerossis e os cuidados com o descarte
destes
materiais fazem parte das Boas Prticas em Laboratrio Clnico (BPLC), seguindo as
regras da Biossegurana. Para cada procedimento h uma regra j definida em Manuais,
Resolues, Normas ou Instrues Normativas.
1. O local de trabalho deve ser mantido sempre em ordem.
2. Aos chefes de grupo cabe a responsabilidade de orientar seu pessoal e exigir o
cumprimento das regras, sendo os mesmos, responsveis diretos por abusos e falta de
capacitao profissional para utilizar os equipamentos, reagentes e infra-estrutura.
3. Antes de utilizar qualquer dependncia que no seja a do laboratrio em que se
encontra
trabalhando, o estagirio dever pedir permisso ao responsvel direto pelo mesmo.
4. Para sua segurana, procure conhecer os perigos oferecidos pelos produtos qumicos
utilizados no seu trabalho.
5. Procure inteirar-se das tcnicas que voc utiliza. Cincia no mgica. O
conhecimento
dos porqus pode ser muito til na soluo de problemas tcnicos.
6. Na dvida, pergunte.
7. Ao perceber que um aparelho est quebrado, comunique imediatamente ao chefe do
setor
para que o reparo possa ser providenciado.
8. Ao perceber algo fora do lugar, coloque-o no devido lugar. A iniciativa prpria para
manter a ordem muito bem-vinda e antecipadamente agradecida.
9. Planeje bem os seus protocolos e realize os procedimentos operacionais dos mesmos.
Idealmente, antes de comear um experimento, voc deve saber exatamente o que ser
consumido, sobretudo no tocante ao uso de material importado.
10. Trabalho com patgenos no deve ser realizado em local movimentado. O acesso ao
laboratrio deve ser restrito a pessoas que, realmente, manuseiem o material biolgico.
11. O trnsito pelos corredores com material patognico deve ser evitado ao mximo.
Quando necessrio, utilize bandejas.
Aquele que nunca trabalhou com patgenos, antes de comear a manuse-los, deve:
Estar familiarizado com estas normas;
Ter recebido informaes e um treinamento adequado em tcnicas e conduta geral
de trabalho em laboratrio (pipetagem, necessidade de manter-se a rea de trabalho
sempre limpa, etc.)
13. Ao iniciar o trabalho com patgenos, o estagirio dever ficar sob a superviso de
um
pesquisador experimentado, antes de estar completamente capacitado para o trabalho
em
questo.
14. Sada da rea de trabalho, mesmo que temporariamente, usando luvas (mesmo que o
pesquisador tenha certeza de que no esto contaminadas), mscara ou avental,
estritamente proibida. No se deve tocar com as luvas em maanetas, interruptores,

telefone, etc. (S se deve tocar com as luvas o material estritamente necessrio ao

trabalho).
15. Seja particularmente cuidadoso para no contaminar aparelhos dentro ou fora da
sala
(use aparelhos extras, apenas em caso de extrema necessidade).
16. Em caso de acidente:
A rea afetada deve ser lavada com gua corrente em abundncia;
lcool iodado deve ser passado na rea afetada (com exceo dos olhos, que devem
ser lavados exaustivamente com gua destilada);
Em caso de ferida, deve ser lavada com gua corrente e comprimida de forma a sair
sangue (cuidado para no aumentar as dimenses da ferida deve ser tomado);
Os acidentes devem ser comunicados, imediatamente, ao responsvel pelo setor e a
direo do Instituto para discusso das medidas a serem adotadas;
17. As normas de trabalho com material radioativo e com material patognico devem ser
lidas com ateno antes de se comear a trabalhar com os mesmos.
18. Recomendao final para minimizar o risco de acidentes: no trabalhe sob tenso.
II BIOSSEGURANA
DEFINIO
Biossegurana um conjunto de procedimentos, aes, tcnicas, metodologias,
equipamentos e dispositivos capazes de eliminar ou minimizar riscos inerentes as
atividades de pesquisa, produo, ensino, desenvolvimento tecnolgico e prestao de
servios, que podem comprometer a sade do homem, dos animais, do meio ambiente
ou a
qualidade dos trabalhos desenvolvidos.
TIPOS DE RISCO
(Portaria do Ministrio do Trabalho, MT no. 3214, de 08/06/78)
1. Riscos de Acidentes
2. Riscos Ergonmicos
3. Riscos Fsicos
4. Riscos Qumicos
5. Riscos Biolgicos
1. RISCOS DE ACIDENTES
Considera-se risco de acidente qualquer fator que coloque o trabalhador em situao
de perigo e possa afetar sua integridade, bem estar fsico e moral. So exemplos de risco
de
acidente: as mquinas e equipamentos sem proteo, probabilidade de incndio e
exploso,
arranjo fsico inadequado, armazenamento inadequado, etc.
2. RISCOS ERGONMICOS
Considera-se risco ergonmico qualquer fator que possa interferir nas caractersticas
psicofisiolgicas do trabalhador causando desconforto ou afetando sua sade. So
exemplos de risco ergonmico: o levantamento e transporte manual de peso, o ritmo
excessivo de trabalho, a monotonia, a repetitividade, a responsabilidade excessiva, a
postura inadequada de trabalho, o trabalho em turnos, etc.
3. RISCOS FSICOS
Consideram-se agentes de risco fsico as diversas formas de energia a que possam
estar expostos os trabalhadores, tais como: rudo, vibraes, presses anormais,
temperaturas extremas, radiaes ionizantes, radiaes no ionizantes, ultra-som,
materiais
cortantes e ponteagudos, etc.

4. RISCOS QUMICOS
Consideram-se agentes de risco qumico as substncias, compostas ou produtos que
possam penetrar no organismo pela via respiratria, nas formas de poeiras, fumos,
nvoas,
neblinas, gases ou vapores, ou que, pela natureza da atividade de exposio, possam ter
contato ou ser absorvido pelo organismo atravs da pele ou por ingesto.
5. RISCOS BIOLGICOS
Consideram-se agentes de risco biolgico as bactrias, fungos, parasitos, vrus, entre
outros.
Classificao de risco biolgico:
Os agentes de risco biolgico podem ser distribudos em quatro classes de 1 a 4 por
ordem
crescente de risco (anexo 1), classificados segundo os seguintes critrios:
Patogenicidade para o homem.
Virulncia.
Modos de transmisso
Disponibilidade de medidas profilticas eficazes.
Disponibilidade de tratamento eficaz.
Endemicidade.
MTODOS DE CONTROLE DE AGENTE DE RISCO
Os elementos bsicos para conteno de agentes de risco:
A. - BOAS PRTICAS DE LABORATRIO - GLP
Observncia de prticas e tcnicas microbiolgicas padronizadas.
Conhecimento prvio dos riscos.
Treinamento de segurana apropriado.
Manual de biossegurana (identificao dos riscos, especificao das prticas,
procedimentos para eliminao de riscos).
A.1. - RECOMENDAES GERAIS
Nunca pipete com a boca, nem mesmo gua destilada. Use dispositivos de
pipetagem mecnica.
No coma, beba, fume, masque chiclete ou utilize cosmticos no laboratrio.
Evite o hbito de levar as mos boca, nariz, olhos, rosto ou cabelo, no laboratrio.
Lave as mos antes de iniciar o trabalho e aps a manipulao de agentes qumicos,
material infeccioso, mesmo que tenha usado luvas de proteo, bem como antes de
deixar o laboratrio.
Objetos de uso pessoal no devem ser guardados no laboratrio.
Utilize jalecos ou outro tipo de uniforme protetor, de algodo, apenas dentro do
laboratrio. No utilize essa roupa fora do laboratrio.
No devem ser utilizadas sandlias ou sapatos abertos no laboratrio.
Utilize luvas quando manusear material infeccioso.
No devem ser usados jias ou outros adornos nas mos, porque podem impedir
uma boa limpeza das mesmas.
Mantenha a porta do laboratrio fechada. Restrinja e controle o acesso do mesmo.
No mantenha plantas, bolsas, roupas ou qualquer outro objeto no relacionado com
o trabalho dentro do laboratrio.
Use cabine de segurana biolgica para manusear material infeccioso ou materiais
que necessitem de proteo contra contaminao.

Utilize dispositivos de conteno ou minimize as atividades produtoras de aerossis,

tais como operaes com grandes volumes de culturas ou solues concentradas.
Essas atividades incluem: centrifugao (utilize sempre copos de segurana),
misturadores tipo Vortex (use tubos com tampa), homogeneizadores (use
homogeneizadores de segurana com copo metlico), sonicagem, triturao,
recipientes abertos de material infeccioso, frascos contendo culturas, inoculao de
animais, culturas de material infeccioso e manejo de animais.
Qualquer pessoa com corte recente, com leso na pele ou com ferida aberta (mesmo
uma extrao de dente), devem abster-se de trabalhar com patgenos humanos.
Coloque as cabines de segurana biolgica em reas de pouco trnsito no
laboratrio, minimize as atividades que provoquem turbulncia de ar dentro ou nas
proximidades da cabine.
As cabines de segurana biolgica no devem ser usadas em experimentos que
envolvam produtos txicos ou compostos carcinognicos. Neste caso utilizam-se
capelas qumicas.
Descontamine todas as superfcies de trabalho diariamente e quando houver
respingos ou derramamentos. Observe o processo de desinfeco especfico para
escolha e utilizao do agente desinfetante adequado.
Coloque todo o material com contaminao biolgica em recipientes com tampa e a
prova de vazamento, antes de remov-los do laboratrio para autoclavao.
Descontamine por autoclavao ou por desinfeco qumica, todo o material com
contaminao biolgica, como: vidraria, caixas de animais, equipamentos de
laboratrio, etc..., seguindo as recomendaes para descarte desses materiais.
Descontamine todo equipamento antes de qualquer servio de manuteno.
Cuidados especiais devem ser tomados com agulhas e seringas. Use-as somente
quando no houver mtodos alternativos.
Seringas com agulhas ao serem descartadas devem ser depositadas em recipientes
rgidos, a prova de vazamento e embalados como lixo patolgico.
Vidraria quebrada e pipetas descartveis, aps descontaminao, devem ser
colocadas em caixa com paredes rgidas rotulada vidro quebrado e descartada
como lixo geral.
Saiba a localizao do mais prximo lava olhos, chuveiro de segurana e extintor de
incndio. Saiba como us-los.
Mantenha preso em local seguro todos os cilindros de gs, fora da rea do
laboratrio e longe do fogo.
Zele pela limpeza e manuteno de seu laboratrio, cumprindo o programa de
limpeza e manuteno estabelecido para cada rea, equipamento e superfcie.
Todo novo funcionrio ou estagirio deve ter treinamento e orientao especfica
sobre BOAS PRTICAS LABORATORIAIS e PRINCPIOS DE
BIOSSEGURANA aplicados ao trabalho que ir desenvolver.
Qualquer acidente deve ser imediatamente comunicado chefia do laboratrio,
registrado em formulrio especfico e encaminhado para acompanhamento junto a
Comisso de Biossegurana da Instituio.
Fique atento qualquer alterao no seu quadro de sade e dos funcionrios sob sua
responsabilidade, tais como: gripes, alergias, diarrias, dores de cabea, enxaquecas,
tonturas, mal estar em geral, etc... e notifique imediatamente chefia do laboratrio.
B. - BARREIRAS
B.1. - BARREIRAS PRIMRIAS

B.1.1. EQUIPAMENTO DE PROTEO INDIVIDUAL EPI

So empregados para proteger o pessoal da rea de sade do contato com agentes
infecciosos, txicos ou corrosivos, calor excessivo, fogo e outros perigos. A roupa e o
equipamento servem tambm para evitar a contaminao do material em experimento
ou
em produo. So exemplos:
LUVAS
As luvas so usadas como barreira de proteo prevenindo contra contaminao das
mos ao manipular material contaminado, reduzindo a probabilidade de que
microrganismos presentes nas mos sejam transmitidos durante procedimentos.
O uso de luvas no substitui a necessidade da LAVAGEM DAS MOS porque elas
podem ter pequenos orifcios inaparentes ou danificar-se durante o uso, podendo
contaminar as mos quando removidas.
Usar luvas de ltex SEMPRE que houver CHANCE DE CONTATO com sangue,
fludos do corpo, dejetos, trabalho com microrganismos e animais de laboratrio.
Usar luvas de PVC para manuseio de citostticos (mais resistentes, porm menos
sensibilidade).
Lavar instrumentos, roupas, superfcies de trabalho SEMPRE usando luvas.
NO usar luvas fora da rea de trabalho, NO abrir portas, NO atender telefone.
Luvas (de borracha) usadas para limpeza devem permanecer 12 horas em soluo de
Hipoclorito de Sdio a 0,1% (1g/l de cloro livre = 1000 ppm). Verificar a
integridade das luvas aps a desinfeco.
NUNCA reutilizar as luvas, DESCART-LAS de forma segura.
JALECO
Os vrios tipos de jalecos so usados para fornecer uma barreira de proteo e
reduzir a oportunidade de transmisso de microrganismos. Previnem a contaminao
das
roupas do pessoal, protegendo a pele da exposio a sangue e fluidos corpreos,
salpicos e
derramamentos de material infectado.
So de uso constante nos laboratrios e constituem uma proteo para o
profissional.
Devem sempre ser de mangas longas, confeccionados em algodo ou fibra
sinttica (no inflamvel).
Os descartveis devem ser resistentes e impermeveis.
Uso de jaleco PERMITIDO somente nas REAS DE TRABALHO.
NUNCA EM REFEITRIOS, ESCRITRIOS, BIBLIOTECAS, NIBUS,
ETC.
Jalecos NUNCA devem ser colocados no armrio onde so guardados objetos
pessoais.
Devem ser descontaminados antes de serem lavados.
OUTROS EQUIPAMENTOS
culos de Proteo e Protetor Facial (protege contra salpicos, borrifos, gotas,
impacto).
Mscara (tecido, fibra sinttica descartvel, com filtro HEPA, filtros para gases,
p, etc.).
Avental impermevel.
Uniforme de algodo, composto de cala e blusa.
Luvas de borracha, amianto, couro, algodo e descartveis.
Dispositivos de pipetagem (borracha peras, pipetadores automticos, etc.).

B.1.2. - EQUIPAMENTOS DE PROTEO COLETIVA (EPC)

So equipamentos que possibilitam a proteo do pessoal do laboratrio, do meio
ambiente e da pesquisa desenvolvida. So exemplos:
CABINES DE SEGURANA
As Cabines de Segurana Biolgica constituem o principal meio de contenso e so
usadas como barreiras primrias para evitar a fuga de aerossis para o ambiente. H trs
tipos de cabines de segurana biolgica:
Classe I
Classe II A, B1, B2, B3.
Classe III
Procedimento correto para uso da Cabine de Segurana Biolgica encontra-se no
anexo 2.
FLUXO LAMINAR DE AR
Massa de ar dentro de uma rea confinada movendo-se com velocidade uniforme ao
longo de linhas paralelas.
CAPELA QUMICA NB
Cabine construda de forma aerodinmica cujo fluxo de ar ambiental no causa
turbulncias e correntes, assim reduzindo o perigo de inalao e contaminao do
operador
e ambiente.
CHUVEIRO DE EMERGNCIA
Chuveiro de aproximadamente 30 cm de dimetro, acionado por alavancas de mo,
cotovelos ou joelhos. Deve estar localizado em local de fcil acesso.
LAVA OLHOS
Dispositivo formado por dois pequenos chuveiros de mdia presso, acoplados a
uma bacia metlica, cujo ngulo permite direcionamento correto do jato de gua. Pode
fazer parte do chuveiro de emergncia ou ser do tipo frasco de lavagem ocular.
MANTA OU COBERTOR
Confeccionado em l ou algodo grosso, no podendo ter fibras sintticas. Utilizado
para abafar ou envolver vtima de incndio.
VASO DE AREIA
Tambm chamado de balde de areia, utilizado sobre derramamento de lcalis para
neutraliz-lo.
EXTINTOR DE INCNDIO A BASE DE GUA
Utiliza o CO2 como propulsor. usado em papel, tecido e madeira. No usar em
eletricidade, lquidos inflamveis, metais em ignio.
EXTINTOR DE INCNDIO DE CO2 EM P
Utiliza o CO2 em p como base. A fora de seu jato capaz de disseminar os
materiais incendiados. usado em lquidos e gases inflamveis, fogo de origem eltrica.
No usar em metais alcalinos e papel.
EXTINTOR DE INCNDIO DE P SECO
Usado em lquidos e gases inflamveis, metais do grupo dos lcalis, fogo de origem
eltrica.
EXTINTOR DE INCNDIO DE ESPUMA
Usado para lquidos inflamveis. No usar para fogo causado por eletricidade.
EXTINTOR DE INCNDIO DE BCF
Utiliza o bromoclorodifluorometano. usado em lquidos inflamveis, incndio de
origem eltrica. O ambiente precisa ser cuidadosamente ventilado aps seu uso.
MANGUEIRA DE INCNDIO
Modelo padro, comprimento e localizao so fornecidos pelo Corpo de

Bombeiros.
PROCEDIMENTOS PARA DESCARTE DOS RESDUOS GERADOS EM
LABORATRIO
1 - RESDUOS INFECTANTES
Estes resduos podem ser divididos em quatro grupos a saber:
MATERIAL PROVENIENTE DE REAS DE ISOLAMENTO
Incluem-se aqui, sangue e secrees de pacientes que apresentam doenas
transmissveis.
MATERIAL BIOLGICO
Composto por culturas ou estoques de microrganismos provenientes de laboratrios
clnicos ou de pesquisa, meios de cultura, placas de Petri, instrumentos usados para
manipular, misturar ou inocular microrganismos, vacinas vencidas ou inutilizadas,
filtros e
gases aspiradas de reas contaminadas.
SANGUE HUMANO E HEMODERIVADOS
Composto por bolsas de sangue com prazo de utilizao vencida, inutilizada ou com
sorologia positiva, amostras de sangue para anlise, soro, plasma, e outros subprodutos.
PROCEDIMENTOS RECOMENDADOS PARA O DESCARTE
As disposies inadequadas dos resduos gerados em laboratrio podero constituir
focos de doenas infecto-contagiosas se, no forem observados os procedimentos
para seu tratamento.
Lixo contaminado deve ser embalado em sacos plsticos para o lixo tipo 1, de
capacidade mxima de 100 litros, indicados pela NBR 9190 da ABNT.
Os sacos devem ser totalmente fechados, de forma a no permitir o derramamento
de seu contedo, mesmo se virados para baixo. Uma vez fechados, precisam ser
mantidos ntegros at o processamento ou destinao final do resduo. Caso ocorram
rompimentos freqentes dos sacos, devero ser verificados, a qualidade do produto
ou os mtodos de transporte utilizados. No se admite abertura ou rompimento de
saco contendo resduo infectante sem tratamento prvio.
Havendo derramamento do contedo, cobrir o material derramado com uma soluo
desinfetante (por exemplo, hipoclorito de sdio a 10.000 ppm), recolhendo-se em
seguida. Proceder, depois, a lavagem do local. Usar os equipamentos de proteo
necessrios.
Todos os utenslios que entrarem em contato direto com o material devero passar
por desinfeco posterior.
Os sacos plsticos devero ser identificados com o nome do laboratrio de origem,
sala, tcnica responsvel e data do descarte.
Autoclavar a 121 C (125F), presso de 1 atmosfera (101kPa, 151 lb/in acima da
presso atmosfrica) durante pelo menos 20 minutos.
As lixeiras para resduos desse tipo devem ser providas de tampas.
Estas lixeiras devem ser lavadas, pelo menos uma vez por semana, ou sempre que
houver vazamento do saco.
2 - RESDUOS PERFUROCORTANTES
Os resduos perfurocortantes constituem a principal fonte potencial de riscos, tanto
de acidentes fsicos como de doenas infecciosas. So compostos por: agulhas, ampolas,
pipetas, lminas de bisturi, lminas de barbear e qualquer vidraria quebrada ou que se
quebre facilmente.
PROCEDIMENTOS RECOMENDADOS PARA O DESCARTE
Os resduos perfurocortantes devem ser descartados em recipientes de paredes
rgidas,
_

com tampa e resistentes autoclavao. Estes recipientes devem estar localizados to

prximo quanto possveis da rea de uso dos materiais.
Os recipientes devem ser identificados com etiquetas autocolantes, contendo
informaes sobre o laboratrio de origem, tcnico responsvel pelo descarte e data do
descarte.
Embalar os recipientes, aps tratamento para descontaminao, em sacos adequados
para descarte identificados como material perfurocortantes e descartar como lixo
comum, caso no sejam incinerados.
A agulha no deve ser retirada da seringa aps o uso.
No caso de seringa de vidro, lev-la juntamente com a agulha para efetuar o processo
de
descontaminao.
No quebrar, entortar ou recapear as agulhas.
3 - RESDUOS RADIOATIVOS
Compostos por materiais radioativos ou contaminados com radionucldeos com
baixa atividade provenientes de laboratrios de pesquisa em qumica e biologia,
laboratrios de anlises clnicas e servios de Medicina Nuclear. So normalmente,
slidos
ou lquidos (seringas, papel absorvente, frascos, lquidos derramados, urina, fezes, etc.).
Resduos radioativos, com atividade superior s recomendadas pela Comisso Nacional
de
Energia Nuclear (CNEN), devero ser acondicionados em depsitos de decaimento (at
que
suas atividades se encontrem dentro do limite permitido para sua eliminao).
PROCEDIMENTOS ESPECFICOS PARA O DESCARTE
No misturar rejeitos radioativos lquidos com slidos.
Preveja o uso de recipientes especiais, etiquetados e apropriados natureza do
produto
radioativo em questo.
Coletar materiais como agulhas, ponteiras de pipetas e outros objetos afiados,
contaminados por radiao, em recipientes especficos, com sinalizao de
radioatividade.
Os containers devem ser identificados com: Istopo presente, tipo de produto qumico
e
concentrao, volume do contedo, laboratrio de origem, tcnico responsvel pelo
descarte e a data do descarte.
Os rejeitos no devem ser armazenados no laboratrio, mas sim em um local
previamente adaptado para isto, aguardando o recolhimento.
Considerar como de dez meias vidas o tempo necessrio para obter um decrscimo
quase total para a atividade dos materiais (fontes no seladas) empregadas na rea
biomdica.
Pessoal responsvel pela coleta de resduos radioativos devem utilizar vestimentas
protetoras e luvas descartveis. Estas sero eliminadas aps o uso, tambm, como
resduo radioativo.
Em caso de derramamento de lquidos radioativos, podero ser usados papis
absorventes ou areia, dependendo da quantidade derramada. Isto impedir seu
espalhamento. Estes devero ser eliminados juntos com outros resduos radioativos.
OBSERVAES IMPORTANTES:

Os Procedimentos estabelecidos para a eliminao de rejeitos radioativos foram

padronizados pela Norma CNEN-NE-6.05 (CNEN, 1985).
O pessoal envolvido na manipulao desses rejeitos devem receber treinamento
especfico para realizao dessa atividade, alm de uma regular vigilncia mdico
sanitria.
4 - RESDUOS QUMICOS
Os resduos qumicos apresentam riscos potenciais de acidentes inerentes s suas
propriedades especficas. Devem ser consideradas todas as etapas de seu descarte com a
finalidade, de minimizar, no s acidentes decorrentes dos efeitos agressivos imediatos
(corrosivos e toxicolgicos), como os riscos cujos efeitos venham a se manifestar a mais
longo prazo, tais como os teratognicos, carcinognicos e mutagnicos. So compostos
por
resduos orgnicos ou inorgnicos txicos, corrosivos, inflamveis, explosivos,
teratognicos, etc.
Para a realizao dos procedimentos adequados de descarte, importante a
observncia do grau de toxicidade e do procedimento de no mistura de resduos de
diferentes naturezas e composies. Com isto, evitado o risco de combinao qumica
e
combusto, alm de danos ao ambiente de trabalho e ao meio ambiente. Para tanto,
necessrio que a coleta desses tipos de resduos seja peridica.
Os resduos qumicos devem ser tratados antes de descartados. Os que no puderem
ser recuperados, devem ser armazenados em recipientes prprios para posterior
descarte.
No armazenamento de resduos qumicos devem ser considerados a compatibilidade
dos produtos envolvidos, a natureza do mesmo e o volume.
PROCEDIMENTOS GERAIS DE DESCARTE
Cada uma das categorias de resduos orgnicos ou inorgnicos relacionados deve
ser separada, acondicionada, de acordo com procedimentos e formas especficas e
adequadas a cada categoria. Na fonte produtora do rejeito e em sua embalagem
devero existir os smbolos internacionais estabelecidos pela Organizao
Internacional de Normalizao (ISO) e pelo Comit de Especialistas em Transporte
de Produtos Perigosos, ambos da Organizao das Naes Unidas, adequados a
cada caso.
Alm do smbolo identificador da substncia, na embalagem contendo esses
resduos deve ser afixada uma etiqueta autoadesiva, preenchida em grafite contendo
as seguintes informaes: Laboratrio de origem, contedo qualitativo, classificao
quanto natureza e advertncias.
Os rejeitos orgnicos ou inorgnicos sem possibilidade de descarte imediato devem
ser armazenados em condies adequadas especficas.
Os resduos orgnicos ou inorgnicos devero ser desativados com o intuito de
transformar pequenas quantidades de produtos qumicos reativos em produtos
derivados incuos, permitindo sua eliminao sem riscos. Este trabalho deve ser
executado com cuidado, por pessoas especializadas.
Os resduos que sero armazenados para posterior recolhimento e
descarte/incinerao, devem ser recolhidos separadamente em recipientes coletores
impermeveis a lquidos, resistentes, com tampas rosqueadas para evitar
derramamentos e fechados para evitar evaporao de gases.
Resduos inorgnicos txicos e suas solues aquosas Sais inorgnicos de metais
txicos e suas solues aquosas devem ser previamente diludos a nveis de
concentrao que permitam o descarte direto na pia em gua corrente.
_

Concentraes mximas permitidas ao descarte direto na pia para cada metal:

Cdmio - no mximo 1 mg/L
Chumbo- no mximo 10 mg/L
Zinco- no mximo 5 mg/L
Cobre- no mximo 5 mg/L
Cromo- no mximo 10 mg/L
Prata- no mximo 1 mg/L
Resduos inorgnicos cidos e suas solues aquosas Diluir com gua, neutralizar
com bases diludas e, descartar na pia em gua corrente.
Resduos inorgnicos bsicos e suas solues aquosas Diluir com gua,
neutralizar com cidos diludos e descartar na pia em gua corrente.
Resduos inorgnicos neutros e suas solues aquosas Diluir com gua e descartar
na pia em gua corrente.
Resduos inorgnicos insolveis em gua:
Com risco de contaminao ao meio ambiente armazenar em frascos etiquetados e
de contedo similar, para posterior recolhimento.
Sem risco de contaminao ao meio ambiente coletar em saco plstico e descartar
como lixo comum.
Resduos orgnicos e suas solues aquosas txicas coletar em frascos etiquetados
e de contedo similar para posterior recolhimento.
Resduos orgnicos cidos e suas solues aquosas diluir com gua, neutralizar
com cidos diludos e descartar na pia em gua corrente.
Resduos orgnicos bsicos e suas solues aquosas diluir com gua, neutralizar
com cidos diludos e descartar na pia em gua corrente.
Resduos orgnicos neutros e suas solues aquosas diluir com gua e descartar na
pia em gua corrente.
Resduos orgnicos slidos insolveis em gua:
Com risco de contaminao ao meio ambiente armazenar em frascos etiquetados e
de contedo similar para posterior recolhimento.
Sem risco de contaminao ao meio ambiente coletar em sacos plsticos e
descartar em lixo comum.
Resduos de solventes orgnicos:
Solventes halogenados puros ou em mistura armazenar em frascos etiquetados e
de contedo similar para posterior recolhimento.
Solventes isentos de halogenados, puros ou em mistura coletar em frascos
etiquetados e de contedo similar, para posterior incinerao.
Solventes isentos de toxicidade, puros ou em soluo aquosa, utilizados em grande
volume coletar em frascos etiquetados e de contedo similar para posterior
recuperao.
Solventes que formam perxidos e suas misturas coletar em frascos, adicionar
substncias que impeam a formao de perxidos, etiquetar, para posterior
incinerao.
5 - RESDUOS COMUNS
Composto por todos os resduos que no se enquadram em nenhuma das categorias
anteriores e que, por sua semelhana com os resduos domsticos comuns, podem ser
considerados como tais.
ROTINAS DE ESTERILIZAO
Vidraria a ser autoclavada de rotina:
A vidraria deve ser autoclavada a 120O C por 20 minutos e postas para secar em
_

estufa. A vidraria com tampa de poliestireno no deve ser submetida a temperatura

acima
de 50O C no forno. Os demais materiais a serem esterilizados devem ser solicitados,
diretamente, ao pessoal da esterilizao, pelos prprios usurios.
1. Tubos de ensaio, frascos e pipetas:
a) Contaminados ou sujos com material proteico:
Aps o uso imerg-los em soluo de hipoclorito de sdio a 1% em vasilhames
apropriados (pipetas Pasteur e demais separadamente) por, no mnimo, 12 horas.
b) Vidraria suja com material aderente (Nujol, Percoll, Adjuvantes oleosos, etc.):
Lavar em gua de torneira e coloc-los em soluo de Extran a 2% prximos a pia
das salas dos laboratrios por um perodo mnimo de 04 horas (Pipetas Pasteur e demais
separadamente).
Observao: A vidraria maior que no couber dentro dos vasilhames deve ser tratada
colocando-se a soluo desinfetante ou detergente dentro da mesma.
c) Vidrarias utilizadas com gua ou solues tampes sem protenas:
Os frascos devero ser lavados pelo prprio usurio, em gua corrente e, em
seguida, trs vezes em gua destilada, colocados para secar deixando-os emborcados
sobre
papel toalha no laboratrio, prximo a pia. Aps secarem, devero ser tampados com
papel
alumnio e guardados nos armrios. Tubos e pipetas devero ser processados como se
estivessem contaminados.
d) Pipetas sujas com gel:
Colocar em vasilhames separados e ferver antes de juntar as demais pipetas.
2. Lminas e Lamnulas
Colocar nos vasilhames apropriados e rotulados para as mesmas com soluo de
hipoclorito a 1%. Aps o trabalho, colocar as lminas e lamnulas em vasilhames
separados.
Lavar as lamnulas no laboratrio e colocar em vasilhames contendo lcool, na mesa
de apoio do fluxo.
3 - Cmara e Lamnula de Neubauer e Homogeneizadores de Vidro:
Aps uso, colocar em vasilhame imergindo em hipoclorito a 1%. Aps 1 hora, lavar
em gua corrente, secar e guardar.
MATERIAL PLSTICO
1) Frasco, tubos de ensaio, seringas, ponteiras e tampas
a) Contaminados:
Imergir em hipoclorito de sdio a 1% no mesmo vasilhame utilizado para as
vidrarias, com exceo das ponteiras, que devero ser colocadas em recipientes
menores,
separados.
Observao: Encher as ponteiras com a soluo de hipoclorito ao desprez-las.
b) No contaminados, porm sujos com material aderente (adjuvante oleoso, Nujol,
Percoll,etc):
Lavar em gua corrente e imergir em Extran a 2% por tempo mnimo de 04 horas
em vasilhame apropriado.
2) Pipetas Descartveis
a) Contaminadas:
Colocar no vasilhame para pipeta de vidro.
b) Sujas com material aderente:
Lavar em gua corrente e colocar no vasilhame para pipeta de vidro.

3) Tampas pretas de poliestireno:

Imergir em formol a 10% ou glutaraldedo a 2% por um mnimo de 24 horas ou 02
horas respectivamente.
OUTROS MATERIAIS:
1) Agulhas descartveis
a) Contaminadas:
Aps o uso imergir no vasilhame de paredes duras contendo formol a 10%, para isso
destinado, pelo menos 24 horas.
Observao: DESPREZ-LAS SEM USAR O PROTETOR a fim de se evitar o
risco de
acidentes (puno acidental do dedo).
b) Sujas com material aderente:
Desprez-las com o respectivo protetor bem preso. Aps a descontaminao dever
ser incinerado
2) Material Cirrgico
a) Contaminado:
Imergir em soluo de glutaraldeido a 2% por 02 horas para desinfectar. Aps lavar
em gua corrente e destilada, secar com gase e guardar.
Se desejar esterilizar o material, submeter a glutaraldeido a 2% durante 10 horas,
lavar e secar com gua e gaze estreis dentro do fluxo laminar. Alternativamente.
3) Tampes de Gaze
a) Molhados com cultura
Colocar no vasilhame com hipoclorito de sdio a 1% para ser desprezado aps
desinfeco.
b) Secos
Deixar em vasilhame reservado por, no mnimo, 48 horas e em seguida reutiliz-los.
4) Filtros Millipore Pequenos
Devem ser desmontados pelo operador, colocados dentro de um frasco com
hipoclorito e entregues esterilizao (at s 16 horas).
5) Culturas de parasitos no utilizados
Colocar um volume duas vezes maior de hipoclorito dentro dos frascos e em
seguida desprezar dentro do vasilhame para vidrarias ou plsticos.
6) Ims para agitadores magnticos
Aps uso, lavar com gua corrente e destilada, secar e guardar.
7) Placas de gel de poliacrilamida
Aps o uso, lavar em gua corrente, gua destilada e lcool, secar e guardar.
EQUIPAMENTOS, BANCADAS E PIAS
1) Cada usurio dever limpar e arrumar as bancadas e equipamentos aps o uso.
2) No final do expediente as bancadas devero ser limpas com hipoclorito a 0,5% e, na
sexta-feira, tarde, no caso, na sala de cultura, fazer a mesma limpeza com fenol
semisinttico
(Germipol 50 mL/L), utilizando mscara.
3) As pias devero ser limpas no incio do expediente, quando forem removidos os
materiais a serem lavados.
4) Verificar se os refrigeradores e freezeres precisam ser descongelados e limpos,
semanalmente, e executar a limpeza, se necessrio.
ALGUMAS NORMAS DA SALA DE ESTERILIZAO
A) - LAVAGEM:
1) Retirar, os vasilhames com materiais a serem lavados, da sala, no incio do
expediente.

2) Lavar o material que estava com hipoclorito de sdio, fenol ou glutaraldedo em gua
corrente.
3) Mergulhar o material em Extran em vasilhames especficos para cada tipo de
material,
pelo perodo mnimo de 04 horas.
4) Retirar o Extran do material aps escov-los (quando necessrio), rinsando-os ,
repetidas
vezes, com gua de torneira seguido por gua destilada.
5) Fazer a rinsagem das pipetas graduadas dentro do lavador de pipetas.
6) Secar o material em estufa. Colocar papel alumnio para cobrir a vidraria no
autoclavvel e devolver ao laboratrio.
B) ESTERILIZAO:
1) PIPETAS
Colocar chumao de algodo, empacotar em papel pardo ou porta-pipetas e
esterilizar em forno (170O C 180O C) por 01 hora.

Anexo 1
Classes de risco biolgico:
Classe de Risco I - Escasso risco individual e comunitrio.
O Microrganismo tem pouca probabilidade de provocar enfermidades humanas ou
enfermidades de importncia veterinria.
Ex: Bacillus subtilis
Classe de Risco II - Risco individual moderado, risco comunitrio limitado.
A exposio ao agente patognico pode provocar infeco, porm, se dispe de
medidas eficazes de tratamento e preveno, sendo o risco de propagao limitado.
Ex: Schistosoma mansoni
Classe de Risco III - Risco individual elevado, baixo risco comunitrio.
O agente patognico pode provocar enfermidades humanas graves, podendo
propagar-se de uma pessoa infectada para outra, entretanto, existe profilaxia e/ou
tratamento.
Ex: Mycobacterium tuberculosis
Classe de Risco IV - Elevado risco individual e comunitrio.
Os agentes patognicos representam grande ameaa para as pessoas e animais, com
fcil propagao de um indivduo ao outro, direta ou indiretamente, no existindo
profilaxia
nem tratamento.
Ex: Vrus Ebola
Nveis de conteno fsica para riscos biolgicos:
Para manipulao dos microrganismos pertencentes a cada um das quatro classes de
risco devem ser atendidos alguns requisitos de segurana, conforme o nvel de
conteno
necessrio.
O nvel 1 de conteno se aplica aos laboratrios de ensino bsico, nos quais so
manipulados os microrganismos pertencentes a classe de risco I. No requerida
nenhuma caracterstica de desenho, alm de um bom planejamento espacial, funcional e
a adoo de boas prticas laboratoriais.
O nvel 2 de conteno destinado ao trabalho com microrganismos da classe de
risco
II, se aplica aos laboratrios clnicos ou hospitalares de nveis primrios de diagnstico,
sendo necessrio, alm da adoo das boas prticas, o uso de barreiras fsicas primrias

(cabine de segurana biolgica e equipamentos de proteo individual) e secundrias

(desenho e organizao do laboratrio).
O nvel 3 de conteno destinado ao trabalho com microrganismos da classe de
risco
III ou para manipulao de grandes volumes e altas concentraes de microrganismos
da classe de risco II. Para este nvel de conteno so requeridos alm dos itens
referidos no nvel 2, desenho e construo laboratoriais especiais. Devem ser mantidos
controles rgidos quanto operao, inspeo e manuteno das instalaes e
equipamentos. O pessoal tcnico deve receber treinamento especfico sobre
procedimentos de segurana para a manipulao desses microrganismos.
nvel 4 ou conteno mxima destina-se a manipulao de microrganismos da classe
de
risco IV, o laboratrio com maior nvel de conteno e representa uma unidade
geogrfica e funcionalmente independente de outras reas. Esses laboratrios requerem,
alm dos requisitos fsicos e operacionais dos nveis de conteno 1, 2 e 3, barreiras de
conteno (instalaes, desenho, equipamentos de proteo) e procedimentos especiais
de segurana.

Anexo 2
Fechar as portas do laboratrio.
Evitar circulao de pessoas no laboratrio durante o uso da cabine.
Ligar a cabine e a luz UV de 15 a 20 minutos antes de seu uso.
Descontaminar a superfcie interior com gaze estril embebida em lcool etlico ou
isoproplico a 70%.
Lavar as mos e antebraos com gua e sabo e secar com toalha ou papel toalha
descartvel.
Passar lcool etlico ou isoproplico a 70% nas mos e antebraos.
Usar jaleco de manga longa, luvas, mscara, gorro e pr-p quando necessrio.
Colocar os equipamentos, meios, vidraria, etc. no plano de atividade da rea de
trabalho.
Limpar todos os objetos antes de introduzi-los na cabine.
Organizar os materiais de modo que os itens limpos e contaminados no se misturem.
Minimizar os movimentos dentro da cabine.
Colocar os recipientes para descarte de material no fundo da rea de trabalho ou
lateralmente (cmaras laterais, tambm, so usadas).
Usar incinerador eltrico ou microqueimador automtico (o uso de chama do bico de
Bunhsen pode acarretar danos no filtro HEPA e interromper o fluxo de ar causando
turbulncia).
Usar pipetador automtico.
Conduzir as manipulaes no centro da rea de trabalho.
Interromper as atividades dentro da cabine enquanto equipamentos como centrfugas,
misturadores, ou outros equipamentos estiverem sendo operados.
Limpar a cabine, ao trmino do trabalho, com gaze estril embebida com lcool
etlico
ou isoproplico a 70%.
Descontaminar a cabine (a descontaminao poder ser feita com formalina fervente;
aquecimento de paraformaldedo (10,5g/m3) ou mistura de formalina, paraformaldedo
e gua com permanganato de potssio. (35 mL de formalina e 7,5 g de permanganato de

potssio).
Deixar a cabine ligada de 15 a 20 minutos antes de deslig-la.
No introduzir na cabine objetos que causem turbulncia.
No colocar na cabine materiais poluentes como madeira, papelo, papel, lpis,
borracha.
Evitar espirrar ou tossir na direo da zona estril (usar mscara).
A cabine no um depsito, evite guardar equipamentos ou quaisquer outras coisas
no
seu interior, mantendo as grelhas anteriores e posteriores desobstrudas.
No efetue movimentos rpidos ou gestos bruscos na rea de trabalho.
Evite fontes de calor no interior da cabine, utilize microqueimadores eltricos.
Emprego
de chama, s quando absolutamente necessrio.
Jamais introduzir a cabea na zona estril.
A projeo de lquidos e slidos contra o filtro deve ser evitada.
As lmpadas UV no devem ser usadas enquanto a cabine de segurana estiver sendo
utilizada. Seu uso prolongado no necessrio para uma boa esterilizao e provoca
deteriorao do material e da estrutura da cabine. As lmpadas UV devem ter controle
de contagem de tempo de uso.
Os recipientes para descarte de material devem estar sobre o cho, carrinhos ou mesas
ao lado da cabine de segurana.
Papis presos no painel de vidro ou acrlico da cabine limitar o campo de viso do
usurio e diminuir a intensidade de luz podendo causar acidentes.