Practica de Formula Roja

UNIVERSIDAD NACIONAL AUTNOMA DE MXICO
FACULTAD DE ESTUDIOS SUPERIORES ZARAGOZA
TITULO:
Frmula Roja
FECHA DE EMISIN: 16/10/2

LABORATORIO No:1502
PGINA: Pgina 1 de 10
Introduccin
Los leucocitos sanguneos (glbulos blancos) estn constituidos normalmente por
granulocitos, linfocitos y monocitos. En una extensin de sangre perifrica teida
con el mtodo de Wright se reconocen por las siguientes caractersticas
morfolgicas:
1.- Los granulocitos presentan un ncleo segmentado y con una cromatina densa
en acumulaciones. El citoplasma contiene grnulos, que son finos y de color
amarillo rosado en los granulocitos neutroflicos (neutrfilos), grandes y de tono
anaranjado brillantes en los granulocitos eosinflicos (eosinfilos), y de tamao
grande y de color negro prpura en los granulocitos basoflicos.
2.- La mayora de los linfocitos son clulas pequeas, inactivas, con un ncleo
redondo.
3.- Los monocitos son clulas grandes, con un ncleo ovalado plegado, que
posee una cromatina en forma de encaje o de hebras, y con un citoplasma gris
azulado que contiene finos grnulos azurfilos.
Los eritrocitos son las encargadas de transportar oxgeno desde los pulmones a
otros tejidos, y dixido de carbono desde los tejidos a los pulmones. La clula
madura tiene forma de disco bicncavo, semejante a una rosquilla, con su porcin
central delgada, en lugar de un agujero. Esta forma proporciona una superficie de
absorcin mayor. El dimetro de los eritrocitos es de una 7. Son elsticos y
aumentan de tamao cuando disminuye el pH de la sangre. Por consiguiente, el
eritrocito es mayor en la sangre venosa que en la arterial.
La vida media de estas clulas es de 80 a 120. Cuando su utilidad disminuye con
la edad, son destruidos por los macrfagos del sistema retculo endotelial, en
especial en el bazo.
Equipo 1: Adriana Gonzlez lvarez, Carlos Alfredo Torres Meja, Omar Morales
Barrientos, Gabriel Alberto Martnez Gmez y Uriel de Jess Solis Ayala

TITULO:
Frmula Roja

LABORATORIO No:1502
La hemoglobina contenida en los eritrocitos, tiene una funcin esencial en el

transporte de oxgeno. Se forma durante la fabricacin de glbulos rojos en la
mdula sea. Cada clula sangunea roja contiene aproximadamente 280 millones
de molculas de hemoglobina.
La anemia es una enfermedad en la que la sangre tiene menos glbulos rojos de
lo normal. Tambin se presenta anemia cuando los glbulos rojos no contienen
suficiente hemoglobina. La hemoglobina es una protena rica en hierro que le da a
la sangre el color rojo. Esta protena les permite a los glbulos rojos transportar el
oxgeno de los pulmones al resto del cuerpo.
Anemia microctica
La microcitosis representa la prueba morfolgica de la menor capacidad de los
precursores de los hemates en maduracin para elaborar hemoglobina, lo que
puede ser consecutivo a:
Cantidad insuficiente de hierro

Defectos genticos hereditarios que disminuyen la sntesis de una de las
cadenas polipeptdicas de globina

Transtornos poco frecuentes en los que se altera la funcin de las enzimas
que catalizan la sntesis del heme.
Anemia normoctica
Pueden subdividirse en:
Anemias normocticas sin hemates de forma anmala. La cual puede ser

causada por infecciones y estados inflamatorios crnicos, afecciones
malignas, hipofuncin endcrina y enfermedad renal crnica.

Anemias normocticas con poiquilocitosis importante y presencia ocasional
de macrocitos policromatfilos. Estos trastornos incluyen: leucemias,
mielofibrosis
con
metaplasia
mieloide
extramedular,
sndromes

TITULO:
Frmula Roja

LABORATORIO No:1502
mielodisplsicos con anemia rebelde y carcinomas que invaden la mdula
sea.
Anemias normocticas con numerosos macrocitos policromatfilos. La
presencia de un nmero muy elevado de macrocitos crea una firme
sospecha de hemlisis.
Anemia macroctica.
Los macrocitos aparecen como consecuencia de la omisin de un cierto nmero
de divisiones durante la maduracin de los hemates, y se encuentran en los
trastornos de la eritropoyesis en los que existe una maduracin nuclear anormal.
Estas anemias se agrupan de dos categoras que son:
Anemias macrocticas ovales y clulas en forma de lgrima.

Anemias macrocticas con predominio de macrocitos redondeados.
Objetivos
Identificar los distintos tipos de clulas sanguneas presentes en un frotis.
Realizar tcnicas hematolgicas fundamentales como: recuento, hematocrito y
cuantificacin de hemoglobina.
Obtener los valores hematolgicos fundamentales
Interpretar los valores obtenidos y su correlacin clnico patolgico.
Tincin de Frotis y conteo de clulas Sanguneas.
Material
Sangre
Cubreobjetos
Portaobjetos
Capilares
Aparato
Microscopio

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Frmula Roja

LABORATORIO No:1502
Reactivos
Alcohol metlico
Colorante diluido 1:4
Colorante de Giemsa diluido 1:9
Colorante de Wright
Mtodos.
Sangre Venosa
Se coloco una ligadura en la parte superior del brazo y se oprimi hasta ejercer
una presin para impedir el retorno venoso. La piel del rea antecubital se limpi
con una torunda con alcohol del 70% y se dej secar. Se coloco la aguja en la
camisa y se procuro que el bisel de la aguja se colocara hacia arriba para as
aplicar la venopuncin, despus se coloc y perfor un tubo vacutainer de EDTA,
se quit el torniquete tan pronto empez a fluir la sangre por el tubo, una vez
lleno, se retir este y posteriormente la aguja de la vena, por ltimo se presiono el
punto de la ven puncin con un algodn.
Mtodo de Giemsa.
Los frotis fueron secados al aire y se fijaron con alcohol metlico durante tres
minutos; posteriormente los frotis se tieron con el colorante diluido 1:4 durante 4
minutos y sin lavarse se les coloc el colorante de Giemsa recin diluido 1:9
dejndose por nueve minutos, se lav rpidamente con agua destilada tres veces
y se cubri con agua por siete minutos ms, se dejaron secar en posicin vertical y
se observ al microscopio a seco dbil.
Mtodo de Wright
El frotis se cubri con el colorante, dejndose actuar durante un minuto, despus
sobre el frotis se le aadi el mismo volumen de agua destilada (4 minutos),

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Frmula Roja

LABORATORIO No:1502
posteriormente sin mover el portaobjetos, se lav con agua destilada hasta que el
frotis tuvo un color rosado y se observ en microscopio a inmersin.
Recuento de 100 clulas sanguneas.
Una vez ya preparadas los frotis, estos se observaron en el microscopio y se
contaron 100 clulas sanguneas identificando: neutrfilos, bandas, eosinfilos,
basfilos, linfocitos y monocitos; los cuales posteriormente se compararon con los
porcentajes reportados.
Recuento de Glbulos Rojos
Material
Cmara de Neubauer
Microscopio
Pipeta de Thoma de Glbulos Rojos
Reactivos
Solucin salina isotnica
Metodologa
Se mezcl perfectamente la sangre en el tubo Vacutainer de EDTA, luego se lleno
de sangre una pipeta de Thoma para glbulos rojos hasta la marca de 0.5 y se
limpi la sangre adherida en el exterior de la pipeta. Se completo la marca de esta
hasta 101 con una solucin salina isotnica.la cual se homogenizo durante 3
minutos y se coloc sobre la cmara de Neubauer.
Se dej que el lquido penetrara lentamente en la superficie de la cmara,
dejndolo reposar 5 minutos y se observ al microscopio con el objetivo de 40X,
contndose los eritrocitos contenidos en los 5 cuadros del centro, para despus
poder calcular la cantidad de eritrocitos sobre mm 3. Donde se empleo la siguiente
frmula:

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Frmula Roja
# gr/ mm3 =
N x 200

LABORATORIO No:1502
5(0.2 mm)2 x 0.1 mm

N= Numero de glbulos rojos contados.
5= Numero de cuadros contados.
(0.2 mm)2= rea de cada cuadrado.
0.1 mm= Altura de la cmara.
200= Dilucin de la muestra.
Microhematocrito y Macrohematocrito
Material
Pipeta Pasteur larga
Tubo de Wintrobe
Tubo de ensayo
Capilares
Tubo de ensayo
Centrifugadora
Metodologa
Macrohematocrito.
1. Se extrajeron 5 mL de sangre venosa.
2. Se pas a un tubo Vacutainer que contena 0.07 mL de anticoagulante al
5%
3. Se mezcl homogneamente la sangre.
4. Utilizando una pipeta Pasteur grande, se llen de sangre el tubo de
Wintrobe exactamente a la marca de 10 mL evitando que se formaran
burbujas.

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Frmula Roja

LABORATORIO No:1502
5. Se centrifug a 3000 rpm durante 30 minutos.

6. La lectura se realiz donde empiezan los glbulos blancos haciendo la
referencia a la escala ascendente del lado derecho del tubo, cada raya
equivale al 1%. Se report porcentaje.
Microhematocrito
1. Se llenaron dos terceras pares de dos tubos capilares con sangre venosa o
capilar.
2. Se sell a la flama por el extremo ms distante a la sangre con el objetivo
de no hemolizarla, se efectu un movimiento de rotacin.
3. Una vez que estaban perfectamente selladas se colocaron con el tubo
Wintrobe pegados con adhesivo y en un tubo de ensayo se fijaron con
algodn.
4. Se centrifug a 3000 rpm durante 30 minutos.
5. Se midieron los milmetros de la longitud total de la sangre y de paquete
eritrocitario. Se report en porcentaje.
Cuantificacin de hemoglobina
Material.
Pipeta Sahli
Equipo vacutainer
Tubos con EDTA
Tubos de ensaye 13x100
Instrumentos:
Espectrofotmetro
Reactivos:
Reactivo de Drabkin
Metodologa
Se extrajo sangre venosa del brazo con un equipo vacutainer en un tubo con
EDTA, se homogenizo la muestra, en un tubo de ensaye se colocaron 5 mL de

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Frmula Roja

LABORATORIO No:1502
reactivo de Drabkin, con una pipeta de Sahli se tomo una muestra de sangre del
tubo con EDTA y se llevo hasta la marca, se limpio la sangre adherida a las
paredes externas de la pipeta con algodn, se transfiri el contenido de la pipeta
Sahli al tubo que contena 5 mL de reactivo de Drabkin, se enjuago 3 veces la
pipeta con la misma solucin del reactivo de Drabkin donde se verti la sangre, se
mezclo la disolucin de sangre y reactivo de Drabkin y se dejo reposar durante 10
minutos para permitir que se formara la cianometahemoglobina, se ley en el
espectrofotmetro GENESYS 20 (02324501) a 540 nm, calibrando a 0
absorbancia con un blanco donde solo se encontraban 5 mL de Reactivo de
Drabkin y se utilizo un estndar de cianometahemoglobina con concentracin de
13 g/100 mL y posteriormente se ley la muestra y con la absorbancia obtenida se
calculo la concentracin de hemoglobina.
Conteo total de leucocitos
Material
Pipeta de Thoma para Leucocitos
Cmara de Neubauer
Metodologa
Se tom una alcuota con la pipeta de Thoma de sangre venosa hasta la marca de
0.5 obtenida con EDTA limpiando la punta de la pipeta antes de proseguir.
Se aspir solucin de Turk hasta la marca de 11 y se agit.
Se coloc una gota en la cmara de Neubauer y se dej sedimentar los leucocitos.
Se realiz el conteo de leucocitos de los cuatro cuadros grandes.
Se realiz el clculo de leucocitos totales a partir del conteo realizado y de
acuerdo a la dilucin.
Anlisis de Resultados

TITULO:
Frmula Roja

LABORATORIO No:1502
En la tabla 1 se pueden observar los resultados obtenidos en Frmula Roja de los

8 equipos, se percat que algunos equipos no realizaron de manera adecuada los
conteos de eritrocitos y la cuantificacin de hemoglobina, por lo que se vieron
afectados los clculos para los ndices eritrocticos; se podra indicar que el equipo
1 presenta valores ligeramente bajos en sus ndices eritrocticos, en el equipo 2 se
presentan niveles bajos de hemoglobina y su VCM es bastante alto, en el equipo 3
sus resultados son ligeramente bajos, en el equipo 4 se presentan bajos los
valores de VCM y el de HCM lo que podra indicar el padecimiento de una anemia
de tipo microctica hipocrmica, en el equipo 5 por las valores reportados en sus
ndices eritrocitarios indicaran la presencia de una anemia macroctica
hipercrmica, cabe mencionar que su conteo de eritrocitos es demasiado bajo; en
el equipo 6 se presenta un conteo bajo de eritrocitos y un VCM alto; en el equipo
7 todos los datos reportados son muy bajos excepto el VCM que es muy alto y en
el equipo 8 la Hemoglobina, el HCM y la CMHC son muy bajos.
En la tabla 2 se observa la cuenta diferencial de leucocitos de todos los equipos
donde todos ellos estuvieron dentro de los valores normales, pero en el equipo 3
se observa un elevado nmero de Eosinfilos, lo que podra indicar algn tipo de
alergia y en la cuenta de leucocitos la mayora de los equipos estuvieron dentro
del rango y el resto de los equipos estuvieron ligeramente elevados sus valores.
Conclusin
Bibliografia
National Heart, Lung, and Blood Institute disponible en www.nhlbi.nih.gov visto el
15 de octubre de 2013.
Rapaport, I. Samuel. Introduccin a la Hematologa. Ed. Salvata. 2 edicin,
Barcelona Espaa; 1998. 437-487.

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La hemoglobina contenida en los eritrocitos, tiene una funcin esencial en el

Cantidad insuficiente de hierro

cadenas polipeptdicas de globina

Anemias normocticas sin hemates de forma anmala. La cual puede ser

malignas, hipofuncin endcrina y enfermedad renal crnica.

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mielodisplsicos con anemia rebelde y carcinomas que invaden la mdula

Anemias macrocticas ovales y clulas en forma de lgrima.

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5(0.2 mm)2 x 0.1 mm

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En la tabla 1 se pueden observar los resultados obtenidos en Frmula Roja de los

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