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INSTITUTO POLITECNICO NACIONAL

ESCUELA NACIONAL DE CIENCIAS BIOLOGICAS


Prctica 7: Obtencin de glucgeno a partir de hgado de una rata
Integrantes: Franco Hernandez Erika Jayet
Olivar Jorge Luis
INTRODUCCIN
El glucgeno es el principal polisacrido
de reserva de las clulas animales y al
igual que la amilopectina es un
polisacrido ramificado de la D-glucosa
con enlaces alfa-1,4 y alfa-1,6 en los
puntos de ramificacin, pero es mucho
ms ramificado y compacto que sta.
El glucgeno es abundante en el
hgado, donde puede alcanzar hasta el
7% del peso hmedo, pero tambin se
le halla en msculo esqueltico.
En las clulas hepticas el glucgeno se
encuentra almacenado en grnulos
grandes que contienen adems las
enzimas responsables de su sntesis y
degradacin.
El glucgeno puede hidrolizarse por la
accin de alfa-amilasa que se encuentra
en la saliva y jugo pancretico, las
cuales rompen los enlaces alfa-1,4 en
las ramas exteriores del glucgeno para
dar glucosa, una pequea cantidad de
maltosa y un ncleo resistente llamado
dextrina limite.
OBJETIVOS
1. Llevar a cabo una hidrolisis cida y
una enzimtica al glucgeno aislado.
2. Caracterizar el glucgeno aislado y
comprobar su pureza.

Grupo: 4QM2
Seccin: 1

RESULTADOS
Tabla
1.
Caracterizacin
glucogeno.
Prueba
Molish

del

Observacin
Anillo Violeta en el
fondo
Azul
Negativo

Biuret
Ninhidri
na
Lugol

Rojizo

Tabla 2. Caracterizacin de la
hidrolisis del glicgeno mediante
pruebas para carbohidratos.
Hidrolisi
s

Acida
1
N

Fehling

Lugol
Seliwan
of

2
N
+
+
+
+

T
4N

Enzim
tica
A

Bla
nco
Agu
a

++
+
-

++

++

DISCUSIN
Prueba de Molish: Dio a una prueba
positiva tras la formacin de un furfural,
pues es un carbohidrato el cual
condenso dando un producto violeta.
Biuret: Resulto una prueba negativa, lo
que nos indica que el glucgeno
obtenido est libre de protenas o
pptidos.
Ninhidrina: Esta prueba es negativo
dado que el glucgeno no presenta
grupos amino en su estructura como las
protenas o aminocidos.
Lugol: Se present una coloracin cafnaranja para la solucin de glucgeno
sin hidrolizar; arrojando una prueba
positiva e indicando que es un
polisacrido ramificado. En tanto dicha

prueba pero con solucin de glucgeno


hidrolizado con cido el resultado fue
negativo, pero con el tubo testigo y los
dos con enzima el resultado fue
positivo, demostrando que la actividad
enzimtica no es suficiente para
degradar completamente la molcula
de glucogeno.
Fehling: Esta reaccin se lleva a cabo
en un medio alcalino por lo que fue
necesaria la adicin de NaOH al 40%
para la neutralizacin del HCl utilizado
en la hidrolisis del glucgeno. En esta
prueba nos dio negativo para los tubos
4, 5 y 6, esto indica que la hidrolisis
enzimtica no es suficiente para
generar
molculas
con
extremos
reductores.
En tanto para los tubos 1, 2 y 3
hidrolizados con HCl 1N, 2N, y 4N
respectivamente nos dio positivo pues
la hidrolisis acida rompe enlaces al azar,
lo que conlleva a la obtencin de
algunos oligosacridos como maltosa,
maltotriosa (unidades estructurales del
glucgeno) y con la conversin final de
estos a glucosa. Y como sabemos la
glucosa es una aldosa con poder
reductor por lo que la prueba resulta
positiva.
Cuanto ms acida era la
hidrolisis
mayor
obtencin
y
concentracin de azcar reductor
podamos encontrar, por lo que la
coloracin era ms intensa.
Seliwanof: Esta prueba es una reaccin
para diferenciar cetosas de aldosas;
aunque ambas dan la reaccin las
cetosasas la dan rpido y las aldosas
lento. En los resultados obtuvimos una
prueba negativa para el tubo con
hidrolisis acida con HCl 1N, esto podra
ser que no fue suficiente para obtener
cetosas que nos permitieran observar el
cambio de coloracin rpido y por lo
tanto una prueba positiva, lo mismo
sucedi para el tubo 4 el cual no estaba
hidrolizado as que no haba unidades
de cetosas que permitieran dar la
prueba positiva. En tanto para los tubos
2,3, con hidrolisis acida fue positiva, lo
que nos indica la presencia de cetosas,

pero mayormente de aldosas pues la


coloracin se obtuvo a los 12 minutos
de calentamiento lo que consideramos
un tiempo prolongado y tardado. Para
los tubos 5 y 6 los cuales estaban
hidrolizados enzimticamente, arrojaron
una prueba positiva aunque menos
intensa que la obtenida en la hidrolisis
acida;
pues
en
las
unidades
estructurales del glucgeno obtenidas
en la hidrolisis enzimtica podra ser la
glucosa,
maltosa,
dextrina
y
maltotriosa, las cuales son aldosas y de
este modo la coloracin tardo ms en
aparecer.

CONCLUSIONES
De acuerdo a los resultados
obtenidos podemos decir que el
glucgeno es un polisacrido
muy ramificado.
La
hidrolisis
enzimtica
es
especfica y la cida inespecfica.
El hgado almacena glucogeno.
El glucogeno dio positiva para la
prueba de molish , negativa para
la prueba de biuret y ninhidrina
y un color rojo para el lugol
BIBLIOGRAFA

Berg, Bioqumica (2008), 4ta.


Edicin, Edit. Revert.
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Orgnica
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ed.).
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Editorial
Revert
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