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LICENCIATURA EN CIENCIA Y

TECNOLOGA DE LOS ALIMENTOS


QUMICA DE LOS ALIMENTOS

ANLISIS DE GRASAS EN
LOS ALIMENTOS

Mtodos de anlisis de grasas


en los alimentos
La FAO y la OMS recomendaron que se
tuviera amplio acceso a los datos
apropiados de composicin de alimentos
referidos a las grasas y que en los anlisis
sobre el contenido de cidos grasos de los
alimentos y en la elaboracin de bases de
d
datos
d nutrientes
de
i
se emplearan
l
mtodos
d
normalizados y materiales de referencia.

En el sistema proximal de anlisis, las


2014
Dra. Roxana Verdini
rverdini@fbioyf.unr.edu.ar

Mtodos de anlisis de grasas


en los alimentos
El material extrado contiene una serie
de clases diferentes de sustancias.

A efectos nutricionales, la medicin de


las grasas totales tiene un valor limitado.

No obstante, se sigue notificando con


frecuencia y se mantiene en muchos
requisitos de etiquetado de los alimentos y
en la reglamentacin sobre la composicin
de los productos alimenticios.

grasas
g
se miden como la fraccin del
alimento que es soluble en disolventes de
lpidos.

Mtodos de anlisis de grasas


en los alimentos

Mtodos p
para determinar
materia grasa total
Mtodo

Limitaciones

Ventajas y aplicaciones

Extraccin con un solvente


Continuo (BUTT)

Solventes inflamables Debe trabajarse sobre muestra


seca o de muy baja humedad, menos de 8%.

Discontinuo (SOXHLET)
Eter etlico, ter de petroleo, alcoholes
Automtico (FOSS-LET FAT ANALYZER) solvente
Tetracloroetileno

Extraccin incompleta, usa alta temperatura, no


puede usarse para estudio de cidos grasos. No se
puede aplicar a alimentos sometidos a algn
tratamiento trmico ni a leche y derivados lcteos.

Semillas oleaginosas, cubos de caldo saborizantes.


Algunas sopas deshidratadas.
Algunos tipos
Al
i
de
d derivados
d i d crneos,

frutas
f
y verduras,
d
algunos productos azucarados.
Derivados crneos

E t
Extraccin
i con mezcla
l de
d solventes
l
t
Hidrlisis acida previa a la extraccin con solventes:
Eter etlico, ter de petrleo

Hidrlisis alcalina previa a la extraccin con


solventes: Eter etlico, ter de petrleo.
Mtodo de Folch, Bligh y Dyer Cloroformo-Metanol

No se recomienda ocupar el extracto lipdico en el


estudio de cidos grasos aunque algunos autores lo
emplean. No recomendable en alimentos ricos en
azcares, productos lcteos.
Equipo especial con tubos y centrifuga adecuada.
Alternativa: usar embudos de decantacin.

Equipo especial

Rpido. Se us mucho para leche y derivados lcteos.

Dispersin de la 1uz. Milkotester.

Equipo especial

Rpido. Leche cruda

Near Infrared Reflectance (NIR)

Equipo especial de alto costo.


q
calibracin
Requiere

Mtodos volumtricos

Otros mtodos

Equipo especial de alto costo. Requiere calibracin

diversos
MTODOS
DE
EXTRACCIN
di
disponibles
ibl
permiten
it
determinar como grasa todo el material
soluble en el solvente que se usa para la
extraccin,
adems
de
la
grasa
propiamente dicha,
dicha incluyendo:

esteroles, cidos grasos libres,


pigmentos, carotenoides, clorofila,
etc.

Mtodo de eleccin para leche y productos lcteos.

Extraccin en frio, aplicable prcticamente a todo


alimento. El extracto se puede usar para determinacin
de cidos grasos,esteroles, etc. Son mtodos rpidos.

NMR

Los

Mtodo rpido, de amplia aplicacin en diversos tipos


de alimentos. Trabaja sobre muestra fresca. Debe
aplicarse a todo alimento sometido a algun tipo de
procesamiento o tratamiento trmico.

Cierto costo en solventes. Re-extraccin para


purificacin, debe conocerse el % de humedad Debe
conocerse el % de humedad del del alimento para
ajustarla al 80%.

Carbonizacin selectiva con H2SO4 concentrado

Mtodos de extraccin

Por esta razn, los resultados de ste


anlisis se informan frecuentemente como
GRASA CRUDA o EXTRACTO ETREO.

Cereales. Leche.
Semillas oleaginosas. Mtodo muy rpido.

Fuente: http://www.fao.org/docrep/010/ah833s/ah833s16.htm

Mtodos de extraccin
Los MTODOS DE EXTRACCIN pueden
agruparse en dos clases:

MTODOS DIRECTOS : procedimientos


de remocin de las g
grasas y sustancias
solubles en ellas a partir del material
desecado, mediante el uso de un solvente
anhidro.

Mtodos directos de extraccin


REQUISITOS

El

material a analizar debe ser


totalmente desecado en estufa
y el
solvente a usar debe ser anhidro:

para impedir que la presencia de

MTODOS CON ATAQUE PREVIO: se

agua posibilite la extraccin de material


hidrosoluble que sera determinado
junto con la grasa.

realiza un ataque cido o alcalino previo a


la extraccin.

Frecuentemente esta determinacin se


lleva a cabo a continuacin de humedad,
sobre
b la
l misma
i
muestra desecada.
d
d

Mtodos directos de extraccin

Mtodos directos de extraccin

PRESECADO

PRESECADO

Los lpidos no pueden ser extrados con

No

efectividad de los alimentos hmedos ya


que el solvente no p
q
puede p
penetrar
fcilmente a los tejidos hmedos del
alimento.

secar las muestras a altas


temperaturas ya que algunos lpidos se
ligan
g
a p
protenas y a carbohidratos,, p
por
consiguiente no se pueden extraer
fcilmente con solventes orgnicos.
g

El ter es higroscpico, se satura con el

El secado en estufa de vaco a baja

agua y se vuelve ineficiente para la


extraccin de las grasas.

temperatura
o
la
liofilizacin
son
recomendables ya que aumentan la
superficie de rea de la muestra y
proporciona una mejor extraccin de
l id
lpidos.

Mtodos directos de extraccin

Mtodos directos de extraccin

PRESECADO

PRESECADO

El secado en estufa a 105


105C
C tambin es

La eficiencia de la extraccin de los

adecuado.

El secado
d hace
h
que la
l muestra
t sea ms

lpidos de los alimentos secos depende del


tamao de la partcula: una molienda
eficiente
fi i t es importante.
i
t t

fcil de moler para una mejor extraccin.

Rompe las emulsiones aceite-agua para

EXTRACCIN

que la grasa se disuelva fcilmente en el


solvente orgnico.

La extraccin puede hacerse en dos

Ayuda
A d a que se libere
lib
l grasa de
la
d los
l
tejidos de los alimentos.

formas:

CONTINUA
INTERMITENTE: extractor de Soxhlet.

Mtodos directos de extraccin

Mtodos directos de extraccin

EXTRACCIN CONTINUA

EXTRACCIN CONTINUA

La muestra se coloca en un dedal

Proporcionan una extraccin eficiente y

poroso de extraccin hecho de cermica.

rpida.

Se aade el solvente al frasco de

Pueden ocasionar canalizaciones en la

ebullicin.

muestra y
y,
incompleta.

Se produce una extraccin continua

por

tanto

una

extraccin

debido al goteo del disolvente que se


condensa sobre la muestra contenida en el
dedal, alrededor del cual pasa el vapor
caliente del disolvente.

Mtodos directos de extraccin

Mtodos directos de extraccin

EXTRACCIN CONTINUA Equipo tipo


BUTT

EXTRACCIN CONTINUA Equipo tipo


BUTT

Mtodos directos de extraccin


EXTRACCIN INTERMITENTE SOXHLET

Mtodos directos de extraccin


SOXHLET

En el aparato de extraccin intermitente


el tubo de extraccin est equipado con un
sifn.

Cada 5 o 10 minutos, el solvente ms la


grasa extrada es arrastrado y se vuelca en
el baln inferior.

La muestra estar as en contacto con


nuevo solvente (sin grasa) cada pocos
minutos.

Mtodos directos de extraccin

Mtodos directos de extraccin

EXTRACCIN INTERMITENTE SOXHLET

EXTRACCIN INTERMITENTE SOXHLET

Se pesa el baln presecado.

Se seca baln con la grasa extrada en

Se coloca el solvente en baln.

un horno de secado por aire a 100c por 30


minutos.

Se ensambla el baln con el dispositivo

Se enfra el baln en un desecador.

de Soxhlet y el condensador.

Se extrae la grasa de la muestra a una


velocidad de condensacin de 5 6 gotas
por segundo calentando el solvente en el
baln durante el tiempo estipulado.
estipulado

Se pesa el baln con el resto de la


muestra.

Mtodos directos de extraccin

SOXHLET

SOXHLET

www.cenunez.com.ar
http://www.biol.unlp.edu.ar/bromatologia/tp.htm

Mtodos directos de extraccin


SOXHLET

Mtodos directos de extraccin


SOXHLET

Mtodos directos de extraccin

Mtodos directos de extraccin

EXTRACCIN INTERMITENTE SOXHLET

EXTRACCIN INTERMITENTE SOXHLET

Alimentos en que se emplea: Cereales y

Errores de la determinacin:

productos derivados, carnes, vegetales y


nueces.

Expresin de resultados: se puede


expresar en base seca o en base hmeda:

para expresarlo en base hmeda


(muestra original) se debe tener en
cuenta el contenido de humedad
determinado previamente.

extraccin de materiales no lipdicos


por disolucin
di l i de
d estos
t
en ell agua
proveniente
del
alimento
no
d hid t d o del
deshidratado
d l solvente
l
t no anhidro.
hid

extraccin
solventes,
adecuados.

incompleta: uso
aparatos o tiempos

de
no

descomposicin u oxidacin (por


calor
l y aire)
i ) del
d l material
t i l en extraccin.
t
i

Mtodos directos de extraccin


EQUIPOS SEMIAUTOMTICOS

EQUIPOS SEMIAUTOMTICOS

La

extraccin viene realizada de


acuerdo al mtodo de Soxhlet mejorado
segn Randall.

Operan en dos fases mas una de


recuperacin del
permiten:

solvente destilado y

reducir

los tiempos de extraccin


(solvente caliente),

salvaguardar
atmosfrica,

la

Mtodos directos de extraccin

contaminacin

reducir el costo de los anlisis.

Mtodos directos de extraccin


EQUIPOS SEMIAUTOMTICOS

Mtodos con ataque previo


Cundo se usan?

Se

usan
cuando
los
mtodos
gravimtricos por extraccin seca no son
aconsejables.
j

Esto puede deberse a la presencia de


protenas y elevadas cantidades de
glcidos puede impedir la extraccin total
de la grasa presente en algunos alimentos,
especialmente productos lcteos.

En alimentos con elevado contenido


acuoso.

Mtodos con ataque previo


FUNDAMENTO

Los slidos que rodean a los glbulos


de grasa de algunos alimentos, son
destruidos con agentes
g
grasos o alcalinos
g
para permitir la coalescencia y posterior

medida volumtrica de la grasa


(mtodos butiromtricos),

la extraccin por solventes mediante


tcnicas gravimtricas.

Mtodos con ataque previo


Mtodos gravimtricos por extraccin
hmeda:

Mtodo por hidrlisis alcalina (RoseG ttli b mtodo


Gottlieb,
t d de
d referencia)
f
i )

Mtodo

por
hidrlisis
cida:
(Schmidt-Sondzynski modificado).

Mtodo por hidrlisis combinada:


alcalina y cida.

Mtodos con ataque previo

Mtodos con ataque previo

MTODO DE ROSE
ROSE-GOTTLIEB
GOTTLIEB

MTODO DE ROSE
ROSE-GOTTLIEB
GOTTLIEB

En

Los volmenes etreos conteniendo la

este
mtodo,
una
cantidad
exactamente medida o pesada de la
muestra se trata con alcohol etlico e
hid id
hidrxido
d
de
amonio
i
y se extrae
t
posteriormente la grasa por agitacin con
t etlico
ter
tli
y ter
t de
d petrleo,
t l
en tubo
t b de
d
Rrig o frasco de Mojonnier.

grasa disuelta se vuelcan o sifonan a un


baln previamente tarado.

Se hacen cuatro o cinco extracciones y


luego se evaporan los solventes y se
determina la grasa extrada por pesada.

El alcohol etlico, soluble en agua y ter,


permite que este ltimo entre en contacto
ms
ntimo
ti
con la
l grasa.

Mtodos con ataque previo

Mtodos con ataque previo

MTODO DE ROSE
ROSE-GOTTLIEB
GOTTLIEB

MTODO DE HIDRLISIS CIDA

En los productos lcteos permite

Este

adems la precipitacin de la casena en


forma muy finamente dividida y por
consiguiente
i i t la
l rpida
id disolucin
di l i de
d sta
t
en el hidrxido de amonio.

El ter de petrleo reduce la solubilidad


del agua en el ter etlico y previene la
extraccin por el ter de materiales
hidrosolubles.

Alimentos en que se emplea: leche,


lleche
h
condensada,
d
d
l h
leche
en
helados, dulce de leche, crema.

polvo,
l

mtodo
se
diferencia
fundamentalmente del anterior en que el
ataque previo se realiza con cido
clorhdrico,
l hd i
t bi en medio
tambin
di alcohlico.
l hli

Se calienta la mezcla y la protena se


disuelve en el medio cido y la porcin
lipdica se separa en la parte superior.

Se prosigue la determinacin del mismo


modo
d que en ell mtodo
t d por hidrlisis
hid li i
alcalina.

Mtodos con ataque previo

Mtodos con ataque previo

MTODO DE HIDRLISIS CIDA

MTODO DE HIDRLISIS COMBINADA

La hidrlisis cida es menos aconsejable

Se realiza la digestin en primer lugar

que el mtodo de Rose-Gottlieb si el


material contiene una proporcin elevada
d azcar.
de

con hidrxido de amonio y despus de


neutralizar, con cido clorhdrico.

Alimentos en que se emplea: pan,

mencionado y la determinacin de la grasa


es tambin gravimtrica.

pastas,
productos
de
panificacin,
productos de la pesca, huevos, etc.

Mtodos con ataque previo


UNIDADES DE HIDRLISIS

El resto del procedimiento es igual al ya

Mtodos con ataque previo


UNIDADES DE HIDRLISIS

La

unidad de hidrlisis permite


hidrolizar
varias
muestras
simultneamente.

La hidrlisis se puede realizar en


ambiente cido o en ambiente bsico a
temperatura controlada.

La muestra hidrolizada se filtra y se lava


con agua desionizada para eliminar
cualquier
l i
rastro
t
d cido
de
id clorhdrico;
l hd i
se
somete despus a la extraccin por
solvente.
l
t

Mtodos con ataque previo


UNIDADES DE HIDRLISIS

Mtodos con ataque previo


UNIDADES DE HIDRLISIS

Ver video en http://www.youtube.com/watch?v=jkxD5Tvt9Is


//
/
?

Mtodos con ataque previo


MTODO DE GERBER - VOLUMTRICO

Consiste en disolver la fraccin proteica


por medio de un cido para dejar la materia
grasa en libertad y p
g
poder reunirla p
por
centrifugacin.

Se utiliza H2SO4 de densidad 1,82 que


rompe el glbulo graso disolviendo la
casena y alcohol amlico que es ayuda a
romper la emulsin, antiespumgeno y
previene la carbonizacin de la materia
orgnica

Mtodos con ataque previo


MTODO DE GERBER

Mtodos con ataque previo


Tubo

q
que
comunica
por un extremo con
un vstago aplanado,
graduado que termina
en
una
pequea
cmara.

Un

extremo con una


boca que se cierra
mediante un tapn de
goma
que
puede
enroscarse ms o
menos
profundamente.

Mtodos con ataque previo


MTODO DE GERBER

Alimentos en que se emplean: leche,


leche descremada, cremas, etc.

El empleo de estos mtodos para el


anlisis de cremas requiere del uso de
butirmetros especialmente calibrados al
efecto.

Cada

graduacin
gruesa corresponde a
1 % de grasa.

MTODO INFRARROJO DE
DETERMINACIN DE GRASAS
La

espectroscopia
en
Infrarrojo
Cercano
o
NIR
(Near
Infrared
Spectroscopy)
presenta
un
enorme
potencial para la caracterizacin de una
gran variedad de productos de forma
instantnea.
instantnea

La base de esta tecnologa reside en la


creacin de un modelo matemtico que
relacione los valores espectrales (datos de
absorbancia NIR) con los parmetros
cuantitativos y cualitativos de inters.

NIR

Algunas clases de lpidos muestran


bandas fuertes de absorcin de grupos
carbonilo en la regin infrarroja.

Se ha utilizado la NIR para las legumbres


y para otros productos alimenticios.
La

utilizacin efectiva de este mtodo


depende de una amplia calibracin frente a
matrices comparables utilizando otro mtodo
aprobado.
p

La

tcnica se aplica casi siempre en


anlisis ordinarios de nmeros elevados de
muestras muy semejantes, para alimentos
productos lcteos.
como los cereales y los p

NIR

NIR

Una vez desarrollado este modelo, se

La espectroscopia de infrarrojo cercano

pueden realizar estimaciones de estos


parmetros a partir de sus espectros NIR.

(NIR) abarca la regin correspondiente


entre 800 y 2500nm.

Es una tcnica, muy extendida en


industrias relacionadas con la alimentacin
animal, farmacia, qumica, textiles, etc,

El mtodo est basado en la absorcin


de energa infrarroja por la grasa a una
l
longitud
i d de
d onda.
d

El espectro
p
NIR es el resultado de la
absorcin de la luz por parte de las
molculas orgnicas.
g

La radiacin se deduce midiendo la


reflejada como (1/R).

Mientras ms absorcin de energa


g haya
y
a mayor ser el contenido de grasa de la
muestra.

NIR

NIR

La espectroscopia de infrarrojo cercano

La radiacin se deduce midiendo la

(NIR) abarca la regin correspondiente


entre 800 y 2500nm.

reflejada como (1/R).

El espectro
p
NIR es el resultado de la
absorcin de la luz por parte de las
molculas orgnicas.
g

NIR
La radiacin se deduce midiendo la
reflejada como (1/R).

NIR
Ventajas:
Rapidez de anlisis, que permite
obtener resultados en minutos.

Tcnica

no
destructiva,
los
productos analizados no se alteran.

Anlisis

multiproducto
y
multiparmetro: se puede analizar
numerosos parmetros en una gran
variedad de productos.

Equipo NIR para alimentos

MTODO INFRARROJO DE
DETERMINACIN DE GRASAS
Es una solucin rentable, flexible y fcil
de usar para el anlisis de rutina de la
grasa.
Se puede estandarizar el contenido en
grasa de la carne de los lotes y evitar un
uso excesivo de materias primas que
resultan caras.

Al mismo tiempo, se pueden controlar


MeatScan ha sido oficialmente aprobado por las
autoridades australianas como un mtodo de anlisis
para medir el contenido de grasa de la carne en Australia.
Australia
Ver video en:
https://www.youtube.com/watch?v=MT6pqQjvoAc

los suministros analizando el contenido en


grasa de las materias primas entrantes.

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