Programa Global para la Infraestructura Biolgica y Biomdica

PROGRAMA GLOBAL PARA LA

INFRAESTRUCTURA DE LA INVESTIGACION
BIOLOGICA Y BIOMEDICA EN MANEJO DE
ANIMALES DE LABORATORIO
Principios bsicos para el manejo de
Animales de Laboratorio

AFIFE MRAD DE OSORIO

CARMEN ALICIA CARDOZO DE MARTINEZ

UNIVERSIDAD NACIONAL DE COLOMBIA

INSTITUTO DE BIOTECNOLOGIA
Septiembre de 1.999

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La
primera
condicin
del
cientfico
que
trabaja
con
animales
de
laboratorio es el
respeto por la
vida, el dolor o el
sufrimiento
a
que
stos
pueden
ser
sometidos en los

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trabajos bajo su
responsabilidad.

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INTRODUCCIN
La docencia e investigacin biolgica y
biomdica, y el desarrollo, produccin y control
de medicamentos, alimentos y otros insumos
importantes para la salud humana y animal,
requieren la utilizacin de animales de
laboratorio.
El diseo de los experimentos que utilizan
animales de laboratorio exige la definicin
detallada de las caractersticas genticas y
ambientales, o sea del dramatipo, de los
mismos.
Solo as, utilizando animales
definidos y estandarizados se obtendrn
resultados reproducibles.
Mantener animales en condiciones sofisticadas
durante los experimentos puede ser intil si
los mismos fueron previamente sometidos a
agentes infecciosos, a nutricin inadecuada,
estuvieron en contacto con agentes qumicos
perjudiciales o albergados en condiciones que
alteraron
sus
caractersticas
comportamentales,
fisiolgicas
y
hasta
anatmicas. Todo lo que suceda desde el
nacimiento hasta la muerte del animal debe
ser preocupacin del investigador, pues a todo
lo largo de este intervalo pueden introducirse
variables que afecten adversamente los
resultados experimentales.
En los pases desarrollados se cuenta con
empresas, varias de ellas transnacionales, que
solo se dedican a la produccin de animales de
laboratorio y tienen instalaciones altamente
tecnificadas y personal cientfico y tcnico
multidisciplinario especialmente calificado en
centros especializados.
Esto garantiza la
entrega de animales de calidad gentica,
ambiental y sanitaria adecuada a las
necesidades experimentales especficas.

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En nuestro medio la Ciencia y la Tecnologa de

animales de laboratorio an est en estado
embrionario.
Existe
un
nmero
muy
limitado
de
profesionales y tcnicos especializados en los
diferentes aspectos de la cra y el
mantenimiento de los animales. Los usuarios
no estn,
en la mayora de los casos,
preparados para definir la calidad del animal
que necesitan y generalmente desconocen la
historia previa de los que usan y las
diferencias de los bioterios que los originaron.
Las investigaciones bsicas y aplicadas y los
trabajos de manufactura y control de
medicamentos y vacunas que utilizan animales
de laboratorio deberan ajustarse a las normas
internacionales de Buenas Prcticas de
Manufactura (GMP) y de Laboratorio (GLP).
Adems, las revistas cientficas internacionales
exigen que los investigadores firmen un
documento donde se garantice que las
experiencias han sido efectuadas respetando
las normas internacionales existentes, por
ejemplo, La Directiva 86/609 del Consejo de
Europa y la Gua para el Cuidado y Uso de
Animales de Laboratorio: NIH y NRC, USA. La
firma de ste documento significa aseverar
que los trabajos han sido previamente
aprobados por Comits de Etica Institucionales
y que todo el personal que interviene en el
trabajo en relacin con los animales de
laboratorio, ha aprobado previamente un curso
de capacitacin el tema.
Con el objetivo de difundir, entre los cientficos
y tecnlogos relacionados con las ciencias
biolgicas y biomdicas, los conceptos y
metodologas modernas referentes al tema se

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elabor la presente CARTILLA que recopila

filosofa, directrices y normativa actuales para
ser tenidas en cuenta en el momento en que
se va a tener contacto o manejo de animales
de laboratorio.

GENTICA Y REPRODUCCIN
Es esencial una investigacin de las
caractersticas genticas para seleccionar los
animales, a fin de elegir los portadores de
caracteres consistentes con los objetivos
experimentales.
Deben considerarse las
diferencias conocidas entre especies, colonias
o cepas que incluyen: expectativas de vida,
anatoma,
tamao
corporal,
sistemas
fisiolgicos y metablicos, requerimientos
nutricionales, susceptibilidad a enfermedades,
caractersticas
comportamentales,
susceptibilidad a xenobiticos, etc. Es muy
importante conocer la historia gentica
completa de los animales antes de comenzar a
trabajar.
Existen
publicaciones
internacionalmente
reconocidas que permiten conocer las cepas,
colonias y mutantes existentes y localizar
rapidamente las instituciones que las poseen
en determinado estado sanitario.
AMBIENTE
Existe abundante evidencia de que las
condiciones ambientales en que se cran y
experimentan
los
animales
influye
decisivamente en las respuestas a los
diferentes tratamientos.
Si se requieren
repuestas estandarizadas las condiciones en

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que se mantienen los animales deben ser fijas

y comparables en todos los laboratorios del
mundo.
En general, los cambios en el ambiente
externo son registrados por los receptores
externos delos animales que envan la
informacin al sistema nervioso central el que,
a su vez, informar al sistema neuroendocrino
para
restaurar
cualquier
desbalance
homeosttico. Esto producir cambios en el
modelo
animal
y
con
ello
cambios,
reconocibles
o
no,
en
las
repuestas
ocasionadas por el tratamiento experimental.

Estas alteraciones pueden traducirse en una

modificacin del tipo de respuesta o en un
aumento de la variabilidad de los resultados
entre o dentro de los laboratorios.
Los principales factores ambientales que
afectan a los animales pueden clasificarse en:

Climticos
(temperatura,
humedad,
ventilacin, etc.)
Fisicoqumicos
(iluminacin;
ruido;
presencia de contaminantes, anestsicos y
sanitizantes; composicin del aire y cama,
etc.)
Habitacionales (forma, tamao, tipo y
poblacin de las jaulas, etc)
Nutricionales (dietas, agua y esquema de
administracin).
Microorganismos y parsitos (con especial
referencia a los patgenos especficos de
cada especie).
Situacin experimental.

TICA Y ALTERNATIVAS
ETICA

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Este tema compete a todos los individuos

pero, con mayor razn, a los involucrados en la
investigacin biolgica; desde el ms simple
tcnico auxiliar que est a cargo del cuidado
de los animales, hasta el ms alto directivo de
la institucin productora o usuaria de los
mismos. La primera condicin del cientfico
que trabaja con animales de laboratorio es el
respeto por la vida, el dolor o el sufrimiento a
que stos pueden ser sometidos en los
trabajos bajo su responsabilidad.

Toma de muestra de sangre

Examen rectal
Toma de muestra de flujo vaginal
Administracin forzada de sustancias
inocuas

Experimentos terminales bajo anestesia

Vacunas sin coadyuvante
Toma de radiografas en animales no
anestesiados

Molestias moderadas: Se consideran como

molestias
moderadas
la
utilizacin
de
cualquiera de los siguientes procedimientos:

Toma frecuente de muestras de sangre

Pruebas de pirgenos
Cateterizacin y canulacin
Uso de yesos
Inmovilizacin
Cesrea
Recuperacin de anestesia general
Inmunizacin sin adyuvantes completos
Transplantes de piel

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Molestias severas: Se consideran como

molestias severas la utilizacin de cualquiera
de los siguientes procedimientos:

Extraccin del fludo asctico

Sangra total sin anestesia previa
Induccin de defectos genticos
Deprivacin prolongada de comida, agua o
sueo
Pruebas de dosis letal 50 y concentracin
letal 50
Inmovilizacin con relajantes sin sedacin
Induccin de infecciones experimentales
Pruebas
de
carcinogenicidad
con
produccin de tumores
Induccin de convulsiones

PRINCIPIOS ETICOS INTERNACIONALES

PARA INVESTIGACION BIOMEDICA CON
ANIMALES CIOM
El avance del conocimiento, la proteccin
de la salud y/o el bienestar de los hombres
y los animales requiere la experimentacin
con animales vivos.
Siempre que sea apropiado usar mtodos
alternativos
Realizar experimentacin en animales
despus de estudiar su importancia para la
salud humana y animal y para el avance
del conocimiento biolgico.
Seleccionar animales de especie y calidad
apropiadas y usar el mnimo nmero

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requerido
para
obtener
resultados
cientficamente vlidos.
Tratar a los animales como seres sensibles
y considerar imperativo tico el cuidado y
uso adecuado, evitando o minimizando el
malestar, angustia y dolor.
Presumir siempre que los procedimientos
dolorosos
para
el
hombre
tambin
causarn
dolor
en
otras
especies
vertebradas.
Procedimientos que pueden causar dolor o
angustia momentnea o mnima deben ser
realizados con sedacin, analgesia o
anestesia. No realizar procedimientos
quirrgicos o dolorosos en animales no
anestesiados o paralizados con agentes
qumicos.
Cuando se requiere apartarse del principio
anterior la decisin debe ser tomada por
un Comit Revisor convenientemente
constitudo. Estas excepciones no deben
ser hechas solo para demostracin o
enseanza.
Al final de la experiencia, o en el momento
apropiado, los animales que puedan sufrir
dolor crnico o severo, angustia, malestar
o invalidez, que no puedan ser aliviados,
deben ser sacrificados sin dolor.

Los animales mantenidos con fines

biomdicos, deben tener las mejores
condiciones
de
vida
posibles,
de
preferencia con supervisin de veterinarios
con experiencia en ciencia de animales de
laboratorio.

El director de la institucin correspondiente es

responsable por la calificacin de los
investigadores y dems personal, para realizar

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los trabajos requeridos, debiendo otorgar

adecuadas oportunidades de entrenamiento.
ALTERNATIVAS
Desde que el concepto de Alternativas fue
introducido recibi nombres variados segn
quienes lo emplearon. Algunos lo interpretan
como un programa para la eliminar totalmente
al animal experimenta.
El concepto ms
generalizado en la actualidad parte de la
publicacin de Russel y Burch (17) que
definieron Alternativas como: cualquier tcnica
que Reemplace el uso de animales, que
Reduzca su nmero en un trabajo particular o
que Refine un mtodo existente para disminuir
el dolor o el malestar de los animales. Esto se
conoce como el principio de las tres Rs
(Reemplazo, Reduccin y Refinamiento).
Como resultado de esta definicin existe una
gran gama de tcnicas o abordajes (biolgicos
y no-biolgicos) que pueden considerarse
apropiados como Alternativas.
Veamos
algunos ejemplos de las diferentes formas de
Alternativas de acuerdo al criterio de Russell.
Entre las tendientes al Reemplazo podemos
mencionar:
a) Sustitucin de estudios en animales vivos
por
invertebrados,
embriones
de
vertebrados o microorganismos.

b) Trabajos con rganos o humores aislados

de animales.
c) Tcnicas "in vitro" utilizando cultivos de
rganos, tejidos o clulas.
d) Sistemas fisicoqumicos mimetizantes de
funciones biolgicas.

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e) Simulacin de procesos fisiolgicos y

modelos
matemticos
de
relaciones
estructura actividad basados en las
propiedades fisicoqumicas de principios
activos, utilizando computadores.
Con respecto a la Reduccin citaremos:
a) El ajuste de la calidad gentica, sanitaria y
ambiental de los animales para lograr una
menor dispersin de los datos y como
consecuencia la disminucin de los
animales necesarios para la significacin
estadstica
de
los
resultados.
Simultneamente la utilizacin de tcnicas
de diseo experimental sofisticadas para la
misma finalidad.
b) Planificacin de las experiencias para
compartir los mismos animales (ejemplo:
utilizacin de varios rganos del mismo
animal para diferentes ensayos realizados
simultneamente y conservacin
de
rganos
o
tejidos
por
tcnicas
criobiolgicas para uso en oportunidades
posteriores).
c) Establecimiento de bancos de datos,
facilitacin del acceso a la literatura
especializada y estmulo a la publicacin
de los resultados negativos con la finalidad
de evitar la repeticin de experimentos.
Por ltimo cabe mencionar el Refinamiento
dentro del cual se destaca:
a) El perfeccionamiento de mtodos para
detectar dolor.

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b) La utilizacin de tcnicas no invasivas o

telemtricas.
c) El empleo de anlisis radiolgicos para
detectar tumores o deterioro orgnico
incipiente sin esperar sintomatologa
aparente.
Esto permitir anticipar la
eutanasia evitando as
padecimiento
prolongado del animal.
d) Uso de analgsicos, tranquilizantes o
anestsicos cuando las circunstancias lo
permitan.
A
nivel
internacional
existen
varias
instituciones con la finalidad especfica de
promover el desarrollo de alternativas vlidas
a la experimentacin con animales vivos.
Como ejemplo podemos mencionar el Johns
Hopkins Center for Alternatives to Animal
Testing, creado en 1981 con el apoyo
financiero de la Asociacin de Cosmticos,
Artculos de Tocador y Fragancias de USA. El
objetivo de esta institucin es apoyar
investigaciones
iniciadas
en
reas
seleccionadas como por ejemplo inflamacin e
irritacin, toxicidad celular, toxicidad aguda,
etc (18). Otra institucin importante es el
Fund for the Remplacement of Animals in
Medical Experiments (FRAME), con sede en
Gran Bretaa. Esta agrupacin se fund en
1969, con el propsito y metodologas de las
ciencias biomdicas y el desarrollo, validacin
y adopcin de tcnicas alternativas (19).
FRAME publica la Revista Cientfica ATLA
(Alternatives to Laboratory Animals). Estas
revista est siendo distribuida a las bibliotecas
de varios centros cientficos colombianos a
travs del Departamento de Farmacia,
Facultad de Ciencias, Universidad Nacional de
Colombia, que la recibe en carcter de
representante por un acuerdo realizado con
FRAME en 1986.

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Debido a la gran trascendencia de este tema,

se realizaron gran nmero de reuniones
cientficas y publicaciones que evaluaron el
estado del desarrollo de las alternativas. Uno
de los termas ms importantes lo constituye el
desarrollo de alternativas a los ensayos del
hogar, etc
RESPONSABILIDADES
En la prctica el cuidado de los animales de
laboratorio recae en varias personas, pero
legalmente y dependiendo de las leyes del
pas donde se adelante el estudio, la
responsabilidad final con frecuencia recae en
el investigador principal que est realizando el
procedimiento cientfico.
RECOMENDACIONES
PARA
EL
TRATAMIENTO
DE
ANIMALES
EN
INVESTIGACION
Acoger los trminos de la legislacin
pertinente
Elegir la especie mas apropiada o la
alternativa no animal si existiere que
responda a las necesidades del proyecto.
Requiere conocimiento previo de la historia
natural de dicha especie. Debe tener en
cuenta el estado de conservacin de la
especie.
Utilizar el menor nmero posible de
individuos (estudio piloto, buen diseo
experimental y uso de pruebas estadsticas
apropiadas )
Discutir previamente con colegas el valor
cientfico de la investigacin as como los

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aspectos ticos de la misma durante todos

los procedimientos.
Obtener animales de proveedores serios.
En caso de tratarse de animales silvestres,
su captura debe hacerse minimizando el
dolor y acogiendo la legislacin vigente

UNIVERSIDAD NACIONAL DE COLOMBIA

INSTITUTO DE BIOTECNOLOGIA
Programa Global Para la Infraestructura de la Investigacin
Biolgica y Biomdica
Protocolo de evaluacin de proyectos de investigacin/docencia en lo
referente a manejo de animales de laboratorio
Institucin

Proyecto No.
PRIMERA PARTE

1.

INVESTIGADOR PRINCIPAL (TITULAR DEL PROYECTO)

2.

TITULO DEL PROYECTO O PROTOCOLO

3.

EQUIPO DE DOCENCIA O INVESTIGACIN (personas

que manipularn los animales de este proyecto)

Nombre

4.

Dpto.

Investigador

Tcnico

Residente

Estudiante

ORGANISMO FINANCIADOR

UNIVERSIDAD NACIONAL DE COLOMBIA

COLCIENCIAS
OTRO

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5.

NATURALEZA DEL TRABAJO

Proyecto
Nuevo

Proyecto
en curso

Prueba
piloto

Especialidad

Maestra

Doctorado

Pregrado

Posgrado

Investigacin
Tesis
Docencia
Supervisado por:

Nombre
Cargo

Los estudiantes:

Manipularn
NO Manipularn los animales

6.

DURACIN ESTIMADA DEL TIEMPO DE TRABAJO CON

ANIMALES DE LABORATORIO

7.

ANIMALES REQUERIDOS
Especie Cepa

8.

9.

Edad

Sexo Peso

Cantidad Procedencia

PROCEDIMIENTO DE TIPO TERMINAL O AGUDO

PROCEDIMIENTO CRNICO

CATEGORA DE LA INVASIVIDAD*

A
B C D
*Ver categorizacin correspondiente en la cartilla

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SEGUNDA PARTE
1.- SINTESIS DE LOS OBJETIVOS DEL PROYECTO O DE LA
PRCTICA:

.
2. LA SIGUIENTE INFORMACION SERA DE UTILIDAD PARA
FACILITAR EL DESARROLLO DE LAS TAREAS QUE UD SE HA
PROPUESTO REALIZAR, POR ELLO LE SOLICITAMOS
DILIGENCIARLA EN SU TOTALIDAD Y DAR A CONTINUACION LOS
DETALLES PERTINENTES:
Para la realizacin de las pruebas requiere inmovilizar a su animal ?
Si
No
Si su respuesta es afirmativa, que tipo de inmovilizacin hara? Qu
mtodo y duracin tendr?

Realizar procedimientos invasivos ?

Si

No

Si su respuesta es afirmativa, de que tipo, frecuencia y duracin sern

estos procedimientos? Cules son los efectos clnicos esperados durante
ellos ? Igual si su respuesta es negativa.

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El animal ser sometido a algunos tipos de privaciones ?

Si
No
Si esto es previsible, de qu tipo, duracin, frecuencia y dems sern y
que se espera como efecto clnico?

Le sern administrados al animal algn tipo de agentes qumicos o

biolgicos ? Si
No
En caso de que su respuesta sea positiva, que tipo de agentes usar,
que dosis suministrar, que vas y frecuencia emplear y que efectos
clnicos espera?

Para la realizacin del experimento o prctica recurrir al empleo de

agentes anestsicos? Si No
En caso afirmativo, de qu tipo son? Qu producto utilizar ( nombre
genrico o comercial )Con qu frecuencia los aplicar?

Describa a continuacin el tipo de manejo que requerir su animal o

grupo de animales en cuanto a dietas, antibiticos, cuidados especiales,
etc.

...........................................................................................
...............................................................

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Enumere el nombre o nombres de el o las personas que se encargarn

de stos cuidados especiales en los animales durante el desarrollo del
proyecto o prctica:

En caso de presentarse dolor durante los procedimientos, qu medidas

se utilizarn para aliviarlo?

Qu mtodo de eutanasia se llevar a cabo al final del procedimiento?

Quin lo realizar?

TERCERA PARTE
Riesgos para el personal o para la poblacin animal del Bioterio
Sin riesgo

Riesgo potencial

Qumicos
Biolgicos
Radioactivos

Cancergenos
Medidas propuestas por el investigador para disminur el riesgo

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CUARTA PARTE:
IDENTIFICACION DE LAS PERSONAS
CONTACTAR EN CASO DE EMERGENCIA:

QUE

SE

PUEDEN

Suministre los datos de una persona a quien se pueda recurrir en caso de

algn imprevisto durante el experimento o prctica y de un nombre
alternativo con el mismo fin:

FIRMA DEL INVESTIGADOR PRINCIPAL

PARA USO DEL COMIT INSTITUCIONAL DE CUIDADO Y USO DE
ANIMALES DE LABORATORIO
APROBADO PARA SU REALIZACION
REMITIR PARA SU CORRECCION
Comentarios

Firma y Sello Responsable