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Laboratorio

4
Molculas esenciales para la vida
Objetivos
Al finalizar este laboratorio el estudiante podr:
1. Reconocer las molculas esenciales para la vida, los grupos funcionales que las componen y sus
caractersticas.
2. Conocer pruebas para la identificacin de grupos funcionales.
3. Definir qu es una reaccin Redox.
4. Identificar mediante pruebas qumicas las molculas de importancia biolgica presentes en
muestras sin identificar (desconocidos).

INTRODUCCIN

os seres vivos se distinguen de la materia inanimada por estar compuestos de molculas


orgnicas, que incluyen carbohidratos, grasas, protenas y cidos nucleicos. Estas molculas
son orgnicas por tener tomos de carbono. Adems de carbono, las molculas orgnicas
contienen varios o todos estos elementos: hidrgeno, oxgeno, nitrgeno, azufre y fsforo. Los tomos
de carbono pueden formar una gran diversidad de molculas al enlazarse con hasta cuatro elementos y
formar el esqueleto de las molculas orgnicas. Estas molculas pueden formar cadenas que varan en su
extensin y arreglo (pueden ser rectas, ramificadas o formar anillos). Los enlaces entre tomos de carbono, y
entre stos y otros tomos, pueden ser sencillos o dobles.
Una de las molculas orgnicas ms simples es metano (CH4), formada por enlaces sencillos de un tomo de
carbono con cuatro tomos de hidrgeno. Si se cambiara uno o varios de los tomos de hidrgeno por
otros grupos de tomos, las propiedades de la molcula nueva cambiaran drsticamente. Estos grupos de
tomos se conocen como grupos funcionales. A continuacin se detallan algunas caractersticas de varios
grupos funcionales importantes (vea tambin la Tabla 4.1).

GRUPOS FUNCIONALES:
Grupo hidroxilo: -OH
Un tomo de oxgeno unido a un tomo de hidrgeno.
Es un grupo polar1 porque el tomo de oxgeno tiene una carga parcial negativa.
Se disuelve en agua debido a la interaccin del grupo hidroxilo con las molculas de agua.
Presente en carbohidratos y alcoholes.
Ejemplos de alcoholes sencillos: metanol y etanol.
Grupo carbonilo: -CO
Un tomo de carbono unido a un tomo de oxgeno por un enlace covalente doble.
Si el grupo carbonilo se encuentra al final de la molcula
y est unido a un tomo de hidrgeno, el compuesto
orgnico se conoce como un aldehdo.

Aldehdo
O
||
RCH

Si el grupo carbonilo se encuentra en el medio de la molcula,


el compuesto orgnico se conoce como una cetona.

Cetona
O
||

RCR

Es un grupo polar porque el tomo de oxgeno tiene una carga parcial negativa.
Est presente en los carbohidratos.
Ejemplo de un aldehdo es formaldehdo, y un ejemplo de una cetona es acetona.
Grupo carboxilo: -COOH
Un tomo de carbono unido a un tomo de oxgeno por un enlace covalente doble, y unido
por un enlace covalente sencillo con otro tomo de oxgeno, que a su vez est enlazado a un
tomo de hidrgeno.
1

El arreglo geomtrico de los tomos en algunas molculas hace que algunas molculas tengan partes con cargas elctricas
positivas y otras partes con cargas elctricas negativas. En este caso, la molcula es polar, o sea, que tiene polos elctricos.
De no tener cargas la molcula es una molcula no polar. El que una molcula sea polar determina si puede reaccionar con
otras molculas o que pueda formar soluciones. Ejemplo de una molcula polar es el agua, que tiene cargas negativas hacia
un lado de la molcula, por parte del oxgeno, y cargas positivas, por parte del hidrgeno, hacia el otro lado.

Es un grupo altamente polar debido a los dos tomos de oxgeno.


Presente en los cidos orgnicos, como los aminocidos.
Ejemplos de dos molculas que contienen este grupo son el cido actico y el cido frmico.

D. Grupo amino: -NH2


Un tomo de nitrgeno unido covalentemente a dos tomos de hidrgeno.
Es un grupo bsico dbil.
Los compuestos que tienen este grupo funcional se conocen como aminas.
Presente en los aminocidos y en los cidos nucleicos.
Ejemplos de molculas que contienen este grupo: cistena y triptfano (aminocidos).

E. Grupo sulfhdrilo: -SH


Un tomo de azufre unido a un tomo de hidrgeno.
Grupo importante para las protenas porque les provee estabilidad interna.
Los compuestos que tienen este grupo funcional se conocen como tioles.
Ejemplo de un tiol: etanetiol.

F. Grupo fosfato: -OPO3


Un tomo de oxgeno unido covalentemente a un carbono, con los dems tomos de
oxgeno unidos al fsforo.
Componente importante de los fosfolpidos y de los cidos nucleicos.
Los compuestos que tienen este grupo funcional se conocen como fosfatos orgnicos.
Una molcula que posee grupos fosfatos es el ATP, o trifosfato de adenosina, que es la fuente
principal de energa de las clulas.

Tabla 4.1 Grupos funcionales ms importantes y ejemplos de molculas que los poseen.

Grupo funcional
Hidroxilo

Clase de molcula
Alcoholes

OH

(a) Carbonilo

(b) Carbonilo

Carboxilo

Amino
H

N
\
H
Sulfhdrilo

Aldehdos

Cetonas

cidos carboxlicos
(cidos orgnicos)

Aminas

H H
| |
HCCOH
| |
H H
(Etanol)
H H
O
| |
HCCC
| | \
H H H
(Propanal)
H O H
| || |
CCCCC
|
|
H
H

(Acetona)
H
O
|
HCC
| \
H OH
(cido Actico)
H
H
|

HCN
| \
H H
(Metilamina)

Tioles

SH

Fosfato
O
||
OPO
|
O

Ejemplo

Fosfatos orgnicos

H H
| |
HCCSH
| |
H H
(Etanetiol)
O
OH OH H
||
| | |

HCCC OPO
|
| | |
O
H H H
(Fosfato glicerol)

EJERCICIO 4.1
IDENTIFICACIN

DE

MOLCULAS

BIOLGICAS

El propsito de los ejercicios de esta seccin es familiarizarle con algunas de las pruebas que se utilizan
para detectar molculas orgnicas segn las propiedades nicas que le proveen sus grupos funcionales.
Por lo general, podemos determinar la clase de molcula orgnica aadiendo un reactivo que reacciona
con un grupo funcional particular. Si el grupo funcional est presente, el reactivo formar un color
especfico. De lo contrario, no habr cambio de color. Esto es un ejemplo de una prueba
colorimtrica.
Las pruebas que detectan la presencia de molculas orgnicas son pruebas cualitativas, mientras que las
pruebas que permiten determinar la cantidad de una molcula orgnica son pruebas cuantitativas. Las
pruebas colorimtricas pueden ser cuantitativas si la intensidad del color formado es proporcional a la
cantidad de sustancia orgnica.

A. Carbohidratos
Los carbohidratos son componentes estructurales importantes de las clulas y son adems una forma
importante de almacenar energa; los que conocemos como las azcares y polmeros de azcares. Estas
molculas usualmente contienen carbono, hidrgeno y oxgeno en una proporcin de 1:2:1. Los
carbohidratos se clasifican como monosacridos, disacridos o polisacridos, dependiendo del
tamao y la complejidad de la molcula (Figura 4.1). Los monosacridos se componen de una sola
molcula de azcar. Cuando dos monosacridos se unen se produce un disacrido, y cuando dos o
ms se unen se produce un polisacrido.

Carbohidratos

Monosacridos

Disacridos

Glucosa
Fructosa

Sacarosa
Lactosa
Polisacridos

Almidn
Celulosa

Figura

4.1

Ejemplos de carbohidratos.

A.1. Prueba de Benedict:


Muchos monosacridos, como la glucosa y la fructosa, y algunos disacridos, son azcares reductores
porque poseen un aldehdo libre (no enlazado a los otros grupos en la molcula). La Prueba de
Benedict se usa para detectar la presencia de azcares reductores porque el reactivo de Benedict
contiene cobre que se reduce en presencia de azcares reductores. Durante esta reaccin el azcar se
oxida. La reaccin antes mencionada se conoce como una reaccin oxidacin-reduccin (REDOX)
porque la oxidacin del azcar sucede simultneamente con la reaccin de reduccin del cobre.2

Reaccin de Benedict antes de calentar la solucin:


O

Reactivo de Benedict oxidado + RC


\
H
(azcar reductor)

Reaccin de Benedict despus de calentar la solucin:


O

Reactivo de Benedict reducido + RC


\
OH
(azcar oxidado)

Cuando se aade el reactivo de Benedict al azcar reductor, y se aplica calor, el color de la


mezcla cambia a naranja o ladrillo intenso mientras mayor sea la abundancia de azcares
reductores.
Un cambio a color verde indica la presencia de menos azcares reductores.
Las azcares que no reducen, como la sacarosa, no producen cambios en color y la solucin se
mantiene azul.
Los monosacridos que forman anillos no son azcares reductores porque no tienen un grupo
aldehdo libre, pero pueden reducir si se convierten en monosacridos abiertos.
M A T E R I A L E S

Tubos de ensayo pequeos*


Lpiz de cera
Goteros
Jugo de cebolla

Solucin de 1% almidn
Solucin de 5% sacarosa
Solucin de 5% fructosa
Solucin de 5% glucosa

Oxidacin: reaccin en la cual una sustancia pierde electrones, recibe un oxgeno o es privada de
hidrgeno.
Reduccin: reaccin en la cual una sustancia gana electrones, es privada de oxgeno o recibe un tomo de
hidrgeno.
6

Reactivo de Benedict
Agarraderas de tubos de ensayo

Hot plate
Beakers

* Es importante que los tubos que se usen sean pequeos, sino malgastar soluciones y
reactivos.
P R O C E D I M I E N T O

1.
2.
3.
4.
5.
6.
7.
8.
9.
10.

Marque seis tubos de ensayo pequeos a 1 y 2 centmetros del fondo y rotlelos del 1 al 6.
Aada jugo de cebolla hasta 1 cm en el tubo 1.
Aada la solucin de almidn hasta 1 cm en el tubo 2.
Aada agua hasta 1 cm en el tubo 3.
Aada la solucin de sacarosa hasta 1 cm en el tubo 4.
Aada la solucin de fructosa hasta 1 cm en el tubo 5.
Aada la solucin de glucosa hasta 1 cm en el tubo 6.
Aada reactivo de Benedict hasta los 2 cm en los seis tubos.
Caliente los tubos por 3 minutos en bao de mara.
Remueva y observe los colores obtenidos.
P R E C A U C I N

C uid a d o a l t ra b a ja r co n lo s tu b o s.
No llen e d e ma sia d o el b a o d e a g u a .
Us e p i n za s p a ra so s ten e r lo s tu b o s d e en sa yo ; e l co n ten id o e s ta r
mu y ca li en te.
E l rea c ti vo d e B en ed ic t es c u s ti co y p u ed e ca u s a rl e q u e ma d u ra s.

11. Anote los resultados en la Tabla 4.2 y comprelos con los resultados negativos y positivos
que aparecen en la Figura 4.2.
Tabla 4.2 Resultados de la prueba de Benedict para azcares reductores
Tubo
Contenido
Color antes de calentar Color despus de calentar
1
Jugo de cebolla
2

Almidn

Agua

Sacarosa

Fructosa

Glucosa

12. Por qu se hace el experimento en un tubo con agua?


13. A juzgar por las estructuras qumicas de sacarosa, fructosa y glucosa, cules son azcares
reductores?
14. Qu color muestra una reaccin negativa en presencia de azcares reductores?
15. Cul de los tubos contiene ms cantidad de azcares reductores?
16. Qu suceder si se hace la prueba con azcar de mesa?
17. Son todos los monosacridos azcares reductores?
18. Son los disacridos y polisacridos azcares reductores?

A.2. Prueba de Yodo:


La prueba de yodo se usa para detectar almidn.
El almidn es un polmero de glucosa producido por las plantas y es una fuente
importante de energa almacenada.
La molcula de almidn forma hlices entre las cuales se inserta el yodo, tiendo
el almidn de azul oscuro a negro.

M A T E R I A L E S

Tres tubos de ensayo pequeos


Jugo de cebolla
Solucin de 1% almidn
Yodo
Goteros
Lpiz de cera

P R O C E D I M I E N T O

1.
2.
3.
4.
5.
6.

Marque tres tubos de ensayo a 1 centmetro del fondo y rotlelos del 1 al 3.


Aada jugo de cebolla hasta 1 cm en el tubo 1.
Aada la solucin de almidn hasta 1 cm en el tubo 2.
Aada agua hasta 1 cm en el tubo 3.
Aada de 3-4 gotas de yodo a cada tubo.
Anote los resultados en la Tabla 4.3 y comprelos con los resultados en la Figura 4.2.
Tabla 4.3 Resultados de la prueba de yodo para almidn
Tubo
Contenido
Positivo
1
Jugo de cebolla
2

Almidn

Agua

Negativo

7. Cul es la funcin del almidn para la planta de papa?

B. Grasas (o Lpidos)
Los lpidos, igual que los carbohidratos, son una fuente importante de energa almacenada. Los lpidos
son componentes importantes de las membranas celulares, de algunas vitaminas, de ciertas hormonas y
del colesterol. Los lpidos son solubles en solventes no-polares y son muy poco solubles en agua
porque se componen principalmente de cadenas de hidrocarbonos.

B.1. Prueba de Sudn para identificacin de grasas:


Detecta las cadenas de hidrocarbonos.
El reactivo de Sudn produce una reaccin hidrofbica donde los grupos no-polares (los
hidrocarbonos) se agrupan y son rodeados por molculas del reactivo.
La prueba de Sudn tie los hidrocarbonos de rojo (Figura 4.2).
M A T E R I A L E S

Tubos de ensayo
Agua y aceite
Reactivo de Sudn

P R O C E D I M I E N T O

1.
2.
3.
4.

Aada 1 mL de agua y 1 mL de aceite al tubo 1.


Aada slo 2 mL de agua al tubo 2.
Aada una gota del reactivo de Sudn y mezcle.
Anote sus resultados

5. Qu capa de la mezcla ti de rojo?

B.2. Prueba de Sudn para detectar grasas en almidn, agua destilada y aceite
vegetal:
M A T E R I A L E S

Tijeras, lpiz
Agua destilada
Aceite vegetal

Solucin de almidn
Tenazas
Tres goteros

Papel de filtro
Plato Petri
Reactivo de Sudn

P R O C E D I M I E N T O

1. Corte un pedazo de papel de filtro que quepa en el fondo de un plato Petri.


2. Con un lpiz escriba las siguientes letras en el papel de filtro:

A = almidn
G = agua
V = aceite vegetal
3. Dibuje un crculo pequeo al lado de cada letra; aqu se colocar cada solucin.
4. Utilizando goteros aada un poco de cada producto en el crculo correspondiente sobre el
papel de filtro.
5. Sature el papel con varias gotas de reactivo de Sudn.
6. Lave el papel con agua en el plato Petri.
7. Deje secar el papel de filtro.
8. Refirase a la Figura 4.2, y anote los resultados en la Tabla 4.4
Tabla 4.4 Resultados de la prueba de Sudn para grasas
Mancha
Solucin
Intensidad de color
A
Almidn
G
Agua
V
Aceite vegetal
10

10. Qu revelan los resultados sobre el almidn, el agua destilada y el aceite vegetal?

11. Contienen estos tres productos la cantidad de grasa esperada?

C. Protenas
Las protenas son componentes estructurales de las clulas, controlan sus procesos metablicos y
actan como mensajeros qumicos. Adems, son parte importante de los anticuerpos, enzimas y
receptores celulares. Las protenas estn formadas por cadenas de aminocidos. Debido a la presencia
de los grupos amino y carboxilo, los aminocidos resisten cambios en pH y son amortiguadores
importantes en soluciones biolgicas.

C.1. Prueba de Biuret:


El reactivo de Biuret se compone de hidrxido de sodio y sulfato de cobre.
El grupo amino de las protenas reacciona con los iones de cobre del reactivo de Biuret y
el reactivo cambia de azul a violeta (Figura 4.2).
P R E C A U C I N

El r ea ct ivo d e Bi u re t e s c u s ti co y p u ed e ca u sa r
q u ema d u ra s .

M A T E R I A L E S

Tubos de ensayo
Lpiz de cera
Solucin de albmina 1%

Solucin de glucosa 5%
Reactivo de Biuret

P R O C E D I M I E N T O

1.
2.
3.
4.
5.
6.
7.

Marque tres tubos de ensayo a 1 y a 3 cm del fondo.


Aada albmina hasta 1 cm del fondo del tubo 1.
Aada glucosa hasta 1 cm del fondo del tubo 2.
Aada agua hasta 1 cm del fondo del tubo 3.
Aada el reactivo de Biuret hasta los 3 cm del fondo de los tres tubos.
Refirase a la Figura 4.2 para comparar colores.
Anote los resultados en la Tabla 4.5.
11

Tabla 4.5
Tubo
1

Resultados de la prueba de Biuret para almidn


Contenido
Positivo
Albmina

Glucosa

Agua

Negativo

8. Cul es el componente principal de la albmina?

9. Dnde se puede conseguir la albumina?

D. cidos Nucleicos
Las clulas tienen dos tipos de cidos nucleicos: el cido ribonucleico (ARN) y el cido
desoxiribonucleico (ADN). El ADN compone los genes que contienen la informacin hereditaria,
mientras que el ARN es importante durante la sntesis de protenas. En este ejercicio, a travs de un
procedimiento sencillo aislar el ADN de las frutas.
M A T E R I A L E S

Por grupo:
Frutas (fresa, kiwi, tomate, guineo o mang) o cebollas
Filtro de caf o gasa de cocinar (Cheese cloth)
Tubo de ensayo
Embudo cnico
Varilla de vidrio o palito de madera
Vaso pequeo (beaker) o matraz
Bolsas plsticas sellables
Alcohol 70% (fro, en hielo)
Solucin ltica *

L a s fr ut a s p u ed e n se r f r esc a s o c o ng e la d a s . S i s o n c o ng el a d a s, se d e b e n
d esc o ng e la r a nte s d e l la b ora t or i o.
S e p u ed e u ti liz a r c ua lq u ie r fr uta , p er o la s fr es a s u s ua l me nt e p ro d uc e n u na
ma y or c a nt id a d d e AD N .

12

P R O C E D I M I E N T O

* Prepare de antemano la solucin ltica:


Solucin ltica
Mezcle lquido de fregar (o champ sin acondicionador) con agua en una
razn de 1:9 A cada 100 ml de solucin preparada aada 1 gr de NaCl.

1.
2.
3.
4.
5.
6.
7.
8.
9.

10.

Seleccione una fruta y corte en pedazos hasta tener el equivalente a media taza.
Pnga los pedazos en una bolsa plstica que selle y aada 10 ml del amortiguador.
Macere con las manos en la licuadora hasta que se forma un pur.
Coloque el embudo cnico con el filtro de caf o gasa sobre el vaso o matraz y filtre el lquido.
Transfiera el lquido filtrado a un tubo de ensayo hasta llegar a aproximadamente 5 cm del
fondo del tubo.
Coloque el tubo de ensayo en hielo por 5 minutos.
Mzcle por inversin dos a tres veces.
Eche 5 ml del alcohol fro al tubo y agite suavemente con movimientos circulares.
Dentro de poco tiempo, se observarn tres capas:
En el fondo, el extracto de fruta.
En el medio, los hilos de ADN.
En la capa superior, el alcohol.
Remueva el ADN con la varilla de vidrio y descrbalo (color, textura, apariencia).

11. Cul es la funcin de la solucin ltica?

12. Por qu fue importante utilizar alcohol a una temperatura fra?

EJERCICIO 4.2
IDENTIFICACIN

DE

MOLCULAS

BIOLGICAS

EN

DESCONOCIDOS

Todas las molculas orgnicas presentes en nuestro cuerpo se derivan directamente o indirectamente
de los alimentos que ingerimos. Las cantidades y proporciones de estas molculas orgnicas varan de
un alimento a otro. Los granos y las papas, por ejemplo, son ricos en almidn, mientras que las carnes
son ricas en protenas y grasas. Para determinar el valor nutricional de los alimentos hay que identificar
las molculas orgnicas que contienen. En este ejercicio se determinar la presencia de algunos
compuestos orgnicos en varias mezclas desconocidas.
13

M A T E R I A L E S

Tubos de ensayo pequeos


Goteros
Lpiz de cera
Yodo

Reactivo de Sudn
Reactivo de Benedict
Reactivo de Biuret

P R O C E D I M I E N T O

1. El instructor le entregar a cada grupo de dos a cuatro muestras desconocidas, a las cuales se les
realizarn pruebas para detectar los compuestos presentes.
2. Cada prueba debe tener un control.
3. Consulte la Figura 4.2 para determinar si los resultados fueron negativos o positivos y anote los
resultados en la Tabla 4.6.
Tabla 4.6 Resultados pruebas de desconocidos
Muestra
Pruebas
Prueba
del
Carbohidratos
Grasas
desconocido
Benedict Yodo Sudn

Prueba
Protenas
Biuret

1
2
3
4
5
6
4. Cules de los siguientes se encontraron en cada desconocido?
Desconocido
1
2
3
4
5
6

Azcares

Almidn

Grasas

Protenas

ADN

________
________
________
________
________
________

________
________
________
________
________
________

______
______
______
______
______
______

________
________
________
________
________
________

______
______
______
______
______
______

5Cules fueron los controles positivos y negativos en el experimento. Por qu son tiles estos
controles?
14

6. Prepare un informe sencillo que presente y discuta los resultados de este experimento.

15

Resultados de la Prueba de Benedict:


Color ladrillo: Positivo (concentracin alta de
azcar)
Color verde: Positivo (concentracin baja de
azcar)
Color azul: Negativo

Color blanco transparente: Negativo

Resultados de la Prueba de Sudn:

Resultados de la Prueba de Biuret:

Color rojo: Positivo (contiene cadenas de


hidrocarbonos)

Color violeta: Positivo (contiene grupos


amino)

Color original o transparente: Negativo

Color azul: Negativo

Figura

Resultados de la Prueba de Yodo:


Color negro o azul oscuro: Positivo
(presencia de almidn)

4.2

Resultados positivos y negativos de las pruebas para la deteccin e identificacin de molculas orgnicas.
16

LABORATORIO 4: MOLCULAS ESENCIALES PARA LA VIDA


PLAN DE ENSEANZA

PARA LOS

INSTRUCTORES

Destrezas que el estudiante adquirir a partir de este laboratorio:


1.
2.
3.
4.

Trabajo grupal e individual


Comunicacin escrita
Aplicacin del laboratorio anterior (Cmo escribir un informe cientfico)
Utilizacin de equipo de laboratorio y pruebas qumicas simples

Manejo del laboratorio:

Prepare el bao de Mara temprano durante el laboratorio.


Los estudiantes deben estar familiarizados con conceptos qumicos bsicos. De no ser
as, debe darse un repaso al comienzo del laboratorio.
Los estudiantes deben usar bata de laboratorio y zapatos cerrados porque trabajarn
con sustancias corrosivas, tintes y bao de mara.
Recurdele a los estudiantes que deben venir preparados para el prximo laboratorio.

Manejo del tiempo:


1. Prueba corta (si no se dio asignacin).............................(10 minutos)
2. Presentacin de objetivos y repaso de qumica...............(10 minutos)
3. Ejercicio 4.1: Identificacin de molculas biolgicas
A.1: Azcares reductoras...........................................(25 minutos)
A.2: Prueba de almidn.............................................(10 minutos)
B.1: Grasas.................................................................(15 minutos)
C.1: Protenas.................................................(10 minutos)
D: cidos nucleicos .................................................. (15 minutos)
4. Discusin resultados (Ejercicio 4.1)......(10 minutos)
4. Ejercicio 4.2: Desconocidos............................................(35 minutos)
5. Discusin resultados (Ejercicio 4.2).........(10 minutos)
6. Resumen y conclusiones(15 minutos)
7. Instrucciones del informe corto.(10 minutos)
9. Recoger el laboratorio.......................................................( 5 minutos)

17

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