NIVELES DE ORGANIZACIN DEL DNA Y MECANISMOS DE REPARACIN.

INTRODUCCIN
La informacin gentica de las clulas eucariotas est almacenada en cadenas de ADN
enormemente largas (si exceptuamos a las mitocondrias y a los cloroplastos, con cadenas
de ADN mucho ms cortas). El ADN es una molcula relativamente inerte y necesita de
las protenas para expresarse, para regular dicha expresin, para replicarse y para
organizarse en el interior del ncleo. Tambin necesita la actividad de las protenas para
que se repartan durante la fase M las dos copias de cada molcula de ADN, tras
replicarse durante la fase S, entre las dos clulas hijas resultantes. Por tanto, el ADN
siempre est asociado a protenas y al conjunto de ADN ms protenas asociadas se le

denomina cromatina.

GENOMA EUCARIOTA
El Cromosoma Eucariota: Estn formados de ADN y protenas Es bicatenario Se pueden
observar los cromosomas en la metafase en su mxima condensacin.
Las protenas asociadas son las HISTONAS: Estas se sintetizan durante la etapa S del ciclo
celular, existen alrededor de 90millones de ellas por cada clula.
El nucleosoma: Las histonas que forman al nucleosomas son polipptido cortos carga
positiva (bsicas) as son atradas por las cargas negativas del ADN (cidas).
Los cromosomas se encuentran en el ncleo celular separados del resto de la clula por
la membrana nuclear. Un cromosoma tiene tres partes fundamentales: centrmero,
telmero y los brazos.
El centrmero (constriccin cromosmica primaria) es la estructura a la que se une el
huso acromtico. La regin centromrica aparece normalmente como un y su posicin
define la relacin entre las longitudes de los dos brazos centromricos que es una

caracterstica muy til. Segn la posicin del centrmero los cromosomas se clasifican
en:

Telocntricos con el centrmero en un extremo.

Acrocntricos con el centrmero alejado del centro.
Metacntricos con el cromosoma en el centro.

Los telmeros son secuencias situadas en los extremos de los cromosomas que les dan
estabilidad. Se encuentran sobre todo en los cromosomas eucariticos lineales.
ORGANIZACIN DEL CROMOSOMA EUCARITICO
En clulas eucariticas que no se hayan sometidas a divisin celular el cromosoma recibe
el nombre de cromatina. La cromatina consiste en fibras que contienen protenas, ADN
(en cantidades muy parecidas) y una pequea porcin de ARN. Las protenas que se
asocian al ADN son bsicas y se llaman histonas.

Primer nivel: nucleosoma

Esta estructura vista al microscopio se ve como si fuera un collar de perlas del que
las cuentas son los nucleosomas.
Segundo nivel: fibra de 30 nm.
El nucleosoma que contiene H1 se pliega en una conformacin que se supone en
zigzag (pero tambin se piensa que en hlice o con interacciones cruzadas)
colocndose prximas a la salida y entrada del nucleosoma; y cuya apariencia
sugiere que los nucleosomas interaccionan mediante contactos entre sus
molculas H1.
Tercer nivel: fibra de 300 nm.
Algunos autores proponen que el solenoide a su vez se enrolla en bucles de 300
nm, formando otras estructuras llamadas cronmeros.
Cuarto nivel: cromosoma
Se produce por el arrollamiento de la fibra de 300 nm sobre s misma formando
una espiral y empaquetando el ADN hasta 10.000 veces formando una cromtide.
La unin de dos cromtidas hermanas a travs de las condensinas.

HETEROCROMATINA Y EUCROMATINA
Si hacemos reaccionar el ADN con el tinte Feulgen hay una parte que se tie
intensamente y otra que no tanto. La parte que se tie intensamente se llama
heterocromatina y la parte que no eucromatina. La mayora de los genes activos se
encuentran en la eucromatina
La heterocromatina puede ser constitutiva o facultativa. La de tipo constitutivo es un
rasgo permanente de una posicin concreta del cromosoma y es un carcter hereditario.
La heterocromatina facultativa puede estar presente o ausente en una posicin
determinada del cromosoma.
MECANISMOS DE REPARACIN DEL ADN

REPARACIN DIRECTA

Por estos mecanismos se reparan: metilacin de guanina, y en algunos

vertebrados dmeros de pirimidina. No intervienen nucleasas ni ADN-polimerasas.

REPARACIN INDIRECTA

Hay intervencin de nucleasas y ADN-polimerasas. Se necesita hebra molde

perteneciente al mismo cromosoma o al homlogo.
Escisin de base. Reparan casos de alteraciones puntuales en bases nitrogenadas.
Se origina un sitio AP y luego se retira el nucletido AP y se resintetiza la
hebra.
Escisin de nucletido. Reparan alteraciones que distorsionan la conformacin del
dplex y que obstaculizaran la transcripcin y replicacin. Generalmente inducidos
por bases alteradas o mal apareadas. Una nucleasa escinde una porcin de la
hebra prxima al lugar del dao. Inmediatamente se resintetiza una nueva
siguiendo el molde complementario.
Recombinacin de regiones homlogas/ Unin de fragmentos terminales de hebras
rotas. Reparan lesiones en las que se ven afectadas ambas hebras, o en las que no
existe una hebra complementaria que pueda actuar de molde fiable. Mecanismo
ms complejo que los anteriores

MECANISMOS DE REPARACIN DIRECTA

Recuperacin de guaninas metiladas

Una de las alteraciones que se conocen en el ADN es el caso de la metilacin de restos de

guanina para formar O6-metilguanina; en este caso la clula dispone de una enzima
suicida que localiza el lugar de la alteracin y seguidamente transfiere el grupo metilo
desde la guanina a un resto de cistena en su centro activo, la enzima queda ahora
inactivada, ya que este proceso no es reversible.

Reparacin de dmeros de pirimidina

Un sistema similar acta en procariotas y en muchos eucariotas, en l interviene una

enzima que detecta dmeros de pirimidina que se producen en restos adyacentes C-C, C-T
(siendo el ms frecuente T-T). En procariotas la enzima que repara esta alteracin es la
fotoliasa. En primer lugar la enzima localiza el punto donde se ubica el dmero y
seguidamente se posiciona sobre l y repara la alteracin.
MECANISMOS DE REPARACIN INDIRECTA
En general estos mecanismos actan eliminando la base alterada utilizando diferentes
estrategias:

Reparacin por escisin de base

En este caso la base alterada es retirada del ADN por un tipo de enzimas denominados
glicosidasas. Hay varias y cada una se ocupa de un tipo de modificacin (HipoxantinaADN glicosidasa, uracil-ADN -glicosidasa, etc.). Cuando estas retiran la base daada se

genera un sitio AP (tambin se pueden generar sitios AP por otras causas), que resultara
muy mutagnico si se dejase sin reparar, ya que bloqueara la replicacin o transcripcin
del ADN en ese punto, por lo que seguidamente interviene una endonucleasa que retira
el resto de ribosa fosfato del sitio AP, dejando un hueco de un nucletido que es rellenado
inmediatamente por la accin de una polimerasa del ADN, por ltimo la hebra es sellada
por la ligasa.

Reparacin por escisin de nucletido o hebra

Este mecanismo de reparacin es muy similar al anterior, y de hecho comparte con aqul
algunos de sus elementos moleculares. En una primera etapa, el sistema reconoce el
punto de la lesin. Seguidamente acta una endonucleasa que corta un pequeo
fragmento de la hebra que presenta la lesin a ambos lados de la misma dejando entre el
nucletido afectado y ambos puntos de corte varios nucletidos. Luego se retira esta
porcin de la hebra al tiempo que una polimerasa de ADN comienza la sntesis del
fragmento que sustituir al eliminado, tomando como molde la hebra sana.
MECANISMOS DE REPARACIN POR RECOMBINACIN
Este mecanismo es complejo, y a diferencia de los hasta ahora estudiados, utiliza una
estrategia de recombinacin similar a la que opera en el intercambio de cromtidas que
se da en la meiosis, uniendo regiones homlogas de los cromosomas paternos y
maternos. El tipo de alteraciones que se reparan mediante este mecanismo suelen ser
aquellas que, por diferentes razones, no permiten disponer de hebra molde (rotura de
hebras, apareamientos anmalos entre bases, etc.). Este ltimo tipo de anomala ha de
ser reparada antes de que la zona sea replicada por la polimerasa, ya que de no ser as
se podra bloquear el proceso replicativo en dicho punto o inducir una mutacin
permanente en la descendencia celular. Si durante la fase S del ciclo celular, la
polimerasa de ADN se encuentra una alteracin que no ha sido reparada anteriormente,
puede ocurrir que introduzca un nucletido al azar con el consiguiente riesgo de
mutacin, o contine su labor dejando sin replicar la zona alterada hasta su reparacin.
En este ltimo caso la solucin al problema consiste en retirar la porcin de una de las
hebras no replicadas y seguidamente sintetizar una hebra nueva de ADN por un
mecanismo que toma como molde la hebra complementaria del cromosoma homlogo.
Se han descrito varias polimerasas del ADN que participan en la resolucin de problemas
de este tipo. En general estas polimerasas no poseen la alta fidelidad de copia de la
polimerasa normal (la que replica el genoma en la fase S del ciclo celular), por lo que
cabe esperar una tasa de error incrementada con respecto al que presenta esta ltima, y
parece que cada una de ellas se especializa en solucionar un tipo especfico de
alteracin.
CONCLUSIONES
En conclusin la permanente agresin a la que se ve sometida la copia del ADN en las
clulas de los diferentes tejidos a lo largo de la vida del individuo, genera una
inestabilidad del genoma que se manifiesta en forma de mutaciones que provocan:
productos deficientes, bloqueo de la transcripcin o de la replicacin, etc. Estas
circunstancias son interpretadas por la clula como una situacin de estrs al cual ha de
responder de manera eficiente, si no quiere ver comprometida su viabilidad o

funcionalidad, y por ello determina en gran medida el ritmo al que una clula envejece,
ya que en l influyen dos elementos contrapuestos:
A) La frecuencia con la que se producen daos en el genoma.
B) La rapidez y eficiencia con que los mismos son detectados y reparados por la clula.
BIBLIOGRAFA
Allison0, L. A. (2007). Fundamental Molecular Biology. Williamsburg: Blackwell Publishing
Ltd.