REPLICACIN Y REPARACIN DEL DNA.

DOGMA CENTRAL DE LA BIOLOGA MOLECULAR.

REPLICACIN DEL DNA:
INICIACIN.
ELONGACIN.
TERMINACIN.
REPARACIN.

REPLICACIN Y REPARACIN DEL D.N.A.

El DOGMA CENTRAL de la biologa molecular establece que la

transferencia de informacin gentica fluye del DNA al RNA y de esta
a las protenas mediante los procesos siguientes:
REPLICACIN DEL DNA.- es la duplicacin exacta de una molcula
parental de DNA a dos molculas de DNA hijas. En esta forma la
informacin gentica pasa de una generacin a otra. En este proceso
se usa el mismo lenguaje y el mismo tipo de letra (bases pricas y
pirimdicas).
TRANSCRIPCIN PARA FORMAR RNA MENSAJERO.- en este
proceso la informacin gentica almacenada en el DNA es transferida
al RNA mensajero para que est disponible para la sntesis de
protenas en el citosol.
En este proceso se usa el mismo lenguaje (el de los ac. nucleicos),
pero diferentes letras (ya que en el DNA hay timina y en el RNA
uracilo).
TRADUCCIN.- del lenguaje de cuatro letras de los cidos
nucleicos, al lenguaje de 20 letras de los aminocidos constituyentes
de las protenas. La traduccin se lleva a cabo en el RNA
RIBOSOMAL que es capaz de leer ambos lenguajes al mismo tiempo;
por un lado reconoce las bases de los c. Nucleicos y por el otro lado
reconoce a los aminocidos, efectuando la biosntesis de las
protenas.
TRANSCRIPCIN INVERSA.- se descubri este sistema en los virus
oncognicos, cuyo material gentico es RNA y los cuales, al invadir
una clula, general un flujo de informacin del RNA al DNA y del DNA
nuevamente al RNA para la sntesis de protenas.

BIOQUMICA DE LA REPLICACIN DEL D.N.A.

La replicacin del DNA es un proceso complicado, que requiere de
energa para desenrollar la hlice, numerosas enzimas que permitan la
copia y un sistema de correccin de errores.
La informacin del DNA reside en la secuencia de bases .La
REPLICACIN debe garantizar que dicha secuencia pase intacta a las
molcula de DNA hijas. El modelo de replicacin es el
SEMICONSERVATIVO, en el cual, cada banda del DNA parental
(padre) sirve de molde a una banda hija. ambas bandas (parental e
hija) quedan apareadas formando una nueva hlice a DNA. De tal
forma, que una hlice de DNA al replicarse produce dos molculas
exactas de DNA, cada una con una banda parental y una hija.

La replicacin tiene tres fases:

INICIACIN
ELONGACIN
TERMINACIN.

INICIACIN.
1.- El proceso se inicia con varias enzimas llamadas
TOPOISOMERASAS, que eliminan las superhlices de DNA.
2.- Todos los DNA conocidos inician la replicacin en sitios concretos
denominados ORIGEN DE REPLICACIN, donde actan enzimas
llamadas HELICASAS que utilizando energa libre de la hidrlisis de
ATP, desenrollan y desnaturalizan el DNA, dejando dos bandas o
hebras de DNA. 3.- Cada una de ellas se recubre con unas protenas
denominadas Protenas de unin a DNA de banda simple o PUBS o
SSB., que mantienen las dos bandas de DNA separadas en el
denominado TENEDOR U HORQUILLA DE REPLICACIN o lugar
donde la replicacin se est llevando a cabo.
El proceso de replicacin se lleva a cabo en forma
BIDIRECCIONAL .La mquina protenica que lleva a cabo la reaccin
de polimerizacin se llama REPLISOMA. Este contiene: DNA
polimerasa III, Primasa, Helicasa y PUBS

Horquilla
Horquilla

ELONGACIN.
La sntesis de una nueva cadena de DNA se logra por la adicin de
nucletidos al extremo 3 de una cadena en crecimiento .Esta
actividad de POLIMERIZACIN es catalizada por enzimas llamadas
DNA POLIMERASAS. Existen tres tipos :
DNA POLIMERASA I .- repara el DNA y participa en la sntesis de una
de las cadenas de DNA .Elimina los ribonucletidos de los fragmentos
de Okasaki y los sustituye por los desoxiribonucletidos
correspondientes a la complementariedad de la banda retardada
original.
DNA POLIMERASA II.- interviene tambien en la reparacin del DNA.
DNA POLIMERASA III .- es la PRINCIPAL enzima de la replicacin del
DNA y componente clave del Replisoma.

PROCESO DE ELONGACIN DE LA CADENA.

La DNA POLIMERASA III, sintetiza DNA agregando un nucletido
cada vez, al extremo 3 de la cadena en crecimiento recin sintetizada.
El nucletido adicionado es un desoxirribonucletido 5 trifosfato
(dNTP).El tipo de nucletido adicionado a la cadena en crecimiento
depender de la base del nucletido correspondiente en la cadena o
banda matriz. As la adenina se aparea con la timina y la guanina con
la citosina.
La DNA POLINERASA III es un dmero que forma parte del
REPLISOMA.
Un complejo del dmero es responsable de la sntesis de la cadena
conductora y el otro de la sntesis de la cadena retardada.
Se producen las siguientes reacciones:
El dNTP entrante establece enlace FOSFODIESTER a nivel C 3del
dNTP de la cadena naciente
La base del dNTP entrante establece PUENTES DE HIDRGENO
con la base correspondiente de la cadena matriz.

 RUPTURA DE DOS ENLACES DE FOSFATO (pirofosfato) del

dNTP entrante, a nivel del fsforo . Posteriormente la hidrlisis de
este pirofosfato proporciona gran parte de la energa necesaria para
las reacciones de polimerizacin

ELONGACIN DE LA CADENA DE DNA.

LAS DOS CADENAS DE LA HORQUILLA DE REPLIACIN SE
SINTETIZAN POR SEPARADO.
La DNA polimerasa cataliza el alargamiento de la cadena,
exclusivamente en direccin 5 3.
Debido a que las dos cadenas son antiparalelas, las sntesis 5 3,
siguiendo la direccin de la horquilla se efecta en una sola cadena,
mientras que en la otra cadena se efecta en direccin contraria al
movimiento de la horquilla.
La nueva cadena sintetizada, formada por la polimerizacin 5 3en
la direccin del movimiento de la horquilla de replicacin se llama
CADENA CONDUCTORA o LIDER.
La otra cadena sintetizada, formada por la polimerizacin 5 3 en
direccin opuesta al movimiento de la horquilla de replicacin se llama
CADENA RETARDADA o REZAGADA.
La cadena CONDUCTORA se sintetiza en forma continua desde el
origen de la replicacin a medida que la horquilla avanza.
La cadena RETARDADA se sintetiza discontinuamente, en corto
pedazos 5 3 en direccin opuesta a la horquilla de replicacin. Esto
se debe a que la cadena matriz o parental para la cadena retardada
tiene una orientacin 3 5. Los trozos individuales de la cadena
retardada llamados FRAGMENTOS DE OKAZAKI son despus
reunidos por procesos diferentes.

La DNA polimerasa no puede iniciar la polimerizacin de novo; solo

puede adicionar nucletidos a polmeros ya existentes.
Por ello la iniciacin de la sntesis de los FRAGMENTOS DE OKASAKI
de la cadena retardada se requiere de la RNA POLIMERASA O
PRIMASA que forma un fragmento corto de RNA (10 nucletidos) que
se llama CEBADOR DE RNA, sintetizado en la horquilla de
replicacin.
Cada Cebador de RNA tiene un extremo 3 que permite que la DNA
POLIMERASA inicie la adicin de dNTP en direccin 5 3, y forme
los fragmentos de Okasaki.
Tambin la cadena lder necesita al principio solo una secuencia de
RNA (cebador de RNA).
La horquilla de replicacin avanza a una velocidad aproximada de
1000 nucletidos por segundo. Y se sintetiza un cebador por cada
1000 nucletidos.

INICIACIN DE LA SNTESIS DE D.N.A A PARTIR DE UN

CEBADOR DE RNA, Y LA SUBSIGUIENTES ADHERENCIA DEL
SEGUNDO dNTP.

ESQUEMA DE LA REPLICACIN (SNTESIS DE LA HEBRA

CONDUCTORA Y DE LA HEBRA O CADENA RETARDADA.

SNTESIS de la cadena RETARADA y FRAGMENTOS DE

OKASAKI.

UNIN DE LOS FRAGMENTOS DE OKASAKI PARA COMPLETAR

LA SNTESIS DE LA CADENA RETARDADA DE DNA.
La unin de los fragmentos de Okasaki para formar la cadena
retardada de DNA se produce por la accin de dos enzimas:
D.N.A POLIMERASA I.
D.N.A. LIGASA.
LA D.N.A POLIMERASA I tiene las siguientes funciones.
Cataliza la REMOSIN del Cebador de RNA en el inicio de cada
fragmento de Okasaki.
LLENA EL VACIO que se forma entre los fragmentos de Okasaki a
medida que se degrada el cebador de RNA.
ADICIONA UN DESOXINUCLETIDO al extremo 3 de la cadena
de DNA acercando los extremos de los fragmentos de Okasaki.
Al final SE DISOCIA del DNA retardado.
La D.N.A LIGASA forma un enlace fosfodister entre el grupo OH de 3
de una cadena de Okasaki y grupo fosfato 5 del otro fragmento de
Okasaki, con lo cual se forma una cadena retardada continua.
Despus la Ligasa se disocia.

TERMINACIN DE LA REPLICACIN.
La terminacin de la replicacin se efecta en el sitio opuesto al origen
de replicacin en el cromosoma circular del E. Coli. Esta regin
contiene una protena que se llama SUSTANCIA DE UTILIZACIN
EN LA TERMINACIN O TUS, que inhibe la accin de la
HELICASA, deteniendo la horquilla de replicacin al evitar que
contine la separacin de la doble hlice de DNA.
En las clulas animales incluyendo las humanas, la REPLICACIN del
DNA ocurre solamente en un perodo especfico durante la vida de la
clula. Este perodo se indica como FASE SINTTICA O S, durante la
MITOSIS. Durante esta fase, el DNA nuclear es replicado
completamente una vez y solo una .Todava existe muchas cosas
obscuras en esta fase de replicacin.
REPARACIN.
El DNA es la nica macromolcula que puede ser reparada,
probablemente debido a que el costo para el organismo por el DNA
daado sobrepasa el costo de la energa que se gasta en la
reparacin del dao. En otras macromolculas cuando existe una
protena defectuosa, simplemente es reemplaza por otra nueva. Sin
embargo, si el DNA es daado, el organismo entero puede estar en
peligro debido a que se han alterado las instrucciones para la sntesis
de una molcula funcional.
1. La presencia de DNA daado es detectado por las enzimas de
ESCISIN-REPARACIN que produce una ruptura a ambos lados
del dao de DNA.
2. Una HELICASA y otras exonucleasas remueven el DNA daado,
dejando un hueco.
3. La DNA POLIMERASA I llena el hueco con los nucletidos
correctos.
4. La mella queda sellada por una DNA LIGASA.

RUTA GENERAL DE ESCISIN /REPARACIN