MTODOS DE DESINFECCIN Y ESTERILIZACIN DE MATERIAL

ENFOCADO AL TRABAJO CON VIRUS

Desinfeccin Medio fsico o qumico de matar microorganismos, pero no
necesariamente esporas.1
Desinfectante Sustancia o mezcla de sustancias qumicas utilizada para
matar microorganismos, pero no necesariamente esporas. Los desinfectantes
suelen aplicarse a superficies u objetos inanimados.
Germicida qumico Sustancia o mezcla de sustancias qumicas utilizada
para matar microorganismos.
Germicidas qumicos deben elegirse cuidadosamente las formulaciones que
sean ms indicadas para las necesidades concretas.
La mayora de los productos desinfectantes tienen algunos efectos txicos,
corrosivos o irritantes por esta razn debe utilizarse guantes, delantal y
proteccin ocular al diluir desinfectantes para su uso. El desinfectante
usado en el laboratorio de virologa es el hipoclorito de sodio al 5 %;
ste es un agente oxidante, corrosivo para los metales.2
Para la desinfeccin de manos antes y despus de manipular material
se utilizar alcoholantisptico.2
Los agentes qumicos se utilizan para la desinfeccin de acuerdo a sus
mecanismo de accin: desde la disolucin de los lpidos de la membrana
celular hasta afectando las protenas.
Dentro de estos agentes tenemos las siguientes sustancias: fenoles, alcoholes,
halgenos, metales pesados (arsnico, plata, mercurio, zinc y cobre), aldehdos
y cuaternarios de amonio. Los gases esterilizantes para su efectividad
depender de la concentracin y la temperatura, este puede ser de 5 a 8 hrs. a
38 C y de 3 a 4 hrs a 54 C.
Cloro (hipoclorito sdico) (NaOCl)
El cloro, oxidante de accin rpida, es un germicida qumico de uso muy
extendido y de amplio espectro.
Normalmente se diluye en agua para conseguir distintas concentraciones de
cloro libre.
Como solucin desinfectante general para toda clase de trabajos de
laboratorio se utilizar una concentracin de 1 g/l de cloro libre.
Las soluciones madre o de trabajo de leja almacenadas en recipientes
abiertos, particularmente a temperaturas elevadas, liberan cloro gaseoso con
lo que se debilita su potencial germicida.
La frecuencia con la que deben prepararse nuevas soluciones de trabajo de
leja depende de su potencia inicial, del tamao y el tipo de los recipientes (por
ejemplo, con o sin tapa), de la frecuencia y el tipo de uso, y de las condiciones
ambientales. A ttulo de orientacin general, las soluciones que reciban
materiales con gran cantidad de materia orgnica varias veces al da deben
cambiarse al menos diariamente, mientras que aquellas que se usan con
menos frecuencia pueden durar hasta una semana.

En caso de derrame que conlleve un peligro biolgico y en presencia de

grandes cantidades de materia orgnica, se recomienda utilizar una solucin
ms concentrada, que contenga 5 g/l de cloro libre.
El cloro, especialmente en forma de leja, es sumamente alcalino y puede ser
corrosivo para los metales.
Su actividad se ve considerablemente reducida por la materia orgnica
(protenas).
Formaldehdo
El formaldehdo (HCHO) es un gas que mata todos los microorganismos y
esporas a temperaturas superiores a los 20C, tiene actividad contra
formas vegetativas de bacterias, esporas, hongos y virus con y sin
envoltura lipdica. Sin embargo, no tiene actividad contra los priones.
Su accin es relativamente lenta y requiere una humedad relativa de
alrededor del 70%. Se comercializa en forma de polmero slido
(paraformaldehdo), en copos o comprimidos, o como formol, solucin
del gas en agua con aproximadamente 370 g/l (37%) y con metanol
(100 ml/l) como estabilizante. Ambas formulaciones se calientan para
liberar el gas, que se utiliza en la descontaminacin y la desinfeccin de
espacios cerrados como CSB y locales (vase ms adelante el apartado
sobre descontaminacin ambiental de locales).
El formaldehdo (un 5% de formol en agua) puede utilizarse como
desinfectante lquido.
El formaldehdo es un agente presuntamente cancergeno.
Se trata de un gas peligroso de olor acre que puede irritar los ojos y las
mucosas. As pues, debe almacenarse y utilizarse con una campana
extractora de vapores o en zonas bien ventiladas.
Glutaraldehdo
Al igual que el formaldehdo, el glutaraldehdo (OHC(CH2)3CHO) tiene
actividad contra formas vegetativas de bacterias, esporas, hongos y virus
con y sin envoltura lipdica.
No es corrosivo y su accin es ms rpida que la del formaldehdo.
El glutaraldehdo suele suministrarse en forma de solucin con una
concentracin de unos 20 g/l (2%); algunos productos antes de ser
utilizados necesitan ser activados (alcalinizados) mediante la adicin de
un compuesto de bicarbonato que se suministra con el producto. La
solucin activada puede volver a utilizarse durante 1 a 4 semanas, segn la
formulacin y el tipo y la frecuencia de uso.
El glutaraldehdo es txico e irritante para la piel y las mucosas; debe
evitarse el contacto con l. Debe utilizarse con una campana extractora
de vapores o en locales bien ventilados. No se recomienda en forma de
pulverizacin ni de solucin para descontaminar superficies.
Compuestos fenlicos
Tienen actividad contra las formas vegetativas de las bacterias y contra
los virus con envoltura lipdica y su actividad contra los virus sin
envoltura lipdica es variable.
Muchos productos fenlicos se utilizan para descontaminar superficies
ambientales, y algunos

 (por ejemplo, el triclosn y el cloroxilenol) se encuentran entre los

antispticos ms usados.
Algunos compuestos fenlicos son sensibles a la dureza del agua y pueden
quedar inactivados con aguas duras; por esa razn, deben diluirse con agua
destilada o desionizada.
Pueden ser absorbidos por el caucho y tambin pueden penetrar en la piel.
Los resultados de estudios de inocuidad ms recientes recomiendan
restringir su uso.
Compuestos de amonio cuaternario
Tienen buena actividad contra algunas bacterias en fase vegetativa y
virus con envoltura lipdica.
Algunos tipos (por ejemplo, el cloruro de benzalconio) se utilizan como
antispticos.
La actividad germicida de ciertos tipos de compuestos de amonio
cuaternario se reduce considerablemente con la materia orgnica, las aguas
duras y los detergentes aninicos. As pues, es necesario tener cuidado en
la seleccin de los agentes empleados en la limpieza previa cuando se
vayan a utilizar compuestos de amonio cuaternario para la desinfeccin.
Alcoholes
El etanol (alcohol etlico, C2H5OH) y el 2-propanol (alcohol isoproplico,
(CH3)2CHOH) tienen propiedades desinfectantes similares.
Son activos contra los virus con envoltura lipdica y su accin sobre
los virus sin envoltura lipdica es variable.
Para conseguir la mxima eficacia deben utilizarse en concentraciones
acuosas de aproximadamente un 70% (v/v).
Una de las grandes ventajas de las soluciones acuosas de alcoholes es que
no dejan residuo alguno en los objetos tratados.
Las mezclas con otros agentes son ms eficaces que el alcohol por s solo;
por ejemplo, el alcohol al 70% (v/v) con 100 g/l de formaldehdo, o el
alcohol con 2 g/l de cloro libre. Las soluciones acuosas de etanol al 70%
(v/v) pueden utilizarse en la piel y las superficies de trabajo de las mesas de
laboratorio
Dado que el etanol puede secar la piel, a menudo se mezcla con
emolientes. Las friegas de alcohol se recomiendan para descontaminar
manos ligeramente sucias en situaciones en las que no es
posible o prctico lavarlas.
Sin embargo, hay que recordar que el etanol quiz no mate todos los tipos
de virus sin envoltura
lipdica.
Los alcoholes son voltiles e inflamables y no deben utilizarse en las
proximidades de llamas desnudas.
Las soluciones de trabajo deben almacenarse en recipientes apropiados
para evitar la evaporacin. Los alcoholes pueden endurecer el caucho y
disolver ciertos tipos de cola.
Los frascos que contengan soluciones con alcohol deben rotularse con
claridad para evitar que sean tratados en la autoclave.

OXIDO DE ETILENO
Da lugar a la inactivacin de cualquier tipo de virus
DISOLVENTES DE LPIDOS
El ter inactiva con facilidad a los virus envueltos pero no a los desnudos
Descontaminacin de espacios y superficies
La descontaminacin del espacio, el mobiliario y el equipo de laboratorio
requiere una combinacin de desinfectantes lquidos y gaseosos.
Las superficies pueden descontaminarse con una solucin de hipoclorito
sdico (NaOCl); una solucin que contenga 1 g/l de cloro libre puede ser
apropiada para la limpieza general, pero se recomiendan soluciones ms
potentes (5 g/l) cuando se trate de situaciones de alto riesgo.
Para la descontaminacin de espacios y superficies, las soluciones de leja
pueden sustituirse por frmulas que contengan un 3% de perxido de
hidrgeno (H2O2).
Las salas y el equipo pueden descontaminarse por fumigacin con
formaldehdo gaseoso, que se obtiene calentando paraformaldehdo o
hirviendo formol. Este procedimiento es sumamente peligroso y debe ser
realizado por personal especialmente adiestrado. Todas las aberturas del
local (ventanas, puertas, entre otros) deben cerrarse con cinta adhesiva o
un material anlogo antes de que se desprenda el gas.
La fumigacin debe efectuarse a una temperatura ambiente de al menos 21
C y una humedad relativa del 70%.
Tras la fumigacin, la zona debe ventilarse completamente antes de permitir la
entrada de personal. Toda persona que entre en la sala antes de la ventilacin
habr de llevar mascarillas respiratorias apropiadas. Para neutralizar el
formaldehdo puede utilizarse bicarbonato amnico gaseoso.
La fumigacin de espacios reducidos con vapores de perxido de hidrgeno
tambin es eficaz, pero requiere equipo especializado para generar el vapor.
Esterilizacin Proceso que
microorganismos y esporas.1

mata

elimina

todas

las

clases

de

Esterilizacin
La esterilizacin comprende medios fsicos y qumicos para eliminar la totalidad
de microorganismos viables en el material a utilizar. El calor es uno de los
mtodos fsicos ms empleados en la esterilizacin. Cuando la temperatura se
eleva a 50-70 C se producen efectos letales sobre las bacterias, hongos y la
mayora de los virus.
Los mtodos empleados para dicho fin en el laboratorio son: la presin con
vapor de agua y el calor en seco. El material y los objetos que se han de
esterilizar deben ajustarse totalmente. Esteprocedimiento debe realizarse el
recipiente de modo que el vapor pueda circular sin dificultad.
Para realizar una buena esterilizacin se emplea el calor hmedo (autoclave) y
el calor seco (horno). El mecanismo por el que acta la esterilizacin por calor
se basa en la desnaturalizacin de protenas.
La esterilizacin por calor hmedo se realiza en el autoclave, donde se
produce vapor saturado, ya que al inicio se expulsa el aire que se encuentra

dentro de la cmara del autoclave, de esta forma se alcanza una presin de

120 lb 6.8 kg de presin con una temperatura de 121 C, y para destruir
todas las endoesporas se toma un tiempo de 10 a 15 minutos.
Precauciones para el uso de autoclaves:
Todo el material debe colocarse en pequeas bandejas para facilitar la e
vacuacin del aire y permitir una buena penetracin del calor.
El autoclave no debe sobrecargarse para que el calor penetre en forma u
niforme.
Se realizar peridicamente el mantenimiento e inspeccin del autoclave
por tcnicoscalificados.
La autoclave debe mantenerse limpia y se debe cambiar el agua con fre
cuencia.
Tiene como ventaja el no corroer el material de metal y su principal desventaja
es el tiempo, adems de resultar inapropiada para materiales de goma y
plstico.
En la esterilizacin por calor seco, el material se coloca en un horno a
temperatura de 160 a 170 C durante 2-3 horas, as, la destruccin de los
microorganismos se produce por la oxidacin de los constituyentes celulares y
la desnaturalizacin de las protenas.
BIBLIOGRAFA
1. file:///D:/Users/NADIA/Downloads/manual%20de%20bioseguridad%20en
%20el%20laboratorio%20who.pdf
2. http://veterinaria.uaemex.mx/_docs/607_974_MP%20Virolog%C3%ADa.pdf
3. https://es.scribd.com/doc/71027900/BIOSEGURIDAD-VIROLOGIA