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INSTITUTO CIENTFICO MOTOLINIA A. C.

BACHILLERATO

Prctica de Laboratorio #2

Extraccin de ADN humano


(cido desoxirribonucleico)

Introduccin:
todos los seres vivos, sean microorganismos, hongos, plantas o animales, contienen ADN; la
cual es una molcula enorme, que se encuentra guardada dentro de las clulas y protegida por
protenas muy especficas. La molcula de ADN puede estar formada por miles de bases
nitrogenadas, cada molcula de ADN es diferente de otra por la secuencia, el orden en que estn
colocados sus nucletidos. As, el ADN de una rana, un pato y un ser humano est formado por
nucletidos similares, pero acomodados en secuencias diferentes

Objetivo: extraer y obtener el material gentico (ADN) a partir de una muestra del epitelio interno
de la boca separndolo de las estructuras que lo envuelven

Materiales:
Equipo.
- Vaso de precipitados de 500 ml
- 2 Vasos de precipitados de 250 ml
- 2 Tubo de ensayo
- Gradilla
- Varilla de vidrio
- 2 cucharas de plstico
- Porta objetos- cubre objetos
- Microscopio compuesto
Reactivos y material biolgico.
- 500 ml Agua mineral
- 500 ml Detergente lquido para trastes
- Alcohol etlico al 70- 95% muy fro
- Cloruro de sodio (sal de mesa)
- Hielos suficientes

Metodologa:
- Prepara los tubos de ensayo con alcohol etlico y ponlos a enfriar lo mximo que sea posible,
mantenlos dentro del vaso de precipitados de 500 ml en bao con hielo, mientras se realizan los
siguientes pasos.
- Coloca en el vaso de 250 ml unos 30 ml de agua mineral y aade media cucharada de sal
comn, as como 5 gotas de detergente lquido
- Poner un poco de agua en el otro vaso de 250 ml y enjuagarse la boca enrgicamente durante
al menos un minuto para arrastrar el mayor nmero posible de clulas de descamacin de la
mucosa bucal (antes de hacerlo conviene haber tragado saliva para eliminar la accin de las
enzimas contenidas en ella).
- Expulsa el agua con tejido en el vaso de precipitados sobre la solucin anterior. Deja actuar 10
minutos, removiendo de vez en cuando suavemente para disolver estos componentes evitando
la formacin de espuma.
- A continuacin, aade la solucin suavemente a cada uno de los tubos de ensayo que contiene
el alcohol frio, dejndola resbalar por la pared del tubo de manera inclinada.

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La solucin es ms densa y turbia que el alcohol, depositndose en el fondo del tubo; deja
reposar durante 2 o 3 minutos sin moverlo en absoluto.
El alcohol formar un sobrenadante por encima de la fase acuosa, en la que se encuentra el
ADN en disolucin, provocando que ste se precipite.
Esperar unos minutos mientras el ADN precipita en la interfase alcohol- agua formando una
masa blanquecina que asciende lentamente formando un grumo de aspecto algodonoso.
Tras unos minutos de reposo el ADN tiende a subir hacia la superficie del alcohol, entonces se
podr recoger utilizando la varilla de vidrio o una pipeta Pasteur.
Coloca el ADN sobre el porta objetos, cbrelo y obsrvalo en el microscopio.

Resultados:
- Elabora esquemas o dibujos a manera de serie, en tu libreta de TSB, de cada uno de los pasos
que seguiste en la prctica de laboratorio
-

Elabora un dibujo de la estructura del ADN donde se visualicen el fosfato, la desoxirribosa, el


enlace fosfodiester, el puente de hidrogeno y las bases nitrogenadas (A, C, T, G)

Contesta:
1. Cul es la funcin del ADN en la clula?
2. Qu estructura de la clula protege el ADN?
3. Qu funcin tiene el detergente para la extraccin del ADN? Recuerda que los
detergentes actan sobre los lpidos
4. A qu sustancia es ms afn el ADN, al agua o al alcohol?
5. Completa las siguientes secuencias, colocando la complementaria para cada una
AGGCGTATTACGACGTACGATTTAAGCGAGCAGT
TACTAGTACGTAATACGTACACGTACGGCATTACT

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