Manual de Inmunologia

UNIVERSIDAD AUTONOMA DE BAJA CALIFORNIA
FACULTAD DE MEDICINA Y PSICOLOGIA

MANUAL DE INMUNOLOGIA
Cdigo: L1M-N3-004
No. de Revisin: 1
Efectividad: 2008-1
Facultad de Medicina y Psicologa

Manual de Laboratorio de Inmunologa
Laboratorio 1
Autor(es): Biol. Martha Rosales Aguilar
Firma:
Fecha: Julio 2007
Revis: Q.F.B. Ma. de la Luz Ibarra Arias
Firma:
Fecha: Julio 2007
Autoriz: Dra. Sara Corts Bargall
Firma:
Fecha: Julio 2007

Cdigo: L1M-N3-004
No. de Revisin: 1
Efectividad: 2008-1
NDICE
Contenido
Pgina
Introduccin..3
Programa terico.....4
Reglamento del laboratorio...........5
Prctica 1: Clulas del linaje inmunolgico...6
Prctica 2: Conteo leucocitario......8
Prctica 3: Fagocitosis.......10
Prctica 4: Complemento C3....12
Prctica 5: Complemento C4.......14
Prctica 6: Velocidad de sedimentacin globular.....16
Prctica 7: Perfil reumtico...18
Prctica 8: IgE...20
Prctica 9: Antgeno carcinoembrionario.....22
Prctica 10: Antgeno de reaccin febril.........24
Prctica 11: Anticuerpo VIH.....26
Prctica 12: Antgeno de superficie de hepatitis B28
Prctica 13: Grupo sanguneo, Rh y pruebas cruzadas..31
Prctica 14: Tuberculina Hipersensibilidad retardada.33

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No. de Revisin: 1
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Inmunologa
Manual de prcticas
INTRODUCCIN
La palabra inmunologa deriva del latn immuzlis, que significa sin carga,
entendindose por carga una enfermedad. La Inmunologa es la rama de las ciencias
biolgicas que se ocupa del estudio de las respuestas de defensa a estmulos
exgenos o endgenos, y de sus desviaciones patolgicas.
La Inmunologa es una rama de la medicina que constantemente proporciona
conocimientos y revela cambios en la naturaleza y en el desarrollo de las
enfermedades.
El propsito de este manual es ayudar a los alumnos de medicina a establecer
la aplicacin de los fundamentos tericos del programa de Inmunologa, y a
encontrar en este conjunto de conocimientos una herramienta de apoyo y de
diagnstico para la futura prctica profesional.
El objetivo consiste en instruir al alumno acerca del conocimiento prctico, del
diagnstico clnico y de las enfermedades comunes y no comunes del sistema
inmunolgico.

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Inmunologa
Manual de prcticas
PROGRAMA TERICO
Unidad I Inmunidad Natural
Unidad III Efectos deseables de la
1. Introduccin
Inmunidad
2. Fagocitosis
1. Inmunidad a bacterias y virus
3. Sistema del complemento
2. Inmunidad a parsitos
4. Inflamacin
3. Inmunidad a hongos y tumores
Unidad II Inmunidad Adquirida
Unidad IV Efectos indeseables de la
1. rganos linfoides primarios y
Inmunidad
secundarios
1. Hipersensibilidad
2. Linfocitos
2. Autoinmunidad
3. Molculas de reconocimiento
3. Rechazo de transplantes
4. Complejo mayor de
histocompatibilidad
Unidad V Inmunodeficiencia
5. Receptor T
1. Inmunodeficiencia congnita
6. Inmunoglobulinas
2. Inmunodeficiencia adquirida
7. Citocinas
8. Antgenos y haptenos
Unidad VI Inmunoterapia
9. Respuestas de los anticuerpos
1. Vacunas
10. Respuesta inmune celular
2. Inmunosupresin
11. Regulacin de la respuesta inmune
3. Inmunoestimulacin

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Inmunologa
Manual de prcticas
REGLAMENTO DEL LABORATORIO

Evaluacin del laboratorio
a) Prcticas y entrega de reporte semanal en libreta por equipo: 50%.
b) Proyecto de investigacin: 50%.
c) 80% de asistencia.
Las prcticas que no sean realizadas de acuerdo al calendario establecido estarn sujetas a
nueva programacin, bajo el consentimiento de la coordinacin del laboratorio y bajo el acuerdo
mutuo de docente y alumnos.
Reglamento del laboratorio
1. El reglamento deber ser ledo ntegramente en la primera sesin de trabajo.
2. El alumno deber presentarse al laboratorio habiendo consultado la prctica correspondiente.
3. El alumno deber leer con detenimiento la tcnica a seguir, exponiendo al docente las dudas
surgidas, antes de iniciar la prctica.
4. No podr realizarse la prctica si el docente no se presenta en el laboratorio. Los alumnos
debern permanecer fuera del laboratorio hasta la llegada del docente.
5. El alumno deber usar bata blanca, larga y limpia, y deber portarla desde antes de ingresar al
laboratorio.
6. El alumno que tenga el cabello largo deber mantenerlo recogido para evitar accidentes.
7. Queda prohibido fumar, comer o beber dentro del laboratorio.
8. El alumno deber mantener el orden dentro del laboratorio.
9. El alumno deber dejar limpia el rea de trabajo una ver terminada la prctica. La basura
deber colocarse en los recipientes correspondientes; las sustancias contaminadas, en depsitos
adecuados.
10. El alumno deber lavarse las manos al finalizar la prctica.
11. El alumno deber asegurarse de que las llaves de agua y gas queden debidamente cerradas.
12. El docente y los alumnos debern completar la prctica puntualmente y de preferencia
saldrn del laboratorio 10 minutos antes de la siguiente clase.
13. No debern permanecer alumnos en el laboratorio tras la salida de su docente.
14. El alumno con ms del 20% de inasistencias no podr reponer prcticas.

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Manual de prcticas
Prctica 1: CLULAS DEL LINAJE INMUNOLGICO
Inmunidad Natural
OBJETIVO
Diferenciar el sistema de defensa del organismo humano, desde su origen hasta
el foco de infeccin o el encuentro con el antgeno.
FUNDAMENTO
Los leucocitos (glbulos blancos) son clulas que circulan por la sangre con la
funcin de combatir infecciones o cuerpos extraos. Son parte de las defensas
inmunitarias del organismo, pero en ocasiones pueden atacar los tejidos normales
del cuerpo.
Existen dos grupos de leucocitos: los granulocitos (neutrfilos, basfilos y
eosinfilos) y los agranulocitos (monocitos y linfocitos).
Los neutrfilos defienden el organismo contra bacterias y otros
microorganismos. Se les puede denominar neutrfilos en banda o segmentados,
dependiendo de si presentan o no divisiones de sus ncleos en 3 a 5 lbulos. Si el
nmero es mayor, se habla de neutrfilos hipersegmentados.
Los basfilos poseen grnulos de heparina e histamina, mediadores de la
inflamacin. Actan en estados de hipersensibilidad retardada. La liberacin masiva
del contenido de sus grnulos puede causar choque anafilctico, mortal si no es
controlado.
Los eosinfilos poseen actividad fagoctica: se comen los agentes extraos.
Sus grnulos tienen sustancias que degradan lo fagocitado, sobre todo las larvas de
parsitos. Adems, inician y regulan las reacciones alrgicas.
Los monocitos poseen actividad fagoctica bactericida. Ante estmulos qumicos
pueden seguir a los neutrfilos. Pueden fijarse a tejido de bazo, hgado y pulmn,

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dando lugar a macrfagos tisulares que forman el sistema retculo-endotelial,

encargado de remover material extrao circulante en sangre.
Los linfocitos B constituyen la minora del pool linfocitario circulante (10%20%). Maduros, pasan de la mdula sea a la sangre y se dirigen hacia los rganos
linfticos perifricos para ubicarse en los folculos linfoides. Bajo estmulo
antignico, se activan y proliferan formando el centro germinal en el interior del
folculo linfoide. Pueden seguir un proceso de estimulacin hasta transformarse en
inmunoblastos, y stos en clulas plasmticas secretoras de inmunoglobulinas.
Pueden tambin regresar al estado quiescente de pequeo linfocito B con memoria
inmunolgica, para pasar a formar parte del manto o corona.
Los linfocitos T forman una poblacin mayoritaria. En el adulto normal oscilan
entre 65% y 75%, con variaciones segn la edad. Ejercen sus efectos mediante la
liberacin de protenas solubles, citocinas, encargadas de la transmisin de seales
a otras clulas, o bien mediante interacciones directas con otras clulas.
MUESTRA
Sangre venosa con anticoagulante EDTA. Tubo morado
MATERIAL
Agujas
Jeringas
Torundas
Torniquete
Alcohol
Microscopio ptico
Portaobjetos
Tincin de Wright
Aceite de inmersin
Papel para microscopio
MTODO
1) Mezclar la sangre durante 3 minutos.
2) Realizar un frotis sanguneo.
Poner una gota de sangre sobre un portaobjetos y con otro portaobjetos limpio, se deslizara la
gota sin hacer presin, pero uniforme.
Dejar secar y despus se fija con metanol, sumergindolo y sacndolo rpidamente, despus
se introducir en el colorante de eosina( rojo) por 15 segundos, se enjuaga y luego se
introducir en el colorante azul de policromo por 15 segundos se enjuaga y se deja secar.
3) Leer en el microscopio bajo objetivos 10x y 40x.
4) Identificar las clulas y anotar los resultados.
RESULTADOS

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CONCLUSIN
BIBLIOGRAFA
Roitt, Brostoff, Male. Inmunologa. 5ta edicin.

Charles, Janeway. Inmunobiologa: el sistema inmunitario en condiciones de salud y enfermedad.
Turgeon (1990). Immunology and serology in laboratory medicine. Mosby Company. 8va edicin.
Margni (1997). Inmunologa e inmunoqumica. Editorial Panamericana. 6ta edicin. Pg 290-295.
Alters, Abelson (1996). Interpretation of the complete blood count.

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Inmunologa
Manual de prcticas
Prctica 2: CONTEO LEUCOCITARIO

Inmunidad Natural
OBJETIVO
Comprender la importancia de las clulas inmunolgicas con relacin a la
presencia de agentes agresores o lesiones.
FUNDAMENTO
Los leucocitos (glbulos blancos) son clulas que circulan por la sangre con la funcin de
combatir infecciones o cuerpos extraos. Son parte de las defensas inmunitarias del organismo, pero
en ocasiones pueden atacar los tejidos normales del cuerpo.
Existen dos grupos de leucocitos: los granulocitos (neutrfilos, basfilos y eosinfilos) y los
agranulocitos (monocitos y linfocitos).
Los neutrfilos defienden el organismo contra bacterias y otros microorganismos. Se les puede
denominar neutrfilos en banda o segmentados, dependiendo de si presentan o no divisiones de sus
ncleos en 3 a 5 lbulos. Si el nmero es mayor, se habla de neutrfilos hipersegmentados.
Los basfilos poseen grnulos de heparina e histamina, mediadores de la inflamacin. Actan
en estados de hipersensibilidad retardada. La liberacin masiva del contenido de sus grnulos puede
causar choque anafilctico, mortal si no es controlado.
Los eosinfilos poseen actividad fagoctica: se comen los agentes extraos. Sus grnulos
tienen sustancias que degradan lo fagocitado, sobre todo las larvas de parsitos. Adems, inician y
regulan las reacciones alrgicas.
Los monocitos poseen actividad fagoctica bactericida. Ante estmulos qumicos pueden seguir
a los neutrfilos. Pueden fijarse a tejido de bazo, hgado y pulmn, dando lugar a macrfagos
tisulares que forman el sistema retculo-endotelial, encargado de remover material extrao circulante
en sangre.
Los linfocitos B constituyen la minora del pool linfocitario circulante (10%-20%). Maduros,
pasan de la mdula sea a la sangre y se dirigen hacia los rganos linfticos perifricos para ubicarse
en los folculos linfoides. Bajo estmulo antignico, se activan y proliferan formando el centro
germinal en el interior del folculo linfoide. Pueden seguir un proceso de estimulacin hasta
transformarse en inmunoblastos, y stos en clulas plasmticas secretoras de inmunoglobulinas.
Pueden tambin regresar al estado quiescente de pequeo linfocito B con memoria inmunolgica, para
pasar a formar parte del manto o corona.

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Los linfocitos T forman una poblacin mayoritaria. En el adulto normal oscilan entre 65% y
75%, con variaciones segn la edad. Ejercen sus efectos mediante la liberacin de protenas solubles,
citocinas, encargadas de la transmisin de seales a otras clulas, o bien mediante interacciones
directas con otras clulas.
MUESTRA
Sangre venosa con anticoagulante EDTA.
MATERIAL
Agujas
Jeringas
Torundas
Torniquete
Alcohol
Pipetas de leucocitos
Agitador de pipetas blancos
Boquillas para pipetas
Microscopio ptico
Portaobjetos
Cmara de Newbauer
Solucin de Turk
Tincin de Wright
Aceite de inmersin
Contador de leucocitos
Cronmetro
MTODO
1) Mezclar la sangre durante 5 minutos.

2) Tomar una alcuota de sangre con la pipeta de leucocitos hasta el 0.5.l
3) Limpiar la punta de la pipeta sin perder lquido.
4) Llenar la pipeta con solucin de Turk hasta el 1.1.
5) Mezclar el contenido de la pipeta en el agitador de pipetas.
6) Desechar las primeras 3 gotas de la pipeta de blancos.
7) Depositar la cuarta gota de la solucin en la cmara de Newbauer.
8) Leer la cmara en el microscopio bajo objetivos 10x y 40x.
9) Hacer el conteo en los cuadrantes para leucocitos (4 cuadrantes).
10) Multiplicar el total por 100.
Nota: los leucocitos se observan como puntos formes luminosos y oscuros.
a) Realizar un frotis sanguneo. Con la tcnica que se menciono en la practica anterior
b) Leer en el microscopio bajo 40x.
c) Contar los leucocitos hasta 100 con ayuda del contador.
Cules son los valores normales del recuento leucocitario?

Qu indica un valor elevado en el recuento?
RESULTADOS
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CONCLUSIN
BIBLIOGRAFA

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Manual de prcticas
Prctica 3: FAGOCITOSIS
Inmunidad Natural
OBJETIVO
Comprender el proceso de fagocitosis in Vitro y aplicar los conocimientos
tericos en casos de dao tisular, traumas o invasin de mltiples microorganismos
o sustancias.
FUNDAMENTO
El sistema fagoctico mononuclear cumple dos funciones principales, cada
una llevada a cabo por un tipo de clula procedente de mdula sea:
Macrfagos profesionales: eliminan partculas antignicas.
Clulas presentadoras de antgeno (CPA): ingieren, procesan y presentan
los antgenos a los linfocitos T.
Pertenecen al sistema fagoctico mononuclear tanto los monocitos (macrfagos)
como los granulocitos.
Los monocitos estn presentes en la sangre. Presentan un tamao de 10-18
m de dimetro. Su ncleo tiene generalmente forma de herradura y suele contener
grnulos azurfilos. Poseen membranas irregulares y muchos lisosomas con
peroxidasa e hidrolasas cidas, importantes en la destruccin intracelular de los
microorganismos. Una vez extravasados son llamados macrfagos.
Los granulocitos se dividen a su vez en neutrfilos, basfilos y eosinfilos, en
funcin a la coloracin cida o bsica de sus grnulos citoplasmticos.
Los neutrfilos (polimorfonucleares) son los ms numerosos. Poseen un
ncleo lobulado de forma irregular (polimrfico). Intervienen en la defensa,
destruccin de clulas viejas y regeneracin tisular. Liberan interleucina 1, un
mensajero inmunitario. Realizan un proceso de heterofagia que les causa la muerte.
La fagocitosis constituye una de las principales defensas del organismo contra
infecciones producidas por bacterias y hongos. El proceso comprende pasos
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secuenciales: quimiotaxis, adherencia del antgeno a la superficie de los fagocitos,

captacin/ingestin (fagocitosis) y muerte intracelular mediada por mecanismos
oxgeno-dependientes o independientes.
Los fagocitos poseen receptores para el componente C3b del sistema del
complemento, as como para la regin constante de las inmunoglobulinas. Esto
permite que los microorganismos opsonizados puedan adherirse, facilitando la
fagocitosis.
MUESTRA
Sangre venosa con anticoagulante heparina.
Una cepa pura de Staphylococcus aureus, coagulasa negativo.
MATERIAL
Agujas
Jeringas
Torundas
Torniquete
Alcohol
Asa de siembra ,mechero de alcohol
Tubos de ensayo de 12 x 75 mm
Pipetas Pasteur con bulbo
Microscopio ptico
Aceite de inmersin
Portaobjetos
Tincin de Wright
Termmetro
Bao Mara a 37C
Cronmetro
MTODO
1) Identificar 1 tubo de ensayo de 12 x 75 mm;

2) Agregar 2-3 gotas de sangre (MUESTRA) de la cepa Staphylococcus aureus al tubo.
3) Incubar el tubo preparado en bao Mara por 30 minutos.
4) Realizar un frotis sanguneo de la muestra que ser el control negativo.
Y se realizara otro frotis con la muestra del tubo incubado y con la cepa bacteriana
5) Teir los frotis con la tcnica de Wright.
6) Poner una gota de aceite de inmersin a los frotis y distribuirlo homogneamente.
7) Revisar los frotis en el microscopio bajo el objetivo de 100x.
Describa el proceso de la fagocitosis.

Qu papel juega en fagocitosis el complemento C3b y C4b?
Qu defectos pueden presentar los fagocitos; qu consecuencias traen consigo?
RESULTADOS
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CONCLUSIN
BIBLIOGRAFA

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Manual de prcticas
Prctica 4: COMPLEMENTO C3
Inmunidad Natural
OBJETIVO
Comprender la importancia del sistema del complemento en el diagnstico.
FUNDAMENTO
El sistema del complemento es un sistema de alrededor de 30 protenas
sricas que interaccionan, formando una cascada enzimtica que amplifica la
respuesta humoral.
El CH50 y CH100 son pruebas de la actividad del sistema del complemento,
para determinar el desarrollo de una enfermedad, para monitorear la gravedad de la
misma o para establecer la eficacia de un tratamiento. Por ejemplo, pacientes con
lupus eritematoso activo pueden tener niveles de C3 y C4 bajos.
La cascada del complemento suele iniciarse por complejos antgenoanticuerpo. El producto final es la unidad de ataque a membrana, que crea
agujeros en las membranas bacterianas, induciendo su destruccin.
El C3, componente de la cascada del complemento, se fija a las bacterias y las
destruye directamente.
Existen productos secundarios de la cascada del complemento que atraen
ciertos leucocitos y aumentan su capacidad para ingerir y destruir bacterias.
Algunas bacterias no requieren la presencia de anticuerpos especficos para activar
el sistema de complemento.
MUESTRA
Suero. Tubo rojo
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MATERIAL
Efectividad: 2008-1
Agujas
Jeringas
Torundas
Torniquete
Alcohol
Kit para complemento C3
centrifuga
Pipetas serolgicas
Micropipetas y puntas
Espectrofotmetro
Cronmetro
MTODO
El descrito en el kit para complemento C3.

Los resultados se deben extrapolar con la curva patron de Kit de complemento3
RESULTADOS
CONCLUSIN
BIBLIOGRAFA

OTRAS FUENTES
http://www.nlm.nih.gov/medlineplus/spanish/ency/article/003354.htm#Razones%20por%20l
as%20que%20se%20realiza%20el%20examen
http://pcs.adam.com/ency/article/003354.htm
http://www.tuotromedico.com/temas/estudio_complemento.html
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Inmunologa
Manual de prcticas
Prctica 5: COMPLEMENTO C4
Inmunidad Natural
OBJETIVO
Comprender la importancia del sistema del complemento en el diagnstico.
FUNDAMENTO
El sistema del complemento es un sistema de alrededor de 30 protenas
sricas que interaccionan, formando una cascada enzimtica que amplifica la
respuesta humoral.
La activacin del sistema del complemento y su fijacin a microorganismos
facilita la eliminacin del antgeno y genera una respuesta inflamatoria. La mayora
de los componentes del sistema se sintetizan en el hgado.
Existen varios receptores especficos para los componentes del sistema,
localizados en distintas poblaciones de leucocitos.
Las consecuencias de la activacin y fijacin del sistema del complemento
incluyen:
Lisis del microorganismo o clula diana.
Opsonizacin; facilitacin de la fagocitosis.
Quimiotaxis sobre fagocitos.
Control de la respuesta inflamatoria.
Amplificacin de la respuesta humoral.
Eliminacin de inmunocomplejos.
Va de las lectinas.
Conexin del sistema de inmunidad adaptativa por medio de la va clsica.
Conexin del sistema de inmunidad natural por medio de la va alterna.
La prueba de complemento C4 se realiza para determinar la concentracin de
C4, componente srico del sistema del complemento.
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MUESTRA
Suero.
MATERIAL
Agujas
Jeringas
Torundas
Torniquete
Alcohol
Kit para complemento C4
centrifuga

Pipetas serolgicas
Espectrofotmetro
Cronmetro
MTODO
El descrito en el kit para complemento C4. Se requiere de la curva patrn para extrapolar los
datos de la prctica.
RESULTADOS
Cmo encontrara C4 en caso de lupus eritematoso?
Qu indicara un valor bajo de C4?
Cules son los valores de referencia de C4?
Explique la va del complemento.
CONCLUSIN
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BIBLIOGRAFA

OTRAS FUENTES
http://www.nlm.nih.gov/medlineplus/spanish/ency/article/003354.htm#Razones%20por%20l
as%20que%20se%20realiza%20el%20examen
http://pcs.adam.com/ency/article/003354.htm
http://www.tuotromedico.com/temas/estudio_complemento.html
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Manual de prcticas
Prctica 6: VELOCIDAD DE SEDIMENTACIN GLOBULAR

Inmunidad Natural
OBJETIVO
Aprender a dar seguimiento a una respuesta inmunolgica idioptica, donde hay
inflamacin sin foco de origen.
FUNDAMENTO
La velocidad de sedimentacin globular (VSG) es la precipitacin de los
eritrocitos en un tiempo determinado (1-2 horas), relacionada directamente con la
tendencia de formar cmulos (pilas de monedas) y con la concentracin plasmtica
de protenas (globulinas y fibringeno). La capacidad y velocidad depende de la
atraccin de la superficie de los eritrocitos.
La VSG es una de dos pruebas para estimar y medir la inflamacin en el
organismo. La otra prueba es la protena C reactiva (PCR).
Los principales usos de la VSG son:
Detectar procesos inflamatorios o infecciosos.
Discriminar presencia de enfermedad.
Control de la evolucin de enfermedades crnicas o infecciosas.
Detectar procesos inflamatorios crnicos ocultos o tumores.
La VSG se ve afectada por el tamao de los eritrocitos, la concentracin,
anisocitosis y poiquilocitosis.
Valores de referencia
Recin nacidos
hasta 2 mm
Lactantes
hasta 10mm
Escolares
hasta 11mm
Hombres jvenes
hasta 10mm
Hombres adultos
hasta 12mm
Hombres mayores
hasta 14mm
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Efectividad: 2008-1
Mujeres jvenes
hasta 10mm
Mujeres adultas
hasta 19mm
Mujeres mayores
hasta 20mm
MUESTRA
Sangre total. Tubo morado con edta
MATERIAL
Agujas
Jeringas
Torundas
Torniquete
Alcohol
MTODO
Pipetas serolgicas
Tubo
con
liquido
para
sedimentacin
Tubo sedimentacin con escala
Cronometro
Pipetas desechables
1) Rotular el tubo para la VSG.

2) Agregar 1 mL de sangre con una pipeta desechable.
3) Insertar con cuidado el tubo plstico con escala con presin, para que suba la sangre.
4) Depositar en una gradilla y registrar y tomar una la hora.
5) Al final de la hora tomar la lectura del tubo de sedimentacin (hasta donde se los eritrocitos
formen una banda blanca y sea el limite con el plasma).
RESULTADOS
CONCLUSIN
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No. de Revisin: 1
BIBLIOGRAFA
Efectividad: 2008-1

Taboada. Anemias en pediatra.
(1983). Hematology oncology. McGraw-Hill. Pg 253-260.
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No. de Revisin: 1
Efectividad: 2008-1
Inmunologa
Manual de prcticas
Prctica 7: PERFIL REUMTICO

Inmunidad Natural
OBJETIVO
Conocer las formas de determinacin de la causa de inflamacin para poder dar
el seguimiento adecuado.
FUNDAMENTO
La protena C reactiva (PCR) es una protena producida en el hgado durante
la inflamacin. Reacciona con el sistema del complemento, de ah su importancia
biolgica.
El factor reumatoide (FR) es un anticuerpo (Ac) reactivo contra la fraccin
constante (Fc) de la inmunoglobulina G (IgG). Es producido por los linfocitos B y
est compuesto por dos cadenas pesadas y dos cadenas ligeras, cada una de ellas
con una regin constante y una regin variable, tal como las inmunoglobulinas. Se
piensa que los linfocitos B-FR presentan los antgenos de los inmunocomplejos a los
linfocitos T-Helper especficos.
El FR circula por la sangre y, en caso de patologa, se une de manera anormal a
inmunoglobulinas propias anormales (IgG), producidas por linfocitos anormales de
las articulaciones. En este caso se habla de artritis reumatoide.
La estreptolisina O es una citolisina oxgeno-lbil que provoca una beta
hemlisis alrededor de las colonias de Streptococcus pyogenes del grupo A en placas
de agar sangre. Es una de las tantas exotoxinas producidas por la bacteria. Una
persona afectada por el estreptococo desarrolla anticuerpos frente a la estreptolisina
O: la antiestreptolisina O (ASLO).
MUESTRA
Suero libre de lipemia y hemlisis.
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No. de Revisin: 1
MATERIAL
Agujas
Jeringas
Torundas
Torniquete
Kit para PCR
Kit para factor reumatoide
Placas para ltex
Efectividad: 2008-1
Kit para antiestreptolisina
Aplicadores de madera
Cronmetro
Rotator
Pipetas desechables
Lmpara para leer placas de ltex
MTODO
Adems del descrito en los kit:
1) Rotular en una laminilla un control negativo, un positivo y el o los problemas.
2) Agregar una gota de suero problema o una por cada problema.
3) Adicionar una gota de reactivo de partculas de ltex de protena C reactiva a cada muestra a
al control negativo y positivo.
4) Mezclar con un aplicador de madera y por separado cada una de las muestra incluyendo el
control.
5) Mezclar a 100 rpm en el rotator durante 2 minutos.
6) Observar bajo una lmpara.
7) Comparar el problema con los controles.
8) si las pruebas resultan positivas hay que realizar la tcnica de cuantificacin leyendo el
instructivo de las pruebas
Nota: Las pruebas no deben tomarse como pruebas de diagnostico nicas.
Qu es la artritis reumatoide y que relacin guarda con la PCR?

Explique la relacin existente entre la PCR y el corazn.
Cul es la base de la prueba de antiestreptolisina y para qu sirve sta?
RESULTADOS
24

Cdigo: L1M-N3-004
No. de Revisin: 1
Efectividad: 2008-1
CONCLUSIN
BIBLIOGRAFA

OTRAS FUENTES
http://www.arthritis.org/Espanol/enfermedades/tipos_de_artritis/default.asp
http://abcnews.go.com/sections/living/Healthology/HO_autoimmunity.html
25

Cdigo: L1M-N3-004
No. de Revisin: 1
Efectividad: 2008-1
Inmunologa
Manual de prcticas
Prctica 8: IgE
Inmunidad Adquirida
OBJETIVO
Cuantificar el valor de IgE total y relacionarlo con etiologas principalmente
ambientales.
FUNDAMENTO
La IgE es el anticuerpo responsable de la mayora de las reacciones alrgicas.
Slo representa el 0.002% de las inmunoglobulinas (0.3 mg/mL suero), pero es
reactiva y eficaz. Su peso es de 200,000 Daltons. Presenta un dominio adicional (C2)
y es la mediadora de las reacciones de hipersensibilidad inmediata (alergia), como
fiebre del heno, asma extrnseco o choque anafilctico.
Las IgE se unen a receptores especficos para Fc de IgE en la membrana de
mastocitos tisulares y basfilos sanguneos. Cuando dos molculas de IgE unidas a
sus receptores se entrecruzan con el alergeno especfico, se produce la
degranulacin y la liberacin extracelular de histamina y citocinas, as como la
sntesis de novo de eicosanoides (prostaglandinas, tromboxanos y leucotrienos).
Todo lo anterior produce los signos y sntomas de la alergia.
La IgE tambin confiere proteccin local frente a patgenos grandes, como los
helmintos. Si el parsito ha logrado atravesar mucosas e IgA, puede ser reconocido
por IgE especficas, previamente unidas a receptores de mastocitos. Ello
desencadena una reaccin de inflamacin aguda en que aminas vasoactivas como la
histamina, y factores quimiotcticos, atraen polimorfonucleares y activan IgG,
complemento y granulocitos. En especial, los eosinfilos reconocen al parsito
cubierto por IgG, y colaboran en su destruccin.
MUESTRA
Suero libre de hemolisis
MATERIAL
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Cdigo: L1M-N3-004
No. de Revisin: 1
Efectividad: 2008-1
Agujas
Jeringas
Torundas
Torniquete
Kit para IgE
Equipo de quimioluminiscencia
Placas de reaccin
Cronmetro
MTODO
El descrito en el kit para IgE y la utilizacin del equipo automatizado.
RESULTADOS
CONCLUSIN
BIBLIOGRAFA

Turgeon (1990). Inmunology and serology in laboratory medicine. Mosby Company. 8va edicin.
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No. de Revisin: 1
Efectividad: 2008-1
Inmunologa
Manual de prcticas
Prctica 9: ANTGENO CARCINOEMBRIONARIO

Inmunidad Adquirida
OBJETIVO
Conocer la respuesta inmunolgica anti tumores.
FUNDAMENTO
El sistema inmunolgico y el cncer
El sistema inmunolgico ataca y elimina no slo bacterias y otras sustancias
extraas, sino tambin clulas cancerosas. Una clula cancerosa es una clula
propia cuya funcin biolgica ha sido alterada, de tal forma que no responde a los
mecanismos normales que controlan su crecimiento y reproduccin. Las clulas
cancerosas, de manera particular, pueden continuar creciendo y reproducindose.
Una buena parte de la defensa del organismo contra el cncer es llevada a cabo
por las clulas inmunolgicas, ms que por los anticuerpos circulantes. Por ejemplo,
la presencia de antgenos cancerosos puede activar ciertos leucocitos (linfocitos y, en
menor grado, monocitos), que buscan y destruyen clulas cancerosas.
Antgenos tumorales
Un antgeno es una sustancia reconocida por el sistema inmunolgico que
puede desencadenar una reaccin. Los antgenos se encuentran sobre la superficie
de todas las clulas, pero el sistema inmunolgico reconoce los antgenos propios y
no reacciona ante ellos. Cuando una clula se torna cancerosa, nuevos antgenos
(extraos) aparecen sobre su superficie y producen una reaccin. Esos nuevos
antgenos son llamados antgenos tumorales. Aun funcionando plenamente, el
sistema inmunolgico no siempre logra destruir las clulas cancerosas.
Se han identificado antgenos tumorales en cnceres como: melanoma
maligno, osteosarcoma y cnceres gastrointestinales. Las personas con cncer
pueden desarrollar anticuerpos contra antgenos tumorales, pero generalmente no
se produce una respuesta inmunolgica eficaz.
Ciertos antgenos tumorales liberados en sangre pueden ser detectados en el
laboratorio. Entones se denominan marcadores tumorales. Son valiosos en el
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Cdigo: L1M-N3-004
No. de Revisin: 1
Efectividad: 2008-1
diagnstico, tratamiento y monitoreo del cncer. Por ejemplo, si el marcador tumoral

desaparece en sangre, es posible que la terapia haya sido eficaz; si desaparece y ms
tarde reaparece, el cncer posiblemente haya reaparecido.
El antgeno carcinoembrionario (ACE) es un marcador tumoral en casos de
cncer de colon, mama, pncreas, vejiga, ovario y cuello del tero. Altas cantidades
pueden tambin detectarse en grandes fumadores y pacientes con cirrosis heptica
o colitis ulcerosa.
MUESTRA
Suero
MATERIAL
Agujas
Jeringas
Torundas
Torniquete
MTODO
Kit para ACE

Equipo de quimioluminiscencia
El descrito en el kit para ACE y la utilizacin del equipo automatizado.
RESULTADOS
29

Cdigo: L1M-N3-004
No. de Revisin: 1
Efectividad: 2008-1
CONCLUSIN
BIBLIOGRAFA

30

Cdigo: L1M-N3-004
No. de Revisin: 1
Efectividad: 2008-1
Inmunologa
Manual de prcticas
Prctica 10: ANTGENOS DE REACCIN FEBRIL

Efectos Deseables de la Inmunidad
OBJETIVO
Determinar los ttulos de anticuerpos producidos por infecciones bacterianas.
FUNDAMENTO
Infeccin
Las enfermedades infecciosas son provocadas por microorganismos que invaden
el organismo y se multiplican en l. La invasin inicia mediante su adherencia a las
clulas del hospedero, implicando acoplamientos precisos similares a los de una
llave con su cerradura. La permanencia en el punto de invasin o su extensin hacia
otros puntos depende de factores como: produccin de enzimas, toxinas (venenos
que se unen a molculas especficas de clulas diana a las cuales afectan), u otras
sustancias.
Para provocar la infeccin, los microorganismos deben multiplicarse una vez
ocurrida la invasin. Pueden entonces suceder tres eventos: primero, que se
multipliquen a tal grado que desborden las defensas inmunolgicas y puedan matar
al hospedero; segundo, que se alcance un estado de equilibrio donde ni los
microorganismos ni el enfermo ganen la batalla, desarrollndose una infeccin
crnica; y tercero, que el propio organismo, sin intervencin mdica, consiga
erradicar al microorganismo, reestablecer la salud y conseguir inmunidad duradera.
Muchos microorganismos resisten los mecanismos de defensa del organismo.
Algunas bacterias producen enzimas que rompen los tejidos, permitiendo su rpida
extensin. Otras pueden interferir con la produccin de anticuerpos o el desarrollo
de linfocitos T. Otras ms poseen cpsulas (cubiertas externas) que impiden la
fagocitosis.
Mecanismos de defensa del organismo
Durante la infeccin, la cantidad de leucocitos suele aumentar en pocas horas
por la liberacin de clulas almacenadas en mdula sea. Aumentan primero los
neutrfilos. Si la infeccin persiste, aumentan los monocitos. Los eosinfilos
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Cdigo: L1M-N3-004
No. de Revisin: 1
Efectividad: 2008-1
aumentan en reacciones alrgicas e infestaciones parasitarias, pero no en

bacterianas. Ciertas infecciones, como la fiebre tifoidea, disminuyen el nmero de
leucocitos porque la mdula es incapaz de reponer clulas a la velocidad que el
organismo las pierde.
La fiebre, una temperatura corporal superior a 37.7C (termmetro en boca), es
un mecanismo de defensa ante la infeccin. Sus causas incluyen infecciones,
enfermedades autoinmunes y cncer (en especial leucemia o linfoma). Para
establecer la causa, el mdico debe indagar acerca de sntomas, enfermedades
presentes y pasadas, medicaciones, exposicin a infecciones, viajes recientes,
etctera. Una fiebre que aparece cada dos o tres das es tpica del paludismo.
Los anlisis de sangre pueden arrojar el nmero de leucocitos, la presencia de
anticuerpos contra un microorganismo y hasta el microorganismo en s para un
cultivo. Por lo general, el aumento de los leucocitos indica infeccin. El incremento
de un anticuerpo especfico puede ayudar a identificar al invasor.
MUESTRA
Suero.
MATERIAL
Agujas
Jeringas
Torundas
Torniquete
Kit para Ag de reacciones febriles
Micropipetas de 10, 20, 40 y 80 L
Puntas de micropipetas
Placas de vidrio
Rotator
Microscopio ptico
Cronmetro
MTODO
1) Marcar 8 espacios en la placa de vidrio, adems de un control positivo y uno negativo.

2) Agregar 80 L de suero a cada uno de los espacios y colocar una gota de los 6 antgenos,
3) Mezclar espacio por espacio con un aplicador de madera.
4) Poner la placa en el rotator por un minuto, a baja velocidad.
5) Leer en el microscopio.
6) Las pruebas positivas debern montarse en la siguiente dilucin: 40, 20, 10 L.
Solo las pruebas positivas, hasta la menor dilucin
Buscar el valor clnico para cada una de las diluciones y que significa cada uno de los
antigenos.
32

Cdigo: L1M-N3-004
No. de Revisin: 1
Efectividad: 2008-1
RESULTADOS
Cules son los valores normales de cada reaccin febril?
CONCLUSIN
BIBLIOGRAFA

33

Cdigo: L1M-N3-004
No. de Revisin: 1
Efectividad: 2008-1
Inmunologa
Manual de prcticas
Prctica 11: ANTICUERPOS VIH

OBJETIVO
Conocer mtodos para llegar al seguimiento de infeccin por VIH.
FUNDAMENTO
El virus de inmunodeficiencia humana (VIH) pertenece a los retrovirus, virus
con ARN en lugar de ADN. Como todos los virus, el VIH slo puede replicarse dentro
de una clula. Para ello utiliza una enzima llamada transcriptasa inversa, que
convierte el ARN en ADN para poder incorporarlo al genoma de la clula hospedera.
El VIH pertenece a un subgrupo de retrovirus llamado lentivirus (virus lentos).
La infeccin por estos virus se caracteriza por un largo intervalo entre la exposicin
y la manifestacin de la sintomatologa.
El VIH causa un deterioro gradual de la funcin inmunolgica. Especficamente
inhabilita y destruye la porcin CD4 de los linfocitos T-Helper, que normalmente
indican a otras clulas del sistema inmunolgico su funcin especfica.
Una persona no infectada tiene normalmente 800-1,200 linfocitos T-Helper CD4
por milmetro cbico. Durante la infeccin por VIH, el nmero decrece
progresivamente. Cuando alcanzan niveles inferiores a 200 clulas por milmetro
cbico, la persona se vuelve vulnerable a infecciones oportunistas y cnceres tpicos
del SIDA (sndrome de inmunodeficiencia adquirida), etapa final de la infeccin por
VIH.
MUESTRA
Suero libre de hemlisis.
MATERIAL
34

Cdigo: L1M-N3-004
No. de Revisin: 1
Efectividad: 2008-1
Agujas
Jeringas
Torundas
Torniquete
Kit InmunoComb II HIV 1 y 2

Bao Mara a 37C
Cronmetro
MTODO
1)
2)
3)
4)
5)
6)
7)
8)
Incubar la bandeja de reaccin a 37C antes de empezar la prueba.

Tomar 50 L de suero.
Perforar la cubierta de papel aluminio de la fila A y agregar la muestra.
Desechar la punta.
Repetir el paso 1 con los controles positivo y negativo.
Insertar el peine (con el lado impreso hacia usted) en los pocillos de la fila A.
Retirar e insertar el peine varias veces para asegurar el mezclado.
Incubar por 10 minutos.
Primer lavado (fila B)

9) Insertar el peine en la fila B.
10) Agitar vigorosamente durante 10 segundos.
11) Incubar por 2 minutos.
Unin del conjugado (fila C)
12) Insertar el peine en los pocillos de la fila C.
13) Mezclar vigorosamente por 10 segundos.
Segundo lavado (fila D)
15) Insertar el peine en los pocillos de la fila D.
Deteccin de reaccin de color (fila E)
18) Insertar el peine en los pocillos de la fila E.
19) Agitar vigorosamente por 10 segundos.
20) Dejar reposar por 2 minutos.
Deteccin de la reaccin (fila F)
21) Insertar el peine en los pocillos de la fila F.
23) Incubar por 10 minutos con todo y peine.
Nota: Desechar las bandejas, puntas de micropipeta, papel absorbente y guantes en RPBI.
35

Cdigo: L1M-N3-004
No. de Revisin: 1
Efectividad: 2008-1
RESULTADOS
CONCLUSIN
BIBLIOGRAFA

Groopman et al (1986). Serological characterization of HTLV III infection in AIDS.
Gnann et al (1987). Synthetic immunoassay distinguishes HIV type 1 infections. Science 237.
Jackson et al (1988). Practical diagnostic testing form human immnunodeficiency virus.
36

Cdigo: L1M-N3-004
No. de Revisin: 1
Efectividad: 2008-1
Inmunologa
Manual de prcticas
Prctica 12: ANTGENOS DE SUPERFICIE DE HEPATITIS B

OBJETIVO
Comprender la infeccin por virus de la hepatitis B.
FUNDAMENTO
El virus de la hepatitis B (VHB) es un hepadnavirus (hepa: se replica en el
hgado; dna: genoma de ADN). El VHB se transmite a travs de sangre o fluidos.
Infecta principalmente al hgado, produciendo una inflamacin que destruye los
hepatocitos y altera su funcin. Se calcula que es 100 veces ms infeccioso que el
VIH.
El VHB tiene al humano por nico hospedero, pero es extremadamente
resistente a condiciones adversas fuera del organismo. Por ejemplo, puede sobrevivir
durante meses sobre equipo mdico y dental contaminado.
Durante la infeccin, en los hepatocitos se producen grandes cantidades de
antgeno de superficie. Slo pequeas cantidades de l se combinan con las
nucleocpsides para formar partculas de virus completas. El resto es liberado al
torrente sanguneo, sin contener ADN, y funciona como marcador de infeccin.
As, el estado de infeccin por VHB se refleja por la presencia de diversos
antgenos y anticuerpos en sangre:
HBsAg: Antgeno. Primer indicador de infeccin. Generalmente aparece 6
semanas despus de la exposicin y persiste durante 414 semanas. Est
presente durante el periodo de incubacin, antes de la manifestacin clnica.
anti-HBs: Anticuerpo. Se desarrolla en respuesta al HBsAg. Es detectable 2
6 semanas despus de que el HBsAg ya no lo es. Su presencia indica
recuperacin clnica y est asociado a inmunidad.
HBcAg: Antgeno. Asociado a la nucleocpside del VHB. No puede detectarse
en sangre durante la hepatitis B, aguda o crnica.
anti-HBc: Anticuerpo. Se produce en respuesta al HBcAg. El anti-HBc (IgM)
es el primero en aparecer tras la infeccin, seguido por el anti-HBc (IgG). Es
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Cdigo: L1M-N3-004
No. de Revisin: 1
Efectividad: 2008-1
detectable cuando aparece la manifestacin clnica y est presente en

pacientes con hepatitis B crnica y aguda, y en aquellos que la han
padecido. No neutraliza al VHB.
HBeAg: Antgeno. Aparece despus y desaparece antes que el HBsAg.
Persiste 3-6 semanas. Indica replicacin viral activa en el hgado, y en
niveles moderados a elevados indica que el paciente es muy contagioso.
anti-HBe: Anticuerpo. Se produce en respuesta al HBeAg. Representa una
disminucin en la infectividad del paciente. Permanece durante un ao o
ms despus de la infeccin.
MUESTRA
MATERIAL
Agujas
Jeringas
Torundas
Torniquete
MTODO
1)
2)
3)
4)
5)
6)
7)
8)
Kit InmunoComb II HBsAg

Bao Mara a 37C
Cronmetro
Incubar la bandeja de reaccin a 37C antes de empezar la prueba.

Tomar 75 L de suero.
Perforar la cubierta de papel aluminio de la fila A y agregar la muestra.
Desechar la punta.
Repetir el paso 1 con los controles positivo y negativo.
Insertar el peine (con el lado impreso hacia usted) en los pocillos de la fila A.
Retirar e insertar el peine varias veces para asegurar el mezclado.
Primer lavado (fila B)

9) Insertar el peine en la fila B.
10) Agitar vigorosamente durante 10 segundos.
Unin del antiHBs biotinilado (fila C)
12) Insertar el peine en los pocillos de la fila C.
Unin de la estreptavidina/fosfatasa alcalina (fila D)
15) Insertar el peine en los pocillos de la fila D.
38

Cdigo: L1M-N3-004
No. de Revisin: 1
Efectividad: 2008-1
Deteccin de reaccin de color (fila E)

18) Insertar el peine en los pocillos de la fila E.
19) Agitar vigorosamente por 10 segundos.
20) Dejar reposar por 2 minutos.
Deteccin de la reaccin (fila F)
21) Insertar el peine en los pocillos de la fila F.
23) Incubar por 10 minutos con todo y peine.
RESULTADOS
CONCLUSIN
BIBLIOGRAFA

Herrera (1994). Serological diagnosis of viral hepatitis.
Hollinger et al (1991) Hepatitis B virus. Viral Hepatitis. Press New York. Pg 73-138.
Swenson et al (1991). Hepatitis viruses. Manual of Clinical Microbiology.
Grosheide et al (1996). Prevention and control of hepatitis B in the community.
Koziol et al (1993). Risk analysis and occupational exposure to HIV and HBV.
Maynard et al (1988). Control of hepatitis B by immunization: global perspectives viral hepatitis
and liver disease.
Poovorawan et al (1992). Long-term efficacy of hepatitis B vaccine in infants born to hepatitis B
antigen-positive mothers.
Davis et al (1989). Horizontal transmission of hepatitis B virus.
Meheus (1988). Hepatitis B: a serious sexually transmitted infection.
Dienstag et al (1984). The epidemiology of hepatitis B, the virus, the disease and the vaccine.
39

Cdigo: L1M-N3-004
No. de Revisin: 1
Efectividad: 2008-1
Inmunologa
Manual de prcticas
Prctica 13: GRUPO SANGUNEO, Rh Y PRUEBAS CRUZADAS

Efectos Indeseables de la Inmunidad
OBJETIVO
Determinar el grupo sanguneo y Rh, someterlos a compatibilidad con otros
tipos y observar la reaccin Ag-Ac.
FUNDAMENTO
El descubrimiento del sistema ABO para el grupo sanguneo fue fundamental
en la evolucin de la transfusin sangunea. Se supo entonces que si los eritrocitos
de un grupo eran mezclados con el suero de otro grupo, seran aglutinados o
hemolisados, aun cuando provinieran de individuos con un parentesco cercano.
Tiempo despus, se descubri el factor Rh (Rhesius en honor al mono donde fue
investigado).
La inmunidad humoral comprende la produccin de inmunoglobulinas
(anticuerpos) por linfocitos B, en respuesta a estmulos antignicos especficos. La
inmunidad celular comprende la interaccin directa de los linfocitos T con las
clulas extraas. Al entrar en contacto con eritrocitos de un grupo sanguneo
distinto al propio, el sistema inmunolgico libera anticuerpos que se fijan a las
clulas y las destruyen.
En la prctica, la investigacin de anticuerpos irregulares abarca la deteccin
de los anticuerpos mediante las pruebas cruzadas: el contacto directo de los
hemates o el suero de un donador con los hemates o el suero de un receptor.
MUESTRA
Sangre total.
MATERIAL
Agujas
Jeringas
40
Torundas
Torniquete

Cdigo: L1M-N3-004
No. de Revisin: 1
Efectividad: 2008-1
Placa de vidrio con crculos

Tubos de ensayo de 12x 75 mm
Ac anti-A, anti-B, anti-D
Antiglobulina especfica IgG
Solucin salina
Pipetas desechables
Centrfuga
Bao Mara a 37C
Cronmetro
MTODO
a) Grupo sanguneo y Rh
1) En caso de no contar con una placa marcada, trazar tres crculos en una placa de vidrio.
2) Colocar una gota de sangre en cada crculo.
3) Agregar a cada crculo una gota de reactivo distinto (Ac anti-A, anti-B, anti-D).
4) Mezclar el contenido de cada crculo con aplicadores de madera distintos.
5) Observar la presencia o ausencia de aglutinacin.
Nota: La aglutinacin indica la presencia de antgeno para el anticuerpo agregado.
b)
1)
2)
3)
4)
5)
6)
Prueba cruzada mayor: Suero del receptor con eritrocitos del donador.
Preparar los eritrocitos del donador al 5% (1 gota de eritrocitos por 19 de solucin salina).
En un tubo de ensayo, agregar los eritrocitos del donador y suero del receptor.
Mezclar, centrifugar y observar.
Agregar 1 gota de antiglobulina.
c) Prueba cruzada menor: Suero del donador con eritrocitos del receptor.
1) Preparar los eritrocitos del receptor al 5% (1 gota de eritrocitos por 19 de solucin salina).
3) En un tubo de ensayo, agregar los eritrocitos del receptor y suero del donador.
4) Mezclar, centrifugar y observar.
5) Agregar 1 gota de antiglobulina.
6) Mezclar, centrifugar y observar.
d)
1)
2)
3)
4)
5)
6)
Prueba autotestigo: Suero del receptor con eritrocitos del receptor.

Preparar los eritrocitos del receptor al 5% (1 gota de eritrocitos por 19 de solucin salina).
En un tubo de ensayo, agregar los eritrocitos del receptor y suero del receptor.
Agregar 1 gota de antiglobulina.
Nota: La aglutinacin indica incompatibilidad de pruebas cruzadas.
41

Cdigo: L1M-N3-004
No. de Revisin: 1
Efectividad: 2008-1
RESULTADOS
CONCLUSIN
BIBLIOGRAFA

Kelton et al (1990). Transfusin sangunea: bases tericas y aplicacin clnica. Edicin Sdoyma.
42

Cdigo: L1M-N3-004
No. de Revisin: 1
Efectividad: 2008-1
Inmunologa
Manual de prcticas
Prctica 14: TUBERCULINA HIPERSENSIBILIDAD RETARDADA

Efectos Indeseables de la Inmunidad
OBJETIVO
Relacionar la reaccin de hipersensibilidad retardada con la administracin de
un antgeno especfico.
FUNDAMENTO
La tuberculosis es la enfermedad infecciosa con mayor prevalencia en el
mundo. La prueba de la tuberculina PPD (derivado proteico purificado) fue dada
a conocer en 1941 por Seibert y Gleenn. El PPD consiste en un principio proteico
activo obtenido del filtrado de cultivos de bacilos tuberculosos en medio sinttico
esterilizado en autoclave, desprovisto de albmina y extrado por cido
tricloroactico o por precipitacin con sulfato neutro de amonio.
Desde julio de 1958, el Staten Serum Institute de Dinamarca ha preparado por
orden de la OMS un lote de PPD, el RT-23, cuya potencia es cinco veces mayor que
el PPD-S. El contenido de una solucin de tuberculina se mide por unidades.
La tuberculina es una prueba de la formacin del tubrculo primario. La
infeccin tuberculosa puede comprobarse aproximadamente 12 semanas despus de
iniciada, dado que produce una reaccin de hipersensibilidad retardada, mediada
por linfocitos T-Helper CD4.
La sensibilidad a la tuberculina contina utilizndose como indicador de
infeccin tuberculosa. La tcnica de Mantoux, cutnea, es la prueba estndar a
nivel mundial, porque entrega informacin cuantitativa de la respuesta. Una
reaccin positiva define la infeccin tuberculosa y contribuye a la deteccin de la
magnitud del problema en una poblacin.
Resulta importante destacar que una reaccin positiva no necesariamente
indica la infeccin tuberculosa actual: puede tambin indicar un contacto previo con
la enfermedad o la presencia del Mycobacterium tuberculosis en el organismo. La
prueba de la tuberculina no debe utilizarse como mtodo diagnstico.
43

Cdigo: L1M-N3-004
No. de Revisin: 1
Efectividad: 2008-1
MUESTRA
Candidatos a la aplicacin de tuberculina
MATERIAL
Jeringas de insulina con aguja

Torundas
Alcohol
Plumn de tinta indeleble

Tuberculina 5 TU (0.1 mL por dosis
MTODO
a) Durante la prueba
1) Realizar asepsia en la cara anterior del antebrazo con alcohol isoproplico al 70%.
2) Llenar la jeringa de insulina con 5 unidades de tuberculina
3) Aplicar la tuberculina va intradrmica en el sitio de la asepsia.
4) Trazar con el plumn un crculo de 20 mm de dimetro alrededor de la puncin.
5) En el caso de presentarse, registrar en mm el rea de induracin a las 24 horas de la
puncin. Imaginar una cruz para poder registrar de norte a sur y de oeste a este.
b)
1)
2)
3)
Tras la prueba
NO colocar una banda adhesiva sobre el sitio de puncin.
NO rascar el sitio de puncin. En caso de prurito, colocar una compresa fra.
NO friccionar el sitio de puncin al secarlo.
RESULTADOS
Negativo: El dimetro de reaccin no rebasa los 20 mm. Hay enrojecimiento o
inflamacin, pero no induracin.
Positivo: El dimetro es igual o mayor a 20 mm. Hay induracin a la palpacin.
El Mycobacterium tuberculosis se encuentra en el organismo, pero no
necesariamente a causado enfermedad.
44

Cdigo: L1M-N3-004
No. de Revisin: 1
Efectividad: 2008-1
CONCLUSIN
BIBLIOGRAFA

Beyt et al (1980). Cutaneous mycobacteriosis: analysis of 34 cases with a new classification of
the disease.
45

Manual de Inmunologia

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UNIVERSIDAD AUTONOMA DE BAJA CALIFORNIA

FACULTAD DE MEDICINA Y PSICOLOGIA

Facultad de Medicina y Psicologa

Fecha: Julio 2007

Revis: Q.F.B. Ma. de la Luz Ibarra Arias

Fecha: Julio 2007

Autoriz: Dra. Sara Corts Bargall

Fecha: Julio 2007

UNIVERSIDAD AUTONOMA DE BAJA CALIFORNIA

FACULTAD DE MEDICINA Y PSICOLOGIA

UNIVERSIDAD AUTONOMA DE BAJA CALIFORNIA

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Unidad III Efectos deseables de la

1. Inmunidad a bacterias y virus

3. Sistema del complemento

3. Inmunidad a hongos y tumores

Unidad II Inmunidad Adquirida

Unidad IV Efectos indeseables de la

1. rganos linfoides primarios y

9. Respuestas de los anticuerpos

10. Respuesta inmune celular

11. Regulacin de la respuesta inmune

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REGLAMENTO DEL LABORATORIO

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dando lugar a macrfagos tisulares que forman el sistema retculo-endotelial,

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Roitt, Brostoff, Male. Inmunologa. 5ta edicin.

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Prctica 2: CONTEO LEUCOCITARIO

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FACULTAD DE MEDICINA Y PSICOLOGIA

1) Mezclar la sangre durante 5 minutos.

Cules son los valores normales del recuento leucocitario?

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Roitt, Brostoff, Male. Inmunologa. 5ta edicin.

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secuenciales: quimiotaxis, adherencia del antgeno a la superficie de los fagocitos,

1) Identificar 1 tubo de ensayo de 12 x 75 mm;

Describa el proceso de la fagocitosis.

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Roitt, Brostoff, Male. Inmunologa. 5ta edicin.

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El descrito en el kit para complemento C3.

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