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PRACTICA No.

4 DESNATURALIZACIN DE PROTENAS

Prctica 4
DESNATURALIZACIN DE PROTENAS

RESULTADOS.
CONDICIN
1 ETANOL
2 JUGO

DE

CARACTERSTICAS

GRADO DE
DESNATURALIZACIN
7
4

LIMN

3 HCL 1 N

4 NAOH 1 N

NACL

(SLIDA)
6

AGITACIN

MINUTOS
NATIVA

Describa las caractersticas de la albmina bajo diferentes condiciones despus de 10


minutos de incubacin. Ordena de las condiciones de menor a mayor grado de
desnaturalizacin enumerando en la ltima columna. Completar el resultado con fotos o
dibujo

25FEBRERO 2015

PRACTICA No.4 DESNATURALIZACIN DE PROTENAS

CONCLUSION.

Existen diferentes condiciones del medio en las cuales las protenas suelen
desnaturalizarse.

Polaridad del disolvente sobre la estructura de las protenas: Cuando se le aaden


sustancias menos polares que el agua

Fuerza inica sobre la estructura de las protenas: Un aumento de la fuerza inica del
medio provoca una disminucin en el grado de hidratacin de la protena, ya que se
compite por el agua y se rompen los puentes de hidrgeno o las interacciones
electrostticas.

pH sobre la estructura de las protenas: Los iones H+ y OH- del agua afectan a la
envoltura acuosa de las protenas y tambin afectan a la carga elctrica de los grupos
cidos y bsicos de las cadenas laterales de los aminocidos. Esta alteracin de la carga
superficial de las protenas elimina las interacciones electrostticas que estabilizan la
estructura terciaria y provoca su desnaturalizacin.

La

temperatura sobre la estructura de las protenas: Cuando la temperatura es

elevada aumenta la energa cintica de las molculas y se desorganiza la envoltura


acuosa de las protenas, provocando su desnaturalizacin.

De los diferentes medios a los que se someti a la protena globular hidrosoluble, el ms


veloz para desnaturalizar fue el etanol esto se debe a la polaridad del disolvente, el etanol
interaccionan con la parte hidrfobo de las protenas y desorganiza su estructura
provocando su desnaturalizacin.

25FEBRERO 2015

PRACTICA No.4 DESNATURALIZACIN DE PROTENAS

CUESTIONARIO.

1. Cules son las condiciones de desnaturalizacin de protenas para someter a una


separacin por electroforesis en condiciones desnaturalizantes?
Las separaciones moleculares se basan en la filtracin a travs de un gel y en las
movilidades de las molculas a separar, de las cuales existen dos tipos: Nativa (en
ausencia de detergente inico) y desnaturalizante (en presencia de detergente inico).
Esta ltima puede ser realizada en condiciones reductoras (en presencia de 2mercaptoetanol) o no reductoras (en ausencia de 2-mercaptoetanol).

2. Mencione dos mtodos de desnaturalizacin de protenas usados cotidianamente


en casa.

Desnaturalizacin del pelo al alaciarlo con planchas de cabello.


Para poder alaciar el pelo necesitamos desnaturalizar las protenas para que pierdan su
estructura tridimensional y quede nicamente su estructura primaria. Para poder hacer
esto tenemos que romper a los puentes de disulfuro entre las cistenas, puentes de

25FEBRERO 2015

PRACTICA No.4 DESNATURALIZACIN DE PROTENAS

hidrogeno de los dems aminocidos. El calor de la plancha hace que se rompan estos
puentes y as poder obtener a estructura primaria de protenas que nos dar un pelo lacio.
Esta es una desnaturalizacin reversible ya que, el pelo puede regresar a su estado
natural.

Desnaturalizacin de la clara de huevo por coccin.


Las protenas globulares de la clara de huevo se encuentran enrolladas. Al frer o
cocer, el calor hace que las cadenas de protena se desenrollen. Este cambio de
estructura da a la clara de huevo la consistencia y color que se observa en un huevo
cocinado. Este proceso es irreversible ya que no podemos regresar a la clara a su estado
anterior.

3. Si quisiramos obtener protenas de un homogenado celular, qu condiciones


experimentales debemos cuidar?

1. Un amortiguador de rompimiento a un pH determinado


2. Temperatura: 4C.
3. En presencia de inhibidores de proteasas: Leupeptina, antipana, E-64, etc.
Graficador
http://www.mathe-fa.de/es#result

25FEBRERO 2015

PRACTICA No.4 DESNATURALIZACIN DE PROTENAS

DIVISION DE CIENCIAS NATURALES Y


EXACTAS

DEPARTAMENTO DE QUIMICA

BIOLOGIA CELULAR

Cesar Antonio Ruiz Estrada

PRACTICA # 3 IDENTIFICACIN DE BIOMOLECULAS ORGNICAS EN LOS


ALIMENTOS
PRACTICA # 4 DESNATURALIZACIN DE PROTENAS
25 DE FEBRERO DEL 2015
1-c

PRACTICA No. 3
IDENTIFICACIN DE BIOMOLECULAS ORGNICAS EN LOS ALIMENTOS

RESULTADOS
25FEBRERO 2015

PRACTICA No.4 DESNATURALIZACIN DE PROTENAS

Despus de realizar la metodologa indica si la identificacin es positiva (+) o negativa (-)


para cada muestra.

1
2
3
4
5
6
7
8
9
10
11

Muestra
Agua
Leche entera
Leche de polvo
Clara de huevo
Maizena
Papa
Sacarosa
Glucosa
Aceite de cocina
Cacahuate
Salchicha

IDENTIFICACIN DE
Almidn
Azcar reductor
+
+
+
+
+
+
+
-

Protena
+
+
+
+
+
+

Lpido
+
+
+
+
+
+

CONCLUSIONES
Concluida la prctica, se lograron identificar diferentes biomoleculas orgnicas que
existen dentro de cierto tipo de alimentos: almidn (maizena), papa, disolucin de
glucosa, disolucin de sacarosa (azcar de mesa), leche entera (gota blanca), leche en
polvo (nido), clara de huevo, aceite de cocina y agua. Esto con base a los siguientes
fundamentos:

Identificacin de almidn en alimentos (reaccin de iodo)


Este mtodo se usa para identificar polisacridos. El almidn en contacto con unas gotas
de Reactivo de Lugol toma un color azul-violeta caracterstico.

Identificacin de azucares reductores en alimentos (reaccin de fehling)


Este mtodo se basa en el carcter reductor de los monosacridos y de la mayora de los
disacridos (excepto la sacarosa). Si el carbohidrato que se investiga es reductor, se
oxidar dando lugar a la reduccin del sulfato de cobre (II), de color azul, a xido de cobre
(I), de color rojo-anaranjado.

Identificacin de protenas mediante la (reaccin el biuret)

25FEBRERO 2015

PRACTICA No.4 DESNATURALIZACIN DE PROTENAS

La presencia de protenas en una mezcla se puede determinar mediante la reaccin del


Biuret. La reaccin se basa en la formacin de un compuesto de color violeta, debido a la
formacin de un complejo de coordinacin entre los iones Cu2+ y los pares de electrones
no compartidos del nitrgeno que forma parte de los enlaces peptdicos. . El Cu, en un
medio fuertemente alcalino, se une con los enlaces peptdicos formando un complejo de
color violeta (Biuret) cuya intensidad de color depende de la concentracin de protenas.

Identificacin de lpidos en alimentos (colorante- Sudn III.)


Los lpidos se colorean selectivamente de rojo-anaranjado con el Sudn III y con un
colorante verde. El colorante verde se va a encargar de teir la parte hidrfila de las
muestras y el sudan a la parte hidrofobica. Las muestras que se tian con el sudan son
las que contienen lpidos.

25FEBRERO 2015

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