Universidad Andrs Bello

Facultad de Ciencias de la Salud

Departamento de Ciencias Biolgicas
Laboratorio de Biologa Celular BIO 035

Trabajo Prctico n 1
Microscopia

Introduccin
El hombre es, por naturaleza, un buscador innato de conocimientos presentando
inquietudes, esta cualidad le ha sido muy fructfera a travs del tiempo, como
consecuencia de esto encontramos algunos descubrimientos importantes, un ejemplo de
esto es Robert Hooke en el ao 1665 con su observacin de un trozo de corcho en un
microscopio de luz en donde patent el trmino clula sin conocer con exactitud qu era
lo que estaba estudiando.
Desde que Hooke observ el trozo de corcho se dio paso a establecer teoras acerca de
la clula acompaadas de observaciones microscpicas de diversos tejidos para de esta
manera lograr comprender de mejor manera la estructura y funcionamiento de este
concepto denominado clula. Es por este hecho que el microscopio se vuelve tan
relevante ya que las clulas al ser tan pequeas hacen imposible su observacin a travs
del ojo humano y se vuelve necesario el uso de una herramienta que permita aumentar la
posibilidad de visualizar las clulas de mejor manera, y es con el microscopio que se ha
dado paso al desarrollo y uso de nuevos mtodos que nos permitan comprender cada vez
con mayor claridad cmo funciona la maquinaria celular.
Hiptesis: no se podr observar organelos celulares a travs del microscopio
Objetivos

Comprender el funcionamiento del microscopio ptico y observar a travs de l

muestras de distintos tipos celulares.

Reconocer y observar las estructuras de los tipos diversos tipos celulares a

diferentes aumentos.

Observar los cambios que se produzcan en las muestras frescas de tipos celulares
al ser sometidos a distintas condiciones.

Materiales y mtodos

En la primera actividad se calcul el aumento final de los objetos observados y el

lmite de resolucin del microscopio, utilizando determinadas formulas para
obtener los resultados.
Luego se realizo la segunda actividad en donde se utiliz el lente objetivo 4x
para observar la letra e impresa en un papel que se nos entreg. Se compar
la orientacin de la letra e en su portaobjetos con la de su campo visual que
se observ en el microscopio (4x).
Para la tercera actividad se utiliz un trozo de papel milimetrado, se coloc en
un portaobjeto y se mojo con agua destilada. Luego se observ en el
microscopio con el objetivo 4x. Se calcul el dimetro del campo visual de
todos los lentes objetivos (4x, 10x, 40x y 100x) utilizando la formula asignada.
DCV obj.x = DCV obj.4X * aumento obj.4X
aumento obj. X

En la cuarta actividad se nos asign una muestra de tejido heptico, tejido intestinal y
frotis sanguneo. Se observ cada una de estas muestras bajo los objetivos 4x, 10x, 40 y
se analiz las estructuras vistas.
En la quinta actividad se calcul el tamao celular (TC) con los datos que se obtuvieron al
calcular el DCV de cada uno de los lentes objetivos y a travs de la formula
TC = (DCV obj. X) / n de clulas

En la sexta actividad se observaron clulas vivas. Para ello se nos asign una muestra de
elodea sp, la cual se coloc sobre un portaobjetos y se cubri con un cubreobjetos. Se
coloc esta muestra en el microscopio y se observ en los objetivos 10x 40x y 100x.
Luego utilizamos una muestra de protozoos, se coloc una gota de la muestra real liquida
en el centro de un portaobjetos utilizando una pipeta Pasteur. Se tom el cubreobjetos y
se coloc cuidadosamente una gota de agua. Se limpio el exceso de agua con un trozo de
papel absorbente y se observaron los organismos vivos.
Para finalizar nuestro trabajo prctico, se corto un trozo de cebolla con una gillete para
obtener una pequea muestra de catafilo de cebolla. Se coloc una gota de agua
utilizando la pipeta Pasteur en un portaobjetos y sobre sta se coloc la muestra obtenida
y se cubri con un cubreobjetos y luego se observ al microscopio. Para finalizar se
coloco una gota de azul de metileno sobre la muestra y se volvi a observar en el
microscopio. Se anoto lo observado.

Resultados
Actividad N 1: Clculo del aumento y lmite de resolucin del microscopio
AUMENTO
4X
10X
40X
100X

Lentes Objetivos
APERTURA NUMRICA
0,10
0,25
0,65
1,25

AUMENTO
10X

Lentes Oculares
APERTURA NUMRICA
18
Condensador

APERTURA NUMRICA (NA)

1,25
Resolucin Mxima
Apertura del Lente 100x: 1,25
Apertura del Condensador: 1,25
Apertura numrica de la interfase de aire: 1,0
Apertura numrica de la interfase de aceite: 1,3 - 1,5
Lmite de resolucin:
Resolucin:

=
=

= 195,2 nm = 0,1952m
= 5,12x10-3 nm = 5,12x10-6m

Qu conclusin se pueden sacar de estos resultados?

De estos resultados se puede concluir que a medida que el objetivo aumente, la apertura
numrica tambin aumentar.

Actividad N 2: Manejo de Microscopio.

Observacin de letra e impresa

Fig.1: Letra e con aumento 4x

Hay algn cambio en la orientacin de la letra?
Si, la letra e sobrepuesta en el portaobjetos, al ser observada mediante el microscopio,
se ve invertida y aumentada dependiendo el objetivo utilizado (4x).
A qu se debe la diferencia observada? (cambios de orientacin de la letra e en
su portaobjetos y en su cambio visual)
Esto se debe a que en el microscopio los rayos de luz reflejados o emitidos por el objeto
que se sita fuera de la distancia focal de un objetivo, al pasar por la muestra son
refractados y enfocados en un plano obteniendo una imagen real que es invertida y de
mayor tamao.

Actividad N 3: Determinacin del dimetro del campo visual

DCV obj.x =

Fig. 2: Papel milimetrado aumentada a 4x

Objetivos
4X
10X
40X
100X

DCV (En m)
4,25x103 m
1,8x103 m
450 m
180 m

Actividad N 3: Observacin de preparaciones biolgicas permanentes

Frotis Sanguneo

Fig. 3: Frotis sanguneo 4x

Fig. 4: Frotis sanguneo 10x

Fig. 5: Frotis sanguneo 40x

Intestino delgado

Fig. 6: Corte intestino delgado 4x

10x

Fig. 7: Corte intestino delgado

Fig. 8: Corte intestino 40x

Hgado

Fig. 9: Hgado 4x

Fig. 10: Hgado 10x

Fig. Hgado 40x

Actividad N 5: Determinacin del tamao celular

TC =

Para la determinacin del tamao celular se ocupara la muestra de frotis sanguneo

aumentada en 400 veces (40x), y usando un DCV de 450 m. al contabilizar el nmero de
clulas se concluy que hay 47 clulas aproximadamente en el campo visual observado.
Por lo tanto:

Actividad 6: Observacin de muestras frescas

Observacin de Elodea sp

10x

Qu estructura logra distinguir?

Se logran distinguir celular vivas con algunas de estructuras celulares como pared celular,
cloroplasto y citoplasma.
Observacin de Protozoo

10x
Tienen forma ovalada, son verdes, se mueven en el agua formando un espiral a la vez
dando vueltas por s mismo y no poseen flagelos solo cilios.

Actividad 7: Observacin de tejidos vegetales frescos sin y con tincin (Catfilo de

cebolla)

Antes de la tincin (10x)

Despus de la tincin (10x)

En el catafilo de cebolla con agua no se puede distinguir claramente las paredes celulares
sin embargo cuando se tio con azul de metileno se pudo distinguir notablemente esta
estructura.

Discusin
Se pudo observar a las clulas vegetales de la planta elodea sp, distinguiendo cada una
de sus partes; pared celular, citoplasma y cloroplastos.
Los colorantes como el azul de metileno, se combinan fuertemente con componentes
celulares cargados negativamente, por lo general las envueltas externas del
microorganismo estn cargadas negativamente. Por ello, en la muestra de cetafilo de
cebolla se pudo observar claramente la pared celular al teirlas con azul de metileno.
Se pudo observar los paramecios solo superficialmente ya que fueron observados en el
microscopio con un aumento de 10X, algunas de las caractersticas que se pudieron
observar en ellos son su color verde, forma ovalada y movimiento rpido en forma de
espiral gracias a sus cilios. El movimiento de la ciclosis se produce por un estimulo, como
la luz, que se relaciona con la distribucin de los cloroplastos hacia la periferia durante la
fotosntesis.
Las muestras de tejido heptico, trozo de intestino y frotis sanguneo se pudieron observar
con mayor nitidez y claridad a medida que se aumentaron los objetivos.

Conclusin
En cuanto a la hiptesis sealada al comienzo de este informe se pudieron observar las
clulas vegetales de la planta Elodea sp, las de catafilos de cebolla y los paramecios a
travs del microscopio con lo que pudimos corroborar que nuestra hiptesis es falsa ya
que si se ven organelos celulares tales como pared celular, cloroplastos y citoplasma en
algunos casos tales como el caso de la Elodea sp. Para los catafilos de cebolla solo se
pudo ver la pared celular an cuando esta se tinci con azul de metileno. En cuanto a los
paramecios pudimos observar solo superficialmente ya que fueron observados en el
microscopio con un aumento de 10X, algunas de las caractersticas que se pudieron
observar en ellos son su color verde, forma ovalada y movimiento rpido en forma de
espiral gracias a sus cilios, pero a pesar de los intentos, no pudimos distinguir organelos
citoplasmticos. Esto mismo ocurri con las muestras de frotis y cortes de tejido heptico
e intestinal, ya que solo se pudo observar membrana plasmtica y citoplasma.

Bibliografa
Discusiones
http://es.scribd.com/api_user_11797_lujanjunior/d/6846048-Informe-5-lab-biologia
Fecha de ingreso: 13 de mayo 2012
http://www.frro.utn.edu.ar/repositorio/catedras/quimica/5_anio/biotecnologia/practico4.pdf
Fecha de ingreso: 14 de mayo 2012
Resultados y dibujos esquemticos
http://www.flickr.com/photos/tmumayor2010/with/4480484412/
Fecha de ingreso: 14 de mayo 2012
Introduccin, resultados y conclusiones.
Universidad Andrs Bello. Gua de laboratorio N3: microscopia, curso BIO035 Biologa
General, 2012.