TITULO ( tentativo).

OBTENCION DE LIPASAS A PARTIR DE LEVADURAS NO

CONVENCIONALES.
OBEJETIVO GENERAL Y ESPECIFICOS.
HIPOTESIS
JUSTIFICACION
MARCO TEORICO (textos en desorden, solo fragmentos importantes de teora)
Definicin de lipasas:
Las lipasas son definidas como triacilglicerol acilhidrolasas y deben ser
diferenciadas de las estereasas por la naturaleza de sus sustratos. El primer
criterio usado para distinguir estos dos tipos de enzimas fue la activacin en
presencia de una interfase, llamada activacin interfacial.
Las lipasas son enzimas capaces de hidrolizar carboxilesteres de cadena larga
de acilglicerol (10 atomos de carbono) mientras que las estereasas hidrolizan
de cadena corta.
Reacciones catalizadas por lipasas:
REACCIONES DE HIDROLISIS:
Las lipasas naturalmente catalizan la hidrolisis del enlace ster de tri, di o
monogliceridos en acidos grasos y glicerol. Se activan en un amplio rango de
sustratos. Las reacciones se dan en un sisteme bifsico; este sistema bifsico
resulta de a presencia de una fase organica inmicible, conteniendo el sustrato
hidrofbico en agua.
REACCIONES DE SISNTESIS:
Las lipasas en condiciones termodinmicas favorables (baja actividad del
agua), tambin catalizan una gran variedad de reacciones de sntesis que
pueden ser clasificadas en dos principales tipos: esterificacin y
transesterificacin. Esterificacin es la reaccin donde un acido graso es unido
por la accin de la enzima, a un alcohol por un enlace covalente, produciendo
un ester, liberando una molecula de agua. Tioesterificacin y amidacin son
reacciones similares pero con un tiol o un amino como sustrato.
Fuentes de lipasas:
Hoy en da se ha reconocido que las lipasas son producidas por varios
organismos, incluyendo animales, plantas y microorganismos.
Las levaduras son fuentes extensamente aceptadas y usadas en muchas
industrias incluyendo los procesos alimenticios. Debido a la importancia y a la
amplia variedad de las aplicaciones de las lipasas, han sido desarrolladas
diferentes tcnicas para su obtencin.
Estructura:

Estructuralmente hablando las lipasas son caracterizadas por un pliegue

comn de hidrolasa /
REVISAR INFORMCION CONFUSA EN PAGINAS 9-14 APROX DEL PDF.
Mecanismo cataltico:
El mecanismo cataltico de las lipasas empieza por una acilacin. Este paso
consiste en transferir un protn entre el aspartato, la histidina y la serina
residuos de la lipasa, causando la activacin del grupo hidroxilo o de la serina
cataltica. Como una consecuencia, el hidroxilo residuo de la serina.
Subsecuentemente se atrae el grupo carbonilo del sustrato. El primer
intermediario tetrahedrico es formado con una carga negativa en el oxigeno
del grupo carbonilo. El oxianin estabiliza la distribucin de cargas y reduce el
estado de energa del intermediario tetrahedrico para formar un hidrgeno con
dos enlaces menos. El paso de desacilacin toma lugar con un ataque
nucleofilico de la enzima, liberando el producto y regenerando la enzima.
Selectividad:
La selectividad de las lipasas esta realcionada con su preferencia para
funcionar dando reacciones. Se pueden distinguir tres tipos de selectividad:
TIPO DE SELECTIVIDAD:
El tipo de selectividad esta asociado a la preferencia por un sustrato dado, por
ejemplo tri, di o monogliceridos. Esta selectividad tambin se refiere a la
preferencia de la lipasa hacia cadenas cortas, medianas o largas de acidos
grasos y el grado de insaturacin y potencial de sustituciones del sustrato.
La preferencia de una lipasa por grupos acilo de diferentes tamaos es
directamente influenciada por la forma de su sitio activo y la naturaleza de los
aminocidos que lo componen.
REGIOSELECTIVIDAD:
Se define como el ataque preferencial de las lipasas hacia un enlace ester dado
en el glicerol base de los triglicridos. Muchas lipasas microbianas hidrolizan el
carbonilo 1 de los triglicridos y solo pocas son capaces de hidrolizar en la
posicin 2. Las lipasas para posicin 1, son especficamente producidas por
Rhizopus arrizhus , Aspergillus nger, Y. lipolytica, R. miehei, R. delemar y
T. lanuginosus. Las lipasas para posicin 2 son inusuales e incluyen
Staphylococcus y lipasa C de Geotrichum sp FO401B . Algunas lipasas son no
especificas y actan al azar en los triglicridos.
ENANTIOSELECTIVIDAD:
Una molecula quiral es una molecula con un centro asimtrico que puede
adoptar dos formas enantionericas, R y S, los enantiomeros R y S son no
superponibles, imgenes especulares de cada uno, tienen diferentes
propiedades biolgicas.

La enantioselectividad se refiere a la preferencia de las lipasas hacia un

enantiomero en particular de una molecula quiral en una reaccin qumica
implicando una mezcla racemica. La enantioselectividad es as una de las mas
interesantes en la industria farmaceutica.
Una regla emprica se basa en el tamao relativo de los sustituyentes en el
estereocentro que ha sido producido por las reacciones de lipasas con
alcoholes secundarios. Esta regla fue tambin relevante para predecir la
enantioselectividad de lipasas para reacciones de hidrolisis y
transesterificacin, el sustrato siendo un ester o un alcohol respectivamente.

Aplicaciones:
Las enzimas tienen importantes aplicaciones en un gran nmero de campos
industriales. Actualmente tienen un amplio mercado por todo el mundo.
Las lipasas son el tercer gran grupo de enzimas comercializadas, que
representan un billn de dlares por ao.
Las lipasas son de gran importancia en la industria debido a su estabilidad en
solventes organicos, su amplia variedad de sustratos, su selectividad, y su
habilidad para catalizar reacciones sin la adicin de cofactores caros. Adems
tambin son producidas fcilmente y activas a condiciones ambiente.
Por lo tanto, las lipasas son utilizadas en muchas reas industriales diferentes,
tales como:
INDUSTRIA ALIMENTICIA: Incluye la produccin de lcteos, tales como
queso y modificacin de grasas y aceites (mantequilla, margarina y
aceites de cocina), produccin de comida de beb y lpidos
estructurados con propiedades nicas (cocoa, equivalente de
mantequilla, sustituto de leche humana, grasas reducidas en caloras,
acidos grasos poli-insaturados. Son usadas como emulsificantes en la
mejora de productos horneados y pastas y como aditivos en alimentos
de animales. Finalmente son tambin usados para modificar sabores y
producir compuestos de fragancias.
DETERGENTES Y LIMPIADORES: como aditivos porque son activas y
estables a altas temperaturas y pH alcalino, tambin son esenciales en
la produccin de jabn, lava trastes, solventes para lavado en seco y
limpiadores para lentes de contacto.
PRODUCTOS QUIMICOS FINOS: En la industria farmacutica para la
produccin de enantiomeros por resolucin de mezclas racemicas, las
molculas quirales tambin son usadas como herbicidas en la industria
agroqumica. En la industria de perfumes y cosmticos, son empleadas
para producir esencias y como emolientes en productos de cuidado
personal.
APLICACIONES MEDICAS: Una alternativa de aplicacin de lipasas es
como instrumentos de diagnostico, desde su presencia y nivel pueden

indicar una infeccin o enfermedad y como un nuevo medicamente ara

el tratamiento de problemas digestivos y colesterol alto.
PULPA E INDUSTRIA DE PAPEL: Para remover triglicridos y ceras.
Adems, su presencia aumenta la blancura y reduce la contaminacin de
agus residuales.
LIPASAS DE BIOREMEDIACIN Y PROCESOS AMBIENTALES: Tal como
tratamiento de aguas residuales ricas en aceites, degradacin de
desechos orgnicos y tratamiento de aguas residuales por un amplio
rango de industrias.
INDUSTRIA DE ENERGA: Produccin de lubricantes, biodiesel y
biokeroseno de fuentes renovables por transesterificacin de aceites
vegetales y animales. Tambin son usadas para producir aditivos que
disminuyen la viscosidad de biodiesel.
OTRAS APLICACIONES: Incluyen la produccin de biopolmeros tales
como polifenoles, polisacridos y polisteres, produccin de biosensores
y modificacin de acidos fenlicos y antioxidantes. En la industria textil
tambin se usan lipasas para lavado enzimtico y tratamiento de
pantalones de mezclilla.

SELECCIN Y FUENTES DE LIPASASY SUS INHIBIDORES