UNIVERSIDAD AUTNOMA DE CHIHUAHUA

FACULTAD DE CIENCIAS QUMICAS

Practica de Laboratorio No 5

FRAGILIDAD OSMOTICA DE LOS ERITROCITOS

Jess Armando Mendoza Grajeda (245501)

Francisco Alfredo Vega Salgado (245414)
Diana Elena Valdez Aguirre (245535)
Eyra Patricia Ruiz Cabrera (245480)
Ivn de Jess Gmez Torres (245529)

Profesor.- M.C. Flor Isela Torres Rojo

OBJETIVO
Conocer la resistencia de los glbulos rojos ante diferentes soluciones de
cloruro de sodio.
Conocer la utilidad clnica de esta prueba en el laboratorio.
RESMEN
En esta prctica se realiz la determinacin de la fragilidad osmtica de los
eritrocitos por medio de un espectrofotmetro para medir las absorbancias de
diferentes soluciones de NaCl con sangre total, para obtener los porcentajes de
hemolisis a una concentracin determinada de NaCl, para apoyarnos en el
diagnostico de diversas enfermedades hematolgicas como las membranopatias
entre otras.

REACTIVOS

Solucin de Cloruro de Sodio

Agua destilada

MATERIAL

Tubos de precipitado
Micropipetas y pipetas
Centrifuga
Espectrofotmetro

METODOLOGA
Tubo

ml NaCl 1%

ml agua destilada

% de NaCl

0.5

4.5

0.1
100% hemolisis

1.0

4.0

0.2

1.5

3.5

0.3

1.75

3.25

0.35

2.0

3.0

0.4

2.25

2.75

0.45

2.5

2.5

0.5

2.75

2.25

0.55

3.0

2.0

0.6

10

3.25

1.75

0.65

11

3.5

1.5

0.7

12

4.0

1.0

0.8
blanco

1. Se colocan los 5 ml de la solucin de cada tubo y se agregan 0.05 ml de

sangre total, perfectamente mezclada con el menor traumatismo posible.
2. Se mezcla y se deja reposar a temperatura ambiente por 30 minutos, se
mezcla nuevamente y se centrfuga a 2000 rpm por 10 minutos.
3. Se lee a 540 nm, la hemoglobina sobrenadante, utilizando como blanco el
tubo # 12. El tubo # 1 corresponde al patrn de 100% de hemlisis.
RESULTADOS
de hemolisis=

|del| Pb
DO del100 de hemolisis

X 100

Tabla 1.- Resultados de la fragilidad osmtica

TUBO

ABS

% DE
HEMOLISIS

RANGO % DE
HEMOLISIS

DENTRO O
FUERA DE
RANGO

1.135

100

97-100

Dentro

1.243

109.51

97-100

Fuera

1.062

93.56

90-97

Dentro

1.225

107.92

90-97

Fuera

1.161

102.29

50-90

Fuera

0.668

58.85

5-45

Fuera

0.017

1.49

5-45

Fuera

0.103

9.07

0-5

Fuera

0.032

2.81

0-5

Dentro

10

0.008

0.70

Fuera

11

0.001

0.08

Fuera

12

Dentro

En la tabla 1 se puede observar el porcentaje de hemolisis obtenido mediante el

clculo de la absorbancia de cada uno de los tubos y la divisin de la absorbancia
del tubo 12 en cual no tiene hemolisis y el resultado multiplicado por 100, adems
de el rango correspondiente para cada uno de los tubos, adems de indicar si se
encuentra dentro o fuera del rango correspondiente a cada determinacin. Se
observa que del tubo 3 al tubo 8 solo el tubo 3 se encuentra dentro del rango.
Grfica 1.- Curva de Fragilidad Osmtica

%Hemolisis
150
100
50
0

Hemolisis

Concentracin de NaCl

En la grfica de la fragilidad osmtica se puede observar claramente que desde la

concentracin 0.45 NaCl se est obteniendo ms de un 50 % de hemolisis
indicando la fragilidad osmtica esta aumentada.

DISCUSIN
Se puede decir que la fragilidad osmtica esta aumentada debido a que a una
concentracin de 0.45% de NaCl se est obteniendo ms de 50% de hemolisis
cuando normal mente a esta concentracin se debe de obtener una hemolisis del
10%.
Los resultados obtenidos en esta determinacin pueden verse afectados por
diversas causas, ya que es una prueba muy sensible, puede verse afecatdo por
movimientos bruscos al momento de homogenizar la solucin de NaCl de cada
uno de los tubos con los eritrocitos, tambin puede estar afectado por la
temperatura.
La importancia de esta determinacin se basa en que la fragilidad osmtica del
eritrocito depende de caractersticas como la edad del eritrocito, su tamao, forma
y las dems condiciones propias de la estructura interna de la clula y as
ayudarnos en el diagnostico de diversas enfermedades ya que la fragilidad
osmtica de los eritrocitos se incrementa en algunos padecimientos como

la

esferocitosis congnita, anemia hemoltica adquirida, enfermedad hemoltica del

recin nacido debido a incompatibilidad sangunea ABO, estomatocitosis ; y puede
estar disminuida en la talasemia, anemia de clulas falciformes, ictericia y anemia
por deficiencia de hierro. Pero esta determinacin por si sola no es indicativa para
alguna patologa.
CONCLUSIN
Jess Armando Mendoza Grajeda (245501)
Con los resultados obtenidos observamos que la fragilidad osmtica esta
aumentada, pero eso no es del todo cierto ya que esta puede verse afectada por
diversos factores, uno de ello es no haber tratado la muestra con el cuidado
necesario. Se pueden descartar padecimientos en donde se encuentre afectada la
fragilidad osmtica ya que el paciente no presenta indicio alguno de una
enfermedad.

Francisco Alfredo Vega Salgado (245414)

La prctica cumpli su objetivo al conocer la resistencia de los glbulos rojos a
diferentes concentraciones de cloruro de sodio. Observamos unas pequeas
inconsistencias en el resultado de la hemolisis de diferentes muestras, por ejemplo
los 5 primeros tubos, los cuales tenan unas concentracin mayor de NaCl,
resultaron con una hemolisis de casi el 100%, en la muestra 5 bajo un 50% y a
partir de esa decay la hemolisis y se mantuvo en un rango aproximado del 10% y
las ultimas 4 de 2%. Existen diversos factores que pudieron afectar el resultado
como la manipulacin de los tubos, creemos que fue un error al momento de
realizar la prctica.
Diana Elena Valdez Aguirre (245535)
En la prctica se demostr la resistencia de los eritrocitos los cuales soportaron
cada una de las concentraciones de NaCl a las cuales fueron expuestos los
eritrocitos. En los cuales se observ que los primeros 5 tubos presentaron una
resistencia del 100%, posteriormente empez a decaer la resistencia hasta solo
presentar una resistencia de 2-4 % .Con esto se comprueba que el paciente no
presenta o se descarta la presencia de membranopatas.

BIBLIOGRAFA
*Rodak,B.(2007).Hematologa Fundamentos y Aplicaciones Clnicas. 2 edicin.
Editorial Panamericana. Argentina. Pgina 273.
*Skirzewski,M. Tiskow, G. (2010). Manual De Prcticas De Laboratorio De
Fisiologia I. 1 edicin. Universidad Centroccidental Lisandro Alvarado.
Venezuela. Pginas 8-19.