Resonancia MN

Efecto del campo magntico esttico Cualquier tipo de materia o sustancia que se quiera analizar est
formada por molculas y estas a su vez por tomos. Los tomos contienen electrones, protones y neutrones.
Todos los ncleos que tienen un nmero impar de neutrones y/o de protones, poseen una propiedad llamada
espn que provoca que stos giren sobre s mismos. Este movimiento de rotacin crea un campo elctrico que
a su vez crea un momento magntico, y los hace susceptibles a la Resonancia Magntica. El ncleo del
hidrgeno est formado slo por un protn, crea un momento magntico bastante grande, y es muy
abundante en la naturaleza, por lo que es uno de los tomos ms utilizados para la extraccin de las
caractersticas de las molculas de las que forma parte. Este proyecto se centrar en la RMN basada en el
ncleo de hidrgeno. Los momentos magnticos que crean los ncleos con espn pueden verse como
pequeos dipolos que, en condiciones normales (sin aplicar ningn campo), tienen direcciones aleatorias.
Estas partes son: Un imn capaz de crear un campo intenso, homogneo y estable. Una sonda que
contiene las bobinas utilizadas para excitar y detectar la seal. Un transmisor de alta potencia capaz de
operar con pulsos de muy corta duracin. Un receptor de alta sensibilidad para amplificar la seal detectada
antes de la digitalizacin. Todo ello supervisado y sincronizado por el sistema de control, que interacta con
el usuario a travs de la estacin de trabajo.
Funcionamiento del espectrmetro Para entender el funcionamiento del espectrmetro se describen los pasos
esenciales que se dan en un experimento, y que estn representados en el diagrama de la Ilustracin III-1 por
la direccin de las flechas. Antes de empezar el experimento es preciso llevar a cabo una calibracin,
emplazando la muestra que se quiere analizar dentro de la sonda. De esta calibracin se extraen dos
parmetros importantes:
La frecuencia central del pulso de RF (frecuencia de Larmor) que es proporcional al campo que crean los
imanes, cuya intensidad puede variar ligeramente por varios motivos: temperatura, efecto de introducir la
muestra en la sonda, deriva temporal de los imanes La correspondencia entre el ngulo de rotacin del
vector de magnetizacin total y la duracin del pulso de RF, en la que intervienen factores como la intensidad
exacta del campo de RF que radia la bobina transmisora.
Los imanes Los imanes son los encargados de someter a la muestra al campo magntico permanente B0
responsable de la alineacin de los ncleos. Las propiedades de dicho campo definen en gran medida las
prestaciones del espectrmetro. Como se ha comentado en la Introduccin, un cambio en el tipo de imanes
que se utilizan, es una de las innovaciones que introduce el nuevo espectrmetro que se va a fabricar, donde
se han sustituido los imanes superconductores por imanes de tierras raras. A continuacin se describen las
principales ventajas y desventajas de cada uno de ellos.
La sonda La sonda contiene una de las partes ms importantes del espectrmetro: las antenas. (Apartado
2.2.1) Pero adems, la sonda est formada por un conjunto de elementos mecnicos, que mantienen las

antenas en su sitio, y que hacen posible que la muestra que se va a analizar se introduzca en el campo
magntico que crean los imanes.
Las antenas A diferencia de lo que sucede en la mayora de sistemas de comunicaciones, las antenas del
espectrmetro trabajaran bajo las condiciones de campo prximo. En consecuencia, se puede prescindir de la
teora de las ondas electromagnticas y de su propagacin, y pensar nicamente en campos magnticos. Es
necesario emitir y detectar un campo magntico en la banda de RF.
La forma de antena que se utiliza es la bobina, por su simplicidad, por la fcil disposicin teniendo en cuenta
la geometra del resto de elementos, y por la sencilla relacin con los campos magnticos dada por la ley de
Faraday. Como ya se ha comentado anteriormente, primero hace falta excitar la muestra con un campo
magntico variable, y ms tarde captar el campo magntico variable que crean los ncleos durante la
relajacin. Esto es posible gracias a la ley de Faraday, que relaciona la electricidad con el magnetismo.
Mecanizacin de la sonda Para que, tanto los imanes, como el tubo que contiene la muestra y las antenas,
queden en su sitio, es necesario construir una serie de piezas que cumplen esta funcin. La pieza de aluminio
que puede verse en la Ilustracin III-6 mantiene la separacin necesaria entre los imanes, que van encajados
en dos fresados que hay a cada lado de la pieza, para trabajar bajo el campo magntico que se crea entre
ellos.
El transmisor El transmisor es la parte del espectrmetro encargada de generar los pulsos de radiofrecuencia
que excitan el sistema. El transmisor consta bsicamente de una fuente de radiofrecuencias y un amplificador
de potencia. Como fuente de RF se utiliza un DDS (Digital Direct Sintetizer), de frecuencia y fase
programables, y que es habilitado y deshabilitado desde el sistema de control para conformar los pulsos. La
secuencia de pulsos generada por el DDS es recogida por un amplificador de alta potencia que aporta la
energa necesaria y la transfiere a la muestra
. El receptor El receptor de un espectrmetro de RMN es muy parecido a un receptor de radio domstico en el
cual la seal de RF es detectada por una antena, y demodulada utilizando un proceso de conversin de
frecuencias. Como se ver en posteriores captulos, el buen diseo del receptor es fundamental para la
obtencin de una seal de RMN limpia de ruido e interferencias.
El sistema de control El sistema de control se encarga de controlar y sincronizar todo el sistema. El ncleo del
sistema de control es una FPGA (Field Programmable Gate Array). La FPGA genera las seales de control de
los DDS y del CAD, y procesa los datos que le entrega este ltimo. El sistema de control es tambin la parte
que interacciona con la estacin de trabajo que maneja el usuario. En la siguiente ilustracin pueden verse
con detalle las lneas de control que intervienen en la configuracin y sincronizacin de todo el sistema
Un espectrmetro de absorcin atmica de llama consta de la siguiente instrumentacin bsica necesaria para poder
realizar medidas de absorcin:
a) Fuente de radiacin
b) Sistema nebulizador-atomizador
c) Monocromador
d) Detector
a) Las fuentes de radiacin empleadas en el espectrofotmetro de absorcin atmica deben originar una banda
estrecha, de intensidad adecuada y estabilidad suficiente, durante perodos de tiempo prolongados. Las ms
comnmente utilizadas son las lmparas de ctodo hueco. Estas lmparas estn constituidas por un ctodo metlico
capaz de emitir radiaciones de las mismas longitudes de onda que son capaces de absorber los tomos del elemento
que se desea analizar. En algunas ocasiones los ctodos estn formados por ms de un elemento, de manera que se
pueden utilizar para su determinacin sin necesidad de cambiar la lmpara. Tambin puede disponerse de las llamadas
lmparas
de
descarga
gaseosa,
en
las
cuales
se
produce
la
emisin por el paso de corriente a travs de un vapor de tomos metlicos, y que se emplean tan solo para algunos
elementos como el Hg.
b) Sistema nebulizador-atomizador.-El nebulizador y el sistema atomizador suelen estar integrados en uno,
especialmente en los equipos de absorcin atmica. En este sistema, la disolucin de la muestra (o parte de ella) es
inicialmente aspirada y dirigida como una fina niebla hacia la llama (atomizador), lugar donde se forman los tomos en
estado fundamental. Para obtener la llama se requiere
un
combustible
(por
ejemplo,
acetileno)
y
un
oxidante
(por
ejemplo,
aire):
La ptica de un espectrofotmetro de absorcin atmica es similar a la de cualquier otro espectrofotmetro.
c)
Monocromador.- El
monocromador
(prismas,
redes
de
difraccin)
En general, dispone de una rendija o ranura de entrada que limita la radiacin lumnica producida por la fuente y la
confina en un rea determinada, un conjunto de espejos para pasar la luz a travs del sistema ptico, un elemento para
separar las longitudes de onda de la radiacin lumnica, que puede ser un prisma o una rejilla de difraccin, y una rendija

de salida para seleccionar la longitud de onda con la cual se desea iluminar la muestra. Parte de la radiacin no
absorbida es dirigida hacia el detector.
d)
Detector.- (por
ejemplo,
un
fotomultiplicador),
El sistema de deteccin puede estar diseado con fotoceldas, fototubos, fotodiodos o fotomultiplicadores. Esto depende
de los rangos de longitud de onda, de la sensibilidad y de la velocidad de respuesta requeridas. El sistema de deteccin
recibe la energa lumnica proveniente de la muestra y la convierte en una seal elctrica proporcional a la energa
recibida. La seal elctrica puede ser procesada y amplificada, para que pueda interpretarse a travs del sistema de
lectura que una vez procesada es presentada al analista de diferentes maneras (por ejemplo, unidades de absorbancia).
Funcin y condiciones de las llamas
La llama tiene tres funciones bsicas: permite pasar la muestra a analizar del estado lquido a estado gaseoso;
descompone los compuestos moleculares del elemento de inters en tomos individuales o en molculas sencillas y
excita estos tomos o molculas. Las condiciones que debe cumplir una llama para considerarla satisfactoria es que
tenga la temperatura adecuada y que en ella se forme un ambiente gaseoso que permita las funciones mencionadas.
Adems, el ruido de fondo de la llama no debe interferir las observaciones a efectuar. El cono interno es la zona en que
tiene lugar, generalmente, una combustin parcial, es decir sin equilibrio trmico. Esta zona se calienta por conduccin y
radiacin a partir de la regin ms caliente que se encuentra sobre ella. En ella se forman los productos de oxidacin
intermedios, se produce una gran emisin de luz (a partir del combustible y no de la muestra), una elevada ionizacin y
una gran concentracin de radicales libres. Es muy poco utilizada para trabajo analtico. Inmediatamente encima de la
regin del cono interno se encuentra la zona interconal Es la llamada parte caliente de la llama y en ella tiene lugar una
combustin completa y se alcanza casi un equilibrio termodinmico. Esta llama es la que se utiliza prcticamente en
anlisis por fotometra de llama y espectroscopa de absorcin atmica. La altura de esta zona sobre el quemador vara
considerablemente con el tipo de quemador, la naturaleza de los gases utilizados y su velocidad de flujo. La regin del
cono externo es una zona de combustin secundaria en la que los productos parcialmente oxidados como el monxido
de carbono pueden completar su combustin. Esta regin se enfra por el aire circundante y es, en general, una regin
poco til.

La muestra a analizar debe ser previamente tratada para asegurar que todos los iones a determinar se encuentren libres
en solucin, en el caso de muestras acuosas este no es el problema pero en el caso de alimentos u
otras matrices slidas debe realizarse un tratamiento previo de mineralizacin.
La solucin a analizar se hace pasar a travs del mechero, por medio de aspiracin en forma de niebla gracias al sistema
de nebulizador. Los iones y tomos son excitados por la energa recibida en la llama y al ser atravesados por el haz de
luz proveniente de la lmpara absorben parte de la energa necesaria para volver a su estado electrnico fundamental.
Un monocromador compuesto por una red de difraccin selecciona la longitud de onda especfica del elemento.
La diferencia entre la cantidad de energa proveniente de la lmpara que llega al detector inicialmente y mientras la
muestra lo atraviesa es una medida cuantificable al alcanzar el amplificador y registrador del equipo.
La seal se traduce en unidades de concentracin del analito mediante una lectura previa de una curva de calibracin del
analito deseado e interpolando los valores obtenidos
Espectrometra infrarroja
La espectrometra de infrarrojos (espectroscopia IV) es un tipo de espectrometra de absorcin que utiliza la regin
infrarroja del espectro electromagntico. Como las dems tcnicas espectroscpicas, puede ser utilizada para identificar
un compuesto o investigar la composicin de una muestra La espectrometra infrarroja se basa en el hecho de que los
enlaces qumicos de las sustancias tienen frecuencias de vibracin especficas, que corresponden a los niveles de
energa de la molcula. Estas frecuencias dependen de la forma de la superficie de energa potencial de la molcula, la
geometra molecular, las masas atmicas y, posiblemente, el acoplamiento vibracional. Si la molcula recibe luz con la
misma energa de esa vibracin, entonces la luz ser absorbida si se dan ciertas condiciones. Para que una vibracin
aparezca en el espectro infrarrojo, la molcula debe someterse a un cambio en su momento dipolar durante la vibracin.
En particular, una aproximacin de Born-Oppenheimer y aproximaciones armnicas; es decir, cuando el hamiltoniano
molecular correspondiente al estado electrnico estndar puede ser aproximado por un oscilador armnico cuntico en
las cercanas de la geometra molecular de equilibrio, las frecuencias vibracionales de resonancia son determinadas por
los modos normales correspondientes a la superficie de energa potencial del estado electrnico estndar. No obstante,
las frecuencias de resonancia pueden estar, en una primera aproximacin, en relacin con la longitud del enlace y las
masas de los tomos en cada extremo del mismo. Los enlaces pueden vibrar de seis maneras: estiramiento simtrico,
estiramiento asimtrico, tijeras, rotacin, giro y wag. Con el fin de hacer medidas en una muestra, se transmite un rayo
monocromo de luz infrarroja a travs de la muestra, y se registra la cantidad de energa absorbida. Repitiendo esta
operacin en un rango de longitudes de onda de inters (por lo general, 4000-400 cm-1) se puede construir un grfico. Al
examinar el grfico de una sustancia, un usuario experimentado puede obtener informacin sobre la misma. Esta tcnica
funciona casi exclusivamente en enlaces covalentes, y se usa mucho en qumica, en especial en qumica orgnica. Se
pueden generar grficos bien resueltos con muestras de una sola sustancia de gran pureza. Sin embargo, la tcnica se
utiliza habitualmente para la identificacin de mezclas complejas.
PREPARACIN DE LA MUESTRA
Las muestras lquidas pueden ser prensadas entre dos planchas de una sal de alta pureza (como el cloruro de sodio).
Estas placas deben ser transparentes a la luz infrarroja para no introducir ninguna lnea en el espectro de la muestra. Las
placas obviamente son solubles en agua, por lo que la muestra, los reactivos de lavado y el medio deben ser anhidros
(es decir, sin agua). Las muestras slidas se preparan mezclando una cierta cantidad de muestra con una sal altamente
purificada (por lo general bromuro de potasio). Esta mezcla se tritura y se prensa con el fin de formar una pastilla por la
que pueda pasar la luz. La pastilla necesita ser prensada a altas presiones para asegurar que sea translcida, pero esto
no puede lograrse sin un equipo adecuado (por ejemplo, una prensa hidrulica). Al igual que el cloruro de sodio, el
bromuro de potasio no absorbe la radiacin infrarroja, por lo que las nicas lneas espectrales provendrn del analito.
MTODO TPICO
Un haz de luz infrarroja es generado y dividido en dos rayos. Uno pasa por la muestra, y el otro por una referencia que
suele ser la sustancia en la que est disuelta o mezclada la muestra. Ambos haces se reflejan de vuelta al detector, pero
primero pasan a travs del separador, que alterna rpidamente cul de los dos rayos entra en el detector. Las dos
seales se comparan y, a continuacin, se registran los datos.
Hay dos razones por las que se utiliza una referencia:
* Evita que las fluctuaciones de energa elctrica de la fuente afecten a los resultados finales, ya que tanto la muestra
como la referencia se ven afectadas del mismo modo. Por esa misma razn, tambin impide la influencia de variaciones

sobre el resultado final, debido al hecho de que la fuente no necesariamente emite la misma intensidad de luz para todas
las longitudes de onda
* Permite que los efectos del disolvente se anulen, porque la referencia es normalmente la forma pura del disolvente en
el que se encuentra.
USOS Y APLICACIONES
La espectrometra infrarroja se utiliza ampliamente tanto en la industria como en la investigacin cientfica, porque es una
tcnica rpida y fiable para medidas, control de calidad y anlisis dinmicos. Los instrumentos actuales son pequeos y
pueden ser transportados, incluso para tomar medidas de campo. Con los avances en tecnologa de filtrado
computacional y la manipulacin de los resultados, se pueden medir con precisin las muestras en una solucin (el agua
produce una banda larga de absorbancia en el rango de inters, lo que dara un espectro ilegible sin dicho tratamiento
computacional). Algunas mquinas incluso dicen automticamente qu sustancia est siendo analizada a travs de miles
de espectros de referencia almacenados en la memoria.
Haciendo medidas a una frecuencia especfica a travs del tiempo, se pueden seguir los cambios en la naturaleza o la
cantidad de un enlace en particular, lo que es especialmente til para medir el grado de polimerizacin en la fabricacin
de polmeros. Las mquinas modernas pueden medir en el rango de inters con gran frecuencia, como 32 veces por
segundo. Esto se puede hacer mientras se toman medidas simultneas con otras tcnicas. As las observaciones de
reacciones qumicas son procesadas con mayor rapidez, y de forma ms precisa y exacta.
Tipos de vibracin
en compuestos orgnicos pueden vibrar de seis formas distintas, estiramientos simtricos y asimtricos, flexiones
simtricas y asimtricas en el plano (scissoring o tijereteo y rocking o balanceo, respectivamente), y flexiones
simtricas y asimtricas fuera del plano (wagging o aleteo y twisting o torsin, respectivamente)
Cromatografa de gases
La cromatografa de gases es una tcnica cromatogrfica en la que la muestra se volatiliza y se inyecta
en la cabeza de una columna cromatogrfica. La elucin se produce por el flujo de una fase mvil de gas
inerte. A diferencia de los otros tipos de cromatografa, la fase mvil no interacta con las molculas
del analito; su nica funcin es la de transportar el analito a travs de la columna.
Existen dos tipos de cromatografa de gases (GC): la cromatografa gas-slido (GSC) y la cromatografa
gas-lquido (GLC), siendo esta ltima la que se utiliza ms ampliamente, y que se puede llamar
simplemente cromatografa de gases (GC). En la GSC la fase estacionaria es slida y la retencin de los
analitos en ella se produce mediante el proceso de adsorcin. Precisamente este proceso de adsorcin,
que no es lineal, es el que ha provocado que este tipo de cromatografa tenga aplicacin limitada, ya que
la retencin del analito sobre la superficie es semipermanente y se obtienen picos de elucin con colas. Su
nica aplicacin es la separacin de especies gaseosas de bajo peso molecular. La GLC utiliza como fase
estacionaria molculas de lquido inmovilizadas sobre la superficie de un slido inerte.
La GC se lleva a cabo en un cromatgrafo de liquidos. ste consta de diversos componentes como el gas
portador, el sistema de inyeccin de muestra, la columna (generalmente dentro de un horno), y el
detector.

Gas portador[editar]
El gas portador cumple bsicamente dos propsitos: Transportar los componentes de la muestra, y crear
una matriz adecuada para el detector. Un gas portador debe reunir ciertas condiciones:
-Debe ser inerte para evitar interacciones (tanto con la muestra como con la fase estacionaria)
-Debe ser capaz de minimizar la difusin gaseosa
-Fcilmente disponible y puro
-Econmico
-Adecuado al detector a utilizar...
El gas portador debe ser un gas inerte, para prevenir su reaccin con el analito o la columna.
Generalmente se emplean gases como el helio, argn, nitrgeno,hidrgeno o dixido de carbono, y la
eleccin de este gas en ocasiones depende del tipo de detector empleado. El almacenaje del gas puede
ser en balas normales o empleando un generador, especialmente en el caso del nitrgeno y del hidrgeno.
Luego tenemos un sistema de manmetros y reguladores de flujo para garantizar un flujo estable y un
sistema

de deshidratacin del

gas,

como

puede

ser

un

tamiz

molecular.

Generalmente la regulacin de la presin se hace a dos niveles: un primer manmetro se sita a la salida
de la bala o generador del gas y el otro a la entrada del cromatgrafo, donde se regula el flujo. Las
presiones de entrada varan entre 10 y 25 psi, lo que da lugar a caudales de 25 a 150 mL/min en columnas
de relleno y de 1 a 25 mL/min en columnas capilares. Para comprobar el caudal se puede utilizar un
rotmetro o un simple medidor de pompas de jabn, el cual da una medida muy exacta del caudal
volumtrico que entra a la columna.
La pureza de los gases es sumamente importante, se requieren niveles 4.5 o mayores es decir 99.995 %
de pureza. Sin embargo, debido al cuidado que se debe tener con la fase activa de la columna, se hace
completamente necesario la instalacin de trampas a la entrada del Gas carrier, estas trampas
obviamente tienen una capacidad limitada, pero son importantsimas al momento de usar el
Cromatografo. Estas trampas evitan el ingreso de Hidrocarburos, agua, CO entre otro
Sistema de inyeccin de muestra[editar]
La inyeccin de muestra es un apartado crtico, ya que se debe inyectar una cantidad adecuada, y debe
introducirse de tal forma (como un "tapn de vapor") que sea rpida para evitar el ensanchamiento de las
bandas de salida; este efecto se da con cantidades elevadas de analito. El mtodo ms utilizado emplea
una microjeringa (de capacidades de varios microlitros) para introducir el analito en una cmara de
vaporizacin instantnea. Esta cmara est a 50 C por encima del punto de ebullicin del componente
menos voltil, y est sellada por una junta de goma de silicona septa o septum.
Inyector de muestra para un GC
Si es necesaria una reproducibilidad del tamao de muestra inyectado se puede usar una vlvula de seis
vas o vlvula de inyeccin, donde la cantidad a inyectar es constante y determinada por el tamao del
bucle de dicha vlvula.
Si la columna empleada es rellena, el volumen a inyectar ser de unos 20 L, y en el caso de las columnas
capilares dicha cantidad es menor, de 1 L, y dependiendo del tipo de columna capilar (ya que existen

columnas con distinto dimetro interno) es que si se utiliza todo el volumen de muestra inyectado. Para
obtener menor cantidad de volumen, se utiliza un divisor de flujo (la inyeccin se conoce como modo
"Split") a la entrada de la columna que desecha parte del analito introducido. Si se utiliza todo el volumen
de muestra la inyeccin es de tipo "Splitless". El modo Splitless, se emple ms para determinar pequeas
cantidades o trazas (determinaciones ambientales).
Si se inyecta 1 microlitro de solvente, por ejemplo agua al pasar a la fase vapor su volumen se multiplicar
por mil. Es decir, un microlitro de agua pasara a ser 1 mL de agua en gas, como el volumen del puerto de
inyeccin es limitado, se emplean split pulsado u otras configuraciones para garantizar el ingreso
adecuado de las muestras.
En caso de muestras slidas, simplemente se introducen en forma de disolucin, ya que en la cmara de
vaporizacin instantnea el disolvente se pierde en la corriente de purga y no interfiere en la elucin.
Segn las curvas de Van Demter (HEPT vs. Velocidad Lineal), el mejor gas a usar en la columna
cromatogrfica como portador de los analitos es el hidrgeno, sin embargo dada su peligrosidad, es ms
usado

como

gas

de

encendido

en

el

detector

FID,

junto

con

el

aire.

Luego

vienen,

respectivamente, helio y nitrgeno.

El gas hidrgeno es el mejor carrier y los flujos que manejan los cromatgrafos no son peligrosos, adems
a la salida de estos generalmente existen restrictores de llama que evitan la propagacin de un posible
incendio. Se puede recomendar el uso de hidrgeno debido a, primero por su bajo precio respecto a los
otros gases y por la resolucin de los picos que se muestran en los cromatogramas. La relacin para la
ignicin entre hidrgeno y aire es de 4,1% para el lmite inferior y del 74,8% para el superior a 101,3Kpa y
298K (Safety Standard for Hydrogen and Hydrogen Systems, NASA), y se tiene que estar en presencia de
una chispa o zona de calentamiento alta (desde 520C).

Columnas y sistemas de control de temperatura

En

GC

se

emplean

dos

tipos

de

columnas:

las empaquetadas o de

relleno y

las tubulares

abiertas o capilares. Estas ltimas son ms comunes en la actualidad (2005) debido a su mayor rapidez y
eficiencia. La longitud de estas columnas es variable, de 2 a 60 metros, y estn construidas en acero
inoxidable, vidrio, slicefundida o tefln. Debido a su longitud y a la necesidad de ser introducidas en un
horno, las columnas suelen enrollarse en una forma helicolidal con longitudes de 10 a 30 cm, dependiendo
del tamao del horno. La temperatura es una variable importante, ya que de ella va a depender el grado
de separacin de los diferentes analitos. Para ello, debe ajustarse con una precisin de dcimas de grado.

Dicha temperatura depende del punto de ebullicin del analito o analitos, como tambin la mxima
temperatura de funcionamiento de la columna (fase estacionaria), y por lo general se ajusta a un valor
igual o ligeramente superior a l. Para estos valores, el tiempo de elucin va a oscilar entre 2 y 30-40
minutos. Si tenemos varios componentes con diferentes puntos de ebullicin, se ajusta la llamada rampa
de temperatura con lo cual sta va aumentando ya sea de forma continua o por etapas. En muchas
ocasiones, el ajustar correctamente la rampa puede significar separar bien o no los diferentes analitos. Es
recomendable utilizar temperaturas bajas para la elucin ya que aunque a mayor temperatura la elucin
es ms rpida, se corre el riesgo de descomponer el analito. Se puede progamar la rampa tanto para
aumentar como para disminuir la temperatura del horno para que no haya solapamiento de los picos.
Columnas y tipos de fases estacionarias

Columnas de relleno

Las columnas de relleno o empacadas consisten en unos tubos de vidrio, metal (inerte a ser posible como
el acero inoxidable, nquel, cobre o aluminio) o tefln, de longitud de 2 a 3 metros y un dimetro interno de
unos pocos milmetros, tpicamente de 2 a 4. El interior se rellena con un material slido, finamente
dividido para tener una mxima superficie de interaccin y recubierto con una capa de espesores entre 50
nm y 1 m. Para que puedan introducirse en el horno, se enrollan convenientemente.
El material de relleno ideal consiste en pequeas partculas, esfricas y uniformes, con una buena
resistencia mecnica, para tener una mxima superficie donde interaccionar la fase estacionaria y el
analito. La superficie especfica mnima ha de ser de 1 m/g. Como todos los componentes de columnas
para GC, debe ser inerte a altas temperaturas (~400 C) y humectarse uniformemente con la fase lquida
estacionaria durante el proceso de fabricacin. El material preferido actualmente (2005) es la tierra
de diatomeas natural, debido a su tamao de poro natural. Estas especies, ya extinguidas, utilizaban un
sistema de difusinmolecular para tomar nutrientes del medio y expulsar sus residuos. Por tanto, debido a
que el sistema de absorcin superficial del analito y la fase estacionaria es parecido, son materiales
especialmente tiles. El tamao es crtico a la hora de darse el proceso de interaccin del analito, y a
menores tamaos la eficacia de la columna es mejor. Pero existe el problema de la presin necesaria para
hacer circular un caudal estable de gas portador por la columna, ya que dicha presin es inversamente
proporcional al cuadrado del dimetro de dichas partculas. As, el tamao mnimo para usar presiones
mximas de 50 psi es de 250 a 149 m.

Columnas capilares

Las columnas capilares son de dos tipos bsicos: las de pared recubierta (WCOT) y las de soporte
recubierto (SCOT). Las WCOT son simplemente tubos capilares donde la pared interna se ha recubierto con
una finsima capa de fase estacionaria. Las columnas SCOT tienen en su parte interna una fina capa de
material absorbente como el empleado en las columnas de relleno (tierra de diatomeas) donde se ha
adherido la fase estacionaria. Las ventajas de las WCOT frente a las SCOT es la mayor capacidad de carga,
ya que en su fabricacin se emplean mayores cantidades de fase estacionaria, al ser la superficie de
intercambio mayor. Por orden de eficacia, en primer lugar estn las WCOT, luego las SCOT y por ltimo las
columnas de relleno. Las columnas WCOT se fabrican a partir de slice fundida, conocidas como columnas
tubulares abiertas de slice fundida o FSOT. Estas columnas se fabrican a partir de slice especialmente
pura, sin apenas contenido de xidos metlicos. Debido a la fragilidad inherente a este material, en el
mismo proceso de obtencin del tubo se recubre con una capa de poliimida, de esta forma la columna

puede enrollarse con un dimetro de unos pocos centmetros. Estas columnas, con propiedades como baja
reactividad, resistencia fsica y flexibilidad, han sustituido a las WCOT clsicas. Las columnas FSOT tienen
dimetros internos variables, entre 250 y 320 m (para columnas normales) y 150-200 m para columnas
de alta resolucin. Estas ltimas requieren menor cantidad de analito y un detector ms sensible, al eluir
menor cantidad de gas. Existen asimismo columnas macrocapilares con dimetros de hasta 530 m, que
admiten cantidades de analito comparables a las de relleno pero con mejores prestaciones. En estas
columnas existe un problema debido a la absorcin del analito sobre la superficie de la slice fundida,
adsorcin debida a la presencia de grupos silanol (Si-OH), los cuales interaccionan fuertemente
con molculas polares orgnicas. Este inconveniente se suele solventar inactivando la superficie por
sililacin con dimetilclorosilano (DMCS). La absorcin debida a los xidos metlicos se ve paliada en gran
parte por la elevada pureza de la slice empleada.

La fase estacionaria

Las propiedades necesarias para una fase estacionaria lquida inmovilizada son:
1. Caractersticas de reparto (factor de capacidad ' y factor de selectividad ) adecuados al analito.
2. Baja volatilidad, el punto de ebullicin de la fase estacionaria debe ser al menos 100 C mayor que
la mxima temperatura alcanzada en el horno.
3. Baja reactividad.
4. Estabilidad trmica, para evitar su descomposicin durante la elucin.
Aplicaciones
La GC tiene dos importantes campos de aplicacin. Por una parte su capacidad para separar mezclas
orgnicas complejas, compuestos organometlicos y sistemas bioqumicos. Su otra aplicacin es como
mtodo para determinar cuantitativa y cualitativamente los componentes de la muestra. Para el anlisis
cualitativo se suele emplear el tiempo de retencin, que es nico para cada compuesto dadas unas
determinadas condiciones (mismo gas portador, rampa de temperatura y flujo), o el volumen de retencin.
En aplicaciones cuantitativas, integrando las reas de cada compuesto o midiendo su altura, con los
calibrados adecuados, se obtiene la concentracin o cantidad presente de cada analito.