Cincias Biolgicas Bacharelado UNOESTE

Prof.: Andr Turin Santana.

Disciplina: Microbiologia aplicada / Prtica 05
DEMANDA BIOQUIMICA DE OXIGNIO

Demanda bioqumica de oxignio (DBO5): indicador que determina indiretamente a

concentrao de matria orgnica biodegradvel atravs da demanda de oxignio
exercida por microrganismos atravs da respirao. A DBO um teste padro,
realizado a uma temperatura constante de 20oC e durante um perodo de incubao
tambm fixo, 5 dias. uma medida que procura retratar em laboratrio o
fenmeno que acontece no corpo dgua.5 Assim uma amostra coletada em
duplicata, e em uma das amostras medido o oxignio dissolvido aps a coleta; o
oxignio da outra amostra medido aps 5 dias, perodo em que a amostra fica em
uma incubadora a uma temperatura de 20oC. A diferena de concentrao de
oxignio representa a demanda bioqumica de oxignio (oxignio consumido para
oxidar a matria orgnica via respirao dos microrganismos). um indicador
estimativo, j que as condies: turbulncia das guas, aerao e insolao etc.
no so consideradas. Quando a gua possui muita matria orgnica e
microrganismos, necessrio diluir a amostra e introduzir nutrientes. Para
efluentes indstrias que no possuem oxignio suficiente e nem microrganismos,
necessrio alm da diluio e introduo de nutrientes, adicionar "semente", ou
seja uma poro de esgoto com microrganismos e DBO conhecido para corrigir o
resultado final.8 No perodo de 5 dias a 20oC (DBO5), consumido cerca de 70% a
80% da matria orgnica (esgoto domstico); aps 5 dias comea a demanda
nitrogenada, em que durante cerca de 20 dias so consumidos 100 % da matria
orgnica. O esgoto considerado biodegradvel quando a relao DQO/DBO
menor 5.7
1. OBJETIVO
Determinar DBO atravs do mtodo respiromtrico.
2. METODOLOGIA
I.

Primeiramente deve-se determinar o valor estimado para DBO atravs da obteno do

resultado de DQO (demanda qumica de oxignio).
II. Sabe-se que a DBO aproximadamente a metade da DQO obtida, podendo variar 30%
de acordo com amostra.
III. Valores de DQO abaixo de 5.000 mg devem ser multiplicado por 0,5, para valores entre
5.000 a 6.000 multiplica-se por 0,6, de 6.000 a 8.000 por 0,7 e 8.000 por 0,8. O resultado
da multiplicao considerado como a DBO esperada, a partir deste, ser possvel
determinar a escala de trabalho para o aparelho Oxitop conforme a tabela abaixo.
DBO esparada
0 - 40 mg/L
0 - 80 mg/L
0 - 200 mg/L
0 - 400 mg/L
0 - 800 mg/L
0 - 2000 mg/L
0 - 4000 mg/L

Volume da
aliquota
425 mL
358 mL
243 mL
147 mL
88 mL
43,5 mL
17,7 mL

Fator de escala
Oxitop.
1
2
5
10
20,1
50,3
100,5

Volume Total
na garrafa
432 mL
365 mL
250 mL
164 mL
95 mL
43,5 mL
22,7 mL

Obs: a coluna do volume total corresponde ao volume da alquota somado a quantidade total
de nutrientes e sementes.

IV. Pipetar para garrafa 1,0 ml das respectivas solues:

Soluo tampo de fosfato 1,5 N
Soluo de Cloreto de amnio 0,71 N

 Soluo de Cloreto de clcio 0,25 N

Soluo de sulfato de magnsio 0,41 N
Soluo de cloreto frrico 0,018 N
V. Pipetar o volume de amostra conforme a tabela 1;
VI. Pipetar 2,0 mL de semente / inibidor; hidratada, soluo heterognea ficar c/ farelos em
suspenso, pois os mesmo fazem o transporte das bactrias. Possui inibidor de nitrificaro.
Mantenha a soluo sob constante agitao, principalmente na hora de pegar a alquota
para as garrafas do Oxitop. Esta soluo tem melhor resultado usando at 6 hs aps
rehidratao. Obs: pode-se descartar o uso da semente em amostras procedentes de
esgotos residenciais, ou que tenham grande quantidade de microorganismos capazes de
consumir oxignio.
VII. Colocar a barra magntica dentro da garrafa;
VIII.Colocar 2 a 3 pastilhas de NaOH na chupeta de borracha, se por alguma razo o hidrxido
de sdio cair dentro do lquido, descarte a amostra, lave a garrafa com detergente neutro e
comece novamente;
IX. Colocar a chupeta com cuidado na boca da garrafa;
X. Fechar a garrafa c/ sensor e coloque sobre o sistema de agitao;
XI. Conectar o instrumento e verifique se os agitadores esto em funcionamento correto;
XII. Pressionar simultaneamente a teclas M e S por 2 segundos no sensor Oxitop , aparecer
00 no visor, indicando que o sistema foi zerado, para ativar o registro, que se iniciar logo
aps 3 horas (tempo de estabilizao do sistema para 20C).
XIII.Para consultar em qualquer momento o valor de DBO pressionar a tecla M. Para valores
armazenados pressione a tecla S.
XIV.
Clculos e reporte de resultados. Ler visor do sensor Oxitop o valor encontrado,
multiplicar pelo fator da escala Oxitop tabela 1.